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李白的简介范文1
上海柏妮化妆品有限公司成立于2000年，经过7年的努力和奋斗，公司旗下的产品已遍布全国各省，专注于销售和市场是柏妮公司的主要职能。上海柯奈丽化妆品有限公司主要致力于生产、代加工OEM以及研发制造等几个方面，公司现代化产品生产加工基地设立在松江工业园区，占地近5000平方米的大型OEM工厂，特别引进了目前国际上配置最先进的4条化妆品专业生产线，并设有一流的专业化妆品研发实验室，吸纳了一批具有高、精、尖的专业人才的高科技团队。追求"卓越品质、努力创新"的观念始终贯穿在每个员工和整个企业的核心中，这为企业的发展树立了一个明确的目标。公司始终坚持"诚信、专业、创新"的经营思想和持续发展的品牌经营战略，建立了科学规范的管理机制和遍及全国的营销网络。新的团队拥有新的观念，新市场的打造源于柏妮新的理念、新的思路。
企业优势及产品特色是竞争的筹码
随着中国关于化妆品各项法制的健全以及市场的日益规范，许多正牌及规范的企业都走得更加长远和稳定了；在硬件方面也与国际越来越同步，许多工厂设备、技术操作、研发条件都开始像国际化妆品趋势看齐。在这样的行业环境下，良性竞争慢慢显现，虽然利润点有可能会受到影响和波及，但对于国家、政府、行业、企业、个人都是一种质的提升，为将来的行业系统化作了万全的准备。
柏妮经过8年以来的长期供应商齐集，已经拥有了相当全面和完整的最优化供应链，保证产品质量的优秀、跟紧国际时尚趋势的步伐、拥有性价比最高的资源、互通最新信息的平台等等都成为了公司产品的几大核心优势。
柏妮一直以来都秉承和倡导“用我们的真心、耐心、责任心为您服务”的三心服务精神和双赢的合作理念，这成就了企业长久经营的最初目标，柏妮拥有的供应商、商、员工等等都必须有这样的企业理念，这是柏妮和他们相互选择对方的衡量标准。
正面面对竞争和压力
"做好终端"是目前柏妮市场操作的主要方面，其中包括产品的品质、包装、技术、文化内涵必须让消费者认可；公司的企划活动、团队建设、利润分配方案必须要让渠道认可；商的选择要精益求精，通过和商的协作，对渠道做到有效管理；在终端上必须赋予品牌的自身价值，使厂家、商、渠道能够通过品牌的延伸价值去完成二次获利，以弥补商务及其它成本上升所带来的利润削减。在做好终端的同时，更要做好售后服务工作。商的合作，不仅仅是在销售层面的合作，更多的合作是体现在服务的完善、两个企业的文化融合、人员协作、战略统一以及资源共享上面。在不同的时期，有着不同的服务内容，包括协同商企业的重新定位、角色转换、合作内容的延伸，不仅仅把商当成下游渠道的扩展，而是企业发展生存的共同体，这样才能真正把合作的内涵深化、外延扩大，使企业迈向一个新的阶段。
前期沟通是长期合作的必要条件
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关键词：《白象似的群山》；空间批评；逃离
20世纪末，学术界经历了引人注目的“空间转向”。学者们开始刮目相待人文生活中的“空间性”，把以前给予时间和历史的青睐，纷纷转到空间上来。空间转向的成果最终导致城市设计、地理学、建筑以及文化研究等学科呈现出相互交叉的趋势，并且影响到对文学文本的重新解读。[1]空间批评注重“强调文化史人与人之间，社会、政治和经济的各种关系，通过文化作为中介（media）、平台（level）、生活圈（sphere）等空间隐喻，将文化研究空间化。[2]批评家强调景观不再仅仅是一种静态的、承载作者叙述内容的‘容器’，注重研究其背后的社会文化属性。[3]本文试图采用空间批评的视角从景观空间、社会空间及个体空间[4]对《白象似的群山》的逃离主题[5]进行解读。
《白象似的群山》讲述了一对美国的年轻男女在西班牙的一个小车站喝酒，这名男子一直在试图说服这名女子去做一个小手术的故事。[6]整部小说几乎都是围绕着男子和女孩之间的对话完成的，对话一直围绕着两个人对做不做这个手术的分歧进行的，在列车即将到达车站的时候，女孩子开始恢复了平静，小说戛然而止了。整部小说的语言文字简洁明了，故事情节表面上简单易懂，都由两个人的对话构成，但其主题却蕴含主人公深深的逃离情绪，而这一主题可以从以下三个方面解读出来。
一、景观空间的渲染――女主人公的逃离
《白象似的群山》通篇不足3000字，基于海明威的创作风格：简练、含蓄，只有一来一往的对话，而若只是局限于这些对话，读者对主人公的心理是无从把握的，更不用说小说主题了。但所谓触景生情，睹物思人，我们往往能从作者的景观空间描写中找到蛛丝马迹。在闷热的夏天，连绵的群山在骄阳的炙烤下横亘着，白茫茫一片，周围则是褐色而干枯的村庄[7]，作者营造的是一种焦躁而压抑的氛围，为整部小说定下了令人压抑窒息的基调。白象似的群山从形态与色彩上可逼真地描摹出女孩备感压抑与焦虑的心理面貌，而这些压抑与焦虑则来自于她与美国男人的谈话主题――做手术（通过分析可知即堕胎）。但当姑娘站起身来，走到车站的尽头。铁路对面，在那一边，埃布罗河两岸是农田和树木。远处，在河的那一边，便是起伏的山峦。一片云影掠过粮田；透过树木，她看到了大河[8]。白象似的群山已与远处的田野、流淌的河水融为一体，这时白象似的群山象征着与文明社会相对应的相对自由的自然界，凸显出女孩一种想躲避与逃离的情绪。
二、社会空间的压迫――男女主人公的双双逃离
海明威的冰山创作原则留给读者太大的想象空间，我们联系上下文，完全有理由认为这个美国男人以及跟着他的小女孩是从美国逃离而来到西班牙的，这里就存在着一个隐含社会空间――美国。从主人公之间的言谈举止我们可以推断出他们之间的恋情并不是正大光明的，而是违道德的，成为美国社会空间下的一股异质力量。因此，他们在美国受到了社会空间的压迫下，只能逃离。为了寻找能藏匿自己这一越轨行为的社会空间，他们来到了西班牙。而根据小说中的细节描写：他们的旅行包上“贴着他们曾过夜的所有旅馆的标签”[9]以及他们正在西班牙的一个小站等待着开往巴塞罗那的火车等等，可以看出，他们的逃离已经开始了很久，而且还将继续进行。
三、个体空间的对抗――男主人公的责任逃离，女主人公的精神逃离
