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血细胞分析仪范文1
【关键词】血常规分析仪;比对
由于具检测结果准确、精密度高、操作简便等特点,血细胞分析仪在检验医学领域的应用愈来愈广泛,但因不同品牌或同一品牌不同型号的血细胞分析仪的测定原理及方法存在相异之处,可引致测定结果出现差异。本文参考美国临床和实验室标准化协会颁布的EP9-A2文件[1]和国际血液学标准化委员会文件[2]本实验室所使用的4台血细胞分析仪测定结果执行比对试验,以确保为临床疾病诊疗提供准确、可比的血液学检验数据。
1资料和方法
1.1材料
1.1.1仪器和试剂四台血细胞分析仪分别为:sysmex XE-2100i、sysmex 1800i、sysmex800i、日本光电。所用试剂均为相应厂家配套试剂,所有试剂均在有效期内使用。
1.1.2质控物均为原装配套质控物。
1.1.3抗凝管及新鲜抗凝全血[3]乙二胺四乙酸二钾(EDTA-K2)抗凝真空采血管购自美国BD公司,抗凝新鲜全血来自健康体检者或住院患者。
1.2方法
1.2.1实验方法
1.2.1.1检验人员熟悉每一检测系统的各个实验环节,熟悉评价方案。
1.2.1.2以sysmex 1800i血细胞分析系统为比较系统,sysmex XE-2100i、sysmex800i、日本光电血细胞分析系统为实验系统。实验系统和比较系统分别测定质控物,各项指标在控后检测实验样本。
1.2.1.3每天检测1份样本,且在抽血后2小时内完成检测,连续检测30天,共检测30份样本。
1.2.2统计学分析计算每一项目在每台仪器上双份测定的均值,以sysmex 1800i为比较仪器,采用SPSS12软件建立回归方程。依据已建立的回归方程,并求出最大偏倚。
2结果
三台比对机与标准机血细胞分析仪检测结果,经统计分析,相关性显著,r2均大于0.95,说明三台仪器在5项指标上均有非常高的优拟合度。最大偏倚结果均在美国CLIA,88能力验证分析质量要求范围内,见表1。
3讨论
目前,许多医院都有数台血细胞分析仪,同一检验项目在不同仪器上的检测结果可能存在偏差,如何保证不同检测系统间检验结果的一致性、准确性及稳定性是目前医学界关注和讨论的热点[4]。不同血细胞分析仪对同一检验结果的可比性是检验质量管理的最终目标,因此,工作中应重视实验室内检测系统的比对,确定比对方案并严格操作规程。目前许多检测系统比对试验是采用统计学t检验进行方法学比对评价,两台仪器检验结果经t检验,若差异无统计学意义,即认为2个检测系统有很好的可比性。然而,这种验证方法不够规范[5]。《检测和校准实验室能力的通用要求》(GB/T15481-2000、ISO/IEC10725-1999)和《医学实验室质量和能力的专用要求》(ISO15189-GB/T22576)这2个国际标准对检验结果的可溯源性和可比性均有明确要求,强调比对试验是实现准确度溯源和患者标本检验结果可比性的重要途径。而比对试验则要参考CLSI-EP9-A2文件,用回归统计法分析不同系统的SE%和医学决定水平处的SE%。以1/2CLIA,88TEa为标准,判断检测系统的可比性即为临床可接受水平[6]。笔者严格按照CLSI‐EP9‐A2文件要求,在保证两台仪器精密度和稳定性良好的条件下,对其进行WBC、RBC、Hb、PLT、HCT5项检测结果的方法学比对和评估,以比对方法为横坐标,试验方法为纵坐标,再进行均值散点图的离群值检查、相关回归分析以及可接受性评估。本研究结果表明,四台仪器具有良好的可比性,SE%在允许范围内,本组比对试验结果可以接受。另外,在实验中要注意方法学的比较必须与临床相结合,实验时选择的数据要围绕医学决定水平,并统计各个水平的系统误差。若某项目只有一个临床决定水平,需估计在实验数据均值附近的SE%。从r值及其与1/2CLIA′88TEa比较等方面,综合评估不同仪器检测同一项目结果间的准确性和一致性,从不同角度评估检测结果更为科学、客观。各实验室熟悉仪器的技术人员应定期对不同检测系统的结果进行分析、评价,确保检验结果稳定、准确、可靠。
参考文献
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[2]England JM,Roman RM,Van Assendeft OW,et al.Protocol for evaluation of automated blood cell counters[J].Clin Lab Haematol,1984,(1):69-84.
