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直播营销的意义范文1
2016年4月15日下午14:00,华为P9在天猫直播进行了一场声势浩大的新品会,并请来了明星主持李艾,超人扮演者亨利卡维尔阵助阵。他们的到来给这场科技秀增添了些时尚的味道。华为P9作为首款冠以徕卡名号的智能手机,它的成像效果并没有让观看直播的消费者失望,尤其是那些爱好自拍、摄影的用户看完之后,都纷纷在直播主页面上留言互动,并表达了想要购买的意向。这时,消费者只要点击直播页面右侧的购物车标志,就可一键直达提前预售页面,完成新机预购。在看的同时,消费者还能参与到粉丝有礼、摇一摇抽奖等活动中,让观看直播的消费者不仅能看,还能玩。
当然作为一场手机的新品会,一定会有用户问到一些有关手机的专业问题。比如在直播中,就有消费者提问“国内版本P9相比国际版,会有哪些不一样?”与线下做新品会不同的是,品牌方在第一时间就给出了回答,而且对其他诸多问题都一一给予了回复。
“直播最大的优势就是可以快速的聚粉、沉淀和互动,然后进行二次营销。直播的另一大优点是它可以和售卖同时进行。”芳菲说,以往很多品牌每年都会策划几场新品会,但它并不能很有效的带动销售,因为线下营销和线上购买是脱节的。这是很多品牌会遇到的问题。但是在天猫直播中就可以实现“边看边买”,实现线上线下的即时互动。
而“边看边买”技术是天猫技术团队自己研发的。它指的是,在消费者观看视频的时候,主播会随机商品,并推荐媒体、达人对商品的介绍、评测,用户在不中断视频的过程中就能完成添加购物车、付款流程。品牌商家通过直播向用户推荐商品,相较于通过硬广、图文推荐来说,这样的购物体验不再是冰冷的货架,或者是单品推荐,而是丰满的内容型商品推荐。
为华为P9做直播,是刚成立两月的天猫直播所做的100场直播中的其中一场。在天猫直播还在测试时期,它就为玛莎拉蒂做过直播,并且成功的通过这个渠道卖出了一台,价值99.98万。这是天猫直播迄今为止,卖出的单价最高的商品。此外,天猫直播服务对象还包括苹果、美宝莲、花印、日韩跨国直播theface shop、卡西欧、精工、西铁城、papi酱直播、DW、李维斯、罗辑思维读书会、北京车展、湖南卫视电视节目同步直播、戛纳电影节、杜蕾斯真人秀等大型、跨国品牌直播。
直播营销的意义范文2
在SNS上,用户需要向对方发出添加好友的请求,而且必须经过对方的认证才可以成为好友,进而获得浏览对方主页的权利。这样虽然保护了用户的隐私,但是也限制了信息的广泛传播和交友圈的扩大。用户之间一旦成为好友,双方的权利是平等的、相互的,其动态可以实现即时相互传播。这与博客、微博等其他媒介有显著的区别。它们没有隐私设置,用户可以随意浏览他人的主页,因此一般为单向传播。以微博为例,在微博上可以出现A关注B、而B不关注A的情况,这样B的动态可以传播给A,而A不可以传播给B。在这种传播模式中,只能是一方接收到另一方的信息,而不能反向传播。
二、中国社交网站的经营管理模式分析
中国的社交网站经过近十年的发展探索,初步形成了六种主要的经营管理模式。
(一)广告模式
社交网站凭借海量而多样化的用户群体,可以搭建良好的网络广告平台,帮助企业促进产品销售、提升品牌影响力。社交网站拥有用户的姓名、性别、年龄、所在地、教育背景、职业、联系方式等个人资料,可以充分利用这些资源发展分众广告。此外,社交网站的群组功能和关系网络能够将海量用户细分为若干群体,广告主可以定位到目标受众,确保广告的精确传播,其良好的广告效果是传统媒体所无法比拟的。社交网站的社交性又使其成为口碑营销的温床,品牌广告可以通过分享、转发等功能迅速传播给更多的用户,进而通过口碑效应促进该品牌的广泛传播。SNS广告具体包括以下几种形式。一是在首页的背景栏及两侧刊登传统的文字图示广告。二是植入式品牌广告。将品牌和网站的某些应用、服务相结合,让用户在潜移默化中强化对该品牌的印象。例如,将优乐美奶茶包装为“暖心奶茶”,作为礼品互赠。[6]三是与品牌商合作开展互动营销广告。“公共主页”已成人人网等社交网站的营销平台之一,广告主可以通过创建公共主页进行营销。例如苹果学院,通过将企业品牌或产品与用户结成好友的方式,开展互动沟通,吸引潜在消费者。
(二)电子商务模式
