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关于七夕节的古诗范文1
【论文摘要】股权结构是公司所有权的结构安排,决定着公司治理的有效性,进而影响公司业绩。本文以深圳 证券 交易所上市的中小公司为研究对象,对股权集中度和股权性质对公司业绩的影响进行实证分析。
现代企业理论研究表明,股权结构是公司治理结构的产权基础。良好的股权结构能优化公司董事会构成,有效地激励和约束经理人员,促进公司形成相互制衡的治理结构,从而提高公司业绩。一般认为,股权结构包含两层含义:一是股权集中度,二是股权性质,即各个不同背景的股东集团分别持有多少股份。本文以2006年12月31日以前在深圳上市的中小企业为样本研究第一大股东持股比例以及不同性质股东持股比例与公司业绩的关系。
一、理论背景与研究假设
(一)股权集中度与业绩
大股东对公司治理会产生两种相反的效应,即利益趋同效应和利益侵占效应。一方面,大股东具有足够的激励去收集信息并有效监督 管理 层,从而避免股权高度分散情况下的“搭便车”问题,而股价上涨带来的财富使大股东和企业的利益趋于一致;但另一方面,大股东往往也会通过委派自己人的方式直接参与和干涉公司的经营管理,为自己牟取利益,从而侵害公司的利益。正是由于这两种效应的存在,使得大股东对 上市公司 的价值和绩效的影响出现了不一致的结论。对有相对控股股东或其它大股东的公司,股东对经理的监督往往有效,他们因持有相当数量的股份而具有监督动力,不会产生“搭便车”的动机。同时,他们为了自身利益得到保障,对第一大股东的利益侵占效应会起到制衡作用。
实证研究方面,国内学者孙永祥、黄祖辉(1999)发现,有一定集中度,有相对控股股东并且有其他大股东的存在,总体而言最有利于公司治理机制发挥作用,公司业绩也趋于最大。朱小平、陈仲威(2007)以沪深两市55家商业上市公司为样本,对股权结构与公司业绩的关系进行回归分析,结论表明第一大股东的控制能力对公司业绩有显著的负面影响。杨 水利 、杨万顺(2008)研究表明第二至第五大股东持股比例与公司治理绩效显著正相关。张传洲(2008)研究发现中小企业第一大股东持股比例同企业长期经营效率存在不显著负相关关系。张天阳(2008)以2005年以前在我国沪、深两地上市的196家民营上市公司为样本,研究发现最终控制人所拥有的控制权比例越大,公司价值越低。
根据以上分析,笔者提出假设一:第一大股东持股比例与业绩负相关。
假设二:股权制衡度与业绩正相关。
(二)股权性质与业绩
不同性质的股东由于治理偏好、治理能力及行为取向的不同,对公司绩效的影响也不同。
1.自然人股东对业绩的影响
在中小企业中,处于前五大股东中的自然人往往是企业的实际管理和控制者,其所控制的企业大部分属于家族企业。在这类企业中,处于控股地位的自然人股东与企业的利益高度一致,他们对提升企业的业绩有极大的积极性和主动性。实证研究方面,孙敬水、俞利峰(2007)以浙江省民营上市公司为样本,实证研究发现高管人员持股比例与公司绩效存在正相关。张传洲(2008)以2006年前在深圳中小企业板上市的102家上市公司为样本,实证研究发现中小企业管理层持股比例与企业现期经营绩效显著正相关。
根据以上分析,提出假设三:自然人股东持股比例与业绩正相关。
2.法人股东对对业绩的影响
