前言:中文期刊网精心挑选了相伴到老范文供你参考和学习,希望我们的参考范文能激发你的文章创作灵感,欢迎阅读。
相伴到老范文1
外婆经常说,女孩子,不要太吵闹,要安静。所以有那么一次,我蹦到桌子上又哭又闹,外婆一直喊着:“不要吵不要吵,你安静点好不好?”外婆把我按在桌子上,打了我的屁股。挨完打,家里最小的舅舅跑来说:“葭葭你呆了这么久怎么都不明白啊,外婆最怕吵了。”
外婆的孩子,舅舅、小姨、包括妈妈都是安静的孩子。外婆身边不安静的人,除了我,还有外公。
记得那一次外公带我去看电影《天书奇谭》,电影院里、回家路上,两个兴高采烈的小孩。外公说他生来就是说话大声的粗心男子,当初第一次看见外婆,觉得那姑娘长得温柔好看,怎么结了婚她那么爱静呢?连大声说句话她都嫌吵!
外婆把家里每一样东西都放得妥帖,可是轮到外公找,总是找不到。于是屋子里便都是外公翻东西的声音。
外公70岁时,耳朵渐渐听不见了。每一个人都必须跟他大声地讲话,可是即便这样,他还是听错。于是我们总能看见外婆站在外公身边,看着他把电视音量调到最大;看着他把收音机音量调到最大;这样看着看着,外婆的抱怨越来越多。
“你这死老头子,都是你,把家里弄得这样吵!”外婆骂着外公。
外公75岁的时候,连这句骂声都听不见了。于是我们看到外婆一脸怒气地瞪着外公,骂着什么,而外公一无所知地,慢慢从她身边走过。
那一年外公生日,舅舅送了他西门子助听器。吃完饭,听完外婆的抱怨,外公忽然跟我说:“其实有时候我能听见。可你看你外婆脾气这么坏,就让她骂骂好了。”
听不见外婆说话的外公,把电视机音量开到最大的外公,总能记得在外婆看连续剧看得入迷的时候,给有关节炎的外婆膝上盖毯子。阳光充沛的下午,外婆不想和外公大声地讲话,在外公前面兴兴头头地走着,外公则慢慢跟在她身后。
外婆买了肥肥的大红枣,外公上去拎住;外婆买了圆圆的桂圆,外公上去拎着;外婆买了一大瓶百事可乐……有段时间,我总抱着百事可乐喝,有一天外公看着我,忽然问:“真的好喝吗?”我给外公尝了一口。没想到那一年74岁的外公,居然爱上百事可乐。于是每年过年过节的全家宴上,外婆总要抱怨:“他一个老头子,居然和这些孙子争可乐!”
外婆是那么喜欢安静,所以到后来,他们总是这样一前一后地走着。
2005年底,外公80岁。某天,走在前面的外婆忽然间那么一回头,发现外公不见了。就在上一个路口,外公躺在地上。
外公高血压加重,住进医院。外婆每天早上6点起来到医院,晚上9点回去。妈妈担心外婆一个人在家,说要过去陪她。外婆说不用了,这样的安静,她求之不得呢。这样的安静持续了一个月。外公还是躺在医院。我们去看外公,他静静地躺在病床上,醒着的时候,听着我们在他床边说话。
那个时候,外公微笑着。外婆说:“现在这老头子安静了。”
那个周末晚上10点,我拿着妈妈给的钥匙,悄悄打开外婆的家门。
一进门我就呆住了。客厅的灯那么明晃晃地亮着,电视机的音量调到了最大,连收音机都开了……外婆独个儿坐着,看着电视。一回头,她看见了我。外婆并没有哭,她只是像个小孩子,一个劲儿问我:“你说你外公会不会死啊?”我说不会的不会的,我抱住了我的73岁的老外婆。然后我听见喜欢了一辈子安静的外婆说:“如果没你外公陪着,这样的安静真让人受不了啊。”
相伴到老范文2
一部曲:我与家长面对面