在社会空间的压迫下，男女主人公双双逃离。而作为独立的人，他们又分别有自己的个体空间。个体空间原本应该相互独立的，而在这样一个男权为主导的社会中，小说中的两个个体空间则呈现出女主人公对男主人公的依赖，男主人公对女主人公的控制。这个局面一直稳定的存在，直到女主人公怀孕。故事中通过二者隐晦的对话，表现出了两个个体空间之间的矛盾与碰撞，而对话的目的实则为解决这一矛盾与碰撞。男主人公一直在劝说女主人公去做小手术――堕胎，而女主人公却通过一遍遍的对手术质疑期望得到满意的答复――男主人公真正的爱。然后就是在这一来一往，不被外人所了解的对话中，男主人公一心想通过花言巧语来逃避自己的责任，他想要的不过是男欢女爱，而不是与这个女孩组建家庭，结婚生子，他害怕承担责任，因此，一直在闪烁其词，在逃离他本该承担的责任。而女孩透过对话明了了这个男人的不负责，所以她极度想逃离这个男人，因此，在整篇的交谈中，女孩一直没有看男人，女孩一直在躲避男人的目光，她看远处的山，看珠帘，看桌子腿下的地，甚至站起身来，走到车站的另一头，去看远处的田野、流淌的河流。但是由于她对这个男人的依赖实在太严重，因此她只能实现精神上的逃离。所以在小说的结尾，她不仅看着男人而且还冲着男人笑了。至此，女主人公与男主人公作为个体空间，企图通过相互交流来达到和谐的梦想貌似得到了实现，然而只有深入探究，我们才能发现其中的深层逃离主题：这个男人不可能承担起这份责任，他会一直逃离；而这个女人尽管依旧靠着这个男人生存，然而也仅限于物质依赖，她已经看透了他对她的爱只是表面的，在之后的逃离旅程中，她的精神至少是独立的了。
结论
空间批评理论应用在文学批评中，使我们可以观木见春，深入探究文本中所体现的社会和政治意义。空间批评理论在审视《白象似的群山》这部文学作品中的景观空间、社会空间以及个体空间的同时，把重点放在探究这些空间背后所蕴含的逃离主题。空间批评理论在提供给我们一个或多个研究视角与理论维度的同时，进一步证明了空间作为文本存在的一个维度在挖掘小说内涵价值上所具有的不可忽视的地位。（作者单位：鲁东大学）
参考文献：
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李白的简介范文3
葛洲坝集团旗下设立有“上海葛洲坝国际旅游有限公司”（下称“葛洲坝旅游”），专事葛洲坝集团的旅游业务，系“葛洲坝主业之一”。湖北百事得资本投资有限责任公司（下称“百事得”）与葛洲坝旅游“组成联合体，进入商业地产及旅游地产领域”。
对民间资本而言，积极探索参与国有企业改革的适当途径，尽快布局，占领先机，是其在新一轮国企改革浪潮中掘金的重要条件。民间资本如何参与国企改革，从中分得一杯羹？百事得资本与葛洲坝旅游的合作给出了一个正在进行中的样例。百事得资本董事长冯彦皓接受《融资中国》专访，谈民间资本与国企改革的对接。
《融资中国》：国企葛洲坝集团与民企百事得资本合作，契机何在？
冯彦皓：百事得与葛洲坝集团旗下葛洲坝旅游开展合作。在葛洲坝集团产业板块中，葛洲坝旅游的发展相对滞后，其希望有较大变化，这意味着需要加大投资力度，而葛洲坝旅游又不便于完全依托集团母体的投资流程或者渠道，于是选择与私募基金开展合作。
借助于葛洲坝集团内部产业调整，希望引入新的混合所有制经济作为经改、股改窗口的契机，百事得资本于2013年成立；目的在于承接“葛洲坝宾馆用地改造”与“旅游+养老地产项目”。百事得作为葛洲坝集团的金融服务商，希望能够为葛洲坝集团提供投资、资本配套服务。
《融资中国》：百事得发起的基金架构是怎样的？募资情况如何？
冯彦皓：百事得资本拟组建上海微通股权投资管理有限公司以及上海微事得投资有限公司，与湖北百事得资本投资有限责任公司一道，负责运营百事得旗下两只基金：百事得股权投资基金和微通国投基金。
百事得股权投资基金由湖北百事得资本投资有限责任公司作为发起人，主要投资商业地产；微通国投基金由上海微事得投资有限公司作为发起人，主要投资旅游地产和养老地产；两只基金均由上海微通股权投资管理有限公司作为管理人。
在募资方面，两只基金的募集目标共5亿元人民币，其中百事得基金募资目标2亿，微通国投基金3亿。百事得在上海通过银行渠道，特别是私人银行渠道能够募到资金，目前有2亿多资金有投资意向，待在上海公司注册完毕，钱就到位。
《融资中国》：百事得的投资状况如何？
冯彦皓：在投资理念上，百事得强调以开放包容的心态来寻找合作对象。期待与合作伙伴一道，在未来若干年中转型提升，在市场中寻找到稳定且能够复制的商业模式。百事得投资时要求介入到被投者的运营中去。
在投资流程上，百事得的投资决策由投资委员会依流程做出，风控委员会负责风险控制。当客观的尽职调查意见反馈给投委会之后，由投委会进行投资决策。
在具体的投资项目上，百事得核心团队只做联系和风险控制工作，其他工作由第三方合作团队按照法律规定的标准完成。
《融资中国》：葛洲坝票务中心业务是百事得与葛洲坝旅游合作的首个项目，请您谈一谈具体运作情况。
冯彦皓：百事得旗下两只基金所募集到的资金都将投入到葛洲坝旅游的不同业务中去。在具体运作上，百事得与葛洲坝旅游签订了总体性的合作协议，确定了双方的义务和责任，根据这个协议，百事得选择葛洲坝旅游的部分单项业务进行投资，并约定占股比例。
2014年4月，首个单项合作协议已经正式签订：百事得将向葛洲坝票务中心投入千万级别的资金。
从字面上讲，“票务中心”业务板块相对较小，但百事得的投资主要针对包机业务，内容包括拟定新开航线的前期评估、测算、接地机场对接等。
百事得看好鄂西地区旅游资源的潜力，但由于当地基础设施配套薄弱，交通存在瓶颈，旅游资源无法形成联动。因此，百事得希望以位于宜昌的三峡机场为依托，在鄂西地区构建较为立体的旅游交通网络。
百事得能够协调旅游景点的落地资源，利用旅游公司强大的地面销售网络，将单项旅游产品包装后进行推广，吸引旅游客源――这是百事得重点关注的旅客来源。在执行方面，目前百事得已开始策划分析航线，与相关航空公司展开谈判，最迟2015年3月份航线将开通飞行。
《融资中国》：除票务中心外，百事得与葛洲坝旅游合作中，还有什么其他的投资机会？
冯彦皓：在与葛洲坝旅游合作的过程中，百事得能够参与葛洲坝集团的一些新项目，例如百事得预计将与葛洲坝旅游共同投资恩施大峡谷的旅游度假项目，这是与葛洲坝集团另一子公司：葛洲坝集团第五工程公司（下称“五公司”）的合作。