一方面,因为各个法人拥有自身独立的利益,同时由于法人股所代表的资本有相当一部分是私人资本和集体所有的资本,因此法人股东对企业监控的积极性要高于国家股东(或其委托人),又由于法人股东持有股份数往往都较大,他们比较关注企业的中长期发展情况,对企业的监督比较有效。但另一方面,由于目前我国证券 市场 还不规范,企业上市重筹资的圈钱现象仍较为普遍,不少法人持股的民营上市公司也是通过上市来圈钱,较少关心上市公司的运营状况,致使很多企业上市或配股的目的就是为了筹措权益资本,为其母公司或关联公司解决资金困难,一旦筹措资金得手后,这些资金很快就被其关联公司卷走,很少用于生产经营,因此对上市公司业绩会有不利影响。
实证研究方面,研究发现法人股所占比重与公司业绩显著正相关的有许小年、王燕(2000),张(2000)以及孙菊生、李小俊(2006)等,而林长泉(2004),孙敬水、俞利峰(2007)得出了法人股比例与公司业绩相关关系不显著的结论。
根据以上分析,得出假设四:法人股东持股比例与业绩关系不确定。
3.国家股东对业绩的影响
国家股持股主体缺位问题已引起了广泛的关注。国家股东存在着较严重的问题,所有者权能严重弱化。国家作为企业的所有者或股东,自身是没有能力控制企业的,而其所委托的 行政 机关、政府官员也没有真正的积极性去监督企业。因为行政机关与政府官员虽然有剩余控制权,但没有剩余索取权,缺乏足够的动力去有效监督和评价管理者,从而产生内部人控制。陈晓、江东(2000),许小年、王燕(2000),孙菊生、李小俊(2006)等对国有股所占比重与公司业绩的关系的实证研究,发现国有股比重与公司业绩显著负相关。
根据以上分析,提出假设五:国家股东持股比例与业绩负相关。
二、样本选取、变量的定义与研究设计
(一)样本选取
本文选取2006年12月31日前在深圳 证券 交易所上市的102家中小 上市公司 ,删除1家st公司和4家在2007年更换第一大股东的公司,共得到97家上市公司作为最终研究样本。本文所使用的数据全部来自上市公司对外公布的2007年度报告(数据来源,深圳证券交易所网站),计算分析过程利用spss完成。
(二)变量选择
1.业绩变量
衡量上市公司业绩的 经济 指标有很多,roe和tobinq是最常用的两个指标。但是在中国,由于上市公司的股票价格并不能完全代表公司价值,而且公司资产的重置价值也难以准确估算,因此tobinq并不适合用来衡量中国上市公司的业绩。另外,由于roe是证监会对上市公司进行首次发行、配股和特别处理(st)的考核对象,企业对这一指标进行盈余 管理 的现象也比较严重,这导致roe并不能准确代表公司业绩。所以本文选用不易纵的总资产利润率roa(净利润/总资产)和主营业务利润率cror(主营业务利润/主营业务收入)作为衡量公司业绩的指标。
2.股权集中度变量
对股权集中度的衡量一般有cr指数和z指数。
(1)cr指数:指公司前n位大股东持股比例之和,本文采用第一大股东持股比例cri。
(2)z指数:指公司第一大股东与第二大股东持股比例的比值。z指数越大,第一大股东与第二大股东的力量差异越大,第一大股东的优势越明显。
(3)股权制衡度变量:为了考察其他大股东对第一大股东的制衡作用,本文选取第二、三大股东持股比例之和与第一大股东持股比例的比值(rsh23/1)作为股权制衡变量。
3.股权属性变量
股权属性变量一般采用国有股、法人股和流通股持股比例表示。由于对公司业绩产生影响的主要是大股东,而且中小企业中自然人股东持股比例较大,因此本文对股权属性变量的衡量采用前五大股东中自然人股东持股数与公司总股数的比值(pa)、前五大股东中法人股东持股数与公司总股数的比值(pl)以及前五大股东中国有股东(包括国有法人股东)持股数与公司总股数的比值(ps)。
4.控制变量
本文选择公司规模和资本结构作为控制变量。公司规模指标用总资产的自然对数lna表示,资本结构指标采用资产负债率d表示。
