数字经济的表述范例6篇

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数字经济的表述

数字经济的表述范文1

关键词:经济技术指标体系;标准类型;计量指标;有机整合

中图分类号:F326.2文献标识码:A文章编号:16749944(2014)10006103

1引言

森林资产评估的经济技术指标体系是森林资产评估的核心技术。本文将这种体系建立过程及方法的要点进行介绍。

2目的、原则及要求

2.1目的

为森林资产评估提供森林资产的成本耗费与收益的计量指标依据。

2.2原则及要求

(1)科学性原则。按全面系统地反映森林资产评估过程中所涉及的各项计量指标的要求,首先必须建立完整的、有结构的、有层次的科学指标体系框架。

举例1,用材林:第一层,a森林经营计量指标,b间伐计量指标,c主伐计量指标。第二层,a中有:①造林计量指标,②未成林造林地抚育管理计量指标,③幼龄林抚育管理计量指标,④幼龄林后抚育管理计量指标;b中有:①间伐采伐计量指标及林地清理计量指标,②间伐集材计量指标,③林分单位蓄积计量指标,④间伐量计量指标;c中有:①成熟林单位蓄积计量指标,②出材量计量指标,③各采伐类型的计量指标,④主伐集材计量指标。第三层,在第二层中的各工序段的计量指标。

举例2,经济林:第一层,a营造林计量指标,b始产期计量指标,c盛产期计量指标,d衰产期计量指标。第二层,a中有①营造林计量指标,②产前期抚育管理计量指标;b-c中有①经营管理计量指标,②产出计量指标,③采收计量指标,④年限计量指标;d中除同b-c外,还有残值计量指标。第三层,在第二层中的按年份的各工序段的计量指标。注:计量指标数据基础来自工序,但是体系中的计量指标单位是以年度的工序段中的各工序并合计量。

其次森林的标准类型划分要科学合理,既涵盖所有的森林类型,又简单明了,而且同样一标准类型内森林生长过程基本一致,物耗工耗一致。例如,湖北省的马尾松林只在山坡地、风积母质和石砾土这三种立地条件下营造,其中山坡地和风积母质生长的马尾松只是用材林,而且培育目的为中径材,石砾土上生长的马尾松的经营目的都为水土保持。因此湖北省的马尾松林只划为这三种标准类型[1]。

(2)客观性原则。标准类型森林生长各阶段状况要求有相对应的物耗与工耗,两者之间的关系有潜在性。体系中的数据包括物耗指标、工耗指标与收益指标都要求来源于调查研究,并且要求通过实践反复验证,不断发展完善。评估数据来源于设计、预测并长期将其固定不变,其客观性存在置疑。

(3)先进性原则。依据科学技术的不断发展与社会的不断进步,指标体系要体现先进的生产力水平。先进的生产力意味着以较小的成本耗损,取得较大的价值效果。

(4)公认性原则。公认性原则是建立在科学性和客观性原则基础之上的,如果体系不科学客观,人们从根本就不认可。有了科学性和客观性的基础,指标的表现形式应大众化、传统化、简明化,才能获得人们的公认。

(5)权威性原则。体系建立要求一批长期从事林业工作并确有丰富的实践经验的专家来完成,并要求相关权威机构鉴定颁布。例如,《湖北省森林经济技术主要指标》是湖北省林业勘察设计院历代专家的共同努力,由全省各地的富有实践经验的林业工作者协助完成,并由国家林业局组织有关专家鉴定行文确认。

3体系建立程序

3.1收集整理资料

必须收集的资料:

(1)“一类清查”资料与“二类调查”资料;

(2)国家频布的森林调查技术与林业规划设计规程;

(3)当地的主要造林模型;

(4)当地的林业用工指标;

(5)当地的林业区划成果资料;

(6)其它的有关资料。

熟悉整理资料:

(1)通过查阅“一类清查”、“二类清查”资料和林业区划成果资料等,掌握林种、树种生长状况、分布规律及与环境的关系,掌握林业用地土壤的性状、种类及分布规律,掌握立地条件与立地类型的关系;

(2)通过查阅造林模型、调查技术和规划设计规程等资料,掌握林业成本耗费项目种类及内容;

(3)通过查阅林业用工指标及其它有关资料,掌握各工序类别及工序流程分录内容。

然后,将掌握的情况行文整理。

3.2制定工作方案

(1)技术方案:明确工作任务、内容和要求。

(2)进度安排:明确工作质量,工作程序,各阶段进度要求,完成期限。

(3)分工合作:人员安排,任务分工,质量要求,组织协调。

3.3运用头脑风暴法,划分森林标准类型,组建体系框架

将阶段性工作成果汇总后,召开专家会议,面对面地答辩,研讨各种森林标准类型和体系枢架的科学性,确定各个经济技术指标表的项目栏,调整各项目栏的各工序流程分录的内容,然后将专家统一意见制定成问卷调查表。

