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小组鉴定范文1
大学生毕业实习小组鉴定评语一：该生综合素质较好，爱岗敬业，工作能力强，有一定的工作组织能力，能和同事友好相处，短短实习工作期间，是个出色的教学能手，相信会在今后的工作中，取的出色的成绩。
二：该学生实习期间工作认真，勤奋好学，踏实肯干，在工作中遇到不懂的地方，能够虚心向富有经验的前辈请教，善于思考，能够举一反三。对于别人提出的工作建议，可以虚心听龋在时间紧迫的情况下，加时加班完成任务。能够将在学校所学的知识灵活应用到具体的工作中去，保质保量完成工作任务。同时，该学生严格遵守我公司的各项规章制度，实习期间，未曾出现过无故缺勤，迟到早退现象，并能与公司同事和睦相处，与其一同工作的员工都对该学生的表现予以肯定。
三：该生综合素质较好，爱岗敬业，工作能力强，有一定的工作组织能力，能和同事友好相处，短短实习工作期间，是个出色的教学能手，相信会在今后的工作中，取的出色的成绩。
大学生毕业实习小组鉴定意见一：该学生实习期间工作认真，勤奋好学，踏实肯干，在工作中遇到不懂的地方，能够虚心向富有经验的前辈请教，善于思考，能够举一反三。对于别人提出的工作建议，可以虚心听龋在时间紧迫的情况下，加时加班完成任务。能够将在学校所学的知识灵活应用到具体的工作中去，保质保量完成工作任务。同时，该学生严格遵守我公司的各项规章制度，实习期间，未曾出现过无故缺勤，迟到早退现象，并能与公司同事和睦相处，与其一同工作的员工都对该学生的表现予以肯定。
二：热情、主动、积极。对事物保持高度的好奇与兴趣，虚心求教并勇於建言。随时调整自己，力求成长、尽善。积极争取已完成实习规定的任务，实习报告符合标准，达到实习目的。
三：勤奋好学，遵守厂规厂纪，带来先进管理理念。工作能力及专长 在不断的社会实践中，自己以认真敬业，责任心强，工作效率高，执行公司指令坚决得到了各实习单位的认可。
大学生毕业实习小组鉴定评价一：该学生实习期间工作认真，勤奋好学，踏实肯干，虚心好学。善于思考，能够举一反三。。能够将在学校所学的知识灵活应用到具体的工作中去，保质保量完成工作任务。同时，该学生严格遵守我公司的各项规章制度，实习期间，未曾出现过无故缺勤，迟到早退现象，并能与公司同事和睦相处，与其一同工作的员工都对该学生的表现予以肯定。
小组鉴定范文2
随着市场经济在农村的不断深入发展,使得农村稳定的社会局面对农村经济发展的影响显得尤为重要。然而，当前农村的社会治安综合治理工作，在一定程度上，还不能很好的为农村经济的发展提供有力的后方稳定保障。农村经济及社会各项事业的发展受到了一些制约,针对这一问题，和静县正在深入讨论如何创建平安乡镇,为打造我镇的平安局面，现就结合实际谈谈如何创建平安村、组。
一、转变工作思维创新工作理念
村级组织是党和国家的各项“三农”政策和法规、法律的具体落实层,同时在维护社会稳定工作中起看非常关键的作用,如果村、组稳定工作做的不好，那么就谈为上全镇的稳定。我想我镇村两委班子一定要改变以往常规的工作模式,以更加长远、有效、实际的方法来解决发展中的问题。切实做好两个转变,即把被动的执行转变为主动的服务；空洞的文字转变为扎实的成效。把一个管辖区域在一定时间内发案数量的多少，作为衡量该村在综合治理工作方面的重要指标，通过对责任状的学习，使各村正确、深刻的认识到综合治理工作“一票否决”的重要性和严肃性。为激发各村领导班子对综合治理工作重视。我们有必要把综合治理工作做得好坏作为提拔或继续录用村干部的一个重要指标。
二、增强责任意识控制案件攀升
为有效的推进社会治安综合治理工作,我镇每年都要和各村、各单位主要负责人签定了《社会治安综合治理责任书》使责任明确到人.我想从今年开始,我们能否结合创建平安村组,由镇派出所根据每个季度的发展情况对各村的刑事案件及治安案件作一个量化标准,使各村的发案率在一定的时期内有一个度。这样更能明确职责,比如乌郎尕扎村20__年第一季度盗窃案件10起、纵火1起、抢劫1起等,镇综治委每季度在召开评审会之前就要求各村针对本季度易发案件做出相应应急措施,比如在这一季度重点加力巡逻力度,杜绝不法分子的盗窃动机。我想只要工作有侧重点,切实抓好主流犯罪侵向，我们本季度的综合治理工作就算成功了,当然在切实抓好主流犯罪活动的同时，也不能放松对其他作案动机的关注,这样才可以有效的遏制我镇案件的攀升趋势。
三、健全会议制度加强互通力度
镇综合治理委员会为有针对性地作好对全镇综合治理工作的部署和安排。能否建立周会、月会和季员制度。周会由镇综治办召急各村分管稳定工作的民兵连长参加,主要是反馈他们在本周内针对主流案件的排查和预防过程中有何进展，有何问题。之后由镇综治办整理汇报主管领导，由主管领导作出及时安排,综治办将安排传达至各村民兵连长。月会制度由镇主管综合治理工作的领导主持,派出所所长、各村党支部书记、村委会主任、民兵连长参加。派出所所长通报各村当月发案情况,首先由村两委班子向与会人员对发案原因进行分析,主要从主观方面谈,他们在工作中做到了什么程度。然后由派出所所长分析发案原因,最后由镇主管领导作出指示,对做得不好的村提出批评意见，同时要求限期整改。季会于每季度的第三个月召开,在季会上首先要完成第三个月的月会议程,然后由镇派出所对一个季度累计的发案情况与责任状对比，当场对各村的发案情况进行评审,这样有助于各村领导对本村的发案情况有一个清醒的认识,增强他们的责任意识及紧迫感,也有利于镇党委、政府年终对各村社会治安综合治理工作的考核。
四、加大宣传力度提高防范能力