刚参加工作时,为了和更多的家长取得联系,我唯一盼望的就是家长会。但家长会期间,更多的时间是班主任说“单口”,是没有多少机会和家长单独交流的。于是,为在工作中能够得到更多家长的理解与支持,我就只好到学生家中进行家访或请家长到学校,与家长面对面交流孩子的情况。虽然辛苦,但伴随着一次次成功家访的进行,我和学生家长的沟通越来越密切,我对学生的要求、我的教学方法,也随之得到了更多家长的理解和信任。同样是面对农村的孩子,我所带的班级,只要有需要家长的配合的,几乎是有求必应。
二部曲:小小电话传心声
随着人们生活水平的提高,电话也越来越普及,大约到2000年,我也才舍得为自己购买了手机。拿到手机的那一刻,我首先想到的是,以后和家长联系,可就方便多了。干工作这么多年,每每接手一个新的班级,统计家长通讯录是我开学第一天的首要工作,此后,给家长打电话便成了我的家常便饭。有时因为孩子思想有问题和家长联系,有时因为孩子学习情况和家长联系,有时因为孩子参加活动和家长联系。这其中,我最喜欢的还是发现孩子点滴的进步的时候和家长联系;因为,这是家长最喜欢和老师聊的话题,孩子进步了,家长自然高兴,在这种情况下,老师再跟家长提配合老师教育好孩子的要求,自然轻松了很多。尽管我们教师注定一生清贫,但我却从来没有因为心疼电话费而节约几分钟的通话,因为,有失必有得,在我“浪费”电话费的同时,我收获的却是一笔无价的精神财富。
三部曲:网络信息家家通
又是10年过去了,为将家校沟通工作做得更加扎实有效,我在全校率先使用QQ飞信的方式与家长交流。因为我们面对的大部分都是农村家长,这件事才做起来并不是一件容易的事情。我首先召开家长会,向家长讲明白,开通飞信是不需要家长交费的,而且在更多的时候,家长只需要查看飞信而不需要回复;然后,我再现场操作给家长看,指导他们如何开通飞信。就这样,我们班的第一个飞信群就成立了。每天放学后,我及时向家长发送作业内容及要求,有利于家长有针对性地辅导学生的作业;学校有什么活动,我及时向家长发飞信,家长第一时间了解情况,然后和孩子一起做好准备;哪些孩子表现好了,有进步了,我就个别给家长发短信,及时对孩子提出表扬;哪些孩子参加活动获奖了,我就第一时间为家长发送贺信。这一举动,不仅得到了更多学生家长的认可,也得到了学校领导的表扬。老师们看到我这样做很好,但因需要指导学生家长逐个加入,怕操作起来太麻烦。于是,我迅速将自己的做法整理出来,发到自己的博客上让全校的教师共享。
相伴到老范文3
[基金项目] 国家自然科学基金项目(81202867)
[通信作者] *郭巧生,Tel:(025)84395980, E-mail:;*赵桂华,Tel:(0511)87290298, E-mail:
[摘要] 以老鸦瓣鳞茎芯芽和子茎(芽茎顶端膨大形成的子鳞茎)为外植体,探索噻苯隆(TDZ)和α-萘乙酸(NAA)诱导老鸦瓣外植体直接成芽的方法,建立老鸦瓣器官途径丛生芽组培体系。研究结果表明,芯芽和子茎在MS+TDZ 2.0 mg・L-1+NAA 2.0 mg・L-1和MS+TDZ 2.0 mg・L-1+NAA 4.0 mg・L-1培养基中可直接诱导不定芽,芽诱导率分别为72.92%,79.22%;利用子茎不定芽在MS+TDZ 0.2 mg・L-1+ NAA 0.2 mg・L-1培养基中可进行丛生芽增殖,增殖系数2.23,形成的芽体健壮,叶色嫩绿;增殖后的丛生芽在含有IBA 1.0 mg・L-1的MS培养基中即可生根,生根率52.6%,平均3~5条根。利用老鸦瓣芯芽和子茎,筛选出了老鸦瓣芯芽和子茎直接诱导不定芽及丛生芽增殖和生根的最适培养基,建立了器官途径丛生芽组培体系。
