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林业大学硕士论文范文1
关键词：高速公路、绿化、问题
中图分类号： U412 文献标识码： A 文章编号：
现阶段高速公路绿化现状分析
无论是从目前国情的需求还是社会的需求出发，还是我们国家经济发展带来的车流快速增加都是对高速公路的建设提出的客观需求。它对我们国家公路混合交通问题带来很大的好处，不但使道路通行能力得到提高，而且还使投资环境得到很大的改善，对经济发展起到很大的促进作用。与此同时，高速公路的建设也给生态环境带来很大的破坏，高速公路的路线较长，占地的面积也比较大，并且有较长的施工周期，对周围的生态环境造成严重的影响，给我们国家的生态系统带来很大的负面影响。因此，将公路的生态绿化纳入公路及沿线的绿化范围，用来改善行车舒适度，使路容得以美化，避免公路对生态规律的破坏。一些发达国家对高速公路的绿化都非常重视，强调一定要与自然相融，与周围的环境相融，尽最大努力恢复原来的自然景观，这也把环境与生态意识充分的体现出来。在一九六五年时，美国就有对公路美化的相关规定，一九七六年日本也对公路绿化技术标准做出相关制定，一九七五年原苏联也对公路的建筑及景观的设计规范做了规定。对于绿化技术，法国多数路段都不采用铁丝网和隔离带，路边的居民区则是采用三米高的透明隔音板，并且藤蔓植物爬满在隔音板上。德国也非常重视绿化植物的种类选择，植物有合适的生长环境就会长的茂盛，这对后期的养护管理是非常有利的。而在美国，中央分隔带全部是由具有弹性的树列代替了原有的金属路栅，比如野蔷薇树列，车辆的运动能量能被它们大量的吸走，对发生车祸以后的司乘人员的损伤起到很大的作用，日本对边坡的治理与绿化也非常重视，并且对于边坡的绿化技术方法有二十种以上，最近几年，我们国家的高速公路的建设力度在不断加大，环保意识也有快速增强，因此，也越来越关注高速公路的绿化，并且，在绿化的技术与水平方面有了很大的提高。对于边坡绿化技术需要坚持下面几项原则：保证边坡的稳定及安全、与周围环境保持协调一致、避免重复建设以及尽量减少日常维护和管理的费用。
我国高速公路绿化分类
路体绿化、房建区绿化及互通立交区的绿化是构成高速公路绿化的三部分，因为土壤会由于高速公路的建设而遭到破坏，特别是在剖切山体时，所以，对路体的绿化有较高的要求，具体包括边坡绿化、中央分隔带绿化及两侧预留绿化带绿化。房建区绿化不但要具有一定的景观价值，与此同时还要有隔离噪音、遮荫美化的作用。而对于互通立交区的绿化来讲常规的有四种模式，一是色带的模纹式绿化，二是简单的疏林草坪式绿化或者仅以草坪绿化，三是乔灌草相结合的自然式立体绿化，四是以乔木为主成片成林的碳汇林模式。调查显示，乔灌草与模纹色带多用于城区立交，而其他模式多用于其它地区。
现阶段我国高速公路绿化中出现的问题及对策
首先，我们国家的高速公路的绿化景观设计并没有把功能、艺术与科学性很好的结合在一起，没有统一的规划，造成各路段之间的景观不协调与不连续的效果。高速公路的绿化模式也比较单一，没有太多种类的植物。在全国尤其是在北方的高速公路绿化中用量最多的就是松柏类植物，造成景观单调的视觉效果，没有丰富的季相变化，没有把我们国家的丰富多彩的植物资源充分的体现出来，也容易给司机造成视觉疲惫。在选择树种的时候也没有充分考虑是否与周围环境的生态相协调，尤其是我们国家的西北区很多高速公路在经过苹果产区的时候依然采用大量的松柏类树种，松柏类植物对苹果树易产生危害，容易引发苹果树发生锈病。其次，施工技术存在一定的问题，我们国家的高速公路的绿化施工人员没有较高的素质，也没有专业技术人员对他们进行指导，导致绿化植物没有较高的成活率，进行补苗后的生长不均，没有较好的绿化效果。在高速公路建设过程中，都有各种各样的挖方护坡，两边许多岩石被暴露出来，造成景观的不协调不美观。
高速公路也是现代经济迅速发展的产物，随着人类不断加强的环保意识，人们也越来越关注绿化。在合适的季节合适的地方种各种各样的植物，采用多结构、多功能、多景观的绿化形式，这是现代高速公路绿化景观的必然趋势。高速公路绿化景观不但给行车带来安全，在美化环境的同时还给生态保护带来实际的意义，也只有不断的研究与探索，才能把高速公路绿化景观的综合功能充分的发挥出来。