综合治理工作是一个非常系统，而且面非常广的工作。其主要目的在于维护社会稳定,但单靠几个政法成员单位的力量是远远不够的,我们要调动全镇的农牧民群众自觉的参与到维护稳定、发展农村经济的工作中。只有这样那些不法分子才没有市场,就不敢那么名目张胆的侵害农牧民群众的生命财产安全。怎样才能提高农牧民群众的自我防范意识呢？我想最我效的办法就是宣传,在这方面，由于我镇的宣传工作近几年仍处于薄弱环节，所以在这一方面我们做的很不够。但在有限的宣传资源下，我认为从以下几方面做比较好：一是利用常规的宣传方法，比如在农牧民群众较为集中的场所办板报,张贴标语、治安常识等。把这一工作落实的情况做为年终综合治理检查的一方面,二是在以往对综全治理工作的宣传中，我们没有充分利用广播电视站的喉舌作用,在这一方面，我想结合我镇实际主要做好谈两点意见：一是开办以广播为主要媒体的《每日案例分析栏目》。二是不定期的播放以综合治理委员会牵头的《致农牧民群众的一封稳定信》。案例分析主要从本镇往年及近年发生的案例中挑取，时间放在每天下午8：00—8：30。体裁主要以每季度的主流案件为主，主要由镇派出所提供数量不限。《致农牧民群众的一封信》主要由我镇宗治办提供稿件，主要就是在一定时期内针对某个热点问题让农牧民朋友做好预防工作。对以上两个节目的播放都实行动态的播放方式。三是充分调动各中小学法制副校长的积极性，每周对五、六年级及初中生进行一次法制教育专题讲座，内容要结合我镇实际，主要以青少年犯罪，预防家庭盗窃案件等为主，这样可以有效的扩大宣传面，通 过学生回家以后与家长的交流，即可得到事半功倍的效果。但在宣传的同时一定要注意教案的正面作用。所讲的内容绝不能对学生幼小的心灵造成误导。每位法制副校长每周都要定期将教案交镇宗治办，由主管领导审核备案。
五、健全联动机制发挥网络作用
新的时期，对社会治安综合治理工作也提出了新的要求，尤其是在农村，因地域广、农牧民居住分散、文化素质相对较低、农牧民群众的法律意识淡薄。就以上一些制约因素就给我镇综合治理工作的进展带来了很大的难度。仅靠镇综治办、派出所、司法所、办等几个综治成员单位不可能做好此项工作。所以说，我们就要在农村建立一个有效的联动机制，我想主要从以下几个方面考虑：一是加强镇综治委与各成员单位就本部门工作范畴有针对性的签定责任状，明确各职能部门的职责。二是加大镇综治委对村级民兵连、治保会等治安组织的领导力度，同时加强与之联系和沟通的力度。三是切实发“十五户”联防的作用。这一点是非常关键的，在这一方面，要想让十五户长切实发挥作用，镇党委、政府能否给他们一些政策上的倾斜，比如优先考虑农业小额信贷、粮食补贴、粮食直补的发放等，从而调动他们的工作积极性。只要我们各成员单位齐心协力、上下联动、左右互动、各负其责，切实发挥治安网络作用,使我镇的社会治安综合治理工作取得更好的成绩。
六、强化联防队伍管理明确联防队员职责
小组鉴定范文3
实际上我们的学生小到自己的同桌，大至以后的工作环境，合作成员都难以随心更换。都必须更快的适应，很好的长时间的合作。我的固定小组合作模式就是全面考虑分组优劣因素，四个学生一组在课堂之外互帮互助，以团体的成绩为评价标准，小组长带头发挥作用，指导小组成员展开合作，发挥群体的积极功能，提高个体的学习动力和能力，达到完成学习任务的目的。对学生而言，合作意味着心态的开放，主体性的凸现，个性的张显，创造性的解放。固定小组合作学习不仅仅改变了学生在传统学习中的单维学习，丰富了学生学习知识的渠道。发挥了学生的主动性、创造性，更是培养了各个小组长的指导能力，各个组员之间的协调能力，适应能力和长期合作能力。让固定合作学习成为学生的第二课堂――延续合作学习。它不仅是一种学习活动方式，更是弥漫、充盈于学生之间的一种学习情境和精神氛围。并且一旦形成一种气候，将改变整个班级学习数学的氛围，减轻教师课后辅导学困生的负担，使教师可将更多的时间用在钻研教材，提高班级学习数学的层次上。
为此，我从学生的整个学习数学过程入手。进行了我的课堂之外固定四人小组合作模式的实践与反思。虽然我的有些做法是否合适还有待探讨，但此时勇于实践显得更为重要。
一、优化分组
合理分组之前我们首先要全面深入地了解每一个即将被分组的学生的差异，包括学生的知识基础和学习能力，学生的性格特征和主被动学数学等。包括与家长联系，与班主任探讨。如何更全面的考虑各个因素，优化四人组合，在我的头脑中逐步酝酿。
1.首先将班级学生按照知识基础掌握情况和能力强弱按1：2：1分成三个组。其中第一组为组长人选。基础知识掌握好，能力强，主动学习；第二组为互助组，第三组为学困组，基础知识掌握较差，能力弱，被动学习。其中第二组按主动被动学习分成两组。所有学生又按性格内外向分成两组。(发放调查问卷对学生性格进行测试及分类。见附表一)
2.初步将所有学生四人一组分成若干组。每一组配备一个甲组学生为组长。组长为师傅带一丙组学生为徒弟。另外两个都是乙组学生，互相督促互相追赶。以每次学习结果优先于另外一个为目标，谁优先这个阶段谁就是另外一个的师傅。每个组有两对，组长除了带徒弟还要管理好整个小组。每一对中一个主动学习一个被动学习，或两个都主动学习；每一对中一个性格外向一个性格内向，或两个都外向。
3.初步分组后，向所有学生说明：目前分组也许不如你意，但是，这对你来说是一次难得的锻炼与他人合作的机会。每个同学都要学会适应对方，适应整个小组这样一个环境。在这个环境中让自己的成绩有飞跃。如果确实有特殊原因没办法很好合作，个别考虑更换伙伴。一周后，所有组的成员固定，本学期内不再变更。二、互助方法：
