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动物实验研究范文1
关键词：输卵管阻塞；动物实验；综述
输卵管阻塞（Fallopian Tube Obstruction）是由于输卵管或盆腔腹膜炎症所致。当输卵管由于淋球菌、结核菌、衣原体、支原体感染或其它细菌感染，使输卵管发炎时，可破坏输卵管内膜上皮组织，使输卵管闭塞，炎症可以使输卵管粘膜破坏而形成瘢痕，引起管腔狭窄或阻塞。与卵子无法在通道相遇，引起不孕。输卵管阻塞性不孕症是临床常见病，据统计，因输卵管阻塞所致的不孕症约占整个不孕症人群的 30%～40% 。对于输卵管性阻塞性不孕症， 古代医籍中尚无明确的阐述，其症状可散见于"无子"、"断绪"，"带下"、"癥瘕"、"小腹痛"、"月经不调"等篇章中。
1 病因病理
1.1西医病因病理
1.1.1病因 淋球菌主要侵犯粘膜，且以泌尿生殖系统粘膜为主，有研究指出，输卵管粘膜为淋球菌的高度特异性受体[2]。一旦感染，将会对输卵管粘膜造成严重损伤。国内学者对大白兔感染解脉支原体后的输卵管进行病理分析，发现输卵管粘膜层上皮细胞出现轻度肿胀，粘膜下层炎性细胞浸润电镜下可见支原体粘附于输卵管粘膜上皮细胞上，同时，输卵管表面的纤毛出现粘连、倒状，微绒毛稀少、甚至脱落，纤毛细胞核膜欠完整，胞浆内出现大量大小不等的空泡。提示支原体到达输卵管后可致输卵管粘膜上皮的损伤[3] 。沙眼衣原体感染可导致输卵管纤毛上皮损伤，且沙眼衣原体热休克蛋白诱导人体产生抗体，引起迟法变态反应纤毛上皮损伤，引起输卵管粘连、阻塞和积水，发生不可逆性损害[4]。随着现代医学的发展，输卵管通液术、输卵管通气术、腹腔镜探查术、宫腹腔镜联合术、选择性子宫输卵管造影术、输卵管介入再通术及辅助生育术等多种现代技术运用于输卵管阻塞性不孕症的治疗领域，针对输卵管腔内粘连梗阻的局部治疗有了丰富的发展。
1.1.2病理改变 其病理变化以慢性间质部输卵管炎为主，此外，还有峡部结节性输卵管炎、输卵管积水、慢性输卵管积脓等病理改变。感染后的输卵管内膜肿胀、间质充血、水肿大量中性粒细胞渗出、弥漫性浸润、粘膜上皮坏死脱落等病理变化，造成管腔粘连闭塞；因输卵管伞端粘连，管腔渗出物排出障碍，储留于内而形成输卵管积水或积脓；或因结核导致输卵管粘膜溃疡、干酪样坏死瘫、痕组织。
1.2 中医病因病机 中医认为"任主胞胎"，"任脉通，太冲脉盛，月事以时下，故有子"。陈修园在《女科要旨·种子篇》指出："妇人无子，皆经水不调，经水所以不调者，皆由内有七情之伤，外有六之感，或气血偏胜，阴阳相乘所致。"肾气不足，痰湿内生，湿热邪毒内侵，情志失调，均可致冲任失调，气机不利，而致癖血内停，癖湿互结，痹阻胞宫，两精相隔而无子。中医认为，瘀积是导致本病的主要原因。输卵管阻塞不孕症的病因病机为外邪内伤导致痰浊、瘀血等病理产物出现，并做为新的致病因素，互相胶结，相兼为病，癖阻胞脉胞络导致不孕。清代陈士铎在《石室秘录》中提到："任督之间，倘有疝瘕之证， 则精不能施， 因外有所障也"。《傅青主女科·种子》也说："窟痕碍胞胎而外障，则胞胎必缩于庙瘾之内，往往经施而不能受。"而输卵管炎性不孕患者多有输卵管的扭曲或与其它组织粘连形成炎性包块，症状与中医所指癥瘕相符。而癥瘕的形成，多因气滞、血瘀、痰湿所致，各种内外因素导致气血运行不畅，气滞血癖，积于胞中，或令胞脉阻滞，则难以摄精成孕，故以活血化瘀、疏通胞脉为治疗大法。说明中医理论已经认识到生殖系统管道发生病理性阻塞， 可致受精障碍。
2 动物模型及评价
以苯酚胶浆剂[5]为代表，卫昊等[6]认为，苯酚胶浆造模的病理变化更贴近中医"血瘀"证的诊断标准，其模型复制方法更符合在中医理论指导下研究中药复方的思路。造模方法是向大鼠卵巢方向注入20%苯酚0.04ml剔除子宫有炎症和注药有阻力的大鼠，分层关闭腹腔。吴高媛[7]用0.2mol/L 盐酸宫腔注射制作大鼠子宫内膜炎模型及慢性输卵管炎模型。溶血性链球菌。李祥云等[8]用β溶血性链球菌制作兔输卵管阻塞模型。赵广兴等[9]采用"混合菌接种法"（大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、溶血性链球菌，按 2：1：1用无菌水稀释，浓度为30×108/ml混合菌），造模组大鼠因急性感染死亡5只，而正常组术后无1只死亡。
综上所述， 输卵管阻塞动物模型的制备：应根据不同的研究目的选择合适的动物模型， 目前还没有发现结合中医的病因和辨证分型来制作输卵管阻塞的动物模型，有待进一步努力制作此种动物模型，以实现辨病与辨证相结合。
3 动物实验研究现状及方向
3.1 细胞因子
3.1.1肿瘤坏死因子（TNF-a）参与输卵管炎症反应 Manimtim等[10]发现，人TNF-a以剂量依赖方式损伤输卵管粘膜细胞，阻断TNF-a的产生可减轻输卵管粘膜细胞的损伤程度，因而提出输卵管炎中的输卵管损伤部分由TNF-a介导。其作用机制可能为TNF-a的细胞毒性作用及诱导炎性细胞释放毒性物质的作用，从而刺激成纤维细胞增生，促进胶原酶释放等作用参与组织损伤、炎症纤维增生过程，造成输卵管狭窄、阻塞等。有关研究发现TNF-a与Ct、Uu感染所致的输卵管伤有关。Uu感染可诱导巨噬细胞、单核细胞等免疫细胞产生TNF-a， TNF-a升高与输卵管组织损伤有关。而Ct感染时输卵管上皮细胞首先释放TNF-a，再激活局部单核细胞、巨噬细胞产生更多的TNF-a。Jendro MC等[11]研究表明被衣原体感染的巨噬细胞可以通过细胞间接触或者体液因子来诱导T细胞的凋亡，从而逃逸T细胞的杀伤作用，有利于沙眼衣原体在细胞内生存，建立持续性感染，TNF-a产生增多，对输卵管造成损伤更严重。
