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初步学习计划范文1
关键词 初中 生物课堂 不良学习行为
教与学是不可分割的两部分，但是长期以来，我们过度地重视课堂教学模式的研究，关注教师教学行为，而忽略了学生的学习行为，学习行为可以反映一个学生的学习状况，它的好坏直接影响教学的成果。学生学习行为贯穿于课前、课堂和课后，课堂上的学习行为是重要的组成部分。本文以初中生物课堂为例，对不良学习行为从定义、特征、原因及转化策略进行了分析研究，从而有利于教师对课堂进行组织和管理，改进学生的学习策略及方法，调动学生学习积极性。
1 主要概念定义
学者们对学习行为从不同角度和层面有不同的看法，主要包括：有的学者认为，学习行为是指学习者在学习过程中所采用的行为形式与方法，它是学习者的思想、情感、情绪、动机、能力及运作程序的具体行为表现，是学习者在特定情景下的学习活动的具体化和现实化；另外一种观点则将学习行为定义为，是学生为达到学习目标而做出的一系列的结果，它的产生与持续首先基于学生对学习目标的价值判断及对学习结果的估计，学生学习行为是指学生在获取和应用知识过程中表现出来的个性特征，这种特征在不同的学习阶段而存在差异。本文中的学习行为指的是学生在学习过程中，所表现出来的反应和动作，是可以被观察的。学习行为有课堂上的和课堂外的，同时按照学生行为的性质和特点以及其引起的后果，将其也可分为良好的学习行为和不良学习行为，积极配合课堂教学的行为是良好的，而不能遵守课堂纪律，甚至破坏秩序的行为则是不良学习行为，本文主要研究的是学生在初中生物课堂上的不良学习行为。
2 不良学习行为现象
课堂学习习惯和方法差。学生上课前不会主动预习课堂内容，上课铃声响后，没有充分做好课前准备。课堂上没有记笔记的习惯，有时被老师或者同学提醒，才会在书上记几个字，对于老师提出的问题，不能主动思考，跟不上老师的思路，不能和老师进行互动，消极接受知识；对于老师要求完成的课堂作业，敷衍了事，不能很好地完成学习任务。
课堂参与度不高。学生在生物课堂上，常常发呆、走神，精力不集中，睡觉或做些与课堂教学无关的事情，如听mp3、看其他书籍、玩手机等一些与课堂不相关的事情，不积极参加小组讨论或者生物实验，即使参加的话经常和其他成员聊一些与学习内容无关的话题。
课堂纪律差。部分学生缺乏责任意识，经常在课堂上打闹，故意干扰课堂纪律，严重时还发生与教师顶撞的现象。在生物实验课上，不遵守实验室规章制度。
3 不良学习行为原因分析
3.1 学生个体因素
有的学生学习态度不积极，他们只是为了满足家长的愿望，不知道自己为什么要学习，没有学习动力和学习目标，从而产生厌学；有的初中生会因为不喜欢生物老师，或者这个老师的对其的不当批评，从而产生不当学习行为；另外，因为学习成绩跟不上，受到家长、老师、同学的压力和责备，丧失学习的自信心，获得习得无助感，消极对待学习。
3.2 教师因素
教师教学方式、教学方法和教学环节设计单一、呆板，只是单调地讲教材，不注重教学内容与现实的联系，学生感受不到学习生物的乐趣。有的老师受职业倦怠的影响，工作热情不够，对学生冷淡，讽刺、挖苦甚至体罚学生，这种不和谐、不民主的师生关系，产生了对立与冲突，严重扼杀了学生的学习积极性。
3.3 其他因素
在初中，中考的考试项目里没有生物，因此，在很多学生甚至老师眼里，生物是相对于数学语文等科目的副科，没必要花费太多时间。而且，有些学校在排课表的时候，经常将生物课排在下午，这样，学生上课很容易注意力不集中或者睡觉。
4 不良学习行为转化策略
4.1 激发学生的学习兴趣
兴趣是获取知识的内驱力了，影响着学生的学习行为和效果。初中生物教师在教学中一定要将书本知识与实际结合起来，使理论回到实践，这样不仅可使学生培养各种思维能力，更能激发学生的学习兴趣；也可以通过实验教学和介绍生物科学研究的新成就及其发展前景等，使生物教学达到知识性和趣味性的和谐统一。让学生不应该只是单纯为了应付教师检查或者考试而学习，而是注重学习过程，在学习中体会到快乐，从而促进学习成绩的提高。学习成绩的提高可以让学生产生学习热情，从而可以转化学生的学习态度。
4.2 培养学生主动探究学习
新课程提出初中生物课程理念“倡导探究性学习”，即初中生物教学应该在教师的引导下，学生从实际出发进行自主的探究性活动。可以是关于一个问题的探究，也可以是关于一个现象的探究，通过给学生一个较大的活动空间，学生们之间的相互合作和交流，这样，不仅可以获得知识，促进自身发展，轻松愉快地学习。
4.3 培养良好的学习氛围
家庭是教育的第一站，学校是学生学习的重要场所，要让学生形成良好的学习氛围，必须将家庭教育和学校教育有机结合起来。家长应该与教师形成积极的互动，为学生的全面发展创造条件。
参考文献
[1] 张彩霞.初中英语学习困难生课堂学习行为研究[D].上海：华东师范大学，2006.
[2] 陈华.不良学习行为的成因及转化策略.中学课程辅导，2011：107-108.
