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医养结合的重大意义范文1
关键词：马铃薯（Solanum tuberosum）；晚疫病病原菌（Phytophthora infestans）；水杨酸；乙烯；基因表达
中图分类号：S532；Q786；S435.32 文献标识码：A 文章编号：0439-8114（2013）17-4238-03
Effects of Infection of Phytophthora infestans on Gene Expressions of Key Enzymes in Salicylic Acid and Ethylene Biosynthesis in Potato
ZHU Jia-li1，DING Yan1，XU Hong-zhang1，XIN Cui-hua1，CAI Lu1，XIAO Huan-huan1，
HE Yan-hong2，LI Na1，GUO Jiang-bo1
（1. Inner Mongolia Key Laboratory of Biomass-Energy Conversion/School of Mathematics， Physics and Biological Engineering， Inner Mongolia University of Science and Technology， Baotou 014010， Inner Mongolia， China； 2. Forestry College， Inner Mongolia Agricultural University， Huhhot 010020， China）
Abstract： Phenylalanine ammonia-lyase（PAL） and 1-aminocyclopropane-1-carboxylic acid（ACC） synthase（ACS） are the key enzymes in the biosynthesis pathway of salicylic acid and ethylene respectively. Expression patterns of gene encoding these key enzymes（poPAL and poACS） in potato（Solanum tuberosum） were investigated by semi-quantitative RT-PCR after injection of Phytophthora infestans physiological strain 89148-9 to potato transgenic resistant strains DR1， DR3a and wild susceptive line DG. The results showed that expression of poPAL and poACS genes was increased in leaves of the three potato lines after inoculation of P. infestans. The expression level in transgenic lines was mostly higher than that in wild line and the peak value in transgenic lines generally appeared earlier to that in wild line. The results suggested that poPAL and poACS were related with the resistance to late blight in potato； but the expression models were different between transgenic lines and wild line， which might be responsible for resistance or susceptibility to P. infestans.
