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保护眼睛的途径范文1
（浙江工业大学法学院浙江杭州310023
【摘要】在静态图像上嵌入数字水印可以公示所有权，数字水印可以在静态图像著作权被侵犯时作为纠纷中的证据。借鉴国外立法与实践，总结我国经验，应充分灵活运用数字水印技术，保护静态图像著作权，发挥其人文、艺术价值。
关键词 数字水印；静态图像；著作权保护
According to the static state picture work power of the numeral watermark protection research
Zhu Jin yi
【Abstract】Imbeding numeral watermark on the static state picture can Mr. show ownership， numeral watermark can at the static state picture work power drive infringe upon Be the proof in the dispute.Draw lessons from abroad lawmaking and practice， summary our country experience， should full use flexibly numeral watermark technique， protection the static state picture work power， exertive its humanities， art value.
【Key words】Numeral watermark;Static state picture;Work power protection
一、数字水印概况
（一、数字水印的概念
有学者认为在使用者对静态图像著作权者造成损害而感到困扰的时候，使用图像时也会对其真实性和完整性产生怀疑。作为保护多媒体信息真实性、完整性的传统加密技术存在缺陷，数字水印是作为加密技术的补充，在多媒体信息的著作权保护和完整性验证方面得到迅猛的发展。
数字水印是可以以一种不容易被人所觉察到的手段插入一个或多个秘密信息，来实现隐蔽传输、存储、标注、身份验证、著作权保护等目的，并且这种方法不会影响到原载体的使用，为数字数据权利人所享有的权利提供保护的一种技术手段。当一个作品的著作权或所有权发生冲突时，可以提取嵌入原载体的水印来验证其权威性。
（二、数字水印的特征
1、鲁棒性（稳健性：
是指一个数字水印应能承受大量的改动，包括恶意处理和常规处理。恶意处理包括：慕改、伪造、 去除水印等。常规处理是指数字水印经过载体图像的某种改动后，如经过JPEG压缩、滤波、扫描与复印、剪切、打印、图像增强、二次抽样、噪声污染、二次t化A/D.D/A转换或几何变换和几何失真（如平移旋转、尺度拉伸等等操作， 图像视觉效果保持不变且仍能被提取出或证明其的存在。
2、安全性：
是指水印信息嵌入后随机分布于图像中，因其位置较隐蔽，能够抵抗一些非法拦截和破解而使水印不被破坏、删除或者窃取。
3、透明性（隐藏性：
是指加入水印的图像和原始图像基本上相同，载体图像没有明显的降低质量的现象，且嵌入水印的数据经过隐藏处理在视觉或听觉上不可感知。
4、通用性：
因水印信息嵌入于数据而非文件本身，好的水印算法适用于多种文件格式和媒体格式，即使文件格式变换，相关水印的数据也不易丢失，通用性在某种程度上意味着易用性。
二、基于数字水印技术的静态图像著作权保护的可行性
（一、静态图像著作权保护的重要性
生活中，商家会设计独特的有个性的商标来代表自己的企业、公司等，而且最常用的就是用平面广告来宣传商品和活动。这种以静态图像为表现方法不仅清晰明了，而且可以通过巧妙的设计留给人们长久的印象，以及扩大产品的销售量。平面设计、广告设计公司或者工作室也数不胜数。而随之当人们创新思维精神减弱、自主创新能力减退，对于设计较好的静态图像，就会非法使用、篡改该作品，甚至有以自己的名义进行发表公开发行的侵权行为的产生。
于是，当对于以静态图像为主要形式的作品的需求日益扩大，静态图像著作权保护的重要性日益凸显。
（二保护其著作权的静态图像
根据《中华人民共和国著作权法》，该法所称的作品主要包括以下9项：（1文字作品；（2口述作品；（3音乐、戏剧、曲艺、舞蹈、杂技艺术作品；（4美术、建筑作品；（5摄影作品；（6电影作品和以类似摄制电影的方法创作的作品；（7工程设计图、产品设计图、地图、示意图等图形作品和模型作品；（8计算机软件；（9法律、行政法规规定的其他作品。其中美术、建筑作品，摄影作品，工程设计图、产品设计图、地图、示意图等图形作品和模型作品等可以归为静态图像的范畴。可见静态图像占著作权法保护的客体比例较大。
（三静态图像著作权保护的权利主体
静态图像的权利主体，是静态图像专有权利益的承担者。通常来说成为权利主体必须具备两个条件：一是有独立的人格，二是经法律确认。对于静态图像的权利主体的确认多数情况下并不困难。但是如果当以下情况发生的时候，笔者认为应当将嵌入数字水印认为即是登记的形式，具有对抗效力：
某甲发表静态图像，并嵌有宣示自己为该静态图像所有权人或者著作权人的水印，而当乙发现时宣称自己才为该静态图像著作权人，与甲产生知识产权纠纷。
对于该种情况的发生，如果乙没有足够的证据证明自己为著作权人，则应当根据嵌入数字水印的时间的迟早判断，认为嵌入数字水印相当于登记，具有创设和公式效力，判断甲为该静态图像的著作权人。
（四静态图像著作权保护的权利内容
静态图像著作权保护的权利内容也就是静态图像的权利主体应当享有的权利种类，按传统著作权理论可以分为精神权利和经济权利。
1、精神权利
静态图像是一种以简单形式来表现的智力成果。静态图像著作权人可以通过该种表现形式来表现自己的设计，或者通过画面来表现抒发自己的情感。静态图像著作权人有权公开，有权要求对复制其作品的一方承认其系静态图像的著作权人。