初步学习计划范文2
关键词：基础化学；虚拟仿真；实验教学
中图分类号：G642.0 文献标志码：A 文章编号：1674-9324（2017）28-0127-02
一、基础化学实验教学现状
经过多年的改革，我校的基础化学实验教学体系已经成为一个有机的整体，分为三个大的模块：第一部分是化学基本操作训练，涵盖无机及分析化学实验、有机化学实验、物理化学实验的所有基础操作训练（虚拟仿真实验教学系统的主要部分）；第二部分是初步的综合性、设计性实验训练，涵盖无机及分析化学实验、有机化学实验、物理化学实验的简单综合性、设计性实验训练，该部分只进行单独的综合性实验训练，不进行课程的交叉训练，前两部分在大学二年级前完成；第三部分是综合三门化学实验课程知识的研究性实验训练，该部分实验内容将涵盖化学实验课程的所有训练内容，以系列的研究性实验训练为主，按着科学研究的思路开设实验，由几个系列实验组成，从制备、合成、检测、鉴定，到研究报告的书写、研究结论的归纳总结的诸多方面进行训练。目前，化学实验教学模式通常是学生课前依据实验教材进行预习，教师课堂现场讲解，学生再进行实验。由于时间、空间、教学资源的限制，在面向大面积学生的实验教学中“照葫芦画瓢”模仿式教学模式长期存在，从而造成学生对于对实验课不重视，实验教学达不到预期效果，最终达不到教学目的。由此，改革传统化学实验教学模式势在必行，基础化学虚拟仿真系统的引入是解决当前问题的重要途径之一。
二、基础化学虚拟实验课程体系设置方案
通过虚拟仿真实验系统的训练，使学生不仅仅掌握基本原理和相应的单元操作，同时达到能够自如地综合运用所学的实验知识和技能，充分调动学生自主学习的积极性，更加灵活地掌握和运用所学的知识，在现实的实验条件下将会大幅度提高学生的动手能力、综合分析能力、解决实际问题的能力；为培养高素质、高水平的应用型人才，特别是受企事业用人单位欢迎的优秀人才奠定基础。虚拟实验课程体系设置方案的核心是根据实验教学大纲和专业特点，实行多层次课程内容，强化综合性系列实验和设计性实验。我国各高等院校的培养模式大体相近，尤其是工科的p工、化工类专业，经过多年的教学改革，已经将四大化学实验融合成一个有机的整体，课程体系分为三个大的模块。本项目虚拟仿真实验系统与原有的实验体系配套，也分成三个部分：第一部分是化学基本操作训练，包括无机及分析化学实验、有机化学实验、物理化学实验的所有基础操作训练；第二部分是初步的综合性、设计性实验训练，包括无机及分析化学实验、有机化学实验、物理化学实验的简单综合性、设计性实验训练，该部分只进行单独的综合性实验训练，不进行课程的交叉训练；第三部分是综合三门化学实验课程知识的研究性实验训练，该部分实验内容将涵盖化学实验课程的所有训练内容，以系列的研究性实验训练为主，按着科学研究的思路开设实验，由几个系列实验组成，从制备、合成、检测、鉴定，到研究报告的书写、研究结论的归纳总结的诸多方面进行训练。根据上述思路，我们按实验的难易程度分为三类：基础实验、综合实验、探究性实验。
1.基础实验包括以下两部分：基础实验一：基本操作类如制备、分离、过滤、蒸发，重结晶以及容量、重量、含量分析等，主要训练学生在大学本科阶段必须掌握的化学基本实验技能技巧、物质的鉴定、分析、分离与提纯等方法。基础实验二：仪器类实验、基本参数测量实验，主要训练学生常用仪器的性能及操作方法，常规物理量和参数测量及数据处理等
2.综合实验。该层次实验主要以合成（含有机合成、无机合成等）为主线，辅之以各种分析与测量手段（大部分在基础实验阶段已经得到训练）。通过本阶段的训练，学生一方面可学到新的合成技术，同时又可以利用阶段掌握的基本实验技能、仪器操作以及数据处理等方法，对合成的产品进行分离提纯、分析表征，并测量相关反应的动力学参数等，也就是开展进一步的应用性实验。这可以帮助学生复习、强化前一阶段已训练过的知识，进一步规范实验操作技能和技巧，避免了简单的重复；并可以培养学生综合应用基础知识和提高解决实际问题的能力。
3.探究性实验。该层次的实验内容主要来自教师的科研成果，学生根据自己的专业和兴趣自由选择实验项目，教材中只给出实验目的与要求，学生必须通过查阅参考文献，撰写实验方案，经指导老师审查通过后独立开展实验，对于实验过程中发现的问题尽可能自行解决。完全摒弃了在以往实验教学中常用的“保姆式”教育，放手让学生去设计、思考，独立自主地解决实际问题，使学生的创新能力得到显着提高。
三、基础化学虚拟实验课程体系实践――硫代硫酸钠标准溶液的标定
（一）实验目的（在软件中点击相关按钮查看）
1.了解间接碘量法的基本原理。
2.掌握间接碘量法的反应条件和滴定条件。
3.学习用淀粉指示剂正确判断终点的方法。
（二）实验原理（在软件中点击相关按钮查看）
四、结语
虚拟仿真实验是现实实验教学的重要补充，虚拟仿真实验形象生动，可激发学生探索学习的兴趣。通过虚拟仿真实验教学系统的训练，有利于学生学习和掌握相关的实验知识，可以在有限的时间内，更好地训练学生的综合运用知识能力，使学生能够更加灵活地掌握和运用所学知识解决实际问题。
参考文献：
[1]龚曼.创建基础医学虚拟仿真实验室的思考和建议[J].中国教育技术装备，2016，2（382）：59-60.
[2]王卫国.虚拟仿真实验教学中心建设思考与建议[J].实验室研究与探索，2013，32（12）：5-8.