[关键词] 老鸦瓣;芯芽;子茎;不定芽;丛生芽;组织培养
老鸦瓣Tulipa edulis (Miq.) Baker 为百合科郁金香属多年生药用植物,生长在山坡草地及路旁,在我国主要分布于辽宁、山东、江苏、浙江、安徽、江西、湖北、湖南和陕西等地,朝鲜、日本也有分布[1]。中药材光慈姑为其地下鳞茎去掉膜质皮及绒毛后的干燥鳞茎,味甘辛,性寒,有毒,具有散结化瘀之功,主治咽喉肿痛,瘰疬,痈疽,疮肿,产后瘀滞[2]。光慈姑药材主要来源于野生老鸦瓣,由于近年来发现其在乳腺疾病等方面的显著治疗效果[3],导致中药产业对光慈姑的需求激增,加上药农无节制的采挖,使得野生资源日渐枯竭[3-6]。光慈姑生理生物学特性及栽培繁育等方面的研究,为人工栽培奠定了一定基础,但种苗繁育问题仍是其规范化栽培的主要障碍。组培方面的初步研究,是以老鸦瓣全鳞茎和芯芽[7]、及芯芽产生的芽茎[8]为外植体,建立了组培苗体系。但组培苗因其较低的驯化移栽成活率无法满足生产需求;而试管鳞茎因有较强的适应环境和抗逆能力,成为衔接组培微环境和大田生产的有效途径。本试验对老鸦瓣鳞茎打破休眠后的芯芽及芽茎产生的子茎进行离体培养,研究外植体直接成芽以及丛生芽的继代增殖,以期为建立老鸦瓣试管鳞茎的离体快繁体系提供依据。
1 材料
供试材料为处于休眠期的老鸦瓣鳞茎,重约2.0 g/个,采自安徽省阜南县,经南京农业大学中药材研究所郭巧生教授鉴定为老鸦瓣T. edulis。
2 方法
2.1 基本培养基和培养条件 基本培养基为MS培养基分别附加琼脂6.3 g・L-1,蔗糖30 g・L-1,pH 5.8,经121 ℃高温灭菌20 min,如无特殊说明,培养温度为(25±2) ℃,光照强度2 000 lx,光照时间12 h・d-1。
2.2 鳞茎预处理 采自安徽省阜南县的老鸦瓣鳞茎,洗去泥沙,沥干水分,以400倍液50%多菌灵可稀释粉剂浸泡处理20~30 min,清水洗去药液,室内晾3~5 d。将鳞茎与灭过菌的潮湿的细河砂(河砂先经135 ℃干热灭菌4 h,湿沙含水量约6%~8%)以1∶3混匀,装于自封袋中,不完全密封以透气。分别放置在自然室温、0~2 ℃下沙藏处理80~120 d,定期查看水分情况,拣出霉烂者。
2.3 外植体消毒 沙藏老鸦瓣鳞茎,除去绒毛层,饱和洗衣粉溶液清洗3次,用解剖刀将鳞茎剖开,分成2块完整的鳞片和带基部芯芽。先经饱和洗衣粉溶液清洗3次,流水冲洗2 h。移至超净工作台,于75%乙醇浸泡30 s,无菌水冲洗3次,再用0.1% HgCl2[含数滴聚氧乙烯脱水山梨醇单油酸酯(吐温-80)]消毒15~20 min,无菌水冲洗4~5次,吸干水分。
2.4 更新鳞茎、鳞片等外植体直接诱导不定芽 取自然沙藏老鸦瓣蕾期更新鳞茎、蕾期鳞片和0~2 ℃沙藏老鸦瓣鳞茎的冷藏鳞片、芯芽、膨大期的芽茎顶端子茎为外植体,将鳞茎剥离成2块完整鳞片和带基部芯芽,膨大初期的芽茎顶端子茎则带外皮消毒。
