审计实习报告范例6篇

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审计实习报告

审计实习报告范文1

3、实训总结:

两个星期紧张的审计实训,时间就这样在忙碌中匆匆过去了,留给我的都是丰富的经验和深深的体会。

我们实训的目的是注重“教学”与“实践”相结合,提高学生的动手能力,增强对审计知识进一步的理解,培养学生对审计知识的灵活运用以便于在以后的就业不至于“手慌脚乱”!

在这次实训中,我深刻地体会到“什么是团队合作精神”,因为对一个企业进行审计是一件十分繁重的工作,一个小组必须要有一个有序的分工,然后再综合大家的工作成果,最后才能做出最后的结果。

我们的实训总共分为7大模块,分为:

1、计划阶段审计实务操作;

2、销售与收款循环的审计;

3、采购与付款循环的审计;

4、生产与服务循环的审计;

5、筹资与投资循环的审计;

6、货币资金的审计;

7、审计报考。

由于我们小组的人数较多,为了工作更有效率,所以我们采用了抽签的方法进行了分组和分配工作,针对前面6个模块,平均2个小组成员负责一个阶段,第7个阶段就根据各组的工作底稿等资料进行整理并出具审计报告。

我和另外一位小组成员主要负责第一阶段即“计划阶段审计实务操作”。我们“简单”而似乎又 “繁琐”的实训步骤如下:

1、开展初步业务活动,与委托单位签订业务约定书;

2、通过资料,了解被审计单位及其环境,识别评估其重大错报风险;

3、针对评估的重大错报风险计划实施的程序;

4、初步确定重要性水平与可接受的审计风险;

5、编制总体审计策略与具体审计计划。

根据实训的步骤,我们填制的表格有:基本情况表、承接业务的风险初步评价表、审计业务约定书、横向趋势分析表、纵向趋势分析表、比率趋势分析表、分析性测试情况汇总表、识别并评价与审计相关的重要的内部控制的设计并确定其是否得到执行、审计风险初步评价表、审计总体工作计划表。以上表格统称为“计划阶段审计工作底稿”。

我的专业是审计实务,但这是第一次真正意义上了解到审计是做什么的。怀着一份新鲜和好奇感开始了实训的第一天。虽然之前有参加过会计模拟手工记账的实训,但这次的感觉却完全不同,尤其是那个工作氛围,几乎全靠自己的能力和理解,刚开始时,面对着一堆的委托单位的资料,我竟然有点无从下手的感觉,久久不知如何开始,后来在老师的耐心指导下,开始有了一点头绪,一个上午4节课,就在分组,分配工作,和一堆疑问中飞速过去了,但手中的工作还远远未达到自己所期望的要求进度。由于上午已经进行了分工,其他组员是没有理由帮你的,所以下午3节课,几乎都在看资料,眼睛看到生疼,十分枯燥,也很累,但是看到开始有点进步了,虽然只是填了一张基本情况表,但看到成果,感觉很充实!

审计实习报告范文2

专业实习是我们完成专业基础课和专业课程的学习之后,综合运用知识的重要的实习性教学环节,是本专业必修的实习课程,在实习教学体系中占有重要地位.通过专业实习使自己在实习中验证,巩固和深化已学的专业理论知识,通过知识的运用加深对相关课程理论与方法的理解与掌握.加强对企业及其管理业务的了解,认识的基础上,将学到的知识与

实际相结合,使学生运用已学的专业理论知识,对实习单位的各项业务进行初步分析,善于观察和分析对比,找到其合理和不足之处,灵活运用所学专业知识,在实习中发现并提炼问题,提出解决问题的思路和方法,提高分析问题及解决问题的能力.

二,实习任务

本次实习我到的实习单位是河南省xxx县审计局,实习的主要任务如下:

1.调查xxx县审计局目前的审计事务的操作流程.

2.研究现行信息化系统对业务进程所起的作用.

3.分析xxx审计局信息化的经验及出现的问题.

三,实习内容

1.实习背我国现存的审计软件概括起来,主要有以下几类:

①审计法规管理系统.

②审计抽样软件.

③表格法审计软件,该类软件能完成审计表格及有关参数的增,删,改维护,能输入审计表格中要抄录的数据,能计算并填入审计表格中由计算得到的数据,能按预定的格式打印输出审计表格.

④基建工程预决算审计软件.

⑤工具箱式通用审计软件,如由北京通审软件公司开发的XX通审软件.

⑥工具箱式通用审计软件,该类程序是为了完成某些特定的审计任务.例如,公路费审计程序,工会经费审计程序,材料成本差异审计程序等.