初步学习计划范文3
【关键词】 集束化治疗措施； 脑出血术后； 肺部感染
中图分类号 R743.34 文献标识码 B 文章编号 1674-6805（2016）8-0025-03
doi：10.14033/ki.cfmr.2016.8.014
肺部感染是脑出血术后患者常见并发症，发生率高达68%，一旦合并肺部感染，其病死率为66%[1]。肺部感染加重脑出血病情，增大治疗难度，延长住院时间，增加死亡率并且加重患者家庭和社会的经济负担。集束化干预是集合一系列有循证基础的治疗及护理措施，来处理某种难治的临床疾患[2]。笔者所在科通过阅读文献，根据最新的循证医学证据，制定一套集束化综合措施来预防、治疗脑出血术后患者肺部感染问题，对86例脑出血术后患者进行干预，经临床观察，效果较为满意，现汇报如下。
1 资料与方法
1.1 一般资料
笔者所在科2012年1月-2015年5月收治的出血术后患者86例作为观察组，其中，男53例，女性33例，年龄42～78岁，平均63.4岁。术前GCS评分6～13分，出血量30～80 ml。选取2008年1月-2011年12月病情类似的85例患者作为对照组，其中，男50例，女35例，年龄41～79岁，平均63.5岁。术前GCS评分5～13分，出血量30～88 ml。两组患者年龄、性别、出血量、术前GCS评分等一般资料比较差异均无统计学意义（P>0.05），具有可比性。
1.2 方法
对照组接受常规治疗措施，观察组在对照组基础上采用集束化治疗措施，具体如下。
1.2.1 调查分析，制定集束化策略 通过阅读文献，分析总结脑出血术后患者肺部感染易感因素及发生原因、治疗措施、致病菌种类，作为循证依据，制定有针对性的治疗干预措施。包括术后常规使用雾化吸入药物湿化气道，保证充足的补液量，使用氨溴索等药物促进痰液排出。严密监测患者意识状态变化，每12小时进行血气分析1次，如果达到以下指征应立即进行气管切开：（1）意识状态进行性恶化；（2）呼吸功能恶化；（3）呼吸不畅，舌后缀，呼吸道不畅，呼吸频率>25次/min，辅助呼吸肌活动明显、胸腹矛盾运动；（4）SpO2
1.2.2 做好培训 对医护人员进行关于昏迷患者及气管切开患者正确的观察、护理、翻身、拍背、吸痰及口腔护理、预防控制医院感染的系统培训与宣教。
1.2.3 观察体温的变化、痰液的量和性状 如痰液量明显增加或痰变黏稠等，应考虑感染可能。留痰做细菌培养，并根据药敏结果选择有效抗生素。合理使用抗生素。
1.2.4 水电解质平衡及营养状态 加强营养，不能进食者早期进行鼻饲饮食，提高机体免疫力。给予易消化、富含高蛋白、高热量、高维生素流质鼻饲饮食。并注意鼻饲饮食的量及速度，防止返流误吸，增加肺部感染的机会。
1.2.5 消毒隔离制度 严格执行消毒隔离制度，紫外线照射消毒室内空气，每日早晚开窗通风30 min，增加氧自由基含量，保持病房空气新鲜。
1.3 诊断标准
肺部感染诊断根据体温、胸片、血常规及痰培养结果[4]，（1）与术前胸片X线比较，出现肺内片状浸润阴影或出现新的炎性病变；（2）出现干湿性音或肺实质变体征；（3）具备下列条件之一，①体温>37.5 ℃，呼吸道有脓性分泌物；②白细胞计数>10×109/L或
1.4 观察指标
观察两组患者肺部感染发生率、住院时间及平均住院费用、病死率。
1.5 统计学处理
采用SPSS 15.0软件对所得数据进行统计分析，计量资料用均数±标准差（x±s）表示，比较采用t检验；计数资料以率（%）表示，比较采用字2检验，P
2 结果
2.1 两组患者肺部感染及病死率比较
观察组肺部感染发生率为12.9%（11/86），显著低于对照组的32.9%（28/85），比较差异有统计学意义（P
2.2 两组患者住院时间、平均住院费用比较
观察组平均住院时间为（14.5±6.8）d，低于对照组的（20.5±6.3）d，观察组患者平均住院费（3.2±1.1）万元，少于对照组的（4.6±1.4）万元，两组比较差异均有统计学意义（P
3 讨论
肺部感染是脑出血术后最常见并发症之一，其发生率、病死率均较高。其诊断较容易，对脑出血术后患者，当出现体温增高，咳嗽咳痰，呼吸急促，听诊双肺出现干湿音及哮鸣音，尤其要注意双肺底，试验室血常规检查白细胞含量增高，中性比增高，胸部X线或CT提示双肺纹理增粗，出现实变及肺不张表现，伴或不伴有胸腔积液，痰液细菌学培养检测到致病菌者一般即可确诊。脑出血术后易发生肺部感染与以下因素有关：（1）脑出血患者术前术后意识障碍，咳嗽反射减弱，颅内压增高导致呕吐，呕吐物误吸入气管，易出现吸入性肺炎[5]。（2）气管插管，损伤咽部黏膜，术中术后应用呼吸机，使含有细菌的鼻咽部分泌物、呕吐物误进入肺段气管以下，不易排出，引起肺部感染。（3）应用脱水剂、补液量不足、发热体液散失过多等因素造成气道黏膜干燥，痰液黏稠，不易排出，呼吸道黏膜分泌型IgA难以发挥吞噬抵御细菌入侵作用，容易并发肺部感染[6]。（4）术后意识障碍时间较长者需行气管切开术，便于吸痰，但干燥空气不经鼻腔湿化而直接进入双肺，并且经气道丧失的水分进一步增加，痰液变得更加稠厚不易排出。气道开放于外界，吸痰等操作均增加细菌进入的几率[7]。（5）术后患者处于高代谢高消耗状态，营养摄入不足，低蛋白血症、营养不良进一步降低抵抗力，容易出现全身性感染。（6）脑出血患者往往合并糖尿病及心肺基础疾病，多发于老年人，易于出现心衰、肺水肿，可使一些条件致病菌或一些致病力较弱的细菌引起致病作用，导致肺部感染。针对以上原因，广大呼吸外科的医务工作者一直在努力探寻有效的预防治疗肺部感染的方法，比如气管切开术、湿化气道、预防性应用抗生素等，也取得了一定的效果。集束化干预是近年来出现的一个新名词，在护理领域应用较多。为应对某种难治的临床疾患，来集合一系列有循证基础的治疗及护理措施，它遵循“循证实践指南”，能最大限度的提高医疗质量，改善患者预后。集束化治疗措施指的是一组治疗措施的集合，一个方案包括几个元素，每个元素经临床证实均能改善患者的预后结局，每个元素都是独立的、可操作性强[2]。该研究中，湿化气道、稀释痰液、气管切开、预防性使用抗生素、营养支持、更加细致专业的护理等措施均是集束化治疗措施中的元素，单一应用有一定临床效果，但难以达到理想水平，把这些元素采用集束化管理，进行捆绑集中应用，其效果往往大于其中某项措施的单个应用。本研究中观察组应用集束化治疗措施后，肺部感染发生率、病死率均较对照组显著下降。表面上观察组较对照组应用于患者的治疗措施增加，会增加患者的治疗费用，但集束化治疗措施降低了肺部感染的发生率，减少住院时间，所以治疗费用较对照组明显下降。本研究中集束化治疗措施取得了较好的治疗效果，但有些问题有待进一步完善解决，比如集束元素的进一步完善，进一步设置路径化管理等。随着循证医学理念的普及，集束治疗在越来越多的疾病中得到应用，如预防治疗手术部位感染、呼吸机相关性肺炎、气管切开肺部感染、院内感染等方面，并且取得了较为一致的良好的效果[8]。
综上所述，应用集束化治疗措施后，患者的肺部感染发生率、病死率下降，住院时间缩短，平均住院费用降低，取得了较好的效果，值得在临床推广应用。
参考文献
[1]李娟，秦德广，黄文勇，等.集束化护理在老年高血压脑出血术后肺部感染中的应用[J].南昌大学学报（医学版），2014，54（5）：76-77.