将以上切下的各部分,按照2.3所示方法消毒后,接入MS培养基2周后获得无菌外植体,转入A1~A10各不同培养基,芯芽为基部插入培养基、鳞片凹面朝下接入培养基、子茎则连同芽茎段切口水平接入培养基。每处理接种20个外植体(A6,A7处理各接种12块),均重复3次。3个月后统计不同外植体在各培养基中的诱导分化情况。激素和外植体处理组合为利用均匀设计软件生成,见表1。
2.5 芯芽外植体直接诱导不定芽 以自然沙藏转4 ℃冷藏后的生根至萌芽期的老鸦瓣鳞茎芯芽为材料,考察NAA质量浓度为1.0 mg・L-1时,不同质量浓度TDZ(0,0.5,1.0,2.0,4.0 mg・L-1)对芯芽诱导不定芽的影响;再以即将进入生根期的老鸦瓣鳞茎芯芽为材料,在TDZ质量浓度为2.0 mg・L-1时考察不同生长素NAA质量浓度(0,0.5,1.0,2.0 mg・L-1)对芯芽诱导不定芽的影响。培养条件除进行遮光暗培养外,其他同初代诱导。每处理重复2次。3个月后统计不定芽诱导情况。
2.6 不定芽增殖 将子茎侧生丛生芽诱导验证实验中得到的子茎侧生丛生芽连带子茎少量基部切下,分割成3~5个小芽一簇,接入各芽增殖培养基中,进行芽继代增殖。每处理接种12个小芽丛,重复3次。定期观察记录芽生长状况,3个月后,计算芽增殖系数。
2.7 试管苗生根 将增殖后的丛生芽分成3~5个芽一簇,高3 cm左右的小芽丛,接种于D1(MS+IBA 1.0 mg・L-1),D2(MS+NAA 0.5 mg・L-1),D3(1/2MS+IBA 1.0 mg・L-1),D4(1/2MS+NAA 0.5 mg・L-1)生根培养基中。 每处理接种15丛小芽,重复3次。45 d后查看苗生长状况,统计生根率。
2.8 数据统计 实验所得数据用Excel和SPSS 18.0软件处理。
愈伤组织率= 形成愈伤组织的外植体数/接种外植体数×100%
不定芽或子茎率=形成的不定芽或子茎的外植体数/接种外植体数×100%
侧生总不定芽率=有侧生不定芽的外植体数/接种外植体数×100%
环生或簇状丛生芽率=有环生或簇状丛生芽的外植体数/接种外植体数×100%
平均芽数(子茎数)= 形成的芽(或子茎)总数/产生芽(或子茎)的外植体数
增殖系数=增殖后芽总数/接入的芽总数
生根率=生根的芽丛总数/接种的芽丛数×100%
3 结果
3.1 外植体直接诱导不定芽 研究结果表明,外植体能否直接诱导不定芽形成,取决于培养基中添加的生长调节物质、外植体取材时期、取材部位和自身的生理状态。冷藏鳞片和蕾期鳞片,虽然都取自老鸦瓣鳞茎,但二者诱导结果差异显著,见表2。冷藏鳞片接入培养基中,形成不定芽或子茎概率较小(A5,A8);而蕾期鳞片虽有一定的不定芽或子茎率,但也仅限于少数鳞片上长出单个鳞芽或小鳞茎(A6,A7)。二者的差别在于,前者的鳞茎处于生根萌动时期,后者鳞茎处于生殖生长旺盛时期;取材时期的差别,再加上鳞片自身所含的高淀粉量,以及沙藏鳞茎导致鳞片消毒彻底比较困难,最终造成鳞片在培养基中启动培养率低。更新鳞茎与培养基接触的部位是鳞茎基部,接种后慢慢裂开,露出芯芽,培养2个月后,芯芽上长出不定芽,因此也仅有少量的不定芽形成。芯芽外植体取自打破休眠的老鸦瓣鳞茎,自身的细胞组织活跃,接入培养基后,能迅速启动,逐渐变绿,基部容易长出愈伤组织和不定芽(A9,A10)。
