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工程分析报告范文1
关键词:勐邦水库 除险加固 综合效益 分析
一、工程概况
勐邦水库是2002年我省病险水库除险加固工程之一,是西双版纳州勐海县三座中型水库中的一件。水库除险加固对水库下游的勐遮镇、勐海县城以及流沙河流域内的六级电站有着举足轻重的作用,是促进勐海县的工农业生产发展和经济繁荣必不可少的水利工程。
勐邦水库建成于1960年,位于西双版纳傣族自治州勐海县勐遮坝边缘的南木冷混河上,地理坐标为东经100°18′,北纬21°54′。南木泠混河是流沙河支流,属澜沧江水系。水库距勐海县城23km,距景洪80km,距昆明783km。水库的专用公路与佛双公路、昆洛公路相连,交通便利。
二、勐邦水库除险加固工程鉴定及审批立项情况
2000年5月,西双版纳州水利电力局组织专家对水库进行了大坝安全鉴定,鉴定结果认为:勐邦水库大坝为不能保证安全运行的Ⅲ类坝。2001年4月9日,省水利厅下发《关于勐海县勐邦水库大坝安全鉴定意见的通知》(云水农水[2001]35号文)给予确认大坝安全鉴定的结论,并对水库主要险情作了高度的概括。
根据《关于做好重点中型病险水库除险加固工程前期工作的通知》(云水规计[2001]17号文)的精神,勐海县水利电力局委托云南省水利水电勘测设计研究院对勐邦水库除险加固工程进行初步设计工作,2001年10月初步设计工作完成,提交了《勐海县勐邦水库除险加固工程初步设计报告》,初步概算总投资2436.07万元。2002年2月21日,云南省发展和改革计划委员会和云南省水利厅连文下发《关于勐海县勐邦水库除险加固工程初步设计报告的批复》(云水规计[2001]110号文)对初步设计报告作了批复,审定该项目概算总投资2400.72万元。2001年11月20日,云南省水利厅下发《关于勐海县勐邦水库除险加固工程水土保持发案初步设计的批复》(云水水保[2001]111号文)将工程投资列入工程投资概算中。2002年6月27 日,云南省发展和改革计划委员会和云南省水利厅连文下发《云南省2002年第二批病险水库除险加固工程中央预算内专项资金(国债)股计划的通知》(云计投资[2002]659号文)确定该项目资金的来源:中央1600万元,省级480万元,地县321万元。
三、勐邦水库除险加固工程项目各部位险情情况及参数 (一)水库实际抗御洪水标准低于部颁水利枢纽工程除险加固近期非常运行(500年一遇)洪水标准。溢洪道渲泄500年一遇洪水时,水位已超过溢洪道侧墙50cm,洪水无法安全下泄。
(二)大坝不满足抗震稳定要求。在地震工况下,下游坡最小抗滑稳定安全系数为0.716,远低于规范要求。
(三)大坝蚁害严重。坝体内蚁道贯通前后坝坡,蚁巢空洞达1~2m3,致使大坝漏水严重,局部出现管涌现象,危及大坝安全。
(四)副坝坝底老涵洞始建的无压圬拱涵与后衬砌的钢筋砼面漏水严重,渗漏量大于10L/s,并且老涵洞过水能力不能满足下游工农业用水需求。
四、勐邦水库除险加固前各项指标及发挥的效益 勐邦水库是以灌溉为主,兼顾工业供水、乡镇人畜饮水和水产养殖并兼有一定削峰和滞洪功能的综合利用水库。
勐邦水库加固前设计总库容为2460×104m3,相应校核洪水位的防洪库容为396×104m3,水库实际运行最高水位控制在1243.0m,低于正常蓄水位2.5m,有效库容减少553万m3,实灌面积仅为2万亩(毛面积),灌溉水量利用系数为0.623,年用水量为1377.5×104m3;乡镇及工业年用水总量为545.6×104m3;年度渔业总产量为15吨。由于水库存在着较大的安全隐患,对下游勐海县城、勐遮镇、勐遮农场及国家二级企业景真糖厂共11万人的生命和财产安全存在着较大的威胁,同时影响到下游19.43万亩耕地的正常运作。
五、勐邦水库除险加固工程的主要内容及投资完成情况
勐邦水库除险加固由四个单位工程组成:第一单位工程是围堰工程;第二单位工程是主、副坝加固工程(包括主坝、副坝加固培厚工程,副坝坝底输水涵洞的封堵工程,主、副坝防渗墙工程及主、副坝帷幕灌浆工程);第三单位工程是溢洪道改建工程;第四单位工程是输水隧洞新建工程。
依照工程建设的法定程序,在上级及地方行政主管部门的监督下,在业主的精心组织以及各参建单位的积极努力和配合下,在工程建设过程中严格执行相关规范及规程的要求,顺利进行了各项工作的招投标、施工图设计、施工及监理工作。该项目工程计划总投资为2400.72万元,实际投资审定为2446.45073万元,比计划投资增加了1.9%。
六、勐邦水库除险加固后的各项指标完成情况 勐邦水库加固后设计总库容增为2540.4×104m3,相应校核洪水位的防洪库容增为423.74×104m3,解决了水库的安全隐患。
勐邦水库加固后实际灌溉面积增为4.5万亩,灌溉水量利用系数达到0.75,年用水量增为1530×104m3;乡镇及工业年用水总量增为664.08×104m3,设计保证率达到95%;年度渔业总产量增为25吨。
七、勐邦水库除险加固后的综合经济效益、生态效益及社会效益情况 勐邦水库除险加固工程实施后,保障了当地人民生命财产安全;保证了下游4.5万亩耕地的灌溉用水,同时下游人民生活饮用水、工业用水要求也得到了保证。由于勐邦水库是勐海大型灌区续建配套与节水改造规划中重要水源工程之一,水库加固后,提高了渠道输配水能力,缓解了用水矛盾,为当地农业、农村经济发展提供了有力的支撑和保障。通过项目建设,取得了以下几方面的效应:
(一)
社会经济效益
勐邦水库位于勐遮坝区上缘,是勐遮坝区的第一水源点。勐遮坝自然资源丰富,是版纳州水稻和甘蔗生产基地。勐遮在“十五”期间主要是进行农业种植结构调整,改造中低产田,重点发展优质品质水稻,推广冬季农业,改善农业设施。在工业上,景真糖厂在县政府投入了大量的资金进行技术改造后,年生产总值突破8亿元人民币大关,生产效益平均年递增8.5%。在农业上,勐邦灌区“十五”计划和2015年发展目标为:到2005年,农业生产总值为1.18亿元,平均年递增5.5%;到2015年,农业生产总值为2.4亿元,平均年递增5%。水库库区养殖面积增加,渔业产量增加了67.7%。
