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生物科技新进展范文1
科技论文;生物科学素养;文献检索
高中生物学教学使用的教材以及生物科技书籍与生物科技新进展存在较大的时差,将生物科技论文中的新观点、新作法,以及相关的新知识、新成果和新应用传播给学生,可促进学生对不断发展的生物科学及其研究的理解和应用,引导学生主动学习,提高生物学学习能力和生物科学素养。
一、科技论文的概述
所谓科技论文是指论证、描述运用科学技术,开展科学研究,获得一定科研成果的学术性文章。中国国家标准GB7713-87明确指出:“学术论文是某一学术课题在实验性、理论性或观测性上具有新的科学研究成果或创新见解和知识的科学记录;或是某种已知原理应用于实际中取得新进展的科学总结,用以提供学术会议上宣读、交流或讨论;或在学术刊物上发表;或做其他用途的书面文件。”科技论文能体现最新的科技成果及科技发展,科技成果已广泛运用于生产、生活。在高中生物学教学中,有效地运用科技论文,能激发学生的探究欲望,促进学生对生物学的认识,提高生物科学素养。
二、科技论文的选择
应选择近期发表的较高水平的科技论文,注意选择研究角度新颖、涉及生物学热点话题的研究文章。如学习有关育种知识时,介绍有关华中农业大学科研人员克隆出控制水稻光敏感核不育的基因pms3,该科研成果可加速水稻“两系”不育系培育,促进作物杂种优势利用。引导学生由此相关信息为主题,检索有关科技论文,让学生获取科学性、权威性的基因工程育种的最新科学进展。
还应注意选择有关促进社会、生产、生活等方面研究的科技论文。例如,在学习“生态环境的保护”时,根据不断加剧的“雾霾”天气,引导学生学习《北京一次持续性雾霾过程的阶段性特征及影响因子分析》,帮助学生了解北京地区持续性雾霾天气过程中的气象因素和气溶胶演变特征。学生结合“雾霾”天气亲身体验,加深了对“雾霾”天气的了解,提高保护环境的意识,有利于学生掌握生物科学知识,运用所学的知识解决现实生活中的问题。许多实验验证性的科技论文包含有实验材料、实验方法、实验结果、讨论和结论,不仅具有科学的、最新的实验技术和方法,还有翔实的实验数据,让学生易于理解实验过程、实验数据和结论之间的关系,体现科技论文的应用价值与社会意义。
三、科技论文的教学应用
首先在课堂上为每位学生提供一份论文,要求学生围绕“文章的研究的目、研究的对象、研究的结论或结果、研究的问题对社会或研究领域有什么影响”等一系列问题进行阅读,培养学生快速地获取有关信息的 能力。
然后指导学生罗列论文中相关的生物学概念和难理解的专业名词,并尝试理清生物学概念与难理解的专业名词之间的关系,通过新情境的构建,培养学生对知识的理解、分析、应用等迁移能力,为理解实验和科学进展打下良好基础。
科技论文表述的实验原理和步骤等具有前瞻性,专业性比较强,学生难以理解。课堂教学时教师应简要地解释实验过程,引导学生理解新的实验方法和实验设计,尝试用通俗易懂的文字简化复杂的实验条件和方法,设计相关类似的实验,提高学生的实验设计能力。
四、科技论文的教育价值
1.促进学生学会文献检索
指导学生从公共媒体如报纸、公共科学杂志,比如《新科学家》《科学新闻》或者中国知网等相关网站,采用“文献检索方法”“数据库检索方法”“出版物检索方法”,使用关键词搜索,在论文期刊上网站上或搜寻合适的论文,比如早期原创性研究论文,进行对比阅读,培养学生学会求知、学会学习,掌握认识世界的工具、学会最迅速、最有效地获取信息、处理信息和运用信息的能力。
2.促进学生对生物学核心概念的掌握