高速公路绿化首先应满足公路行车的视距视线等安全功能要求，同时应做到点线面相结合的全方面发展，各有各的特色，避免相同的情景出现，通过不同植物品种的绿化，使灌木与乔木、阔叶与针叶、草本与木本相结合，按照近处是花草，中间有灌木，无处是乔木的原则，由路的两侧向外展天，使草花重占突出，乔木以及灌木作为衬托，使得一年四季常绿，并且又有分明的层次，针对互通、立交的设计可采用各种绿化的类型，使绿化景观不断得到丰富；对于各房建站点以及服务区来讲，首先应结合区域特点，满足房建站点对绿化设计的特殊要求，如遮荫、吸尘、屏蔽高速公路上汽车的噪音等，同时因为这些地方也是工作或是休息的地方，也要兼顾园林美化的要求。可栽植一些有观赏价值的灌木以及花草，或是比较珍贵的树种和果树类，做到标准高、投入多，才能达到有较快的效率，美观的使用以及引人入胜的效果。充分把乔木、花草以及灌木充分的利用起来，在高速公路的路堑、分隔带或是沿线地带都用可以绿化的培植覆盖起来，加强高速公路两侧的绿化修饰美化。
参考文献：
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林业大学硕士论文范文2
关键词：城市滨水区；亲水性；
中图分类号：TU984 文献标识码：A 文章编号：
当前，城市滨水区的建设正成为中国城市发展的重要议题，而滨水区如何处理好城市与水的关系，成为城市建设进程中引人注目的焦点之一。人的滨水游憩活动进行分析可以分成展览型游憩、娱乐型游憩、购物型游憩、餐饮型游憩、居住型游憩、聚会型游憩、休憩型游憩、体育型游憩、观景型游憩、散步型游憩等10个方面。不同的游憩活动对应不同的游憩空间，与水的关系也各自不同。
城市水环境设计一个很大的目的就是要创造一个舒适的亲水环境，所谓的亲水设计也就是能够让人们容易亲近水的设计，亲水设计主要包括亲水护岸、亲水平台、亲水步道与水域戏水空间四个方面。
1亲水护岸
1.1护岸的立面形式
在城市滨水空间，人们总是希望能够接近水域或者接触到水，这就需要安全而友善的滨水边缘，于是具有保护作用的护岸工程应运而生。人工护岸根据剖面形态的差别，可分为直立式、斜坡样式和台阶式三种。直立式护岸就是将块直立堆积或用钢筋混凝土砌筑形成的护岸；斜坡式护岸是沿斜面堆砌石块或做护坡，局部可以种植攀附力较强的植物；台阶式护岸为面向水面像阶梯状的护岸，台阶式护岸采用逐渐下降的阶梯形状，可以很容易接触到水，同时还可以坐在台阶上眺望水面，这是一种亲水性很高的护岸。
垂直型的混凝土护岸，以防洪作为唯一的设计准则，容易造成刻板生硬的滨水景观，令人望而却步。护岸的设计应尽量采用斜坡型或阶梯型，并运用自然的绿地和碎石修筑，既可提供视觉的美感，又能种植树木。常常对于滨水绿地采用不同高度临水台地的做法，按淹没周期，分别设置了无建筑的低台地，允许临时建筑的中间台地，和建有永久性建筑的高台地三个层次。
1.2岸线平面形式
平直的岸线会带来单调的景观，客观上造成单一的游憩活动。结合游憩活动的特征来改造岸线，不仅增加了临水边界的长度，创造了丰富的景观，并且在功能上具有了更好的适用性。在具体选择岸线形态时，应该考虑与实际的功能相结合。曲线的岸线形态与水的运动相适应，并且具有连续、多变的景观角度，当曲线向内部凹进的时候容易形成聚心的心理感觉，适宜设置滨水步行道和营造视觉和活动的中心点，如小广场和观景平台等。垂直的岸线形态为建筑的设置提供了方便，并且可以利用其围合的空间作为一些水上运动(如游泳、潜水等)的场所。折线的岸线形态增加了更多的临水岸线长度，适宜设置小型船舶停靠的码头，也可以组织钓鱼活动，例如福特·朗岱尔的滨水岸线设计成折线型，既方便了水上公交的停靠，同时也形成了丰富多变的岸线形态。
2亲水平台
亲水护岸的水体边缘设置的小场地就成了亲水平台，亲水平台可满足人们观景休息类和与水接触类等多种滨水游憩活动。例如丹麦哥本哈根市中心的亲水平台，它在平台上设置了戏水池和室外游泳池等种不同形式的娱乐活动，它们为游人增添了更多的趣味性，多变的高程为游人提供了丰富的空间感受，而无障碍步行系统则加强了交通上的便利性。
对于亲水平台，这里特别应强调它的安全性。从安全性角度考虑，应设置亲水平台，亲水平台周边2m范围内水深应小于0.5m，平台宽度≥2m。当亲水台阶或平台临近深水侧，应设置牢固的安全护栏。
3亲水步道