3.4运用德尔菲法,进行指标计量

(1)将问卷调查表分发给不少于30个林业基层生产单位,进行调查征询意见。

(2)将调查结果汇总,评判离散度。

(3)将整理好了的调查结果汇总情况反馈给各生产单位,再次调查,征询意见。

(4)将第二次调查结果汇总,评判离散度。如此循环,直到离散度达到满意止。

3.5再次运用头脑风暴法,形成指标体系

召开专家会议,将生产单位的指标计量进行一致性研究,并进行调理,达到合理、科学、客观的要求。然后,将各层次指标进行有机组合,形成森林资产评估的经济技术指标体系。

3.6实践检验,反馈调节

将体系中的指标放到生产实践中逐一多次检验,并形成检验记录。将检验结果的统计分析情况提交给专家会议进行研讨,给系统作出相应调整。

3.7权威机构组织鉴定,颁布生效

由技术权威单位按以上程序建立的指标体系,应提交给权威机构组织鉴定。权威机构频布体系的鉴定结果,以形成指标的法定效力。

4关键技术要点举例

4.1造林指标栏

决定造林成本耗费的主要因素,造林方式、整地、土石方开挖难易程度、苗木价格等。

造林方式为机械造林和人力造林。机械造林成本较低,效果好,适宜在坡度35°以下。

机械造林的工序流程分录为:①地面清理,②道路整修,③机械准备,④机械进入场地,⑤机械施工,⑥机械进库,⑦机械保修,⑧苗木准备,⑨植苗填土,⑩浇水。

工耗有:①地面清理,②道路整修,③机械准备,④司机台班,⑤机械保修,⑥苗木准备,⑦植苗填土,⑧浇水。

物耗有:①机械折旧,② 工具损耗,③油耗,④苗木,⑤肥料,⑥农药。

成本耗费:①设计费,②管理费,③不可预见费,④工耗成本,⑤物耗成本。

因此,造林指标栏中的成本耗费分栏只要物、工、费3个基本栏,其它分栏为:造林方式、株行距、开挖方式、苗木规格等。

2014年10月绿色科技第10期

李正明,等:森林资产评估的经济技术指标体系建立资源与产业

4.2用材林经营主要经济技术指标表格式

用材林标准类型的经济技术指标包括森林经营经济技术指标、间伐经济技术指标、主伐经济技术指标和生长过程指标。用材林经营主要经济技术指标包括造林指标、未成林造林地抚育指标、幼林后管护指标。

4.3主伐经济技术指标表格

主伐经济技术指标包括伐倒到路边集材全过程的木材生产成本耗费,其数额主要取决于采伐方式、集材方式、地形地貌、木材种类及径级等(表2)。采伐机采伐比油锯采伐效率高成本低,但坡度要求40°以下,并且生产规模要求达到一定程度,此外还受主伐种类的限制。

另外,还有标准类型森林生长过程表、标准类型经济林收获量表及经营经济技术指标表等,不再逐一举例。

表2 主伐经济技术指标表格式单位:元/m3

树种平均胸径地貌坡度级主伐种类采伐成本方式费用集材距离方式费用林地清理方式费用

合计

5小结

(1)依据科学性、客观性、先进性、公认性与权威性原则和要求,建立森林资产评估的经济技术指标体系,需要林业权威单位花费大量的人力、物力经相当长的时间,由当地众多有代表性的基层林业生产单位的协助配合,才能圆满完成。

(2)工序流程是指标计量的基础,标准类型森林指标是体系的基本单位,各经济技术指标表是体系的结构功能单位,由一系列这种既有联系又有区别的结构功能单位有机地联成一整体,就形成了森林资产评估的经济技术体系。

(3)经权威机构鉴定与颁布的指标体系,可以为规范林业资产评估人员引用经济技术指标的行为提供法定依据。

数字经济的表述范文2

关键词:电子商务 常设机构 认定 综述

一、研究的总体情况概述

笔者选择"电子商务"、"常设机构"、"认定"等为题名或管检测,在中国知识资源总库--CNKI 系列数据库检索了相关文献,提出非学术性文献及重复文章后,得到专题研究的期刊论文60余条。

对所载文献的内容进行分析,笔者发现,目前学界和业界争议较多的问题集中在"常设机构原则能否使用与跨国电子商务活动"、"服务器或网址是否构成固定营业场所"和"网络提供商是否构成营业人,进而构成常设机构"这些问题上。

二、相关研究焦点梳理

(一)常设机构原则能否适用于跨国电子商务活动

对于跨国电子商务活动所产生的跨国营业所得,是否可以按照现有的国际税收协定中确定的常设机构原则确定征税权的划分?针对这个问题,本文将有关国际组织的观点进行了总结如下:对于国际互联网上开展的电子商务活动中的税收问题,有关的国际组织,特别是OECD给予密切关注。OECD的财政事务委员会(CFA)就此问题展开了一系列研究和讨论活动。1997年11月,OECD在芬兰的图尔库举行讨论会,最终的阿城一致意见,即:OCED税收协定范本中有关常设机构的概念同样可以适用于跨国电子商务活动,但是需要进一步明确如何适用。

综上所述,当前普遍的观点是:对于跨国电子商务活动中产生的跨国营业所得的征税权划分,仍然适用现行的常设机构原则。

(二)常设机构的认定

虽然大多数学者和国家及国际组织都持继续保留"常设机构"原则的观点,但针对电子商务的特殊性,对现有常设机构认定标准的修改问题,学界又是中说纷纭。以下是我国学者对"与电子商务有密切联系的服务器、网址和因特网服务提供商能否构成电子商务环境下的常设机构"这些具体争议焦点的看法总结:

1、服务器能否构成常设机构的问题

通过对所参考文献进行总结归纳,笔者发现,绝大多数学者认为服务器构成固定营业场所。笔者在此将其中较主流的观点归纳如下:

黄素梅(2006)认为,首先,服务器是硬件且有形,在一般情况下较为固定,不论是直接所有或租赁,频繁更换服务器的成本都很高。因此,即使按照传统的常设机构认定标准,它也具备了构成常设机构的物理条件;其次,服务器及人员的存在并非构成"常设机构"所必需的,即使在传统商务领域,是否有人参与经营也不是构成常设机构营业活动的必要条件。因此,服务器可以构成固定营业场所。①

2、关于网络服务提供商能否构成常设机构的问题

朱炎生(2001)认为,经合组织财政事务委员会没有完全排除网络服务提供商成为其他企业常设机构的可能性。如果某个网络服务提供商向某个企业提供维持网址服务过程中,草畜其营业常规,例如有权以该企业的名义与他人签订合同并经常行使此项权利,那么该网络服务提供商将构成该企业的常设机构。注释第42.10段的第4句话清楚地指出来这种可能性。②苏宁华(1998)认为,我国在签订国际税收协定时,应明确提出一个营运人及时无权为本公司对外签订合约,但只要经常为这个企业包邮库存并交付货物或商品,应视为常设机构。因为该人已具备盈利的作用,不再符合辅、准备性的精神。③

三、简要评述和展望

(一)服务器构成常设机构的认定

针对电子商务环境下常设机构的认定标准,有的学者主张作较大改革,如预提税、虚拟常设机构及公式利润分配等方案;有的主张小调整,如人的干预、引力原则、取消例外及软件功能例外等方案,这些观点各有优缺点。为了维护我国税收权益,我国可以认定服务器构成常设机构,而网络服务供应商(ISP)以及网址在一定条件下构成常设机构。