水库加固后保证了人民生命财产的安全,保证了勐遮镇的工、农业用水需求,促进勐遮镇的工、农业发展。保证了农业高产稳产、农民增收、社会安定,同时对发展优质、高效农业,农作物起到了促进作用,农业种植结构的调整,增加了农民收入,为当地的经济发展带来了生机和活力。
(二)生态效益
勐邦水库加固后在生态环境中最突出的影响有:加固后其防洪库容增加,水库的削峰和滞洪能力增强,在大洪水来临后可以蓄滞部分洪峰,保证下游河道不被过度的冲刷,降低河流区域生态环境的恶化。
工程分析报告范文2
针对资产公司钢材贸易所处的行业发展趋势,面临的竞争环境,充分结合资产公司的竞争优劣势分析,资产公司制定了钢材贸易初期发展战略,确定了从传统贸易商向供应链综合服务商转型的经营思路,在稳固并壮大钢材贸易的前提下,增强供应链一体化管理综合服务水平,最终将资产公司钢材贸易打造为南昌市乃至江西省领先的供应链一体化价值创新服务平台。
为研究资产公司钢材贸易合资公司的可行性,资产公司对南昌市钢材贸易现状进行了细致的摸底,现将掌握情况总结如下:
一、资产公司钢材贸易发展现状及瓶颈
1、资产公司钢材贸易发展现状
历年钢材贸易供应量、收入及毛利明细表
单位:万元
年份
供应量(万吨)
收入
成本
毛利
毛利率
2013年
1.21
4,100.27
3,863.06
237.21
5.79%
2014年
3.45
10,625.22
9,854.48
770.74
7.25%
2015年
9.94
21,974.86
20,662.26
1,312.60
5.97%
2016年
6.12
13,261.04
12,708.91
552.13
4.16%
2017年
4.61
15,809.19
15,421.89
387.30
2.45%
2018年
3.67
14,073.56
13,717.63
355.93
2.53%
2019年(预估)
1.8
7.000.00
6.822.90
177.10
2.53%
从上以上表格中可以分析出资产公司主体业务钢贸供应量从2015年开始逐步下行,同时也说明了现有的钢材贸易经营模式改变不了目前钢贸现有的囧境。
2、资产公司钢材贸易发展瓶颈
通过以上分析得出钢贸业务逐年下滑的主体原因是受困于钢贸经营模式上的缺乏创新等因素,资产公司钢贸在苦苦支撑的几年中不断摸索,不断学习,总结出导致目前逐年产量下行的局面主要有以下3点:
1、甲供钢材的取消导致资产公司钢贸在没有任何缓冲期或保护期就直接面对千变万化的钢材市场时显得有心无力,再加上没有自购权,在钢材价格波动剧烈时对钢材采购成本控制及供应及时性上比较被动。对于我们来说,施工单位的钢材需求是可以比较准确预测的,如果可以在某个时段相对低价采购一批钢材,在供应及时性及收益上将会有更好的表现。遇到突发事件还要按时上会,层层审批,时效性慢,相对钢材市场上摸扒滚打,灵活多变,手段百出的竞争对手时处处被动挨打,毫无反手之力。最终结果,对外开展钢贸业务始终无法突破,钢贸产值无法持续上行。
2、资金上的支持没有根据业务的发展进行调整,众所周知,钢贸行业是一种资金密集性行业,对资金有着较高的要求。“巧妇也难为无米之炊”,我们也经历过反复谈判,好不容易把钢材业务谈下来的时候却因为没有资金的支持而放弃的历程。
3、在钢材贸易的实际操作过程中,一般要经过业务洽谈、合同签订、货物采购、货物销售、支付结算、款项回收等基本环节。钢材贸易因钢材单价高,且为项目施工主材,对资产公司的资金需求量大,目前因多数施工单位长期拖欠货款,也成为制约资产公司钢贸扩大发展的瓶颈。针对施工单位的拖欠货款,资产公司经过多次实地了解和沟通,施工单位拖欠货款的主要原因还是因为工程进度计量时间跨度过长等各种客观原因造成。但不可否认这种现状已严重影响资产公司资金的正常运作及钢材业务扩展。
二、南昌市钢材贸易经营模式分析
为更好完成集团对资产公司钢贸发展设定的目标,资产公司现有的钢贸经营模式亟需转型升级,找寻新的竞争优势。目前,整个钢材行业由于受产能过剩影响和经营模式单一化两个因素的影响,几乎所有钢贸公司在近些年遇到了发展瓶颈,而近年来南昌钢材市场的低迷,钢材贸易效益严重下降,导致许多钢贸公司经营困难,“大浪淘沙始见金”,虽然钢贸公司间的同质化竞争愈发激烈,但还是有几家钢贸公司的业绩却逆流而上,傲视群雄,成为这个行业的领导者。
1、采购(托盘)
具有雄厚资金实力的钢贸公司多采用这种经营模式,行业内称之为“托盘”业务。此类钢材贸易业务经营方式简单直观,即通过合同锁定钢材采购价格,托盘方委托钢贸公司到钢厂订货或市场采购,托盘方则要一定期限内(一般在7天左右),一次或几次提货完毕,而钢贸公司通过自身的渠道优势赚取价差。由于托盘方在采购前已找好了终端客户,签订了销售合同并锁定了价格。这种经营模式在钢材采购量及钢材收款有保障的前提下容易做大产值,但收益很低,风险几乎为零。因为市场价格上涨则钢贸公司享受利润;市场价格下跌则钢贸公司承担风险。托盘方不享受超额利润也不承担市场风险。
南昌钢贸托盘的领导者江西省出版集团公司供应链管理分公司,该公司自 2014年成立至今,供应钢材约45万吨,创造产值约20亿元。
2、自主经营(独资)
由钢贸公司直接向钢厂或钢材销售单位付货款采购钢村,放在仓库、码头、车站或钢材交易市场进行销售。采购前没有确定销售下家,价格随行入市,也叫“零售”。这种方法受市场价格波动影响巨大,市场价格上涨则利润丰厚:反之,市场价格下滑,则无人问津,造成亏损,如果不出货则资金压力沉重,无法掌握销售速度。
南昌钢贸自主经营的领导者江西伟梦钢贸有限公司,江西伟梦近3年来钢贸规模发展迅速,2016年年销量在45万左右,2017年年销量在58万左右,2018年年销量在83万左右。的钢厂有方大特钢,九江萍钢,新余钢厂和马鞍山马钢。销售模式主要为直送终端和市场批发,同时还会在期货上进行套保。其优势在于体量大,钢厂多。劣势在于所需资金量大,时常会出现周转困难;发展速度过快,自营能力跟不上,钢厂普遍强势,加大了亏损风险。随着和钢厂协议量的增加,目前已经感受到较大压力,其公司已经准备减量。