企业可以利用SNS平台管理客户群,在细分目标的市场开展电子商务。社交网站可以帮助销售人员找到合适的社会关系,然后通过网络口碑方式开展营销活动。社交网站是用户人际关系的集成,用户根据各自的好友来源、兴趣爱好等对自己的关系进行分类,并在共同需求的基础上形成关系圈。社交网站能提供关系的查找和匹配功能,这样商务信息就可以有的放矢地传播给目标受众。社交网站的群组是各种社区圈子———例如驴友群、留学生群、球迷组织等,企业可以根据产品特征在各社区圈子进行有针对性的营销活动,开展B2C和C2C交易。[7]
(三)增值业务模式
社交网站可以推出各种增值业务,实现网站盈利。具体有以下几种形式:1.推出VIP会员服务,VIP用户必须付费使用,享有个性主页定制、赠送虚拟礼物、增加好友数量上限等高级功能。2.创建收费“礼品”系统,采用向厂商、用户双向收费的盈利模式,通过与“百事”、“肯德基”等品牌合作,获得网络广告收入。3.创建开放平台,参与第三方应用分成。社交网站的应用一般都外包给第三方团队开发,并允许其在插件中植入广告。第三方插件通过广告或销售虚拟道具获得收入后,按比例与社交网站进行分成。4.其他增值业务,如主页装扮等。
(四)社交游戏模式
游戏是SNS用户使用较多的功能,也是其盈利的重要途径。社交游戏的运营商通过销售虚拟道具与植入式广告,借助社交网站的海量用户平台,可以获得丰厚的利润,聚集人气。而社交网站也根据协议,与运营商按比例进行分成。例如,曾经红极一时的社交游戏“开心农场”,使得“偷菜”成为当时很多网民的重要娱乐活动。
(五)与手机厂商合作的模式
目前,苹果、三星、摩托罗拉等手机厂商都已经内置了社交网站客户端应用(App),或者通过开放接口实现了社交功能的无缝接入。很多厂商在手机硬件、软件设计之初,都会将社交网络服务列入必备服务,手机在底层数据处理时就在契合社交网络,从而保证了用户能顺畅地浏览社交网络。此外,许多社交网站运营商也已经推出基于iPhone、Android、Symbian等系统的客户端软件。社交网站的运营商已开发出SNS移动终端特有的功能和应用,满足手机用户的各种需求。[8]
(六)与其他网站数据互通的模式
大型社交网站已经与很多网站实现账号互通,只需一个账号就可以登录这些网站。用户可以将其他网站的内容分享到个人的SNS主页上,还可以通过SNS浏览外部资源后进入原始网站浏览更详尽的一手信息,实现资源共享。这样不仅为社交网站提供了更加丰富的内容来源,更好地满足用户的多种需求,而且促使其他网站的内容借助SNS实现更广泛的传播,从而提升二者的影响力。例如,人人网已经通过“人人连接”技术与“56网”、“MSN”、“大众点评网”等网站合作,实现数据互通。其用户可以通过人人网账户登录这些网站,还能够联系已经在这些网站上的人人网好友,同时也可以邀请其他好友浏览该网站或成为注册用户。
三、结语
直播营销的意义范文3
无论你是推广营销中的大咖还是草根,对于微博营销我想大家都应该怀着一份谦卑的心态去对待,因为在我看来,微博营销的确没有前些年那么好做,但是微博营销并没有到那种一无是处的时候,因为时间的沉淀让微博营销慢慢褪去浮夸留下光芒,与此同时,一些价值点不断被显现出来。
价值点一:用户不断被过滤,留下的都是精粉
微博用户在这些年的确削减了很多,而这也成为了一些喷子的槽点。但是盲目的将用户数量与推广效果划等号显然并不合适。要知道经过这些年的沉淀和过滤,现阶段微博留下来的用户都是活跃程度较高的精粉,他们在微博上主动制造和分享内容,他们的存在对于推广营销来说非常有必要。而且有一点需要说明,官方微博在目前的媒体传播中仍然占有极高的权重,而且这种权重随着时间的推移反而变得更加有分量。单单这点就能说明即便在新兴媒体不断产生的今天,微博信息的正规化、透明化仍然被大家认可,它的价值仍然存在。门外汉只知道微博用户减少,却不知道精准性的提升对于微博来说反而是一件好事。以往多余冗杂的用户群体对于微博来讲并不利,它对于整个产品环境的发展有较大的阻碍。而现在这些忠实粉丝和较高的市场参与认知度都是微博下一阶段实现自我超越的根本所在。
价值点二:明星效应越发强大
说道微博营销推广作用,就不能不提明星效应。这种明星不仅是指具有较高社会知名度的艺人,也包括一些大号资源。毕竟我们都知道做营销推广,引导关注力是一项非常有必要的前提,而明星关注微博,粉丝会因为爱屋及乌,顺带关注上明星账号提到的账号,而这就是一种带动性作用,对于推广而言,非常有必要。如果一个营销者能够通过明星效应来自由组织和传播主题产品,或者是利用有名气的官微进行正面报道,那么对于产品价值观的树立可以说是全方面的。之前李冰冰发文诉澳囧经历,不就是短时间内在微博中火热传开了,大家都为冰冰的病情担忧,而这就是明星效应的一个形象的阐述,如果各位真的拥有十万级别的账号,那么那个时候你就会真切体会到来自微博大号的推广红利。