我国可以借鉴OECD观点,在税收协定中规定:如果外国销售商通过设在我国的服务器(包括购买和租用)从事了实质性的营业活动,则该服务器应当认定为常设机构。

(二)网络服务供应商构成常设机构的认定

我国在税收协定中应明确规定,如果网络服务供应商有权代表企业签署契约、经常代表其从事实质性营业活动、或者全部或几乎全部为某个销售商提供网络服务,则构成在我国的常设机构,我国可以从源征税。

当然,以上规则的实行存在一些制约因素。首先,修改现有对营业利润征税的规则将会比单纯改变国内规则更困难,需要的时间也更长。其次,许多国家除了必须修改国内法外,还要修改税收条约与协定,如果通过重新谈判方式进行的话,耗时很久。第三,即使修改现行规则,在过渡时期里,新旧规则的并存也将增加双重征税和不征税情形的发生。上述问题的解决需要与我国签订税收协定的当事国予以协商、合作,对此遇到的重重困难,我们必须要有一个正确的认识。

注释:

①黄素梅:电子商务中常设机构认定标准的新发展[J].国际税收.2006(8).

②朱炎生:跨国电子商务活动中常设机构的认定经合组织观点述评[J].涉外税务.2001(5)

③苏宁华我国跨国营业所得课税中常设机构的认定及完善〔J〕.涉外税务1998 (8).

参考文献:

[1] 黄素梅:电子商务中常设机构认定标准的新发展[J].国际税收.2006(8).

[2] 朱炎生:跨国电子商务活动中常设机构的认定经合组织观点述评[J].涉外税务.2001(5)

数字经济的表述范文3

【关键词】肾盂输尿管交界处狭窄;腹腔镜;TGF-β1;β2-微球蛋白

【中图分类号】R69 【文献标识码】A 【文章编号】1004-7484(2012)12-0027-01

肾盂输尿管连接部梗阻(UPJO)是先天性肾积水的最常见原因之一[1],其发病机制目前尚不明了,以往对于先天性输尿管肾盂连接部梗阻的诊断及术后恢复的评估都依赖于放射影像学,如静脉肾盂造影、放射性同位素肾造影术等,这些检查都使患者暴露、接触到放射性物质,从而损害其身体健康。因此寻找安全、无创的方法至关重要,本研究检测后腹腔镜肾盂成形术前后患者尿液TGF-β1和β2-微球蛋白的水平变化,现报告如下:

1材料与方法

1.1临床资料

选择我院2010年1月至2012年9月确诊的肾盂输尿管交界处狭窄的住院患者,其中男性10例, 女性 14例; 年龄9岁-39岁,年龄21.8+5.9岁。所有患者入院时均行泌尿系彩超、泌尿系三维重建及肾盂分泌造影检查,无手术禁忌症,分别于术前及术后留取患者的尿液。

1.2 实验材料

酶标板:96孔已包被抗人TGF-β1和β2-微球蛋白单抗、样品稀释液、第一抗体工作液(生物素化的抗人TGF-β1和β2-微球蛋白抗体)、酶标抗体工作液(辣根过氧化物酶标记)、底物稀释液、终止液、洗涤液(双蒸水1:20稀释后应用)、标准品(冻干粉,4000pg/ml)、OPD片、坐标纸、封板纸。

1.3酶联免疫(ELISA)方法检查

1.3.1 取-20℃保存尿样

1.3.2 建立标准曲线:设标准孔8孔,每孔中加入样品稀释液100μL,第一孔中加入标准品100μL,混匀后用加样器吸取100μL移至第二个空,之后如上重复对倍稀释至第七孔,最后从第七孔中吸出100μL弃去,第八孔为空白对照,各孔中体积均为100μL。

1.3.3 加样:待测样品孔中每孔各加入待测样品100μL.

1.3.4 将反应板置于37℃120分钟

1.3.5 洗板:用洗涤液将反应板充分洗涤4-6次,向滤纸上印干

1.3.6 每孔种加入第一抗体工作液50μL.

1.3.7 将反应板充分混匀后置37℃60分钟

1.3.8 洗板:用洗涤液将反应板充分洗涤4-6次,向滤纸上印干

1.3.9 每孔种加入酶标抗体工作液100μL.

1.3.10 将反应板充分混匀后置37℃60分钟

1.3.11 洗板:用洗涤液将反应板充分洗涤4-6次,向滤纸上印干

1.3.12 每孔种加入底物工作液(显色前5-10分钟将OPD片放入5ml底物稀释液中溶解)100μL,置37℃暗处反应5-10分钟.

1.3.13 每孔种加入终止液50μL混匀.

1.3.14 在492nm处测吸光度值。所有OD值减去空白值再计算。

1.3.15 以标准品2000、1000、500、250、125、62.5、31.25、0 pg/ml之OD值在半对数线上作图,画出标准曲线,将浓度作为X轴,OD值作为Y轴,根据样品OD值计算出对应的人(TGF-β1)及β2-微球蛋白含量.

1.4 统计学方法

采用 SPSS10.0 统计软件进行独立样本的 t 检验, 所有检验结果 P < 0.05 为有统计学意义。

2结果

通过酶联免疫(ELISA)方法检测后腹腔镜肾盂成型前后患者尿液中TGF-β1及β2-微球蛋白的表达的影响。发现行肾盂成型术后的患者其尿液中TGF-β1及β2-微球蛋白的表达明显下降(见表1)。

3讨论

肾盂输尿管连接部梗阻(UPJO)是先天性肾积水的最常见原因之一,,伴随输尿管梗阻可产生一系列的病理生理改变。肾盂、肾盏、集合管及肾小管扩张,肾间质水肿,局灶性炎性细胞浸润,间质纤维化,最终导致肾萎缩[2]传统的检查方法对患者均有一定的损害。因此寻找安全、无创的诊断方法已经成为目前研究的热点。