高中生物核心概念是建立在一般概念、原理和规律之上的对生物学核心问题认识和理解,从不同的角度阐释生命的本质,有利于帮助学生理解与掌握生物学主干知识。在有关“光合作用、呼吸作用”等核心概念学习中,以关键词“光合作用、呼吸作用、影响光合作用、呼吸作用速率等”检索到《不同营养条件对金鱼藻净化作用及其生理生态的影响》《静止和充气培养条件下光强对龙须菜光合生理效应的影响》等科技论文,通过学习,拓宽视野,加深对光合作用速率、光合效率、净光合作用速率等生物学核心概念理解和掌握。
3.提高学生图文转换和图表处理能力
生物科学经常以生物绘图或图表方式呈现科学研究方法或成果,在教学中尝试将论文的数据用简化的图表进行特殊处理,剔除冗余信息,并将图表与文字相结合,培养学生科学思维和习惯,提高图文转换和图表处理能力,加深对新的科学实验的理解。
4.提高学生解决问题能力
生物科技新进展范文2
[关键词] 肝细胞癌;SIRT6;增殖;凋亡
[中图分类号] R735 [文献标识码] A [文章编号] 1674-0742(2017)01(c)-0054-03
Effect of SIRT6 Gene Silencing on the Proliferation and Apoptosis of Liver Cancer Cells
XIE Ling-lin
Microbiology Teaching and Research Room, Sichuan Nursing Vocational College, Chengdu, Sichuan Province, 610100 China
[Abstract] Objective To discuss the effect of SIRT6 gene silencing on the proliferation?and?apoptosis of liver cancer cells. Methods The SMMC-7721 was constructed and transfected with SIRT6, and SIRT6 mRNA and protein expression levels were tested, and SIRT6 mRNA, protein expression level and apoptosis were tested after culturing the slow-virus infection Huh-7 cells expressing shSIRT6. Results Huh-7 stable cell line of the silencing SIRT6 gene was successfully constructed, in the Huh-7 cells, the inhabitation rate of mRNA expression reached 81.25%, and the SIRT6 protein level was also inhabited, and the apoptosis ratio of Huh-7 cells reached (16.52±2.08)%. Conclusion SIRT6 gene silencing can induce the apoptosis of human hepatoma cells thus inhabiting the proliferation.
[Key words] Hepatocellular carcinoma; SIRT6; Proliferation;Apoptosis