从以上种类的覆盖度可以看出,我国的审计软件已经有了一定的基础,审计署也已经高度重视计算机审计和审计信息化,制定出了相应的计划.并正在积极的推行现有审计软件的应用推广.但是我国现有的审计软件大都处于满足穿过计算机审计的阶段.还没有适用于网络审计的审计软件.即使是这样,象xxx审计局这样的基层单位仍没有实力购买使用单机版的,这样只是单机的电子化应用不可能将信息化的好处完全带到审计中.现状急待改进.

3.审计人员

审计署提出信息化建设总体目标和构想中指出全国审计系统已有3万多人具备计算机初级水平,占审计人员的25;在审计业务,公文管理,办公自动化方面运用计算机的水平都有较大提高.计划加强计算机审计队伍建设.全国培训800名审计信息化骨干,提高他们在审计工作中解决实际问题的能力,推动计算机审计的广泛运用;重点培养200名审计信息化专家,进行it审计师专家水平培训.

但是在注册会计师的行业,由于我国cpa的市场化建设及推行较晚,现行的cpa的素质较低.同时在cpa的考试中也没有计算机方面的要求,因此绝大多数的cpa运用计算机的水平很低.cpa的审计工作仍然是传统的手工审计.计算机仅仅用作文字处理或者基本不用.河南省xxx县审计局共有4名注册审计师,并且年纪相对交大,都已经习惯了手工审计的步骤,很难使他们接受新的计算机的审计流程.其他审计人员有的计算机基础较好,能够熟练操作计算机,但是很难把审计业务和计算机信息化结合起来进行.

因此,我国政府审计的计算机审计的水平高于cpa的计算机审计的水平.政府审计虽然已经在一定程度进入了穿过计算机审计的阶段,但是仍然处于其初级阶段.而cpa的计算机水平仅仅处于绕过计算机审计的阶段,仅仅运用计算机进行文字处理,穿过计算机审计的阶段还没有开始,最多有极少数的cpa进入了穿过计算机审计的阶段

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四,实习体会

引用国务院信息化工作办公室副主任杨学山说过的一句话,十五个字:起步晚,基础弱,资金少,应用难,见效快.

首先是起步晚.国家审计署计算机应用是从八十年代后期开始的,到XX年南京计算机审计展示会上才只有18个参展单位,象xxx县这种经济欠发达县审计信息化的应用范围就更小了.第二是基础弱.因为搞信息化,计算机应用要有好的审计工作者,包括审计专业人员和it人员,这方面xxx县审计局基础比较薄弱;有的工组人员甚至连熟练使用计算机进行基本操作也达不到由于起步晚,投入少,网络,计算机设备在起步的时候基础也比较弱.网络环境较差.三是资金少.今年上半年,局里的负责信息工组的人员想购买一套新的审计软件,需要5000块资金,但最终因为没有批准而流产,这正说明了基层单位资金缺乏的程度.四是应用难.审计相对其他部门工作来说,其计算机应用难度比较大.被审计对象都是开放的,无论是金融机构还是财政部门或者大中型国有企业或小型企业都有各自的制度,要在这样的基础上进行审计的难度比较大.另外被审计对象的系统与审计单位系统主体之间存在一定的矛盾,增加了技术上的难度.而且从技术上看,审计单位要在人家的基础上进行工作的技术难度大大增加.特别是在被审单位本身的信息化称度较低的情况下,应用就更加困难了.第五是见效快.虽然审计信息化起步晚,但是我在实习单位见到仅有的2个审计和网络财务软件的使用还是给工作带来了很大的效率的提高,受到大大多数员工的肯定,效果显着.总之,xxx县审计局的审计信息化任重而道远.

21世纪是信息技术的时代.随着生产的自动化,贸易中的电子商务的普及,网络财务软件的广泛使用,以及支付手段的多样化,审计信息化将是21世纪必然趋势.但是我国现今的基层审计单位的信息化现状是什么样的呢我国基层审计信息化的现状,审计人员;软件条件以及硬件条件如何在信息化的过程中有什么样的经验和教训呢带着这个问题,我联系了河南省xxx县省审计局,并在那进行了我的专业实习.

本文所探讨的审计信息化是指,被审计对象进行财务工作和经营时,审计人员为了实现其审计目的,收集必要的审计证据,采取必要的审计程序,对企业的运营的合规性以及利用计算机以及网络生成的财务信息进行审计的工作.