Key words： potato（Solanum tuberosum）； Phytophthora infestans； salicylic acid； ethylene； gene expression
收稿日期：2012-08-27
基金项目：国家自然科学基金项目（31260344）；内蒙古自然科学基金项目（2011BS0506，2012MS0301）；高等学校科学研究项目
（NJZZ11139）；内蒙古科技大学李保卫大学生科技创新基金项目；教育厅“青年科技英才支持计划”项目
作者简介：朱佳莉（1990-），女，江苏丹阳人，在读本科生，生物技术专业；通讯作者，郭江波（1976-），男，内蒙古呼和浩特人，副教授，博士，
主要从事植物抗逆分子生物学研究，（电话）15044701654（电子信箱）。
马铃薯（Solanum tuberosum）是世界第四大粮食作物，在缓解全球粮食安全问题中占有重要的地位[1]。马铃薯晚疫病则是限制马铃薯生产的第一大病害，给马铃薯产业造成了严重的损失，培育优良的抗病品种、探明其抗病机制意义重大。
植物在受到病原菌的侵染后其体内会发生一系列生理生化反应以降低病害造成的伤害。其中体内产生信号分子进而诱导一系列防卫基因表达和代谢变化是植物抗病行而有效的方法之一。水杨酸（Salicylic acid，SA）和乙烯是植物体内重要的信号分子，可以诱导植物的抗病反应[2，3]。本研究以通过转基因技术获得的2个马铃薯抗晚疫病株系DR1、DR3a和野生型株系DG为材料，利用水杨酸合成途径中的关键酶——苯丙氨酸解氨酶（Phenylalanineammonialyase，PAL）基因（poPAL）和乙烯合成途径中的关键酶——1-氨基环丙烷-1-羧酸（1-Aminocyclopropane-1-carboxylic acid，ACC）合成酶（1-Aminocyclopropane-1-carboxylate synthase，ACS）基因（poACS）的保守区设计特异引物，通过半定量RT-PCR研究接种晚疫病病原菌（Phytophthora infestans）生理小种89148-9后各株系中两种酶基因的表达情况，为深入了解马铃薯抗晚疫病能力与水杨酸和乙烯信号分子介导植物抗病防卫反应之间的关系提供一定的依据。
1 材料与方法
1.1 试验材料
以前期试验获得的转基因抗晚疫病马铃薯株系DR1、DR3a和野生型株系DG为材料，采用苗钵（10 cm×10 cm）温室培养。取生长8～10周的植株为接种对象。
1.2 试验方法
1.2.1 马铃薯接种晚疫病病原菌 ①制备游动孢子。将生长14 d的晚疫病病原菌生理小种89148-9的孢子囊用无菌水冲洗到灭菌培养皿中，在4 ℃冰箱中放置6 h使其释放游动孢子，然后镜检游动孢子浓度并稀释调整到终浓度为5×104 个/mL用于接种。②接种。每株系只取中上部3片叶接种，每片叶接种20 μL游动孢子液，接种后置于接种箱培养，培养条件为18～25 ℃、光照16 h/d，接种后24 h内用塑料膜覆盖保持100%的相对湿度，分别于接种后0、12、24、48、72 h取样用于poPAL和poACS基因表达量的分析。
1.2.2 基因特异引物设计 根据GenBank中发表的poPAL（序列号Z37106）和poACS（序列号AB041521）基因序列，使用软件Prime 5.0设计特异引物，引物序列分别为poPAL，5′-GCTAGAGGTGCT
AGTGCTAAGGGATT-3′和5′-TTTGAAACCCTAGA
TAAGGAAATGGC-3′；poACS，5′-TCCTGGTGATGC
ATTTCTAGTTCCT-3′和5′-ATCCATCCAAATAAA TAGGCCAGCAT-3′。