子茎外植体取自芽茎顶端膨大期,正处于发育成新鳞茎时期,生理状态活跃,并且带外皮消毒,受消毒剂的毒害作用小,接入培养基(A1,A3)后,基部会形成环状丛生、紧密排列的不定芽,具有较高的芽诱导率,由此子茎是直接诱导不定芽的适宜外植体。根据试验结果,运用均匀设计软件对不定芽得率进行外植体和激素配比优化,得出子茎外植体在MS+TDZ 2.0 mg・L-1+ NAA 4.0 mg・L-1的培养基中具有最优的不定芽得率68.99%。验证试验结果表明,子茎诱导不定芽得率为72.92%,说明验证结果符合预期优化值。虽然芯芽和蕾期鳞片也可以诱导出不定芽,但综合考虑外植体消毒、取材难易程度及材料的利用度等方面,最终确定子茎为最佳外植体,并且在含有TDZ 2.0 mg・L-1,NAA 4.0 mg・L-1的MS培养基中诱导不定芽效果最好。
3.2 芯芽外植体直接诱导不定芽 以老鸦瓣鳞茎打破休眠后的芯芽为外植体,取材统一,生理时期相同。并且由于芯芽鳞片的包裹,相对于鳞片和子茎等污染较少,消毒容易,启动培养率更高。因此芯芽是除子茎外适宜诱导不定芽的外植体。芯芽接种1个月后,幼叶从内部长出,近基部形成少量乳突状新生不定芽原基,继续培养一段时间后,芯芽近基部形成环生或簇状丛生的不定芽。
在NAA质量浓度为1.0 mg・L-1时,随着TDZ浓度的升高,侧生丛生不定芽率和平均芽数都呈先增加后降低的趋势;以TDZ质量浓度为2.0 mg・L-1时芯芽诱导侧生丛生芽率最大,平均芽数最多。当TDZ质量浓度为4.0 mg・L-1时芯芽诱导侧生丛生不定芽率下降,芽数减少。可见芯芽诱导不定芽时,TDZ的最适质量浓度是2.0 mg・L-1。试验发现芯芽接种1个月后即有丛生不定芽产生,说明老鸦瓣鳞茎由自然室温沙藏转至低温处理后,可促进鳞茎打破休眠,得到的芯芽生理状态较好,见表3。
以TDZ质量浓度为2.0 mg・L-1,考察NAA浓度变化对芯芽诱导不定芽的影响,见表4。当TDZ浓度不变时,不论NAA的浓度高低,都有很高的侧生不定芽形成率。当NAA浓度为2.0 mg・L-1时,平均芽数和环生或簇状丛生芽率都达到最大,但侧生不定芽率有所降低;可见TDZ存在的条件下,NAA浓度稍高有利于环状或簇状丛生芽的诱导。而实际培养中,环生或簇状丛生芽不利于芽丛切分单芽,继代增殖容易长畸形粘连的芽,侧生不定芽呈独立状,有利于切分单芽进行芽增殖。因此,选择NAA质量浓度为2.0 mg・L-1,配合TDZ使用,较为合适。本试验还发现丛生芽诱导历时较长,可能与芯芽尚未完全打破休眠有关。因此,以芯芽为外植体时,应该将老鸦瓣鳞茎沙藏后低温处理,以提高芯芽的生理活性;芯芽诱导不定芽的适宜培养基为MS+TDZ 2.0 mg・L-1+ NAA 2.0 mg・L-1。