[2]单君，朱健华，顾艳荭.集束化护理理念及其临床应用的研究进展[J].护士进修杂志，2010，25（10）：889-891.
[3]靳文辉.重型颅脑损伤气管切开术后肺部感染的预防和处理[J].中国医学创新，2014，11（33）：148-149.
[4]张建伟，邵瑞芳，赵天海.肺部感染常见病原菌与感染正相关因素分析[J].中国医学创新，2014，11（1）：23-24.
[5]胡海芳.脑血管病并发肺部感染67例临床分析[J].中国实用神经疾病杂志，2008，11（3）：83-84.
[6]金作恒，王宇，田雅文.脑出血术后昏迷患者切开气管发现肺内感染的危险因素研究[J].中西医结合心血管病杂志，2015，3（6）：85-87.
[7]蔡树雄，孟兵，庄柳情，等.颅脑外伤和脑出血患者应用早期气管切开治疗的效果观察[J].中国民康医学，2015，27（2）：84-85.
初步学习计划范文4
【关键词】 细胞株
Effect of Aminopeptidase Inhibitor on Differentiation Induction Activity of All-trans Retinoic Acid in Human Acute Promyelocytic Leukemia NB4 Cells and Its Mechanism
Abstract
This study was purposed to investigate whether aminopeptidase inhibitor，bestatin，can potentiate all-trans retinoic acid (ATRA)-inducing differentiation in NB4 cells，and to explore its mechanism. The NB4 cells were exposed to either bestatin and ATRA alone or in combination，the morphological changes of NB4 cells were observed by optical microscopy，the CD11b expression was measured by flow cytometry，the function of defferentiation cells was analyzed by nitroblue-tetrazolium (NBT) reduction assay，the mRNA expressions of c-myc and c-EBPε in NB4 cells were detected by RT-PCR，the c-Myc protein expression was determined by Western blot. The results showed that treatment with bestatin alone induced no significant changes in morphology，NBT reduction activity and CD11b expression in NB4 cells. NB4 cells incubated with 10 nmol/L ATRA plus 100 μg/ml bestatin showed more morphologic feature of metamyelocyte and band neutrophil than ATRA alone treated cells. 100 μg/ml bestatin enhanced the NBT reduction activity in NB4 cells induced by various concentrations of ATRA (10，20，40 nmol/L). The effects of various concentrations of ATRA in combination with 100μg/ml bestatin were statistically different from the effect of ATRA alone (P
Key words bestatin; ATRA; cell line，NB4; differentiation
氨肽酶抑制剂乌苯美司（bestatin）能抑制氨肽酶N/CD13和亮氨酸氨基肽酶活性，通过增强宿主免疫功能及诱导肿瘤细胞凋亡等发挥抗肿瘤作用［1，2］。有研究提示，bestatin能够诱导U937细胞的分化［1］，国内未见报道。我们以NB4细胞为研究对象，通过形态、功能和表面分化抗原等多层次实验研究，了解bestatin是否能诱导NB4细胞分化及（或）对ATRA的诱导分化作用的增强效应，并初步探讨其可能的机理。
材料和方法
主要试剂
Bestatin、ATRA均购于Sigma公司。bestatin以无菌去离子水溶解为1 mg/ml，分装之后-20℃保存；ATRA以无水乙醇溶解成10-5 mol/L的储存液，4℃避光保存，使用时用RPMI 1640细胞培养液将其稀释为相应工作浓度。NBT为BBI公司产品，以PBS配成0.1%溶液，过滤除菌后4℃避光保存，使用前1周内配制。RPMI 1640为Gibco公司产品。胎牛血清为JRH公司产品。CD11b-FITC标记单克隆抗体为Teotech公司产品。CD13-PE标记单克隆抗体为Becton Dickinson公司产品。TRIzoL试剂为Gibco公司产品，M-MLV逆转录酶和Taq DNA合成酶为Promega公司产品。鼠抗人c-Myc单克隆抗体（c-33）及羊抗人β-Actin多克隆抗体（I-19）均为Santa Cruz公司产品，使用时以TBST液分别按1∶500和1∶1 000稀释。ECL显色液为Santa Cruz公司产品。
细胞培养及药物处理
人APL细胞株NB4细胞（浙江大学肿瘤研究所惠赠）及人髓细胞白血病细胞株HL-60细胞培养于含10%胎牛血清的RPMI 1640细胞培养液中，置37℃、5% CO2培养箱中培养，2-3天传代1次。实验时取对数生长期的细胞，调整细胞密度为7×104/ml，以不同浓度ATRA和bestatin单独或联合处理，于不同时间收集细胞进行实验。
细胞形态学观察
取空白对照组及药物处理各组细胞悬液，离心，制备涂片，瑞氏-姬姆萨染色，用光学显微镜（Leica，40×10）观察细胞形态。
四氮唑蓝（nitroblue-tetrazolium，NBT）还原实验
按文献［3］报道的方法进行。空白对照组及药物处理各组细胞与NBT共孵育后，制备涂片，瑞氏-姬姆萨染色，光学显微镜下（100×10）观察，胞浆内含有蓝黑色颗粒者为阳性细胞，随机计数200个细胞，计算阳性细胞百分率。
细胞表面分化抗原CD11b和CD13的检测