3、合资经营(强强合作)
钢贸合资经营模式是近几年来钢材市场化合作的一种比较典型的钢贸经营模式。从投资分析角度来看也是可行的,用相对较少资金获得较多收益。从风险角度来看,合资经营模式风险共担,有效的降低资金风险。
合资经营的领导者江西南昌旅游集团新创实业发展有限公司(以下简称新旅集团),新旅集团通过跟民营企业参股合资的模式成立贸易公司,新旅集团控股但不参与经营,经营由民企负责。新旅集团模式在钢材市场运营有3年多,钢厂有九江萍钢和新余钢厂,目前年销售量在36万吨左右,年产值超10亿元。从新旅集团近3年来的运营结果来看,总体表现较为稳定,风险小,产值高,利润率较低。
三、资产公司的优势及展景
资产公司作为一个具有很强本地资源性的公司,一方面,在品牌形象、资产规模、客户资源、业务基础、经营人才及规范化管理等方面具备了一定优势,另一方面,也存在着落后于市场需求、企业功能单一、专业化程度低、缺乏网络支持、信息系统不健全等制约企业发展的“瓶颈”。目前南昌市正处在“大投入、大建设、大发展”城市发展理念当中,相对于以上几种钢贸经营模式而言,合资经营模式优势更明显。除获取对方资金和渠道扩大钢材贸易规模,进一做大产值增加收益,合并财务报表,还可以有效降低资金风险。
从理论上来说,合资模式具备国有制和私有制的优点,即可促进钢贸公司生产力的进一步发展,也可以提高员工积极性和创造性,同时也有利于筹集资金,引进和利用外资加快发展壮大。合资钢贸公司结构和组织方式灵活多变,可以快速适应钢材市场灵活的密集性资金运作模式。
资产公司合资经营也有先例,早在2013年为了充分发挥各自的优势,提高整体竞争力,实现优势互补、效益共赢的合作经营目标,资产公司作为甲方在南昌地铁2号线混凝土项目上与南京兰叶集团、南昌三建进行了战略合作。三方合资成立有限责任公司,实行独立核算、自主经营、自负盈亏,资产公司按出资比例为控股方,由集团委派董事长和财务总监。近3年共销售328.1万方混凝土,产值107,823万元。
合资公司目前首要任务是解决资产公司今年产值困境,在解决今年产值困境后,预计成立合资公司第一年将为南昌轨道交通集团创造产值3亿元人民币,第二年约5亿元人民币。资产公司需要持续高效整合现有及远期的地铁资源,同时借助合作方的市场经营手段与市场资源,做大做强合资公司钢材贸易,我们要把现在单一的钢材贸易衍生为多元化钢材贸易以及物资配应一体化公司,最终我们要完成合资公司的大宗物贸采供销改革,打造合资公司大物贸概念。
四、合作公司简介
江西斯蒂尔贸易有限公司成立于2017年4月27日,地址位于江西省南昌市经济技术开发区昌北钢材大市场7号楼,注册资本壹仟万元整,是一家钢材批发和零售的贸易有限公司,主营螺纹钢、线材、盘螺,各种管材、板材、型材等,经营品牌为南钢、新钢、萍钢、马长江。公司至创办以来,在激烈的市场竞争下,秉承“敬业、诚信、共赢、合作”的经营理念,努力耕耘,奋发进取,勇于开拓,培养了一批具有高素质的市场营销队伍,分别设立了总经办、业务部、财务部、行政部、人事部,现有员工20人,其中本科人员8人,专科6人,有专业技术职称3人。
近年来公司快速成长,业绩屡创新高,财务状况稳健。2017年销售钢材2.06万吨,营业额9200万。 2018年销售钢材18.5万吨,营业额8亿。2019年1-7月销售钢材9.11万吨,营业额3.35亿。公司坚持质量第一,服务为本的原则,曾为江西建工第一建筑有限责任公司、江西建工第四建筑有限责任公司、江西康成建设工程有限公司、海南工控国鑫国际贸易有限公司、江西嘉业建设工程集团公司、中禾元丰建设工程有限公司等公司的多个工程提供优质钢材。公司通过近几年的发展,已经形成了自己的核心的竞争力和竞争优势。
五、成立合资公司的主要事项
合资公司的成立不是简单的联合,更不能是泛泛合作,为此,资产公司钢贸经营在转型发展中,明确了发展方向,明晰合资的主线。为使资产钢贸业务发展的步伐迈得更快,走得更稳,结合此前10余次的实地调研得出以下建议:
1、建议合资公司初期注册资金1000万人民币,后续根据钢贸业务发展规模进行追加,结合自身及合资方钢贸业务摸底,
2、建议合资公司成立之初我方钢贸利润不低于银行同期银行贷款利率,在钢材甲供实现以后按股比分成。
3、建议为避免合资双方在初期因经营理念管理方式、行为准则的冲突致使效率低下、资产公司占股不超过百分之三十,资产公司为控股方且合并财务报表。
4、建议为了合资公司长远健康发展和保障投资收益,做大做强集团融资平台,提升相关人员在合资公司中的创造性,主动性,应建立完善相关合资公司工作人员的股权激励制度。
六、钢材甲供特点及优势
根据集团公司的战略部署,资产公司早在2013年以地铁2号线卧龙山站为试点,开展了钢材甲供及地铁相关工程的钢材贸易拓展业务。此前,由集团林洁总经济师带队,我司会同集团企管部、合约部对同行业的钢材甲供操作模式进行了全面深入的学习调研。在借鉴其他地铁城市的经验和做法的基础上,结合南昌地铁的实际情况,制定并出台实施了一系列钢材甲供管理办法和措施,为保证地铁工程钢材质量,实现工期和成本控制,以及集团融资平台的建立,奠定了夯实的基础。
1、钢材实行甲供,能够更加有效地控制项目成本
目前各大中型建设工程项目一般都实行总承包制,如由施工单位自行采购钢材对甲方来说虽然省事,但施工单位大多要求钢材供货商垫资,而施工单位所付出去的钢材供货款垫资成本大多通过各种不同形式转嫁给了甲方。
而甲方供应钢材,实行的是大批量集中采购,通过公开招标,中标单位可以与国内钢材大厂签订战略合同框架协议,从而成为国内钢材大厂的重点客户,具体体现在钢材供应及时性和稳定性上有着非甲供可比拟的优势。
2、钢材实行甲供,能确保项目品质及工程质量。