五公司在建设恩施大峡谷水库时获得了附近土地的使用权，这些土地位于大峡谷入口，旅游度假项目来说非常适合，百事得准备投资并开展运营：修建商业街及从低端青年旅社到高端酒店的住宿设施。这一投资涉及到同一央企的两个下属子公司及第三方民间资本，操作上可能更加复杂。
宜昌政府鼓励和支持民间资本发展，因此也会向百事得推介一些项目。
《融资中国》：您强调民间资本与国企的对接，请问百事得以何种模式参与国企改革？
冯彦皓：十后，国家政策对于民间资本的扶持力度很大，市场环境利好。
在与国企合作的过程中，百事得找到了一种新的合作方式：民间资本与国有资本签订框架性合作协议，具体投资时针对特定项目，确定投资金额，约定回报比例，双方共同运营这个“联营体”。
由于民间资本在股权投资出现纠纷时的追索手段比较单一，这样的构架商业风险较大，因此在选择合作方时需要很谨慎：双方要认同这种合作形式，也需要遵从确定的游戏规则。
百事得在衡量收益时，将收益确定在一个合理范畴内，一旦收益超过了合理投资回报，就很容易让国企方面的合作者承担过大的政治和商业风险。民企追求过高的回报会使得很多台面上的动作就变成了台下的动作，这往往会造成尖锐的矛盾。
《融资中国》：多家PE机构都有意愿参与国企改革，百事得与国企合作的核心竞争力是什么？
冯彦皓：民间资本与国有资本进行对接时，在确定风险共担、利益共享的前提之下，需要尝试不同的商业模式。
百事得在与葛洲坝旅游合作的过程当中，以合理合法合规为前提，尝试新的合作模式：百事得的投资不强调股权占比，但投资后百事得的权利、义务及项目运作中的大致分工，都与合作方通过合同加以明确，并且在业务管理中拥有一票否决权，按约定比例获得收益。
百事得与央企合作，双方能够互补，一方面央企拥有他人不可逾越的资源，但另一方面也有有很多限制。百事得不仅可以为央企提供市场资源，包括市场观念、价值等，也能通过合同确立下的联营体模式，为央企不拘一格地选拔人才。
民间资本与国企合作时存在一定的不确定性，双方能够合作的关键前提是有对方认可的商业模式，并且双方都能遵守法规。与国企合作我懂得放弃一部分，并不追求短平快。很多追求短平快的投资需要承担很大的风险，压力相对集中，投资者没有办法在时间上去摊销风险。
《融资中国》：对于葛洲坝旅游的投资刚开始，百事得准备以何种模式退出？
冯彦皓：退出方面，百事得并不刻意强调退出，做股权投资，只要能把收益和成本控制好，长期持股为什么不可以？但毕竟长期持有的项目少，百事得投资商业地产和旅游地产时也会与合作方确定需要出售的地产，待售地产出售完毕百事得即获部分退出。
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[关键词] 心力衰竭；心肌肌钙蛋白I；临床价值
[中图分类号] R541.6 [文献标识码] A [文章编号] 1673-7210（2012）02（a）-0087-02
The value analysis of cardiac troponin I levels detection in patients with chronic heart failure
TAN Hongzhi WEI Xiange
Department of Laboratory, the First People's Hospital of Hechi City, Guangxi Zhuang Autonomous Region, Yizhou 534600, China
[Abstract] Objective To investigate clinical value of cardiac troponin I (cTnI) levels in patients with chronic heart failure. Methods CTnI levels of 114 patients with chronic heart failure were checked. The correlation among cTnI and cardiac function, left ventricular ejection fraction and cardiac structure were analyzed. Results The cardiac function class Ⅳ in patients with CHF cTnI levels were significantly higher than class Ⅲ and class Ⅱ patients (t = 13.23, 9.62, P < 0.01), class Ⅲ patients′ cTnI level were significantly higher than that of class Ⅱ patients (t = 7.54, P < 0.01), and LVEF＜40% patients′ cTnI levels were significantly higher than that of LVEF 40%-50%, LVEF>50% patients (t=18.34, 13.86, P < 0.01). LAD and LVEDd in CTnI elevated group were significantly higher than those of the normal group (t = 6.54, 7.45, P ＜ 0.01), and LVS, LVPW in normal group was significantly higher than elevated group, the difference was statistically significant (t = 16.54, 8.78, P ＜ 0.01). Conclusion cTnI level can reflect cardiac function in patients with CHF, left ventricular ejection conditions and ventricular remodeling situation. It's worthy of promotion and application.