a)在练习课和作业整理课上以四人分组排位置坐，便于练习时相互帮助。b)布置的课外探究活动，以四人分组为标准展开。组长分工要明确。c)遇到不懂的问题师傅要帮助解决，并负责同类型问题再次出题，看是否掌握。d)每周一次开小组学习会。每个同学说明自己本周学习情况，并由组长负责填写师徒结队情况并填写感想。e)当徒弟进步时要给予鼓励，当徒弟懒散时，学习放松时要给予严厉批评，并督促其改进，也可给其指定短期目标。当徒弟暂时学习上有情感障碍时要帮助一起克服。比如和他谈心，建议解决方法，必要时也可向我说明，寻求支持。
三、奖励规则：
规则的详尽和公平是学生努力的一个方向。奖励机制中有三个标准。
一是隐性的但实际上是最重要的一个衡量标准，那就是老师每一次对进步学生的口头激励。在合适的时间你的激励会是让学生坚持这么去努力的一个原动力。针对已存在差异，但又有着巨大潜能的学生，努力提高他们的成就动机是教育成功的关键。而我的每一次口头激励都在告诉学生你获得了一些成就，你有潜力继续获得更多的成就，促使学生提高被激励的需要，有了一种希望自己成功的美好愿望。
二是向家长汇报你的孩子进步了!每一阶段之后将进步大的这几组同学以祝贺信的形式，只字片语让孩子带回的是胜利的感觉，被别人肯定的感觉。作为家长收到的不仅仅是只字片语，也是激发了他们要把孩子培养成才的愿望，他们会花更多的时间在教育孩子鼓励孩子关注孩子上，这种无形的力量总是能促使我们的学生更加努力地去完成老师的任务。
三是和班级的评比制度挂钩，将优胜组的学生名单汇报给班主任，在班会课上向这些同学表示祝贺，并上墙祝贺!以次表明我们的合作学习是一件比较“严肃”并且需要每个同学认真去做的事情，让每个学生更加重视合作的存在以及合作带给我们的学习进步了的快乐。
但是，不管是哪一种奖励，奖励时都必须整组四人一起奖励，荣辱与共。让学生们知道不仅要为自己的学习负责，而且要为小组负责。为他们所在小组中其它同学的学习负责。让学生充分认识到个人与集体的关系，学习对集体负责，主动参与讨论学习。不能有消极等待或依赖小组其它成员的思维情绪，而是和组员形成积极互赖的关系。当然不妨以“特别是某某同学表现出色”这样的话语指出学生中的榜样，让别的同学像他学习。
小组鉴定范文4
关键词：超声定位；神经阻滞；麻醉效果
Application of Ultrasound-guided Interscalene Brachial Plexus Block
MA Jun
(Wuchang Hospital of Wuhan City,Wuhan 430063,Hubei,China)
Abstract：ObjectiveTo investigate the clinical application of anesthesia effect of ultrasound-guided interscalene brachial plexus block.MethodsThepatients with upper limb trauma in our hospital from 2013 January toSeptember during this period in the selected 100 people as sample,dividedinto two groups,each group of 50 people,were named as the experimental group and the control group.For the experimental group using a portable B Ultrasound instrument in the neck by two-dimensional ultrasound images to determine the puncture for interscalene position,the control group withtraditional anatomic landmarks were punctured,with two groups of patients with operation time of the first block,block onset time,complete block time,adjuvant drug cases and complication rate as evaluation index of treatmentthus,comparative analysis. Results Compared with control group, the test group patients with operation time block,block onset time,complete block time is shortened obviously, P value of less than 0.05,and the test grouppatients adjuvant drug cases and complication rate was significantly lower than the control group,the P value is less than 0.05.Conclusion Goodanesthesia effect ultrasound-guided interscalene brachial plexus block in clinical application, and can effectively shorten the block time,reduce the complication rate,is a new technology of high efficiency,good safety,can be widely used in clinical treatment.