(三)回归分析
本文采用线性回归分析方法来 检验 中小上市公司股权结构与公司业绩之间的关系。以公司业绩指标作为被解释变量,以股权集中度、股权制衡度和股权性质指标作为解释变量。用最小二乘法进行回归分析。考虑到cr1、z、rsh23/1之间以pa、pl、ps之间存在多重共线性,不能同时使用,笔者分别考察它们对总资产利润率roa和主营业务利润率cror的影响。
三、研究结果分析
(一)对股权集中度与公司业绩回归结果的分析
从表1可以看出,在控制了公司规模和资产负债率的情况下,第一大股东持股比例与总资产利润率和主营业务利润率均呈显著的负相关,回归系数分别通过5%和1%的置信度检验。z指数,即第一大股东与第二大股东的比值,与总资产利润率和主营业务利润率均呈显著负相关,回归系数分别通过1%和10%的置信度检验。假设一成立,即第一大股东持股比例越大,公司业绩越差,而且第一大股东对第二大股东的优势越明显越不利于公司业绩提升。表示股权制衡度的指标第二、三大股东持股比例之和与第一大股东持股比例的比值与总资产利润率和主营业务利润率均呈显著的正相关,回归系数均通过了1%的置信度检验。假设二成立,即第二、三大股东对第一大股东的制衡作用对公司业绩提升有正面影响。
(二)对股权性质与公司绩效 统计 结果的分析
从表2可以看出,前五大股东中的自然人股东持股比例与总资产利润率正相关,且通过了显著性水平为5%的置信度检验。前五大股东中的法人股和国家股持股比例都与总资产利润率负相关,但都没有通过显著性检验。当以主营业务利润率为因变量时,自然人股东持股比例与之正相关,法人股东持股比例与之负相关,国家股东持股比例与之正相关,但上述相关关系均没有通过显著性检验。上述结果验证了假设三和假设四,即自然人股东持股比例与公司业绩存在正相关关系,法人股持股比例与公司业绩不存在显著线性关系。研究结果显示国家股持股比例与公司业绩不存在显著线性关系,假设五没有得到验证。其可能的原因是在中小企业中,国家股所占比重比较小,对公司业绩作用不明显。
四、主要结论
本文对深市中小板上市公司股权结构与绩效的关系进行了实证分析,研究结果表明:由于中小企业中自然人控股的公司多为家族企业,自然人大股东的利益与企业利益高度一致,因此其持股比例与公司业绩存在显著正相关。法人股东和国有股东持股比例与中小上市公司的业绩不存在显著相关性。对股权集中度与公司业绩的实证分析表明第一大股东持股比例与公司业绩存在显著负向关系,即一股独大不利于公司业绩的提升。同时研究结果表明第二、三大股东对第一大股东的制衡作用与公司业绩存在显著正向关系。因此中小上市公司应适当降低第一大股东持股比例,通过
大股东间的制衡作用降低 成本 ,提升公司业绩。
【主要参考文献】
[1] 孙永祥,黄祖辉. 上市公司 股权结构与绩效[j]. 经济 研究,1999(12):38.
关于七夕节的古诗范文2
作为光荣的人民教师,身上肩负着将中华传统文化与课堂教学结合起来的重任。在平时的教学与研究中,本人发现,从俗语、楹联、诗词曲赋、四书五经、传统美德、民风民俗及语法等各种形式的中华传统文化入手,与语文教学结合,均可收到意想不到的效果。时间一长,师生都感到“中华文化,妙不可言”。
一、传统节日在语文教学中的运用
春节是我们的传统节日,可近年来一些人为了赶时髦,过起了洋节日,传统的节日却忽略了。圣诞节各大商场张灯结彩,圣诞老人站在门口迎接各位顾客,门口的圣诞树光彩夺目,商场里到处都是头戴圣诞帽的售货员……气氛煞是热烈。情人节大街上处处是大幅的标语,玫瑰卖得特别火爆……可我们的传统节日春节、七夕节,却显得冷落了。于是,在语文教学中,我对学生说:“春节是我们的传统节日,你们知道有什么风俗吗?”学生说:“家家户户举行一些庆祝活动,如放鞭炮、贴春联、贴年画、舞龙狮、吃年糕等,年初一早上人们互相庆贺,大人给小孩压岁钱等。”