施工单位供应钢材,从品牌上得不到保证,就算甲方指定国内大厂某品牌,施工单位经常会以某大厂品牌的钢筋规格不齐,要求增加品牌,从而降低施工单位采购钢材的成本。而甲供钢材能够有效的控制材料来源,避免项目建设过程中施工承包商以次充好。
3、钢材实行甲供,加速钢材供货周期、推动项目整体进展。
施工单位供应钢材,往往资金不足,钢材供应商往往发货断断续续,造成钢材供应不足,从而影响工程进度。
而甲供钢材不存在资金不足,且合同约定甲供钢材品种、数量、品牌,预先避免纠纷的发生,甲供钢材应有效的避免施工方在工程施工过程中有关材料方面的扯皮问题由于批量采购,同时甲供钢材供应商提前备货充足,不会出现部份规格断货而影响工程进度。
综上,甲供钢材的重要性在于节省投资、控制钢材质量,避免花高价买到低质量的产品,资产公司通过甲供钢材贸易实现盈利,成为集团融资平台,南昌地铁钢材甲供势在必行。
七、需要解决的问题
1、政策上希望集团能够在推动所有地铁项目所用钢材全部列为甲供项目,授权合资公司特许经营,并通过钢材甲供制度确保钢材资金的及时回笼上给予支持。
工程分析报告范文3
关键词: 高速公路;改扩建;保通措施
中图分类号:U41 文献标识码:A 文章编号:1006-4311(2012)22-0114-020 引言
伴随着公路的高速发展,对原有高速公路的改建、交汇施工的工程越来越多,由此引发的施工与通行之间的矛盾越来越突出。因高速公路设计时速高,车辆行驶速度快,经常因施工与保通处置不当引发交通事故。如何协调高速公路改扩建工程中施工与车辆通行之间的矛盾,采取何种措施保障被施工高速公路的通行顺畅,如何将设计好的保通措施在路面上进行逐步实施,是摆在广大公路工作者面前的一项艰巨任务,现根据商周高速公路上跨济广高速公路现浇箱梁施工中所采取的保通措施与实施步骤进行详细分析,希望能为以后的高速公路改扩建施工起到一定的帮助。
1 商周高速跨济广高速现浇箱梁保通措施
1.1 工程施工简介 商周高速二期工程和济广高速公路交汇于济广高速桩号K348+080处,工程设上跨济广高速12孔现浇箱梁桥一座,现浇箱梁采用满堂支架施工,济广高速为正在通行的道路,日交通量约1000辆,80%为小型车,车流量不大,但车速高。为保证商周二期高速公路施工与济广高速车辆运营共同进行,在经过实地调查的基础上,认真研究分析,制定了详细的施工保通措施。
1.2 保通措施 跨线桥A匝道桥在K348+080处上跨济广高速,桥面宽度19米,桥下净空大于5.5米。为现浇箱梁结构,施工方案为在济广高速路面上搭设满堂支架施工,左右两幅在位于中央分隔带处分别预留通行门洞各一处,门洞宽度4.5米,高度大于5.0米,确保正常运营车辆的通行。行车道由双车道改为单车道通行,既保证了原有高速公路车辆的正常通行,同时又满足了高速公路改扩建工程的施工。如图2所示。
1.3 保通措施的具体实施步骤 第一步:施工警示标志设置。在高速公路路面进行施工作业,第一步需要设置醒目的施工警告标志,此项步骤参照公路《公路养护技术规范》(JTG H10)2009中的规定执行,共需设置“前方施工”标志、“限速”标志、“合并车道”标志、“向左或向右”转向标志、“禁止通行”标志、“限速解除”标志等,按照公路养护技术规范预留足够的警告距离,并在重要位置增加爆闪灯、电子警察等警告标志,安排专职保通人员监控路面车辆通行情况。警告标志布置完后,即可进行下一步骤的实施。
第二步:隔离门洞施工区,施工预留门洞。搭设满堂支架,需先行设置施工临时性通行通道,预留通道两侧门柱下设置宽1米,高0.6米混凝土防撞墩,在防撞墩上设置门柱支架,支架上方架设工字钢横梁。施工时将作业区与行车区采用反光水马隔离墩严格分离,通行车辆,施工车辆及人员由上一个高速公路入口进入,然后行至作业区施工,施工完毕由下一出站口驶出。施工期间安排专职保通人员指挥车辆,施工车辆到场后将警示隔离墩打开一道缺口,进入作业区后马上封闭隔离墩,防止其他通行车辆误入,预留通道施工完毕后转入满堂支架搭设第三道工序。
第三步:隔离满堂支架施工区,搭设满堂支架。门洞搭设完毕后,进行剩余满堂支架的搭设,剩余满堂支架搭设在预留通道外侧直至路线以外。搭设门洞时所设置的施工警告标志一直保留,然后设置作业区警示水马隔离墩,将作业区与行车区严格分离,仍按照第二步骤行驶作业。在作业区外侧的波形梁护栏打开宽度8米的开口,施工所需模板、钢筋等设备由此进入施工区,不施工时立即封闭,防止路外人物进入高速公路。
此三步实施完毕,现浇箱梁满堂支架搭设工作就进行完毕,即可按照正常施工工序进行现浇箱梁的模板支护、钢筋绑扎、混凝土浇筑等一系列的工程施工。
工程分析报告范文4
一、原实验失败原因
1.实验材料准备不充分
(1)在新课程中,该实验安排在12月份至次年1月份。由于洋葱根尖是较理想的实验材料,但是天气寒冷,根尖的培养需要很长时间,而且此时的生根率不高,如果不准备充足的根尖,往往会出现实验材料不足而无法开展实验的情况。
(2)由于洋葱根尖的有丝分裂活跃时期在根长约5cm时,上午10:00至下午2:00。不可能所有班级都在这段时间进行实验。因为按照教材上讲的用鲜活材料做实验,学生不可能都取到处在细胞有丝分裂最活跃时期的根尖,所以会影响实验效果。
2.教材要求剪取2~3mm根尖进行解离
由于根尖太小,解离后又很滑,因此不容易用镊子取出,即使取出解离酥软的根尖,也容易把根尖破坏。此外,在染色时又会出现根尖太短的现象,它浸没在染液中很难找到,更难取出。
3.教材要求将材料在清水培养皿中漂洗10min
由于实验时间太长,要完成实验时间很紧张。
4.根据教材要求制作的装片效果差
(1)“用镊子弄碎洋葱根尖”,这样制成的装片会出现根冠细胞、生长点细胞、生长区细胞杂乱排列重叠严重的现象,不利于学生观察。
(2)教材描述:“在装片的盖玻片上再加一片载玻片,然后轻压。”这样操作会出现压片后拿去载玻片时带起盖玻片的现象,破坏临时装片,导致实验失败。
二、改进方法
1.材料准备