Key words：Ultrasound localization; Nerve block; Anesthesia
肌间沟臂丛神经阻滞是上肢手术中常用的麻醉方法之一，近几年来随着医学技术的发展，超声定位引导肌间沟臂丛神经阻滞在我国临床治疗中得到了推广应用。与传统的肌间沟穿刺相比，这项新技术的麻醉效果更为显著。传统的肌间沟穿刺主要依靠解剖标志和麻醉医生经验进行操作，失败率和并发症发生率较高，而超声定位能够有效缩短阻滞操作时间、阻滞起效时间，同时也对降低并发症发生率、减少对神经以及血管伤害等方面有着显著效果[1]。
1资料与方法
1.1一般资料将上述两组患者的基本资料进行整理分析，得到试验组患者中男性27例，女性23例，年龄为45~73岁；对照组患者中男性28例，女性22例，年龄为41~69岁，两组患者中均无颈部畸形，颈部手术史及局麻药过敏史。将两组患者的基本资料进行统计学分析得到两组资料的差异性在统计学中无意义，即差异性不显著，具有可比性。
1.2方法两组患者的局麻药均为1%利多卡因和0.5%罗哌卡因，最大剂量为20ml[2]。
试验组患者平卧去枕，降头偏向外侧约30°左右，采用彩色超声引导系统进行操作，将探头的频率调整至7.5 MHz，之后将探头置于患者的侧颈部，选择探头外侧约1cm处为穿刺点，当超声图像显示为针尖接近神经时，固定穿刺针，注入局麻药[3]。
对照组患者是用标志定位进行麻醉操作，在患者的前、中斜角肌肌间沟进入，调整穿刺针的方向及深度，寻找异感，固定针头，将局麻药注入[4]。
1.3统计学方法本研究使用的统计学软件是SPSS 17.0，计量资料采用t检验，计数资料采用χ2检验。
2结果
两组患者的局麻药用量差异性在统计学中不显著，而在阻滞操作时间、阻滞起效时间以及阻滞完善时间三个指标中，试验组患者明显低于对照组患者，此外，试验组患者的并发症发生率也明显低于对照组患者,见表1。
3讨论
臂丛神经阻滞的两个关键因素是准确的解剖定位和局麻药的均匀扩散。在传统的临床操作中，常使用盲探异感定位的方法，但是这种方法通常对于麻醉医生的穿刺经验有较高的要求，因此，由于缺乏相对客观的指标判断，该方法通常成功率较低，并发症发生率较高，安全性、有效性较差。近几年来，随着医疗技术的发展，超声影像定位技术逐渐取代了传统的麻醉操作方式，成为了我国临床中一项较为先进科学的麻醉技术。超声定位影像能够较为直观地表达出穿刺部位的肌肉、血管以及神经分布，能够清晰的展现出患者前中斜角肌之间的臂丛神经横断面，使得整个操作过程中实现了可视性和可控性，从而有效地降低了传统穿刺中血管和神经损伤情况的发生率[5]。
本研究结果显示，采用超声引导臂丛神经阻滞，能够有效缩短阻滞操作时间、阻滞起效时间以及阻滞完善时间，提高了阻滞操作的有效性，保证了操作的安全性。此外，在研究过程中，有3例患者由于肥胖、颈短等原因很难实施盲探异感定位法进行麻醉操作，但在超声引导操作下成功完成了麻醉，因此，与传统的麻醉方式相比，超声定位方式的适应性较强。
综上所述，超声定位在沟臂丛神经阻滞中的麻醉效果较好，与传统方法相比，能够有效降低阻滞时间和并发症率，在有效性和安全性方面较为突出。此外，对一些神经解剖复杂、肥胖、小儿等患者，该方法的适应性和灵活性也较好，因此该方法可以在临床治疗中推广应用。
参考文献：
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小组鉴定范文5
【摘要】 采用超高效纳升液相色谱电喷雾串联质谱对重组人Ⅱ型肿瘤坏死因子受体抗体融合蛋白进行了分析。样品经胰蛋白酶酶切后，进行液相色谱串联质谱分析和数据库检索。结果表明， 分别有5个和7个肽段匹配于人肿瘤坏死因子受体和人Ig gamma1 chain C region。比对分析表明，重组人Ⅱ型肿瘤坏死因子受体抗体融合蛋白中检测到的人IgG的7个肽段完全与人IgG1的序列匹配，与其它3个亚型只有部分肽段匹配。说明重组人Ⅱ型肿瘤坏死因子受体抗体融合蛋白一级结构正确，Fc片段确实为人IgG1的Fc片段。
【关键词】 基因重组受体抗体融合蛋白，纳升液相色谱，电喷雾串联质谱，蛋白鉴定
Abstract The Nano ultrahigh performance liquid chromatographyelectrospray ionization mass spectrometry tandem mass spectrometry(UPLCESIMS/MS) was used to characterize the primary structure of recombinant human necrosis factorα receptorⅡ∶IgG Fc fusion protein. Samples were digested by trypsin， followed by liquid chromatographytandem mass spectrometry analysis and database search. Five peptides matched with tumor necrosis factor receptor and seven peptides matched with human IgG1 fragment of the Fc. Further analysis demonstrated that seven peptides all matched with the IgG1 Fc but only partly peptides matched with the other subtypes. RhTNFR:Fc is fused by IgG1 Fc but not other subtypes.