[3]彭黎明,李丽娟,彭志勇,等.几种血细胞分析仪结果的比对和质控[J].中华检验医学杂志,2000,23(2):94-97.
[4]汪艳,朱敏,张静.同型号全自动细胞分析仪的比对试验[J].国际检验医学杂志,2010,31(2):166-167.
血细胞分析仪范文2
关键词 血细胞分析仪 检测结果 比对试验
随着检验医学的快速发展,全自动血细胞分析仪在医学实验室得到广泛使用,但由于其品牌种类多,同一实验室可同时拥有多台不同型号、不同分析原理的血细胞分析仪,导致同一血液标本在不同仪器之间测定的结果不可避免的会存在系统误差。为了解两台血细胞分析仪的性能,并为今后的室内及室间质量控制方案做准备,保证两台血细胞分析仪测定结果的准确性和可比性,根据1984年国际血液学标准化委员会(ICSH)公布的关于全自动血细胞分析仪评价的文件[1],使用标准全血质控品及患者新鲜全血标本在不同型号的血细胞分析仪上进行了WBC、RBC、HGB、HCT、PLT等5个主要项目的检测,对所检测的结果进行比对分析,现将比对结果报告如下。
资料与方法
标本来源:每天随机抽取本院门诊和住院患者血液标本20例,空腹静脉血1.5ml,用EDTA-K2抗凝。仪器:Sysmex XS-800i型血细胞分析仪,倍肯公司AC-920型血细胞分析仪。试剂:稀释液、溶血剂、清洗液等均采用原装进口配套试剂。质控液:全血细胞质控品,由新成生物有限公司提供。
方法:实验前首先对两台仪器进行日常维护,保证仪器的工作环境及运行状态在正常状态,再用血细胞分析仪的校准液对分析仪的主要参数进行校准,然后用质控液在Sysmex XS-800i型血细胞分析仪和瑞典倍肯公司AC-920型血细胞分析仪两台血细胞分析仪上分别进行检测,并使用患者的新鲜全血样本在两台仪器上分别进行检测,使用质控液所测定的WBC、RBC、HGB、HCT、PLT等5个项目的检测结果来评价两台血细胞分析仪的批内、批间精密度。
仪器稳定性监控:每台仪器每天以全血质控物做室内质控(批间精密度),分别计算参数WBC、RBC、PLT、HGB、HCT的均值、SD和CV。
仪器精密度测定:取正常人新鲜抗凝静脉血1份,分别在每台仪器重复测定10次,计算WBC、RBC、PLT、HGB、HCT的均值,SD和CV。
结 果
精密度测定:①批内精密度:用质控液在每台血细胞分析仪上连续测定20次。两台血细胞分析仪的测定结果和批内精密度均在质控品参考范围内,经t检验,测定结果之间的差异均无统计学意义(P>0.05)。②批间精密度:将质控液每日随机插入常规标本中在每台血细胞分析仪上检测1次,连续20天作为每台仪器的批间精密度。两台血细胞分析仪的检测结果和批间精密度均在质控品参考范围内[2],经t检验,两台仪器检测结果差异均无统计学意义(P>0.05)。
随机取门诊和住院患者EDTA-K2抗凝全血标本20份,同时在两台血细胞分析仪上分别检测两次取其平均值。将两台血细胞分析仪测定的同一检测项目的结果进行配对t检验(P>0.05),说明两台仪器检测的各项检验结果间的差异无统计学意义。
讨 论
血红蛋白含量的测定是在被稀释的血液中加入溶血剂后,使红细胞释放出血红蛋白,后者与溶血剂中有关成分结合形成血红蛋白衍生物,进入血红蛋白测试系统,在特定波长(一般在530~550nm)下比色,吸光度的变化与液体中Hb含量成比例,仪器便可显示Hb浓度。不同系列的血液分析仪配套溶血剂配方不同,形成的血红蛋白衍生物也不同,但大多数的最大吸收光谱接近540nm。近年来许多高档的分析仪上采用了激光散射法进行单个血红细胞血红蛋白的分析,以尽量减少高WBC、乳糜血、高胆红素等对HBG比色的影响。