3.1.2白细胞介素-2（IL-2） IL-2是机体免疫调节及炎症调控的重要细胞因子，IL-2亦称T细胞生长因子（T cell growth factor）是促使T细胞从G1期转至S期的关键性因子，主要由CD4及Th细胞产生，CD8 T细胞、NK细胞、LAK细胞亦可产生IL-2。静止的Th细胞在识别APC提高的抗原后，成为诱导性T细胞，继之活化，成为效应性Th细胞，并分泌一系列细胞因子，包括IL-2。IL-2是T细胞最重要的生长因子，可促使已激活的T细胞进一步增殖分化，促使T细胞分泌B细胞生长因子和分化因子。作为T淋巴细胞生长因子的白细胞介素2（IL-2）与细胞表面的高亲和力受体IL-2Ra（Kd=10-1lmol/L）结合，诱导淋巴细胞、自然杀伤细胞及巨噬细胞的增殖与分化[12]，提高T细胞、自然杀伤细胞及淋巴因子激活杀伤细胞的细胞毒活性，促进干扰素的分泌，还可诱导B细胞的增殖与分化[13]，从而提高机体的免疫功能[14]。因此，IL-2在免疫调节方面具有重要意义。
3.1.3 白细胞介素-6（IL-6） Schols等[15]发现IL-6参与全身性炎症反应，Ulich等[16]研究认为IL-6可发挥一定的抗炎作用。为抑制炎症的发展，局部免疫系统可能使单核巨噬细胞合成细胞因子能力加强，同样有可能使活化的单核巨噬细胞增加，刺激肉芽纤维组织的生长。在正常情况下，它可导致多克隆B细胞的增殖活化产生免疫球蛋白，诱导T细胞的合成及表达IL-2和IL-2R，以维持稳定的免疫功能。而高浓度的IL-6则可明显抑制T淋巴细胞IL-2和IL-2R的合成[17]。在创伤及感染时，IL-6的水平明显升高，可与其它炎性细胞因子如TNF-a一起诱发全身性炎症反应性综合征（SIRS），与患者的病死率有明显关系[17，18]。Kassem等[19]也认为，IL-6与其受体系统结合可促使分化成熟的B细胞分泌抗体，促进TC、TD细胞增殖分化等生物学效应，过量IL-6的产生，会导致过于剧烈的免疫反应，对机体造成伤害。有研究提示[17]，IL-6可能参与慢性炎症自身发展的病理生理，最终形成输卵管等局部组织粘连、促进肉芽纤维组织的生长。
3.2细胞凋亡 Bcl-2是调节凋亡基因家族的基本成员，这一家族成员还包括bcl-x、bax、bad、bak、bag-1、mcl-l和AT等等。Bcl-2基因产物在人体细胞中的表达量与细胞寿命长短有关。Bcl-2对正常细胞的生理作用尚不十分清楚，可能在保护各种细胞免遭凋亡方面具有调节作用，故被称为"凋亡抑制基因"。近年来对成人和胎儿非造血组织Bcl-2表达的研究提示：它可能与细胞发育、成熟、分化及形态发生有关。Bcl-2保护效应主要体现在线粒体摄入钙的增加和减少线粒体内钙对呼吸链的损害，推测可能阻断了线粒体膜转运孔道。尽管bcl-2有抗凋亡的作用，但这个凋亡调节蛋白的具体作用是复杂的。有许多学者对Bcl-2基因编码的蛋白调节凋亡的机制进行了探讨。Bcl-2是一个完整的膜蛋白，主要位于线粒体外膜上。细胞色素C正常存在于线粒体内膜上，对于凋亡程序的诱发启动是必不可少的。细胞色素C从线粒体释放到胞质内影响半肤氨酸蛋白酶家族，半肤氨酸蛋白酶家族对于凋亡启动有着重要的作用。凋亡细胞的线粒体内细胞色素C减少而胞浆内细胞色素C水平则升高。Bcl-2的过分表达可以阻止细胞色素C从线粒体内外流，提示Bcl-2阻止凋亡的机制可能为阻止细胞色素C从线粒体释放所启动的凋亡过程。目前认为Bcl-2蛋白能够直接抗自由基氧化，维持钙稳态、阻止线粒体释放细胞色素C，抑制凋亡蛋白酶的激活。
综上所述，对输卵管阻塞需作系统研究， 应从微循环、血液流变学、微生物学等多方面研究而不单单是免疫系统。将输卵管阻塞的实验研究与临床研究并举， 应当是现代中医对输卵管阻塞研究的主要内容之一。
参考文献：
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动物实验研究范文2
一、研究专题和期限
专题1、实验动物质量检测技术、实验技术及有关实验动物标准的研究和制定
研究目标：研究和建立新的实验动物质量检测技术、实验技术，研究和制定有关实验动物地方标准。
研究内容：
1、建立实验用鸭病原体检测方法和技术并制定*市实验用鸭地方标准；
2、研究和建立实验小鼠4-6种重要病毒同时检测的方法及技术；
3、定位、分析和研究东方田鼠部分染色体的遗传位标；
4、构建标记的腺病毒通用转移载体，提升实验动物质量监控和检测技术；
5、评价糖尿病小鼠母体对子代的亲缘效应并研究其分子机理；
6、采用五种以上先进成像技术，建立大、小鼠影像资料数据库并进行比较研究，初步建立小动物影像技术服务平台。
进度要求：年9月30日前完成
专题2、重要人类疾病动物模型的研究和建立
研究目标：建立若干种人类疾病动物模型并进行相关研究。凡涉及本专题项目需将有关研究成果纳入*实验动物资源中心统一管理。
研究内容：
1、通过定向培育，建立小鼠白内障动物模型种群并进行相关研究；
2、筛选、建立骨癌痛动物模型，并对模型进行评价和干预研究；
3、运用基因打靶和核移植技术建立若干人类疾病模型兔；