Keywords Recombinant human necrosis factorα receptorⅡ∶IgG Fc fusion protein， nano ultrahigh performance liquid chromatographyelectrospray ionization mass spectrometry tandem mass spectrometry， protein identification
1 引 言
类风湿关节炎(rheumatoida rthritis， RA)是一种以累及关节为主的系统性自身免疫性疾病。近年来研究表明，肿瘤坏死因子a（TNFa）是RA发病机制中的关键因子。阻断TNFa即在RA发病机制的上游阻断了炎症反应，达到治疗RA的目的[1]。注射用重组人Ⅱ型肿瘤坏死因子受体抗体融合蛋白(rhTNFR：Fc)用于治疗RA，不仅可缓解症状，还可阻止关节变形，临床效果好。该药是由Ⅱ型TNF受体P75的细胞外部分和人免疫球蛋白(IgG)1的Fc段形成的融合蛋白。Ⅱ型TNF受体P75的细胞外部分是与游离肿瘤坏死因子特异结合的部位，竞争性地阻断肿瘤坏死因子和效应细胞表面的肿瘤坏死因子受体结合，阻断肿瘤坏死因子的生物活性，达到减轻炎症的目的[2]。人IgG1的Fc段可延长药物半衰期。
基因重组药物需要经过严格的质量控制来确保药效和药物的质量。目前， 基因产物的质量控制主要包括分子量测定、等电点测定、纯度分析、结构分析以及生物活性分析等[3]。结构测定主要是包括蛋白质N端序列分析[4]、C端序列分析、二硫键分析及蛋白质肽谱分析[5，6]。形成了以等电聚焦电泳[7] 、氨基酸组成分析、氨基酸序列分析[8]、生物质谱[9]、细胞学实验及动物实验[10]等为基础的综合鉴定体系。对于高度同源蛋白，如果N端或C端含有不同的氨基酸，则可以通过N端或C端测序来区分。对于重组人Ⅱ型肿瘤坏死因子受体抗体融合蛋白(商品名益赛普)，这两种方法都不能区分。本实验采用同时具有分离能力和测序功能的超高效纳升液相色谱电喷雾串联质谱（NanoUPLCESIMS/MS）法进行分析，对其进行了准确鉴定。目前，尚未见到准确鉴定融合蛋白中高度同源人IgG的报道。
益赛普是我国第一个实现产业化的人源化单克隆抗体药物（生物制剂），已于2005年在国内获得批准上市销售。但是该药品进入国际市场必须确定融合蛋白抗体部分为人IgG1的FC片段。人IgG共有4个亚型，序列高度相同，一般的分析鉴定方法难以区分，因此高效、高分辨的质谱鉴定方法成为首选的鉴定方式。本实验采用NanoUPLCESIMS/MS法对样品酶切溶液进行质谱分析，经肽段序列分析比较，准确鉴定了益赛普的结构组成，证明益赛普中的IgG确实为IgG1，为其出口提供了可靠依据。
2 实验部分
2.1 仪器与试剂
超高效纳升液相色谱电喷雾串联质谱(美国Waters公司)。样品来源：重组人Ⅱ型肿瘤坏死因子受体抗体融合蛋白（益赛普）由上海中信国健药业有限公司提供。胰蛋白酶为美国罗氏公司测序级的酶；碘乙酰胺（ACROS公司）；DTT（美国ICN公司）；实验用水为MilliQ 纯水器制备的去离子水；其余试剂均为国产分析纯。
2.2 样品的还原、烷基化和酶切
称取重组蛋白样品2 μg，溶于0.025 mol/L NH4HCO3中制得1 g/L溶液，以0.01 mol/L DTT在56 ℃还原60 min， 以0.055 mol/L碘乙酰胺室温闭光烷基化30 min，然后加入1 μg胰蛋白酶，在37 ℃酶切过夜即可。
2.3 酶切肽段的NanoUPLCESIMS/MS分析
取2 μL 酶切产物，加3 μL 1%甲酸溶液酸化，然后进样2 μL用NanoUPLCESIMS/MS分析。Symmetry C18(20 mm×180 μm， 5 μm)为富集柱；NanoACQUITY UPLC 超高效液相色谱键合乙烷杂颗粒柱为BEH C18（250 mm×75 μm， 1.7 μm）为分析柱。柱温度：35 ℃；流速：200 nL/min；流动相A：含0.1%甲酸的水溶液； 流动相B：含0.1%甲酸的乙氰。梯度：0～80 min，B从1%上升到40%；80～90 min，B从40%上升至80%；90～100 min，80% B停留10 min；100～105 min，B从80%降至1%；105～120 min，1% B平衡15 min。质谱条件：离子化方式：纳升电喷雾正离子；数据采集模式：DDA方式，每次扫描中两个强度最高的离子进行串联质谱分析；毛细管电压：2500 V；锥孔电压：35 V； 源温：90 ℃，采集范围：MS， 350～1600，MS/MS， 50～2000。数据分析软件：PLGS V2.3处理后通过Mascot检索软件的MS/ MS 离子方式检索数据库。检索条件：Trypsin 酶切，M氧化和碘乙酰胺烷基化为可变修饰，漏切位点为1。 MS和 MS/MS的质量误差均为0.2 Da。
3 结果与讨论
3．1 数据库检索结果
酶切后的益赛普样品采用NanoUPLCESIMS/MS分析后，经数据库检索鉴定到2个蛋白，其中一个是肿瘤坏死因子受体（tumor necrosis factor receptor），有5个肽段相匹配，Mascot得分563；另一个是人Ig gamma1 chain C region，有7个肽段相匹配，Mascot得分382（Mascot得分37即为鉴定有意义），说明该样品确实由肿瘤坏死因子受体和人IgG Fc片段两个蛋白融合而成。表1为检测到的人IgG Fc片段7个肽段的质量数、测量误差及氨基酸序列信息。图解1为人Ig gamma1 Fc片段上的氨基酸序列及所检测到的7个匹配位置（加粗斜体标示）。如表1所示，所有肽段的测量误差均小于0.01 Da，说明鉴定准确可靠。表1 益赛普 IgG Fc片段中检测到的7个肽段的氨基酸序列及相关信息（略）
3.2 检测结果与IgG四亚型比较