我又引导学生说关于春节的诗 “爆竹声中一岁除,春风送暖入屠苏。千门万户瞳瞳日, 总把新桃换旧符。”
为了引起学生对传统节日的重视,我又告诉他们,我们的传统节日还有清明节、端午节、七夕节、中秋节、重阳节等
清明节是祭拜祖先的,相关诗句有“清明时节雨纷纷,路上行人欲断魂”。 端午节是纪念屈原的,人们在这天的风俗是吃粽子、赛龙舟、插艾叶辟邪等。七夕节源自牛郎织女的传说,人们常用“两情若在长久时,又岂在朝朝暮暮。”这句诗来象征美好的爱情。中秋节人们观月祭拜,寄托情怀,留下了许多思乡的佳句,如“但愿人长久,千里共婵娟” “举头望明月,低头思故乡”等。
在上语文课时,我把这些传统的节日穿去讲,以便活跃语文课堂学习,加强学生对传统节日风俗的回顾以及他们对传统文化的印象。在语文课堂上了解传统节日的同时,又穿插相应的古诗词,加强了学生对古诗词的理解和应用,这样起到了良好的效果。
二、古诗在语文教学中的运用
古诗在语文教学过程中随时可以灵活运用,无论是导入、解答问题、小结、总结时均可加以运用,达到对学生实施爱国主义、亲情、友情教育的目的。
(1)对学生实施爱国主义教育。传统文化中最浓郁、最强烈的亮点就是爱国主义情感。例如初中学生都会接触到的这些名篇名句:“位卑未敢忘忧国”是南宋时期著名诗人陆游忧国爱民的真实情怀, 陆游《 示儿》一诗说“死去元知万事空,但悲不见九州同。王师北定中原日,家祭无望告乃翁。”陆游临死之前,仍然惦记祖国的一统大业,其爱国之心感人肺腑,催人泪下。杜甫在《茅屋为秋风所破歌》中发出了兼济天下苍生的远大理想“安得广厦千万间,大庇天下寒士俱欢颜”。文天祥的《过零丁洋》“人生自古谁无死,留取丹心照汗青”表现了坚贞的民族气节,慷慨悲壮,感人至深。范仲淹《岳阳楼记》一文的名句“先天下之忧而忧,后天下之乐而乐”的远大抱负,在今天仍有积极的教育意义。岳飞的《满江红》“壮志饥餐胡虏肉,笑谈渴饮匈奴血”,是何等的气势,体现了他的爱国情怀。王昌龄的《出塞》、范仲淹的《渔家傲·秋思》都抒发了伟大诗人的爱国情感。学习过程中,务必让学生在理解诗句含义和时代背景的基础上,体察探究伟大诗人的爱国情怀。学习伟大诗人热爱自己的祖国的高尚品质,长大后做社会主义事业的继承者和建设者,能够为国家做出自己的贡献。
(2)对学生实施亲情教育。亲情教育是传统伦理道德的一个重点。孟郊的《游子吟》“谁言寸草心,报得三春晖”,颂扬了母爱的伟大。唐朝诗人王维《九月九日忆山东兄弟》的 “每逢佳节倍思亲”其手足之情溢于言表,使人感动至极,成为千古佳句。三国时期曹植的《七步诗》“本是同根生,相煎何太急”,则教育我们亲人之间要和睦相处且不可相互残害。教学过程中,要注重引导学生体会亲人对自己的关爱,注重培养学生尊老爱幼的优良品德,给学生编织一个和谐的亲情关系网。
关于七夕节的古诗范文3
七夕古诗大全七夕
作者:(宋)杨璞
未会牵牛意若何,须邀织女弄金梭。
年年乞与人间巧,不道人间巧已多。
七夕
作者:(唐)曹松
牛女相期七夕秋,相逢俱喜鹊横流。
彤云缥缈回金辂,明月婵娟挂玉钩。
燕羽几曾添别恨,花容终不更含羞。
更残便是分襟处,晓箭东来射翠楼。
七夕
作者:(唐)崔国辅
太守仙潢族,含情七夕多。
扇风生玉漏,置水写银河。
阁下陈书籍,闺中曝绮罗。
遥思汉武帝,青鸟几时过?
七夕
作者:(唐)崔涂
年年七夕渡瑶轩,谁道秋期有泪痕?