亲水步道连接了水域内外的环境空间，组织了人在水环境中的活动，是十分重要的连接元素。引入水空间的亲水步道。从高地走近滨水环境空间的亲水步道有台阶式和缓坡式。当坡度比较大、边坡比较窄的时候步道设置不适宜垂直水面，不仅有不安全的隐患，并且在视觉上效果也不好。台阶式步道的台阶可以兼作休憩平台，而缓坡可以结合无障碍坡道设计。一般来说，以大致平行水面的步道进入水环境空间增加了步行距离，且顺应地势变化，带来更为丰富的环境体验。
水中亲水步道的设计还可以与净水设施相结合，增加亲水设计的生态性。以杉山惠一设计的日本三岛市源兵卫川亲水步道为例，源兵卫川本是一条来自
受到家庭废水严重污染的河道，经过巧妙的多孔性火山岩石过滤池与净化水路分流的设计后，把溪水的水质提高到可以供鱼类繁殖、小孩玩水的程度。其亲水设计是把过滤箱做成水面上的栈道，让人有如涉水而过的感觉，有些岸边过滤器则做成临水赏鱼的平台。
4水域戏水空间
水域戏水空间的设计在内容上除了划船、水上餐厅等传统形式外，还包括室外游泳池，水中浮桶浮台等新型的活动形式。
4.1室外游泳池
使用室外游泳池是一项很受欢迎的水上活动节目。它既能在游泳时亲近自然，又能提供室内游泳池的安全和卫生。例如柏林的欢乐河上的室外游泳池设施。它有岸上的人造沙滩，水中的室外游泳池和连接两者的木质栈桥，三部分构成。水中的室外游泳池有旧的船体改造而成，在较冷的季节里，室外游泳池里的水温从早上8点到午夜一直维持在24摄氏度左右，而在冬季它将成为一个溜冰场。木质栈桥上设置了吊床，人们可以在上面尽情的享受日光浴。
4.2水中浮桶、浮台
水中浮桶浮台属于特别适合儿童参与的一项活动，儿童可以坐在浮桶，在水中自由漂游，或站在浮台上依靠绳索在水中来回移动，尽情享受水给他们带来的乐趣。
4.3水中浮岛、浮庄
水中的绿岛随着水位的变化而上下浮动，始终保持极强的亲水感，可以让置身其中的游人带来远离都市的喧嚣，可以充分体验大自然的宁静与平和。
4.4水中植物种植池与浮床
水中植物种植池与浮床可以看成是岸上的绿化向水体的延伸，让游人在视觉和心理上加强岸域和水域的联系。
4.5水中喷泉与雕塑
水中喷泉与雕塑能给游人带来不同寻常的新奇感和吸引力。在罗德岛州的普罗维登斯，艺术家巴拿比·艾温斯创造了“水与火”这一奇观，它神奇地改变了位于城市商业区中的滨水区，使从前美丽但空旷的地方如今挤满了人。“水与火”的设施包括一组喷火的火把，在乌那斯夸特克特河的中央，一团团从金属火盆中喷射出的火焰在熊熊燃烧，这幅壮观的景象还伴随着世界流行乐曲展示给人们，无论是在几里以外漫步、聊天或是观看火焰的人都能听得到。
5 总结
城市水环境中多创造亲水空间能够吸引人更多的使用环境，并且为人带来很好的环境体验。但是亲水设计不能和生态性相违背，如果因为要亲水这一个目的而要破坏水体本身的生态结构，那么这种亲水设计就不是可取的。因此我们这里所提到的亲水设计是在人们既能够亲近水又不与保护水体的自然生态相矛盾的亲水设计。亲水设计不应成为表现自然隶属于人类这种环境伦理观的设计，而应该更多的尊重水体本身。
参考文献：
⑴郑安生；城市滨水区设计原则初探；硕士论文；北京林业大学；2006年
⑵钱欣，城市滨水区设计控制要素体系研究；中国园林，2004年11期，-46-49
⑶张庭伟，滨水地区的规划与开发；城市规划，1999年2期
林业大学硕士论文范文3
关键词：内源激素；高效液相色谱；板栗（Castanea mollissima Bl.）
中图分类号：S-3 文献标识码：A 文章编号：1674-0432（2011）-03-0076-1
植物的内源激素与植物生长发育的基本规律和代谢过程的调节控制都密切相关[1]。果树的许多生命活动过程都与激素息息相关，对激素的定性、定量研究是调控果树生长发育、开花结实的一种十分重要的途径和手段[2]，但是植物激素的含量很少，用传统的方法无法实现精确的研究，随着现代仪器的快速发展使我们对植物激素含量的定性、定量研究成为现实，尤其是色谱仪器的快速发展，几乎成为植物激素测定的必备设备，这为我们从宏观上用植物生长调节物质进行调控植物花芽分化、生长发育、开花结果、落叶休眠奠定了重要的基础[3]。
使用高效液相色谱法测定植物内源激素比较准确，在植物痕量测定方面起着重要作用[4]。用高效液相色谱法测定植物内源激素，提取方法和色谱条件是关键，通过反复实验，获得测定板栗（Castanea mollissima Bl.）枝条顶芽内源激素合适的实验条件、纯化方法和色谱条件。
1 采样方法