人IgG共有4个亚型，4个亚型序列高度同源，NCBI登陆号分别为IgG1，CAC20454；IgG2，CAC20455；IgG3，CAA67886；IgG4，CAC20457。为进一步确认益赛普中IgG确实为IgG1，将从益赛普中检测到的7个肽段和IgG的 4个亚型的序列进行了比对分析，结果见表2。在益赛普中检测到的7个肽段均与IgG1 Fc片段相匹配，只有1个可与IgG2 Fc片段相匹配，5个与IgG3相匹配，1个与IgG4相匹配。其中有2个肽段为IgG1 Fc片段所特有的肽段，这2个肽段的串联质谱测序图见图1和图2。从图1和图2可见，强度高的峰得到了很好的匹配，这也说明本方法的测序效果是非常好的。同时进一步证明了重组人Ⅱ型肿瘤坏死因子受体抗体融合蛋白中的Fc片段确实为人IgG1的Fc片段。表2 益赛普中检测到的7个肽段和4个人IgGs Fc片段预测肽段的比较（略）
生物质谱，尤其是电喷雾串联质谱的应用，为蛋白及多肽的测序开辟了一条新的途径，成为鉴定微量蛋白和蛋白修饰的有力工具[11]。NanoUPLCESIMS/MS方法具有分离能力强、测序效果好和灵敏度高等优点，已成为研究蛋白质最强大的工具 [12]，在蛋白质的翻译后修饰研究和同源蛋白的区分方面也显示出独特的优势，在重组蛋白药物的质量控制方面也将发挥重要作用。
参考文献
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小组鉴定范文6
[关键词] 肌间沟；臂丛神经阻滞；地塞米松；罗哌卡因
[中图分类号] R614.2 [文献标识码] A [文章编号] 1673-7210（2015）02（b）-0081-05
[Abstract] Objective To compare the differences of sensory block and motor block effects of the same concentration of Ropivacaine with deferent dosages of Dexamethasone for ultrasound and nerve stimulator guided interscalene bronchial plexus block. Methods Sixty six cases of patients underwent shoulder surgery under interscalene brachial plexus block in Department of Sport Medicine of Beijing Jishuitan Hospital from December 2012 to May 2014 were chosen and randomly divided into three groups： using Ropivacaine 0.5% 20 mL （group A， n = 22）， Ropivacaine 0.5% with Dexamethasone 0.05 mg/kg 20 mL （group B， n = 22）， Ropivacaine 0.5% with Dexamethasone 0.1 mg/kg 20 mL （group C， n = 22）. Onset time and duration time of sensory and motor block， adverse reactions and patients' satisfaction for anesthesia among the three groups were recorded. Results There were no significant differences in onset time of sensory or motor block among the three groups （P > 0.05）. Compared with group A， Dexamethasone can significantly lengthen the duration time of sense block [group A： （15.3±5.3） h vs group B： （28.9±6.9） h， P = 0.000； group A： （15.3±5.3） h vs group C： （31.3±4.9） h， P = 0.000] and motor block [group A： （10.3±3.8） h vs group B： （17.3±4.4） h， P = 0.000； group A： （10.3±3.8） h vs group C： （18.8±2.5） h， P = 0.000] of Ropivacaine 0.5%； but there was no significant difference of different dosages of Dexamethasone for sensory block （group B vs group C， P = 0.198） and motor block （group B vs group C， P = 0.343）. The resting numerical rating scale （NRS） at postoperative 12， 24， 36 h in group B and group C were lower than those of group A， but there were no significant differences between group B and C at any time （P > 0.05）. There were no significant differences of postoperative incidence of nausea and vomiting and satisfaction for postoperative analgesia among the three groups （P > 0.05）. Conclusion Dexamethasone can lengthen the duration time of sense block and motor block of Ropivacaine 0.5%， but there are no significant differences by using 0.05 mg/kg or 0.1 mg/kg Dexamethasone.