避开寒冷,在天气温暖的时候培养根尖。此时的洋葱生根率高,根生长旺盛。待根长到约5cm时,在上午10:00至下午2:00剪取健壮的根2~3cm进行固定,以便随时取用。操作如下:将剪好的根尖放在固定液中(固定液的配制:一份冰醋酸+3份95%酒精)15~30min,再取出放入70%酒精中保存。由于固定好的根尖都处在有丝分裂最活跃时期,不仅是做装片的理想材料,还可以根据需求量来准备根尖。
2.解离
取固定好的洋葱根,将有生长点的一端放在解离液中,另一端架在装解离液的培养皿沿上,充分解离3~5min。
3.漂洗
待根尖酥软后,用镊子夹住没有解离的一端取出,用细流水漂洗解离端约2~3min。
4.染色
将漂洗后的根尖用吸水纸吸去表面的水,把解离过的一端放进盛有质量浓度为0.01g/mL的龙胆紫溶液的培养皿中,另一端置于培养皿沿上,染色3~4min。如果染色剂质量浓度大或染色时间长,就会出现染色过深的现象,从而影响观察。
5.制片
用镊子将染色后的根尖取出,用吸水纸吸去根尖上的多余染液,再用剪刀剪取处理端的根尖2~3mm,放于载玻片上,加一滴清水,盖上盖玻片,再在盖玻片上盖一层有载玻片大小的吸水纸,最后在吸水纸上加一片载玻片,垂直用力压载玻片,力求一次成功,使材料成云雾状,此时细胞分散开来。当取下上层的载玻片及吸水纸时,不仅不会带起临时装片的盖玻片,而且装片的观察效果很理想。
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一、职业院校校园文化建设的必要性
校园文化是指学校这个特殊场所所具有的特定的精神环境和文化氛围,是各类学校教育不可缺少的重要组成部分,是学校师生在学习、工作和生活过程中所形成并共同拥有的价值观、信仰、态度、作风和行为准则。具体而言,校园文化可分为物质、制度、观念三个层面。从内涵上体现为显性课程和潜在课程两方面,显性课程指学校规定学生必须掌握的知识、技能、思想、观点、行为规范等;潜在课程包括校园建筑,文化设施和环境布置等有形环境和校风、教风、学风、人际关系、集体、舆论、心理气氛以及校园群体观点、信念等,而校园精神和校园价值观等观念形态的东西是校园文化的深层结构和核心内容,对校园的生存和发展都具有指导意义,是与办学质量连接在一起的。事实证明:健康和谐的校园文化能给师生创造一个有形而庄重的“磁场”,能在无形中统摄全体师生的灵魂,起到“润物细无声”的教育魅力。它具有陶冶性情、规范行为,培养健全的人格,促进健康的心理、养成良好的习惯;还有利于培养学生正确人生观、价值观、世界观;还可以增强学生集体意识、竞争意识、创新意识;因而,校园文化在学生思想品德教育和良好行为习惯中发挥着独特的作用,校园文化建设是社会主义精神文明的需要,也是学校素质教育的需要,它在学校育人过程中发挥着不可低估的作用。
职业教育是我国教育体系中一个重要的组成部分,是我国国民经济和社会发展的重要基础。职业院校是与当今社会经济发展相适应而存在的,其校园文化建设有其自身的特点。
首先,从职业院校的性质来看,它不同于普通中小学,也不同于普通高校,它主要培养生产、经营、管理、服务一线的高素质技术人才。它以“以服务为宗旨,就业为导向,以能力为核心,以学生为本位”。它要将教、学、做贯彻于教学始终,培养社会职业人,因而,职业院校的这些特质决定了其校园文化的特殊性。
其次,从学生主体来看,有其独特的“个性”。这些学生有理想,有报负,有上进心,有求知欲,有为目标的实现不懈努力的精神。但由于他们基本上都经历了升学的挫折,在求学过程中有特殊的经历,与其他同龄人相比,更加敏感,自尊心更强,在遇到困难时易放弃,学习、生活中常常表现出更多的困惑、自卑,行为习惯不佳,因此他们需要更多的关注、爱护。他们渴望尊重、赏识,渴望立业、成功。那么,要把这些特殊的培养主体培养成合格的职业人才,加强职业院校校园文化建设势在必行。
二、职业院校语文课程的特殊性
语文课作为各类学校教育开设的一门公共基础课,它在人才培养过程中发挥了其他课程无法替代的作用,彰显了自身独特的魅力,在整个课程体系中具有独特的价值,而职业院校的语文课程更具有特殊性。
第一,它不同于中小学基础教育阶段,主要是夯实学生语言文字的基础,培养学生阅读、理解、表达、写作的能力,为今后高层次的教育打下坚实的基础;也不同于普通高校的语文课,主要是培养学生的文学素养,提高人文精神和综合素质;在职业院校,语文课主要为专业课服务,突出人文性、工具性,将人文素质教育浸透于语文教学的始终,并以此提升职业能力和职业素养。同时培养学生思维的开放性、创造性及解决问题的主动性、自觉性,为学生可持续发展奠定良好的基础。
第二,在职业教育的过程中,语文课与其他学科相比,它是通过形象生动的经典美文的教学,语文实践活动的开展,来净化学生的心灵,陶冶学生的性情,使之养成良好的习惯,形成健康人格,同时还培养了学生分析问题、解决问题的能力及交际沟通能力,从而全方位地提高学生的综合能力。
第三,从教育对象需求来看,更需要校园文化的熏陶和感染。这些教育群体,在学习理念上,注重专业课,轻视公共课;注重眼前利益,忽略长远发展的潜能;往往把人的职业性和社会性割裂开来。同时,学生的文化基础较差,学习习惯、行为缺失严重,面对这一特殊的对象,只有通过寓教于乐的方式,采取学生乐于接受的方式,激发学生的主动性、积极性,鼓励他们参与课堂,参与实践,从而培养学生的团队协作精神和竞争意识,培养学生的语文素质和能力。职业院校语文课的特殊性决定了它在职业院校校园文化建设中独特的地位和作用。
三、职业院校校园文化建设中语文课程功能研究的可行性
(一)以校园环境为阵地,发挥语文课程在校园文化建设中的作用
