光学显微镜的技术范例6篇

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光学显微镜的技术

光学显微镜的技术范文1

核糖体一般要靠电子显微镜来观察,因为放大倍数的限制,光学显微镜是看不到的。

电子显微镜,简称电镜,经过五十多年的发展已成为现代科学技术中不可缺少的重要工具,电子显微镜由镜筒、真空装置和电源柜三部分组成。

电子显微镜技术的应用是建立在光学显微镜的基础之上的,透射电子显微镜在光学显微镜的基础上放大了1000倍。

(来源:文章屋网 )

光学显微镜的技术范文2

关键词:诺贝尔化学奖;显微镜;能力

中图分类号:G632 文献标识码:B 文章编号:1002-7661(2014)23-332-01

十一放假返校,校园里师生热议2014年诺贝尔奖,课余时间到办公室向教师咨询的学生也不少,这是一个难得的教育时机。其中的2014年诺贝尔化学奖与高一生物显微镜内容最贴近,如何因势引导借力诺贝尔化学奖给学生一次适时的教育,笔者决定以此为契机,草船借箭,以刚学的显微镜内容为载体,升华知识为能力,在高一掀起一次学习生物的小。

在诺贝尔化学奖刚公布时笔者就在生物课堂上给学生布置任务:网上搜集2014年诺贝尔奖的内容,找出与我们高一生物所学知识最密切的奖项,用简要的语言概述该奖项,并写出该奖项给自己带来的体会,小组或班内交流,奠定了知识升华的基础。最后同学一致认为本年度诺贝尔化学奖与高一生物内容最贴近,并概括如下:斯特凡・黑尔(Stefan W.Hell)、埃里克・贝齐格(Eric Betzig)和威廉・莫尔纳尔(William E.Moerner)共同荣获2014年诺贝尔化学奖,获奖理由是研发了超分辨率荧光显微技术。

一、以观察工具每一次改进催生新的理论成果的史实,引导学生认识科学,增添学习动力

2014年诺贝尔化学奖与显微镜内容相关,这是学生感兴趣的地方,从肉眼看不到到放大300倍左右的简易显微镜到放大1500倍左右的普通光学显微镜,再到放大一百万倍左右的电子显微镜、荧光显微镜,观察工具的改进, 拓宽了人类的视野,也取得了相应的理论成果,从发现并命名细胞到提出细胞学说再到现代分子生物学,人类的认识水平不断提升,说明对细胞本质的认识是随着显微技术、物理学、化学和生物科学等的发展而不断深入的。推动社会发展和科技进步是每位同学应尽的责任和义务,高中阶段是人生中最宝贵的时光,必须志存高远,热爱科学,学有所成,打下坚实基础。

二、以显微镜的正确使用来设置疑问,培养规范严谨的习惯

在显微镜的教学中通过设计问题串,引导学生多层次多角度分析问题,针对与显微镜相关的知识可以引导学生思考以下问题串:如何判断细胞死活,如何区分原核细胞与真核细胞的异同?结合学生生活实际引导学生思考:在腌制白菜的过程中,白菜形态在宏观上有什么变化?制作装片后,显微镜下观察白菜细胞在微观上液泡大小、颜色有什么变化?能否辨识原生质层,是否与细胞壁脱离?导致此现象发生的内部因素是什么?白菜腌制前和腌制后的细胞结构图有什么变化?制作临时装片对比观察并绘图。通过多角度设置疑问,引导学生在实验操作中动手又动脑,逐步养成实验操作中规范严谨的良好习惯。

三、以荧光显微技术为背景,培养学生查阅资料和对比辨析能力

结合2014年诺贝尔化学奖发明的荧光显微技术问学生:荧光显微镜属于电子显微镜还是光学显微镜?这时可适时的引导学生查找相关资料,通过查阅,学生发现荧光显微镜属于光学显微镜的一种,由于二者激发的波长不同,荧光显微镜与普通光学显微镜在结构和使用方法上也不同。这时再引导学生列表比较光学显微镜与电子显微镜的区别,通过差异点的比较,培养学生的辨析能力。