肝细胞癌作为临床上常见的恶性肿瘤,其患病率及病死率一直居高不下,手术是常用的治疗手段,但效果常不尽如人意。探索肝细胞癌的发生发展的内在机制,寻求有效抑制癌细胞增生的新疗法一直是临床研究的重要课题。Sirtuins是存在于哺乳动物基因中的酵母沉默信息调节因子的同源基因,其中,沉默信息调节因子6(silent information regulator 6,SIRT6)具有抗癌作用,而当SIRT6缺失时,细胞则会出现组蛋白H3第56位赖氨酸(histone H3 on lysine 56,H3K56)高度乙酰化,而这是与肿瘤息息相关的一类染色质修饰。此外SIRT6对基因组的稳定性、炎性反应等都有调节作用,这也是其发挥抑癌作用的一个重要方面[1]。该研究以2015年1月―2016年1月来四川护理职业学院附属医院就诊的88例肝癌患者的细胞系为研究对象,旨在探讨SIRT6对肝癌细胞增殖和凋亡的影响,并分析其内在机制,以期为肝癌的临床治疗提供新的思路,现报道如下。
1 资料与方法
1.1 一般资料
88例人肝癌细胞系SK-Hep-1、PLC/PRF/5、HepG2、Huh-7均来自2015年1月―2016年1月来四川护理职业学院附属医院就诊的肝癌患者;永生化肝细胞系MIHA购自上海冠导生物工程有限公司;pCMV6-XL5和pCMV6-XL5-XIAP质粒购自Cell Biolabs公司;shSIRT6慢病毒购自GeneChem公司;SIRT6抗体购自Sigma公司;羊抗鼠IgG-HRP和GAPDH抗体购自上海市雅吉生物科技有限公司;羊抗兔IgG-HRP购自北京博尔西科技有限公司;质粒转染试剂购自Roche公司;siRNA转染试剂Lipofectamine 2000购自上海联硕生物科技有限公司;Annexin V-FITC细胞凋亡检测试剂盒购自南昌乐悠生物科技有限公司;培养基购自Gibco公司;RT-PCR试剂盒购自TAKARA公司。
1.2 细胞培养
在5%CO2,37℃的恒温箱中分别对SK-Hep-1、PLC/PRF/5、HepG2、Huh-7 4细胞系进行培养,并按说明书进行质粒转染及siRNA转染。
1.3 Western blot
收集细胞,洗涤后加入裂解液,离心取上清液,电泳分离蛋白质,转膜后用TBST洗膜,加入包被液,平稳摇动,室温2hr,继续洗膜,加入一抗,4℃放置12hr以上,弃一抗,TBST洗膜,二抗室温2hr,TBST洗膜,加入显色液,避光显色至出现条带时放入双蒸水中终止反应。阴性对照以β-actin作为内参,其余步骤与实验组相同。
1.4 RT-PCR检测
裂解细胞提取RNA,逆转录为cDNA,利用试剂盒进行RT-PCR,以β-actin为内参,每组实验重复3次。
1.5 流式细胞术检测细胞凋亡
SK-Hep-1和Huh-7细胞转染72 h后,洗涤并离心,加入195 μL Annexin-V结合液重悬细胞、6μL Annexin-V、4 μL PI,室温避光孵育20 min,立即进行流式细胞术进行检测。
1.6 统计方法
采用SPSS 20.0统计学软件进行统计分析数据,两组间比较采用配对t检验,以P
2 结果
2.1 SIRT6在肝癌细胞系中的表达
经RT-PCR和Western blot结果显示,SIRT6在4个肝癌细胞系中的mRNA和蛋白质水平较永生化肝细胞系MIHA明显升高,见图1、2。
2.2 慢病毒介导的shRNA对SIRT6的抑制作用
将表达shSIRT6的慢病毒感染Huh-7细胞,构建SIRT6-shRNA-Huh-7稳定细胞系,并采用RT-PCR和Western blot检测SIRT6 mRNA及蛋白质水平。结果表明,在Huh-7细胞中,mRNA表达的抑制率达81.25%;应用Western blot检测Huh-7细胞中SIRT6蛋白质水平,结果显示,其SIRT6蛋白质水平亦受到抑制。
2.3 SIRT6基因沉默可诱导人肝癌细胞凋亡