有研究表明TGF-β1是间质纤维化表达过程的关键机制。因此研究其在肾盂输尿管交界处狭窄之中意义重大,最新国内的动物实验也表明,在单侧输尿管梗阻的大鼠模型中,梗阻肾脏中TGF-β1水平逐渐增高[3]。本研究也表明肾盂输尿管交界处狭窄时TGF-β1蛋白的表达明显增高 ,这表明病理性肾积水肾脏TGF-β1表达的改变和肾脏纤维化有一定关系,并且在术后降低,表示及早发现疾病并治疗这一改变是可逆的。

肾小球的功能之一就是选择性滤过血浆蛋白。β2-微球蛋白类的低分子量蛋白质95%由肾小球滤过,约99.9%被近端肾小管重吸收[4],因此,尿中出现了β2-微球蛋白就表明肾小管的重吸收功能受损[5]。β2-微球蛋白的测量可以评估肾小管的功能。本研究也表明肾盂输尿管交界处狭窄时β2-微球蛋白的表达明显增高 ,这表明此时肾脏受损,并且在术后降低,表示及早发现疾病并治疗这一改变是可逆的。

综上所述,腹腔镜肾盂离断成型术能有效的改善,肾盂输尿管狭窄引起的肾脏的病理改变。

参考文献:

[1] Mei H,Pu J,Yang C,etal,Laparoscopic versus open pyeloplasty for ureteropelvic junction obstruction in children: a systematic reviewandmet a-analysis.JEndourol. 2011;25(5):727-36.

[2] 林国安,龚以榜.积水性肾萎缩.国外医学,1996,16:104-106

[3] 周健淞 陈刚 吴美等抗纤灵二号方对单侧输尿管梗阻大鼠肾小管上皮细胞转分化的调节作用,中国中西医结合肾病杂志,2008,9(11),961-965

[4] 王林,郭宗远,吴荣德等,先天性肾积水患儿β2一MG、EGF、TGF一β1含量变化及临床意义,山东医药,2005,45(11),18-20

[5] 孙泽英,吴湘,吴嘉慧,等.肾脏疾病患儿的血、尿β2-微球蛋白变化.实用儿科杂志,1996,5:14.

作者简介:

万有贵,男,主任医师,硕士研究生导师, 主要从事微创泌尿外科的研究

通讯作者:

数字经济的表述范文4

[关键词] 褪黑素;神经生长因子;脊髓损伤;神经保护;大鼠

[中图分类号] R745.4 [文献标识码] A [文章编号] 1673-7210(2013)04(a)-0009-03

褪黑素(melatonin,MT)是一种由松果体分泌的具有多种生物效应的神经内分泌激素,以往多种研究表明其对脊髓损伤具有清除氧自由基、抗炎、减少神经细胞凋亡等脊神经保护作用[1-3],而对其促进神经系统修复及对神经生长因子(nerve growth factor,NGF)水平影响的相关研究较少。NGF是首个被发现的内源性神经营养因子,由神经细胞和神经胶质细胞分泌,对神经细胞具有强大的修复、保护作用[4]。本研究通过观察MT对脊髓损伤大鼠血清及脊髓内NGF表达水平的影响,探讨MT对损伤脊髓保护作用的机制。

1 材料与方法

1.1 实验动物

84只8~10周健康成年雄性SD大鼠,体重(250±30)g,购自广东省医学实验动物中心[许可证号:SCXK(粤)2011-0004]。

1.2 试剂与仪器

MT、苏木精、伊红均购自美国Sigma公司,无水乙醇、10%水合氯醛、大鼠NGF检测酶联免疫吸附法试剂盒、兔抗鼠NGF多克隆抗体、Trizol试剂、DAB试剂均购自北京鼎国昌盛生物技术有限责任公司,PCR试剂盒购自上海江莱生物科技有限公司。美国ABI PCR 9700型PCR扩增仪,美国STAT FAX2100全自动酶标仪,北京君意JY025型凝胶紫外分析仪,HPIAS-1000彩色病理图像报告分析系统。

1.3 脊髓损伤动物模型建立

依据改良Allen法制作脊髓损伤大鼠模型[5]。腹腔注射10%水合氯醛麻醉大鼠,T11~13为术区,备皮消毒后做正中纵向切口暴露目标棘突和椎板,咬除椎板暴露脊髓硬膜,范围约0.6 cm×0.3 cm。采用质量为10 g的条形金属重锤于距硬膜2.5 cm处做自由落体运动打击暴露处脊髓形成脊髓急性损伤。以大鼠尾部及下肢出现抽搐、硬膜充血水肿为模型建立成功标准。清洗、消毒后缝合术口。

1.4 分组及实验方法

采用随机数字表法将大鼠分为模型对照组(36只)、模型MT组(36只)及假手术组(12只),模型对照组和模型MT组随机分为A、B、C亚组,各12只。模型对照组和模型MT组依“1.3”法制作模型,判断模型成功后,模型对照组各亚组给予100 mg/kg无水乙醇1次,腹腔内注射;模型MT组各亚组给予100 mg/kg MT注射液腹腔内注射1次。假手术组则仅依“1.3”法暴露硬膜,并不损伤脊髓。三组术后进行神经功能评价,继续人工饲养,均给予抗感染(青霉素20万U/d肌注)治疗,生存期>3 d则给药3 d,人工辅助排尿排便(4次/d)。术后12 h模型对照组及模型MT组的A组再次进行神经功能评价后断头处死取材,模型对照组及模型MT组的B、C组分别于术后3、5 d进行神经功能评价后断头处死取材。

1.5 观察指标检测

1.5.1 血清NGF检测 大鼠断头取血2 mL室温静置30 min,3000 r/min离心15 min取血清储存于-20℃冰箱备用。采用大鼠NGF检测酶联免疫吸附法试剂盒检测血清NGF水平,操作方法按试剂盒说明进行。

1.5.2 脊髓组织NGF免疫组化检测 解剖患处,取以T12为中心的约1 cm脊髓生理盐水冲洗,均分为2段。上段进行常规制片苏木精-伊红染色,厚度5 μm,各组按1∶5比例取5张切片,采用兔抗鼠NGF多克隆抗体按试剂盒说明进行染色标记,DAB显色,于显微镜下观察。HPIAS-1000彩色病理图像报告分析系统对每张片随机5个400倍视野阳性神经细胞进行计数,取平均值。神经细胞细胞质、细胞核均呈棕色或棕褐色为阳性。