自是人间一周岁,何妨天上只黄昏。
七夕
作者:(唐)窦常
露盘花水望三星,仿佛虚无为降灵。
斜汉没时人不寐,几条蛛网下风庭。
楚塞馀春听渐稀,断猿今夕让沾衣。
云埋老树空山里,仿佛千声一度飞。
秋夕
作者:(唐)杜牧
银烛秋光冷画屏,轻罗小扇扑流萤。
天阶夜色凉如水,坐看牵牛织女星。
七夕
作者:(唐)杜牧
云阶月地一相过,未抵经年别恨多。
最恨明朝洗车雨,不教回脚渡天河。
七夕
作者:(唐)杜审言
白露含明月,青霞断绛河。天街七襄转,阁道二神过。
袨服锵环佩,香筵拂绮罗。年年今夜尽,机杼别情多。
迢迢牵牛星
作者:(梁)萧统
迢迢牵牛星,皎皎河汉女。
纤纤擢素手,札札弄机杼。
终日不成章,泣涕零如雨。
河汉清且浅,相去复几许。
盈盈一水间,脉脉不得语。
七夕
作者:(唐)权德舆
今日云骈渡鹊桥,应非脉脉与迢迢。
家人竟喜开妆镜,月下穿针拜九霄。
七夕
作者:(唐)徐凝
一道鹊桥横渺渺,千声玉佩过玲玲。
别离还有经年客,怅望不如河鼓星。
七夕今宵看碧霄,牛郎织女渡鹊桥。
家家乞巧望秋月,穿尽红丝几万条。
七夕词
作者:(唐)崔颢
长安城中月如练,家家此夜持针线。
仙裙玉佩空自知,天上人间不相见。
长信深阴夜转幽,瑶阶金阁数萤流。
班姬此夕愁无限,河汉三更看斗牛。
七夕
作者:(唐)白居易
烟霄微月澹长空,银汉秋期万古同。
几许欢情与离恨,年年并在此宵中。
七夕赋咏成篇
作者:(唐)何仲宣
日日思归勤理鬓,朝朝伫望懒调梭。
凌风宝扇遥临月,映水仙车远渡河。
历历珠星疑拖佩,冉冉云衣似曳罗。
通宵道意终无尽,向晓离愁已复多。
七夕
作者:(唐)李贺
别浦今朝暗,罗帷午夜愁。
鹊辞穿线月,花入曝衣楼。
天上分金镜,人间望玉钩。
钱塘苏小小,更值一年秋。
同赋山居七夕
作者:(唐)李峤
明月青山夜,高天白露秋。花庭开粉席,云岫敞针楼。
石类支机影,池似泛槎流。暂惊河女鹊,终狎野人鸥。
七夕歌
作者:(唐)刘言史
星寥寥兮月细轮,佳期可想兮不可亲。
云衣香薄妆态新,彩輧悠悠度天津。
玉幌相逢夜将极,妖红惨黛生愁色。
寂寞低容入旧机,歇著金梭思往夕。
人间不见因谁知,万家闺艳求此时。
碧空露重彩盘湿,花上乞得蜘蛛丝。
七夕
作者:(唐)李商隐
鸾扇斜分凤幄开,星桥横过鹊飞回。
争将世上无期别,换得年年一度来。
七夕偶题
作者:(唐)李商隐
宝婺摇珠佩,常娥照玉轮。灵归天上匹,巧遗世间人。
花果香千户,笙竽滥四邻。明朝晒犊鼻,方信阮家贫。
壬申七夕
作者:(唐)李商隐
已驾七香车,心心待晓霞。风轻惟响佩,日薄不嫣花。
桂嫩传香远,榆高送影斜。成都过卜肆,曾妒识灵槎。
辛未七夕
作者:(唐)李商隐
恐是仙家好别离,故教迢递作佳期。
由来碧落银河畔,可要金风玉露时。
清漏渐移相望久,微云未接过来迟。
岂能无意酬乌鹊,惟与蜘蛛乞巧丝。
七夕寄张氏兄弟
作者:(唐)李郢
新秋牛女会佳期,红粉筵开玉馔时。
好与檀郎寄花朵,莫教清晓羡蛛丝。
七夕
作者:(唐)李中
星河耿耿正新秋,丝竹千家列彩楼。
可惜穿针方有兴,纤纤初月苦难留。
七夕
作者:(唐)刘威
乌鹊桥成上界通,千秋灵会此宵同。
云收喜气星楼晓,香拂轻尘玉殿空。
翠辇不行青草路,金銮徒候白榆风。
采盘花阁无穷意,只在游丝一缕中。
七夕二首
作者:(唐)刘禹锡
河鼓灵旗动,嫦娥破镜斜。满空天是幕,徐转斗为车。
机罢犹安石,桥成不碍槎。谁知观津女,竟夕望云涯。