[Key words] Heart failure; Cardiac troponin I; Clinical value
慢性心力衰竭（chronic heart failure，CHF）是一种严重的临床综合征，是目前唯一的发病率仍在上升的心血管病，并且病死率仍然很高[1-2]。研究显示美国有500万心力衰竭患者并且每年以50万的数目在增长，每年死于心力衰竭的患者有30万[3]，在我国随着高血压、冠心病的比例呈明显上升趋势，心力衰竭的发病率也在逐年升高。心肌肌钙蛋白I（cTnI）是诊断心肌损伤的特异性及敏感性指标，是心肌特异性肌钙蛋白的亚基单位，临床上集中用于急性心肌梗死的早期诊断及预后[4-6]，但对于cTnI是在CHF的诊断价值上的研究国内报道较少，为了探讨cTnI在CHF中的应用价值，本研究对114例CHF患者进行了cTnI的检测，现报道如下：
1 资料与方法
1.1 一般资料
选取2009年6月～2011年5月在我院心内科进行住院治疗的114例CHF患者，其中，伴有冠心病37例，高血压性心脏病26例，慢性肺源性心脏病26例，风湿性心脏病16例，扩张性心肌病9例。按NYHA分级，114例心力衰竭患者中，心功能Ⅱ级20级，心功能Ⅲ级68例，心功能Ⅳ级26例。其中，男68例，女46例；年龄46~69岁，平均（53.6±18.6）岁。纳入标准：①符合ACC/AHA中慢性心力衰竭的诊断标准，并且年龄＞18岁，心力衰竭病史＞6个月；②均接受心脏超声检查和血cTnI浓度测定；③签署知情同意书。排除标准：3个月内患急性冠脉综合征、病毒性心肌炎和心包炎急性发作期、心源性休克、肥厚性心肌病、主动脉狭窄、败血症等疾病。
1.2 方法
所有患者入院后认真询问患者病史，评价心功能，于入院后次日清晨空腹抽取肘静脉血，所有标本均于采血后半小时内分离血浆，并立即采用Access全自动微粒子化学发光免疫分析仪夹心ELISA定量法测定患者血清cTnI浓度，参考值为0～0.04 ng/mL；并且采用Backman全自动生化仪检测肌酸激酶同工酶（CK-MB）的含量，CK-MB的正常值＜16 IU/L；超声心动图检查：患者入院后由同一个超声科医师行超声心动图检查，测量左心房直径（LAD）、左室后壁厚度（LVPW）、室间隔厚度（LVS）、舒张末期左心室内径（LVEDd），取心尖标准四腔观切面，采用Simpson法测量并计算左室射学分数（LVEF）。
1.3 统计学方法
采用SPSS 11.5统计学软件包建立数据库，计量资料数据以均数±标准差（x±s）表示，采用t检验，P ＜ 0.05表示差异有统计学意义。
2 结果
2.1 cTnI 水平与心功能分级的关系
心功能Ⅳ级的CHF患者cTnI水平明显高于心功能Ⅲ级和心功能Ⅱ级患者的cTnI水平（t = 13.23、9.62，P ＜ 0.01），并且心功能Ⅲ级患者的cTnI水平明显高于心功能Ⅱ级患者的cTnI水平（t = 7.54，P ＜ 0.01），心功能Ⅳ级患者的CK-MB水平明显高于心功能Ⅱ级患者CK-MB水平（t = 5.37，P ＜ 0.05）。见表1。
表1 cTnI水平与心功能分级的关系（x±s）
注：与心功能Ⅱ级比较，*P ＜ 0.01；与心功能Ⅲ级比较，P ＜ 0.01；与心功能Ⅱ级比较，#P ＜ 0.05
2.2 cTnI 水平与LVEF的关系
以LVEF＜40%、40%～50%及＞50%为界限分析cTnI与LVEF的关系发现：LVEF＜40%的患者cTnI水平明显高于LVEF 40%～50%、LVEF＞50%患者cTnI水平（t = 18.34、13.86，P ＜ 0.01），而各组CK-MB水平变化比较，差异无统计学意义（P ＞ 0.05）。见表2。
表2 cTnI水平与LVEF的关系（x±s）
注：与LVEF 40%～50%比较，*P ＜ 0.01；与LVEF＞50%比较，P ＜ 0.01；与心功能Ⅱ级比较，#P ＜ 0.05
2.3 cTnI与心脏结构的关系
以cTnI标准为0.04 ng/mL，114例CHF患者CTnI正常组32例，cTnI升高组82例，比较两组患者的心脏结构发现LAD和LVEDd在CTnI升高组明显高于CTnI正常组，差异有高度统计学意义（t = 6.54、7.45，P＜0.01）。而LVS、LVPW在CTnI正常组患者中显著高于CTnI升高组患者，差异有高度统计学意义（t = 16.54、8.78，P＜0.01）。见表3。
3 讨论
心脏cTnI的检测是近年来心血管疾病研究领域中的一项重要研究，cTnI分子量较小，心肌损伤后3～6 h cTnI便可以升高，14～20 h达到高峰，血中可持续5～7 d，故cTnI可作为心肌细胞损伤敏感性和特异性最强的标志[7]。但是也有对急性心肌梗死的研究显示，虽然cTnI水平的升高可能是患者正患急性心肌梗死或者不稳定性心绞痛，而对1 047例30岁及30岁以上胸痛患者的cTnI水平进行分析后发现有相当数量的急性心肌梗死患者和心绞痛患者cTnI水平正常，许多cTnI水平水平升高者，却被诊断为CHF。