3.3 不定芽增殖 将子茎基部不定芽切分后,接种到4种芽增殖培养基中,3个月后,统计高于0.5 cm的芽,见表5。在各增殖培养基中,都有芽增殖的现象,其中以C1处理(TDZ 0.2 mg・L-1,NAA 0.2 mg・L-1)的丛生芽增殖效果最好,增殖系数2.23,芽体健壮,呈纺锤形独立芽。当TDZ质量浓度较高(2.0 mg・L-1)时,增殖的芽多偏畸形,可能是由TDZ很强的细胞分裂素作用,而此时生长素NAA浓度较低,造成分化和生长不均而变成畸形,也可能是由于子茎初代诱导不定芽阶段使用的TDZ和现阶段使用的TDZ同时聚集在此发挥了“激素累积”作用。由此看来,TDZ作用下子球形成的丛生芽增殖时,适宜较低浓度的TDZ和低浓度的NAA。所以,适宜的子茎丛生芽增殖培养基为MS+ TDZ 0.2 mg・L-1+NAA 0.2 mg・L-1。
3.4 生根培养 丛生芽转入生根培养后,因培养基的成分不同,生根效果不同。4种培养基都能生根,但以MS+IBA 1.0 mg・L-1处理有最高的生根率52.6%。1/2MS 培养基中,丛生芽基部多生乳白色、细长的毛细根;MS培养基中所生的根比1/2MS培养基中所生的根,稍粗稍短,且平均根数3~5条。实验发现各处理诱导生根的时间都稍长,可能与外植体来源和材料本身生根能力差异有关。由于本研究是为老鸦瓣组培苗诱导试管鳞茎建立基础,可不需生根培养,所以在此未进行生根培养见图1~3。
4 讨论
植物组织培养中,经外植体诱导愈伤组织,进而分化出不定芽的途径,因其比较高的繁殖系数,已经应用的比较广泛。本研究采用老鸦瓣子茎或芯芽外植体直接诱导不定芽,继而进行丛生芽增殖的途径,省去了外植体诱导愈伤组织,再由愈伤组织分化出不定芽的阶段,既避免了因诱导愈伤组织时可能产生的变异,又缩短了由外植体到组培苗的整个诱导周期,成为继由老鸦瓣芽茎诱导愈伤后分化不定芽[8]的另一条途径。
郁金香组织培养中,已有研究发现由鳞片直接再生芽是最佳的繁殖途径[9],也有研究使用花托、花茎[10]、鳞片[11-12]作外植体,直接诱导小鳞茎,平均每块外植体直接再生小鳞茎10个以上。Nishiuchi[13]研究发现使用2,4-D和KT,郁金香鳞片在试管中可直接诱导不定小鳞茎。这种器官诱导效应的不同,可能与植株的发育时期有关[14]。本实验中,也发现类似的结果由鳞片上直接诱导出小鳞茎或不定芽,但数量较少,可能是鳞片中淀粉含量比较高,细胞组织活力较低,启动培养需要的时间较长的原因。
邴其忠[7]曾使用6-BA和NAA共同作用诱导光慈姑全鳞茎和芯芽产生愈伤组织,再分化出不定芽。而Podwyszyska等[15-16]早期研究发现,在培养基中添加TDZ以代替6-BA和2iP,可以明显的提高花茎外植体上初代再生结果;几乎100%的花茎外 植体,在2~3个月里,都能再生出多于10个的芽。而单独使用TDZ或NAA,形成的胚状体结构较少。目前研究表明TDZ能引起类似细胞分裂素作用,活性强于6-BA[17]。这种高活性的分裂素通常用来离体培养的建立和有难度物种的增殖,有效的提高愈伤组织、不定芽或者胚的形成[18]。本试验中使用的外植体主要为子茎,其特定的形成方式和含有的物质成分,使其启动培养花费的时间较长[7]。因此选择TDZ为主要激素,与NAA配合使用,以诱导老鸦瓣子茎产生环生簇状丛生芽。但是在培养过程中,长时间使用高浓度TDZ(2.0~4.0 mg・L-1)会诱导叶片发生变化,形成扁平状叶或畸形结构[15-16],本试验也验证了这点。所以在今后的研究中应注意TDZ的使用浓度。