2、经济权利
权利人有权通过他人对其作品的利用获得经济报酬。所以静态图像著作权人可以通过自己对其拥有的著作权，利用其进行收益。比如平面广告设计人可以通过为商家设计产品的平面广告来收取经济报酬，再由宣传商利用其作品进行产品宣传。经济权的权利内容可以分为复制权、发行权、摄制权、播放权、展览权等。其中静态图像权利主体主要通过复制权、展览权获取经济利益。
（五静态图像著作权纠纷案例分析及思考
在网络环境中的真实纠纷案例少见，多数在现实生活中发生纠纷。下列为案例举例：
丁长禄是张家口市群艺馆离休干部、中国摄影家协会河北分会会员，今年已73岁。2000年1月初，丁长禄在购买由张家口市人民政府、张家口市函件广告局设计、制作、销售及国家邮政局发行的2000年贺年（有奖明信片时发现，有一题为“中国张家口”的装帧图案，其主体画面是盗用自己拍摄的展现张家口代表景观“大境门”的景物照片《大好河山》。丁长禄认为，他作为《大好河山》作品的作者，依法对作品享有著作权，三被告未经许可，以赢利为目的，不署名使用作品，并对作品进行剪裁和添附，破坏了作品原有的完整性，故起诉到法院。法院经审理认为：摄影作品《大好河山》的作者是丁长禄，他对这一摄影作品享有著作权；张家口市人民政府是《中国张家口》2000年贺年（有奖明信片的设计者，因该明信片内容所产生的民事责任应由张家口市人民政府承担；张家口市人民政府在未经丁长禄许可的情况下，对这一摄影作品进行修改及未给丁长禄署名的行为，侵犯了丁长禄对这一摄影作品所享有的修改权和署名权，应承担相应的民事责任；国家邮政局作为2000年贺年（有奖明信片的发行者，并且在该明信片上也注明了“国家邮政局发行”，因此，国家邮政局应对明信片所涉及的著作权问题与张家口市人民政府共同承担民事责任。法院依据《中华人民共和国著作权法》的相关规定，做出上述判决。
通过此案可以再次验证静态图像因为形式简单，容易被模仿、抄袭，可以通过技术手段再加以剪接、添加等篡改，而且又是因为其形式简单，对于现实生活中静态图像著作权发生的纠纷较难进行解决。
三、国际基于数字水印的静态图像著作权保护的立法及启示
不管发达国家还是发展中国家，经常会有对静态图像的使用，也不论其数字环境发展如何，在一定程度上，静态图像的著作权面临着挑战。对此，不少国家和组织做出过尝试，针对数字环境下的知识产权执法出台相应法律法规。在此我们主要讨论国际在静态图像著作权保护上的立法及对我们的启示。
在国际角度上，涉及著作权保护的公约主要有《反假冒贸易协议》（ACTA、《伯尔尼保护文学和艺术作品公约》（Berne Convention for the protection of Literary and Artistic works、《世界知识产权组织表演和录音制品条约》（WIPO Performances and Phonograms Treaty等。
（一《反假冒贸易协议》与运用数字水印以期保护权利管理电子信息
《反假冒贸易协议》作为最新的知识产权执法国际标准，其核心内容第二章与《TRIPS协定》规定的知识产权执法大同小异，而最大的区别就在于ACTA规定了有关数字环境下的知识产权执法。在这里主要讨论其规定的关于权利管理电子信息的义务方面的内容。
“权利管理信息”是指附着在作品、表演、录音制品的复制品上的信息，或作品表演、录音制品在向公众进行传播或者提供时所出现的信息，包括：1.识别作品、表演、录音制品、作者、表演者、录音制品制作者以及在作品、表演和录音制品中的所有权利人的信息；2.有关作品、表演、录音制品的使用的条款与条件的信息；3.代表上述信息的任何数字或代码。并且在ACTA第27条第7款规定：“为了保护权利管理电子信息，缔约方应规定充分和有效的法律救济办法，制止任何人明知或就民事救济而言应知其行为会诱使、促成、便利或掩盖对任何版权或邻接权的侵害，却未经授权而实施下列行为：（I去除或改变任何权利管理电子信息；（Ⅱ明知权利管理电子信息未经许可已被去除或改变，却发行、为发行目的而进口、广播、向公众传播或提供作品、表演、录音制品的复制件。”
通过ACTA的相关规定，可以看出权利管理信息是提供作品的权利人等相关信息，保护好权利管理电子信息在一定程度上等于保护好作品的著作权。而且在第27条第7款也规定了为了保护权利管理电子信息，缔约方应规定充分和有效的法律救济办法。对于本文静态图像著作权侵权的救济办法，数字水印是绝佳首选。数字水印既可以在作品中表现作品的著作权人等相关信息，又可以通过其鲁棒性等特点，保护其权利管理电子信息。
（二《伯尔尼保护文学和艺术作品公约》与静态图像难以保护的原因分析
伯尔尼公约是世界上第一个国际版权公约，原始签字国就有10国，是国家注重版权的国际保护的体现。
《伯尔尼公约》保护的作品范围是缔约国国民的或在缔约国内首次发表的一切文学艺术作品。其中“文学艺术作品”有图书、讲课、演讲、讲道、戏剧、哑剧、舞蹈、乐曲、电影作品、图画、建筑、雕塑、摄影作品，实用艺术品，地理学、解剖学、建筑学或科学方面的图表、图示及立体作品等。其次还包括“演绎作品”，即翻译、改编、乐曲整理，以某一文学或艺术作品的其他改造，只要不损害原作的著作权，这种改造就得到与原作同等的保护。图书、图画、图标、图示等静态图像包含其中，公约既保护经济权利也保护精神权利。
《伯尔尼公约》中有规定关于平面设计的保护，可见对于平面设计等静态图像的著作权保护开始上心。“在遵守本公约第七条第四款之规定的前提下，本同盟各成员国得通过国内立法规定其法律在何种程度上适用于实用艺术作品以及工业品平面和立体设计，以及此种作品和平面与立体设计受保护的条件。在起源国仅仅作为平面与立体设计受到保护的作品，在本同盟其他成员国只享受各该国给予平面和立体设计的那种专门保护；但如在该国并不给予这种专门保护，则这些作品将作为艺术作品得到保护。”