本研究发现，心功能Ⅳ级的CHF患者cTnI水平明显高于心功能Ⅲ级和心功能Ⅱ级患者的cTnI水平（t = 13.23、9.62，P ＜ 0.01），并且心功能Ⅲ级患者的cTnI水平明显高于心功能Ⅱ级患者的cTnI水平（t = 7.54，P ＜ 0.01），这与cTnI可以反映慢性心力衰竭时心肌损伤的情况，从而可以判断心功能状态有关。进一步分析cTnI与LVEF的关系发现：LVEF＜40%的患者cTnI水平明显高于LVEF 40%～50%、LVEF＞50%患者cTnI水平（t = 18.34、13.86，P ＜ 0.01），这是因为随着心肌的损伤和重构，LVEF不断下降，而作为为心肌细胞损伤敏感性和特异性最强的标志也随之升高，因此，cTnI水平也可以反映慢性心力衰竭时左心室射血情况。且本研究进一步研究发现LAD和LVEDd水平在CTnI升高组明显高于CTnI正常组，这说明cTnI可能与心肌重构关系密切。
综上所述，笔者认为CTnI能够反映CHF患者心功能分级、左室射血情况及心室重构情况，因此可作为临床诊断及评价CHF严重程度的检测指标进行临床推广应用。
[参考文献]
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【关键词】 慢性粒细胞白血病 BCR 融合蛋白 逆转录病毒载体 动物模型
0引言
慢性粒细胞白血病（chronic myeloid leukemia，CML）是一种起源于骨髓内异常多能干细胞的骨髓增殖性疾病，其发病机制复杂，但持续表达的bcr/abl融合基因在该病的形成过程中起重要作用.目前在含有bcr/abl融合基因的细胞模型上进行研究的报道较多. 对CML体内研究的模型主要是基于bcrabl转化的造血细胞株在小鼠体内的定殖，以及用K562细胞移植裸鼠成瘤后，再接种到免疫缺陷型小鼠致白血病的方法［1］.而利用逆转录病毒转染的小鼠骨髓移植模型研究人类白血病细胞的发生、发展及其生物学特性，并用来进行实验治疗，是20世纪90年代以来国外白血病实验研究的新发展［2］，国内尚未见报道.本课题拟探索建立bcrabl逆转录病毒Mig210骨髓转染/移植诱导的小鼠白血病样模型，为后续CML信号通路和治疗机制的研究奠定基础.
1材料和方法
1.1材料BALB/c小鼠，6~12 wk龄，体质量21~23 g， 雌雄各半， 均为清洁级动物，由本校动物中心提供.逆转录病毒载体MIGRP210由美国Warren S Pear教授惠赠.小鼠急性粒单核白血病细胞株WEHI3购于中国医学科学院基础医学细胞中心.RTPCR试剂盒购于TakaRa公司;转染试剂jetPEITM 为Polyplus公司产品;聚凝胺(Polybrene)为Sigma公司产品;抗cabl多克隆抗体、二抗为抗兔IgHRP，羊抗鼠αtubulin mAb，ECL显色试剂盒均购于Cell Signaling公司;rmIL3，rmIL6，rmSCF均购于PeproTech公司.
1.2方法
1.2.1逆转录病毒上清的制备将Mig210和MigRI空载在jetPEITM的介导下转染PhoenixAmpo细胞，36 h后收集第一批病毒上清，72 h后收集第二批病毒上清，用有限稀释法感染NIH3T3细胞计数绿色荧光测病毒滴度，达到1×1011~1×1012IU/L离心过滤，存于-80℃备用.
1.2.2供体鼠骨髓细胞的制备尾静脉注射雄性供体BALB/c小鼠5氟尿嘧啶（5FU），4 d后处死小鼠取骨髓，用DMEM预激培养基（含胎牛血清、WEHI3B细胞上清、青霉素、链霉素、肝素、环丙沙星、L谷氨酰胺、rmIL3，rmIL6和rmSCF）培养24 h后，计数有核活细胞.
1.2.3病毒感染骨髓原代细胞使用含500 mL/L逆转录病毒上清，10 mmol/L Hepes， 2 mg/L聚凝胺，pH 7.4 DMEM培养基，病毒和细胞在20℃，1000 g离心90 min共沉降，2~4 h的吸附后更换培养基，48 h后进行第二轮重复上述的转导和共沉降，吸附2 h后收集细胞，用DHanks洗涤，计数有核活细胞.
1.2.4感染逆转录病毒的骨髓原代细胞的回输雌性受体小鼠照射前5 d接受抗生素直到移植后2 wk，经450 cGy的γ射线照射二次，中间休息3~6 h，照射后分4组，A组15只:输含有Mig210转染的骨髓细胞;B组10只:输含有MigR1空载的骨髓细胞；C组10只:回输经5FU处理4 d后的供体小鼠骨髓细胞；D组10只: DHanks空白对照.E组10只:未经处理的正常对照组.移植后将受体鼠于IVC层流房隔离笼饲养(符合SPF).
1.2.5移植小鼠成模的鉴定
1.2.5.1细胞形态学检查移植后，每隔3 d用剪尾法采血行外周血常规计数和外周血涂片染色分类.第4周开始每周分别取各组1只小鼠骨髓有核细胞，用PBS洗3次后将之分成3份，一份PBS洗后取沉淀涂片染色行形态学检查，一份用于提取总RNA，存于-80℃，一份参照试剂盒提取胞浆总蛋白，Bradford法测蛋白总量后存于-80℃.各组脾和肝脏组织标本也分别处理作相应检测.