价值点三:微博营销穿透力远胜其他产品
在这点上我想问下大家,对于微信大家都说好,都说有用,可是到底哪里有用,各位心里清楚吗?或许大家只是知道微信营销现在好多人讲,但是具体操作各位心里并不清楚。其实在我看来,论信息传播的穿透力,谁都比不上微博。为什么这么说,因为微博可以在不需要关注的情况下,可以@某某就知道内容了,这种无意识的传播很有穿透力。在微博营销中,信息的传播途径是透明的,也是可靠的,在这个过程中,很多时候内容是没有水分的,用户自己既是参与者,也可以是关注者,无形中就保证了内容传递的完整性。而且微博营销短小精悍,受到文字方面的约束,操作和阅读起来都是很方便的,通过营销的穿透力,将微博打造成自媒体的团队也是日益增多,这点说明了微博营销的价值正在步步发扬出来了。
直播营销的意义范文4
【关键词】 阻断 乙型肝炎病毒;宫内感染;乙肝免疫球蛋白
全球乙型肝炎病毒表面抗原携带者大概有4亿多人。我国就占1.3亿,其中有半数以上是母婴传播所致。接种乙肝疫苗使我国儿童的表面抗原携带率已从9.8%下降到1.3%。但是,乙肝疫苗不能阻断母婴传播中大概10%~20%的高危婴儿,这些所谓的高危婴儿阻断失败的原因,主要是由于宫内感染所造成的。因此,阻断HBV宫内感染是阻止母婴垂直传播及控制乙肝流行的主要环节,我们采用乙肝免疫球蛋白注射来控制乙肝宫内传播,获得了明显效果。
1 资料和方法
1.1 一般资料 选择2004年10月至2006年10月期间在我院门诊和一厂医院妇产科就诊的HBsAg和(或)HBeAg阳性的孕妇80例。将其分为用药组42例,未用药组38例。
1.2 方法 用药组孕妇指导其在孕28、32、36周分别在三角肌内注射乙肝免疫球蛋白200 U,未用药组孕妇仅常规产前检查及监护。最后通过观察新生儿和孕妇血清乙肝病毒标志物来评价干预效果。孕妇采分娩前静脉血2 ml,新生儿采脐静脉血2 ml,检测乙肝病毒标志物(HBVM)(ELISA法,试剂由上海科华有限公司提供)。
2 结果
用药组42例孕妇分娩出的新生儿有3例HBsAg阳性,未用药组38例孕妇所生新生儿有14例HBsAg阳性,并且用药组孕
妇HBsAg滴度及HBV-DNA水平较用药前明显下降。
3 讨论
直播营销的意义范文5
[关键词]小檗碱; 胰岛素抵抗; PPARγ; 脂肪细胞因子; 微滴数字PCR(ddPCR)
[Abstract] Adipocytokines are closely associated with insulin resistance (IR) in adipose tissues, and they are more and more seriously taken in the study of the development of diabetes. This experiment was mainly to study the effect of berberine on mRNA expression levels of PPARγ and adipocytokines in insulin resistant adipocytes, and investigate the molecular mechanism of berberine in enhancing insulin sensitization and application advantages of droplet digital PCR (ddPCR). ddPCR absolute quantification analysis was taken in this experiment to simply and intuitively determine the appropriate reference genes. ddPCR and quantitative Real-time PCR (qPCR) were used to compare the effect of different