通过解读，可以发现《伯尔尼公约》中，静态图像的保护并不注重，《伯尔尼公约》着重在于文学作品和音乐作品等上面，规定了有关文学作品和艺术作品专有权利和各国对其的保护措施。根据公约第七条的叙述，如果同盟的成员国对实用艺术作品平面设计和工业品平面设计没有专门的保护，将作为艺术作品予以保护。而定性为艺术作品的话，在《伯尔尼公约》中的范围稍稍广泛了些，没有较好的对应的规定，不如文学作品和音乐作品保护规定全面。可见作为当代社会用处较多的可以呈现各种形式作品与设计想法的静态图像，其著作权在《伯尔尼公约》中不能得到全方位的保护。第一，从主体来看，静态图像的形式简单，在数字环境中仅仅只有JPG、BMP等格式，容量小、储存简单，在现实中可能也只是一张纸的份量，不如其他作品的表现时所需步骤复杂。第二，静态图像其著作权认证困难，创造一份以静态图像为表现形式的作品所需要的时间较少，并且静态图像容易复制，以至于在知识产权纠纷中，静态图像的著作权很难确定。第三，公约的规定有一定程度上的口号的意味，没有很多地对保护作品著作权的相关机构的职责与职能的规定，也就限制了对以静态图像为表现方式的作品的著作权保护水平。
（三《世界知识产权组织表演和录音制品条约》与静态图像著作权人精神权利
该条约制定所保护的客体是表演和录音制品，但是其中的条款对于静态图像的保护有很好的示范和借鉴作用。
在条约的第二章第5条提出了表演者的精神权利：“（1 不依赖于表演者的经济权利，甚至在这些权利转让之后，表演者仍应对于其现场有声表演或以录音制品录制的表演有权要求承认其系表演的表演者，除非使用表演的方式决定可省略不提其系表演者；并有权反对任何对其表演进行将有损其名声的歪曲、篡改或其他修改。（2 根据本条第（1款授予表演者的权利在其死后应继续保留，至少到其经济权利期满为止，并应可由被要求提供保护的缔约方立法所授权的个人或机构行使。但批准或加入本条约时其立法尚未规定在表演者死后保护上款所述之全部权利的缔约方，可规定其中部分权利在表演者死后不再保留。（3 为保障本条所授予的权利而采取的补救办法应由被要求提供保护的缔约方立法规定。”该条款可以引用到静态图像著作权人的精神权利。静态图像著作权人创作的静态图像可能没有表演和录音制品的经济收益多和收益速度快，但是其精神上的价值也是十分重要的，通过静态图像表现自己的人生思考、情感呼吁，或者表现自己的设计理念观点。所以笔者认为当复制静态图像不再为了经济权利时，其精神权利应该予以保留。静态图像著作权人有权要求对复制其作品的一方承认其系静态图像的著作权人，有权反对对其作品进行不正当的歪曲和篡改。
保护眼睛的途径范文2
[关键词] 脱氧土大黄苷；β-环糊精；荧光光谱；超分子化合物
超分子化合物是微观单元以非共价键弱相互作用力结合而成的有序缔合体 [1-2]。超分子化合物具有识别、记忆、变换和传输等功能，因此在药物、光化学分子器件、膜材料[3-5]等方面应用广泛。其中药物包合物是超分子研究内容的独特领域，研究药物包合体系中分子间的相互作用机制，可为进一步深入理解包合物的理化性质、主客体包合反应机制以及包合物选择性结合受体的识别机制提供依据，药物包合物已成为当前超分子领域研究的热点。
脱氧土大黄苷（DES，结构式见图1）主要来源于天山大黄的蓼科植物，为二苯乙烯衍生物，属于茋苷。DES在抗肿瘤、抗氧化、降低II型糖尿病的血糖及提高机体免疫力等方面有显著疗效。但DES的水溶性极差，极大限制了该药物在制剂上的开发应用。如将其制备成超分子包合物，可增加水溶性、提高稳定性，达到改善药物生物利用度的目的。而制备具有实用价值的DES包合物，选择一种理想的药物包合载体材料为关键之一。
β-环糊精（β-CD，结构式见图1）在环糊精种类中应用最广[6-8]。适宜的空腔大小使β-CD成为近年发展起来的新型药物包合材料。β-CD以疏水性空隙经范德华力及非传统疏水作用力容纳或插入药物分子，形成的药物包合物又称“分子胶囊”，可不同程度改善药物溶解性，降低外在条件对药物分子的影响，提高药物的稳定性。目前已有大量有关环糊精包合药物的报道[9-13] ，但对药物包合物理论、包合物的结构分析等还有待开展深入的研究。
本研究选择DES为客体，含有7个葡萄糖分子的β-CD为载体，合成包合物并进行分析鉴定[14-29]，确定包合比、计算理论参数，为该类药物超分子包合物的研究奠定前期基础。目前，β-CD-DES包合体系的研究未见文献报道。
1 材料
F-4500型荧光光度计（Hitachi，日本）；UV-2450型紫外-可见分光光度计（Shimadzu，日本）；DZF-6020型真空恒温干燥箱（上海林频实验设备有限公司）；PS-1000型磁力搅拌恒温水浴槽（Eleya，日本）。
脱氧土大黄苷（≥96%，赛纳斯特化学）；β-CD（≥96%，上海阿拉丁试剂公司）；无水乙醇（≥99.7%，天津市永大化学试剂有限公司）；其余试剂均为分析纯。试验用水均为二次蒸馏水。
2 包合物的制备及表征
2.1 β-CD-DES包合物的制备 DES 0.02 g 溶于50%乙醇，β-CD 0.5 g溶于60 ℃二次蒸馏水。将DES溶液缓慢滴入β-CD溶液中，60 ℃回流并搅拌反应2 h。反应液冷却至室温后过滤，沉淀用乙醇、蒸馏水洗涤数次，100 ℃恒温干燥5 h。
2.2 标准曲线的绘制 50%乙醇配制DES对照液 （20～50 mg·L-1），紫外扫描并在λmax 300 nm波长处读取其吸光度，绘制DES的浓度（c）～吸光度（A）标准曲线，数据拟合获得标准曲线的线性回归方程。β-CD在200～400 nm无紫外吸收，对DES的紫外-可见吸收光谱无干扰。测定β-CD-DES包合物体系的吸光度，利用DES的标准曲线计算游离DES的浓度，进而计算包结比等参数。
2.3 荧光光谱表征 荧光光谱仪在λex 260 nm，λem500～600 nm分别测定1.2×104mg·L-1的β-CD，DES，β-CD-DES （物理混合）和β-CD-DES包合物体系的荧光发射谱，比较分析光谱特征获得β-CD-DES包合物体系的荧光表征谱。