Sysmex XS-800i型血细胞分析仪利用光检测器模块应用流式细胞计数法进行白细胞分析和五分类分析,红细胞检测器利用流体聚焦法进行红细胞和血小板计数,血红蛋白检测器利用SLS血红蛋白检测法来分析血红蛋白。分析模式可采用手动模式和毛细管模式,为保证结果的准确性,定期对仪器进行校准,并且每天用全血质控品进行室内质量控制分析,定期参加室间质量评价活动,通过长期使用发现Sysmex XS-800i型血细胞分析仪的检测结果重复性好,准确性高,具备完善的质量控制程序,仪器性能优良,室间质量评价成绩优良,可以为临床提供准确、快速、及时的血细胞分析检测数据。
AC-920型血细胞分析仪利用电阻抗法进行白细胞、红细胞和血小板的检测,用光吸收法进行血红蛋白的检测,可采用预稀释模式和抗凝全血两种模式进行检测,可对白细胞进行三分类分析,尤其对于不易采血的婴幼儿可采取末梢血稀释后进行检测,用血量少,非常方便。
对于同一实验室的不同类型的血细胞分析仪,定期进行比对试验是保证其检测结果准确性的重要手段,正确评价和合理使用血细胞分析仪,对提高临床检验质量和工作效率起着积极作用。
参考文献
血细胞分析仪范文3
为了解我室几台血细胞分析仪的性能,并为今后的室内及室间质量控制方案做准备,笔者采用新鲜血对本室几台血细胞分析仪做了比对实验,现报道如下。
1 材料与方法
1.1 仪器与试剂:血细胞分析仪共3台,其中Pentra-60 1台
(ABX公司),ACT-diff2 1台(BECKMAN公司),F-820 1台(Sysmex公司),所有仪器都使用配套试剂,全血质控物(四川迈克公司批号090515F)。
1.2 标本收集
1.2.1 每天随机选取临床病人新鲜静脉抗凝血小板(EDTA-K2抗凝)。
1.2.2 选取我院体检正常者新鲜抗凝血标本(EDTA-K2抗凝)。
1.3 方法
1.3.1 仪器稳定性监控:每台仪器每日以全血质控物做室内质控(批间精密度),并依据室内质控做随程监控。分别计算参数WBC、RBC、PLT、HGB、HCT的均值、SD和CV。
1.3.2 仪器精密度测定:取正常人新鲜抗凝静脉血1份,分别在每台仪器重复测定10次,计算WBC、RBC、PLT、HGB、HCT的均值,SD和CV。
1.3.3 比对仪器的确定:根据我室的具体情况,依据室内质控,选定Pentra-60(ABX)为参考比对仪器,其他2台为测试仪器。
1.3.4 比对实验:每日用2.1所采集的标本4份,在3台仪器上分别进行测试,连续26天,比较测试仪器和参考比对仪器的测定结果,包括WBC、RBC、PLT、HGB、HCT。
1.4 统计处理
1.4.1 对各个仪器与参考比仪器结果做回归和相关分析,求其相关系数r及回归方程y=bx+a,然后根据回归方程求x在允许误差内的取值范围,即有效检测范围,查阅相关文献后,参考美国CLIA’88能力比对检验质量要求和国际血液学标准化委员会及NCCLS制定的标准设定允许误差为:WBC:±5%,RBC:±2%,PLT:±9%,HGB:2%,HCT:±2%。
1.4.2 以参考范围为界限(RBC为3.5~5.5×109/L,WBC为4~10×109/L,HGB为110~160 g/L,HCT为0.37~0.55L/L,PLT为100~300×109/L)[2],低于参考值为低值,高于正常参考范围为高值,在参考范围内为中间值,以参考比对仪器高中低值区段均值为测定值,计算各测试仪器相对参考比对仪器的变异百分率%=│测定值-正确值│正确值×100。
2 结果
2.1 从各仪器试验期间室内质控结果可知CV%不大于5%,见表1,显示各仪器在实验期间性能稳定。
2.2 各仪器分析项目的批间精密度都在厂家规范范围内,见表2。
2.3 比对仪器与其他2台仪器相关分析见表3,回归方程经方差分析推断直线关系成立,P>0.05。
2.4 根据回归方程Y=bx+a和设定的允许误差范围计算的有效测试范围见表4。
2.5 两台测试仪器与对比仪器测定值间的变异百分率见表5。
3 讨论
3.1 从各比对项目来看,我室ACT和F820两台测试仪器中,ACT和比对仪器有较好的符合性,一般在临床应用上可以相互替换,但是在某些较低值时,见表4,WBC