取对数生长期HL-60细胞和NB4细胞或药物处理后各组NB4细胞离心，用PBS（pH 7.4）洗涤，调整细胞数为2×105/50 μl，加CD13-PE标记单克隆抗体8 μl或CD11b-FITC标记单克隆抗体5 μl，避光孵育30分钟，用PBS洗涤，上流式细胞仪检测。以Cellquest 1.2软件进行分析。
细胞总RNA提取和RT-PCR反应
总RNA提取 用TRIzoL一步法抽提细胞总RNA，按试剂说明书操作。甲醛变性凝胶电泳证实为完整RNA，紫外分光光度仪定量，A260 nm/280 nm比值均在1.8-2.0之间。
逆转录反应
样品总RNA 4 μg及随机引物0.5 μg，70℃ 5分钟，立即冰浴，离心。依次加5×逆转录酶缓冲液5 μl、10 mmol/L dNTP 1.25 μl、M-MLV 200 U，RNase抑制剂0.6 μl，DEPC水补至反应体积为25 μl，于27℃10分钟，37℃ 60分钟，72℃ 10分钟灭活逆转录酶，冰浴1分钟，结束反应。
PCR反应
PCR引物为上海Sangon公司合成。引物序列、反应条件及产物大小见表1。反应体系包括逆转录产物2 μl、10×PCR缓冲液2.5 μl、25 mmol/L MgCl2 1.5 μl、10 mmol/L dNTP 0.5 μl、25 μmol/L(c-myc与c-EBPε)或2.5 μmol/L(β-actin)上游及下游引物各0.5 μl、Taq DNA聚合酶1U，用灭菌去离子水补至终体积为25 μl。预实验确定产物与循环之间呈线性关系范围。取5 μl反应产物在15 g/L琼脂糖凝胶（含0.5 μg/ml溴化乙锭）电泳，电场强度5 V/cm，紫外灯下观察电泳结果，用凝胶成像系统（BIO-RAD公司）扫描分析条带灰度，以目的基因与β-actin的灰度比做半定量分析。Table 1. Sequences of primers，condition of PCR and sizes of PCR products（略）
Western blot
收集药物处理各组细胞（细胞数为2×106/ml），预冷的PBS漂洗2次，重悬于100 μl Lammiulis上样缓冲液（0.125 mmol/L Tris-HCl，pH 6.8，4%SDS，5%甘油）中，超声波裂解，于4℃离心13 000×g）15分钟，收集上清，蛋白样品保存于-80℃。按蛋白定量试剂盒（Bio-Rad公司）操作说明书进行蛋白定量，在10%聚丙烯酰胺凝胶电泳、转膜，转移后的硝酸纤维素膜以5%脱脂奶粉封闭1小时，分别与抗人c-Myc和抗人β-actin抗体及辣根过氧化酶标记的二抗孵育。ECL显色，显影于胶片。图像分析处理系统（Image Station 2000R）扫描，测定条带的面积和灰度，以二者之乘积进行半定量比较分析。
统计学分析处理
各项实验重复3次以上，以X±D表示，多组间比较F检验后采用方差分析及Tukey检验。相关分析采用Pearson相关。应用SPSS 10.0统计软件进行统计分析。
结果
NB4细胞表面有CD13的表达
NB4细胞CD13阳性表达率为94.79%（平均荧光强度为1739.59），对照组HL-60细胞CD13阳性表达率为95.49%（平均荧光强度为3107.49）。两者的CD13平均荧光强度有一定的差异，但阳性百分率差异不明显。
Bestatin与ATRA联合处理后NB4细胞形态改变明显
100 μg/ml bestatin单独作用72小时后，NB4细胞形态无明显改变。10 nmol/L ATRA单独作用72小时后，NB4细胞呈现部分分化的形态，细胞核/浆比例减小，核变小有凹陷。100 μg/ml bestatin与10 nmol/L ATRA联合处理72小时后，NB4细胞形态分化更加明显，细胞浆内空泡增多，核凹陷、扭曲更加明显，形态似晚幼粒及杆状核粒细胞的细胞增多（图1）。
Bestatin与ATRA联合应用后NB4细胞NBT还原能力明显增加
以一定浓度（50、75和100 μg/ml）bestatin单独处理72小时后，NB4细胞的NBT还原能力无明显改变（与空白对照组相比较，P>0.05）；不同浓度（10、20和40 nmol/L）ATRA作用72小时后，NB4细胞的NBT还原能力呈浓度依赖性增加，与空白对照组相比，差异明显。100 μg/ml bestatin与不同浓度ATRA联合处理72小时后，NB4细胞的NBT阳性率明显地提高，与单用相应浓度ATRA组相比，差异显著（表2）。Table 2. Effect of bestatin on the NBT reduction activity of NB4 cells induced by ATRA. (略)
100 μg/ml bestatin单独处理细胞不同时间（48小时-96小时），NB4细胞的NBT还原能力改变不明显（与相应时间点空白对照组相比，P>0.05）；10 nmol/L ATRA处理细胞至72小时，开始出现NB4细胞NBT还原能力的增强，并呈时间依赖性，与相应时间点对照组相比，有明显差异；而10 nmol/L ATRA与100 μg/ml bestatin联合处理48小时，就出现NB4细胞NBT还原能力的明显增强，且此作用随时间延长而明显增强，与相应时间点单用10 nmol/L ATRA组相比，差异显著（图2）。
Bestatin与ATRA联合处理后NB4细胞CD11b表达明显增强
100 μg/ml bestatin单独处理72小时后，NB4细胞CD11b阳性表达率（MFI为13.4±0.6）稍有增加，但与对照组（MFI为12.3±0.9）相比，差异不显著（P>0.05）。10 nmol/L ATRA单独处理72小时之后，NB4细胞CD11b阳性表达率（MFI为19.2±4.2）明显提高，与对照组相比，差异显著（P
Bestatin和ATRA单独及联合处理后NB4细胞c-EBPε mRNA表达的变化
NB4细胞低表达c-EBPε mRNA。10 nmol/L ATRA处理12小时之后，NB4细胞c-EBPε mRNA表达水平明显提高，与对照组相比较，差异显著(P
Bestatin和ATRA单独及联合处理后NB4细胞c-myc表达的变化
NB4细胞c-myc mRNA呈高水平表达。10 nmol/L ATRA单独处理4小时后，NB4细胞c-myc mRNA表达下降，与空白对照组相比较，差异明显（P
Figure 4. Effect of bestatin and ATRA on the expression of c-myc mRNA of NB4 cells after treatment for 4 hours. M: marker; Lane 1: control. Lane 2: bestatin (100 μg/ml). Lane 3: ATRA (10 nmol/L). Lane 4: bestatin (100 μg/ml) +ATRA (10 nmol/L).