2.4 包合物的包合率测定 定量包合物溶于50%乙醇，在最大吸收波长处测其紫外吸光度，由标准曲线的线性回归方程计算DES的浓度，代入公式（1）计算包合率。
2.5 包合反应包结比及热力学函数的测定 分别配制30，60，90，120，150 mg·L-1 β-CD对照液，测其荧光光谱，按Hildebrand-Benesi方程以1/（F-F0）对1/[β-CD]n作图，求算包结比及反应热力学函数。
3 结果与讨论
3.1 DES与β-CD 的包合过程 β-CD包合DES反应方程式见图2。
β-CD分子略呈锥形的中空圆筒立体环状结构，使得环糊精具有外亲水内疏水的特性，这种特性使得环糊精能够包合各种形状大小与环糊精内腔相匹配的疏水性客体分子，以此提高客体分子的溶解性及稳定性。
3.2 标准曲线 对DES对照溶液在300 nm波长处的吸光度进行测定，数据拟合获得线性回归方程为c=0.051 3+0.003 5A（r=0.995 2，SD=0.004 1， n=7， P
3.3 荧光光谱分析 DES，β-CD-DES包合物，β-CD-DES （物理混合）和β-CD的荧光发射谱见图3。DES形成β-CD-DES包合物后出现明显的荧光猝灭现象，表明DES分子嵌入β-CD的环状圆筒结构中，溶液中游离态DES浓度降低，导致荧光强度降低。而β-CD-DES（物理混合）只是简单的2种化合物物理混合，与β-CD荧光谱图几乎没有差别，这是因为溶液中含有过量β-CD和微量DES，所以混合物的荧光强度主要以游离β-CD的荧光强度表现出来，表明物理混合中药物未被环糊精包合。
图3为固定激发波长条件下，体系的发射荧光强度与扫描发射波长关系的二维荧光光谱图。客观上体系的荧光强度与激发波长、发射波长均有关系，应该是一种三维函数谱，即三维荧光光谱更能详细描述药物包合物体系的结构特征变化。β-CD，DES，β-CD-DES （物理混合）和β-CD-DES包合物的三维荧光谱见图4。
从图4可见，β-CD与DES的3D荧光谱各有其特征，β-CD的荧光发射谱中出现多个指纹峰，但强度明显弱于DES的3D指纹峰。β-CD-DES（物理混合）包含了完整的DES特征指纹峰，说明β-CD与药物DES的物理混合没有引起药物的任何改变，即没有形成有效包合物。β-CD-DES包合物中保留了β-CD的特征指纹峰，DES的特征指纹峰发生明显变化。其中，图4（B）图中的峰4未出现在图4（D）中，峰5发射波长蓝移了7 nm，且荧光强度减弱，表明分子间作用力形成的复合物改变了药物体系的空间结构。由此判断成功合成包合物，这与二维荧光法测得的结果相符。
3.4 包合物的包合率 包合物颗粒细小，颜色介于β-CD和DES之间。将测得包合物的吸光度代入标准曲线方程式，进而由公式（1）求得包合物的包合率为38%。
3.5 DES与β-CD的包结比及结合常数 结合常数是衡量主体β-CD与客体药物包结能力的大小，可以表征包合物的稳定性及包合反应的难易程度。在主体浓度大于客体浓度条件下，可采用Hildebrand-Benesi公式（2）获得包合物的结合常数。
式中，F为不同浓度β-CD的荧光强度；F0为客体DES荧光强度；F∞为包合物的荧光强度。将试验数据按1/（F-F0）对1/[β-CD]n （n=1，2，3……）作图，由直线的截距与斜率可求得结合常数K。
根据公式（2）做试验数据拟合图，n取值1～5。从拟合结果看，当n=2时，1/（F-F0）对1/[β-CD]2作图效果最优，获得良好的线性关系，说明主客体间形成2∶1的包合物，1/（F-F0）对1/[β-CD]2的关系见图5。
从图5可见，不同温度条件下，1/（F-F0）～1/[β-CD]2的线性关系良好（r>0.990 0），线性回归方程见表1，说明β-CD-DES包合物的包结比为2∶1。包合物的结合常数见公式（3）。
式中，[DES]为被包合药物的平衡浓度；[β-CD]为溶液中环糊精的平衡浓度；[β-CD-DES]为包合物的平衡浓度。计算不同温度条件下[β-CD-DES]包合物的结合常数，结果见表1。
由表1可见，求得的结合常数较大，且随温度升高而增大，说明β-CD包合DES生成稳定复合物。
3.6 DES与β-CD包合反应热力学函数 根据热力学公式ΔG0=ΔH-TΔS0，ΔG0=-RTlnK结合van′t Hoff公式，由结合常数的对数值lnK对温度的倒数1/T作图，可得出不同温度下的热力学函数，结果见表2。van′t Hoff公式见下。
由表2可知，吉布斯自由能G0
3.7 包合物的偏振度及各向异性 偏振荧光是荧光分子在偏振光激发下发射光发生变化的偏振光谱。通常用偏振度P和各向异性r表示。
式中G为校正因子（G=IHV /IHH），IHV和IHH分别为水平偏振光激发下的垂直偏振发射光强度和水平偏振发射光强度，IVV和IVH分别为垂直偏振光激发下的垂直偏振的发射光强度和水平的发射光强度，P和r的计算结果见表3。
荧光体的转动速度与偏振度P成正比，偏振度越小，荧光体转动速度越快。由表3可见，β-CD-DES（物理混合）的偏振度P及各向异性r与β-CD相比，几乎没有发生改变。而β-CD-DES包合物的P及r较β-CD均有较为明显的提高（分别提高了0.030，0.042）。说明β-CD-DES包合物由于药物嵌入环糊精空腔内，分子间相互作用使超分子体系稳定性增强，复合物体积变大，荧光体转动速度变缓，体系黏度增大而使偏振度增大。偏振荧光法定量证明了β-CD-DES包合物的形成。
3.8 DES与β-CD包结物的结构推测 研究证明分子结构是药物与β-CD相互作用的重要因素。DES具有2个疏水苯环，虽然分子的空间位阻不大，但要完整的包合药物小分子，客体分子所需的空间会超出单个环糊精分子的容纳空腔。由Hilde- brand-Benesi方程，1/（F-F0）对1/[β-CD]2呈现良好的线性关系，得出主客体包结比为2∶1，推测包结过程见图6，可能的结合形式有4种。