老鸦瓣冷藏芯芽产生的芽茎诱导愈伤组织后分化出的丛生芽,因纤细而看起来略显柔弱,而芯芽和子茎在TDZ作用下产生的丛生芽,芽体短而粗壮,色泽嫩绿,生长旺盛,可为下步试管鳞茎诱导工作提供更多组培苗,这样既拓展了初代诱导外植体的来源,也丰富了培养途径,有利于研究试管鳞茎的发生途径。试管鳞茎代替试管苗,作为组培微繁殖和大田生产衔接的关键环节,省去了炼苗环节,能增加抗逆性、提高移栽成活率,有着不可忽视的作用。目前已经诱导出老鸦瓣组培苗,下步工作重点是试管鳞茎诱导以及诱导出的试管鳞茎移栽萌发。
[参考文献]
[1] 中国科学院中国植物志编辑委员会.中国植物志.第14卷[M].北京:科学出版社,1980:89.
[2] 河南省中药材标准[M].郑州:中原农民出版社,1991:34.
[3] 吴正军,朱再标,郭巧生,等.老鸦瓣传粉生物学初步研究[J].中国中药杂志,2012,37(3):293.
[4] 吴正军,朱再标,郭巧生,等.老鸦瓣种子生理及其萌发特性研究[J].中国中药杂志,2012,37(5):575.
[5] 徐红建,朱再标,郭巧生,等.光强对老鸦瓣生长发育及光合特性的影响[J].中国中药杂志,2012,37(4):442.
[6] 杨龙.光慈姑生物学特性及栽培技术的研究[J].安徽农学通报,2005,11(4):143.
[7] 邴其忠.光慈菇引种栽培及离体培养技术[D].北京:中国协和医科大学,2008.
[8] 朱丽芳,史俊,朱再标,等.老鸦瓣芽茎组织培养初步研究[J].中草药,2014,45(4):563.
[9] 胡新颖,王锦霞,代汉萍,等.郁金香鳞片组织培养研究[J].沈阳农业大学学报,2007,38(3):304.
[10] 杨永刚,代汉萍,胡新颖,等.郁金香器官离体培养再生小鳞茎的研究[J].园艺学报,2006,33 (5):1133.
[11] 尹新新,杨瑞卿,金建邦,等.郁金香组织培养技术[J].江苏农业科学,2010(5):85.
[12] 王丽娟,,赵越.郁金香快速繁殖技术的研究[J].北方园艺,2003(4):75.
[13] Nishiuchi Y.Studies on vegetative propagation of tulips Ⅳ regeneration of bulblets in bulb sacle segments cultured in vitro[J].J Japan Soc Hort Sci,1980,49:235.
[14] 陆文梁,王雪洁,郭仲琢.郁金香组织培养器官分化的研究[J].园艺学报,1986,13(1):55.
[15] Podwyszyska M,Agnieszka M.Effects of thidiazuron and paclobutrazol on regeneration potential of tulip flower stalk explants in vitro and subsequent shoot multiplication[J].Acta Soc Bot Pol,2003,72(3):181.
[16] Podwyszyska M,Sochacki D.Micropropagation of tulip:production of virus-free stock plants[M].Poland: Humana Press,2010,243.