1.2.5.2RTPCR检测受体鼠骨髓、脾和肝脏bcr/abl融合基因mRNA的逆转录参照TakaLa RTPCR试剂盒说明书操作步骤得cDNA.人bcr/abl融合基因上游引物为5′GCAAGCTTACCATGGACATCCGTGG3′，下游引物为5′GTCGACCTTGCCATCAGAAGC3′，扩增片段为654 bp. PCR扩增条件：94℃ 8 min，94℃ 1 min，57℃ 1 min，72℃ 90 s， 72℃ 8 min，32个循环. 小鼠的βactin基因的上游引物为5′ACACTGTGCCCATCTACGAG3′，下游引物为5′CACAGGATTCCATACCCAAG3′， 扩增片段为 336 bp.PCR产物电泳后在数字化凝胶成像仪上观察，并做DNA测序.
1.2.5.3Western Blot法检测受体鼠骨髓和脾脏P210蛋白的表达提取骨髓细胞和脾脏组织蛋白， SDSPAGE凝胶电泳分离蛋白后电转移到PVDF膜上，转印膜封闭过夜后，分别加入cabl抗体及rtubulin抗体，再分别加入二抗IgHRP，ECL法显色后于化学发光成像仪上显影并保存图像.
统计学处理：各组数据以x±s表示，采用SPSS11.5统计软件进行t检验.
2结果
2.1受体小鼠存活状态观察经γ射线照射的受体小鼠次日出现畏冷、恐慌、相拥缩成一团，1 wk之内出现体毛蓬松、体质量减轻较快、活动力明显减低等，这些症状在2 wk后逐渐改善. 第3月时A组小鼠皮肤开始出现出血点，第4月后相继死去.其他组小鼠中途未见死亡. 所有经γ射线照射的受体小鼠，3 wk时体质量开始恢复，毛发变柔顺、活动增加、反应灵敏、进食及饮水量增加.
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2.2受体小鼠血液细胞学检查外周血白细胞计数及涂片分类结果发现：经γ射线照射后的小鼠白细胞计数在0×109~0.2×109/L，外周血涂片偶见WBC，Hb，RBC等其它血常规项目与E组相比无明显改变，此后WBC数逐渐增多，第4 wk后A，B，C，D组的WBC数逐渐增加到E组水平（4.5×109~6.0×109/L）， 嗜酸粒细胞和单核细胞也稍有增多；A组到8 wk时WBC总数显著增高，外周血粒细胞明显增高(图1)，血涂片粒细胞比例大于0.65并有幼稚粒细胞出现，到12 wk时WBC数已达到20×109~30×109/L，粒细胞比例达到0.80~0.90(表1)，幼稚细胞甚至到达0.30，单核细胞和嗜酸粒细胞的绝对值也增多.A组小鼠的骨髓象检查发现:移植后第6 wk时骨髓增生活跃，各期的粒细胞系统增生，晚期骨髓增生极度活跃，各期的粒细胞系统显著增生，细胞形态各异，大小不一，易见早期细胞（图2）.
A：A组移植后7 wk； B：A组移植后12 wk； C：E组对照组.
图1小鼠外周血涂片瑞氏染色 ×100（略）
表1A组小鼠移植后外周血涂片白细胞随时间的变化（略）
A：A组移植后8 wk； B： E组对照组..
图2小鼠骨髓涂片瑞氏染色 ×400（略）
2.3小鼠造血组织病理检查A组小鼠在4 wk时脾脏开始增大，晚期有大量白血病细胞浸润(图3)，并侵及肝脏；B，C，D组的肝脾在前4 wk内无差异，由于照射后血液系统受到抑制，脾的大小相对正常组的脾缩小约0.02 g；B，C，D组肝组织切片中细胞有轻微水肿，肝血窦扩大.A组小鼠在移植12 wk后相继出血而死（图4）.
A：A组移植后8 wk； B： E组对照组..
图3小鼠脾组织切片（箭头所指为白血病细胞）HE ×250（略）
2.4RTPCR检测移植小鼠的bcr/abl融合基因第4 wk时RTPCR检测A组受体鼠骨髓细胞和脾细胞有bcr/abl融合基因（654 bp），到第7周时肝组织有bcr/abl融合基因（图5），DNA测序证实序列与Mig210上的bcr/abl融合基因完全符合（图6）.其它组小鼠未检测出bcr/abl融合基因.
A：A组移植后6 wk小鼠； B：E组对照组.
图4小鼠肝脏组织切片（箭头所指白血病细胞）HE ×250（略）
M1:100 bp marker; 1:A组第30日脾; 2:A组第30日骨髓; 3:A组第50日骨髓; 4:A组第50日肝; 5:A组第50日脾; 6:B组第30日骨髓; 7:B组第50日骨髓; 8:B组第50日脾; 9:C组第30日骨髓; 10:C组第50日骨髓; 11: K562细胞阳性对照L; 12: HL60细胞阴性对照; M2:DL2000 Marker.
图5RTPCR检测各组小鼠造血组织bcr/abl融合基因的表达（略）
图6移植小鼠造血组织bcr/abl融合基因阳性片段DNA测序结果（略）
2.5Western Blot法检测移植小鼠P210蛋白表达第5周时用Western Blot法检测到A组小鼠骨髓细胞和脾细胞有P210蛋白的表达，其它组未检测到有此蛋白的表达(图7).
1： A组小鼠骨髓 ； 2： A组小鼠脾； 3：B组小鼠骨髓； 4：D组小鼠骨髓.