β-CD分子的小口端由7个伯羟基组成，大口端由葡萄糖单元2，3位的14个仲羟基组成。由于氢键作用环糊精分子排列成“笼状”或“管状”，客体分子被包埋其中，可能有以下4种不同构型：脱氧土大黄苷分子大头（含葡萄糖基与酚羟基）插入β-CD的小口端，小头（含甲氧基苯环）插入β-CD的大口端（图6A）；脱氧土大黄苷分子大头插入β-CD的大口端，小头插入β-CD的小口端（图6B）；脱氧土大黄苷分子大头插入β-CD的大口端，小头插入β-CD的小口端（图6C）；脱氧土大黄苷分子大头插入β-CD的小口端，小头插入β-CD的小口端（图6D）。
4 结论
本试验成功制备脱氧土大黄苷-β-环糊精包合物，通过光谱试验结合理论计算方法对包合物超分子体系进行深入探讨，得到包合物热力学函数及主客体包结比，氢键、范德华力为β-CD-DES包合物主要驱动力。试验数据说明，包合反应自发进行，包合物形成后体系的能量降低，生成稳定包合物超分子体系，药物的热稳定性及溶解性能均有明显提高，达到了预期效果。
另外，结合药物及载体空间构型，本研究推测出β-CD包合DES的4种类型，理论分析了包合反应的可行性。由于本实验室的量子化学计算资源有限，包合物的稳定构型有待进一步深入研究，但已开展的研究工作对环糊精-药物包合物体系中分子间相互作用作了一定程度的探讨，可为脱氧土大黄苷在医药方面的应用提供有关参考。
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Study on preparation of deoxyrhaponti-β-cyclodextrin super-molecular
inclusion complex and performance of inclusion complex
GUO Ming*， WANG Chun-ge， YIN Xin-xin， DU Hong-chen
（School of Engineering， Zhejiang Agriculture & Forestry University， Lin′an 311300， China）
[Abstract] To prepare β-cyclodextrin （β-CD）-deoxyrhaponti inclusion complex by the homogeneous method， and characterize the inclusion complex with ultraviolet-visible spectrum and fluorescence spectroscopy， in order to determine the inclusion rate， the ratio of subject-object， the binding constant of supra-molecular system and the thermodynamic function. The results showed that the designed method was so rational that the inclusion complex was successfully prepared. The ultraviolet-visible spectrophotometry method was adopted to determine the inclusion rate of 38%， and the ratio of subject-object of 2∶1. The thermodynamic parameters of this inclusion complex： ΔH0， ΔS0 was all smaller than zero， which indicated that the main acting forces generated by the inclusion complex were hydrogen bonding and Vander Waals′ force. ΔG0
保护眼睛的途径范文3
在哪
【关键词】 槲寄生生物碱；P53；RT-PCR；人肝癌细胞株SMMC-7721
Abstract Objective：To examine the effects of mistletoe alkali on P53 expression in Human Hepatocarcinoma cell SMMC-7721. Methods:MTT assay was used to evaluate the inhibitory effects of mistletoe alkali on the proliferation of human Hepatocarcinoma cell SMMC-7721. RT-polymerase chain reaction (RT-PCR) technique was used to evaluate P53 mRNA expression in human Hepatocarcinoma cell SMMC-7721. Results:Mistletoe alkali significantly inhibits the growth of SMMC-7721 cells in a time and dose-dependent manner. After exposure of SMMC-7721 cells with mistletoe alkali at 0.100mg/mL for 24 hours, the relative intensity of P53 mRNA expression level as determined by RT-PCR increases markedly (P＜0.01). Conclusion:The stimulation of the expression of anti-oncogene P53 by mistletoe alkali may underlie the molecular basis for it to inhibit tumor growth