4、建立具有自主知识产权的转基因绿色荧光兔种群并进行相关研究；
5、其它具有自主知识产权的、重要人类疾病动物模型的建立、收集、保存、特性研究、评价和推广应用。
进度要求：*年9月30日前完成
专题3、实验动物福利相关研究
研究目标：对实验动物麻醉、镇痛方法、机体应激反应进行研究和评价；开展实验动物减少和替代技术的研究。
研究内容：
1、对大型实验动物若干种麻醉方法（不同药品种类、剂量、途径）进行比较和评价并制定技术规范；
2、对清洁级实验兔、豚鼠和地鼠若干种麻醉方法（不同药品种类、剂量、途径）进行比较和评价并制定技术规范；
3、对实验兔、豚鼠和地鼠机体应激水平进行评价，对应激干预方法进行研究，并建立技术规范；
4、研究和建立规范的、能减少与替代动物实验的方法及技术并推广应用。
进度要求：*年9月30日
二、申请方式
1)本指南公开。凡符合课题制要求、有意承担研究任务的法人、自然人均可以从“*科技”网站上进入“在线受理科研计划项目课题可行性方案”，并下载相关表格《*市科学技术委员会科研计划项目课题可行性方案（*版）》，按照要求认真填写。书面可行性报告要求同时附上相应的知识产权状况查新报告。鼓励多家单位联合申报，实行资源共享，并在申请材料中明确各自承担的工作和职责，并附上合作协议或合同。
2)课题责任人年龄不限。鼓励通过课题培养优秀的中青年学术骨干。作为课题责任人和主要科研人员，不得同期参与承担的863、973、国家科技攻关和*市重大、重点科研课题数超过三项。
3)每一课题的申请人可以提出不超过2名的拟回避自己课题评审的同行专家名单（名单可以随课题可行性方案一同提交）。
4)本专项课题的申请起始日期*年3月2日，截止日期为*年3月23日。课题申报时需提交书面可行性方案一式8份，并通过“*科技”网站提交可行性方案和所有表格。书面可行性方案集中受理时间为*年3月17日至3月23日，每个工作日上午9：00—下午4：30。所有书面文件请采用A4纸双面印刷，普通纸质材料作为封面，不采用胶圈、文件夹等带有突出棱边的装订方式。
5)网上填报备注：
1）登陆“*科技”网，进入网上办事专栏；
2）点击《科研计划项目课题可行性方案》受理并进入申报页面：
-【初次填写】转入申报指南页面，点击"专题名称"中相应的指南专题后开始申报项目（需要设置“项目名称”、“依托单位”、“登录密码”）；
-【继续填写】输入已申报的项目名称、依托单位、密码后继续该项目的填报。
动物实验研究范文3
【摘要】 目的研究大田基黄多糖对SD大鼠、家犬及自发性高血压大鼠(SHR)血压(BP)的影响。方法应用颈动脉插管测压法，连接BL-420生物机能实验系统测定给药前后血压值。结果大田基黄多糖使SD大鼠、家犬及SHR血压明显降低(P
【关键词】 大田基黄 多糖 血压
大田基黄Lysimachia fortunei Maxim.系报春花科排草属多年生草本植物，又名红根排草、星宿菜，生于山坡、溪边低草丛潮湿地，在我国华东、中南各省均有分布。5～7月开花，夏秋采集开花全草，鲜用或晒干，全草入药，有活血散淤、利水化湿之功效［1］，广西民间用于治疗肝硬化、肝腹水、高血压病等，国内外未见对其药效学的研究报道。
目前治疗高血压病的常用药物有利尿药、交感神经抑制药、血管紧张素抑制剂、血管紧张素转化酶抑制剂、Ca2+通道阻滞剂、血管扩张药等［2］。中药在高血压病治疗上的应用很多，但大多是复方或者草药，对于单体研究得不多。本研究观察广西民间习用药材大田基黄提取分离得到的多糖对正常大鼠、家犬及SHR的血压的影响，为临床治疗提供理论依据。
1 器材与方法
1.1 药品大田基黄粗多糖、大田基黄多糖LFMP2本室自行制备；阳性药物盐酸地尔硫卓（Diltiazem，Dil）由国药集团国瑞药业有限公司生产，批号0510002；异丙肾上腺素(ISO)为无锡第四制药厂生产，批号为040801；硝苯地平，山东方明药业有限公司产品，批号0207232。
1.2 动物SD大鼠，由广西医科大学实验动物中心提供，体重(320±20)g，雌雄兼用；家犬为普通市售， 体重(11±1.5)kg；自发性高血压大鼠(SHR)，由中科院上海实验动物中心提供，清洁级，体重(320±20)g。
1.3 仪器BL-420生物机能实验系统(成都泰盟生产)。
1.4 统计分析数据采用±s表示，用华西医科大学统计软计PEMS进行统计学处理，比较组间有无显著性差异。
1.5 实验方法两种大鼠、家犬均以戊巴比妥钠30 mg/kg腹腔麻醉，常规气管插管，颈动脉插管后经压力换能器连接BL生物机能实验系统，记录血压变化［3］。每次均待血压恢复至稳定10 min后SD大鼠、家犬股静脉穿刺给药，SHR口服给药，记录给药前及给药后不同时间的血压值。
2 结果
2.1 大田基黄多糖LEMP2对正常大鼠血压的影响正常血压SD大鼠30只随机分为5组，每组6只。设立阳性药地尔硫卓（Diltiazem）对照组，剂量1.25 mg/kg；生理盐水组；大田基黄多糖LFMP2高、中、低剂量组，分别用量为20，10，5 mg/kg［4］。记录药前、给药后1，3，5，10，15，20 min时的血压值。结果见表1。
2.2 大田基黄多糖对正常家犬血压的影响家犬38只，随机分为5组，设立阳性对照异丙肾上腺素（ISO）组，剂量0.005 mg/kg；生理盐水组；大田基黄粗多糖高、中、低剂量组，剂量分别为100，50，35 mg/kg。记录给药前、后不同时间血压。结果见表2。