1.5.3 脊髓组织NGF mRNA检测 采用PCR扩增法。脊髓标本下段于-80℃冻存,取冻存样品研碎后采用Trizol法提取总RNA并逆转录为cDNA,以GAPDH为内参进行PCR扩增,引物序列见表1。取5 μL产物进行凝胶电泳,分析图像对比NGF与GAPDH灰度值,以其比值作为NGF mRNA相对表达量。

1.5.4 神经功能评价 采用Tarlov评分法对大鼠进行神经功能评价,0~5分为完全瘫痪至正常。脊髓损伤模型完成后Tarlov评分为1~4分方能继续进行实验。

1.6 统计学方法

2 结果

2.1 脊髓损伤大鼠模型及神经功能情况

2.2 脊髓损伤大鼠血清NGF水平

2.3 脊髓损伤大鼠脊髓组织NGF蛋白表达情况

2.4 脊髓损伤大鼠脊髓组织NGF mRNA表达情况

3 讨论

MT在神经系统中分布广泛且具有多种生物效应,已经被证实在减轻对脊髓神经细胞的破坏、减少凋亡等方面对脊髓损伤患者神经系统具有保护作用,作为一种功能复杂的内源性激素,MT对神经细胞的增殖、分化同样具有调控作用[6]。NGF通过刺激凋亡抑制因子bal-2表达升高,抑制凋亡促进因子bax蛋白表达,促使bal-2与bax比值偏移,从而减少神经细胞的凋亡。高表达的NGF对损伤轴突有促进生长和加速再生的作用,并且在中枢及周围神经系统中对神经细胞的发育、分化、生长、再生和功能恢复均有重要调控作用[7-8]。内源性NGF在脊髓损伤后表达会保护性升高,但由于无法维持有效浓度从而达不到促进神经系统修复的作用。

本研究采用大鼠建立脊髓损伤模型,由于NGF基因属即早基因,因而在术后立即给药,术后12 h NGF早期表达并开始对神经细胞转归产生影响,术后内源性NGF呈现上升趋势,到第5天达到峰值,因此,本研究选择了术后12 h、3及5 d作为观察时点。研究发现,MT有促脊髓损伤大鼠体内血清及脊髓组织中NGF水平升高作用。通过对三组大鼠术后12 h神经系统功能评价发现,两个模型组大鼠Tarlov评分均显著低于假手术组,而模型MT组评分稍高于模型对照组,但差异不显著。可能由于脊髓仍处于休克状态,症状缓解表现尚不明显。而此时两模型组血清NGF水平、脊髓组织切片NGF蛋白及NGF mRNA表达水平已较假手术组显著上升,模型MT组上升幅度明显高于模型对照组,此后两模型组大鼠体内NGF表达均有上升趋势,模型MT组血清和脊髓中NGF表达出现大幅度升高,而模型对照组上升趋势则较为平缓。不仅如此,两组神经功能恢复状态也呈现显著差异,术后3、5 d模型MT组Tarlov评分有显著回升,下肢运动功能逐渐恢复,且据观察发现大鼠精神状态较好,饮食恢复较快,而模型对照组则进展不明显。表明脊髓损伤大鼠神经功能严重受损,而内源性NGF生理性出现升高,起到保护神经系统的作用,但效果并不佳,而通过给予MT促进内源性NGF的表达,大鼠体内NGF水平明显升高,并可到达有效浓度,对神经系统再生和功能修复产生作用。NGF直接给药会受到利用率低、半衰期短等限制[9],而MT具有高度脂溶性和水溶性,可轻易透过血脑屏障和细胞膜进入核内发挥作用[10],促进内源性NGF表达,自身也具有较强的神经保护作用,治疗脊髓损伤具有明显优势。

综上所述,MT对脊髓损伤后神经系统不仅具有减少损伤的保护作用,还通过促进体内NGF的表达促使神经细胞及轴突的再生,调节神经细胞增殖、分化,改善神经功能,增强对神经系统的保护。

[参考文献]

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数字经济的表述范文5

[关键词]五味子;脑缺血;磷脂酰肌醇3激酶;凋亡

缺血性脑血管疾病是临床上的常见病和多发病,严重威胁着人类的健康。脑缺血后机体产生大量的自由基,毒性氨基酸等使凋亡相关基因激活,启动凋亡信号通路,促进神经细胞出现凋亡和坏死。研究表明,PI3K (phosphatidylinositol 3-kinase,磷脂酰肌醇3激酶) /AKT(serine-threonine kinase,丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶)信号通路参与了凋亡过程并且与脑缺血损伤密切相关[1-2]。五味子Schisandra chinensis (Turcz.)Baill.是我国传统中药材,具有敛肺,滋肾,生津,收汗,涩精等作用。具有抗氧自由基,增强机体免疫力,抗肿瘤等药理作用。此外五味子还具有改善心肌,促进微循环,减轻脑水肿等功能[3-6]。五味子的主要活性成分是木脂素,关于北五味子总木脂素(S.chinensis lignans,SCL)对脑缺血损伤的保护作用及机制目前尚不明确。本研究通过建立局灶性脑缺血损伤大鼠模型,观察北五味子总木脂素对大鼠脑缺血性损伤的保护作用及对PI3K/AKT信号通路的影响,探讨北五味子总木脂素保护脑缺血的机制。

1材料

1.1药品与试剂 SCL由北华大学林学院食品科学与工程实验室提供;红四氮唑(TTC,上海市先进农场试剂厂);免疫组化试剂盒(南京建成生物技术有限公司);Bcl-2,Bax,p-AKT和AKT抗体(Sigma公司);MCAO栓线(北京沙东生物技术有限公司)。

1.2动物 健康雄性SD大鼠,体重250~300 g,由吉林大学基础医学院动物实验中心提供,合格证号0022216,清洁级动物室饲养,饮水不限,定时喂食。

1.3仪器 GIS-2008天能凝胶成像分析仪(上海天能科技有限公司);立式电泳仪(江苏海门市麒麟医用仪器厂);病理图像分析系统(美国 Media Cybernetics公司)。