审计实习报告范文3

实习单位:朔州诚信会计师事务所有限公司

实习岗位:审计员

实习目的:会计专业作为应用性很强的一门学科、一项重要的经济管理工作,是加强经济管理,提高经济效益的重要手段,经济管理离不开会计,经济越发展会计工作就显得越重要。在进行了四年的大学学习生活之后,通过对《会计学原理》、《中级财务会计》、《高级财务会计》、《管理会计》、《成本会计》及《会计理论》的学习,可以说对所有有关会计的专业基础知识、基本理论、基本方法和结构体系,我都基本掌握了,为了将这些理论性极强的东西搬上实际上应用,我希望通过实习,在实践中锻炼自己、检验自己、吸收知识、弥补不足。真正的了解什么是现型社会所需要的财会人员,我需要实习。理论结合实践,在实践中了解社会、在实践中巩固知识;开阔视野、增长见识,我希望通过实习,在实践中锻炼自己、检验自己、吸收知识、弥补不足。充分了解什么是现型社会所需要的财会人员,为日后的工作打下良好的基础。

一、公司概况:朔州诚信会计师事务所,是原隶属于朔州市国家税务局的会计师事务所,XX年6月份改制成为朔州诚信会计师事务所有限公司。公司住址位于朔州市建设局招待所一楼,现有执业注册会计师17名,是朔州地区会计师事务所行业中注册会计师人数最多的一家会计师事务所,另有助理专业人员16名,从业人员共计36名,而且文化程度在大专以上学历者占80%,组建成一支既有专业理论知识,又有丰富实践经验的专业人才队伍。成为朔州地区在经营规模、人才实力、业务质量等方面都具有较强实力和优势的会计师事务所,在职业道德、执业质量、业务培训和后续教育等方面,该所专业人员每年都要不定期地参加省注册会计师协会和国家会计学院的专题培训,更新知识,提高素质。全面承揽国内各种法定业务。在承办业务时严格遵守国家法律、法规和行业法规制度,始终坚持独立、客观、公正和实事求是的原则,切实维护当事人的合法权益,保守商业密秘,获得了很多企业的一致赞扬。在历年的上级行业主管部门的检查考评中,多次受到上级部门的表扬,并被评为先进单位。从未因执业质量和执业道德受到任何处分和处罚。经营范围主要有:审验企业会计报表,出具审计报表;验证企业资本、出具验资报告;办理企业合并、分立、清算事宜中的审计业务,出具有关报告;办理法律法规的其他业务,出具相应的审计报告;担任企业财会顾问;提供会计及其它管理咨询,业务涉及到了社会中的各个行业和领域。

二.实习内容

(一)组织机构和人员设置:

1.组织机构设置:

2.人员设置:

(1)主任会计师(所长):全面负责事务所各项工作。

(2)业务一部经理:负责执行上级分派的工作和受托审计业务;协助撰写审计业务综合分析评价报告。审议是否接受委托审计业务,确认企业有接受服务的意愿,寻找到业务来源后,应积极到企业收集相关信息和记录企业的要求,汇总成一份资料,提交主任会计师,并共同审议是否接受委托;审批通过的,主任会计师对该项业务负有最终责任,并报办公室记录;审批未能通过的,业务一部经理应说明理由,并口头或书面通知委托方。接受受托审计相关的业务后,成立专项小组,确定工作流程和运用方法、审计程序等,每次完成业务后撰写工作分析和评价报告。

(3)业务二部经理:负责执行上级分派的工作和审计业务外的其它受托业务,主要负责事务所受托记账和相关咨询等工作。接受业务后确定工作方案,每次完成业务后撰写工作分析和评价报告。

(4)财务部主管:记账并期末编制报表,审批各项目资金支出、费用报销等,如金额较大,提交上级领导审批;其他工作安排。

(5)办公室主任:主要负责直接管理事务所内务,承担本所的宣传、外联、资料管理和公司博客资料的上传、文员工作、员工考勤、员工工作记录、绩效考核等日常工作;兼任财务部出纳,严格按照相关法律法规执行出纳工作,不得“坐支”,未经批准或出示领导批条,不得随意挪用资金;并做好相关记录工作。

(6)其他安排:由于人员有限,会根据实际工作情况临时作出岗位调整或额外工作安排,务必随时接受安排。

(二)实习的具体内容:

实习期间按照要求和公司安排主要完成以下实习任务:

1.了解会计师事物所机构组成,人员职责,基本业务。

2.分别熟悉事物所各种会计业务的操作流程,行业规范,协助会计师完成各类业务。

审计实习报告范文4

(一)历史争论--作用相斥

随着人们对报表审计中内部控制重要性认识的深入,是否对内部控制进行单独评价及报告作为难题之一逐渐浮出水面,成为历史上一个长期争论的话题。而争论的焦点在于:内部控制评价报告的出具是否会降低财务报表审计意见的可靠性。