对感染慢病毒后的Huh-7细胞进行流式细胞术检测。结果显示,Huh-7细胞的凋亡比例为(16.52±2.08)%,提示SIRT6基因沉默可诱导人肝癌细胞凋亡。
3 讨论
随着分子生物学的发展,基因在临床中的应用及潜在价值越来越受到医务工作者的重视[2]。SIRT6是Sirtuin家族的重要成员,最早在酵母等低等生物中发现,随后陆续在高等生物的基因中发现其同源序列。哺乳动物的Sirtuin家族包括7个成员,其中SIRT6在抗衰老及抗癌方面有着重要作用[3]。葡萄糖代谢在肿瘤细胞的生长、增殖中占据重要地位,SIRT6可通过调控胰岛素的信号转导来干预葡萄糖的代谢,进而影响肿瘤细胞的增殖和凋亡[4]。除此之外,SIRT6还可参与基因的损伤修复,在维护正常基因序列的同时,对异变的肿瘤基因起到抑制、杀灭的作用[5]。
关于SIRT6在抗癌中的作用,既往有多位学者做了深入研究。该研究成功构建了沉默SIRT6基因的Huh-7稳定细胞系,在Huh-7细胞中,mRNA表达的抑制率达81.25%,其SIRT6蛋白质水平亦受到抑制;Huh-7细胞的凋亡比例为(16.52±2.08)%。提示SIRT6基因沉默对于肝癌细胞的凋亡有促进作用,这与既往相关学者的研究结果相一致。周洪钟等[6]将表达shSIRT6-1、shSIRT6-2的慢病毒分别感染SK-Hep-1和Huh-7细胞,结果显示,SK-Hep-1细胞中shSIRT6-1和shSIRT6-2组的细胞凋亡比例分别为(20.5±2.64)%和(18.4±2.1)%;Huh-7细胞中shSIRT6-1和shSIRT6-2M的细胞凋亡比例分别为(17.4±2)%和(21.93±2.45)%,提示SIRT6基因沉默可诱导人肝癌细胞凋亡。SIRT6可通过p53、p73和ATM信号通路及影响ADP-核糖基转移酶活性促进肿瘤细胞的凋亡。但亦有学者提出不同观点,刘妙娜等[7]的研究证实,SIRT6在HepG2肝癌细胞株过度表达具有较为明显的抗肿瘤作用,该作用在诱导细胞凋亡的基础上,抑制ERK1/2信号通路。同时,SIRT6过度表达能够降低HepG2肝癌细胞ROS水平[8-9]。因而在关于SIRT6的具体抗癌机制及临床应用方面还需进一步探索。
4 结语
SIRT6基因沉默在促进肝癌细胞凋亡,抑制其增殖方面效果显著。但是,其具体的作用机制尚未研究透彻,操作手段目前发展尚不成熟,有待于进一步深入研究。此外,关于SIRT6在肿瘤治疗中的具体作用尚有争议,其双重作用可能有组织、因子分布乃至肿瘤分型及发展阶段等息息相关,这些都需要科研人员及临床工作者的进一步探索。
[参考文献]
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[4] 肖元元,王倩倩,毛月芹,等.Exendin-4对游离脂肪酸诱导肝细胞sirt6表达及其对糖异生作用的影响[J].医学研究杂志,2015,44(1):39-43.
[5] 周洪钟,陶娜娜,陈祥,等.SIRT6基因沉默对裸鼠异位移植人肝癌细胞增殖和凋亡的影响[J].中国细胞生物学学报,2016,38(7):821-828.
[6] 周洪钟,陶娜娜,陈祥,等.SIRT6基因沉默对人肝癌细胞凋亡的影响及其机制研究[J].中国细胞生物学学报,2016,38(4):389-396.
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预应力混凝土结构研究新进展
(1)次内力对预应力混凝土及型钢混凝土结构性能影响的研究进展 熊学玉 王美华 李媛 吕品
(8)次轴力对预应力混凝土框架结构承载力影响 熊学玉 吕品 程琛 李媛
(12)全面考虑次内力影响的预应力混凝土框架施工过程研究 熊学玉 程琛 李媛 吕品