在用显微镜观察比较细胞中的叶绿体和线粒体异同时,学生尝试从分布、形状、材料选取、是否染色等多方面对比辨析,从宏观上学生有了深刻认识,再引导学生从二者的亚显微结构上比较差异,再对比辨析二者的功能的不同,进而得出结构决定功能的结论。

在学习渗透作用内容时,让学生将动物细胞与成熟的植物细胞发生的渗透作用作对比,比较二者发生渗透作用的相同点和不同点。在比较后有学生发现植物细胞失水或吸水后体积没有明显的变化,对比辨析生成了问题,引导学生再次观察二者细胞结构特点,得出植物细胞壁的伸缩性小的缘故。

四、以简化实验步骤为突破口,培养学生化繁为简的能力

显微镜是高中生物常用仪器,必须熟练使用,要将实验步骤要点化,易懂易记易操作,多次训练后学生动手操作才会规范。学生在操作高倍镜观察标本时常常动作迟缓效果差强人意,主要原因是文字叙述内容多,学生抓不住要点,只有善于化繁为简才能抓住要点。比如高倍镜操作步骤简化为:找物像,移中央,换高倍,调清晰。观察制作的植物细胞临时装片时,操作步骤简化为:擦干净 ,滴中央,撕表皮,展平,盖缓放,染标本。实验步骤简化为操作要点后,简单扼要,易于理解记忆,规范了操作,提高了学生的动手能力,这些都得益于化繁为简能力的培养和训练。

五、以生物图引导学生读图说图,培养学生的图文转换能力

显微镜是高中生物重要的观察工具,课本上的许多图形都来自光学或电子显微镜。结合显微镜来锻炼学生识图绘图能力,教学会收到事半功倍的效果。如观察各种细胞形态大小、观察植物细胞液泡和叶绿体的流动,让学生绘出细胞的示意图;绘制各种细胞器如叶绿体、线粒体、高尔基体、内质网等的简图,加深学生对不同细胞器结构不同功能不同的理解。通过绘图,微观的图形变得直观生动,生物知识变得鲜活有趣,易于理解,易于接受,学生叙述时也变得轻松生动得心应手。在学习细胞增殖内容时,结合各时期特点和显微镜观察,让学生绘出各时期细胞的示意图,通过图文结合,有丝分裂各时期的特点呼之欲出,知识水到渠成。

2014年诺贝尔化学奖是众多科学家长期合作、不懈研究的科研成果,生物学习中需要培养合作学习能力,学习小组成员之间的紧密协作会带来更高的学习效率;还要学习科学家孜孜不倦,勇于探索,勇于创新的科学精神和科学品质,不断克服学习上的困难,不断超越自己。

光学显微镜的技术范文3

【关键词】全自动尿沉渣分析仪;尿样检查;应用

DOI:10.3760/cma.j.issn 1673-8799.2010.06.149

作者单位:450004河南省消防总队医院

尿液检测作为临床诊断中最常规的检测项目之一,尿沉渣的检测占有极其重要的地位。对泌尿系统疾病的诊断、定位、鉴别、疗效观察和预后诊断提供依据[1]。为了进一步探讨全自动尿沉渣分析准确性,现对全自动尿沉渣分析与光学显微镜检测比较分析,汇报如下。

1 资料和方法

1.1 标本采集 尿样随机取自我院2009年6月~8月门诊和住院送验晨尿为检查标本1800份,其中男1020例,女780例,年龄1~88岁。所有标本均于采样后2 h内完成进行UF-100全自动尿沉渣分析仪及光学显微镜检测。

1.2 仪器与试剂 仪器采用日本syemex公生产的UF-100全自动尿沉渣分析仪。Olympus光学显微镜,8022离心机,刻度离心管,中国桂林华通MA24280KB 尿干化学分析仪,试剂采用配套原装试剂、原装试纸。