20世纪60年代末70年代初,财务领域的学术研究逐渐表明,年度财务报告仅仅是债务和权益投资的部分决策因素,而对季度会计信息、内部控制、预测等信息的需求变得越来越明显。于是,一些学者开始对注册会计师进入这些领域的可能性进行了论证,并使用问卷表来调查公众对此的态度。美国注册会计师协会1953年出版的《注册会计师手册》中指出一个新建议:在审计人员对财务报表的意见中,应包括一个对内部控制系统的意见。这个建议立刻引起了激烈的争论,许多人指出:对内部控制在审计报告中加以评价容易引起误解。到60年代,《审计程序说明书第49号--内部控制的报告》把在审计报告中是否需要说明内部控制的权利交给了管理当局。这使得如何表达对内部控制评价的意见成为一个更加突出的问题。1980年,《审计准则公告第30号--内部会计控制的报告》取代了《审计程序说明书第49号》,《审计准则公告第30号》指出:为了表示意见,注册会计师必须审查企业的内部控制结构。审查既可独立进行,也可以结合财务报表审计进行。可见,《审计准则公告第30号》采取了折中的态度,这也反映了实际中人们对内部控制评价报告与审计报告二者关系认识上的转变。

在长期争论的基础上,人们对内部控制评价报告与审计报告关系的认识于80年代末出现了明显的改变。1988年,《审计准则公告第60号--审计师对关注到的内部控制结构相关事项的传达》被颁布,该公告要求注册会计师就控制环境、会计制度和控制程序中存在的重大不足与审计委员会进行沟通。1991年,美国国会通过了联邦储蓄保险公司利用法(FDICIA),这一法律规定:所有资产大于20亿美元的金融机构管理当局必须对内部控制结构的有效性进行声明。该法同时还要求注册会计师对管理当局的报告进行验证。21993年,美国注册会计师协会颁布了《鉴证业务准则第2号--财务报告外的内部控制报告》及《鉴证业务准则第3号--符合性鉴证》,对企业提供内部控制报告及注册会计师对其进行评价并表示意见提供指导。至此,对于内部控制评价与审计报告关系的争论,以职业规范对内部控制评价及出具报告的认可而告一段落。实践的发展告诉我们,对内部控制进行单独评价及报告是因实际需要而产生的,是经济健康发展的保证,是独立审计勇于承担社会责任的正确选择。

(二)关系重新定位

虽然对于内部控制报告与审计报告关系的争论已告一段落,但留给我们思考的问题是:内部控制评价报告是否影响审计报告的意见类型?内部控制评价报告到底是提高了还是降低了审计报告的可靠性?二者的关系到底如何定位?笔者试在以上论述的基础上,就此谈一些自己的看法。

审计报告是注册会计师对于被审计企业年度会计报表发表审计意见的书面文件。这里的会计报表是企业管理当局向外部信息使用者提供关于企业财务状况、经营成果及现金流量等方面财务信息的手段。一般地,会计报表主要包括资产负债表、损益表、现金流量表等。注册会计师以第三者身份,对企业管理当局提供的会计报表进行检查,并对会计报表的合法性、公允性和一贯性作出独立鉴证,以增加会计报表的可信性。内部控制评价报告是注册会计师对被评价企业内部控制声明书发表评价意见的书面文件。内部控制声明书是企业管理当局对其内部控制的完整性、合理性及有效性所作的认定。按最新理念,企业内部控制包括控制环境、风险评估、控制活动、信息与沟通、监督五个要素。注册会计师接受委托对企业管理当局的内部控制声明书中的认定进行鉴证,并发表评价意见,以满足利害关系人对此信息的需求。

从审计报告与内部控制评价报告的比较中可以看到:审计报告仅仅是对企业年度财务信息的鉴证,范围较小,时效也较短;内部控制评价报告则是对"……为营运的效率效果、财务报告的可靠性、相关法令的遵循性等目标的实现而提供合理保证的过程"的鉴证,范围广,时效也较长。正因为内部控制评价报告是对过程的鉴证,审计报告是对结果的鉴证,所以内部控制评价报告会对注册会计师的报表审计产生影响。但这种影响不是表面上的意见类型的一一对应,即不能认为内部控制评价报告是无保留意见,则审计报告也应该是无保留意见。由于内部控制评价报告是对整个企业范围内的、某个时期的全过程的鉴证,而审计报告是当年度财务信息发表意见,故财务报表所示财务信息的合法、公允及会计处理方法保持一贯并不表示整个企业的内部控制也一定是完整、合理及有效的;同理,企业内部控制在完整性、合理性或有效性上存在重大缺失也不等于企业当年财务报表一定不可信。内部控制对财务信息的影响是一种基础性的影响,是一种过程性的影响。