(16)预应力型钢混凝土框架梁试验研究及抗裂度分析 熊学玉 高峰 李亚明
(20)预应力型钢混凝土框架梁裂缝控制试验分析及计算 熊学玉 高峰 李亚明
(24)预应力型钢混凝土框架梁正截面承载力试验及计算 熊学玉 高峰 李亚明
(30)预应力型钢混凝土短期刚度试验研究 熊学玉 黄炜一 高峰
(34)预应力型钢混凝土框架结构非线性分析 熊学玉 李阳 王美华
(39)预压装配式预应力混凝土框架拟动力抗震性能试验研究 黄慎江 柳炳康 凌琦
(44)建设全生命周期内的低碳电厂 黄继前 雷梅莹 徐杨 李伟林
(48)武汉丽人源生物科技发展有限公司产业园及无菌车间设计 周百灵 王廷韶
(52)旌西工业园区产业发展目标技术论证及策略研究 高伟 龙彬
(57)某办公大楼建筑设计中空间蒙太奇手法的应用 赵冬 朱亦民
(60)现砌加强肋生态复合墙体抗震性能试验研究 黄炜 陈海燕 侯莉娜 陈国新 张荫
(65)早龄期钢筋混凝土柱受地震影响后的抗震性能试验研究 陈雄 杨俊杰 章雪峰 崔钦淑 王李娜
(71)保温混凝土小型砌块墙体受压性能的试验研究 何淅淅 杨智 张雪松
(75)冷轧螺旋钢筋混凝土楼板的现场试验研究 毛土明 邹道勤 张海义
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(84)千枚岩弃料压实土的路用特性试验研究 赵丽娅 刘保健 王书涛
(88)地震波作用下桩-锚支护切方直立土坡的动力响应分析 汪鹏程 朱大勇 孙玲玲
(92)土钉支护结构侧压力分布规律分析 刘磊 宋二祥
(98)新型混凝土横孔空心砌块砌体基本受力性能试验研究 陈伟 周绪红 吴方伯 黄海林 徐静
(102)后装拔出法检测聚乙烯醇纤维水泥复合砂浆抗压强度的试验研究 卜良桃 李静媛
综述
(106)高性能水泥复合砂浆钢筋网薄层加固钢筋混凝土结构的技术研究进展 汤繁华 蒋隆敏
现代钢结构
(111)筑巢轻钢龙骨体系桁架梁试验研究及有限元分析 王志军 朱兰影 余宾宁 罗来安
(116)单片开洞薄板墙边缘构件的受力分析 兰涛 郭彦林 郝际平
(121)主方支圆内隔板加劲t型节点破坏模式研究 邓芃 王来 刘艳 何莎莎
鉴定·加固·改造
&n
bsp; (126)安哥拉既有铁路桥梁检测鉴定及修复对策研究 苗吉军 樊龙 刘延春 王玉田 高立堂
(130)清华大学西体育馆的保护修缮技术 刘芳 田庆平 何本贵
无
(136)专业小知识 无
工程事故分析
(137)鸳鸯会隧道开挖变形分析及控制措施 孙强 胡书桥
工程实录
(141)某砖混结构墙体托换过程监测及性能研究 邵剑文 干钢 何勇 毛江鸿 崔何亮
建筑设计漫谈
(146)融:青岛理工大学黄岛新校区规划设计和实践 解旭东 王贵杰 郝赤彪
无
(149)会讯 无
建筑设计漫谈
(150)从“绿色建筑”理念看冶金工厂建筑设计 武瑞
无
(154)会讯 无
生物科技新进展范文4
关键词:生物 素质教育 教师素质 创新
尽管我国开展素质教育已经多年,但是由于中考和高考指挥棒的作用,应试教育仍是教学工作的主要目标,素质教育往往流于形式。自2001年以来实行的新课程改革,其核心是深化素质教育,促进学生在德、智、体、美、劳各方面的全面发展,培养学生的创新精神、研究能力和自学能力,改变学生被动的学习方式,激发学生的自主学习和探索意识,为学生的终身学习和发展打基础。