1.3 检测方法 将尿沉渣分析仪和尿干化学分析仪进行校正,并且在质控通过后按仪器说明书操作。用收集到患者洁净中段尿晨尿,经充分混合后分为2管。第1管用UF-100自动吸样并检测其有形成分。第2管约10 ml,首先用MA24280KB 进行干化学测试。对尿液应用离心机进行1 500 r/min 离心5 min,弃去上清液留底部约0.2 ml,混匀沉淀涂片镜检。红细胞和白细胞在高倍镜下观察20 个视野,报告其平均数。管型在低倍镜下观察10 个视野,报告其平均数[2]。

1.4 尿液检验正常参考范值 显微镜镜检:RBC 0~3/HP,WBC 0~5/HP,超过此范围即判为阳性。UF-100尿沉渣分析仪检测: 男性:红细胞(RBC) 0~12/μl,白细胞(WBC) 0~12/μl;女性:RBC 0~24/μl,WBC 0~26/μl;超过此范围即判为阳性。

2 结果

表1

UF-100 与显微镜镜检比较

UF-100

显微镜镜检

阳性(符合率%)阴性(符合率%)

阳性820725(84.25)120(21.90)

阴性98062(7.20)915(95.55)

3 讨论

近些年,随着检验技术的飞速发展,全自动的尿沉渣分析仪逐渐在广大医院检验科中得以应用。由于全自动尿沉渣分析仪具有操作规范化、检测的自动化、速度快、重复性好、一次可以检测多个参数等优点,被临床广泛应用。UF-100全自动尿沉渣分析仪采用流式细胞及电阻抗的原理,通过检测经荧光染色后的尿沉渣中单个细胞的荧光强度,前向散光强度及电阻抗的大小来识别尿内细胞、管型、结晶等各种有形成分[3]。UF-100 全自动尿沉渣分析仪是目前临床上比较先进的尿沉渣分析系统,是集电阻、电导、氩激光流式细胞分析和荧光染色为一体,UF-100 对尿沉渣作荧光素染色后,用流式细胞仪原理,以激光散射强度、散射波幅度、荧光强度及荧光波幅度技术识别和计数尿中有形成分,测定其荧光强度,荧光波幅度,前向散射光强度及幅度从而对尿液中有形成分进行精确计数与鉴别。从而区分各个有形成分,定量报告红细胞、白细胞、上皮细胞、管型、细菌和结晶等有形成分进行分析[4]。操作简单,对红细胞、白细胞、上皮细胞、细菌、管型等能进行定量分析和提供散点图,UF-100 能提供红细胞的前向散射直方图,由此可将尿中红细胞分为均一型(多位肾外来源)、非均一型(多为肾小球来源) 和混和型,进而可以推断出血尿来源。在鉴别血尿来源方面,UF-100 的敏感性高于相差显微镜而特异性低于显微镜[5]。总结UF-100尿沉渣分析仪优点:可对红细胞、白细胞等尿液进行计数,作出定量报告,有助于血尿、尿路感染患者等的疗效监控;对尿内红细胞形态的鉴别,有助于临床了解泌尿系统出血部位;尿内有形成分如红、白细胞、管型等仅能在4 h内保持稳定如时间长会影响尿液检验质量,UF-100保证大批量尿液标本检验结果可靠性改善尿液检验质量,提供可靠信息。

参考文献

[1] 马政辉.UF-100全自动尿沉渣分析仪各项检测项目假阳性结果分析.临床检验杂志,2004,22(1):67.

[2] 文玲.尿液自动分析.尿沉渣及尿常规镜检对尿中有形成分的对比分析.中国现代医学志,2002,12(10):49.

[3] 崔翔.UF-100 尿沉渣分析仪的临床应用分析.检验医学与临床,2008,5(1):40.