审计报告侧重于向信息使用者传递被审计企业当年度或短期的信息,而内部控制评价报告反映出来的信息则具有长期性的影响。内部控制评价报告是对审计报告所提供信息不足的补充,二者相辅相成,共同为增加证券市场及其他资本市场的透明度及有效性发挥着应有的作用。

参考文献: 

1. [美]道格拉斯·R·卡迈克尔 约翰·J·威林翰 卡罗·A·沙勒 著 刘明辉 胡英坤 主译. 《审计概念与方法--现行理论与实务指南》. 东北财经大学出版社. 1999

2. 中国注册会计师协会 香港会计师公会. 《高级审计实务》. 经济科学出版社. 1998

3. 超越企管出版研发组. 《内部控制制度作业要点及实务--公开发行公司自我评估规范》.超越企管顾问股份有限公司新闻局局版. 1999

4. 文硕. 《世界审计史》. 企业管理出版社. 1996. 第二版

5. 王光远等编著. 《会计大典第十卷--审计学》. 中国财政经济出版社. 1999

6. 阎金锷 陈关亭. 《内部控制评价应用》. 中国人民大学出版社. 1998

审计实习报告范文5

关键词:市场经济,市场,微观经济主体,实习,规划

一,实习目的:通过对市场和工厂的参观与调查,让我们这些大一的经济类专业的学生对市场与微观经济主体有一个初步的认知,也让我们在这次实习中可以使我们学到的知识与实际相联系从而得到运用。

三,实习地点:迎新街,得一文化广场,花鸟鱼市场,恒源钢材市场,红星·美凯龙家居市场,新华化工场

四, 2.花鸟鱼市场

花鸟鱼市场应该算的上是一个新兴的市场,是随着我国社会主义市场经济不断发展,人们生活水平不断提高,对生活质量有了更高的要求而慢慢兴起的一个市场。据我对市场工作人员的询问,了解到,该市场的主要消费者是一些企事业单位和一些中高等收入者。我们通过调查发现,其实该市场的价格范围还是比较大的,便宜的只要几块钱,而贵的则高达上万元。像我们有几个同学就花了5元钱购买了一盆含羞草,花30元购买了一对小松鼠,这个价格还是在我们大学生的承受范围之内的。

3.恒源钢材市场

钢材市场是我们参观的各个市场中唯一一个生产资料市场,也是与我们专业最能联系上的一个市场吧。近些年,国内国际上对钢材价格的问题引发过不少争议,像08年以前,房地产业开始快速的发展,国际上铁矿石价格疯涨,造成钢材的价格急剧上升,那几年,做钢材生意的人都赚了不少钱。08年,受到国际金融危机的影响,钢材市场的价格一度下降了不少。09年以后,随着经济形势的复苏,钢材的价格也开始呈上升趋势。我们也向钢材市场的员工了解了一下目前的钢材的价格情况,目前全国二级螺纹钢均价为3831元每吨,全国热轧卷板平均价格为3909元。前段时间看到一则新闻,说武钢收购了澳大利亚的一处铁矿石,我觉得我们国内的钢厂就应该多走出去,多掌握原材料,那样在国际定价时,我们就多了一点话语权,而不像现在这样在国际钢材价格的定价权上我国没有多少话语权。

4.红星·美凯龙家居市场

红星·美凯龙家居市场是我们参观的最后一个市场,这个家居市场是一个面向中高档消费人群的高级家居市场,一进家居市场的大门就能感受到那种高贵典雅的感觉。这个家居市场一共有3层,布局十分合理,使得消费者可以有目的的进行选购。我们主要调查了一下各类家具的价格,发现这里经营的大多是外国的知名品牌,也有少数国内的高档品牌,当然家具也是价格不菲,大多数家具是以万元为单位的。随着人们收入水平的不断提高,这种面向中高档消费人群的市场会不断涌现出来。

(二)我们身边的微观经济主体

我们的市场是由一个个微不足道的微观经济主体组成的,微观经济主体主要包括个人,企业,政府三个方面,这次实习我们参观了位于迎新街的新华化工厂就是一个微观经济主体,通过这次参观实习,我们也了解到了一个企业,一个工厂是如何构成,如何运转的。