2.3 大田基黄多糖灌胃对SHR大鼠血压的影响原发性高血压大鼠（SHR），设立阳性硝苯地平（NIF）组，剂量 0.02 g/kg；生理盐水（NS）组;大田基黄粗多糖高、低剂量组，剂量分别为2.0，1.0 g/kg。实验前禁食12 h，麻醉前30 min灌胃给药1次，测给药前、药后240 min内血压变化值，并与生理盐水组比较。结果见表3。
表1 大田基黄多糖LFMP2对正常大鼠血压的影响（略）
组内比较，*P
表2 大田基黄粗多糖对正常家犬血压的影响（略）
与NS组比较，*P
表3 大田基黄粗多糖灌胃对SHR血压的影响（略）
与NS组比较， * P
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3 讨论
我们采用静注和灌胃两种给药方式，就大田基黄多糖对正常和自发性高血压动物模型血压的影响进行了研究，结果表明静脉注射大田基黄多糖LFMP2或者粗多糖对麻醉SD大鼠、正常血压家犬均有明显的降压作用，降压特点为快、长、强。
从统计结果看，静脉给药正常血压大鼠，高剂量组、中剂量组、小剂量组组内比较，与阴性组比较均有非常显著性差异（P＜0.01）。采用静脉给药方式，大田基黄多糖LFMP2对正常血压大鼠具备较好的降血压作用，小剂量平均降压维持时间达15 min以上，中剂量和高剂量降压维持时间超过20 min，药物作用呈剂量依赖性关系。
静脉给药正常血压家犬，药物高剂量组、中剂量组与阴性组比较，均有非常显著性差异。在1 min 时高、中剂量组血压降低百分数与阳性药异丙肾上腺素相近，降低特点与幅度也与阳性药接近，呈现一定的剂量依赖关系。
灌胃给药自发性高血压大鼠，高剂量组、中剂量组均有非常显著性差异。在检测时间240 min内，大剂量组降压效果比小剂量组降压效果稍差，可能原因为短时间内高浓度药物无法有效吸收所致。
静脉给药后血压很快下降，持续时间较长，各剂量组给药后均可观察到一个明显的降压幅度改变过程。尽管对两种动物都有降压作用，但效果、降压幅度与剂量依赖性关系又有一些不同。由于二者药物纯度不同，降压幅度、对动物影响情况不好比较。灌胃给药对SHR有很好的降血压作用，降压维持时间长，高剂量组降压幅度比低剂量组小，其原因有待进一步进行研究。
有研究认为［5，6］灌胃给药后，药物有可能在胃肠道受pH影响而破坏，而使血药浓度达不到治疗要求。大田基黄以灌胃给药方式能够起较好的降低血压作用，证明其在胃肠道内比较稳定或者代谢物仍然具有活性。高血压病是一种慢性病，没有特殊疗效的药物，需要长期服用药物加以控制，静脉给药不太适合高血压病这样的慢性病，大田基黄能够满足口服用药的条件，本研究为大田基黄临床治疗高血压病提供了理论依据。
大田基黄多糖对其他高血压动物模型的降压效应如何，其降压机理是怎么样等还有待进一步深入研究，要对其降压作用作出综合而全面的评价，是我们的下一步的工作。
【参考文献】
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动物实验研究范文4
关键词：三维超声心动图；左室心外膜多点电极；CRT；实验
应用三维超声心动图（Three dimensional Echocardiography，3D-Ech）新技术评价微创外科方法植入左室心外膜电极的CRT的可行性和疗效，特别是从三维空间角度分析心脏电-机械运动与左心室收缩及舒张功能的相互关系，可以为寻找评价心脏不同步的敏感指标、三维空间定位和指导外科左室心外膜电极植入位置提供科学的理论依据和安全有效地操作方法，对于CRT治疗方案进一步完善和个性化治疗有重要意义。本文旨在通过三维超声心动图对左室心外膜单点与多点电极起搏器植入，对左室心肌收缩同步性存在的差异进行准确定量评价。
1资料与方法
1.1一般资料 健康中华小型猪13只，质量22.0～26.0 Kg雌雄不限，采用快速心室起搏导致III度房室传导阻滞的方法制备猪心力衰竭动物模型，以左室舒张期末压力（LVEDP）>18 mmHg和心输出量（CO）下降>30%认定为小型猪心力衰竭模型为成功。造模过程中，死亡2只。将剩余11只小型猪通过超声引导对其进行小切口左室心外膜增加临时起搏电极的多点电极起搏器植入方法治疗。
1.2方法 仪器为Philips IE33彩色多普勒超声仪，矩阵三维探头，型号X3-1频率1～3 MHz，数据通过QLab定量分析工作站处理分析。通过介入方法置入右心电极，在超声引导下通过外科小切口对心衰猪模型放置左室心外膜单点与多点电极于最佳位置。分别于术前及术后3 w将三维探头置于心尖部，取得满意的心尖四腔观图像后，启动全容积显像方式，收集全容积成像三维数据， 将图像传输至工作站。脱机后在工作站中打开QLab 定量分析软件，应用3DQ 软件进行定量分析。分别在舒张末期和收缩末期调节矢状切面和冠状切面位于左室中央，横切面位于二尖瓣环水平，分别选定四腔心切面二尖瓣环水平的室间隔及侧壁、二腔心切面二尖瓣环水平的下壁及前壁、心尖顶点5个左室心内膜取样点后，软件自动描绘出动态三维心内膜轮廓。在进行序列分析后，软件自动输出左心室舒张末期容积（left ventricular end-diastolic volume，LVEDV）、收缩末期容积（left ventricular end-Systolic volume，LVEDV）、每搏输出量（stroke volume，SV）、射血分数（left ventricular ejection fraction，LVEF）、左室的17节段整体时间-容积曲线图，并计算多普勒指数（Doppler index，也称Tei指数）。