就生物学科而言,《生物课程标准》要求生物教育的目标是使学生掌握必要的生物学知识和基本技能,学会生命科学的基本方法,提高学生的思想品德、身体心理等素质;使学生了解人、自然和社会的相互关系,了解生命科学的发展与人类未来的关系,对全球性的人口、粮食、健康、能源、资源和环境等问题有一种正确的态度;培养学生的科学精神和创新思维习惯以及收集处理信息的能力、获取新知识的能力、分析问题的能力、语言文字表达能力以及团结协作和社会活动的能力,使受教育者具有较高的生命科学素质。新标准突出了两大方面的内容:一是实验内容大大增加,特别是探究性实验,着重培养学生的探索及思考能力;二是培养学生综合素质的教育内容大大增加,这些知识的学习需要学生进行一定的调查、资料搜集、信息获取,提高分析整理能力。但目前中学生物教学与此要求仍有差距,如在生物课堂上,仍以教师为中心的讲授式教学模式占统治地位:老师讲的多,学生说的少;老师想的多,学生思考少;老师写的多,学生练的少。师生间缺乏相应的互动,学生间缺乏相应的交流,学生处于被动的地位。学生创新意识和实践能力的培养不被重视,侧重于生物学现象和事实的学习,学生往往孤立地记忆和掌握知识点,忽视了自己思考解决问题能力的培养,综合运用知识的能力和思维分析能力很差。
鉴于这些现状,提出以下浅见:
一、加强师资配备,提高教师素质
课改能否成功的关键在于教师。学校应根据实际情况需要配齐生物教师和实验人员,加强对生物教师的培训,可组织暑期培训,也可利用网络资源进行远程培训。教师自身也应通过自学不断提高自身的思想文化素养、教育素养、创新和科研素养以及学术素养等,使自己成为一个具备高尚道德修养、掌握现代科技知识和技能、享有平和心态和自由心灵并拥有完善人格和良好个性的适应职业发展的人。
二、重视生物学实验,并引导学生理论联系实际,通过实验强化理论认识
生物科学不仅是一门基础学科,同时也是一门实验科学。纵观生物科学的发展历史,它的每项重大实验和发现同其实验技术是分不开的。通过初中生物实验教学,不仅可以培养学生的观察能力、动手能力和思维能力,让学生所学知识更牢固,还可激发学生学习生物的更大兴趣。有条件的情况下应积极开展课外活动,生物课外活动是课堂教学的延续和必要的补充,也是实施素质教育的重要阵地。
三、注重教学方法
针对教学内容的差异,要在传统教学方法的基础上积极尝试新的方法和模式,如探究式教学、合作学习教学模式的应用。要重视多媒体教学与传统教学的结合,使知识更加直观和生动。
四、关注创新教育
在中学生物教育中,教师不仅要让学生获得生物学知识和技能,提高生物科学素养,还要培养学生的创新精神和创新能力。教师可以增加反映现代生物科技新进展的知识,如克隆技术、转基因技术、人类基因组计划等,让学生科学理解生物学科的性质和变化,进而形成对自然和社会的正确认识。
参考文献
[1]胡明 李少毅 主编《生物课程标准教师读本》.武汉:华中师范大学出版社,2002。
生物科技新进展范文5
关键词:甜瓜;蚜虫;生物制剂
甜瓜蚜虫是甜瓜上的主要虫害之一,危害日趋严重。如温湿度适宜,极利于甜瓜蚜虫的繁殖和暴发。由于甜瓜蚜虫繁殖速度快,世代重叠严重,对农药易产生抗药性,因而导致生产中超剂量、滥用农药的现象频频发生,造成田间药害和产品、土壤中农药大量残留[1],严重威胁和影响了人们的健康和环境的安全[2]。使用生物药剂及其复配药剂[3-5]防治甜瓜蚜虫,是克服这一缺陷和不足的有效措施和主要发展方向。为此,笔者选择了4种生物制剂进行田间药效试验,以期为今后在德州地区甜瓜生产中推广使用生物农药,替代传统农药,最终实现无害化防治病虫害提供依据。
1 材料和方法
1.1 试验材料
1.1.1 供试药剂
0.3%苦参碱水剂(山东百纳生物科技有限公司);200万个/mL耳霉菌悬浮剂(山东省长清农药厂有限公司);0.5%藜芦碱可溶性液剂(邯郸市建华植物农药厂);1.8%阿维菌素乳油(陕西上格之路生物科学有限公司)。
1.1.2 试验品种
供试品种为景甜1号。试验处理时甜瓜处于伸蔓期,真叶9~16片。
1.2 试验方法