1.2.3 目的基因半定量RT-PCR分析 植物总RNA采用天根生化科技（北京）有限公司植物总RNA提取试剂盒RNAprep法提取，cDNA的合成按照普洛麦格（北京）生物技术有限公司的M-MLV逆转录酶操作说明进行。各株系cDNA浓度通过内标引物（poactin，5′-GATGGTGTCAGCCACAC-3′和5′-ATTCCAGCAGCTTCCATTCC-3′）来调整，然后以该cDNA为模板扩增。反应程序为：94 ℃ 4 min；94 ℃ 45 s，60 poPAL/57 poACS ℃ 45 s，72 ℃ 70poPAl（poactin）/40poACS s。PCR产物用1.2%的琼脂糖凝胶电泳检测。RT-PCR半定量积分分析使用GelPro 60分析软件。
2 结果与分析
2.1 接种晚疫病病原菌后各株系poPAL基因的表达情况
接种晚疫病病原菌生理小种89148-9对3个马铃薯株系poPAL基因的表达都有持久的诱导作用，从3个株系中都扩增出了长度约为1.2 kb的产物。对RT-PCR产物进行琼脂糖凝胶电泳检测（图1）和半定量积分分析（图2）发现，转基因DR1株系中poPAL基因的表达量在接种后24 h时达到最大，然后随着时间的延长其表达量迅速下降，到72 h时该基因的表达量显著低于接种前水平；转基因DR3a株系中poPAL基因的表达量也在接种后24 h时达到最大，并保持一段时间的高表达量然后缓慢下降；野生型DG株系中poPAL基因表达量在接种后12 h时达到最大，到48 h时仍保持在相对稳定的水平上，接种72 h后该基因的表达量略低于接种前水平。除72 h时转基因DR1株系中poPAL基因的表达量与野生型DG株系相当外，接种晚疫病病原菌后72 h内转基因DR1和DR3a株系中poPAL基因的表达量均明显高于野生型DG株系。
2.2 接种晚疫病病原菌后各株系poACS基因的表达情况
接种晚疫病病原菌生理小种89148-9对3个马铃薯株系poACS基因的表达都有明显的诱导作用，从3个株系中都扩增出了长度为681 bp的产物。对RT-PCR产物进行琼脂糖凝胶电泳检测（图3）和RT-PCR半定量积分分析（图4）可以看出，DR1株系在接种后12 h时poACS基因的表达量达到最大，在12～48 h内一直保持较高的表达水平，然后逐渐下降，但72 h时其表达量仍高于接种前；转基因DR3a株系接种后12 h poACS基因表达量迅速升高，24 h时poACS基因的表达量略有升高，但与12 h时没有显著差异，之后poACS基因的表达量逐渐下降，到72 h时其表达量低于接种前水平；野生型DG株系接种后24 h时poACS基因的表达量达到最大，然后逐渐下降，到72 h时poACS基因的表达量已检测不到。在整个观察期内，转基因DR1和DR3a株系中poACS基因的表达量远高于野生型DG株系，而且转基因株系中的诱导为连续诱导，而野生型为不连续诱导，在接种后72 h时该基因不表达。
3 小结与讨论
水杨酸在植物的系统获得性抗性中是必不可少的信号物质[4]，研究发现增加内源水杨酸表达量或者外施水杨酸都可以诱导系统获得性抗性[5-7]。本研究发现，接种晚疫病病原菌生理小种89148-9后，在马铃薯转基因株系和野生型株系中都诱导了poPAL基因的表达，表明水杨酸可能是马铃薯抗晚疫病过程中重要的信号分子，这与前人的研究结果[8]一致。但同一株系不同时间和不同株系同一时间该基因的表达量存在一定的差异，说明转基因株系可能通过调控poPAL基因诱导表达的强度来实现对晚疫病的抗性。
在高等植物中，ACC经ACS或者ACC氧化酶（ACO）合成乙烯，它们是乙烯合成途径的关键酶，而ACS和ACO受生物胁迫或者非生物胁迫正调控[9]。本研究发现，在接种晚疫病病原菌生理小种89148-9后，在马铃薯转基因和野生型株系中都诱导了poACS基因的表达，表明乙烯可能是马铃薯抗晚疫病过程中重要的信号分子，这与之前的报道一致[10]。但同一株系不同时间和不同株系同一时间该基因表达量有一定的差异，这说明转基因株系可能通过对该基因诱导表达的强度和时序的调控来实现其对晚疫病的抗性。