1.3统计学分析 采用SPSS 11.0统计软件，数据以均数±标准差（x±s）表示，组间比较采用成组t检验，P
2结果
2.1小型猪的左室舒张末期容积（left ventricular end-diastolic volume，LVEDV）术后相对于术前明显减小（P
2.2通过小切口左室心外膜增加临时起搏电极的多点电极起搏器植入后，小型猪Tei指数较术前显著提高（P
3讨论
CRT治疗是针对存在心室运动不同步的患者，对于不存在心室运动不同步者实施CRT是无反应的；理论上，将左室电极放置在左室收缩最延迟节段能取得最佳的效果，因此CRT术前适应证的选择（即心脏不同步的判定）和左室电极的植入位置是CRT技术的关键，也是影响和决定CRT疗效的两点重要因素。三维超声心动图可以对最晚激动节段位置的确定起到潜在的优化作用，而且还可以显示电极与心腔和室壁的空间关系，确定不同步节段的部位和范围，并对起搏导线进行心腔定位，为置入电极选择最佳的起搏部位，观察有无起搏器植入并发症发生，提高CRT 疗效。
急性血液动力学研究已证明，起搏部位对提高心室功能至关重要。因此可假定，CRT无反应者其起搏部位不是最佳的。目前植入左室电极的常用方法是经冠状静脉窦逆行置于冠状静脉内，但是由于冠状静脉的变异等原因使8%～10%的左室电极不能成功植入和近半数左室电极位置的不够精确[1]。随着技术的发展，经心脏静脉植入失败或不适合内科CRT的患者，可通过外科方法（尤其是微创外科方法）植入左室心外膜电极导线。微创外科心外膜导线植入术具有成功率高、可放置到左心室电极理想位置（靶位置）、脱位率低等优点，可使心衰患者最大受益于CRT。笔者应用实时三维超声心动图技术来定量分析评价左室整体容积、射血分数及左室17节段时间-容积变化曲线等参数， 结果显示LVESV、LVSV、LVEF在术前与术后具有显著性差异（P
研究中，左室做功指数在术后得到显著提高（P
过去认为由于心肌纤维解剖和心电传导复杂性以及超声二维技术本身的局限性[3]，到目前为止，公认的CRT适应证的选择仍沿用电活动参数（QRS>120 ms）作为评价心脏不同步的指标，而关于超声评价心脏同步性的最佳方法和指标的讨论一直都很激烈，尚未发现公认的最佳的超声预测指标[4-5]，但是很明显，电活动指标（心电图）并不能完全代表心脏的机械运动同步性，因此需要通过前瞻性的动物实验结合血流动力学状态筛选出评价心脏不同步的最优指标。三维超声心动图技术是建立在三维灰阶基础之上的，可以真实反映三维立体空间容积与室壁运动情况，在空间全方位地、立体地显示心室形态、容量，可以对左室延迟节段的部位和范围进行三维空间的定位，为CRT的开展与疗效评价提供理论和技术上的支持。
笔者应用超声定量新技术观察微创外科左室心外膜多点电极的动物实验研究。采用猪心力衰竭动物模型，应用超声新技术评价微创外科方法植入左室心外膜电极的CRT的可行性和疗效，特别是对左室心外膜多点电极与单点电极两种植入方法的疗效的对比，从三维空间角度分析心脏电-机械运动改善与心室收缩剂舒张的关系，为寻找评价心脏不同步的敏感指标、三维空间定位和指导外科左室心外膜电极植入位置提供科学的理论依据和安全有效地操作方法，对于CRT治疗方案进一步完善和个性化治疗有重要意义，必将具有广阔的应用前景。
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动物实验研究范文5
【关键词】 关节炎，类风湿；动物模型；自身免疫性疾病；综述
类风湿关节炎（rheumatoid arthritis，RA）是一种以关节滑膜慢性炎症病变为主要特征的自身免疫性病变。我国的患病率为0.32 %～0.36 %，是造成我国人群丧失劳动力和致残的主要病因之一[1]。国内外学者对RA进行了大量的动物实验研究，并形成了一些较为成熟的动物模型，本文对现阶段较常用的关节炎模型进行简要阐述，以期借鉴。
1 佐剂性关节炎（adjuvant arthritis，AA）模型
AA模型最先由细菌学家Freund于20世纪50年代创立，是建立免疫性关节炎动物模型的常用方法[2]。多数是在大鼠足趾皮内注射弗氏完全佐剂（CFA）0.1 ml致炎；但另有研究表明，0.15 ml注射量可能是RA模型复制中的最佳注射量[3，4]。其发病机制主要为分子模拟理论，CFA皮内注射延缓机体吸收，造成对机体不断刺激而产生继发性自身免疫应答反应。
AA大鼠模型的原发病变属急性应激反应，致敏后即可出现致炎侧的关节、足跖红肿。18～24天达峰值，持续3天后逐渐减轻；致炎后10天左右发生继发病变，属自身免疫应答反应，20天左右达高峰，一般表现为造模后出现的致炎侧、非致炎侧（对侧） 及双前肢的关节和足跖肿胀，耳、尾“关节炎”结节等[5]。
该模型是目前应用最广泛的模型复制方法，具有耗费少、方法简单易行、病理表现类似于RA等优点；但AA缺乏慢性病理过程，病变具有一定自限性。
2 胶原性（collagen-induced arthritis，CIA）关节炎模型