[Key words] Interscalene； Brachial plexus block； Dexamethasone； Ropivacaine
肩关节镜手术在临床已广泛开展，由于术中需行控制性降压，术后需早期活动进行功能锻炼，完善的术中及术后镇痛显得尤为重要。由于肌间沟臂丛神经阻滞不仅可以阻滞臂丛神经的所有分支，并可能阻滞来源于颈浅神经丛的锁骨上神经，可以覆盖肩关节手术所有累计神经支配范围，因此被常规应用于肩关节镜手术麻醉及术后镇痛。近年来超声引导神经阻滞技术不断发展和完善，不仅提高了阻滞的准确性，同时减少了不良反应的发生[1]。罗哌卡因应用于临床已近二十年，它对心血管毒性低，低浓度下可产生运动感觉分离现象，作用持续时间相对较长，可提供术后8～12 h的完善镇痛[2]。目前研究显示地塞米松复合罗哌卡因可以明显延长肌间沟臂丛神经阻滞持续时间，但使用不同剂量地塞米松对罗哌卡因神经阻滞持续时间的影响是否不同目前尚不清楚[3]。本研究拟评价不同剂量地塞米松对超声引导神经刺激器定位肌间沟臂丛神经阻滞时使用0.5%罗哌卡因起效及作用持续时间的影响，现报道如下：
1 资料与方法
1.1 一般资料
本研究采用随机、双盲、对照的研究方法，经北京积水潭医院（以下简称“我院”）伦理委员会批准，所有患者均签署知情同意书。选择2013年12月～2014年5月于我院运动医学科行肩关节镜下肩袖修补手术患者66例，随机分为三组：A组、B组、C组，各22例。麻醉方法均为超声引导神经刺激器定位肌间沟臂丛神经阻滞复合全身麻醉。病例排除标准：既往神经病变，局麻过敏，严重凝血功能障碍，穿刺局部感染，认知功能障碍或未签署知情同意书的患者。
1.2 材料
超声：Sonosite，M-turbo，USA；探头：Sonosite，M-turbo，USA，高频（5～12 MHz），50 mm；短斜面穿刺针：Stimuplex；B/Braun Medical，Melsungen，Germany，22G，0.7 mm×50 mm，30°；外周神经刺激器：HNS11，B/Braun Medical，Melsungen，Germany；罗哌卡因：AstraZeneca Pty Ltd，North Ryde，NSW，Australia。
1.3 麻醉方法
1.3.1 麻醉前准备 患者入室行心电图、无创血压、脉搏血氧饱和度常规监护，选择任一下肢开放静脉通路。对侧于局部浸润麻醉后行桡动脉穿刺置管检测动脉血压。前额正中、眉弓上方和外眼角处的皮肤乙醇脱脂后，贴上专用电极监测脑电双频指数（bispectral index，BIS）。
1.3.2 臂丛神经阻滞方法 患者去枕仰卧位，肩下垫一薄枕，双臂自然垂于体侧，头向对侧45～60°，定位前中斜角肌间隙，采用高频线性探头（HFL 50×/13-6 MHz，SonoSite M-Turbo，索能生公司，美国），将超声探头放置C6横突水平，采集横断面图像，探头可沿胸锁乳突肌上下滑动直至获得满意的肌间沟臂丛神经图像（图1）。选用短斜面穿刺针（Stimuplex，贝朗医药公司，德国），将穿刺针连接外周神经刺激器（HNS11，贝朗医药公司，德国），在超声引导下由外侧向内侧实时进针。当穿刺针针尖接近目标神经后开启神经刺激器，若电流强度为0.3～0.5 mA仍可引出相应肌肉运动，则认为位置正确。回吸没有血液后分别注入0.5%罗哌卡因20 mL（A组，n = 22）；0.5%罗哌卡因加入地塞米松0.05 mg/kg混合液20 mL（B组，n = 22）；0.5%罗哌卡因加入地塞米松0.1 mg/kg混合液20 mL（C组，n = 22）。
1.3.3 麻醉诱导 所有患者均依次静脉注射咪达唑仑0.04 mg/kg、芬太尼3 μg/kg、异丙酚TCI至效应室浓度3 μg/kg、罗库溴铵0.07 mg/kg，待BIS值降到60以下，下颌松弛后进行气管插管，并确定气管导管位置正确。通气满意无漏气后接通Ohmeda麻醉机行机械通气，维持呼气末二氧化碳分压（partial pressure of carbon dioxide in endexpiratory gas，PetCO2）35～40 mm Hg（1 mm Hg=0.133 kPa）。
1.3.4 麻醉维持 术中微量泵持续输注丙泊酚维持麻醉，调节丙泊酚用量维持BIS值为40～60；按需间断静脉注射罗库溴铵维持肌松。手术于臂丛神经阻滞完成40 min后开始。术中维持血压低于基础值30%并无缺血表现，若BP波动大于此控制性降压值10%则间断给予芬太尼或血管活性药物以维持血流动力学稳定。手术结束前30 min静脉给予地佐辛10 mg。
1.3.5 术后镇痛 术后静脉给予氟比洛芬酯镇痛（100 mg，2次/d）。若视觉模拟评分（visual analogue score，VAS）>4，则肌注杜冷丁50 mg镇痛。
1.4 观察指标