采用完全随机区组试验设计，三次重复，每株采八个不同方位枝条上的顶芽，每次50个，包入锡箔纸中，进行标记，放入液氮罐中，带回试验室，放入-60℃超低温冰箱中备用。
2 液相仪器分析条件
2.1 主要仪器和试剂
主要仪器：Agilent 1100型高效液相色谱仪。
主要试剂：色谱用甲醇、高纯水、0.1M冰醋酸和其他化学分析试剂。
2.2 色谱条件
色谱柱：Waters C18 3.9×150mm，4.5um；
流动相：甲醇：水：冰醋酸=46.0：53.5：0.5；
柱温：36℃；进样量：15uL；流速1.0mL/min；
标样：ZR、IAA、GA3、ABA均为Fluka产品。
采用外标峰面积定量方法，梯度洗脱，洗脱条件如表1：
表1IAA、GA3、ABA和ZR梯度洗脱条件
3 板栗顶芽内源激素提取纯化方法
首先，从超低温冰箱中取出样品，用精确度为0.1mg的化学分析天平迅速准确称取0.5g样品，在研钵中加入冰醋酸研磨直至成为浆状，研磨好的浆状物倒入准备好的小烧杯中，用甲醇冲洗研钵数遍，保证浆状物全部洗入烧杯中。研磨时注意避光，需要在研钵中加入少量抗氧化剂，用锡箔纸封住烧杯口，放入恒定3℃冰箱中浸提过夜。
其次，从冰箱中取出烧杯，加入不溶PVP(聚乙烯聚吡咯烷酮)，进行搅拌，大约8min左右，进行抽提、弃残渣、过滤，将过滤液倒入浓缩瓶中，加入几滴氨水，用旋转蒸发仪器进行浓缩（温度不要超过40℃，然后用试管定容在5ml，放入冰箱中冷冻过夜（温度在-18℃以下）。
再次，取出样品，放入离心机中进行离心，离心前用水配平，转速在4500转以上，离心15min左右，离心后取出试管，倒出上清液于烧杯中，调ph值大约为2.8左右，定容至10ml试管中，用等体积的乙酸乙酯萃取三次，取出上清液倒入浓缩瓶中，在38-40℃温度下用旋转蒸发仪浓缩至干。
第四，浓缩后的浓缩瓶用流动相溶液溶解，然后定容到1ml青霉素管中，放入高效液相仪器中测定样品中激素含量。
4 实验结果与讨论
在上述色谱条件和样品提取纯化方法下，样品中IAA、GA3、ABA、ZR激素可以获得比较好的分离效果，从图1中可以看出，基线比较平直，峰型好，拖尾少，能够获得比较好的色谱图；从图2中可以看出标样中GA3、IAA、ZR和ABA激素的峰高、峰型和保留时间，同图1中样品混合液中峰1、峰2、峰3和峰4比较符合，说明样品混合液中峰1、峰2、峰3和峰4分别是IAA、GA3、ABA和ZR，因此，本实验采用的色谱分离条件和样品提取纯化方法适用于板栗顶芽内源激素定量和定性测定。
注：1-GA3(赤霉素)；2-IAA（生长素）；3-ZR(玉米素)；4-ABA（脱落酸）。
参考文献
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[4] 河北农业大学.果树栽培学[M].北京:中国农业出版社,1987
林业大学硕士论文范文4
（一）相关的生物技术网站
充分利用现代生物技术相关的网站资源是“基因工程”课程教学的重要一环。这些网站实时反映了生物技术最前沿的理论和技术成果，可以对教学内容作出实时补充与更新。因此，笔者在教学过程中，向学生推荐了一些生物类网站，如影响力较大的中文网站生物谷、生物秀，目前国内内容最专业、系统最完善和技术最先进的生物医药门户网站生物通。另外，国外还有许多生物技术类的网站，通过这些网站可以检索到开展基因工程研究的信息资料。笔者多年的教学实践证明，通过课程教学中实时链接相关网站进行教学以及学生自己在课下浏览网站内容，可以大大激发学生学习“基因工程”课程的兴趣。
（二）文献数据库
高校和科研院所的文献数据库可为“基因工程”课程教学内容提供有益的补充。全国各高等院校与科研院所图书馆购买多个中英文全文数据库，中文数据库主要有CNKI科技期刊全文数据库，维普中文科技期刊全文数据库，博士、硕士论文全文数据库等，其中与基因工程相关的期刊包括“中国生物工程杂志”“生物工程学报”“农业生物技术学报”“分子植物育种”等。此外，“中国农业科学”“林业科学”等综合性期刊也有与基因工程相关的动态信息。此外还有各类专业性较强的生物技术类期刊。通过对这些数据库相关期刊文献的追踪，可以让高校师生与研究人员及时获取新的基因工程知识、掌握基因工程研究领域的前沿动态信息。
二、网络资源在“基因工程”课程教学中的应用
（一）利用网络资源，提高备课效率和质量