2方法

2.1北五味子总木脂素的制备过程 北五味子木脂素由北华大学林学院食品科学与工程实验室优选北五味子新品种,采用超临界CO2流体萃取,模仿口服药物在胃肠道的转运过程,选用特定pH依次连续提取(半仿生法提取);经分子蒸馏,其蒸馏温度110 ℃,进料速率65 L・h-1,真空度0.7 Pa;再通过AB-8大孔树脂处理,总木脂素流量1.52 g・L-1,洗脱速度1 mL・min-1,乙醇95%、洗脱率78.9%;采用硅胶柱色谱法,200~300目硅胶,以石油醚-乙酸乙酯60∶1洗脱,得木脂素组分,采用紫外分光光度法,在570 nm检测总木脂素,其纯度为93.5%。

2.2模型制备 雄性健康SD大鼠,末次给予药物2 h后用10%水合氯醛进行左下方腹腔注射麻醉,10 min进入麻醉维持期,将其仰卧位于鼠台上固定,颈部正中线纵向切口,先分离右侧颈总动脉(CCA),后分离颈外动脉(ECA)和其下方的颈内动脉(ICA)。在CCA远心端和近心端及ECA处挂线备用。用微动脉夹于CCA近心端夹住,用手术线于远心端打一活结,用圆头带有标记点的MCAO栓线通过事先用眼科剪在CCA上剪的切口进入向ICA缓缓推入约18 mm(从ICA和ECA分叉处算起),感到有轻微阻力且标记点在动脉分叉处左右停止,此时说明栓线已到达大脑前动脉。用手术线结扎固定栓线,缝合皮肤。假手术组只分离出颈外动脉以及颈内动脉,其他步骤同上但不进行栓塞。待大鼠清醒后,观察大鼠的体征,对大鼠进行神经症状评分[7],行为学评分≥2分的大鼠,表明模型的制作成功。24 h后立即断头取血取脑,同时进行病理组织学、免疫组化和Western blotting检测。

2.3分组与给药 50只健康SD大鼠,随机分成5组(按体重),每组10只(至少保证模型建立成功8只)。按常规进行饲养,进行不同的处理方法,每天上午灌胃1次,持续14 d后,末次给药2 h后进行脑缺血动物模型的建立。具体分组及处理措施如下,假手术组:分离颈总动脉,不栓线,每天给予生理盐水(10 mg・kg-1)灌胃;模型组:MCAO栓线,缺血,每天给予生理盐水(10 mg・kg-1)灌胃;SCL高、中、低剂量组:造模手法同模型组,每天给予SCL(100,50,25 mg・kg-1)灌胃。

2.4大鼠脑梗死面积测定 TTC(红四氮唑)是呼吸链中吡啶-核苷结构酶系统的质子受体,为脂溶性光敏感复合物。实验结束后立即对大鼠进行取脑,于-20 ℃冰箱放置2 min,目的为保持相对固定便于对脑组织行冠状切片,将脑组织切成相对均匀的5片,避光于2%TTC磷酸盐缓冲液(pH 7.4)37 ℃水浴中放置5~10 min,期间轻轻晃动使其与TTC接触充分。TTC与正常组织中的脱氢酶反应而呈红色,而缺血组织因脱氢酶活性下降,不能反应,故呈苍白色,由此判定脑缺血面积。应用BI2000软件处理系统计算每个脑组织切片损伤面积和总面积,以5个脑组织切片中梗死面积之和与5个脑组织切片面积之和的比值反映梗死范围。

2.5大鼠脑组织HE染色 实验结束后,立即断头取脑,10%甲醛中固定,以由高至低梯度的乙醇进行洗脱,体积分数分别为70%,80%,90%,每种浓度乙醇中脱水1 h。100%乙醇中脱水2 h后在正丁醇中放置24 h。分别置于两缸同浓度二甲苯中各5 min,浸蜡包埋后切片,于光学显微镜下进行观察。正常脑组织神经元细胞排列整齐, 脑缺血大鼠神经元细胞排列紊乱,高倍镜下,可见凋亡细胞,细胞核呈深蓝色,形态各异,可见核固缩及碎裂,细胞浆淡染。

2.6免疫组化检测脑组织中Bcl-2和Bax的表达 石蜡切片脱蜡水化后,按照免疫组化试剂盒操作:滴加试剂A 30 μL,室温孵育20 min,PBS冲洗,进行抗原修复,滴加试剂B 30 μL,室温孵育20 min,PBS冲洗,然后加一抗(兔抗大鼠Bcl-2和Bax多克隆抗体)湿盒4 ℃过夜;PBS冲洗后滴加试剂C 30 μL,室温孵育30 min,PBS冲洗DAB显色,自来水冲洗,苏木素复染,氨水返蓝,脱水透明后封片。显微镜下观察,胞浆中有棕黄色颗粒者为阳性细胞。用Image-pro软件分析计算各组阳性表达细胞的吸光度。

2.7Western blotting检测脑组织内p-AKT和AKT蛋白的表达 脑缺血造模结束后立即断头取脑,置于液氮中保存。实验时取脑组织200 mg用脑蛋白裂解液提取脑组织蛋白。用考马斯亮蓝进行蛋白定量。进行SDS-PAGE垂直板电泳,然后电转至PVDF膜上,用脱脂奶粉封闭2 h;进行一抗孵育,用PBST洗膜,10 min×2次,将PVDF膜放入稀释好的p-AKT和AKT(1∶1 000稀释)中,4 ℃过夜;PBST洗膜后将PVDF膜放入辣根过氧化物酶标记的二抗中(1∶500),室温孵育2 h;PBST洗膜后DAB显色,凝胶成像系统拍照,计算机扫描并分析处理结果。

2.8统计学处理 本实验中的所有数据统计学处理均以±s来表示,运用SPSS 11.0 统计软件中的单因素方差分析(One-Way ANOVA)。其中关于组间比较选用t 检验对数据进行处理,P