Key words Mistletoe alkali； P53; RT-PCR； Human hepatocarcinoma cell line SMMC-7721
原发性肝癌是我国常见的恶性肿瘤之一，其死亡率居恶性肿瘤的第二位[1]，且原发性肝癌具有起病隐匿、进展迅速、高度恶性、易转移复发、治疗难度大、生存期短等特点，被称为“癌中之王”[2]。目前肝癌以外科手术为首选治疗方案，但术后5年生存率并不理想，总体只有62.9%，大肝癌术后5年生存率仅34.6%。近年来应用传统的中药治疗日益受到重视。槲寄生为桑寄生科植物槲寄生［Viscum coloratum(Komar)Nakai］的干燥带叶茎枝，其味苦、平，归肝、肾经，有祛风湿、补肝肾、强筋骨、安胎作用[3] ，且槲寄生有较好的抗肿瘤效果[4] 。本文从分子水平探讨槲寄生抑制肝癌的机制。
1 材料与方法
在哪
1.1 材料
1.1.1 细胞株 人肝癌细胞SMMC-7721，购于中国科学院上海细胞研究所。
1.1.2 主要试剂和仪器 RPMI1640(GIBCO)，胎牛血清(杭州四季青公司)，二甲基亚砜、MTT(Amersco)，RNA提取试剂盒、RT-PCR试剂盒（宝生物公司），琼脂糖（Promega），引物（上海生工）、Forma CO2培养箱（美国），ELX-800酶标仪（美国），Enpddorf低温离心机（德国），PCR仪(美国)，紫外分光光度计（日立），倒置显微镜、凝胶成像系统（上海康乐）。
1.1.3 药物 槲寄生购于包头益仁堂中药房，山西医科大学药学系扬官娥教授鉴定该中药为槲寄生并非其他寄生。槲寄生生物碱由本校化学教研室予以提取。将提取物以碘-碘化钾试剂、碘化汞钾试剂检验呈阳性反应，证明提取物为槲寄生生物碱。
1.2 方法
1.2.1 体外细胞培养 细胞培养于含10%胎牛血清、100mg/L青霉素、100mg/L链霉素的RPMI1640培养基中, 37℃、5%CO2培养箱中培养,每2天换液1次。
1.2.2 MTT法测定槲寄生生物碱对肝癌细胞增殖的影响 取对数生长期的肝癌细胞调整至1×105/mL，取0.200mL接种于96孔板，置37 ℃、5%CO2培养24h后弃原培养液,加入浓度为0.200mg/mL、0.100mg/mL、0.050mg/mL、0.025mg/mL槲寄生碱培养液各0.200mL，每个浓度设6个复孔，分5次重复，并设阴性对照、5-Fu阳性对照（10μg/mL）和空白对照孔，同时作3个板。分别作用 24h、48h、72h后倾去上清液,用D-Hanks洗涤2次，各孔加入5%MTT 0.020mL，37℃4h后吸去上清液,加入DMSO 0.150mL,振荡10min使结晶充分溶解后上酶标仪490nm处测吸光度A值。抑制率(%)=(对照孔A值-实验组A值)/对照孔A值×100 %。依据MTT结果用改良寇氏法计算IC50。
1.2.3 槲寄生生物碱对人肝癌细胞SMMC-7721P53 mRNA表达影响的测定 （1）细胞给药：取对数生长期的SMMC- 7721细胞调整至2×105/ mL,2.500mL接种于6孔板,置37℃、5 %CO2培养箱，培养24h后弃原培养液,对照组加入不含药物的培养基2.500mL，试验组依据MTT结果加入含浓度为0.100mg/mL槲寄生生物碱培养液2.500mL培养24h(抑制率为38%)。（2）总RNA的提取：用RNAiso Reagent提取试剂,经氯仿抽提、异丙醇沉淀，分别提取实验组和对照组细胞总RNA。提取的总RNA用紫外分光光度计在260nm和280nm下检测其吸光度值，以A260nm/A280nm比值表示其纯度。（3）引物设计：参考文献[5-6] 及GenBank中基因序列设计引物。P53上游引物：5′-TGTCCCCGGACGATATTGAAC-3′，下游引物：5′ -TTCCTTCCACTCGGATAAGATGC-3′；β-actin上游引物：5′-GTGGGGCGCCCCAGGCACCA-3′，下游引物：5′-CTCCTTAATGTCACGCACGATTTC-3′。（4）RT-PCR反应：逆转录取总RNA 1μL按反转录试剂盒要求配成10μL反应体系，实验组和对照组分别进行逆转录PCR反应。转录条件为30℃ 10min、50℃ 20min、99℃ 5min、5℃ 5min，共一个循环。（5）PCR反应：β-actin扩增条件: 94℃预变性2min，94℃ 30s，55℃ 30s，72℃ 1min，35个循环,72℃延伸8min。P53扩增条件：94℃预变性2min，94℃30s，56℃30s,72℃1min,35个循环,72℃延伸8min。
1.2.4 半定量分析 将扩增的RT-PCR产物在2%琼脂糖凝胶中电泳45min。电泳结束后在紫外透射仪下观察电泳条带,于凝胶成相仪上进行目的条带的密度定量,以目的基因条带的密度与内参β- actin的密度之比作为该目的基因的mRNA的相对含量。
1.2.5 统计学处理 实验结果用SPSS 11.5统计分析软件处理，数据用x±s表示，行t检验,以P＜0.05为差异具有统计学意义。
2 结果在哪
2.1 槲寄生生物碱对细胞增殖的影响 槲寄生生物碱对SMMC-7721细胞有显著生长抑制作用，且呈剂量和时间依赖方式，0.100mg/mL和0.200mg/mL浓度组在24h、 48h、72h均表现出抑制SMMC-7721细胞生长作用，抑制率分别为38%、52%、75%和52%、74%、93%，且作用强于5-Fu。 0.050mg/mL组及0.025mg/mL组也表现出抑制SMMC-7721细胞生长作用，在3个时间点抑制率分别为9%、21%、49%和0%、5 %、23%，但作用弱于5-Fu。
2.2 RT-PCR结果
2.2.1 总RNA抽提结果 所提取RNA经紫外分光光度计检测A260nm/A280nm比值为1.8，说明提取的样品为较纯的RNA。