NB4细胞c-Myc蛋白呈高表达。10 nmol/L ATRA单独处理8小时后，NB4细胞c-Myc蛋白表达水平明显下降（P
讨 论
ATRA对APL的有效治疗是白血病诱导分化治疗的成功典范。但单用ATRA治疗易复发及产生耐药，与其他化疗药物联用时疗效有一定的提高，但毒副反应增加。因此，寻找能够增强ATRA诱导分化作用而毒副反应轻的药物，成为临床治疗中的关注问题之一［7，8］。最近，Hirano等［7］根据NBT还原实验结果提出，bestatin可能增强ATRA对NB4细胞的诱导分化作用，但未做进一步的研究。本研究通过对细胞形态、功能和表面分化抗原等多层次的检测及分析对比，表明一定浓度范围的bestatin本身不能诱导NB4细胞分化，但确能增强ATRA对NB4细胞的诱导分化作用。
Hirano等［7］认为，bestatin增强ATRA诱导分化作用可能与其抑制细胞表面CD13活性有关。本研究结果显示，与HL-60细胞相似，NB4细胞表面CD13阳性表达率高达94.79%，该药是否通过抑制CD13表达从而增强ATRA诱导NB4细胞分化的作用，尚待进一步研究证实。髓系祖细胞定向分化受转录因子活性的调节。ATRA调节与髓细胞定向分化有关转录因子的表达诱导APL细胞向中性粒细胞分化。氨基肽酶N/CD13为Ⅱ型跨膜蛋白，胞内端只有8-10个氨基酸，但最近研究报道，CD13分子能够直接参与细胞内信号转导的过程［9］。因此，本研究从药物对转录因子影响的角度对氨肽酶、抑制剂bestatin增强ATRA诱导分化作用的可能机制进行了初步探索。c-EBPε为C-EBP家族转录因子之一，ATRA诱导NB4细胞向中性粒细胞方向分化时，药物作用2小时，c-EBPε mRNA表达水平即开始增高，并持续增高至细胞终末分化［10］。而酪氨酸激酶抑制剂STI571增强ATRA诱导NB4细胞向中性粒细胞分化时，c-EBPε基因及蛋白的表达水平均未进一步增高［8］。本研究结果显示，10 nmol/L ATRA处理12小时后，NB4细胞c-EBPε mRNA表达水平明显上升，而100 μg/ml bestatin与ATRA联合处理NB4细胞时，c-EBPε mRNA表达却未进一步增强。这提示bestatin可能与STI571相似，其增强ATRA对NB4细胞的诱导分化作用可能不是通过调节c-EBPε表达。
原癌基因c-myc表达异常与髓细胞性白血病的发生有关，抑制c-myc表达可以促使白血病细胞分化及诱导细胞终末分化后的凋亡。本研究结果显示，10 nmol/L ATRA单独作用能够使NB4细胞c-myc的表达下调，这与文献报道相似［11］。同时，bestatin与ATRA联合应用时c-myc表达水平的下调作用较单用ATRA时更加明显，且药物联合应用各组细胞的c-myc蛋白表达水平与药物诱导的NBT还原能力之间呈明显的负相关。这提示bestatin可能通过与ATRA协同下调c-myc表达，从而增强ATRA诱导NB4细胞分化的作用。1，25-(OH)2 D3在诱导HL-60细胞分化时，激活蛋白激酶C，引起c-myc表达下调［12］。bestatin是否也通过激活蛋白激酶C增强ATRA下调c-myc的表达，这有待进一步研究证实。
【参考文献】
1Murata M，Kubota Y，Tanaka T，et al. Effect of ubenimex on the proliferation and differentiation of U937 human histiocytic lymphoma cells. Leukemia，1994; 8: 2188-2193
2林茂芳，何静松，蔡真等. 氨肽酶抑制剂Bestatin 通过激活半胱天冬酶3诱导HL-60细胞凋亡. 中华血液学杂志，2001; 22: 348-350
3韩锐. 抗癌药物研究与实验技术. 北京: 北京医科大学、中国协和医科大学联合出版社，1997： 329-330
4Zhuang WJ，Fong CC，Cao J，et al. Involvement of NF-kappaB and c-myc signaling pathways in the apoptosis of HL-60 cells induced by alkaloids of Tripterygium hypoglaucum (levl.) Hutch. Phytomedicine，2004; 11: 295-302
5谭映霞，章圣辉，尹丽慧等. 三氧化二砷和全反式维甲酸联合用药诱导NB4细胞C／EBPε mRNA和CD11b表达的初步研究. 临床血液学杂志，2004; 17: 108-110
6林茂芳，俞静，严力行. 可溶性抗CD47单抗对人树突细胞分化与功能的影响. 中华血液学杂志，2004; 25: 709-712
7Hirano T，Kizaki M，Kato K，et al. Enhancement of sensitivity by bestatin of acute promyelocytic leukemia NB4 cells to all-trans retinoic acid. Leuk Res，2002; 26:1097-1103
8Gianni M，Kalac Y，Ponzanelli I，et al. Tyrosine kinase inhibitor STI571 potentiates the pharmacologic activity of retinoic acid in acute promyelocytic leukemia cells: effects on the degradation of RAR alpha and PML-RAR alpha. Blood，2001; 97: 3234-3243