3.2 F820的实验结果就不尽人意了,可能是年代久远的缘故(使用了8年),WBC在高于5.39×109/L时结果就会超过允许误差,分区段计算的结果,见表5,也显示在高值时的变异百分率8.87也超过5%,此外HCT和PLT也存在着较大偏差,需检测一下F820的WBC、PLT、HCT的检测系统,其中HCT有一定的影响,PLT在
3.3 在做相关分析时,相关系数R均大于0.99,见表3,但是利用回归方程计算有效检测范围和高中低区段计算时仍有超出允许误差的现象出现,此前有相关报道只利用相关系数来判定两仪器的测定结果是否可以互换使用,这是不行的。所以在此次实验中选用了这种方法来比较结果,可能会更准确一些。
血细胞分析仪范文4
血细胞分析仪具有快速、方便、重复性好、工作效率高等优点,但是由于自身检测原理的限制以及血小板易于粘附、聚集、破坏等特点,血细胞分析仪测定血小板时常常会出现假性减少现象,这是临床经常反映的问题。假性血小板减少如不及时纠正会给临床医生误导,有时会引起医疗纠纷。因此,必须重视和纠正这样的情况。现就血细胞分析仪计数血小板假性减少原因,分析报告如下。
1 采集血液标本不顺利造成
采血过程影响血小板计数的准确性,采血速度和出血是否顺利是保证血小板数目准确的关键。手指采血时若方法掌握不当,如采血速度慢、出血不畅、挤压采血部位等,都会造成假性血小板减少。静脉经多次穿刺而引起的水肿及皮下出血时,因组织损伤,组织凝血因子混入血液标本中产生肉眼看不见的小凝块,是造成血细胞分析仪计数血小板出现假性减少的常见原因之一,所以对血小板减少患者应注意阅片,必要时重新采血。
2 标本放置时间不足造成
在实际工作中,采取标本后立即进行检测,有时会出现血小板计数假性减少现象。这是由于血小板离体后,其形态立即发生变化,其外膜形成的微小管游离端向外伸展,从而在血小板周围形成丝状伪足,数个这样的血小板伪足相互缠绕,形成血小板可逆聚集体,其体积一般和淋巴细胞大小相似。由于这种血小板不被溶血剂溶解,故而使血小板计数暂时减少,随着时间的延长,这种假性聚集发生一定程度的解聚,所以,为了提高准确性,建议在采血后放置15~20min再测定可得到准确结果。
3 计数血小板方法学的缺陷造成
自动化的血液分析仪,无论是阻抗法还是光散射法,对于血小板数及形态正常的标本,结果一般比较可靠,但是对于血小板明显减少和/或形态异常者,所得结果误差甚大,有时甚至难以计数。其原因是:这些方法基本上都是依据细胞的大小进行区分和计数的,而正常人的血小板体积相差甚大,可自2fl至20fl以上,其体积分布直方图不是对称的,而是明显地向右延伸,即都存在一定数量的大血小板。在病理情况下,大血小板会更多地增加。由于大部分血液分析仪不能将大血小板与小红细胞等分开,致使许多大血小板被当成红细胞而未计入血小板总数中,从而使血小板计数结果偏低。
4 抗凝剂EDTA的影响造成
有极少数人的血小板在用EDTA抗凝时,反而会出现血小板聚集,这种EDTA依赖性假性血小板减少可能与血浆中存在的抗血小板抗体和/或抗心磷脂抗体等自身抗体有关,但无任何病理、生理意义,也与特殊药物使用无关,多发生在肿瘤患者、自身免疫病、肺心病、晚期孕妇、肝病、毒血症等疾病,此现象是其他疾病发生的伴随现象。
5 药物的影响
长期使用某些药物如:地高辛、双氢克尿塞、甲基多巴、青霉素等,引起血小板减少;使用促凝药物后如:VK、VK3、止血敏等,当药物过量或某些患者对这类药物较为敏感时,也可发生血小板聚集。这些药源性的血小板减少常要在停药15~20天后可恢复。
6 输血的影响
大量的输入血液制品时会引起血小板减少。这种情况多在4~6天后恢复正常;此外,某些患者在输血后一周左右,出现血小板计数明显减少,这是因为患者对外源性血小板抗原产生同种免疫,再次输入相应的血小板后产生血小板特异性抗原―抗体复合物,使输入的血小板受到破坏,也使患者自身血小板破坏,引起血小板的明显降低[1]。
7 治疗方法的影响