2.2.2 槲寄生生物碱对人肝癌细胞SMMC-7721 P53 mRNA表达的影响 0.100mg/mL槲寄生生物碱作用24h后能增强人肝癌细胞SMMC-7721 P53 mRNA表达，差异有统计学意义（P＜0.01）。电泳及P53 mRNA/β-actin mRNA半定量见图1及表1。
图1 槲寄生碱对肝癌SMMC-7721细胞P53 mRNA表达的影响（略）
M为Marker，1、3为对照组，2、4为药物组，1、2为P53，3、4为β-actin内对照
表1 槲寄生碱对肝癌SMMC-7721细胞P53 mRNA表达的影响（略）
*与对照组比较P<0.01
3 讨论在哪
槲寄生是我国传统中药，分布广泛，在我国主要分布在东北、华北地区，资源丰富。为了开发利用天然资源，国内外的学者作了大量的工作。目前证实槲寄生有抗肿瘤、抗病毒、抗菌、免疫调节、抗氧化、抗衰老等作用。目前研究较多的是槲寄生苷类的结构及槲寄生毒肽的抗肿瘤作用，对生物碱的研究不多。彭海燕等[7]的研究表明槲寄生生物碱在120mg/kg计量时对小鼠肝癌H22 的抑瘤率可达73.8%。肿瘤抑制基因是肿瘤遗传学及分子生物学的研究热点。P53基因与肿瘤关系最为密切。野生型的P53基因产物监控基因组的完整性，当DNA受到损伤时，野生型P53产物通过转译后的稳定作用，蓄积、促进细胞周期停留在G1期，用这额外的时间进行修复[8]。野生型P53基因的结构和表达异常是肝癌中最多的基因改变之一[9]。
本实验从分子水平探讨槲寄生生物碱的作用机理与基因表达的关系。我们选择了与肿瘤发生关系密切的基因P53作为研究对象，检测其mRNA的表达。研究发现，槲寄生生物碱0.100mg/mL作用于肝癌细胞株SMMC-7721 24h后，野生型P53表达增强。这表明槲寄生生物碱可能激活抑癌基因P53而使癌细胞死亡从而发挥其抗肿瘤作用。对于槲寄生生物碱作用后其他浓度及时间点基因表达的改变有待继续研究。
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保护眼睛的途径范文4
【关键词】视力低下 中学生 成因 预防
【中图分类号】G63 【文献标识码】A 【文章编号】2095-3089（2015）06-0167-01
视力低下，又称为视力不良或视力低常，指裸眼远视力达不到正常标准。按照《全国学生体质健康状况调查研究工作手册》的方法对2014年对营口市15383名在中校学生的视力进行检测，检测结果为：中学生整体视力低下率平均为72.8%，初中、高中学生视力低下率平均为69.1%和78.4%，男生视力低下率平均为68.4%，女生为77.3%；初中学生女生视力低下率平均为73.6%，男生视力低下率平均为64.8%；高中学生女生视力低下率平均为82.7%，男生视力低下率平均为73.9%。总体视力低下构成轻、中、重比例分别占8.4%，24.7%，66.9%。高中视力低下率高于初中，女生视力低下率高于男生。初、高中视力低下均以重度为主，因此，中学生近视防治工作应引起社会各界高度重视。
一、中学生视力低下的成因
造成中学生视力低下的原因很多，主要由以下几方面原因所致。
1.与遗传因素有关
现在很多的研究表明，高度近视和遗传有关，多数调查资料的结论是常染色体隐性遗传。父代与子代可以在不同时出现近视。遗传受到客观环境的影响导致了遗传的复杂性。中度以下近视则存在较大的分歧。
2.与环境因素有关
（1）中学生在校与在家时间占据了绝大多数，而且室内的时间更是占主要的，室内的过分洁白墙壁会反射大量光线，刺伤学生的眼睛，洁白的书页过度反射光线也是造成视力低下的重要原因。有的教室、自习室、书房内的照明达不到建筑照明设计标准。
（2）学生的课桌椅高度不符合学生身高坐高要求，很多学校的桌椅的高度虽然是可以调整的，但是通常还是按统一的高度使用，并未按学生的坐高进行调整。
3.与用眼卫生有关
学生在看书写字姿势不正确，如看书时眼睛与书本距离太近，有的学生趴在桌子上看书写字，躺在床上看书。看书写字间过长，看电视过度，长时间玩手机、上网、玩掌上游戏机等电子产品。未按定时间、规范动作做眼保健操。即使出现了视力低下变化明显时，未能及时就医。佩戴不合格近视镜、角膜塑型镜、隐形眼镜、美瞳产品等，都会有可能造成视力低下。
4.与体内微量元素有关
微量元素锌、硒、钼、钙和磷等的缺乏可导致视力低下、视觉神经的敏感度降低、增加视神经疲劳等。
二、中学生视力低下的预防
保护中学生视力是一项长期而艰巨的任务，是多方面，多渠道，多角度，多种方式并重的工作，主要可以从下几方面着手开展工作。
1.建立良好的学习环境
为每一个学生配备适合学生的身坐高的桌椅，学习场所照明达到《建筑照明设计标准》规定的教室内日光灯的平均照度达到300LX，教室黑板的照度要达到500LX。教室光线要明亮，桌面、黑板不要反光过强，左右两侧都应有窗户，不要太高、太小，以坐在教室任何位置都能看到窗外为宜，并定期调换坐位。在家的书桌应放在外面无遮挡物的窗前，台灯应放在左前方，光线要柔和，如为白炽灯，最好为25～40瓦之间。
2.注意用眼卫生
（1）保持正确读写姿势。阅读时注意眼睛与书的距离，姿势要端正，不能躺着看书或边走边看。保持眼睛与书本距离为35厘米左右，阅读写字连续40分钟应休息，不能过多地沉溺于手机、游戏机、电视之中。看电视时，人与电视机应保持三米以上距离，电视屏幕的高度应与看电视人的视线平行或稍低一些。电视的光亮度要合适，不能过亮或过暗。
（2）坚持做眼保健操
眼保健操是保护眼睛的自我按摩法。通过按摩眼睛四周的穴位以增强眼眶的血液循环，改善神经营养，消除眼内的过渡充血，达到解除眼疲劳的目的。实践表明，坚持做好眼保健操，对保护视力，预防近视具有一定的意义。每天可做数次，在学习中间的休息时间对眼睛进行自我保健的一种有效途径。还要增强通过体育锻炼，达到提高体质、增强眼调节力。
3.注意饮食习惯
保护眼睛的途径范文5