本研究选用的2个转基因株系和野生型株系在接种晚疫病病原菌后都启动了水杨酸和乙烯信号转导途径，只是启动的强弱和时序上有较大的差异。这表明并非只有抗病株系才启动防御反应机制，而是在植物与病原菌互作中，植物都具有潜在的防御反应机制，这些防御反应基因通过识别、信号传递和诱导，使植物自身防御系统被激活而相关防御反应基因被诱导表达[11，12]。同时也支持了有关水杨酸和乙烯信号转导途径在抗病防御反应机制中的复杂性和可能存在多条信号转导途径复杂的交叉与重叠作用的结论。但是各株系接种晚疫病病原菌后相关基因的启动强度与时序性有较大的差异，这可能是由于不同植物与病原菌所组成的不同互作系统引起的，也可能就是抗、感晚疫病的原因所在。
参考文献：
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医养结合的重大意义范文2
关键词 离退休 老干部 服务与管理
中图分类号：G657 文献标识码：A
高校离退休干部是高校教职工队伍的重要组成部分，加强高校离退休干部的服务与管理工作对构建社会主义和谐高校具有极为重要的意义。如何做好高校离退休干部服务与管理工作，我们必须了解高校离退休干部的群体特征。首先，高校离退休干部普遍具有较强的政治、思想素质。经历了长期的实践锻炼和党的培养教育，有些还经历过战争年代的生死考验，在社会和群众中有较大的影响力；
其次，高校离退休干部普遍具有较高的文化素养。他们多为老干部、老专家、老教授，知识分子比重大。从事教育事业多年，讲道理，有忧患意识，工作经验丰富，为党和国家的教育事业奉献了全部的青春，多年的高校工作经历使得他们具有较强的理性的独立思想意识、严谨的工作作风；第三，高校离退休干部存在鲜明的心理特征。离退休干部在退下来的最初往往有种莫名的失落感，从而郁郁寡欢；另外，离退休以后一般和原单位没有什么联系了，住地分散，信息不灵，加上年龄较高，病痛多，困难多，他们怕孤独，怕寂寞。个别离退休干部人还存在清高自傲、自我封闭等特征，有的当过领导的老干部还存在架子大、爱面子等心理特点。由于高校离退休干部有着与其他行业老龄人不同的特点。因此，高校对离退休干部的服务与管理工作，应紧紧围绕上述特点来展开，具体讲，应该抓好以下四个方面的工作：
1学校领导高度重视是做好高校离退休干部服务管理工作的关键
高校离退休干部工作，概括起来说，就是执行、检查、协调和落实党和国家对离退休干部的学习、生活、医疗保健、发挥作用、文化娱乐、丧葬优抚等政治、生活待遇的政策规定、以及老干部事业的建设和发展，离退休工作部门和队伍自身建设等方面工作的总和。而做好服务管理工作是做好离退休干部工作的重要方面和基本要求。高校离退休工作部门的主要工作就是服务老年人；要服务老年人，就必须紧紧依靠老年群众，离开老年群众，工作就成了无源之水，无本之木。每个老年人都像是一棵饱经风雨、历尽沧桑的树。树的年轮珍藏着往昔美好的记忆；树的枝叶流淌着生命不息的汁液；每棵树都有一片绿荫，滋润自身，造福他人。老年人是整个社会的宝贵财富。我们的工作必须依靠老年人，要最大限度地激发老年人的热情和创造力，这样才能真正把老年工作做好。离退休老同志毕生为高校工作，他们从工作岗位上退下来后，理应得到很好地安排照顾。这体现了党和国家对他们所做贡献的充分肯定，体现了中华民族敬老尊贤的传统美德和社会主义制度的优越性。只有充分认识到离退休干部为国家建设所作出的巨大贡献，在今天五个文明建设中具有的积极影响和作用，才能加深对广大老干部的感情；只有充分认识到实行干部离退休制度的重大意义，才能增强做好老干部工作的自觉性；只有正确认识做好新时期老干部工作的重要意义，才能进一步增强做好这项工作的紧迫感和责任感；只有清醒地认识到新形势下老干部工作的艰巨性和复杂性，正确了解当前离退休干部工作面临的新情况、新问题，才能切实加强对离退休干部工作的领导，推动离退休干部工作的健康发展。