学校无闲处,处处熏陶人。陶行知先生说:“一草一木皆是情。”苏霍姆林斯基说过:让校园的每一块墙壁都会“说话”。环境不仅是学生生活的空间,也是培养学生文明素质的载体。整个校园,就是思想品德教育的大课堂,要让学生视线所到的地方都赋予生命。在这一特定的校园环境中,语文课程在校园文化育人中发挥着独特的作用。因为不论是有形环境还是无形环境中都是以语言文字为载体彰显思想,交流情感,滋润心田。如校园宣传栏、警示标语、教学大楼的布置、教室内外的名人名言、学生的学习园地、校园题词、校训、教学仪器使用的注意事项等等都承载着校园文化的内涵。这些感人肺腑的语录,鼓舞人心的题词,鞭策言行的语言都凝聚着前辈们或广大教育工作者的思想,其目的是让学生在浓郁的文化环境中得以感染、陶冶、净化,从而明事理、懂礼仪、知廉耻、辩是非、晓丑恶,最终形成正确的人生观、价值观、审美观。因而,在校园环境建设中,语文课有其得天独厚的优势。
(二)以课堂教学为阵地,发挥语文课在校园文化中的建设作用
语文课不同于其他课程,它是以生动的形象影响着学生,以思想情感感染学生的。不论是指导学生学习弘扬传统文化的经典作品还是现当代时尚美文,在学习过程中,作品深刻的思想情感总能触动学生的情思,震撼着学生的心田,洗礼着学生的灵魂,不知不觉,学生会用榜样人物鼓励自己,用成功的事实鞭策自己,用正确的人生道理指导自己。因而,语文课教学过程就是心灵净化,境界提升、性情陶冶的过程,是接受真善美,拒绝假恶丑的过程,是完成自我成长的过程,是激发学生创造力和生命力的过程。也许只是一次感动就改变了学生的世界,也许只是一次启发就成就了学生的将来,也许只是一次鼓舞就让学生抛弃了自卑。总之,语文课独特的人文性是其他课程不可比拟的,也是校园文化建设中主要的内容。
(三)以丰富多彩的校园活动为阵地,发挥语文课在校园文化建设中的作用
活动是学校生命力所在,是对学生进行思想教育的有效载体。而校园活动又是语文课最好的实践活动。也是加强校园文化建设中的一种行之有效的形式。如在传统节日,法定节日开展丰富多彩、形式多样的诗文朗诵、演讲、辩论、主题班会、讲故事等,既丰富了校园文化,又对学生进行了爱国主义、集体主义、社会主义、中华民族精神的教育。如在“学雷锋活动”、运动会、教师节等活动中,鼓励学生撰写倡仪书,通讯稿件等,既增强校园文化的氛围,又加强学生的思想道德教育。也可以在课余生活中,要求学生创办主题鲜明的黑板报、校刊、校报,撰写广播稿,这既锻炼了学生主动创作的能力,又使学生获得心灵上的满足。因而,充分发挥语文课在校园文化建设中的作用不仅必要,而且可行。
(四)从学生自身发展、成长的历程中渴求一种沁入心脾的校园文化的滋养,而语文课更具有利的条件
作为职业院校的学生,个性鲜明,有理想、有活力、有上进心,但由于社会阅历所限,升学诸多挫折,加之成长中的种种困惑,感悟能力等诸因素的影响,他们对美好人生的追求有很多不解,对美的事物理解仅停留在表面。为此,语文课可以结合职业院校学生的实际,举办形式多样的美学、礼仪、职业生涯规划,交际等讲座。同时,采用学生参与互动的形式,用优秀社会价值观念、道德标准、行为模式感染学生使其树立信心和远大的目标,用知识、礼仪、修养武装他们,让他们真正明白:只有作为,人生才是美好的,虚度年华,碌碌无为,实在是对生命的浪费,对父母的不孝,对社会的不恭。因此,以学生心理情感需求为出发点,发挥语文课在校园文化建设中的作用也是可行的。
(五)以加强师德建设为阵地,发挥语文课程在校园文化建设中的作用
前苏联教育家乌申斯基说:“在教育中,一切都应以教育者的人格为基础……,只有人格才能影响人格的发展和形成。”在学生面前,教师就是一本无字德育书,学生时刻都在阅读。教师是立校之本,而师德师风则是教育之魂。要使学生成为品格高尚的人,就必须加强师德建设。因此,通过举办教师学习班、组织教师参加各种活动,树立良好的师德,规范教师的言行举止,感染学生的行为,养成良好的教风。而这些加强师德的活动,也是以语言文字为载体而具体实施的。因而,语文课在教师师德师风促校园文化建设中发挥着独特的作用。试想一下,一个知识浅陋,语言粗俗,举止不雅,品行不端的教师怎么能培养出德才兼备的学生。因而,以加强师德建设为阵地,也可以发挥语文课程在校园文化建设中的作用。
(六)从学校培养人才的目标出发,发挥语文课在校园文化建设中的作用
学校的天职是为社会培养大量合格的人才。而学校不论是制度文化还是精神文化都以语言文字来承载。著名的教育家乌申斯基说过:一个民族把自己全部的精神生活的痕迹都珍藏在民族的语言里。语文是民族文化的载体,文化的抽象与概括,外延与传递,都必须借助语文这个工具和载体。因而,对学校而言,其校园文化都是以语文为工具,承载着思想、情惑、价值趋向,发挥着独特的育人的效力。不论是校报、校刊、校园宣传栏布置,校园设计,还是校园规章制度,学校各项文件,都传达出校园文化的精华,竭尽全力地为培养职业人才服务,而校园的这一切活动和文化熏陶都离不开语言文字的承载。因而,语文课程在学校育人的整个过程中,渗透着校园文化的内涵,发挥着应有的作用。
(七)从社会对人才需求的角度,发挥语文课程在校园文化建设中的作用
职业教育是我国教育的一种类型,它主要是培养一大批面向生产、经营、管理、服务第一线的高素质技能型人才。社会对这些学生的要求不仅包括应具有综合素质,还包括要具备综合能力,因此,良好的职业素质和职业能力是学生在今后职场的激烈竞争中立于不败之地的关键,他们必须具有社会人和职业人的属性,这也是职业院校校园文化建设中必须明确的因素,在今后的职场上除了拥有精湛的专业技能,还应具备沟通、交际、读写,应变等相关能力,而这些能力绝大多数依赖于语文课程的训练才能实现。考虑学生的就业和将来的发展,就必须在校内根据社会对人才的需要来对其进行培养,而其中语文课程较之于其他课程更有先天性的优势。
总之,校园文化建设是各类学校高度关注的一项内容,它关系整个校园的生存和发展,与学校的办学质量联系在一起,是学校重要的可持续发展要素之一,它以形象直观的表达方式,把思想教育寓于各种具体可感的情境中,而语文课程以其独特的性质和形式在校园文化建设中发挥着重要作用。只有充分挖掘这一资源,利用这一资源,才会使职业院校校园文化的内容更丰富,形式更多样,效果更显著。
(本文系陕西省教育科学“十二五”规划2012年度课题 编号:SGH12568)
参考文献:
[1]杨文钦.高职语文与校园文化建设探讨[J].漯河职业技术学院学报,2009,(06).