据我调查了解,新华化工厂跟我们学校是有很大的渊源的,以前我们学校和新华化工厂是同属于兵工部系统,外界对我们学校的俗称就是“化校”,我们学校是后来才转划到教育部的,不过我们学校和新华化工厂还是一直保持着很好的关系。工厂的负责人给我们介绍,新华化工厂是一个国有独资的兵工厂,对外名称是新华化工厂,而内部代码是908厂,该厂主要是向部队生产提供个体防护工具(如防毒面具)和集体防护面具(如过滤器),当然也会有一小部分用于对外销售,如网吧,银行等公共场所都需要过滤器,工厂的产品还会对外出口,主要出口对象是那些亚非拉发展中国家。我还向负责人了解到,全国部队所需要的防护产品基本上是由这个新华化工厂和湖北宜昌的809厂共同供给,做为一个在太原读书的湖北人,我也感到一丝自豪。后来我又向工厂的负责人询问该工厂的生产模式是什么样的,他告诉我说:“由于身份的特殊(国有兵工厂),所以一般都是国家先下指标,我们再集中力量进行生产,一般都会超额完成任务。”这也许就是计划体制下的优越x##b。当有同学问起该厂的规模时,负责人非常自豪的告诉我们,这个产从配件生产到成品组装都有自己的分厂,就是说,从配件生产到成品的出厂都是在这么一个厂里完成的,不需要外界的任何帮助。

在参观工厂时,我还发现了一个非常欣喜的现象,都说我们中国缺少自主研发的拥有核心技术的机器设备,但在这个厂里,我见到的都是映着中文的国产机器,整个工厂工人并不是很多,靠的就是这些机器的自动化生产。

这次的工厂之行给我的收获实在是太多……

五,心得总结

审计实习报告范文6

【摘要】

目的:观察白蒺藜皂苷(gross saponins from tribulus terrestris L,GSTT)及灯盏细辛注射液[Erigeron Breviscapus(Vant.)HandMazz,EBHM]对慢性高眼压模型兔视网膜神经节细胞(retinal ganglion cells,RGCs)的保护作用。方法:健康新西兰白兔24只,随机分为对照组、高眼压组、EBHM治疗组和GSTT治疗组,高眼压组和EBHM治疗组及GSTT治疗组的兔眼前房内注射20g/L甲基纤维素制成慢性高眼压模型,EBHM治疗组的兔每日耳缘ivEBHM注射液4.5mg/kg,GSTT治疗组的兔每日耳缘iv GSTT注射液5mg/kg,高眼压持续4wk时,处死实验兔,摘取眼球,做RGCs电镜检查。结果:造模后各组眼压均升高,电镜下高眼压组相对于GSTT治疗组及EBHM注射液治疗组,RGCs超微结构有明显损伤。结论:GSTT及EBHM注射液对慢性高眼压兔RGCs均具有保护作用。

【关键词】 慢性高眼压;兔;灯盏细辛注射液;白蒺藜皂苷;视网膜神经节细胞;超微结构

Abstract AIM:To study the protective effect of gross saponins from tribulus terrestris L(GSTT) and Erigeron Breviscapus(Vant.)HandMazz(EBHM) on retinal ganglion cells(RGCs) in rabbits of chronic high intraocular pressure (HIOP)mode 1.METHODS: Twentyfour rabbits were randomly pided into control group,HIOP group,EBHM treated group,GSTT treated group.The HIOP models were made by injected 20g/L methylcellulose into anterior chamber in rabbits of HIOP group and two treated groups. The rabbits in two treated groups were treated with EBHM and GSTT extract every day,4.5mg/kg and 5mg/kg respectively.When the HIOP lasted for four weeks,killing rabbits,removal of the eye, electron microscopy of RGCs were done.RESULTS: After modeling in each group were elevated intraocular pressure, ultrastructure of RGCs have obvious damage under electron microscope for HIOP group in relation to the two treatment groups.CONCLUSION: GSTT and EBHM have a protective effect on RGCs in rabbits with chronic high intraocular pressure.

KEYWORDS: chronic high intraocular pressure;rabbit;Erigeron Breviscapus(Vant.)HandMazz;gross saponins from tribulus terrestris L;retinal ganglion cell;ultrastructure

0 引言

白蒺藜(Tribulus terrestris L)为蒺藜科蒺藜属植物,别名刺蒺藜、硬蒺藜,其果实、花及根在我国有悠久的用药历史。其果实始载于《神农本草经》,列为上品。具平肝解郁,活血祛风,明目,止痒的功效,为历版药典所收载。蒺藜的花、苗、根,也有药用记载[1]。蒺藜化学成分的研究始于20世纪60年代,迄今已证实蒺藜主要含有皂苷类、黄酮类、生物碱、多糖类等化合物,其它尚含甾醇类、氨基酸类、萜类、脂肪酸、无机盐等成分[2]。蒺藜皂苷(gross saponins from tribulus terrestris L,GSTT)是从白蒺藜地上全草中提制的有效成分之一。现已证实,GSTT具有降低血压、降血脂、舒张血管、抗血小板聚集、抗缺氧和保护离体心脏缺氧再给氧损伤等作用。青光眼系多种因素引起的以进行性视神经损害为特征的主要致盲眼病之一。目前对青光眼视神经损害的确切发病机制不十分清楚,但无论何种机制,其最终的结局均是视网膜神经节细胞(retinal ganglion cells,RGCs)的凋亡,因此防止或延迟对RGCs的损害,有效保护视神经,已成为21世纪青光眼研究的方向和热点。我们将GSTT用于慢性高眼压兔眼模型,通过观察RGCs在电子显微镜下的改变,探讨GSTT对慢性高眼压兔RGCs的保护作用,以期为青光眼RGCs的保护提供新药。