doses of berberine (10, 20, 50, 100 μmol・L-1) on mRNA expression levels of PPARγ, adiponectin, resistin and leptin in IR 3T3-L1adipocytes. Antagonist GW9662 was added to study the inherent correlation between PPARγ and adiponectin mRNA expression levels. ddPCR results showed that the expression level of β-actin in adipocytes was stable, and suitable as reference gene for normalization of quantitative PCR data. Both of ddPCR and qPCR results showed that, as compared with IR models, the mRNA expression levels of adiponectin were decreased in the treatment with berberine (10, 20, 50, 100 μmol・L-1) in a dose-dependent manner (P
[Key words] berberine; insulin resistance; PPARγ; adipocytokines; droplet digital PCR (ddPCR)
doi:10.4268/cjcmm20161103
近年来临床调查发现我国18岁以上糖尿病患者多达1.139亿[1],控制血糖是防治糖尿病的关键。中药临床辨证治疗,黄连为主要的系列经方广泛用于糖尿病发生发展和不同阶段。小檗碱是从黄连中分离出的一种异喹啉生物碱,临床研究显示小檗碱能显著降低糖尿病患者的体重和血糖血脂及炎症因子,提高脂联素浓度,降低瘦素水平,改善胰岛素抵抗(IR),疗效显著且安全性较高[2-3]。动物实验研究表明小檗碱能提高胰岛素受体的表达、促进糖酵解、增强胰岛素敏感性、促进胰岛素的释放与分泌,具有良好的降糖效果[4-5]。小檗碱改善IR的机制研究有助于指导其在糖尿病上的临床用药。本实验摸索建立稳定可靠的IR模型,确认各剂量小檗碱降糖药效的基础上对不同剂量小檗碱对IR脂肪细胞PPARγ及脂肪分泌因子mRNA表达进行研究。考虑到瘦素和抵抗素的低丰度表达,本实验采用最新的微滴数字PCR (ddPCR)和荧光定量(qPCR)方法,比较检测不同剂量干预下各组PPARγ和脂肪分泌因子mRNA表达变化差异。
1 材料
Nanodrop 2000核酸蛋白测定仪,ABI 7500型Real-time PCR仪(美国Thermofisher公司);QX200微滴式数字PCR系统(美国Bio-Rad公司);Eppendorf 5424R型冷冻离心机(德国Eppendorf公司);Spectra Max Plus384全波长酶标仪(美国 Molecular Devices公司)。
盐酸小檗碱(中国食品药品检定研究院,批号110713-201212);罗格列酮,GW9662,地塞米松,IBMX和胰岛素购自Sigma公司(批号分别为122320-73-4,BGBC1877V,D8040,STBC7632V,I5500);TNF-α(Protech公司,批号070473);高糖DMEM(Hyclone公司,批号1280);新生牛血清(浙江天杭生物科技有限公司,批号140625);胎牛血清(全式金生物科技有限公司,批号G20701);Trizol和PureLinkTMRNA Mini Kit ( Life Technologies公司,批号分别为74121,1502889A);GoScriptTMReverse Transcription System (Promega公司,批号000013889);DNase-free water (Qiagen公司,批号129115);Power SYBR Green PCR Master Mix和Taqman Gene Expression PCR Master Mix,FAM标记探针引物PPARγ,脂联素,抵抗素,瘦素,β-actin,GAPDH,α-tubulin购自Life Technologies 公司(批号分别为1408467,1402193,1272571,1270795,1279888,1390158,1274427, 1293520, P140417-001A10);ddPCRTMSupermix for Probes和droplet generation oil for Probes购自Bio-Rad公司(批号分别为186-3010,186-3005)。