有些治疗方法对血小板的计数也会产生较大影响如血液经光量子血疗仪照射后,血小板计数明显减少,经电镜观察发现,照射后的血小板形态不完整,形成大量的伪足及血小板碎片[2];此外,肿瘤患者化疗前后血小板数量有显著差异,呈现先低后逐渐增高至化疗前水平。
8 疾病的影响
高胆固醇和高三酰甘油血症时,血小板聚集性增高,部分患者可以引起假性血小板减少;老年人由于动脉粥样硬化而导致的血管壁粗糙及血液粘稠度较高,出现血小板聚集,部分患者引起假性血小板减少;部分肺部疾病及产妇或待产妇、烧伤患者等均可出现血小板聚集,尤其是慢性肺心病患者,其体内的血小板被激活,使血小板黏附、聚集、稀释等功能增强。
综上所述,血细胞分析仪计数血小板具有快速、简便、重复性好等优点,然而,血小板易于粘附、聚集、破坏等诸多因素,常常造成血小板计数假性减少,从而给临床准确诊断疾病带来困难。针对此种情况,在实际工作中,要排除一些干扰因素,以便准确测定混有大血小板、血小板聚集等异常血液标本的血小板数,进一步保证异常血液标本中血小板检测结果的准确性,为临床提供可靠的诊疗依据。
【参考文献】
血细胞分析仪范文5
[关键词]血细胞分析仪;血小板计数;影响因素
[中图分类号]R446[文献标识码]B[文章编号]1673-7210(2007)02(b)-068-02
COULTER STKS系列血细胞分析仪是利用电阻抗原理计数血小板,其临界值为2.0~20.0 fl,而对其临界值以外的血小板则根据正常人血小板体积正态分布的理论,通过0~70 fl的电子拟合曲线,将这些异常大小的血小板估计计入。由于具有快速、方便、重复性好、工作效率高等特点,COULTER STKS系列血细胞分析仪已被医院检验科广泛使用。但由于各种原因造成血小板检测结果假性减少的情况时有发生。本文将对工作中造成血小板计数假性减少的原因进行探讨。
1 材料与方法
1.1 材料
1.1.1 仪器COULTER STKS 全自动五分类血细胞分析仪,Olympus双目显微镜,EDTA-K2真空抗凝管。
1.1.2 试剂仪器进口配套试剂,草酸铵稀释液(按《全国临床检验操作规程》配制)。
1.1.3 标本2006年3月~5月本院住院患者血常规检验标本120例,门诊标本80例。
1.2 方法
对200例病人标本分别于0、15、30、60、120 min进行机测,观察结果的变化;根据血小板直方图电子拟合曲线的情况,分别进行手工计数作比较。
2 结果
正常情况下,血小板计数仪器法与手工法结果一致[1]。
但在不同混匀时间的情况下,血小板两种方法测定的结果有所差异,且在0、15 min仪器法与手工法比较差异明显;另外,0、15、120 min仪器测定的结果与30、60 min测定的结果亦有显著性差异(表1)。
表1直方图出现电子拟合曲线的标本不同混匀时间两种方法测定结果
仪器测定血小板时,血小板直方图通常情况下会出现一条拟合曲线。当血液中血小板形态异常时,直方图中并未出现拟合曲线,此时血小板计数仪器法与手工法比较有明显差异(表2)。
表2直方图未出现电子拟合曲线的标本不同混匀时间两种方法测定结果
3 讨论
3.1 一定浓度的EDTA-K2作抗凝剂络合了血液中的钙,使血液抗凝。血液标本与抗凝剂混匀时间对结果影响很大。EDTA-K2会使血小板形态发生变化,其外膜形成的微小管游离端向外伸展,从而在血小板周围形成丝状伪足,数个这样的血小板伪足相互缠绕,形成血小板可逆聚集体,由于仪器只识别颗粒大小而不区分颗粒性质,且血小板与红细胞计数在同一通道进行,致使这些血小板被误认为是小红细胞而不纳入血小板计数范围,这就是血小板混匀时间在0、15 min仪器法较手工法显著偏低的原因。随着时间延长,EDTA能使血小板由盘状变为球状,血小板伪足回缩到胞质内,相互缠绕的血小板解散[2],血小板的计数较0、15 min的测定值高。实际操作中,由于急需报告而使待测时间缩短,往往导致血小板结果偏低。而血标本混匀超过60 min后,血小板会因离体时间太长,发生变形、自溶、体积变小,或黏附聚集和破坏,致使计数减少。所以,血小板测定的最佳时间为抽血后30~60 min,而且最迟应在120 min内完成,以避免由于混匀时间过短或过长导致血小板假性减少的情况发生。