1 材料和方法

1.1 材料

体质量1.8~2.5kg健康新西兰白兔24只,10~12月龄,雌雄各半,由广东省医学动物实验中心提供。用裂隙灯显微镜、直接眼底镜检查眼前节及眼底无明显异常:外眼正常,结膜无充血,角膜清亮,房水清亮,虹膜淡粉色,放射状纹理清晰可见,瞳孔圆,晶状体正位,后节();以10g/L丁卡因滴眼液表面麻醉后,Schioetz眼压计连续测量眼压3d,1次/d,眼压均

1.2 方法

将24只健康新西兰白兔随机分为正常对照组(A组),高眼压模型空白组(B组)和高眼压模型EBHM治疗组(C组),高眼压模型GSTT治疗组(D组)。每组6兔12眼。选用对眼压无明显影响的30g/L戊巴比妥钠1mL/kg肌注麻醉,眼部表面麻醉后,9∶00位沿角巩膜缘内1mm抽出前房房水0.2mL后,高眼压模型眼等量注入20g/L甲基纤维素,兔眼注射20g/L甲基纤维素后,外眼正常,睑结膜轻中度充血,球结膜混合充血,部分结膜血管充血、迂曲、扩张,角膜轻度水肿,雾化,前房加深,房水基本清亮,虹膜色淡,纹理不清,阶段性虹膜萎缩,瞳孔扩大,晶状体在位。如在实验周期中发现眼压有所下降,即予以模型眼前房补注甲基纤维素0.1mL,使其观察期内眼压均维持在32~39mmHg[3]。维持高眼压状态达4wk。对照眼注入生理盐水,均在30min后测量眼压(表1)。正常对照组正常喂养,不做任何处理。高眼压模型组正常喂养,制成高眼压模型。EBHM治疗组正常喂养,制成高眼压模型,将给药组动物称质量,每日耳缘静脉给药4.5mg/kg(约等于成人用量),1次/d。GSTT治疗组正常喂养,制成高眼压模型,将给药组动物称质量,GSTT粉剂溶于生理盐水中,每日耳缘静脉给药5mg/kg(约等于成人用量),1次/d,连续用药4wk。所有实验兔于观察28d后处死。眼球12∶00位缝线标记后,立即完整摘除(包括球后视神经2mm),沿标记缝线视神经连线对剖眼球,去除角膜、虹膜、晶状体及玻璃体,将剩余眼球壁用25g/L戊二醛和10g/L锇酸双固定,用于透射电镜观察[4]。采用Schioetz眼压计,分别于造模前3d,造模后30min,造模后每日测量眼压并记录,共计1mo[5]。测前校正眼压计,以避免人为误差。将所取标本用25g/L戊二醛固定36h后,修整成1mm×1mm×1mm的组织块,10g/L锇酸后固定2h。平衡盐溶液漂洗2次,乙醇梯度脱水后,再经梯度丙酮脱水,环氧树脂包埋。最后行透射电镜观察,以了解视网膜超微结构改变。表1各组造模前后眼压比较(略)

统计学分析:使用SPSS 13.0软件包统计分析,实验数据以均数±标准差(±s)表示。

2 结果

透射电镜下超微结构单纯正常眼压组RGC胞质内散在大量细胞器,以线粒体和核糖体为主,散在粗面内质网,线粒体嵴完好(图1A)。高眼压组核周细胞器数量减少,胞质水肿,细胞界限不清晰,线粒体肿胀,空泡变性,线粒体膜崩解,粗面内质网和核糖体消失(图1B)。EBHM治疗组及GSTT治疗组,胞质内细胞器数量略为减少,散在线粒体,粗面内质网和核糖体,部分线粒体肿胀、空泡变性,部分线粒体嵴完好(图1C,D)。