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摘 要:目的:观察肺瘤平膏及其拆方干预体外培养体系中Dc抗原递呈功能的作用并探讨其分子机制。方法:建立体外人血PBMc诱导分化成熟Dc的诱导培养体系,从健康人外周血中分离获得PBMC,采用多种细胞因子(TNFα、IL-4、GM-CSF)联合诱导,获得了分化与功能相对成熟的DC,并采用流式细胞仪检测技术,对肺瘤平膏及其拆方含药血清干预成熟DC与抗原递呈功能相关表面分子表达,及其对DC分泌IL-12水平影响进行初步研究。结果:肺瘤平膏可上调DC与抗原递呈功能相关膜分子MHC-Ⅱ、CD80、CD83、CD86及CD40的表达,并促进Dc分泌IL-12水平,其芳中扶正部分的作用不容忽视。结论:在扶正培本治则指导下的肺瘤平膏能够调节DC抗原递呈功能,提高机体的抗肿瘤免疫监视功能。
关键词:树突状细胞:肺瘤平膏:抗原递呈
树突状细胞(Dc)是目前体内已知功能最为强大的抗原递呈细胞(antigen presenting cells,APC),其最显著的特征是能摄取、加工及递呈抗原,刺激初始型T细胞(naive Tcells)的活化和增殖,从而启动机体早期特异性抗肿瘤免疫应答。由于DC对细胞毒T细胞(CTL)识别并杀伤肿瘤细胞,以及正常机体免疫监视功能有着十分重要的意义。本研究通过对肺瘤平膏及其拆方干预健康人外周血经多种细胞西子(TNFα,IL-4、GM-CSF)联合诱导分化成熟DC膜分子表达,揭示该药调节早期抗肿瘤免疫作用机制。
1 材料和方法
1.1 材料
正常人新鲜浓缩白细胞:由北京市红十字会中心血站提供。
1.2试剂及仪器
Ficoll,Biosciences公司提供;Foetal calf 8erlLrn,Sigma公司提供;MHC-Ⅱ(FITC)F-Mab、CD40(FITC)F-Mab、CD80(FITC)F-Mab、CD83(PE)F-Mab、CD86(PE)F-Mab由Biolegend公司提供;rhTNF-α、rhIL-4、rhGM-CSF由TBDSCIENCE公司提供;IL-12兔抗人ELISA试剂盒,由武汉博士德生物工程有限公司提供。
FACSort流式细胞仪,美国Becton Dickinson公司生产;LP400型全自动酶标仪,为法国巴斯德公司产品。
1.3 方法
1.3.1 肺瘤平膏及其拆方含药血清的制备分别制备肺瘤平膏全方、益气方(黄芪、党参)、解毒方(白花蛇舌草、草河车、败酱草)、益气解毒方(白花蛇舌草、草河车、败酱草、黄芪、党参)中药的含药血清,具体方法如下。
①药物:肺瘤平膏,由中国中医科学院广安门医院制剂中心统一制备,批准文号:(98)京卫药研字[058]DF-1657号;经生理盐水稀释为终浓度为1.71g/mL后备用。其余各拆方草药均购自广安门医院中药房,剂量以原方为准,制成浸膏后备用,其终浓度为分别为含生药2.32、3.62、2.77g/mL。②动物:大白兔。③血清采集方法:大白兔随机分为5组,分别于空腹时灌服生理盐水和各组中药汤剂10mL,中药用药剂量均按照动物体表面积折算成等效剂量,连续给药4天,共计7次,末次给药后2h从兔耳缘静脉采血8-10mL,离心取上清夜,将同组兔血清混合,56℃水浴灭活30min,0.22μm微孔滤膜除菌,分装,置于-20℃冰箱中保存。
1.3.2 DC的培养与鉴定①DC培养:采集正常人外周血浓缩白细胞,Ficoll―Hypaque密度离心分离PBMC,将经分离得到的PBMC,置入37℃5%CO2培养箱中培养2h。采用贴壁法,去除巨噬细胞,加入含有细胞因子完全PMI一1640液(含IL-4 IOOU/mL、GM-CSFIS0ng/mL、TNK-αS00U/mL)。置入37℃,5%C02培养箱中培养,隔日半换液。在倒置显微镜下每日连续观察细胞的生长状态及形态变化。待成熟后,1%胎盘兰染色,光镜下细胞计数后,根据需要,将细胞数调整到1×106/mL备用。分别用MHC-Ⅱ(F1TC)、CD80(F1TC)、CD83(PE)、CD86(PE)、CD40(F1TC)标记后,常温下静置30min,加入PBS,1500r/min,10离心洗脱,流式细胞仪检测其纯度及表达。
②DC形态学特征及组化鉴定:光镜下形态学特征观察:于倒置显微镜下,每日观察细胞的生长状态及形态学变化,并拍照记录。扫描电镜观察:将培养第10天收获得到的DC滴于多聚赖氨酸包被的玻片,37℃温育4h后,用2.5%戊二醛固定1h,0.01M PBS冲洗3次后,1%锇酸固定90min,梯度30%、50%、70%、90%、100%乙醇脱水,扫描电镜观察细胞形态,摄片。
S-100蛋白免疫组化染色:吸取培养第10天的DC。均匀涂片,I抗用鼠抗人S-100单克隆抗体,按SABC-AP常规免疫组化方法,进行染色。对照组用PBS代替I抗。中性树酯封片。光镜下观察200个细胞并计算阳性细胞的百分率,摄片。
1.3.3 DC表面分子流式细胞仪检测成熟DC分为6组:全方组、益气方组、解毒方组、益气解毒方组、DC对照组及单核细胞组。于DC培养第4天,细胞中加入相应的中药含药血清1mL,空白血清组加入不含药血清lmL,终浓度约为17%;DC对照组及单核细胞组中加入不完全1640液1mL;隔日半换液。每日倒置显微镜下观察其生长状态及形态的变化。
采用双标法,将培养第10天PBMC及IX:分别采用MHC一Ⅱ(FITC)、CD80(FITC)、CD83(PE)、CD86(PE)、CIMO(FITC)FITC威PE标记的荧光探针,常温避光,反应30min。洗脱未结合探针,流式细胞仪测定。FITC―IgG1、PE-IgGl阴性参照抗体(购自Biolegend公司)。同样实验重复3次,取均值,记录结果。
1.3.4 DC培养上清分泌IL-12水平的检测于培养第10天收集各组DC,离心后吸取上清,按照人血清IL-12ELISA试剂盒说明书,常规操作;室温下,用酶标仪于530nm波长处,检测OD值;根据标准曲线,换算成IL-12含量(pg/mL)。