互联网的最大优势是可以突破时空界限，实现资源的共享。利用互联网很容易获取关于基因工程的有关信息资料，例如精品课程教学大纲、教学课件、教案、实验教学录像等。教师可根据教学内容需要，通过搜索引擎得到同行的教案与课件等教学素材。教师借鉴这些素材，不仅节约了时间，提高了备课效率，而且还博采众长，有效地提高了备课质量。
（二）利用网络资源，追踪科学前沿，更新教学内容
进入21世纪，生命科学研究领域的理论和技术不断创新，而“基因工程”是集生命科学理论和生物技术于一体的实践性很强的一门课程，更新的理论和技术不断应用到基因工程的研究和实践应用中。因此，仅依靠教材不能实时反映基因工程相关领域的最新理论、技术及其应用现状。互联网信息量大且更新速度快，它为教学提供了丰富的信息资源和最新的学科资讯。例如，笔者2006年在“基因工程”课程教学过程中，在讲授基因表达调控———基因沉默技术这一节内容时，实时地介绍了因发现RNA干扰机制而获得2006年诺贝尔生理医学奖的美国科学家安德鲁•法尔和克雷格•梅洛）的有关实验，进而将RNA干扰技术的最新研究进展技术进行了重点介绍，包括amiRNAi的原理和优点、WMD3软件使用方法、amiRNAi技术应用案例分析等内容。
（三）利用网络资源，丰富教学手段，提高教学效果
网络资源内容具有多样性，不仅可以利用文字和图片，做到图文并茂，而且还可以利用动画、视频等多媒体资源，使抽象、难懂、枯燥的内容变得生动、直观、形象，便于学生理解和记忆，这样不仅能够激发学生的学习兴趣，还能提高学生的学习效率。例如，教师在介绍PCR、qPCR技术原理时，可通过Flas将在PCR管中的一个生化反应以形象可视的方式进行展示，使抽象的原理变得直观易懂，学生很容易理解且印象深刻，同时教师的教学效率也得到了提高。另外，教师在进行RNAi内容教学时，通过一个视频短片对RNAi的作用机制进行了生动展示和讲解，使复杂的调控机制化繁为简，再加上短片配有背景音乐，使教学成为一种享受。
三、网络资源在“基因工程”课程教学中的应用效果
笔者在“基因工程”课程教学中，充分利用网络资源，实时补充和更新生命科学前沿的理论与技术成果，利用Flash、Movie等声像资料开展动态直观的教学活动，不仅使学生拓宽了知识面，而且极大地激发了学生的学习兴趣。按照北京林业大学教务处设计的学生对教师教学质量评价的标准，对生物技术专业135名学生的调查发现，92．7％的学生认为“基因工程”这门课程合理地运用了网络、多媒体等现代教育手段；93．2％的学生认为教学内容丰富充实、信息量大，而且还补充了新知识；93．0％的学生通过“基因工程”课程的教学活动激发了学习兴趣，学习成绩得到了提高。笔者综合分析了11个评价项目，发现各项累计得分为93．45分，取得了较好的教学效果。
四、总结
林业大学硕士论文范文5
论文摘要:植物组织培养过程中，褐变问题普遍存在,与菌类污染和玻璃话现象并称为植物组织培养的三大难题。针对褐变难题，本文结合相关资料，对影响褐变的因素作了全面分析，褐变的影响因素是复杂的，随植物种类外植体的部位几生理状况培养基及培养条件的不同而危害的程度有所不同，对这些因素是内因外界影响作用作了分析并针对这些因素提出了相应的解决措施。
在许多植物组织培养过程中，常遇到褐变问题。褐变主要发生在外植体，在植物愈伤组织的继代、悬浮细胞培养以及原生质体的分离与培养中也经常发生。褐变产物不仅使外植体、细胞、培养基等变褐，而且对许多酶有抑制作用，从而影响培养材料的生长与分化，严重时甚至导致死亡。本文探讨植物组织培养中褐变现象的影响因素、机理及防范措施，对我们进行科学研究或工厂生产，包括植物组织的培养,原生质体、悬浮细胞和植物器官的培养都有着十分重要的现实意义。
1褐变原因及危害
褐变是指外植体在培养过程中,自身组织从表面培养基释放褐色物质,以致培养基逐渐变成褐色,外植体也随之进一步变褐而死亡的现象。褐变的发生与外植体组织中所含的酚类化合物数量多少及多酚氧化酶活性有直接关系。很多植物，尤其是木本植物都含有较高的酚类化合物，这些酚类化合物在完整的组织和细胞中与多酚氧化酶分隔存在，因而比较稳定。在切割外植体时，切口附近的细胞受到伤害，其分割状态被打破，酚类化合物外溢。对于外植体本身来讲，酚类物质从外植体切口向外溢出是一种自我保护性反应，可诱导植保素或无物理屏障的形成，以防止微生物侵染组织。但酚类很不稳定，在溢出过程中与多酚氧化酶接触，在多酚氧化酶的催化下，迅速氧化成褐色的醌类物质和水，醌类物质又会在酪氨酸酶等的作用下，与外植体组织中的蛋白质发生聚合，进一步引起其他酶系统失活。从而导致组织代谢活动紊乱，生长停滞，最终衰老死亡。此外，由于组织的老化病变也会使多酚氧化酶激活而引起褐变。