9Santos AN，Langner J，Herrmann M，et al. Aminopeptidase N/CD13 is directly linked to signal transduction pathways in monocytes. Cell Immunol，2000; 201: 22-32
10Morosetti R，Park DJ，Chumakov AM，et al. A novel，myeloid transcription factor，C/EBP epsilon，is upregulated during granulocytic，but not monocytic，differentiation. Blood，1997; 90: 2591-2600
初步学习计划范文5
大学生个人学习计划范文1
我想象中的大学是可以在学海里恣意的，是无忧无自由自在的。但刚到这同学们个个都打算要埋头苦考，明明不喜欢英语还是在准备考四级，电脑二级。我想自己终究还是个俗人，毕竟四年之后还得找工作，不能在起步时就落后，说这话是多么的无奈啊，于是就有了下面的计划。
大一：自由
要初步了解职业，特别是自己未来所想从事的。提高人际沟通能力，多参加学校社团活动，了解交际技巧。
学习英语：上课时认真听讲，珍惜去语音室听听力的时间。为提高英语水平，争取更多发言机会，尽可能和同学交流;计算机：提高打字速度，学好课本上要求的课程如word等办公文件，学习制作网页基本知识，熟练掌握网上查找信息功能的能力;专业知识：看相关的书籍，对其中的一些概念有初步了解，充分利用图书馆和互联网，培养独立学习和研究的本领，为适应今后的进一步学习作准备;公共课：上课占前边的位置，认真听讲并做好笔记，积极勇敢的回答问题。对有兴趣的科目，利用图书馆互联网进行深人学习，扩大自己的知识面。体育课：积极参加体育锻炼，上课配合好老师工作做好老师要求的动作，不挂体育课学好篮球。
生活早睡早起，坚持锻炼才能身体棒。
交际多参加社团活动多和师哥师姐交流，和同学友好相处，多在公共场合讲话，为自己增添一些人气增加自信。
大二：紧张
在课余时间多，了解自己的专业做与本专业有关的活动，努力通过英语和计算机的相关证书考试，并开始有选择地辅修其他专业的知识充实自己学习英语加大课外阅读量并以此加大词汇量，为考试英语四级打基础。英语作为一种沟通手段需要学习来熟练掌握，而沟通技巧与能力则需要通过锻炼来得到提高。计算机：加强有关专业知识方面的练习。
大三：冲刺
目标所定在提高专业技能，全面提高自身素质。目标所定在提高专业技能，全面提高自身素质。因为临近毕业所以目标应锁定在提高术职技能，搜集公司信息，并确定自己是否要考验。在撰写专业学术文章时，大胆提出自己的见解，锻炼自己的独立解决问题的能力和创造性。参加和专业有关的暑假工作，和同学交流求职工作心得体会。学习写简历，求职信，了解搜集工作信息的渠道，并积极尝试。加入校友网络，和已经毕业的校友，师哥师姐谈话了解往年的求职情况。
大四：找工作
找工作，不能再犹豫不决，大部分目标应该锁定在工作申请及成功就业上。对前三年的准备做一个总结：首先检验自己已确定的职业目标是否明确，前三年的准备是否已充分。然后，开始毕业后工作的申请积极参加招聘活动，在实践活动中检验自己的积累和准备。
最后，预习或模拟面试，积极利用学校提供的条件，了解就业指导中心提供的用人公司资料信息，强化求职技巧，进行模拟面试等训练，尽可能地做出较为充分准备的情况下进行施展演技。
大学生个人学习计划范文2
时间过的飞快，转眼大一的生活就要结束了。感概一下，确实发现了许多自己虚度的时光，也许是高中非常人的高压下，来到大学后，发现自己突然没有压力，过度的开始放纵自己的懒懦，无论如何再后悔也没有用，只得把握现在，珍惜现在，同时对自己的接下的三年做一个计划来规划自己的未来。
首先要先明确自己的目标，我的目标是三年后的考研。所以我的任务就是在这三年中努力学习，弄清楚自己所报院校的考研科目，在自己所能控制的时间里，认真学习。
一、良好的生活和学习习惯是学习的前提
1、坚持每天七点起床；
2、每天起床后可以有一定的时间背一下英语单词；
3、有着锻炼身体的习惯，有空打球确保每星期的打球次数
二、在学校要结伴学习，寻找自己的对手
同学之间只有竞争才能共同前进，共同发展。只有竞争了，才能激发自己的的潜能，让自己的才能得到更广阔的发展。我们需要敌人，才能让自己感到危机感，让自己不再以为自己考上大学而洋洋得意，忘记了自己的本分还是一个学生。
三、利用寒暑假周末时间打工
对于我们学生来说，我们的视野太过于狭隘，正如井底之蛙不知道外面世界的广阔，还洋洋自得。学生打工使我们学习生活的一种补充，毕竟我们学习出来了之后，是要步入社会的，将自己的理论知识应用于社会，打工并不意味着提前上班，只是开阔我们的视野。虚心向那些已经上班的前辈们吸取经验。
四、在大学中尽自己可能多获些证书
本人认为也许有些证书对于我们以后的就业就形同鸡肋，但是我们仍然需要去获得，因为拥有那些证书，就是机会，如果你连那些证书都没有，那么你连机会都没有。
五、兼职