3.2 表1与表2比较结果显示,171例标本仪器法与手工计数结果大致相符,血小板直方图形状正常,有明显的主峰;29例结果仪器法与手工计数结果则有明显差异,血小板直方图有多峰出现,分布低而宽,部分图形尾巴上翘。这是因为采用电阻抗原理计数血小板的COULTER STKS系列的血球仪,为防止20 fl的小红细胞及其他细胞干扰,仅将2.0~20.0 fl血小板直接计入,而对其临界值以外的血小板则无法通过直接计数计入,只能根据健康人血小板体积符合正态分布的理论,通过0~70.0 fl的电子拟合曲线,将这些异常大小的血小板估计计入,由于仪器受此原理的限制,仅能对体积呈正态分布的血小板进行计数[3]。当样本中以大型或小型血小板为主时,由于临界值的限制,直方图均未出现拟合曲线,检测过程中漏掉了部分异常大或异常小的血小板,造成仪器计数血小板准确度差,血小板假性减少。因此,需进行手工计数复查。
血小板为多功能的细胞,易于黏附、聚集和破坏,测定时受诸多因素影响,正确掌握测定时间和观察直方图,必要时以手工复查,这样才能得到可靠的数据,指导临床的正常诊断与治疗。
[参考文献]
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[3]陈风.血小板计数假性减低的原因及排除方法探究[J].现代检验医学杂志,2006,21(1):78.
血细胞分析仪范文6
[关键词] 全自动血细胞分析仪;镜检;复查
[中图分类号] R197.39[文献标识码] B[文章编号] 1673-7210(2010)04(b)-109-03
全自动血细胞分析仪目前已是国内外临床检验最常用的筛检仪器之一,与传统方法相比,有着精度高,速度快,易操作,功能强的强劲优势,尤其是现有先进血细胞分析仪(如Sysmex XE2100和贝克曼库尔特LH755)不仅应用多项检测原理对各项血细胞检测参数进行分析检测,而且可与血涂片制备和染色仪有效结合,进而为临床不同层次需求提供更有效、精确的血细胞检测参数,对疾病的诊断与治疗有着重要的临床意义。但是,即使再先进的血细胞分析仪也存在着自身无法弥补的缺陷,因此血细胞镜检和其他手工复检还是有必要的。只有全自动血球分析仪和血细胞镜检有效结合才能达到更完美的目的,进而使全自动血细胞分析仪的检测结果更有临床实用价值。
1 全自动血细胞分析仪在临床应用中的优点
1.1 全自动血细胞分析仪的功能
现代血细胞分析仪除拥有一般三大功能(①全血细胞计数功能;②白细胞分类计数功能;③血细胞计数和分类功能的拓展功能,包括:有核红细胞计数;网织红细胞计数及其相关参数检测;未成熟粒细胞,幼稚粒细胞,造血干细胞计数;未成熟血小板比率;淋巴细胞亚型计数;血细胞免疫表型检测等)外,其还可得知以往手工常规检查无法检测的参数,进而为临床诊疗提供更有价值的实验依据。
1.2 全自动血细胞分析仪的优点
在正常生理状态下,血常规检查时,现代血细胞分析仪各项性能评价均在可接受范围内,且其检测速度快、精度高、准度够,所以现代血细胞分析仪(仪器法)是目前国内外公认的血常规筛查手段。
1.2.1有学者报道,其以手工镜检结果为准,利用雅培CD3700型全血细胞分析仪对医院常规标本进行测定并对检测结果进行统计分析,研究表明 CD3700 分析仪对形态异常细胞检测功能的特异性为77%、敏感性为100%,检出有效率高达83.7%。CD3700型全自动血细胞分析仪是应用多种原理、多角度对各血细胞参数进行分析的五分类血细胞分析仪,其对血细胞的检测具有良好的技术性能,对形态异常细胞提示的敏感性高,重复性好。适用于常规标本的血细胞分析筛查。