实践证明，做好离退休干部服务与管理工作关键在领导。领导重视了，工作中的问题才能得到解决。做好离退休干部服务与管理工作关键在领导，除了在一般意义上讲之外，还有其特殊意义：一是领导班子年轻化后，不断有新的年轻同志进入领导岗位，有的同志对离退休干部工作不太了解。二是离退休干部工作是一个“系统工程”，许多具体问题离退休干部工作部门本身解决不了，需要领导出面协调解决。三是在建立社会主义市场经济体制过程中，离退休干部工作涉及到不少政策性问题，这些问题又与整个干部政策、与改革中其他配套政策密切相关，其中一些问题需要领导拿意见，作出决策。因此，各级领导干部都要站在党性原则立场上，充分认识离退休干部工作的重要性。一些新上任的年轻领导干部，尤其是基层单位的领导要尊重离退休干部，重视离退休干部工作。那种把离退休干部当作负担，甚至认为是包袱的想法和做法，都是极端错误的。新形势下离退休干部工作困难很多，要排除畏难情绪，克服各种困难，下功夫把离退休干部工作做好。各高校领导要把离退休干部工作放到学校整体发展中来考虑，放到整个干部工作中来考虑，提高认识，统一思想，增强政治责任感和紧迫感，切实加强对离退休干部工作的领导。做好离退休干部工作是党的事业兴旺发达、继往开来的重要保证。
2注重离退休干部的身心健康状况，提高晚年生活质量
高校教师与干部离退休之后，由于社会地位、生活方式和生活环境的变化，心理状况也随之发生了变化。由于社会角色的转换、人际关系的反差、经济收入的下降、身体条件的变化等原因，使原先的心理平衡状态被打破，出现了新的心理不平衡。空虚感、孤独感和冷落感等也随之产生，急切希望得到人们的尊重、理解和关心。即尊重他们的社会地位、尊重他们历史上发挥的作用，理解他们的正当要求，关心他们的政治待遇、生活待遇、文化娱乐、身体状况。此外，离退休老同志还面临着健康受损，各种疾病的困扰。
老年人渴望有强壮的体魄和健康的心理。“实现健康老龄化”是老年人最大、最现实的愿望。所以要努力营造健康老龄化环境，实现老年人健康养老。因此，各高校应该有计划、较系统地向老同志普及健康保健知识，增强老年人自我保健意识，提高自我保健能力，鼓励和支持老年人参加各种有益的活动，加强运动健身，为预防疾病打好基础。
针对我国人口日益老龄化的问题，十报告明确提出，要“全面做好离退休干部工作”。离退休干部工作必须以科学发展观为指导，统筹安排，认真实施，确保政策措施落到实处和老龄事业全面、协调、可持续发展。例如，武汉大学离退休工作处紧紧围绕如何使老同志生活更无忧、精神更充实，围绕如何提高老同志晚年生活质量等工作，想办法，下工夫。一方面从制度入手，不断完善医保制度；另一方面，用实际行动说话。首先是关心老同志的身体健康，组织好体检疗养工作；其次是不断探索新时期离退休工作的特点和规律，进一步改进、完善、提高服务质量和水平；三是办好老年活动室，根据老同志的特点开展各项活动。此外，还先后成立了老年协会和老教授协会，自我管理、自我教育、自我服务，紧紧围绕以实现“六个老有”为目标，以落实“两项待遇”为根本，以在“五个文明建设”（物质、精神、政治、社会、生态）中发挥作用为重点，将服务老同志的工作落到实处。文艺活动方面，离退休工作处不断尝试，取得了不俗的成就。成立了乒乓球队、门球队、太极拳队、健身舞队、民族舞队、时装队、书画社、珞珈诗社、体育舞蹈队、常青合唱团、康乐园、网球队、京剧社等13个文艺团体，积极参加和开展各项比赛和文艺活动，多次在国家级、省级或市级的比赛中获得骄人的成绩。
3建立健全对困难离退休干部的帮扶机制
对困难离退休干部的帮扶工作是做好服务与管理工作的重中之重。按照中央关于建立健全党内激励、关怀、帮扶机制的要求，各高校要结合实际制定和完善困难离退休干部的帮扶制度和办法，加大帮扶力度，深入开展助老帮困爱心工程，及时解决老同志最紧迫、最直接和反映最强烈的问题。尤其是对失独、高龄、空巢、长期生病生活不能自理的老同志，要给予个性化、亲情化的服务，通过上门服务、电话问候、精神慰藉等形式，为他们雪中送炭，帮助他们解决生活、医疗等方面的实际困难。例如，武汉大学利用武汉市2013年为65周岁以上老人免费安装社区居家养老服务求助系统“一健通”的有力时机，积极推进利用社区资源为高校老同志服务工作。加强与社区的联系和协作，整合各方面的资源，努力为高校老同志就近学习、就近活动、就近发挥作用、就近得到关心照顾创造有利条件。要创新离退休干部服务管理工作，加强对退休干部服务管理的研究，建立健全单位、社区、家庭相结合的离退休干部服务管理体系，提高服务管理质量，努力让他们过一个幸福、安宁、有尊严的晚年。
4工作人员要提高认识，增强感情，积极投身离退休干部服务与管理工作