3T3-L1 细胞(小鼠胚胎成纤维细胞)由中国科学院细胞库提供。
2 方法
2.1 3T3-L1细胞培养 按照参考文献[6]方法,将处于对数生长期的细胞消化后,用含10%新生牛血清的DMEM培养基调整细胞浓度为6×107个/L,接种在24孔板上,每孔接种1 mL。待细胞生长至完全融合,将培养液换成含10%胎牛血清、0.5 mmol・L-1 3-异丁基-1-甲基黄嘌呤(IBMX)、10 mg・L-1胰岛素、1.0 μmol・L-1地塞米松和2 μmol・L-1罗格列酮的高糖DMEM培养基,3 d后换用10 mg・L-1胰岛素、10%胎牛血清的高糖DMEM培养2 d,之后每2 d换用含10%胎牛血清的高糖DMEM,诱导分化10 d左右的3T3-L1细胞90%呈脂肪细胞表型,细胞内可见明显脂滴,油红O染色法鉴定[6]。
2.2 IR模型制备及给药方法 将分化诱导成功后的脂肪细胞分为对照组和模型组,对照组加正常培养基,模型组加入含1.0 μmol・L-1地塞米松的培养基,用葡萄糖测定试剂盒检测诱导24,48,72,84,96 h细胞外液中的葡萄糖量,选择正常组和模型组细胞葡萄糖消耗差值最大的时间为诱导最佳建模时间,并进行后续给药实验。
2.3 给药分组及药效试验 将分化成熟的脂肪细胞分为9组,分别是空白组,模型组(IR组),10,20,50,100 μmol・L-1小檗碱组、罗格列酮组、罗格列酮+GW9662组、小檗碱+GW9662组,每组6孔,预防性给药。空白组给予完全培养基,模型组及给药组给予含有20 μg・L-1 TNF-α完全培养基,除此之外,罗格列酮组含10 μmol・L-1罗格列酮,小檗碱各组分别含有10,20,50,100 μmol・L-1小檗碱,罗格列酮+GW9662组添加10 μmol・L-1罗格列酮和10 μmol・L-1 GW9662,小檗碱+GW9662组添加10 μmol・L-1小檗碱和10 μmol・L-1 GW9662。给药作用48 h后,用葡萄糖测定试剂盒检测各组细胞外液中的葡萄糖量。
2.4 RNA提取和RT收集 各组细胞按PureLinkTMRNA Mini Kit说明书提取总RNA。RNA浓度及纯度用Nanodrop 2000核酸蛋白测定仪检测,确保吸光度在1.9~2.0。用1%琼脂糖凝胶电泳鉴定完整性。Promega逆转录试剂盒合成cDNA。
2.5 微滴式数字PCR(ddPCR) 数字PCR的反应体系:2×ddPCRTMSupermix for Probes 10 μL,模板DNA 1 μL,20×Prime Probe mixture 1 μL,DNase-free water 8 μL。将配制好的20 μL PCR反应液,转移至微滴发生卡(DG8 cartridge)中,再加入70 μL微滴发生油(droplet generation oil)后,利用QX200TM微滴式数字PCR仪的微滴生成器制备反应微滴。数字PCR循环反应条件:95 ℃ 10 min;94 ℃ 30 s, 60 ℃ 45 s, 68 ℃ 45个循环; 98 ℃,10 min, 4 ℃。将PCR扩增后的96孔板放入QX200TMddPCR仪的微滴分析器中,并在软件QuantaSoft上设定检测模式为ABS(absolute quantification),检测FAM的荧光信号。仪器会自动分析每个微滴中荧光信号,然后计算各样品基因拷贝数浓度。