天衢启云帐,神驭上星桥。初喜渡河汉,频惊转斗杓。
馀霞张锦幛,轻电闪红绡。非是人间世,还悲后会遥。
七夕
作者:(唐)卢殷
河耿月凉时,牵牛织女期。欢娱方在此,漏刻竟由谁。
定不嫌秋驶,唯当乞夜迟。全胜客子妇,十载泣生离。
七夕
作者:(唐)杜甫
牵牛在河西,织女处河东。
万古永相望,七夕谁见同。
七夕诗
作者:(唐)卢纶
凉风吹玉露,河汉有幽期。星彩光仍隐,云容掩复离。
良宵惊曙早,闰岁怨秋迟。何事金闺子,空传得网丝。
七夕诗
作者:(唐)卢纶
祥光若可求,闺女夜登楼。月露浩方下,河云凝不流。
铅华潜警曙,机杼暗传秋。回想敛馀眷,人天俱是愁。
七夕
作者:(唐)罗隐
络角星河菡萏天,一家欢笑设红筵。
应倾谢女珠玑箧,尽写檀郎锦绣篇。
香帐簇成排窈窕,金针穿罢拜婵娟。
铜壶漏报天将晓,惆怅佳期又一年。
七夕
作者:(唐)清江
七夕景迢迢,相逢只一宵。月为开帐烛,云作渡河桥。
映水金冠动,当风玉佩摇。惟愁更漏促,离别在明朝。
韩庄闸舟中七夕
作者:(清)姚燮
木兰桨子藕花乡,唱罢厅红晚气凉。
烟外柳丝湖外水,山眉澹碧月眉黄。
奉和七夕两仪殿会宴应制
作者:(唐)李峤
灵匹三秋会,仙期七夕过。查来人泛海,桥渡鹊填河。
帝缕升银阁,天机罢玉梭。谁言七襄咏,重入五弦歌。
七夕
作者:吴绡
星光历历汉悠悠,怅望双星独倚楼。
莫谓人间多别恨,便疑天上有离愁。
梁清谪去谁相伴,子晋归来合公游。
惟有月娥应最妒,一轮风露不胜秋。
乞巧
作者:林杰
七夕今宵看碧霄,牵牛织女渡河桥。
家家乞巧望秋月,穿尽红丝几万条。
七夕
作者:仇远
河鼓天孙各老成,无愁可解任秋声。
痴儿笑月羞眉曲,稚女穿针斗眼明。
夜半且分瓜果供,天中岂识别离情。
未能免俗消光景,醉卧西风梦亦清。
牵牛织女
作者:(唐)杜甫
牵牛出河西,织女处其东。万古永相望,七夕谁见同。
神光意难候,此事终蒙胧。飒然精灵合,何必秋遂通。
亭亭新妆立,龙驾具曾空。世人亦为尔,祈请走儿童。
称家随丰俭,白屋达公宫。膳夫翊堂殿,鸣玉凄房栊。
曝衣遍天下,曳月扬微风。蛛丝小人态,曲缀瓜果中。
初筵裛重露,日出甘所终。嗟汝未嫁女,秉心郁忡忡。
防身动如律,竭力机杼中。虽无姑舅事,敢昧织作功。
关于七夕节的古诗范文4
【摘要】
目的观察化淤祛湿法对膝骨性关节炎早期诱导型一氧化氮合酶(iNOS)炎症途径的影响,探讨其治疗作用机理。方法通过切断膝关节前交叉韧带和内侧副韧带造成膝OA模型。将24只日本雄性大耳白兔随机分为A组(正常组)、B组(模型组)、C组(补肾法)、D组(化淤祛湿法)。给药4周后处死实验兔,行关节腔大体观察,关节液NO含量检测,滑膜、关节软骨组织学观察,滑膜、关节软骨iNOS含量检测。结果D组关节腔大体观察与C组比较,差异无显著性(P>0.05);D组关节液NO含量检测与C组比较,差异显著(P
【关键词】 膝骨关节炎 化瘀祛湿法 一氧化氮合酶
膝关节骨关节炎(简称膝骨关节炎,KOA)是一种多发于老年人的慢性退行性疾病,目前无根治方法,现代医学采用非甾体类消炎镇痛药(NSAIDs)为主对症治疗。而长期使用NSAIDs ,易发生胃肠道溃疡等严重并发症。临床应用化淤祛湿法或类似治法治疗KOA取得了较好疗效[1~6]。我们在兔KOA早期动物模型上,观察了化淤祛湿法对诱导型一氧化氮合酶(iNOS)炎症途径的影响,以探讨化淤祛湿法对KOA早期的治疗作用及其机制,为临床应用提供依据。
1 材料
1.1 分组