光学显微镜的技术范文4

1 试验部分

1. 1 主要试验材料

分别在浸水、酸膨胀、软化、浸酸、铬鞣、加脂 6 道工序完成后,于皮张的颈部、背部、臀部、腹部 4 个部位取5cm × 5cm 的小皮块,然后用 10% 的中性甲醛液固定 24h 以上。具体工艺流程见图 1。

1. 2 试验仪器

冰冻切片机,德国 Leica 公司;SBM - 20 透反射生物显微镜,上海微图公司;SPM - 9600 型原子力显微镜,日本 NSG11 公司;X'Pert Pro 型 X 射线衍射仪,荷兰飞利浦公司。

1. 3 试验方法

1. 3. 1 光学显微镜观察[9 -10]

用冷冻切片机,按纵切方向( 即顺毛生长方向垂直于粒面) 和平切方向( 即平行于粒面方向) 进行切片,切片厚度为 10μm。用蛋白胶固定后按照不同观察需求进行染色。( 1) 苏木素伊红染色法对胶原纤维、肌肉、毛囊、表皮、细胞核等基本组织进行染色。染色效果: 细胞核呈深蓝色,胶原呈粉红色,表皮呈蓝色,肌肉呈紫红色,毛囊呈蓝色。( 2) 威氏弹性纤维染色法对染弹性纤维进行染色。染色效果: 弹性纤维呈深蓝色,胶原纤维呈浅蓝色。

1. 3. 2 AFM 观察

将用冷冻切片机切成 25μm 厚度皮样,和洗净晾干后毛样,分别平整的固定在一小片的玻璃上,,然后利用AFM 进行观察。

1. 3. 3 XRD 观察

将各工序段所取皮样,晾干,压平,然后用 XRD 进行测定。

2 结果与讨论

2. 1 酸膨胀工序

2. 1. 1 光学显微镜观察

图 2 为通过苏木素伊红染色法对胶原纤维进行染色后,用光学显微镜所观察的结果。在裘皮加工工艺中,酸膨胀主要起到对动物皮胶原纤维的分散作用。对比图 2 酸膨胀前后胶原纤维的分布可以发现,由于酸膨胀工序将 pH 维持在较低的条件下,使得牦牛皮的胶原纤维编织变得极为疏松,其中网状层的胶原纤维编织较层的编织更为松散。

2. 1. 2 扫描电镜观察

图 3 是牦牛皮酸膨胀前后胶原纤维组织结构的扫描电镜图。对比图3 - a 和图 3 - b 可以观察到牦牛皮胶原纤维的编织形态变化很明显。在酸膨胀前,胶原纤维编织非常紧密,且胶原束粗大; 酸膨胀后,胶原束之间间隔变大,但胶原束本身体积缩小,其原因是由于胶原肽链间氢键、离子键在低pH 条件下被破坏,同时出现的渗透差现象使得胶原纤维束充水,导致纤维结构发生剧烈变化,从而促使胶原纤维的松散。图 4 为牦牛毛酸膨胀前后形态对比的扫描电镜观察图。从图 4- a 可以清晰的观察到,酸膨胀前的牦牛毛的表皮层较为光滑平整。与图4 - b 进行对比发现,经酸膨胀后牦牛毛的表皮层变得粗糙,但并没有受到较大破坏。

2. 1. 3 原子力显微镜观察

图 5 是牦牛皮酸膨胀前后原子力显微图。从图中可以看出: 经过酸膨胀后,由于低 pH 条件所导致的原纤维发生剧烈的膨胀和分离作用,使得原本平行排列的原纤维变得扭曲,呈螺旋状,原胶原的周期结构并没有发生改变,这说明酸膨胀结构对胶原结构没有太大影响。但是,原纤维的直径从原有的 70nm 增大到 110nm 左右,如图 5 - b 所示。 图 6 是牦牛毛的原子力显微 3D 图。对比酸膨胀前后毛样的形态可知: 酸膨胀后,毛的表皮层表面明显变得粗糙。但毛结构的基本形态并没有受到较大破坏。