试验共设5个处理:(1)0.3%苦参碱水剂100倍液;(2)200万个/mL耳霉菌悬浮剂310倍液;(3)0.5%藜芦碱可溶性液剂1 500倍液;(4)1.8%阿维菌素乳油1 500倍液;(5)清水对照。4次重复,小区随机排列。
试验设在德州市德城区黄河涯镇有机西瓜基地露天生产地。于2010年6月7日上午用WS-16P型背负式喷雾器常规喷雾,每667m2喷水量15 kg,并于药后第1天、第3天、第5天、第7天分别记录残留蚜虫数量,计算防治效果。
防治效果按下列公式计算:
式中:CK0:空白对照区施药前虫数;CK1:空白对照区施药后虫数;PT0:药剂处理区施药前虫数;PT1:药剂处理区施药后虫数。
1.3 数据统计分析
试验数据用DPSSOFT进行统计分析。
2 结果与分析
2.1 防治效果
0.3%苦参碱水剂100倍液、200万个/mL耳霉菌悬浮剂310倍液、0.5%藜芦碱可溶性液剂1 500倍液这3种处理施药后第1天的防效均达91.39%以上,表现出良好的速效性;以0.3%苦参碱水剂100倍液施药后第1天的防效最高,达98.91%,200万个/mL耳霉菌悬浮剂310倍液次之,达98.16%,但3种药剂的速效性之间无显著性差异(P>0.05)。处理3药剂施药后第3天、第5天、第7天的防效分别达99.58%、99.97%和100%,表现出良好的持效性。1.8%阿维菌素乳油1 500倍液速效性不如前3种处理,施药后第1天的防效仅达84.50%,与前3种处理药剂防效有显著差异性(P<0.05);施药后第3天、第5天的防效分别达94.25%、96.65%,防效明显逐渐增高,与前3种处理有显著差异性(P<0.05)。4种处理在施药后第7天的防效均达到100%,防治效果良好,有效控制了甜瓜蚜虫的为害,详见表1。
2.2 安全性调查
据观察,4种药剂处理施药后,甜瓜长势正常,均未发生药害现象。
3 结论
3.1 0.3%苦参碱水剂100倍液、200万个/mL耳霉菌悬浮剂310倍液、0.5%藜芦碱可溶性液剂1 500倍液、1.8%阿维菌素乳油1 500倍液4种供试药剂对甜瓜蚜虫均具有理想的防治效果,且都为生物制剂,可保证甜瓜生产安全、无污染,以满足无公害甜瓜生产的需要。
3.2 药剂防治适期应掌握在蚜虫发生初期,晴天傍晚16∶00以后喷施,连续用药2~3次,每次间隔5~7 d。同时,蚜虫容易对药剂产生抗药性,生产上应几种药剂轮换使用。
参考文献
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生物科技新进展范文6
P855-857
心肺复苏患者心跳骤停后脑组织经历了严重的全脑缺血-再灌注损伤,既往流行病学资料表明,即使患者恢复自主循环,仍有高达55%~71%的院内病死率[1]。亚硝酸盐既往被认为是一氧化氮的代谢产物,但目前研究发现,在组织缺氧时亚硝酸盐可作为底物被还原为一氧化氮,从而起到保护脑组织缺氧的作用。本试验采用窒息型大鼠心肺复苏模型,用亚硝酸钠进行干预,观察大鼠心肺复苏后大脑皮层枕叶一氧化氮的含量以及细胞凋亡的发生,用以进一步探讨亚硝酸钠在心肺复苏后脑保护中的作用。
1 材料与方法
1.1 实验动物及分组
实验共使用清洁级健康成年雄性SD大鼠45只(由上海斯莱克实验动物有限责任公司提供),日龄70~90 d,体质量300~400 g,(357.5±20.8 )g。随机(随机数字法)分为手术对照组、复苏组、亚硝酸钠组,每组各15只。术前禁食12 h,自由饮水。
1.2 仪器与试剂
南京美易科技有限公Med-lab-U/4CS生物信号采集处理系统;成都泰盟科技有限公司HX-300动物呼吸机;德国Hettich公司低温高速离心机(univerval-32R);上海棱光技术有限公司722S分光光度计;上海贺德实验设备厂DK-600电热恒温水浴箱;南京建成生物科技有限公司亚硝酸盐还原酶试剂盒;德国罗氏原位细胞凋亡检测试剂盒;广州白云山明兴制药有限公司亚硝酸钠注射液。