CIA模型是Trentham等1977年首次建立的实验性关节炎模型[6]，在大鼠背部、尾根部多点皮下注射CII胶原乳剂（1 mg・ml-1），每只大鼠1.0 ml。初次免疫10天后加强免疫，再在鼠背部、尾根部皮下注射1 ml乳剂（尽量避免与初次免疫注射位置相同） [7]。CIA的发生、发展是个复杂的免疫过程，由细胞免疫、体液免疫以及相关的细胞因子共同参与，且受控于主要组织相溶性复合体。CIA模型具有典型的关节炎体征，小鼠在致炎后24天左右出现，36天左右最严重；大鼠14天左右出现，21天左右最严重。后足踝关节最常受累，肿胀一般持续5～8周，最终导致关节的畸形。CIA的关节炎发病率比单独使用弗氏完全佐剂注射显著提高，且CIA模型临床症状、病理学改变等类似RA [8]。但CIA在同种属、同周龄、相同诱发因素和生活环境下，发病时间相差较大，临床表现轻重不一。
3 卵蛋白诱导的关节炎模型
最早由Dumonde和Glynn于1962年首次建立[9]。用卵蛋白溶解于生理盐水配成浓度为20 mg・ml-1的溶液，与等量弗氏佐剂混匀，注入动物背部皮下，每周1次，连续3周致敏，末次注射后1周于关节内注入5 mg卵蛋白[10]。其机制为关节内抗原持续存在，刺激滑膜细胞出现抗体并形成抗原-抗体-C3复合物，激活补体产生局部炎性反应，诱导 T 细胞介导的免疫反应，使大量淋巴细胞、单核-巨噬细胞及中性粒细胞浸润于滑膜间质，逐渐形成血管翳，其覆盖软骨后导致其变性和降解[11，12]。
关节内注入抗原后，24 h出现关节红肿热痛等急性炎症的表现，随后关节肿胀有所减轻，至14～21天达到平台期；1～4周内，关节滑膜明显增生，血管翳形成，部分动物可出现早期软骨破坏；4周后出现不可逆的关节软骨及骨破坏，最后可出现骨变形，最长到6个月时能够观察慢性炎症仍存在。
该模型成功率高，可在兔、羊等动物上复制，关节相对较大，适合需观察较大病变关节的研究，但免疫学指标及病程特点与RA具有一定的差异性[13-16]。
4 病症结合模型
中医根据其临床特征，病症结合模型主要分为风寒湿痹阻症模型、风湿热痹证模型和肾虚痹证模型。
风寒湿痹阻症动物模根据“风、寒、湿三气杂至，合而为痹”的中医学理论，在造模的第1天，于大鼠右后足跖皮内注射CFA 0.1 ml，同时将大鼠置于5～7 ℃冰水中，水深2 cm，站立20 min，同时伴以4级风力吹，每天1次，连续14天[17]。其他如将Wistar雄性大鼠尾根部、颈背部皮内多点注射小牛Ⅱ型胶原，其间每天在造模箱中给予风寒湿三种外界因素刺激的，为改良的胶原诱导性关节炎动物模型[18，19]。风湿热痹证模型同上述风寒湿痹证动物模型，只是将风寒湿刺激改为风湿热刺激。肾虚痹证模型由艾景录等[20]建立，具体方法为Ⅱ型胶原免疫注射制作实验性痹证模型，复加雄鼠雌激素应用法和雌鼠卵巢切除法所致肾虚。
病症结合模型比单用CFA 或CIA等炎症周期长、模型稳定，且模型效果显著，更能体现中医学“证”的特色，适应中医辨证论治的需要。但该模型尚不完善，如只是简单地将中医证的动物模型与西医病的动物模型相叠加；环境刺激条件上没有统一的标准，刺激时间及频率也各异；证候属性评价困难；模型稳定性、可靠性差等问题[21，22]。因此，在研制包含病因和中医证候在内的中医动物模型时，要借鉴现代科学技术和方法引入到中医学理论体系中来，对中医学理论进行验证，并通过实验去发现新的现象和本质，提出新的问题和假设，形成新的科研思路，从简单的外部造模手段的病证结合，向病证本质的内在联系发展，构建从临床到基础研究模式。
5 其 他
除以上四种疾病模型外，常用的RA动物模型还有蛋白多糖诱导的关节炎模型、软骨低聚体基质蛋白诱导的关节炎模型、Avridine诱导的关节炎模型、降植烷诱导的关节炎模型、链球菌细胞壁成分诱导关节炎模型、佐剂角叉菜胶诱导的关节炎模型等。但它们一般用于特定的研究，比如Avridine诱导的关节炎模型侧重于研究辅剂和先天免疫系统在侵蚀性关节中的作用；佐剂角叉菜胶诱导的关节炎动物模型主要用于炎性药物的筛选等[23-25]。
6 总 结
理想的类风湿关节炎动物模型应具备以下特点：①临床症状、病理和影像学的特点与人类RA相似，尽可能少的非RA特点；②易感的品系容易得到且价格便宜、可高效繁殖；③可模拟类风湿关节炎患者的治疗作用；④易检测疾病和免疫功能的变化；⑤可缩短疾病的自然发生过程。但是，RA是由环境、免疫、遗传、感染等多种复杂因素共同作用的结果，而目前的RA动物模型只是在特定条件下，选取其中某一个或某几个侧重因素而建立起来的，并不能完全反映RA的所有属性，不同的类风湿关节炎动物模型可能只代表了RA发病特点的某一个或某几个方面。因此，选择RA动物模型时，应根据药物特点，结合发病机制及其与临床的关系，选择适合的动物模型进行研究。
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动物实验研究范文6
【关键词】实验动物专业；实践教学体系；研究
实践教学是培养学生实践能力以及综合素质的重要教学环节，具有直观性、实践性、综合性、创新性，直接影响着人才培养质量。[1]实践教学体系是由实践教学活动中的各要素构成的有机联系整体，具体包含实践教学活动的目标体系、内容体系、管理体系和保障体系等要素。实践教学体系是一个有机的整体，在运行中各组成要素既要发挥各自的作用，又要协调配合，构成实践教学体系的总体功能。[2]