3结果

3.1北五味子总木脂素对大鼠脑梗死面积的影响 与假手术组比较,模型组的脑梗死面积明显增大,说明大鼠脑缺血模型建立成功;与模型组相比较,SCL高、中、低剂量组的脑梗死面积显著减小,具有显著性差异(P

3.2北五味子总木脂素对脑组织病理学的影响 假手术组脑组织不产生缺血性表现,神经细胞结构正常完整,基本没有细胞的病变或者坏死,呈正常形态学结构;模型组缺血区神经细胞呈现明显的固缩坏死,细胞数量减少,空泡样变性坏死数量较多;北五味子总木脂素低剂量组与模型组比较,缺血区坏死神经细胞数量相对较少,固缩和空泡样变比模型组减少;北五味子总木脂素中剂量组与模型组比较明显改善,与低剂量组比较神经细胞坏死数量明显减少;北五味子总木脂素高剂量组总体跟低剂量组相差不大,小部分出现坏死神经细胞,没有中剂量组的效果明显,见图2。

3.3北五味子总木脂素对脑组织Bcl-2和Bax表达的影响 免疫组化结果光镜下可观察细胞浆中有棕黄色颗粒者为阳性细胞。模型组Bcl-2阳性细胞数显著少于假手术组(P

3.4北五味子总木脂素对脑组织p-AKT和AKT蛋白表达的影响 与假手术组相比, 模型组p-AKT蛋白表达水平明显降低,差异具有统计学意义(P

4讨论

脑缺血后,产生的炎症因子、兴奋性氨基酸,自由基等诱导神经细胞发生凋亡。脑缺血损伤造成神经细胞死亡的主要形式之一就是凋亡。凋亡信号通路是多基因和多信号参与的复杂的调控和转导过程,虽然目前对凋亡发生机制尚不完全清楚,但Bcl-2家族对神经细胞凋亡发挥了重要的作用,与脑缺血的严重程度密切相关。Bcl-2是细胞凋亡抑制基因,Bax是促细胞凋亡基因。在细胞内 Bcl-2 和 Bax 2种功能的蛋白之间可相互作用形成同源或异源二聚体,调节线粒体结构与功能的稳定性,调控线粒体Cytc等的释放,从而构成重要的细胞凋亡调控点之一。Bcl-2/Bax升高,则抑制细胞凋亡;反之,则促进细胞凋亡[8-13]。本实验结果显示,北五味子总木脂素各组对大鼠脑缺血性损伤具有一定的保护作用,减小脑梗死面积,改善脑组织的病理形态学改变。提示北五味子总木脂素对脑缺血损伤具有一定的保护作用。同时免疫组化结果显示北五味子总木脂素能够促进抗凋亡蛋白Bcl-2的表达,抑制促凋亡蛋白Bax的表达,提示其对脑缺血损伤的保护作用可能与抑制神经细胞的凋亡,影响凋亡信号通路有关。

PI3K/AKT信号转导通路参与了脑缺血时神经细胞的凋亡。PI3K具有脂类激酶活性和蛋白激酶活性。当脑缺血发生后,机体释放的细胞生长因子,整合素等能够激活具有酪氨酸激酶活性的受体,受体发生磷酸化并与PI3K的调节亚基结合使PI3K激活,促进位于PI3K下游的效应分子AKT活化。AKT活化后能经多种途径促进细胞存活。AKT既可以促进Bad,caspase-3等凋亡蛋白磷酸化,使其失活,也能够促进抗凋亡基因如Bcl-2,Bcl-xL等基因的转录和表达,使细胞的存活[14-16]。本研究结果显示,脑缺血时p-AKT表达减少,神经细胞凋亡数量增多;北五味子总木脂素各组均能够使p-AKT表达增多,磷酸化的AKT促进下游的抗凋亡蛋白的表达,使凋亡细胞减少,表明通过促进AKT活性增加可提高脑组织抗缺血损伤的能力及抗凋亡作用。北五味子总木脂素抗脑缺血的作用机制可能涉及到多环节、多层面和多机制的,值得进一步深入研究。

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Effect of Schisandra chinensis lignans on neuronal apoptosis and

p-AKT expression of rats in cerebral ischemia injury model

JIANG En-ping 1, 2, WANG Shuai-qun1,4, WANG Zhuo4, YU Chun-rong5, CHEN Jian-guang1*, YU Chun-yan3*

(1.College of Pharmacy, Beihua University, Jilin 132001, China; 2. Guangdong Medical College, Dongguan 523808, China;

3. Basic Medical College, Beihua University, Jilin 132001, China; 4.Jilin Central General Hospital, Jilin 132001, China;

5. JOINN Laboratories, Beijing 100176, China)

[Abstract] Objective: To observe the effect of Schisandra chinensis lignans(SCL) on neuronal apoptosis and PI3K/AKT signaling pathway of rats in the cerebral ischemia injury model, and study its possible mechanism. Method: Rats were orally administered SCL high, middle and low dose groups (100, 50, 25 mg・kg-1) for 14 days. The cerebral ischemia injury model was established by using the suture-occluded method to rate the neurological functions. The cerebral infarction area was observed by TTC staining. The pathological changes in brain tissues were determined by HE staining. Bcl-2 and Bax expressions were detected by immunohistochemical assay. The protein expressions of p-AKT and AKT were assayed by Western blotting. Result: Compared with the model group, SCL high, middle and low dose groups showed reduction in the cerebral infarction area to varying degrees, improve the pathological changes in brain tissues, promote the expression of apoptin Bcl-2 and p-AKT, and inhibit the expression of apoptin Bax. Conclusion: SCL shows a protective effect on rats with cerebral ischemia injury. Its mechanism may be related to the increase in p-AKT ability and anti-ischemic brain injury capacity and the inhibition of nerve cells.