1.2.2有资料表明,贝克曼库尔特(BECKMAN COULTER)全自动5分类血球分析仪(5DF)可用于一般标本常规检查的筛查方法。研究者通过其与瑞氏染色镜检相比较研究,得出5DF血细胞分析仪对中性粒细胞、嗜酸、嗜碱性粒细胞和淋巴细胞分类计数无明显差异(均P>0.05),仅单核细胞分类计数仪器法比镜检法结果偏高(P
1.2.3有学者用迈瑞BC-5500全血细胞分析仪与现代先进Sysmex XE2100全自动血细胞分析仪作对比分析表明,二者各参数相关性良好,即二者性能相当。同时,迈瑞BC-5500全血细胞分析仪的批内、批间精密度及总精密度变异系数(CV)值均在可接受范围内;且各分析参数的携带污染率小于0.5%。经试验表明,迈瑞BC-5500全血细胞分析仪可用于日常标本筛查检查。
1.2.4目前,血细胞分析仪有三分群和五分群之分,不仅五分群血细胞分析仪性能良好,三分群血细胞分析仪的性能也很优良。相对而言,三分群血细胞分析仪标本用量少,尤其适用于儿童末梢血的检测分析。相关资料表明,三分类雅培CELL-DYN1800全自动血细胞分析仪各种参数性能评价良好,测定参数快速,线性范围宽,准确度,精密度良好,各参数的携带污染率小于1%,线性范围相关系数(r2)>0.99,准确性的偏离指数(DI)
1.3 全自动血细胞分析仪的拓展应用
现代先进血细胞分析仪拥有幼稚细胞检测通道,在一定范围(1~1 600)×106/L内,可精确地对造血干细胞计数,且其检测结果与流式细胞术检测无明显差异。有资料表明,某些先进血细胞分析仪(Sysmex XE2100)能快速、高效地检测出外周血、脐血和采集物中的造血干细胞,且具有方便快捷、标本用量少(约60 μl)、检测时间短(75 s)、花费少等优点。所以,应用自动全血细胞分析仪来检测造血干细胞,在外周血造血干细胞最佳采集时机的快速判断、干细胞成功采集的预测和白血病患者造血功能恢复观察等方面,具有良好的临床应用价值。
2 全自动血细胞分析仪在临床应用中的缺点
虽然,全自动血细胞分析仪拥有众多的优势,但是在实际工作中,其也存在着致命的弱点。
2.1全自动血细胞分析仪的白细胞分类
因为三分群血细胞分析仪主要利用电阻抗法对血细胞参数进行检测分析,所以其存在着分类不精准的缺点,尤其是对中间型细胞群异常时的检测及结果有所出入。有众多资料表明,三分群ABX MRCRO S60 血液分析仪和三分群CD1800型全血细胞分析仪对儿童血标本进行检测,并同时用手工染色镜检进行对比分析,研究表明,当血细胞分析仪(三分群)检测的白细胞分类(中间型细胞群)为10%以上时,均应做瑞特染色的人工镜检复查,以防止幼稚细胞,异型淋巴细胞,嗜酸性粒细胞等病理性细胞漏检。
2.2全自动血细胞分析仪的复检体会
即使再先进的五分群血细胞分析仪也存在着一定的假阳性率和假阴性率,尤其是随着医学检验的崛起和发展,血液学和血液学检验创建了一个理论-检验-疾病相互结合,紧密联系的新体系,且在实践过程中不断发展完善和提高。所以对临床血液学常规筛查也提出更高的要求。
2.2.1实验室数据表明,根据实际情况制订血细胞分析仪复检规则,则可在保证工作量适宜的情况下,提高其检测准确率。在一定程度上可降低漏诊率和误诊率。有学者报道,根据Sysmex XE2100血细胞分析复检制定协作组的23条复检规则和涂片阳性规则,对检测结果进行统计分析表明,复检率为15.27%,假阳性率6.70%,假阴性率1.86%。Sysmex XE2100血细胞分析仪白细胞复检规则能有效提高检测准确率,防止漏诊和误诊。因此各血常规室根据实际情况制订自己相应的复检规则,可有效降低漏诊率和误诊率。
2.2.2有些学者,将Sysmex 1800i与血涂片检查进行对比分析,参照国际血细胞复检相关条款,并对检测结果进行分析,得到复检率25%,假阳性率为20.4%,假阴性率为1.1%。说明虽然Sysmex 1800i及类似五分群机型,血细胞形态血检查,在血常规分析中具有十分重要的意义,但是仪器法检测的方法学具有局限性,对于形态结构异常的细胞不能作出准确的判断和定位。一旦仪器检查提示异常应及时涂片复查,以保证检验结果的准确性和可靠性。