图7Western Blot检测移植小鼠P210蛋白表达（略）
3讨论
国际上CML动物的建模方法目前主要有以下四种:①bcr/abl转化的造血细胞株在小鼠体内的定殖模型，主要用于研究bcr/abl融合基因的结构功能和药理试验；②CML原代骨髓细胞移植入免疫缺陷小鼠模型，主要适用于CML祖细胞的移植和生物学特性研究以及抗CML治疗性研究；③bcr/abl转基因小鼠模型，主要用于模拟bcr/abl诱导的淋巴细胞白血病，且成活率低，技术含量高；④bcr/abl逆转录病毒骨髓转染/移植诱导的白血病模型，该模型主要用于研究BCR/ABL不同变异体（P190，P210和P230）和不同结构域（DD区，SH2结合区，Dbllike区，PH区和CalB区等）的致白血病潜能以及不同信号通路在CML发病中的作用［3-4］.结合我国目前CML小鼠模型研究的现状，本课题组构建了bcr/abl逆转录病毒介导的逆转录病毒骨髓转染/移植小鼠CML模型.
鉴于BALB/c小鼠对BCR/ABL诱导的白血病表现出较强的敏感性，而用其他品系的鼠作相似的实验却不能产生类似CML样疾病而最终发展为急性淋巴系白血病/淋巴瘤、巨噬/单核细胞系白血病，故本实验采用BALB/c小鼠品系作为实验对象.此外，因5FU为细胞周期特异性化疗药物，主要杀伤分裂期细胞，从而可增加造血祖/干细胞的相对丰度和转染效率，而目前已有的实验结果已经表明仅被BCR/ABL转染的造血干细胞（HSC）能致CML， 故在本研究中，采用5FU预处理实验小鼠提高HSC 丰度的策略以进一步提高建模成功率［5］.同时，本实验采用具有LTR强启动子的逆转录病毒载体表达P210BCR/ABL，以上这些改进大大提高了建模成功率［5］.与其它几种CML小鼠模型比较， bcr/abl逆转录病毒转导、移植模型系统通过简单地制备不同的病毒颗粒即可相对容易地检测不同形式和不同bcr/abl突变体的致类CML的潜能［2］，但建模过程中的转导/移植程序冗长，工作量巨大；在5FU预处理、骨髓细胞收集、病毒包装和滴度测定、骨髓病毒转导和注射受体鼠等实验步骤均需非常小心仔细. 其次，载体中bcr/abl的表达是通过逆转录病毒的LTR启动子启动的，该启动子是一个比bcr更强的启动子，因此， bcr/abl诱导人类CML疾病模型小鼠的生存期较短［5］，尚不能完全模拟人CML患者在经受离子辐射后需要较长的潜伏期才能发生临床症状的现象.
本研究构建的逆转录病毒转录/移植模型系统可用于以下几个方面的研究: ①比较3种主要bcr/abl变异体－P190，P210和P230的致白血病活性；②比较BCR/ABL融合蛋白不同结构区域含突变的bcr/abl基因的致白血病活性；③检测其它基因的突变对BCR/ABL致白血病潜能的影响.
【参考文献】
［1］ 宋艳秋，刘敏，李薇，等. K562／NODSCID小鼠白血病样模型的建立［J］.中国实验血液学，2007，15(1)：16-19.
［2］ Li S， Ilaria Jr RL， Million RP， et a1.The P190， P210， and P230 forms of the BCR/ABL oncogene induce a similar chronic myeloid leukemialike syndrome in mice but have different lymphoid leukemogenic activity ［J］. J Exp Med， 1999，189(9):1399-1412.
［3］ Million RP， Richard A， Etten V， et al. Van EtteThe Grb2 binding site is required for the induction of chronic myeloid leukemialike disease in mice by the Bcr/Abl tyrosine kinase et al ［J］.Blood， 2000， 96: 664- 670.
李白的简介范文6
3月-2015年3月收治的72例糖尿病合并慢性心力衰竭患者作为观察组，选取同期糖尿病未伴有心力衰竭的72例患者作为对照组；对患者予以重组甘精胰岛素注射及瑞格列奈口服治疗，于治疗前及治疗7、14 d分别检测两组患者空腹血糖、糖化血红蛋白、BNP，并予以比较。结果：用药前，观察组各项指标水平远远高于对照组（P0.05），观察组糖化血红蛋白及BNP水平均明显高于对照组（P0.05），观察组BNP水平明显高于对照组（P
【关键词】 糖化血红蛋白； BNP检测； 糖尿病； 慢性心力衰竭
中图分类号 R587.1 文献标识码 B 文章编号 1674-6805（2016）3-0056-03
doi：10.14033/ki.cfmr.2016.3.030
糖尿病与心血管病症之间存在着密切联系，在心血管疾病的诸多并发症中，心力衰竭也是属于糖尿病患者的一种严重并发症。糖化血红蛋白作为血糖控制的一项关键指标，属于判定糖尿病控制水平的重要基准[1]。就血浆BNP水平来说，则是将心功能状态进行精准反应的一项指标，无论是对于心力衰竭的诊断，疗程及严重程度评价都有巨大价值。本次研究中通过对糖尿病合并慢性心力衰竭患者及糖尿病未心力衰竭患者各项指标进行比较，探讨糖化血红蛋白及BNP检测的应用意义。
1 资料与方法
1.1 一般资料
选择笔者所在医院于2014年3月-2015年3月收治的72例糖尿病合并慢性心力衰竭患者作为观察组，选取同期糖尿病并未伴有心力衰竭的72例患者作为对照组；均排除伴有严重心、肺、肾及血液系统病症者；患者均为2型糖尿病，且糖尿病病史超过1年；观察组中男40例，女32例，年龄45～76岁，平均（61.3±2.5）岁；对照组男38例，女34例，年龄43～75岁，平均（60.5±2.3）岁；两组患者各项数据资料比较差异均无统计学意义（P>0.05），具有可比性。