2.6 荧光探针定量PCR法(Taqman-qPCR) 荧光探针PCR采用20 μL的PCR反应体系:Taqman Gene Expression PCR Master Mix10 μL,模板DNA 1 μL,20×Prime Probe mixture 1 μL,DNase-free water 8 μL。DNase-free water 9.4 μL。PCR反应条件:95 ℃ 10 min;95 ℃ 15 s, 60 ℃ 30 s, 68 ℃ 30 s, 40个循环。以内参基因β-actin为参照,计算目标样本基因相对含量。用于ddPCR和qPCR的商业化Taqman引物购自美国Life Technologies公司。
2.7 数据统计分析 所有数据以±s表示,采用SPSS 19.0 统计分析软件分析数据。多组间的比较用One-way AVONA方差分析, 2组组间比较采用非配对t检验;P
3 结果
3.1 3T3-L1脂肪细胞的分化 3T3-L1前脂肪细胞成长梭状,胞浆内无脂肪小滴。当生长到接触抑制后,加罗格列酮诱导4 d细胞开始变圆,出现少量小脂滴。当诱导到8~9 d时,90%左右的细胞表现为有大量脂滴的圆形细胞,符合脂肪细胞特征, 油红染色鉴定前脂细胞已分化为脂肪细胞(图1)。
3.2 IR脂肪细胞模型的建立及诱导时间优化 采用地塞米松加罗格列酮诱导的方法建立脂肪IR细胞模型。检测不同时间点细胞外液葡萄糖含量,结果显示,24 h已建立起IR脂肪细胞模型,一直持续到96 h,但对于正常组而言,96 h细胞外液营养物质缺乏影响脂肪细胞的正常生长增殖,所以认为稳定IR模型建立的时间应为24~84 h(表1)。
3.3 不同剂量小檗碱的降糖药效检测 采用不同剂量小檗碱干预地塞米松加罗格列酮诱导建立脂肪IR细胞48 h,检测细胞外液葡萄糖含量。结果显示与IR模型组相比,各个剂量(10,20,50,100 μmol・L-1)小檗碱都显著降低细胞外液葡萄糖浓度,具有显著降糖药效(表2)。
3.4 基于数字探针PCR法确定合适内参基因 采用新一代ddPCR探针法基于绝对定量原理研究正常组,IR组和阳性药物组内参候选基因β-actin, GAPDH和α-tubulin之间比值变化。GAPDH与β-actin均以α-tubulin进行校正,当α-tubulin恒定表达时,β-actin在各组脂肪细胞样本中的表达量较为稳定,适合做内参基因;当β-actin进行校正,α-tubulin在各处理样本中的表达量较为稳定,而GAPDH在各组样本中数值离散,差异变化大,表明GAPDH不适合在IR脂肪细胞中作为内参基因进行标准化分析(图2)。
3.5 基于qPCR和ddPCR方法比较研究小檗碱对PPARγ和脂联素基因表达的影响 基于qPCR法和ddPCR法获得小檗碱干预脂联素mRNA表达的结果类似(图3),与正常组比较,IR模型组脂联素表达下降(与qPCR和ddPCR,P
3.6 拮抗研究PPARγ基因和脂联素基因表达关联性 在前2个实验结果基础上,加入PPARγ特异拮抗剂GW9662后检测PPARγ和脂联素mRNA表达(表3,4)。与非拮抗组相比,小檗碱拮抗组均显著下调脂联罗格列酮拮抗组均非常显著下调脂联素mRNA表达,揭示脂联素mRNA表达主要受PPARγ调控。
3.7 ddPCR检测IR脂肪细胞抵抗素和瘦素基因表达 ddPCR检测IR脂肪细胞抵抗素和瘦素mRNA表达结果类似,与正常组比较,模型组抵抗素和瘦素表达下降(P
3.8 小檗碱剂量依赖性干预mRNA表达研究 10,20,50,100 μmol・L-1多个剂量小檗碱用来干预IR脂肪细胞。qPCR和ddPCR均检测到小檗碱剂量依赖降低PPARγ mRNA表达,但两者存在细节上小差异;qPCR结果显示20,50,100 μmol・L-1小檗碱下调PPARγ 均呈现非常显著差异(P
不同剂量小檗碱干预下脂联素和PPARγ 两者mRNA的变化趋势具有一致性,小檗碱剂量依赖性下调脂联素mRNA表达非常显著(P
4 讨论
在检测转录水平的定量方法中都需要应用内参基因对目标基因表达量进行校正。理想的看家基因应该在各种实验因素条件下恒定表达,常用内参基因有参与细胞骨架形成的β-actin和α-tubulin,参与细胞能量代谢的甘油醛-3-磷酸脱氢酶(GAPDH),参与蛋白质合成的18S rRNA等。为了确保精细定量结果的可靠性,本实验室采用最新的绝对定量ddPCR法检测α-tubulin,β-actin和GAPDH内参基因进行相互校正,结果发现各组脂肪细胞β-actin和α-tubulin的绝对数值和相对比值都很接近,而GAPDH的绝对数值比较离散,相对比值各组间变化较大,IR组GAPDH表达升高,其他组以IR组GAPDH进行标准化处理得到数值比实际数值偏高,目的基因表达结果容易被误读,不适合在IR脂肪细胞研究中作为内参基因使用。究其原因是GAPDH是参与糖酵解和糖异生过程中的关键酶,在胰岛素和地塞米松联合建立的IR脂肪细胞与正常脂肪细胞表达差异较大。α-tubulin基因稳定表达但表达量较低,所以β-actin比α-tubulin更合适作为IR脂肪细胞定量表达研究中的内参基因。绝对定量的ddPCR方法可以更简单直观选择合适内参基因,具有明显技术优势[7]。