在大一的学习中应该可以利用一些课余时间去外面丰富一下自己的只是可以通过打工，也可以通过旅游等等方法。在大二的学习生活中，应该努力去考一些证书例如四六级证书，计算机等级证书，家政证书，会计证书，教师资格证书等等。同时因为大二结束后会分流，所以要努力提高成绩以便分流是的选专业。在大三的学习生活中因为已经确定自己的计划目标，所以需要努力为此而你努力学习各种专业课。在大四的生活中已经没有了浪费时间的说法，只能埋头于苦学中。
曾经高考的那个巨大的坎我们都已经努力的跨过来了，现在的我们更是有三年的时间来默默的有计划的实现我们的目标。现在说什么都没有用，那么就让我们用实际行动来证明我们的决心。
大学生个人学习计划范文3
计划一：
我美好的大学生活已经过去了四分之一，接下来要开始的是我大二生活。这是非常关键的一年，因为今年我们要学很多专业课，大一下学期的专业课只是专业基础课，只是学校为了让我们对这个专业保持最初的热情而开设的。上学习已经适应了大学的学习与生活。我认为学习计划能够为我达到学习目的而服务，能推动我主动积极学习和克服困难的内在动力。所以，现在我将进一步的对我即将开始的大二生活做一个整体和细节的规划，做出下一年的学习计划。
学习目的：最主要的是要学习一种在社会上是生存能力。如果说寒窗苦读20xx年为的是上一所好的大学，那么我们上大学甚至考研等的继续深造为的就是能够在社会上立足，或者是更好的生存、过得更好。
大二学习目标：学习目标是学生我们学习的努力的方向，正确的学习目标能催人奋进，从而产生为实现这一目标去奋斗的力量。相反没有学习目标，就像漫步在街头不知走向何处的流浪汉一样，是对学习时光的极大浪费。所以我制定了大二这一学年的学习目标——学好英语，争取大二上学期过英语四级和计算机二级。努力学好其他课程，争取在期末拿奖学金。利用周末课余时间打工接触社会了解社会需求，明确学习方向，
我的计划：要学习好，首先要制定一个切实可行的学习计划，用以指导自己的学习。古人说：“凡事预则立，不预则废。”因为有计划就不会打乱仗，就可以合理安排时间，恰当分配精力。这学期的目的在前面我的目标里已经说得很清楚了，那就是——学好英语并争取大二上学期过英语四级和计算机二级，努力学好其他课程，争取在期末拿奖学金。利用周末课余时间打工接触社会了解社会需求，明确学习方向，课后业余时间，在复习完本专业所学知识的前提下，多查阅与本专业相关的其他书籍，争取做到涉及范围广，从而明确什么是市场营销，市场营销专业毕业后从事什么样的职业，我们的努力方向是什么。
分科学习计划：
线性代数：我想对于我们理科生来说线性代数算不上什么难点。也不想花太多的时间在它身上，所以这就要求我上课要认真听讲跟着老师的思路走，下课稍微复习一下笔记，做几道题就可以了。很简单的。
大学英语：六月份的四级考试考得很糟糕，所以十二月份的四级一定要过。所以这学期就得很辛苦的学习英语了。因为下学期没有了早自习，所以这得考验我的自觉性了。坚持早上六点半起床，坚持晨跑二十分钟因为大四的体育好像很重要哦，不到要素质好身体也要好。然后去教室读英语或者听四级英语，每天练习一句英语日常用语。大学开设的自主学习的听力坚持每周四上午去听一个小时。每周坚持做两套四级题。周末晚上对四级题进行分析，特别是阅读。
西方经济学：这是这学期学过的课程，没什么难的，只要理解和学会看图就可以了。
虽然现在已经制定了一个初步的计划，但是应该根据平时的学习情况做适当的调整。我希望能坚持我的计划，努力的过好我的大二生活。
计划二：
还有几天就要开学了，在适应了大学生活之后，就要开始在学业上有所进步了。现在写下下学期的计划，希望自己可以时刻的鞭策自己。
学业上：
大二12月份随之而来的就是英语四级考试，本来自己的英语就是弱项，所以大二上学期最重要的任务就是主攻英语了，一定要付出的比别人多才有可能取得与他人一样的成绩。争取一次通过四级考试!
当然，进入大二，专业课也随之增多了，所以部分心思也得放在专业课上。大一的时候过了会计基础考试，这学期就得多注意一些与初级会计考试有关的消息了。希望尽量把初级会计证考到吧!咩咩，
呼呼，似乎忘记了一个很重要的东西额!大二上也要参加普通话考试额~~加油吧，为未来奋斗!
兼职上：
希望自己可以在学习之余多锻炼一下自己，提高自己动手能力。顺便挣点外快吧，
这学期希望在开学之初可以做一段时间的校园，不知道自己做不做的好了，一定要加油啊。然后最好可以在学校饭馆里找点事情做吧，那样既不会耽误太多的时间，也不用经常向外跑了。当然在外面卖饮料也以的，希望自己可以像小郑一样，独立自主一点，向小郑学习!!
休息时：
初步学习计划范文6
自从xx年上半学期学习应用文写作半年来，在老师的指导和帮助下，已初步对常用的应用文有一定了解。
新学期由于学校组织参加省电脑应用文写作技能竞赛，老师对进一步提高应用文写作水平提出了新的要求。为此，我结合自身学习情况，特制订下列学习计划：
一、学习要求
深入学习《应用文写作基础》内容，全面提高应用文写作水平，争取比赛中取得优异成绩。
二、学习内容
1.了解应用文写作基础知识，包括主题、材料、结构、语言。
2.学习行政公文(通知、通报、报告、请示、批复、函、会议纪要、决定、意见)传播应用文(消息、广播稿、演讲稿)事务应用文(证明信、推荐信、感谢信、慰问、贺信、倡议书、建议书、申请书、计划、总结、会议纪要)礼仪应用文(欢迎词、欢送词、开幕词、祝词)三大方面，学习每种文种的格式、写作要求、内容、语言、排版要求。
3.从网上下载试题，尤其对计划、总结、演讲稿加强练习。
三、学习方式
以自学为主，老师指导为辅。养成良好学习习惯，分配好每天的学习内容和时间，多和老师同学沟通，交流经验。
四、学习时间