2. 1. 4 XRD 观察

图 7 是牦牛皮酸膨胀前后 XRD图。从图中可以发现: 皮胶原在经过浸水、酸膨胀后,皮样的衍射曲线形态基本一致,衍射角 2θ 均在 7°与 23°两处分别出现宽峰现象。由以上数据分析可以得知,酸膨胀对胶原结构没有影响。在工艺过程中加入酸膨胀这一工序,主要起到 2 方面作用: 一是对牦牛皮进行适度的酸膨胀处理后,其皮板厚度明显增加,且皮张平整,有利于片皮的操作,实现了皮板厚度的可控性;二是胶原纤维间和胶原分子链间距离增大,皮纤维得到一定程度的分散,实现皮板柔软度的可控性,同时也有助于皮化材料在皮内的渗透。对酸膨胀前后胶原纤维结构变化可以发现,经过酸膨胀工序,胶原纤维得到了分散,同时结构没有被破坏。虽然酸膨胀工序中所采用的较低 pH 条件对毛组织有一定的影响作用,但是破坏程度不大。因此,在裘皮工艺中加入酸膨胀工序有利于裘皮产品质量的提升。

2. 2 软化工序

2. 2. 1 光学显微镜观察

图 8 是通过威氏染色法对弹性纤维进行染色后,用光学显微镜所观察的结果。将图 8 - a 和图 8 - b 进行对比,可以发现软化前后牦牛皮中的弹性纤维去除效果并不明显。图 9 通过苏木素伊红染色法对胶原纤维进行染色后,用光学显微镜所观察的结果。将图 9 - a 和图 9 - b进行对比发现,软化工序对胶原纤松散并没起到明显的作用。

2. 2. 2 扫描电镜观察

图 10 分别是牦牛皮软化前后弹性纤维分布的扫描电镜图。对比图10 - a 和图 10 - b 可以发现,酶软化这一工序 对 弹 性 纤 维 的 去 除 效 果 不明显。在制革工艺中酶软化工序主要是为了去除弹性纤维,并进一步清除皮内残留的毛根分解物、油脂、类脂等物质,以及部分非胶原物质及其降解物,同时使皮纤维疏松。使得革制品比较柔软细致,富于弹性和延伸性。本研究对牦牛裘皮中弹性纤维的分布变化进行观察发现,酶软化工序对弹性纤维的去除,以及对胶原的分散作用都不显著,从而可以推测出酶软化工序对裘皮产品的柔软度没有太大影响。然而弹性纤维的抗酸、碱、酶能力较强,有利于对毛的保留。因此,建议在裘皮工艺过程中,可以省去酶软化这一道工序。

2. 3 浸酸工序

2. 3. 1 光学显微镜观察

图 11 通过苏木素伊红染色法对胶原纤维进行染色后,用光学显微镜所观察的结果。对比图 11 - a 和图 11- b 可以观察到浸酸后,由于过低的pH 条件使得胶原纤维编织再次呈现出松散现象,但是由于食盐的存在下,在一定程度上削弱了胶原纤维的充水效果,使得浸酸工序对胶原纤维的松散作用不及酸膨胀工序的作用。

2. 3. 2 扫描电镜观察

图 12 是牦牛皮浸酸前后胶原纤维组织结构的扫描电镜图。对比图12 - a 和图 12 - b 也可以明显地观察到牦牛皮胶原纤维的编织形态变化。经过浸酸工序后,由于过低的 pH 条件,使得胶原束与束之间再次出现了较大间隔,但其程度比酸膨胀时小些。

2. 3. 3 原子力显微镜观察

图 13 是浸酸前后胶原纤维结构的原子力显微图。从图中可以观察到,由于浸酸工序中过低的 pH 条件使得胶原纤维周期结构发生明显改变,由原有固定的 40nm 左右增至 68nm左右,这说明浸酸工序对胶原结构有较大的影响作用。