人们睡前玩手机之所以能睡着，是因为玩的过程中太投入，错过平时的睡眠时间，过了生物钟自然会越玩越困。那么，睡前玩手机到底好不好呢？
蓝光影响危害多
国外有研究指出，3C产品（计算机、通信和消费类电子产品三者合称）充电、使用时会发出微弱的蓝光。蓝光是可见光中波长最短、能量最强的部分，广泛分布于阳光之中，而在当代人们的日常生活中接触到的电脑、手机、电视等产品屏幕中，也有很多蓝光。
光源中所含有的蓝光成分越多，显示出的色温也就越高。有研究指出，在夜晚使用色温越高的光源会影响人体内褪黑激素的分泌，可能会扰乱身体代谢机制在夜晚的正常作用，让人睡不好觉。褪黑激素是由大脑内分泌的一种荷尔蒙，它的分泌受到光线与黑暗的调节，在夜晚时分泌，而白天接受到光线即停止，是控制人体清醒与睡眠周期的一大要素。
褪黑激素的分泌十分敏感，若不是在全黑的环境中，就算只是一点微光，其分泌都会受到影响。虽然3C产品的微光不像日光那样强，但是一样会扰乱身体对环境中光线讯号的解读，影响人体清醒与睡眠的生物钟，让褪黑激素无法正常在睡觉时分泌，导致夜间新陈代谢不完全，甚至肥胖找上身。
另外，蓝光对眼睛的危害不容小视，特别是对黄斑部的伤害。黄斑部是正对着瞳孔的视网膜构造，直接接受射入瞳孔的光线。接收的蓝光越多，黄斑部线粒体受损就越严重。
此外，{光对黄斑部的影响是累积性的慢性损害，一般而言，老年人黄斑部病变的概率相对较高。同样地，高能蓝光对皮肤的细胞组织也会造成慢性损害，若皮肤经常暴露在蓝光下，容易老化，严重者还可能增加皮肤癌的发生率。
护眼有妙招
保护眼睛的途径范文6
一、护肤
常见问题皮肤晒伤。容易被晒伤者一般肤色较淡，而且平时主要在室内工作，缺乏暴露于日光下的机会。往往在日晒后数小时内，暴露的皮肤会发生水肿，出现猩红色斑，并可形成水疱。病人感觉灼热或灼痛，严重者可能会有发热、寒战等全身症状。
应对策略
1.在游泳前30分钟涂上防晒霜，以利于皮肤充分吸收。在海滨游泳，全身都应该涂防晒霜，特别注意不要忽略了颈后、耳后和背后。防晒霜每隔1～2小时就应再涂一次。选择防晒霜只看SPF值远远不够，因为SPF只能防御中波紫外线（UVB），也就是说只能防御1%的紫外线。真正的阳光杀手是长波紫外线（UVA），占到达地面紫外线的98%，它能在最短的时间内到达真皮底层，迅速损害弹性纤维，造成皮肤老化。惟一能对付UVA的，就是选择防御UVA的PA产品。由于阳光的反射，皮肤在水中吸收紫外线的量会加倍，因此选择防晒品，最好是SPF30以上、 PA+++，而且最好选择防水性防晒乳液而不是防晒霜。
2.在中午12时至下午4时，阳光的直接接受量和散射量（水面的散射接近100％）都是最大的，皮肤最容易被晒伤。这段时间最好能避开阳光直接照射。
温馨提示
由于水质问题及人为因素对水的污染，游泳后皮肤并不干净。因此，游泳之后必须立即彻底清洁全身，减少交叉感染的可能。海水是高渗水，会让皮肤中的水分渗透到海水中，使皮肤很干燥，应尽快用温水洗净脸上、身上、头上的海水成分，并涂上润肤乳，给肌肤补水。
哪些皮肤病患者不宜去公共泳池游泳？
1. 敏感性肤质者身体接触较冷物体时，会出现寒冷性荨麻疹的症状，尤其在下水前未热身的情况下，身体皮肤无法承受温度的突然变化，全身会起风团。预防方法是在下水前充分热身。
2. 对氯过敏者若曾经对漂白水、消毒水过敏，就可能对游泳池中的氯过敏，产生过敏性皮炎。
3. 感染性皮肤病患者包括皮肤细菌感染（脓疱疮、皮肤有化脓性伤口等），真菌感染（体癣、足癣、甲癣等），病毒感染（传染性软疣、尖锐湿疣等）。
二、护发
常见问题头发干枯。池水中的氯气、消毒液、过滤液，海水，沙粒，紫外线等，对头发的损伤不亚于化学品，易导致发丝断裂、干枯。
应对策略
1.在游泳之前，先将头发浸湿，然后抹上护发素，使之在头发表面形成一层薄薄的保护膜。
2.把头发梳顺（长发束起固定在脑后），然后再佩戴泳帽。尽量选择高质量丝织泳帽。
3.游泳后先将头发彻底冲洗干净再梳头，以防水中杂物与头发摩擦而对发丝造成损伤。尽量选用碱性小的温和洗发水，之后使用护发素，避免或少用电吹风，尽可能让头发自然吹干。
三、护眼
常见问题红眼病。学名为流行性急性角结膜炎，是一种发病很急、传染性很强、传播很迅速的眼部感染性疾病。主要是通过接触传染，传播途径一般是“患眼――水――健眼”“患眼――手或物――健眼”两种方式，但以水源的传播更为普遍而迅速。开始发病时，眼睛会觉得发热、疼、痒，好像进了沙子一样不舒适，怕光、流泪、分泌物增多。接着眼睑红肿加重，球结膜充血水肿明显, 结膜下出血，同时角膜也容易出现点状白斑。眼睛分泌物增多时，会在早晨起床后，发现上下眼皮常常被分泌物粘住。除眼部症状外，还可以伴有乏力、头痛、流涕、嗓子痛及发热等上呼吸道感染症状。
应对策略
1.尽量选择水质好、污染少的游泳场所。
2.经营者把好健康体检关，严禁红眼病患者进入。
3.在游泳以后，及时用干净的水洗脸、洗澡。对于比较容易或经常患结膜炎的人来说，可以在每次游泳后适当滴用抗生素眼药水，达到预防的目的。
温馨提示
1.池水中的消毒剂有轻度刺激性，可引起非感染性的结膜炎，表现为游泳后眼睛短时间发红，数十分钟至数小时以后自行消失，一般不必治疗。但如果在刚出水时症状很轻或不明显，1～2天以后眼睛出现发红、分泌物逐渐增多等症状，就应该高度怀疑红眼病，应及时就诊。
2.高度近视的人，应尽量避免由高处头朝下跳水，以免引发视网膜脱离。
四、护耳
常见问题耳闷塞感、耳部不适及疼痛。
应对策略
1.为防止池水进入外耳道或经鼻腔进入中耳，可戴防护耳塞和鼻夹。
2.外耳道有耵聍，应事先取出，否则泡胀后容易疼痛发炎。
3.游泳后若出现耳闷塞感，一般为外耳道存有液体。可采用以下方法：头歪向一侧、掌心封闭该侧耳道口，快速抽动手掌，依靠负压使水流出。如耳内发痒，可用蘸有75％酒精的棉签轻轻擦拭外耳道。避免挖耳，以防损伤外耳道皮肤及鼓膜，引起炎症。
4..若鼻咽部干痛、吞咽时耳部不适及疼痛，一般为池水刺激鼻咽部或进入咽鼓管所致。此时，切勿用力擤鼻涕、捏鼻鼓气，以防鼻咽部炎症循咽鼓管播散入中耳。
温馨提示