阻滞后30 min内，每隔5 min，用22号穿刺针分别在正中神经、尺神经、桡神经、肌皮神经及腋神经支配区域轻刺患者，评估感觉阻滞情况；同时观察肌肉力量，评估运动阻滞效果。感觉阻滞评估标准为：正常感觉=0（阻滞失败），感觉下降=1（部分阻滞），感觉缺失=2（完全阻滞）。运动阻滞评估标准为：肌力正常=0（阻滞失败），对比对侧上肢肌力下降=1（部分阻滞），肌力完全丧失=2（完全阻滞）。上述神经支配区域感觉和运动阻滞评分均达到2为阻滞完全，记录从穿刺针拔出至阻滞完全所需时间。记录术后4、8、12、24、36 h及48 h的静息疼痛数字评分（NRS）。记录不良反应的发生情况，包括出血血肿、局麻药毒性反应、全脊麻，若患者主诉呼吸困难于吸氧后无缓解则拍摄胸片以除外气胸或膈神经阻滞。记录患者对术后镇痛的满意程度（0=不满意，10=非常满意）。
1.5 统计学方法
采用SPSS 12.0统计软件对数据进行统计分析。采用Kolmogorov-Smirnov正态检验对数据进行正态分布检验，采用变量的重复测量ANOVA分析检验重复测量的数据（如NRS评分）是否符合正态分布。计量资料符合正态分布以均数±标准差（x±s）表示，非正态分布资料以M（Q）表示。三组患者符合正态分布资料采用ANOVA分析检验组间差距；三组患者计数资料组间比较采用Pearson相关检验。三组患者术后NRS评分及患者满意度比较采用Kruskal-Wallis检验。以P < 0.05为差异有统计学意义。
3 讨论
肩关节镜下肩袖修补手术术后疼痛剧烈，目前多采取持续静脉镇痛，但临床观察发现持续静脉镇痛效果欠佳，且嗜睡、头晕、恶心、呕吐等不良反应发生比例较高[4]。有报道指出，行臂丛神经阻滞时加入一些药物如肾上腺素、可乐定、阿片类等可以延长局麻药的作用时间，推迟患者术后疼痛出现时间，减少阿片类药物使用，并减少相关并发症的发生[5]。目前研究发现行外周神经阻滞时局麻药中加入一定剂量的肾上腺皮质激素可明显延长局麻药物的感觉及运动阻滞效果持续时间[6]。
本次研究发现，同样使用0.5%罗哌卡因20 mL用于超声引导神经刺激器定位肌间沟臂丛神经阻滞，加入一定剂量的地塞米松可以明显延长感觉及运动阻滞持续时间，且无论使用0.05 mg/kg还是0.1 mg/kg，其延长作用效果相当[感觉B组：（28.9±6.9）h比C组：（31.3±4.9）h，P = 0.198；运动B组：（17.3±4.4）h比C组：（18.8±2.5）h，P = 0.343]。一般认为糖皮质激素可以使局部血管产生收缩，从而减缓局麻药的吸收，延长作用时间[7]。还有人认为地塞米松增加了C纤维上异质性钾通道的活性从而减轻疼痛[8]。研究发现地塞米松还可以有效抑制创伤部位氧化酶活性和前列腺素的合成发挥抗炎镇痛作用。罗哌卡因脂溶性高与蛋白质结合，作用于臂丛神经轴突，两种药物混合后，地塞米松作为载体可对罗哌卡因起协同作用，使罗哌卡因代谢减慢，存留于臂丛神经鞘管内的作用时间延长。本研究显示在臂丛肌间沟阻滞中加入地塞米松能明显延长罗哌卡因的感觉阻滞时间和术后镇痛效果，这与Parrington等[9]的报道一致。
本次研究三组患者臂丛神经阻滞感觉及运动阻滞完善时间相似，这可能是因为使用了超声引导神经刺激器定位后注药更加精确，起效时间均很短[感觉：A组（13.2±3.9）min比B组（12.7±4.8）min比C组（12.3±4.0）min，P = 0.780。运动：A组（19.3±5.8）min比B组（17.3±6.5）min比C组（18.6±5.6）min，P = 0.518]，因而无法得出地塞米松不会加速罗哌卡因起效这一结论。
本次研究A组患者虽然在12、24、36 h时静息NRS评分明显高于B、C组患者，但是由于术后随访细致到位，对于疼痛及其他不适主诉均给予及时处理，因而三组患者对于术后镇痛的满意程度差异无统计学意义；同时由于加入地塞米松使患者运动丧失时间明显延长，且部分患者主诉存在较长时间的上肢麻木感，因而降低了B、C两组患者对术后镇痛的满意程度。今后应对术后镇痛时所需的最适地塞米松剂量做进一步研究。
三组患者均未观察到出血血肿、局麻药毒性反应、全脊麻及呼吸困难等严重不良反应的发生。超声引导可以观察目标神经及其周围比邻结构的位置关系，并可实时引导穿刺针进针，不仅效果明确同时可以避免不良反应的发生，尤其对于熟练掌握这一技术的麻醉医生来说，完全可以避免相关并发症的发生[10-11]，研究中同时使用神经刺激器定位，它不仅可以明确目标结构性质，与周围有可能混淆的结构区分（如血管、肌腱、淋巴结等），同时调节合适的阈电流可以避免神经内注射或神经损伤的发生[12]。本次研究无严重呼吸困难发生，虽然有研究指出，由于膈神经在C4水平走行于前斜角肌表面，因而肌间沟臂丛神经阻滞隔神经阻滞发生率近乎100%，单侧膈神经阻滞会使有效肺容量损失30%左右，对于正常人来说可以代偿，因而本次研究患者均为主诉严重的呼吸困难；而对于过度肥胖、COPD或存在对侧膈肌麻痹患者则会造成严重不良后果，因而行肌间沟臂丛神经阻滞前完善的检查尤为重要。
综上所述，使用0.05 mg/kg和0.1 mg/kg的地塞米松均可以同样延长臂丛肌间沟阻滞时0.5%罗哌卡因感觉及运动阻滞持续时间，可以为肩关节镜下肩袖修补手术提供接近36 h的有效术后镇痛，但是其最适剂量、浓度需进行进一步探索研究。
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