1.3 动物模型制作
采用窒息法建立大鼠心肺复苏模型[2]。实验参数设计和记录均参照复苏实验研究Utstein模式。大鼠以5%水合氯醛0.35 g/kg腹腔注射麻醉后固定于大鼠手术台,将皮下针接心电导联予以心电监护,经口气管插管接动物呼吸机供气(空气),分离右侧腹股沟,暴露股动脉、股静脉后予以分别置管用于监测血压及给药。呼吸机供气10 min待其基线达到平稳状态,大鼠于呼气末夹闭气管插管,窒息7 min后开始CPR,当出现自主心律、脉搏波,MAP>60 mm Hg(1 mm Hg=0.133 kPa)并持续10 min以上判断为自主循环恢复(ROSC)。亚硝酸钠组大鼠在复苏前经股静脉推注亚硝酸钠针0.13 mg/kg[3](亚硝酸钠溶液质量浓度为30 μg/ml,取药后不足1 ml用生理盐水稀释至1 ml静注)和肾上腺素20 μg/kg(肾上腺素溶液质量浓度为10 μg/ml,取药后不足1 ml用生理盐水稀释至1 ml静注)。复苏组肾上腺素稀释至2 ml推注。对照组动物仅进行麻醉和气管插管、血管穿刺,推注2 ml生理盐水,不进行夹管窒息及CPR。大鼠于ROSC后3 h开始逐步脱机,并于角膜反射和疼痛反射均出现后拔除右侧股动脉、静脉插管,结扎血管,缝合右股动脉处创口,撤离气管插管,放入鼠笼内,自由饮食饮水,室温控制在23~26℃。各组于ROSC后24 h快速断头处死,在冰盘上完整取出大脑。
1.4 大脑皮层组织匀浆NO含量测定
采用亚硝酸盐还原酶法。亚硝酸盐还原酶试剂盒购自南京建成生物科技有限公司。大鼠在ROSC后24 h用5%水合氯醛(7 ml/kg)麻醉,剪开右心房,用100 ml生理盐水经颈动脉注入灌洗。断头取出大鼠大脑,完整分离出左侧大脑皮层,取枕叶约100 mg剪碎放入玻璃匀浆器内,加1 ml 4 ℃生理盐水,制成匀浆,离心(4 ℃,3000 r/ min)取上清液,放入-20 ℃冰箱保存待测。检测的操作过程均按说明书要求进行。
1.5 大脑皮层细胞凋亡检测
采用原位细胞凋亡检测试剂盒,试剂盒购自罗氏公司。将右侧枕叶皮层组织置于10%福尔马林中固定24 h后,常规石蜡包埋切片,片厚4 μm,免疫组织化学染色。按照说明书要求,部分切片以试剂2代替TUNEL反应混合物做阴性对照。具体操作步骤按说明书要求进行。
1.6 统计学方法
采用SPSS 13.0软件包处理数据,计量资料以均数±标准差(x±s )表示。多组比较采用方差分析。方差齐性检验采用levene’ s法,方差齐性时采用LSD-t法,方差不齐时采用Tamhane’ s检验。以P<0.05为差异有统计学意义。
2 结果
2.1 各组参数比较
各组存活24h大鼠体质量(P=0.391),基线平均动脉压(P=0.671)差异均无统计学意义。
2.2 大鼠大脑皮层枕叶匀浆NO含量
与假手术对照组比较,复苏组和亚硝酸钠组大鼠脑组织NO含量显著升高;与复苏组比较,亚硝酸钠组大鼠脑组织NO含量显著升高;与复苏组比较,亚硝酸钠组大鼠复苏后24 h存活率显著升高。见表2。
2.3 大鼠大脑皮层枕叶细胞凋亡表达
与假手术对照组比较,复苏组和亚硝酸钠组大鼠皮层凋亡细胞高度表达,与复苏组比较,亚硝酸钠组皮层凋亡细胞表达明显降低,差异具有统计学意义。见表3,图1。
3 讨论
2010年心肺复苏指南心跳骤停复苏后高级生命支持的新进展仍乏善可陈,对脑保护仅提及亚低温疗法。心跳骤停后心肺复苏患者脑组织主要病理生理改变为缺血再灌注损伤,因此积极防治脑缺血再灌注损伤是改善患者预后的重要因素。