3 讨论

青光眼是一组以眼压升高为主证并视神经凹陷性萎缩和视野缺损为共同特征的眼病。在中医属“五风内障”范畴,是由于风火上攻头目,或气郁生火上逆及痰火上攻造成阴阳偏盛、气机失调等诸种原因,导致气血失和、经脉不利,目中玄府闭塞,气滞血瘀,神水瘀积而发病[6]。中医药治疗青光眼主要以清火、解郁、活血、利水、祛风,开窍,后期以滋补肝肾、舒肝解郁等法为主。与现代医学认为的由于机械性损伤、缺血性损伤其导致的氧化损伤等因素使视网膜RGC不断死亡及神神经轴突不断减少基本一致。蒺藜,为蒺藜科(zygophylaceae)蒺藜属(tribulus)植物蒺藜(tribulus terrestris L)的干燥成熟果实,性微温,味辛苦,有小毒,有平肝解郁、活血祛风、明目、止痒的功效,用于治疗头痛眩晕、胸胁胀痛、乳闭乳痈、目赤翳障、风疹瘙痒等症。《本经》:“蒺藜味苦温,久服明目,轻身”。叶天士等注释:“刺蒺藜久服而肝木攸畅,肝开窍于目,故目明”。叶长华等[7]发现,刺蒺藜单体成分白蒺藜醇甙(tribulus fruit alcohol glycoside,TFAG)具有促进体外培养鼠视RGC存活及具有类似神经营养因子的作用。灯盏细辛,辛温解表,可祛风除湿止痛、活血化瘀、改善眼部血流。有效成分吡喃酮类物质有增加血流量、降低血管阻力、对抗二磷原苷引起的血小板聚集等作用。现代医学认为这类物质对青光眼视神经损伤有明显保护作用[8]。朱益华[9]报告,EBHM注射液具有改善大鼠实验性高眼压后视神经轴浆运输的作用。

青光眼是一种以视神经损害为特征的致盲眼病,至今有关青光眼的发生机制、病理变化、发展过程以及有效的治疗手段等许多问题仍在研究探讨之中,因此对青光眼的研究需进行广泛的动物实验。慢性高眼压模型相对于急性高眼压模型来说,对青光眼的发病机制、病理变化以及治疗的研究更有意义。甲基纤维素兔眼前房内注入是目前普遍使用及公认的引起兔慢性高眼压的有效方法。甲基纤维素法是利用不溶的甲基纤维素沉积在前房,阻塞房水流出通道造成高眼压。国内1994年贾莉君等[10]首先报道前房内连续注入10g/L甲基纤维素建立兔眼慢性高眼压模型。

本实验中高眼压组和EBHM治疗组及GSTT治疗组在注入20g/L甲基纤维素后后,约30min后眼压升高超过30mmHg,用单因素方差分析比较了三组动物4wk内的眼压值,各组间没有显著性差异,说明EBHM及GSTT没有降低眼压的作用。高眼压持续4wk后,高眼压组核周细胞器数量减少,胞质水肿,细胞界限不清晰,线粒体肿胀,空泡变性,线粒体膜崩解,粗面内质网和核糖体消失。EBHM治疗组及GSTT治疗组,胞质内细胞器数量略为减少,散在线粒体,粗面内质网和核糖体,部分线粒体肿胀、空泡变性,部分线粒体嵴完好。本结果显示,GSTT及EBHM对慢性高眼压兔RGCs均具有保护作用。我们为青光眼RGCs的保护提供一种新的中药,以往的实验研究中对活血化瘀类中药研究较多,我们从祛风药里寻找对视网膜RGC有保护作用的中药,具有较好的临床开发和应用前景。但是本实验样本量不足,观察时间较短,其长期的疗效仍不能做出肯定判断,其给药最佳时间、最佳剂量,是否需增加给药次数及最佳给药间隔时间等,都有待于进一步研究。

参考文献

1 张健,李俊,莫琪,等.蒺藜提取物的药理研究进展.中医药研究1998;14(6):5657

2 钱本余.蒺藜研究概述.中成药 1990;12(1):34

3 宋宗明,崔守信,张德秀.川芎嗪对兔眼高压下视网膜神经节细胞和双极细胞损伤的保护作用.第四军医大学学报 2001;22(6):514517

4 李志勇,张果忠,张广庆.针刺对家兔慢性高眼压及视网膜超微结构的影响.中国中医眼科杂志 2002;8(12):135138

5 王强,魏厚仁,樊郑军.家兔眼压测量的标定问题.眼科研究 1994;12(4):224226

6 彭清华,李建超.青光安治疗抗青光眼术后患者临床研究.湖南中医学院学报 2004;24(2):3639

7 叶长华,蒋幼芹.白蒺藜醇甙对混合培养鼠视网膜神经节细胞的作用.视光学杂志 2001;3(3):148151

8 蒋幼芹.眼压已控制的晚期青光眼治疗的探讨.眼科研究 1991;9(4):229232