1.4 统计学方法
采用t检验和方差分析。
2 结果
2.1 DC鉴定
2.1.1 人外周血来源DC的形态学特征观测 倒置显微镜观察:在培养初期细胞贴壁生长,有的呈簇状聚集,第3日细胞逐渐散开,并从壁上脱离,细胞形态各异,有的呈梭状,以悬浮生长为主。培养5天后,胞体明显增大,大小约
为单核细胞的2-3倍,形态不规则,异型性较大,细胞表面伸出伪足或呈毛刺状,呈现典型的树突状细胞形态特征。扶正方组细胞体积及核仁增大明显,有的细胞伸出较长的树枝样突起;而未经对照组的DC,仅个别细胞有突起,胞体也较前为小解毒方组细胞贴壁较多,生长状态欠佳;其他各组细胞在数量和形态上与对照组无显著差异。
2.1.2 DC扫描电镜形态学特征扫描电镜下可见,成熟DC细胞形状不规则,细胞表面可见大量的折叠结构,可见球茎状,泡状,薄片状,丝棒状等突起,长短粗细不一。
2.1.3 DC表面分子S-100蛋白免疫组化染色光镜下观察,阳性细胞浆着色较深呈紫红色,胞核为淡橙红色,胞体不规则,边缘有突起。细胞阳性率>99%。
2.1.4 体外单核细胞与成熟DC膜表面分子表达的变化在富含GM-CSF、TNFα、IL-4的诱导体系中培养10天,与非诱导培养的PBMC比较,成熟DC表达MHC-Ⅱ+99.5%、CD80+99.2%、CD83+99.42%、CD86+93%、CD40+96.96%。而体外培养的单核细胞低表达MHC-Ⅱ41.1%、CD80 27%、CD40 28%,不表达或极低表达CD83、CD86及分子等成熟DC的膜表面标志。
2.1.5 肺瘤平膏及其拆方对DC膜表面分子表达的影响经诱导培养第10天,对照组DC与PBMC比较,膜表面高表达MHC-Ⅱ及CD80、CD83、CD86、CIM0等共刺激分子,与成熟DC抗原递呈功能相关各膜分子的荧光强度显著升高。其中以MHC-Ⅱ、CD86、CIMO于DC表面荧光强度最高。益气组对上述DC膜分子表达的影响优于其他拆方组,而解毒组则呈现抑制DC表面分子表达的趋势,但益气解毒组则上调DC膜表面分子的表达。结果表明,肺瘤平膏可明显上调DC膜表面与抗原递呈相关的膜分子的表达水平,方中益气组的作用最为明显。
2.1.6 肺瘤平膏及其拆方对体外培养DC分泌IL-12功能的影响经诱导培养第10天,DC。与PBMC比较,IL-12表达量明显升高(P<0.05)。中药含药血清可明显促进体外培养DC的IL-12分泌水平(P<0.05或0.01),其中益气组优于对照组。结果表明,扶正中药(益气为主)可促进DC体外IL-12的分泌。
3 讨论
3.1 人外周血DC培养体系的建立
笔者采用密度梯度离心及贴壁法收集并分离人外周血单核细胞(PBMC),采用粒细胞一巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)、白细胞介素-4(IL=4)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)联合刺激培养体系,诱导DC的增殖与分化。体外培养第9-14天,S-100蛋白免疫组化染色,倒置显微镜、扫描电镜、激光共聚焦显微镜成像观察,表现为典型的成熟DC的形态学特征。ELISA检测DC的IL-12分泌水平,流式细胞仪表面标志分析结果均证实,经该法诱导成熟的DC高表达与抗原递呈功能相关的IL-12,表面分子MHC-Ⅱ、CD80、CD83、CD86、CD40。其中CD40分子的表达率(96.96%)明显高于国内报道(44%),可能与细胞因子的比例不同有关。以上研究结果表明采用本方法建立的体外培养体系是稳定和成功的。
3.2 拆方研究的必要性
拆方研究是近年来研究中药复方药理学的常用方法,已有许多关于中药复方拆方研究实验药理学研究的报道。多数研究是通过拆方比较药理作用的差异,阐述方中药味对全方药理作用的贡献和地位。拆方研究不仅有助于解释中药复方的配伍、组方的科学意义,还有助于揭示中药复方的作用机制。一般认为,中药复方的药理作用是方中药物所含多种成分作用的综合效应,其中多种成分的相互作用与其药效的最终表现具有密切关系。拆方研究为全方药理作用和作用机制的研究提供了一个视角,可获得许多信息,因此拆方研究不仅对于阐述中药复方的配伍原理有所帮助,也是中药复方药理作用机制研究的一个重要手段。本次研究依照肺瘤平膏的立法原则,将原方拆解为益气方、解毒方、益气解毒方,通过观察肺瘤平膏及其拆方对树突状细胞抗原递呈功能的影响,探究扶正培本治则在肿瘤治疗中的地位,以期更好地指导临床实践。
3.3 肺瘤平膏及其拆方对DC抗原递呈功能的影响
在DC刺激T细胞活化中,需要由MHC-Ⅱ及TCR/CD3介导的特异性抗原刺激,以及T细胞与抗原递呈细胞(APC)膜表面共刺激分子对的结合,即双信号的刺激。成熟DC组成性高表达MHCⅡ分子,高表达黏附分子和共刺激分子CDS0(B7-1),CD86(B7-2),CD40,CD54(ICAM-1),CD44等是其递呈特异性抗原并有效活化T细胞的分子基础。其表面分子的表达水平也是衡量DC成熟与抗原递呈功能的重要标志。为中西医结合调节DC抗原递呈功能的应用与研究提供了重要的切入点。
通过对中药复方含药血清干预体外培养人外周血DC表面分子表达的研究,初步证实扶正中药(益气为主)可明显上调DC膜表面分子MHC-Ⅱ、CD80、CD83、CD86及CD40的表达水平,从而促进DC的成熟与分化;而祛邪中药(解毒为主)对DC膜表面分子CD83、CD86的表达有下调趋势,不利于DC的进一步成熟,但当此两组中药合用的时候,CD83、CD86的表达又得到上调;全方的DC膜表面分子表达水平最高。本研究显示,以益气为主的扶正中药可明显促进体外培养DC的IL-12分泌水平,说明该复方发挥抗肿瘤免疫调节机能的作用机制之一可能与益气药物促进DC分泌IL-12的水平有关。