上海农林职业技术学院实验动物专业的培养目标是培养熟悉实验动物和动物实验基本知识，掌握实验动物饲养、管理、模型及标本制作和动物实验等基本技能，适应高等院校、科研机构、药品检验及评价机构、兽药或生物制品厂及相关行业部门从事实验动物饲养、管理、动物实验、模型及标本制作等工作岗位变化的知识型、发展型技能人才。加强实践教学环节，密切与企业的联系，建立合理的实践教学体系是实验动物专业能否真正办出成效、办出特色的关键，也关系到实验动物专业人才培养目标的实现。本研究力图通过建立一套适合实验动物专业学生的实践教学体系，培养出适应实验动物行业发展、受用人单位欢迎的高级应用型人才。
1.实验动物专业实践教学目标体系
1.1实践教学以达到毕业生可直接上岗为目标
“ 拿过来可以直接用”是大多数企业用人的基本要求，因此实验动物实践教学的目标就是要使经过专业实践培养的学生毕业后无需培训，或仅需短暂培训就可以上岗，这样就大大节约了企业用人的成本。因此毕业生的就业渠道会非常畅通。
1.2 实践教学内容的选取以岗位需求为目标
近些年来，实验动物专业毕业的学生主要从事的岗位有医学院、医院、生命科学研究单位的实验动物饲养管理岗位；食品、药品安全评价动物实验员岗位；动物药理与毒理实验员岗位和生物制品及药品研发辅助和生产制备岗位这四大类岗位。在设计实践内容时紧贴岗位需求，做到岗位需要什么，学生就实践什么。
1.3实践教学形式多样化，实践中学习、感悟和升华理论知识为目标
充分利用课内课外一切可能的时间，校内和校外一切可用的资源，开展不拘一格、形式多样的专业实践教学活动。在日常教学中，有些学生觉得理论知识枯燥无味，甚至一些学生认为高职就不应当学习理论知识。可一进行实践，发现自己的理论知识非常欠缺，甚至实践活动被迫由此而停止。因此，通过实践教学，学生可把原来老师传授的知识得以巩固和升华，同时会自学或向他人学习一些新的理论知识。
2.实验动物专业实践教学的内容体系
根据实验动物专业就业特点和学院内外的实践环境，课题组确定了校内和校外两大实践板块。校内实践板块包括专业素质和技能训练单元、专业技能强化单元、模拟企业的专业方向综合实训单元三部分；校外实践板块包括企业初步认知卧、企业实习周单元、订单实习单元、职业生涯规划与社会实践单元和毕业顶岗实习单元五部分。具体内容表1。
2.1 校内实践板块
2.1.1专业素质和技能训练单元。
利用为期两周的入学军训培养学生吃苦耐劳，团结协作等基本专业素质，这些基本素质是学生日后学习和工作中最为宝贵的素质，军训在培养这些素质方面发挥着其他任何实践都无法取代的作用。
利用各类的专业基础课和专业课中的实验和或实训课来训练学生专业的基本技能。教学计划规定每门专业基础课和专业课的学时不能少于课程总学时的50%，所有的专业基础课和专业课程均直接在实验实训室进行。能施行项目化教学的课程都施行理实一体的项目化教学模式。以《实验动物》这门课为例，在项目一任务三实验动物给药为例 采用了如下教学模式，见表2。
2.1.2专业技能课余实训单元。
上海农林职业技术学院实验动物国际培训是与美国GR8培训机构、国家新药安全评价研究中心等单位进行合作，引入美国实验动物网上课程和国际标准的教材，在暑期由GR8公司提供师资和教学材料，学院提供教室、实训场地、相关的动物和实训器械等，共同组织开展实验动物饲养、设施和动物实验等基本理论和操作培训，包括实验动物法律法规、小鼠、大鼠、兔、犬的饲养、护理、动物试验基本操作，动物福利等内容。培训已经进行了三届，每届为期2周，每届人数在20人左右，获得相关证书，受训学生大部分进入相应跨国企业或行业内大型企业工作。
利用学院的”五四文化节”每年举办一次实验动物校内技能比武，预赛要求所有实验动物专业学生必须参加，选拔项目是实验动物专业的重点技能，选出优秀的选手在决赛中向全体学生展示技能。通过这样的比武，再次训练和强化了学生的专业技能。
将全部的实训室开放，学生利用业余时间可以自愿到实训室参加实验实训材料的准备，成立专业学生社团，在实训室开展学生科研活动。
学院的实验动物实训中心的运作主要由学生来参与，学生负责实验动物的日常饲养管理，参与教师的科研项目，这样有效地锻炼了学生的实践能力。
2.1.3岗前专业核心技能综合实训单元。
实验动物专业的核心技能见表3。
在第五学期，根据学生日后就业岗位所需的综合技能，结合实验动物上岗证考证要求，分实验动物饲养管理、动物模型制作、动物试验基本技能和动物试验设计这四个模块进行岗前专业技能综合实训，为期九周，之后学生要参加实验动物上岗证考核，考核成绩作为学生毕业成绩的重要组成部分，这样既确保学生都能掌握相关技能，又使学生在上岗前拿到了从业资格证书。
2.2校外实践板块
2.2.1企业初步认知单元。
在入学第一周的专业教育阶段，选取几个典型的合作企业，带领学生到企业进行认识性参观，参观中由企业专家对企业的工作环境，工作岗位的要求、工作流程等进行详细的介绍，为学生初步了解专业，了解日后的工作场所奠定坚实基础。
2.2.2企业实习周单元。
从第二学期开始，每学期抽出一周的时间，派学生到相关合作企业实习，要以观看企业员工操作，熟悉某一岗位操作流程为主，企业师傅认可下才可以动手操作，实习完成后要求学生撰写实习报告。
2.2.3订单实习单元。
与国家新药安全评价中心合作，每届选出15名学生，组成实验动物专业订单班。这些学生作为企业的准员工，由企业发放补贴，专业实践操作主要在企业进行，由专门的师傅指导，毕业后必须在企业至少工作三年。
2.2.4职业生涯规划与社会实践单元。