相伴到老范文4
还记得我们一起
相伴到老
你是风花雪月的主角
我充当旁白祈祷
水流漫过我的裙角
我不知道 该向哪逃
捧着你给我的问候
看着月落乌啼的孤单
你说过爱只不过是个游戏梦一般
为什么我不能释然
海中心 心中月
潮来潮去转眼消云散
凤中花 花中影
不知道人间有几环
午夜的月黑风高
挡不住寂寞的暗潮
相伴到老范文5
我们六位老友第一次相伴骑自行车去了离县城5公里的弯岭山庄。我们讲过,要慢慢欣赏山庄风光,还要集中打气排球、羽毛球,在幽雅的环境中锻炼身体,做有氧运动,放松身心。这一天,我们玩得挺开心,也觉得挺有意思。
县城里接连发生了两起老人因搓麻将久坐后站起突然倒下猝死的事,让我们几位常在一起搓麻将的老友意识到了久坐的危害性。于是,在老黎倡导下,一致决定改变娱乐方式:时常相伴去郊外游玩,以此锻炼身心,开阔视野,放松心情,陶冶情操。这次游玩当天还形成了个共识:日后相伴出游轮流作东。这次老黎请客,共210元。
之后我们几乎每个星期都相伴出游一次。很快,我们每人都作了一次东。待再次轮到老黎作东时,老黎提出请大家到离县城二十公里的三岔湾风景区游玩,老刘则说不愿去了。我们只好五个人去。那天碰着老刘的老伴,我逗她:“怎么把老刘管得这么严,不让他随我们去玩了。”她性格直爽:“是他自己不愿意去,他说上次他作东时一下就花去258元,千来元的工资用去了近三分之一,感觉心痛的他自己不愿意去,别怪我呀!”我突然意识到,这样轮流作东也不太好,因我们六人中就有四人从工人岗位上退休,月工资千来元,如果一次让他们拿出三两百元钱来,一方面可能舍不得,另一方面确实难承受,再是每次出游花费有差异,一把两次可以,多了可能会心理不平衡,如此会影响玩兴,也会影响参与玩的积极性,难以长久集中相伴玩下去。如果实行AA制,每次每人该承担多少就承担多少,这样一次也就几十元,当然舍得了,把一次性承担分开来,就会感觉轻松,也会感觉合理,轻松了就能玩得更舒心更积极。第二天与老友们相聚时我即提出这个建议,大家都觉得如此好些,日后出游就按此进行。当我提出AA制去高岩山风景区玩时,老刘满口答应了。
我们又实现了每个星期相伴出游一次的计划。一年多下来,我们不仅走完了县城的山庄及其它好山好水,有的地方我们还连去了两三次,目的是为了享受那里的好山好水好空气,还因为那里有好的运动场所让我们打球。如今,我们又开始扩大旅游圈,决定每个星期骑自行车去游县城内的一个乡镇,慢慢来扩大旅游开阔眼界。
享受着骑车旅游给我带来快乐的同时,我想,如果不及时改为出游费用AA制,我们就很难团结一致将旅游运动坚持到底。
相伴到老范文6
2、你说人山人海边走边爱怕什么孤独,我说人潮汹涌都不是你该怎么将就。
3、不要过于对我承诺,不要执意给我思念,尽避思念是一种美丽,承诺也不是无心,千万不能让我感觉你的淡薄。
4、离开了你,我的心就停止了跳动;看不见你,我的眼睛就会失明;拉不到你的手,我的手就失去温度;看不见你的笑,我的世界就只有黑暗!
5、望眼欲穿,千里云烟的思念。面朝北方,想你,在春暖花开的季节。
6、假如你是云,我就是雨,一生相伴,风风雨雨;假如你是夕阳,我就是黄昏,一生相扶,暮暮朝朝;假如你是糖,我是蜜,一生缠绵,甜甜蜜蜜!
7、有一天,我习惯了你的直率,你已经猜到了我的真假。我们相视一笑,握着手,一起变老了。
8、多希望和你一个不小心就白头到老了,哪怕一路再多的荆棘曲折,只求结局是你就好。
9、你逗我笑的时候真帅,你说我可爱的时候我都想亲死你。