2. 3. 4 X 射线衍射观察

图 14 是牦牛皮浸酸前后 XRD图。从图中发现经过浸酸后,衍射角2θ 衍射峰的最高点从 23°向右回移到20°。这说明浸酸前、后胶原纤维的排布发生了本质上的变化,这也与原子力显微镜所测出的结果相一致。在制革工艺中浸酸工序的目的是,一方面终止软化工序中酶的继续作用,另一方面是为了调节皮胶原的电性,使得鞣剂易于与皮胶原发生交联反应,制成柔软细致的皮革产品。在裘皮工艺中,软化工序一般采用的是酸性蛋白酶作为软化剂,这就使得浸酸工序需要将 pH 值调到 2.0 以下,才能终止酸性酶的继续作用,过低的pH 条件也就造成了对皮胶原结构的破坏。又由于之前对酶软化工序研究发现可以在裘皮工艺中省去软化工序,因此,建议将浸酸工序的 pH 值维持在 2. 5 左右,以消除过低 pH 条件对皮胶原结构的破坏。

光学显微镜的技术范文5

目前,生物医学图像信息技术主要包括生物医学图像传输、图像管理、图像分析、图像处理几方面。这些技术同以前的图像技术、医学影像技术都有一定的联系,其在涵盖以往图像技术、医学影像技术的同时,也具有自身的特点,与传统的图像和医学影像技术相比,生物医学图像信息技术更加强调在医学图像信息收集、处理等过程中应用计算机信息技术。

1.1图像成像

从本质上来看,生物医学图像成像技术(下文简称“图像成像技术”)与医学影像技术的区别并不大,仅仅是人们更习惯将其表达为医学影像。生物医学图像成像技术的研究内容为:利用染色方法和光学原理,清晰地表达出机体内的相关信息,并将其转变为可视图像。图像成像技术研究的图像对象有:人体的标本摄影图像、观察手绘图像、断层图像(如ECT、CT、B超、红外线、X光)、脏器内窥镜图像、激光共聚焦显微镜图像、活细胞显微镜图像、荧光显微镜图像、组织细胞学光学显微镜图像、基因芯片、核酸、电泳等显色信息图像、纳米原子力显微镜图像、超微结构的电子显微镜图像等等。

图像成像技术主要包括2个部分:现代数字成像和传统摄影成像。通常可采用扫描仪、内窥镜数码相机、采集卡、数字摄像机等进行数字图像采集;显微图像采集则可应用光学显微镜成像设备及超微结构电子显微镜成像设备;特殊光源采集可应用超声成像仪器、核磁共振成像仪器及X光成像设备。目前,各种医学图像技术的发展都十分迅速,特别是MRI、CT、X线、超声图像等技术。在医学图像成像技术方面,如何提高成像分辨力、成像速度、拓展成像功能,尤其是在生理功能及人体化学成分检测方面,已经引起了相关领域的重视。

1.2图像处理

生物医学图像处理技术,是指应用计算机软硬件对医学图像进行数字化处理后,进行数字图像采集、存储、显示、传输、加工等操作的技术。图像处理是对获取的医学图像进行识别、分析、解释、分割、分类、显示、三维重建等处理,以提取或增强特征信息。目前,医学领域所应用的图像处理技术种类较多,统计学知识、成像技术知识、解剖学知识、临床知识等的图像处理均得到了较快的发展。另外,人工神经网络、模糊处理等技术也引起了图像处理研究领域的广泛重视。

1.3图像分析及图像传输

生物医学图像分析技术,是指测量和标定医学图像中的感兴趣目标,以获取感兴趣目标的客观信息,建立相应的数据描述。通过计算测定的图像数据,可揭示机体功能及形态,推断损伤或疾病的性质及其与其他组织的关系,进而为临床诊断、治疗提供可靠依据。生物医学图像传输技术,是指应用网络技术,在互联网上开展医学图像信息的查询与检索。通过网上传输图像,在异地间进行图像信息交流,可实现远程诊断。同时,在院内通过PACS(数字医学系统—医学影像存档与通信系统),也能在医院内部实现医学图像的网络传递。