社会实践是广大学生从事生产实践、巩固理论学习的有效途径。利用寒暑假，结合所学专业， 开展学习参观、技术咨询、技术服务、调查研究等多种形式活动，并提交调查报告。[3]社会实践有利于学生对理论知识的转化和拓展，把所学的理论知识与接触的实际现象进行对照、比较，把抽象的理论知识逐渐转化为认识和解决实际问题的能力。通过实践锻炼，让学生养成吃苦耐劳、踏实肯干的品质，使学生练就了较强的动手操作能力。
2.2.5毕业顶岗实习单元 。
从第五学期的后三个月和第六学期，学生经过面试到相关企业进行至少为期6个月的顶岗实习。实习单位及岗位如下表4。实习结束时上交一份实习报告。
3.实验动物专业实践教学管理和保障体系
无论是校内实践板块还是校外实践板块，都制定了严格的实践教学管理和保障体系。
3.1 校内实践教学管理和保障体系
3.1.1编写实践教学材料，保障实训内容、形式和考核评价有合理依据。
每门专业课都编写了实践教学大纲、实验实训进度表、实验实训指导书。校内技能比武编写了详细比赛方案。实验动物实训中心管理人员制定日常运行和实训管理规范。综合实训教师团队编写了较为完善的实训大纲和综合实训指导书。这些教学材料有效地确保了校内实训的顺利进行。
3.1.2 任课教师和实验员共同负责管理学生实践。
校内实践主要由任课教师、实验员和辅导员共同负责。任课教师主要负责实验实训课现场的组织、管理和考核。部分核心专业课教师还要负责校内技能比武的组织，学生专业社团的指导和实验动物实训中心学生的管理。实验员主要负责准备和指导学生准备实验实训材料、协助教师管理课堂实验实训活动和在开放实验室指导学生课余的实践活动。
3.1.3 实践的考核评价。
课堂实践的考核主要包括技能考核、职业基本素质与态度考核两部分。技能考核包括日常课上的每个实训项目，都要在每次实训结束前进行逐一考核，记录成绩；期中和期末的技能考核。职业基本素质与态度的考核是指在平时技能操作的过程中考核学生的纪律性、认真程度、耐心、分析解决问题能力、报告书写、团队协作能力等进行考核见表5。
3.2 校外实践教学管理体系
3.2.1制定校企合作实习教学文件。
校外实习文件主要包括社会实践表、学生顶岗实习管理办法、学生顶岗实习记录明细表、学生顶岗实习记录明细表、学生顶岗实习考核表、校内指导教师实习指导记录、学生顶岗实习成绩表、毕业实习鉴定表等多个有效保障实习效果的文件。
3.2.2 “三师制”的校外实习教学管理体系。
三师制”是指在校外实践期间，由企业技术人员和学校专业老师和辅导员共同指导和管理学生，严格考核。具体分工见表6。
“三师制”让学生在实践期间接受企业的严格培训及企业和学校的共同管理，从而使学生圆满地完成实习任务，顺利地走入工作岗位。
3.2.3明确对实习单位和学生的要求。
实习单位是学生顶岗实习期间的直接管理者，校企p方共同制订的实习计划、共同确定学生的实习岗位、实习内容、考核目标等。
对学生的要求如下：（1）学生离校前须认真学习顶岗实习的有关规定，了解实训任务，并签订《学生顶岗实习协议书》。（2）按规定时间到实习单位进行顶岗实习，无正当理由不得擅自离开实习单位。未经实训单位同意擅离岗位者，实习考核按不合格处理。若由于顶岗实习单位单方面原因，必须上报校内指导教师，由指导教师与顶岗实习单位联系证实后，方可办理相关的离岗手续，并调换到新的顶岗实习单位，不允许先离岗后报告。（3）学生到岗两天内必须报告校内指导教师，一周内将实习的作息时间安排告知指导老师，以便指导教师抽查指导；可通过电话、短信、QQ、E-mail、网上留言等多种方式，每周至少与校内指导教师保持联系一次。（4）顶岗实习的学生具有双重身份，既是一名学生，又是实习单位顶岗实习的一名员工，要服从实训单位和学院的安排和管理，尊重实习单位的领导、实习指导教师和其他员工。（5）按照顶岗实习计划、工作任务和岗位特点，安排好自己的学习、工作和生活，培养独立工作能力，刻苦锻炼和提高自己的业务技能。（6）收集好有关顶岗实习资料等，按要求写好顶岗实习毕业论文和学生顶岗实习小结，完成各项实习任务。（7）自觉遵守国家法律法规，遵守实习单位的规章制度，有事必须向实习单位指导教师和校内实习指导教师双方请假，不得擅自离岗，不做损人利己、有损实习单位形象和学院声誉的事情，不参与一切违法犯罪活动。
3.2.4“校内、校外”双考核和评价体系。
比如在顶岗实习结束时，由企业师傅给每位学生填写“上海农林职业技术学院学生顶岗实习考核表”客观地给出学生的顶岗实习成绩，该部分成绩占学生顶岗实成绩的70%。校内的专业指导教师和辅导员共同填写“上海农林职业技术学院学生顶岗实习成绩表”，其中学院指导教师评价占30%。学生顶岗实习成绩合格是学生毕业必须条件。
4.实验动物专业实践教学保障体系
4.1建设合理的实践教学团队
利用特色校建设的契机，通过让专业教师和实验员定期到实验动物相关企业顶岗实习、让专业教师和实验员攻读学位和参加国内外各类学术研讨会和培训会、聘请企业专家来校上实训课和讲座等形式逐渐形成一支年龄、学历、职称和专业资格结构合理，能理论联系实际，富有实践创新意识和团队协作精神的“双师型”实践教学团队，保障实践教学工作正常运行 [4]。
4.2建设校内外实践教学基地
校内，利用085和特色校建设的经费，新建和扩建了实验动物实训中心，中心按照企业运行模式管理。校外，通过与多家企业签订顶岗实习协议，与一家企业合作建立双主体的订单班等多种途径建立形式多样的实践教学基地。
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