1.2 方法
1.2.1 仪器选择 使用罗氏全自动生化仪进行检测分析；瑞格列奈（江苏豪森药业股份有限公司，国药准字H20000362）；重组甘精胰岛素（甘李药业股份有限公司，国药准字S20050051）。
1.2.2 治疗方法 观察组和对照组患者在停用原有口服药的基础上，予以瑞格列奈口服，初剂量为0.5 mg/次，2次/d，于餐前口服；同时每晚10点注射10 U重组甘精胰岛素；并依据患者不同的血糖控制情况相应调整重组甘精胰岛素的注射剂量；若患者血糖超过7.0 mmol/L，则注射量增加3 U，每日调整1次，持续治疗1个疗程（14 d），直至将患者血糖控制到低于7.0 mmol/L。
1.3 观察指标
于用药后治疗前及治疗7、14 d，检测患者空腹血糖、糖化血红蛋白、BNP水平。
1.4 统计学处理
采用SPSS 20.0软件对所得数据进行统计分析，计量资料用均数±标准差（x±s）表示，比较采用t检验；P
2 结果
于治疗前、治疗7 d、治疗14 d，分别对患者空腹血糖、糖化血红蛋白及BNP值进行检测，治疗前，观察组各项指标水平远远高于对照组（P0.05），而在糖化血红蛋白及BNP水平方面均明显高于对照组（P0.05），观察组BNP水平明显高于对照组（P
3 讨论
糖尿病多发于中、老年人群，属于该人群中的主要多发、严重病症，且近些年来，糖尿病的发病率也逐渐呈上涨的趋势，糖尿病患者中心力衰竭的发病率要比普通人群心力衰竭的发病率高，有相关数据表明，约有一半的心力衰竭患者都同时患有糖尿病[2]。
表1 治疗前患者各项指标水平比较
组别 空腹血糖
（mmol/L） 糖化血红蛋白（%） BNP
（pg/ml）
观察组（n=72） 13.2±2.4 12.1±2.3 350.4±15.5
对照组（n=72） 8.0±1.7 8.7±1.5 89.6±7.6
t值 7.907 5.537 67.563
P值
表2 治疗7 d患者各项指标水平比较
组别 空腹血糖
（mmol/L） 糖化血红蛋白（%） BNP
（pg/ml）
观察组（n=72） 10.2±3.1 11.3±1.4 305.1±10.7
对照组（n=72） 9.2±1.5 7.5±1.1 78.3±8.1
t值 1.299 9.545 75.579
P值 >0.05
表3 治疗14 d患者各项指标水平比较
组别 空腹血糖
（mmol/L） 糖化血红蛋白（%） BNP
（pg/ml）
观察组（n=72） 7.0±0.8 7.5±0.6 256.7±12.3
对照组（n=72） 6.8±1.2 7.1±0.8 76.2±7.4
t值 0.930 1.789 56.141
P值 >0.05 >0.05
通过糖化血红蛋白水平的检测，是将患者近几个月平均血糖水应出来的重要指标，用来评估其长时间血糖控制的状况、是否需要相应的转换治疗方案等都有重要的临床依据。若糖化血红蛋白水平每下降1%，则相应的糖尿病患者死亡概率就会下降20%，甚至更多，伴发心肌梗死的概率则会下降15%左右，这也说明糖化血红蛋白已经成为诊断糖尿病的一项重要标准[3]。但糖化血红蛋白水平作为诊断糖尿病及血糖监测的一项重要指标，由于受到诸多方面例如种族的不同多少会受到一定限制，在临床上对其是否作为重要判别指标仍存在较大分歧。但不排除糖化血红蛋白已经成为检测糖尿病的重要指标。BNP水平则是临床上公认的、判定心力衰竭危险程度的一项重要标准，借助于BNP对患者是否伴有心力衰竭进行评定，其准确率要远高于使用普通仪器进行检测出的准确率，精准度可以达到70%以上[4]。
本次研究旨在借助于注射重组甘精胰岛素联合口服瑞格列奈，对糖尿病及糖尿病合并慢性心力衰竭患者的糖化血红蛋白及BNP水平进行分时间阶段的检测，并就其对两组患者糖化血红蛋白及BNP水平带来的影响进行研究。
相关数据表明，重组甘精胰岛素联合瑞格列奈口服治疗2型糖尿病，可显著控制及降低患者血糖及糖化血红蛋白水平，通过白蛋白、甘精胰岛素两者的有效结合，抑制甘精胰岛素的吸收，促进胰岛素作用时间的延长，继而起到降低血糖的作用[4]。在本次研究中，通过重组甘精胰岛素联合瑞格列奈口服治疗，研究结果表明，可大幅度降低患者血糖及糖化血红蛋白水平。对照组患者的BNP水平并未见有受到严重影响，相反观察组患者的BNP水平得到大幅度降低，可能是心力衰竭受到了其他因素的影响，仅患有糖尿病患者若两药联合使用不会影响到BNP水平。观察组患者治疗前、治疗7 d及治疗14 d时，其糖化血红蛋白及BNP水平的相关性也逐渐降低。也就是说，糖尿病合并慢性心力衰竭患者的糖化血红蛋白水平愈高，其BNP水平也就会愈高。
综合来看，糖尿病合并慢性心力衰竭患者的糖化血红蛋白水平愈高，其BNP水平也就愈高，患者心力衰竭等级也会随之增长，提高患者住院概率。基于此，可以通过从根本上控制患者糖化血红蛋白水平来控制和降低患者因心力衰竭诱因而住院的概率。
参考文献
[1]董虹，刘天春，周莉，等.糖化血红蛋白和BNP检测在糖尿病合并慢性心衰患者中的临床意义分析[J].长江大学学报（自科版）医学下旬刊，2014，11（8）：95-97.
[2]史格，包国祥.糖尿病心肌病患者糖化血红蛋白、同型半胱氨酸和B型脑钠肽检测及临床意义[J].全科医学临床与教育，2014，12（1）：12-15.
[3]张源.急性冠脉综合征患者糖化血红蛋白水平与心功能的相关性研究[J].中国医药导刊，2012，14（5）：869-870.