2总结

光学显微镜的技术范文6

关键词:实验室;显微镜;维护保养

显微镜的发明是人类最伟大的发明之一,它让我们从宏观世界走进了微观世界,在工业,农林,生物学,医学等各个行业都有不可替代的地位。对于一个集教学与科研为一身的医学研究实验室,各种显微镜的使用更是必不可少。这不仅需要我们能正确使用它,更需要对它正确的维护保养,这样才能让它以最佳最好的状态为我们工作,就我个人体会而言,这项工作对实验室来说不仅单是管理工作更是一项技术工作。如何做好这项工作,有些人或许会觉得太复杂,因为不同的显微镜维护保养的内容各不相同。我想首先应该充分了解各种显微镜的共性和个性,这样我们就会总结出一些经验做好这项工作,我就对我们实验室显微镜维护保养的心得体会在这里和大家分享一下。

1 充分认识显微镜,了解它的多样性,复杂性,精密性。

1.1显微镜分类较多

显微镜从问世到现在,已由单纯光学显微镜发展成一个庞大的家族,包括比如激光共聚焦显微镜,体视显微镜,倒置荧光相差显微镜,电子显微镜等等。

1. 2显微镜部件复杂

显微镜不再只是由几个透镜组成,就单纯的光学显微镜而言也包括目镜,物镜,粗细准焦螺旋,压片夹,通光孔,遮光器,转换器,反光镜,载物台,镜壁,镜座和光阑等部件。电子显微镜包括镜筒、真空装置和电源柜三部分组成,镜筒主要又由电子源、电子透镜、样品架、荧光屏和探测器等部件构成。其他各种显微镜还包括荧光部件,扫描模块,激光器,冷却系统及稳压电源,数码相机、摄像头、图像分析软件等各种部件组成。

1.3显微镜部件精密

不仅是电子部件,荧光部件,激光部件等各种特殊部件精密,包括光学部件也是十分精密。比如物镜最高的数值孔径(N. A.:1.42),比如100×物镜在340nm处(紫外)仍维持着高透过率,这些光学部件的精密程度都是以前无法做到的。

1.4显微镜用途各有针对性,使用各有特点

各种显微镜主要用途不同,所接触的理化物质也有所不同,比如倒置显微镜是为了适应生物学、医学领域中的组织培养、细胞离体培养等显微观察。所以主要接触这些均放置在培养皿中的活体被检物体。比如激光扫描共聚焦荧光显微镜能随时采集和记录检测信号,主要用于观察活细胞结构及特定分子、离子生物学变化,具有成像功能外,还有图象处理功能如包括光学切片、三维图象重建[2]、细胞物理和生物学测定、荧光定量、定位分析以及离子的实时定量测定,主要接触的样品是经荧光探针标记,固定的或活的组织,固定的或活的贴壁培养细胞应培养在专用小培养皿或盖玻片上,悬浮细胞,甩片或滴片后,用盖玻片封片等被检物。

2 认识共性,对各显微镜实行相同内容的维护保养工作,我总结为一轻,二避免,三擦拭,四预防。

2.1一轻

显微镜属于精密仪器,各部件的位置都是十分讲究的,剧烈的震荡均可能导致显微镜出现精密度降低甚至故障,所以在使用和存放显微镜时,我们都应该轻拿轻放,动作轻柔。

2.2二避免

2.2.1第一避免人为污染或损坏,比如用手触摸光学镜头,某些挥发性化学物品长期放置在显微镜载物台等。

2.2.2第二避免显微镜长期处于工作状态,反复工作状态或者极端状态。显微镜使用完毕要及时关闭电源等,做好保存工作,使用时电源开关不要短时内频繁开关。具有张力作用的器件使用完毕后耍让它回到自然松弛状态,任何可调节的部位最好都不要让它处于极端位置。

2.3三擦拭

2.3.1擦拭内容很重要,首当其冲擦光学镜头,先用洗耳球吹掉镜头上的附着物,吹不掉的再用毛刷刷【1】,最后用专用擦镜纸擦,可蘸少许二甲苯轻轻擦拭或者用少许无水酒精擦拭。如果油镜使用完毕要及时用擦镜纸把油质擦掉,再用二甲苯滴湿擦镜纸擦两次,最后再用干擦镜纸擦一次。