选择成年健康日本雄性大耳白兔24只(广西中医学院实验动物中心提供,许可证号:SYXK桂2003-0001),体重2.0~2.5kg。按随机数字表法随机分成4组:A组(正常组)、B组(模型组)、C组(补肾法)、D组(化淤祛湿法),每组6只,分别编号。
1.2 造模与处理
手术切断膝关节前交叉韧带和内侧副韧带制造兔膝骨关节炎软骨退行性变模型。采用化学纯氨基甲酸乙酯(乌拉坦)麻醉,用0.9%盐水将其配成25%的溶液,按1 g·kg-1体重(4 ml·kg-1体重)耳缘静脉注射。麻醉后,剪除右后肢膝关节周围毛发,常规消毒,髌旁内侧切口长约3 cm,切开关节囊,将髌骨向外翻转,切断前交叉韧带和内侧副韧带,止血,缝合关节囊及皮肤。A组不手术。4周以后喂服药物1次/d,连续给药4周。A组与B组喂服与D组中药等量的淀粉颗粒1次/d。药物组与剂量:①C组:桑寄生15 g,补骨脂10 g,杜仲10 g,肉苁蓉10 g,熟地10 g,鹿含草10 g,续断15 g,山茱萸10 g;②D组:丹参15 g,当归10 g,川芎10 g,红花10 g,川牛膝10 g,苍术15 g,半夏10 g,陈皮10 g,白芥子6 g,白术10 g。为提高实验结果的重复性,使用由江阴天江药业有限公司生产的单味中药浓缩颗粒剂组配,并且要求同一批号。用药剂量按Meeh-Rubner公式A(体表面积)=K(系数)·W(体重g)2/3·10-4体表面积换算,用适量温开水将中药浓缩颗粒剂搅拌均匀后灌胃。动物分笼标准饲养。于手术后8周予过量麻醉处死,处死当天不给药。处死后每只动物依次打开关节腔行大体观察。用锐刀切取内侧滑膜和股骨内髁下面全层关节软骨,留作实验标本。滑膜、软骨标本分成两等份。
2 方法
2.1 关节腔大体观察
实验动物处死后,打开膝关节囊,观察滑膜和软骨表面的颜色、光泽、光滑度(是否粗糙)。
2.2 关节液NO含量测定
打开膝关节囊后,收集关节滑液0.5 ml,用等量生理盐水稀释后,严格按南京建成生物研究所提供的NO测试盒(编号20071211)的实验步骤行NO含量测定。
2.3 组织学观察
取材后的滑膜和软骨标本经4%多聚甲醛溶液固定24~48 h,递增浓度乙醇脱水,石蜡包埋,与滑膜或软骨表面垂直行间断连续切片,厚3 μm。HE染色、光镜下组织学观察。
2.3.1 滑膜组织学观察
观察滑膜细胞、细胞外基质、毛细血管。将滑膜病变定为4级,计分为0~3分。滑膜完整,细胞排列整齐,无充血水肿、无炎细胞浸润为0级,计0分;滑膜充血水肿,表层细胞增生为Ⅰ级,计1分;滑膜细胞呈状增生,滑膜内血管增生,肉芽组织形成为Ⅱ级,计2分;滑膜内肉芽组织纤维化(瘢痕形成),伴有淋巴细胞和浆细胞浸润为Ⅲ级,计3分。
2.3.2 软骨组织学观察
观察的石蜡切片HE染色:观察软骨表面,细胞排列,基质,潮线。按照贺艳丽等[7]标准,予适当简化,将软骨退变定为4级,计分为0~3分。关节软骨表面光滑,可清楚地分为表层、移行层、辐射层和软骨基质钙化层,辐射层和钙化层之间的潮线清晰可见为0级,计0分;软骨细胞排列不规则,层次变得紊乱为Ⅰ级,计1分;软骨中层内有软骨细胞成簇增生,潮线间断为Ⅱ级,计2分;关节软骨表层灶性剥离,层次紊乱,潮线消失为Ⅲ级,计3分。
2.4 滑膜、软骨iNOS检测