研究发现小檗碱剂量依赖降低IR脂肪细胞脂联素基因表达,与ddPCR和qPCR 2种定量方法呈现高度的一致性,说明实验结果是可信的。但在PPARγ基因剂量依赖研究上,ddPCR和qPCR结果有些差异,究其原因可能是2种方法精确度的差异。对于qPCR而言,不同组间Ct差异很大,随着Ct增大,扩增效率逐步降低,最终影响相对定量结果的准确性[8]。ddPCR是基于通过油水两相间隔得到以液滴为单位的PCR反应体系液进行绝对定量,不依赖于扩增曲线的循环阈值进行定量,不受扩增效率的影响,因而ddPCR比qPCR有更高的精确度[9],基于两者原理上不同更应采信ddPCR结果。除ddPCR探针检测外,本实验采用qPCR探针法检测抵抗素和瘦素mRNA表达,结果发现对于20,50,100 μmol・L-1小檗碱组而言,抵抗素基因Ct已达到或超出31循环,超出荧光定量法检测可信区间。模型组瘦素基因Ct已达到34循环,无法可信检测。探针定量方法对比研究发现ddPCR比qPCR有更宽的线性范围和更高的精确度,尤其在对极低表达基因检测上具有无可比拟的技术优势[10]。
PPARγ是脂肪细胞中唯一高丰度表达的核受体,与脂肪细胞分化、糖脂代谢及炎症的反应关系密切,PPARγ激活后可结合在脂联素基因的启动子位置正调控其转录,脂联素可以通过磷酸化激活骨骼肌和肝脏的腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK),刺激糖利用和脂肪酸氧化来增加胰岛素敏感性[12]。拮抗剂GW9662实验证实PPARγ对脂联素基因直接正调控作用。结果揭示小檗碱改善脂肪IR并非通过PPARγ依赖途径在转录调控水平上调脂联素mRNA表达来增强胰岛素敏感性,推测可能是小檗碱在翻译后调控水平激活AMPK来升高具有活性脂联素高聚体比例来实现[12],小檗碱这种非PPARγ依赖途径的胰岛素增敏机制有待深入研究。
在脂肪细胞因子中抵抗素和瘦素发现较晚,功能机制研究相对不如脂联素确切。有些研究表明瘦素和抵抗素可增加IR作用,两者均可导致胰岛素抑制脂解作用减弱,使内脏脂肪更易脂解,释出游离脂肪酸,胆固醇,甘油三酯等浓度升高从而加重IR;研究发现瘦素可抑制胰岛素表达和分泌,抵抗素可使胰岛素作用受损[13]。周立斌等研究结果发现10 μmol・L-1小檗碱降低前脂肪细胞抵抗素和瘦素基因表达[14]。以往这两者mRNA表达研究较少涉及IR脂肪细胞,究其原因可能是基因检测手段受限。借助ddPCR定量新技术,本研究表明小檗碱剂量依赖下降IR脂肪细胞的抵抗素和瘦素mRNA表达减轻IR。通过对小檗碱对PPARγ和脂肪分泌因子表达的研究有助于研究者深入了解其改善脂肪IR的作用机制。
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直播营销的意义范文6
关键词 水稻;种子包衣剂;配套技术;应用效果
中图分类号 S511 文献标识码 A 文章编号 1007-5739(2016)23-0027-01
水稻是宁夏引黄灌区三大粮食作物之一,年均种植面积6.67万hm2,总产量50万t。近年来,全区水稻约4万hm2采取了旱直播的栽培方式,减轻了劳动强度,降低了生产成本等,但由于农机与农艺没有很好地融合,播种量大、出苗率低、易倒伏、产量不高等问题依然存在。为此,开展种子包衣剂的生产试验[1-4]旨在筛选出符合灌区中低产田水稻直播种植的高效、经济、适用的新材料与新方法。
1 材料与方法
1.1 试验地概况
试验于2014―2015年在平罗县通伏乡集中村进行。年均降水量190~230 mm;年平均气温8~9 ℃,≥10 ℃的活动积温3 200~3 400 ℃,水稻生育期(4月下旬至9月下旬)日平均气温18.8~19.8 ℃,年日照时数2 800~3 100 h,无霜期140~160 d,试验农田前作为小麦,土壤25 cm耕层有机质含量14.6 g/kg、全氮1.42 g/kg、全磷0.65 g/kg、碱解氮78.6 mg/kg、速效磷9.26 mg/kg、全3.87 g/kg。中等肥力偏上,具有代表性,适宜机械化作业。