2.3全自动血细胞分析仪的局限
无论三分群血细胞分析仪还是五分群血细胞分析仪都存在着一定的局限性(不能对血细胞形态学改变做出准确检测)。所以在临床工作中,由于忽视了血细胞的形态学分析,就已造成漏诊,甚至误诊的现象。有学者利用临床实例证实:仪器分类法不能将患者外周血形态异常的特征表达出来,故若将仪器的分类计数结果报告临床,则易漏掉重要的诊断信息。对于血象有变化的病例,有其是血细胞分析仪提示异常的病例,若不做镜检复查,则会漏诊、漏检的现象。
2.3.1白细胞形态的改变:外周血出现幼稚粒细胞,核左移(中性杆状核粒细胞比例增高),核右移(中性分叶核比例增高)嗜酸或嗜碱性粒细胞增高,中性粒细胞毒性病变,异型淋巴细胞等。
2.3.2红细胞形态的改变:外周血出现有核红细胞,成熟红细胞大小不等(RDW增高)中心淡染,点彩红细胞,球形红细胞,泪滴样红细胞,红细胞呈缗钱样排列。
2.3.3血小板形态改变:EDTA依赖性假性血小板减少,血小板大小不等(PDW增高),血小板聚集、堆积和发生卫星现象使全自动血分析仪不能确认血小板而使血小板计数减低。
2.3.4 其他:肿瘤细胞及寄生虫等。
总之,在临床实际工作中不能只为了达标而提高镜检率,镜检标本的确定一定要依据临床实际情况和血细胞分析的提示,两者结合起来考虑,不能仅依赖于血细胞分析的提示作为镜检标本的筛选条件,部分异常形态,比如异常红细胞形态,粒细胞中毒改变,血小板的形态异常等都是仪器无法提示的。
3 讨论
现代血细胞分析仪主要综合应用了电学(电阻抗法及射频电导法)和光学(激光散射法及分光光度法)两大原理,用以测定血液有形成分(细胞)和无形成分(血红蛋白)。目前电阻抗法是三分群血液分析仪的主要原理。现在市面上的血细胞分析仪有很多种,但其检测原理不尽相同:白细胞系列参数检测原理主要有5种方法,即:①体积、电导和光散射(VCS)法。②流式细胞术、电阻抗、射频和特殊细胞染色法,其有3个检测通道(4DIFF通道、WBC/BASO通道和未成熟粒细胞信息IMI通道)。③钨光源、激光散射法,其有过氧化物酶(Pero)通道、嗜碱性粒细胞/核分叶性通道和未染色大细胞计数(LUC)检测通道。④多角度偏振光散射法(MAPSS)应用固体激光流式细胞荧光技术多角度检测白细胞和分类。⑤双流体(双鞘流)动力连续系统(DHSS),其有白细胞计数通道、嗜碱性粒细胞通道和白细胞分类通道来检测白细胞和白细胞分类;成熟红细胞系列检测原理主要有4种方法,即:①电阻抗法。②流式细胞术、鞘流电阻抗法。③流式细胞术激光散射法。④电阻抗法和光散射法。血小板系列参数检测原理有4种方法,即:①电阻抗法。②流式细胞激光核酸荧光染色和电阻抗法。③激光散射法。④固体激光散射法、电阻抗法和单克隆抗体荧光染色散射法。血红蛋白浓度测定检测原理主要有2种方法,即改良氰化高铁血红蛋白法和非氰化高铁血红蛋白法。网织红细胞系列参数检测原理主要有2种,即非荧光染料染色法和荧光染料染色法。有核红细胞系列参数检测原理主要有4种,即:①VCS法。②流式激光/荧光染色法。③白细胞计数和分类通道衍生法。④阻抗法和噻唑橙荧光染色流式细胞术。
虽然现代血细胞分析仪的功能及检测原理都在不断完善和提高。但是,我们必需强调在临床工作中复检的重要性。因为不同地理环境、不同检测人群间,存在个体及群体差异,所以每个血常规室应根据自己实验室的具体情况制订相应的血细胞分析仪复检原则,但是在临床实际工作中,我们不能只为了达标而一味提高镜检符合率。镜检复查标本的确定一定要依据临床实际情况和血细胞分析仪的提示,两者结合起来考虑。
随着循证医学的不断完善,根据循证医学原则,我们应该用当前最好的检测技术、质量控制体系和临床实践成果,对血液分析仪检测结果进行严格评价,才能使血液分析仪为临床提供最有价值的检测证据。
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