软骨和滑膜组织中iNOS含量测定:剥取关节内滑膜及关节软骨,用1/10万电子天平精确称重,立即于低温下(-83℃)放置,用研钵粗研后,用组织匀浆器做成组织匀浆,12 000 r/min离心后取上清液,严格按南京建成生物研究所提供的iNOS测试盒(编号20071211)的实验步骤行iNOS含量测定。
2. 5 统计方法
本研究的数据以±s表示。采用SPSS11.0 for Windows统计软件进行数据录入和统计处理。
3 结果
3.1 滑膜和软骨大体观察A组兔膝关节软骨外观呈蓝白色,色泽明亮,无裂纹及软化缺损,触之较硬;关节液量较少,质地清辙透明。B组关节软骨明显失去原有光泽、发黄、色泽暗淡、软骨触之较软,尤以股骨外髁为著,可见皲裂甚至缺损,关节表面欠规则,且关节边缘有骨赘形成及纤维性粘连,滑膜存在不同程度增生;关节液量增多,且呈泡沫状、混浊。对照、治疗两组均可见关节软骨外观呈白色,欠光滑,股骨髁软骨触之变软,有的可见裂纹,滑膜轻度增生,关节液较A组稍多。D组肉眼观察与C组相似,滑膜炎性表现较B组轻,C,D组之间差异不显著。
3.2 关节液NO含量测定 见表1。关节液NO含量,B组与A组比较明显升高,有显著性差异(P0.05),但与B组比较均明显降低,有显著性差异(P
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3.3 组织学观察
3.3.1 滑膜组织学观察
见表1。滑膜组织学计分,B组与A组比较明显升高,有显著性差异(P
3.3.2 关节软骨组织学观察
见表1。关节软骨组织学计分,B组与A组比较明显升高,有显著性差异(P
3.4 滑膜、软骨iNOS的检测
见表1。关节滑膜和软骨iNOS含量,B组与A组比较明显升高,有显著性差异(P
①关节液NO含量:B组与A组相比较,P
4 讨论
中医学认为,KOA多责之于虚实两端,虚以肝肾脾亏虚等为主,实以血淤、痰湿阻滞等为主。病性为本虚标实。我们认为[8],本病虽虚实夹杂,证候复杂,但淤、湿(痰)等标实是造成KOA疼痛、肿胀等症状的主要原因, KOA的早期更是以实证为主,而虚证不突出。采用化瘀祛湿法治疗早期KOA,切中中医病机;即使兼有虚证,暂不治之,也符合中医“急则治其标”原则。
研究发现,OA的发病与NO和iNOS密切相关。在正常滑膜中iNOS未见明显表达[9],OA时细胞因子如白细胞介素-1(IL-1)、肿瘤坏死因子(TNF)等刺激下,使滑膜细胞表达iNOS增加,且iNOS强烈表达于沿膜衬里层、滑膜下层[10]。一旦iNOS蛋白合成,它的活性可持续表达,能催化产生大量NO,使NO水平升高,软骨分解代谢增快,软骨细胞凋亡过盛,最致导终关节软骨损害。因此,iNOS在OA的发病过中发挥着重要作用。本研究结果显示实验各组关节液中NO含量明显增高,也提示NO是OA软骨退变的机制之一。
在OA的早期,滑膜的增生和纤维化,分泌炎症介质和软骨降解酶,且参与OA整个病理过程[11],而且滑膜组织学改变与OA的临床表现也呈现出相符性[12]。实验显示,使用化淤祛湿法可减少KOA早期关节液中NO的含量、滑膜和关节软骨中iNOS的表达,显著降低关节局部NO的含量,从而有利于抑制滑膜炎症,缓解KOA早期的疼痛、肿胀症状,延缓关节软骨的退变。
本实验表明,化淤祛湿法对兔KOA早期iNOS炎症途径产生重要作用,为化淤祛湿法的临床应用提供了依据。
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