2褐变产生的机理
2.1非酶促褐变
非酶促褐变是由于细胞受胁迫或其他不利条件影响所造成的细胞程序化死亡或自然发生的细胞死亡，即坏死形成的褐变现象，并不涉及酚类物质的产生。徐振彪等[1]将生长正常的愈伤组织转移到含NaCl的培养基中，组织周围尤其是接触培养基部分发生褐变，但培养基中没有看到扩散的褐化物质。当温度升高时继代保存时间过长，也会发生此类现象。但这种褐变若采取适当措施或者愈伤组织适应了胁迫环境就不再发生了[3]。
2.2酶促褐变
目前认为植物组织培养中的褐变主要是由酶促褐变引起的，培养材料变褐主要是由伤口处分泌的酚类化合物引起的[4]。酶促褐变如同一般的酶促反应，其发生必须具备三个条件，即酶、底物和氧。引起褐变的酶有多酚氧化酶(PPO)、过氧化物酶(POD)、苯丙氨酸解氨酶等。从初次培养和继代培养过程中试管苗的褐变程度和PPO的活性来看，表明PPO活性的高低是引起培养材料褐变的关键。引起褐变的酶的底物主要是酚类化合物，按其组成可分成3类:苯基羧酸（包括邻羟基苯酚、儿茶酚、没食子酸、莽草酸等），苯丙烷衍生物（包括绿原酸、肉桂酸、香豆酸、咖啡酸、单宁、木质素等），第三类是黄烷衍生物（包括花青素、黄酮、芸香苷等），但并非所有的酚类物质都是PPO的底物。
在正常发育的植物组织中,底物、氧气、PPO同时存在并不发生褐变，是因为在正常的组织细胞内由于多酚类物质分布在细胞的液泡内，而PPO则分布在各种质体或细胞质中，这种区域性分布使底物与PPO不能接触。而当细胞膜的结构发生变化和破坏时，则为酶创造了与PPO接触的条件，在氧存在的情况下使酚类物质氧化成醌，进行一系列的脱水、聚合反应，最后形成黑褐色物质，从而引起褐变。
3褐变产生的影响因素
影响植物组织培养褐变的因子是复杂的，因植物的种类、基因型、外植体部位及生理状态等不同，褐变的程度也有所不同。
3.1植物种类及基因型不同的植物和不同的基因型决定了不同的褐化程度。在组织培养中，品种褐化难易可能是与该品种中多酚类物质含量的多少及多酚氧化酶(PPO)活性的差异有关。
3.2外植体部位及生理状态外植体的部位及生理状态不同其褐化程度不同，同时，不同时期和不同年龄的外植体在培养中褐变的程度也不同。
3.3培养基成分培养基成分中的无机盐、蔗糖浓度、激素水平等对褐变的程度的影响尤为重要。另外，其pH值也与褐变程度有较大关系。
3.4培养条件温度过高或光照过强，均可加速被培养组织的褐变。不利环境条件都能造成细胞的程序化死亡，温度是诱导程序化死亡的主要因素[1]。
4防止外植体产生褐变的对策
从理论上讲,酶促褐变可以通过以下三种方法加以抑制:一是除去引起氧化的物质——氧；二是捕捉或减少聚合反应的中间产物；三是抑制有关的酶。实际操作上，下列措施是被认为行之有效的。
4.1适当外植体的选择
取材时应注意选择褐变程度较小的品种和部位作外植体。成年植株比幼苗褐变程度厉害，夏季材料比冬季及早春和秋季材料的褐变要严重。冬季的芽不易生长，宜选用早春和秋季的材料作为外植体。王异星[5]用荔枝无菌苗不同组织的诱导试验表明，茎最容易诱导出愈伤组织，培养2周后长出浅黄色的愈伤组织；叶大部分不能产生愈伤组织或诱导出的愈伤组织中度褐变；而根极大部分不产生愈伤组织，诱导出的愈伤组织全部褐变。
4.2对外植体的处理
通过对较易褐变的外植体材料的预处理能减轻醌类物质的毒害作用。处理方法如下：外植体经流水冲洗后，在2-5℃的低温下处理12-24小时，再用升汞或70%酒精消毒，然后接种于只含有蔗糖的琼脂培养基中培养5-7天，使组织中的酚类物质部分渗入培养基中。取出外植体用0.1%漂白粉溶液浸泡10分钟，再接种到合适的培养基中。若仍有酚类物质渗出，3-5天后再转移培养基2-3次，当外植体的切口愈合后，酚类物质减少，这样可使外植体褐变减轻或完全被抑制。何琼英等[6]用抗坏血酸预处理香蕉吸芽外植体，能减轻外植体褐变，从而提高芽丛诱导率。
4.3适宜的培养基
培养基的成分与褐变程度有关，要考虑所选培养基的状态和类型。