2.3.2其次就是机械装置的擦拭,也可先用洗耳球吹掉机械装置上的附着物,再用柔软的纱布擦拭,或者使用棉签进行擦拭,避免使用能腐蚀机械装置表面油漆或者化学涂层的化学品擦拭【2】。

2.3.3最后就是擦拭载物台,镜壁,镜座等仪器表面,可以用柔软棉布,纱布等。

2.4四预防,做到防尘,防腐和防潮,另外还要防高温。

1防尘工作很重要,因为灰尘可以影响我们的成像质量,更重要的是灰尘带有酸碱性可能腐蚀镜头等,而且较大灰尘掉镜头上擦拭时有可能导致镜片出现划痕,掉机械部件里,有可能影响机械部件工作。因此我们要对显微镜的使用环境(如实验室)进行经常的清洁打扫。存放显微镜时要盖好防尘布【3】。

2.4.2显微镜应少接触酸碱类物质,特别强酸强碱,避免对镜头及其他部件的腐蚀。

2.4.3显微镜长期受潮,镜头容易发霉,金属机械部件也容易腐蚀,所以要做好实验室湿度监测和管理,显微镜应该在干燥的环境下保存。在31℃时湿度不得大于80%,温度每升高3摄氏度,相对湿度要设法降低10%。

2.4.4显微镜主要由精密的机械部分和光学镜头组成,各部件受热膨胀的系数不一,所以应避免高温导致显微镜的使用异常。所以在实验室里使用或者存放显微镜,应放置于避免阳光直晒,后者远离发热源的地方。对使用环境和存放环境进行温度监测,保证其温度大概在5~40℃。

3.认识个性,分类管理,做好不同类型显微镜的个性维护保养。

我们实验室有很多显微镜,比如Leica品牌, 型号为S6E的体视显微镜,Nikon 品牌的型号TE2000U的倒置荧光相差显微镜,Leica SP5为激光共聚焦显微镜。我们根据不同类型的显微镜在做好共同内容的维护保养同时,再做针对性保养,例如激光共聚焦显微镜,除了前面所讲的共性,它有自己特殊的组件系统——光路转换装置,也就是汞灯和激光的转换,所以在做相应的维护保养时,我们要检查我们的汞灯以及激光器工作是否正常,提前准备好该型号显微镜使用的的同型号的汞灯等作为备用,发现工作异常时能及时更换,不影响正常的工作秩序。再如体视显微镜,又叫实体显微镜,它的倍率变化是由改变中间镜组之间的距离而获得的,又称“连续变倍体视显微镜”【4】,它拥有多个可选倍数的目镜,拥有不同规格冷光源,所以我们必须做好目镜的保养,同倍数的目镜统一放置管理,避免双目镜因为倍数不一导致的成像重影,也要做好同型号冷光源灯泡的提前准备,分类标识统一管理,避免上下灯路的灯泡烧坏后,更换灯泡时规格使用错误,或没有灯泡更换等影响其正常工作。为了灯泡使用寿命够长,我们要对稳压系统工作是否正常经常监控,对显微镜电线连接是否牢固进行检查等。

总之,作为实验室的管理人员,做好实验室显微镜的维护保养,保证显微镜的正常工作是十分重要的,这项工作不仅是管理工作也是技术工作,我们应该仔细分析每台显微镜的共性和个性,仔细分析每台显微镜的技术指标,在一般维护保养的基础上做到针对性维护保养,那样的话,看似繁琐的工作,将变得很简单。

参考文献:

[1] 林和,陈寅山.浅谈高校生物显微镜的使用与维护保养[J].现代仪器,2005,11(4),63-66.

[2] 王丽婷,孙玮,王丽馨,等.浅谈激光扫描共聚焦显微镜的使用维护及保养[J].现代医药卫生.2012,28(20):3132-3133.