数字经济的表述范文6

【关键词】测绘;监测;应用;GPS

中图分类号: TB2 文献标识码: A

测绘作为国民经济的基础工作,一直以来都在我国经济发展、国民经济建设领域发挥其重要的服务职能。

一、新型测绘技术的含义

(一)测绘技术的含义

测绘是测量与绘图的总称。测绘学为研究和推算地面点的几何位置,地球形状及地球重力场提供数据,据此测量地球表面自然形态和人工设施的几何分布,并结合某些社会信息和自然信息的地理分布,编制全球和局部地区各种比例尺的地图和专题地图的理论和技术的学科。

它是以计算机技术、地理信息技术光电技术、网络通讯技术、空间科学、信息科学为基础,对自然地理要素或者地表人工设施的形状、大小、空间位置及其属性等进行测定采集、表述以及获取的数据、信息、成果进行处理而提供的活动。

(二)新型测绘技术的含义

随着经济和社会的进步,现代数字化技术的发展当前测绘技术已从传统的模拟时代走向信息时代,它以传统测绘技术为基础,以全球定位系统(GPS)、遥感(RS)、地理信息系统(GIS)为技术核心,将地面已有的特征点和界线通过测量手段获得反映地面形状的图形和位置信息,供工程建设的规划设计和行政管理之用。随着经济和社会的进步现代的,数字化技术。

二、新型测绘技术在建筑领域的创新应用

(一)3S集成技术

GPS技术可以实时、精确的提供物体的三维坐标信息,但无法获得地理的属性信息。RS技术能获取大面积的地理信息,但在实时与精度上不足。GIS具有信息查询分析和管理功能,但数据的获取与更新很困难。三者的集成实现功能互补、资源共享。

3S本是三者的简单组合,而是利用现代测绘技术、遥感技术、定位技术、图像处理技术和计算机技术为一体向GIS和RS数字图像处理系统提供足够的数量、精度、可靠性、完整性的空间数据,通过空间分析、预测、决策,确保地理信息优化系统的解决。

1.3S集成技术在公路工程建设中应用

以数字信息为主的管理系统,它以空间地理信息系统为依托,应用3S技术,借助计算机及网络技术,把公路数据信息化、数字化,实现公路从规划、勘测、设计到施工、运营等环节数字化管理,将公路的路网、路况、管理机构及人员等海量信息通过3S集成技术采集、存储、分析、处理等功能,使公路达到预期效果,因此3S集成技术具有广阔的发展前景和现实意义。[1]

2.3S集成技术在数字城市建设中的应用

城市建设的核心是城市空间信息科学,而数字城市空间信息科学的核心是3S技术及其集成,所以3S集成技术在数字城市的数据采集、处理、存储中具有广泛的作用和应用前景。利用RS信息,经纠正、处理、形成正射影像图,进一步目视判读后,可编辑成各种专题图,经扫描或手扶跟踪数字化后成为数字地图,进入到GIS中,实现多种信息的综合分析,派生出新的图形、图件,便于城市规划建设和运营管理。[2]

(二)PPP单点定位技术

采用精密单点定位技术,利用单站GPS就可以达到几厘米的精度,即传统的RTK的精度,其作业不受距离限制、不需要基准站支持,这无疑大大提高高精度定位作业的灵活性,降低作业成本。

PPP单点定位技术应用:

GPS-RTK的正常工作需具备基准站和移动站要同时接受五个卫星的信号;基准站和移动站要同时接受卫星的信号和基准站发出的差分信号;以及移动站迁站过程中不能关机等要求,所以PPP单点定位技术广泛应用在RTK作业盲区、精密海洋工程测量、海岸线测量、海洋测量、大面积航空摄影测量、土地测量(开发造地、土地整理)等方面。

(三)GPS—RTK联合全站仪在地形测绘中的应用

GPS是美国从20世纪70年代开始研制,历时20年,于1994年全面建成,具有海、陆、空全方位实施三维和定位能力的新一代卫星导航与定位系统。

RTK技术是在GPS基础上发展起来的,能够实时提供流动站在指定坐标系中的三维定位结果,并在一定范围内达到厘米级精度的一种新的GPS定位测量方式,是GPS应用的重要里程碑。

1.GPS-RTK联合全站仪在地形测绘中的应用

以GPS-RTK和全站仪结合的手段进行地形图测绘,大大减少外业的工作量,工作效率显著提高。在卫星测量无法满足的情况下,采取全站仪进行有效补充,为我们圆满完成任务打下坚实基础,但在绘图过程中仍要绘制草图一边内业成图,接下来将将从坐标数据的传输入手,实现移动站接收机通过蓝牙等无线手段将数据传输到便携电脑和掌上电脑,这样无需绘图而直接在外业成图,内业修改也可以防止测错、漏测现象发生。

2.在高层建筑中的应用

GPS测量技术参数主要包括:设计精度、观测计划、设计基准和网线。在确定设计精度时,应根据测区的具体情况和工程需要,选择工程或城市GPS网作为测区首级控制网。平均边长小于1KM,最弱边相对中误差小于千分之一,GPS接收机标称误差a

三、新型测绘技术的应用前景

随着传统测绘技术向新型测绘技术的转变,工程测量科技进步很大,发展很快,取得显著成绩,以空间技术,通讯技术,信息技术为支柱的测绘高新技术迅猛发展,测绘业已成为一项重要的信息产业。测绘技术的广泛应用必将给国民经济的发展带来新的生机,他作为社会发展的服务行业为我国的创业时期的建设做出了不可磨灭的贡献,在当今的发展时期,测绘技术更需要提升行业技术水平,创新应用进一步扩展其应用领域,才能更好地发挥其服务职能为政府的决策部门提供科学依据,从其职能和社会需求它的应用和发展前景是令人乐观的。

测绘是准确掌握国情国力、提高管理决策水平的重要手段。提供测绘公共服务是各级政府的重要职能。加强测绘工作对于加强和改善宏观调控、促进区域协调发展、构建资源节约型和环境友好型社会具有重要作用。现在测绘技术已经成为国家科技水平的重要表现,地理信息产业正在成为新的经济增长点。全面提高测绘保障服务水平,对于经济又好又快发展具有积极的促进作用。

随着经济和社会的进步现代的,数字化技术的发展,测绘技术已从传统的模拟时代跨过数字走向信息时代,已广泛应用在国民经济的各个领域,特别是国家政府部门的决策,测绘技术和产品在各个行业起着关键的作用。

参考文献