4.3.1适当的无机盐浓度张妙霞等[7]在柿树组织培养防止褐变所进行的试验中，4种培养基的无机盐以改良MS(大量元素减半)和1/2MS的效果最好，MS的效果较差，结果证明低浓度的无机盐可促进外植体的生长与分化，减轻外植体褐变的程度。徐振彪[1]在对玉米幼胚耐NaCl愈伤组织的筛选表明，随NaCl浓度升高，褐变现象加重。
4.3.2适当和适量的激素王异星[5]在荔枝的组织培养过程中，培养基中添加1mg/LBA+0.5mg/L2,4-D时，愈伤组织较坚硬，增殖缓慢，易产生褐变。培养基中添加1mg/LBA+1mg/L2,4-D时，愈伤组织浅黄疏松，增殖也快。
4.3.3培养基的硬度在一定范围内，琼脂用量大，培养基硬度大，褐变率低[8]，这可能是培养基的硬度影响了酚类物质的扩散速度的缘故。
4.3.4培养基中水的硬度的影响硬度低的蒸馏水褐变率低,而使用硬度较高的自来水,褐变严重,甚至会出现褐变死亡[8]。这可能是配制培养基的水改变了培养基中无机盐的浓度,间接地影响了植物外植体的褐变。
4.3.5培养基的pH值在水稻体细胞培养中，pH值为4.5-5.0时MS液体培养基可保持愈伤组织处于良好的生长状态，其表面呈黄白色，而pH值为5.5-6.0时，愈伤组织严重褐变[9]。一般来说，酸性环境(pH值为4.5-5.0)不利于褐变过程的发生[10]。
4.3.6培养条件如温度过高或光照过强，光照会提高PPO的活性，促进多酚类物质的氧化，从而加速被培养的组织褐变。高浓度CO2也会促进褐变，其原因是环境中的CO2向细胞内扩散，细胞内CO32-增多，CO32-与细胞膜上的CO32-结合，使有效CO32-减少，导致内膜系统瓦解，酚类物质与PPO相互接触，产生褐变[11]。因此，初期培养要在黑暗或弱光下进行。
4.4添加褐变抑制剂和吸附剂
褐变抑制剂主要包括抗氧化剂和PPO抑制剂。在培养基中加入偏二亚硫酸钠、L-半胱氨酸、抗坏血酸、柠檬酸、二硫苏糖醇等抗氧化剂都可以与氧化产物醌发生作用，使其重新还原为酚[12]。由于其作用过程均为消耗性的，在实际应用中应注意添加量，其中L-半胱氨酸和抗坏血酸均对外植体无毒副作用，在生产应用中可不受限制。在水稻细胞的培养基中，添加植酸(PA)，可防止褐变，PA分子中众多的羟基产生抗氧化作用，使生色物质的含量下降或PA与PPO分子中的Cu2+结合，从而降低了其活力。陈学森等[13]在对植酸在银杏组织培养中应用的研究中也证实了植酸具有抑制多酚氧化酶活性的作用。
常用的吸附剂有活性炭和聚乙烯吡咯烷酮(PVP)。活性炭是一种吸附性较强的无机吸附剂，能吸附培养基中的有害物质，包括琼脂中的杂质、培养物在培养过程中分泌的酚、醌类物质以及蔗糖在高压消毒时产生的5-羟甲基糠醛等,从而有利于培养物的生长。粉末状的活性炭与颗粒状的活性炭相比吸附性更强，一般在培养基中加入1-4g/L的活性炭。在使用过程中应注意，尽量用最低浓度的活性炭来对抗褐变的产生，因为活性炭的吸附作用是没有选择性的，在吸附物质的同时，也会吸附培养基中的其他成分，对外植体的诱导分化会产生一定的负面影响[14]。而聚乙烯吡咯烷酮(PVP)是酚类物质的专一性吸附剂，在生化制备中常用作酚类物质和细胞器的保护剂，可用于防止褐变[15]。
4.5进行细胞筛选和多次转移
在组织培养过程中，经常进行细胞筛选，可以剔除易褐变的细胞。在外植体接种1-2天后应立即转移到新鲜培养基中，能减轻酚类物质对培养物的毒害作用，降低抑制作用，使外植体尽快分生，连续转移5-6次，可基本解决外植体的褐变问题。
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林业大学硕士论文范文6
【关键词】市场比较法；房地产；评估；问题
市场法（Market Comparative Method），又称市场比较法、市价比较法、交易实例比较法，是通过类似房地产的成交价格来求取估价对象价值的方法，较具体地说，是选取一定数量、符合一定条件、发生过交易的类似房地产，然后将它们与估价对象进行比较，对它们的成交价格进行适当的处理来求取估价对象价值的方法。是房地产估价三大方法之一，其理论基础为替论。市场法的本质是以房地产的实际成交价格为导向来求取房地产的价值。 但房地产评估价格并不是对实际成交价格的简单的归纳、整理、修工两者无论在理论上还是在实际表现上均有一定的差异。下面对两者的差异进行分析。