1.2 试验材料
供试种子包衣剂为亮盾、锐胜、稻籽乐(15%甲霜灵+2%福美霜)、稻衣(0.5%咪鲜胺+2%吡虫啉)、矮锈(20%萎锈+20%福美霜)。供试水稻品种为2007XZ-181中熟品种。
1.3 试验设计
试验设5个处理,分别为亮盾100 mL+锐胜10 g+水1 kg处理35 kg稻种(A);稻籽乐400 mL+水1 kg处理50 kg稻种(B);稻衣100 mL+水1 kg处理50 kg稻种(C);矮锈100 mL+水1 kg处理50 kg稻种(D);空白对照(CK)。试验小区面积0.2 hm2,3次重复,随机排列[5-6]。
1.4 试验实施
用华南大学研制生产的2BDH-20型同步开沟水稻精量穴直播机进行播种,行距20 cm,穴距15 cm,每穴12~15粒,4月15日进行平整农田,4月28日播种,4月30日上水;各处理结合春耕一次性施农家肥75 t/hm2(耕深≥25 cm,4月上旬用1GQNZ-230型自走式履带旋耕机旋耕15 cm,全生育期施磷酸二铵150 kg/hm2、尿素225 kg/hm2、硫酸钾复合肥300 kg/hm2。播种量159 kg/hm2,其他农艺措施与田间管理均按当地要求进行。田间记载水稻各生育期性状,成熟期分小区收获地上与地下部生物量称重,对其效益进行评价。
2 结果与分析
2.1 拌种效果
2.1.1 促进了生长发育。水稻经种子包衣处理后,处理A出苗分别较处理B、C、D、CK提前1.5、1.0、0.5、2.0 d,有利于营养生长期的缩短,出苗率达67.6%,较处理B、C、D、CK分别高6.30%、7.82%、9.31%、13.30%,有利于减少播量、降低成本;单株低节位分蘖成穗12.6穗,分别较处理B、C、D、CK多1.1、1.5、2.1、2.6穗,分蘖早生快发,分蘖势强,易获得足够的穗数;平均株高95.3 cm,分别较处理B、C、D、CK高1.50、1.32、1.10、2.30 cm,群体结构协调,光合速率高;产量构成三要素中穗数达487.5万穗/hm2,分别较处理B、C、D、CK高18.3万、21.7万、28.5万、36.4万穗/hm2,光合产物累计速度快,干物质积累多;穗结实粒数97.6粒,分别较处理B、C、D、CK高2.4、3.2、4.3、6.8粒;千粒重达24.8 g,分别较处理B、C、D、CK低0.52、0.45、0.32、0.53 g;产量达11 800.5 kg/hm2,分别较处理B、C、D、CK高4.34%、6.30%、9.70%、13.75%。
2.1.2 提高了抗病性。发病期间调查,CK稻恶苗病株数达8.35%,病情指数达4.69%,均高于处理区(病株率为2.23%,病情指数达1.32%);叶瘟病叶率CK为48.32%,处理区为29.3%,比CK低39.4%。
2.2 配套的关键技术
2.2.1 选用良种,适期开沟施肥播种。由于旱直播减少了育秧环节,播期推迟15~20 d,营养生长期缩短,成熟期推迟,故应选用中熟品种并利用2BDH-20型同步开沟水稻精量穴直播机于4月下旬至5月5日前开沟施肥播种,实现“沟中有水”的湿润灌溉、同步播种施肥和肥料深施直播,以减少用种量与施肥次数,降低生产成本。
2.2.2 加强病虫草害防治。虽然种子包衣处理病害较空白对照略轻,但防治稻瘟病工作不可放松;水稻旱直穴播秧苗与杂草同期生长,应及时人工除草。
2.2.3 适时晾田,控制分蘖。由于机械开沟穴旱直播植株入土浅、分蘖快,在6月下旬当基本苗达到570万~600万株/hm2时应及时晾田,控制无效分蘖。收获前10 d断水。
3 结论与讨论
试验结果表明,采用种子包衣技术能较好地减少由真菌引起的稻恶苗病和叶瘟病发病率。种子包衣技术必须配合良种,在宁夏灌区应选择中熟品种作为旱直播主栽品种,早熟品种则不利于生产潜力的发挥。农艺和农机应高度融合。本试验中,种子包衣剂是新材料,而机械化开沟施肥播种则是新方法,二者紧密结合方能产生良好的效果。
4 参考文献
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