依据经济学原理相同的商品具有相同的价格。但房地产实际成交价格并非如此，相间房地产的实际成交价格并非完全一致，这主要是由于房地产开发商不断调整房地产出售价格以适应市场需求或达到一定的目的，只要能满足开发商的预期目的，开发前就可以出售房地产；从购买者的角度出发，只要能满足购买人的要求，在其允许的经济条件下，购房人就可以购买。因此，由于开发商的预期目的、预期的收益率、购房人的经济条件、购房人的偏好等情况的不同，就引起同样房地产实际成交价格的差异。造成房地产实际成交价格差异的因素。具体表现在以下几个方面：
（1）房地产成交价格受成交量的影响和一般商品类似，一次性购买的房地产数量越大，价格一般越低，零散出售一般价格较高。
（2）房地产成交价格受房地产现状的影响房地产开发商为了提前回收资金、降低银行负债率、降低开发风险，在建设期就升始预售房地产其预售房地产价格一般低于建成后同类房地产价格。
（3）房地产成交价格受付款方式的影响开发商为了迅速回收资金，一般对一次性付款的情况给予适当优惠。从理论上讲，优惠价格应该是分期付款价格的贴现值。
（4）房地产成交价格与房地产销售速度的关系房地产开发商为了迅速出售房地产，也经常采用降价销售的方法。对于类似房地产若开发商适当降低其售价，销售速度较快，反之则销售速度较慢。
（5）房地产的申报价格存在瞒价或变相瞒价的情况为了逃避政府应征收的税费，有的房地产申报价格低于其实际成交价格。有的则采用联营、联建、联合开发的形式变相买卖房地产。
综合以上分析，房地产成交价格受诸多因素的影响，由于不同因素的影响，同一宗房地产会有不同的成交价格，因而建立在房地产成交价格基础上的市场比较法的评估价格具有个确定性。因此，采用市场比较法进行房地产价格评估，对其评估价格应有明确的定义，否则就失去了意义。
房地产评估价格的定义，应主要明确以下几点：
（1）不同的评估目的具有不同的价格定义例如房地产抵押价格评估。因考虑到房地产的变现能力及担保债权期间房地产价格变动等风险回素，评估价格一般保守，其评估价格应是在整体出售并且出售时的价格。而对于一般的资产评估如股份制改造、现值评估等，其价格定义与抵押价格评估就有所不同。同一宗房地产在不同评估日目的的评估价格不同。
（2）房地产价格评估应是特定时点时的评估价格随着时间的不同，房地产自身状况、房地产市场状况等因素随之变化，房地产价格也随之变化，因而房地产评估价格必须有确定的时间点。
（3）在具体的房地产价格计估中，评估人员对具体的价格定义应有明确的认识房地产评估人员必须明确评估出的房地产价格是很容易成交时的价格、较易成交时的价格、较难成交时的价格还是有行无市时的价格。
总之，房地产评估价格并不是简单的对房地产成交实例价格做交易日期、区域因素等因素修正，而要结合其房地产评估的价格定义、评估目的对比实例实际成交价格进行调整，以使其达到要求的价格定义的价格。因此，房地产评估机构应该采取的积极措施：
（1）加快自身的信息化、网络化建设，建立和完善市场信息资料库，实现信息化管理 评估过程是以基础数据资料为依据，应用评估理论、方法进行分析、对比、计算的过程。市场法进行评估尤其需要大量的市场交易参考资料。在计算机技术和网络技术的飞速发展，以及房地产市场日益规范、成熟的前提下，评估机构获得市场信息的渠道会越来越多，此时的房地产评估机构，应该抓住机遇，利用计算机和网络，积极建立起自己的市场信息资料库，强化评估信息的搜集、处理、储备能力，这样才能及时得到想要的交易案例，提高评估结果的正确性，使市场法得到更好的应用。
（2）提高评估人员的执业水平和经验技能 采用市场法对房地产进行评估时，要求评估人员能够全面准确地调查市场资料，合理选择比较案例，并将比较案例与评估对象进行全面、细致的比较，确定适当的修正系数，以保证评估结果的准确性。因此评估人员的执业水平和经验技能的高低与评估结果的准确性有着紧密的关系。但是目前国内缺少能够熟练运用市场法的高素质人才制约了市场法的应用，说明我们的评估人员运用市场法的执业技能还有待提高。
（3）改善观念，提醒各界加强对房地产市场法应用的关注 除了政府尽快建立健全房地产评估的法律、法规体系，保障市场法的应用环境外，行业学会的引导也有利于提醒各界加强对房地产市场法应用的关注。建议行业学会采取的引导措施有：
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