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纤维蛋白原范文1
Gene polymorphism of fibrinogen Bβ148(CT)
【Abstract】 AIM: To analyze the frequency of Fg Bβ148(CT)polymorphism in 77 patients with cerebrovascular disease. METHODS: Gene polymorphism of Fg Bβ148(CT) was analyzed by PCR and restriction fragment length polymorphism (RFLP). RESULTS: The overall allele frequency of Fg Bβ T148 (C148) was 0.636 (0.364). CONCLUSION: The T/T genotype of Fg Bβ148(CT)gene is related with carotid atherosclerosis and the level of Fg.
【Keywords】 fibrinogen Bβ148;gene polymorphism; cerebrovascular disease
【摘要】 目的:对河北省脑血管患者纤维蛋白原(Fg)Bβ148C/T基因多态性进行初步研究. 方法:用聚合酶链式反应(PCR),限制性片段长度多态性(RFLP)方法研究河北省77例脑血管病患者Fg Bβ148C/T基因多态性. 结果:77例脑血管病患者Fg Bβ148基因频率C=0.364,T=0.636. 结论:Fg Bβ148C/T突变基因T与Fg水平、严重的颈动脉粥样硬化明显相关.
【关键词】 纤维蛋白原Bβ148;基因多态性;脑血管病
0引言
杨志刚等[1]发现携带突变基因T148,A448和A445的血浆纤维蛋白原(fibrinogen, Fg)水平较野生型显著升高. 我们对河北省脑血管病患者77例的血浆Fg水平进行了分析,并研究其血浆Fg Bβ148C/T基因多态性与颈动脉粥样硬化的关系如下.
1材料和方法
1.1材料
血浆Fg Clauss测定法试剂盒购自上海医科大学华山医院技协生物试剂公司上海鹰跃试剂厂;引物:上游引物5′CCTAACTTCCCATCATTTTGTC3′, 下游引物5′ATGGTTTTAAGTTTGTGGAAGC3′由北京博润汇力基因技术有限公司(合成);PCR扩增试剂盒购自上海生工生物工程技术服务有限公司;UNIQ10 柱式DNA胶回收试剂盒购自上海生工生物工程技术服务有限公司;100 bp DNA ladder购自华美生物工程公司; HindⅢ为Promega产品.
1.2方法
住院脑血管病患者77(男67,女10)例,其中短暂脑缺血发作(TIA)9例,椎基底动脉供血不足8例,脑梗死51例,脑出血9例. 取早晨空腹肘静脉血分别用38 g/L枸橼酸钠及20 g/L二胺四乙酸(EDTA)抗凝. 枸橼酸钠试管取2.7 mL血,用Clauss测定试剂盒检测Fg浓度. 另取晨空腹肘静脉血4 mL置20 g/L EDTA抗凝管(每管2 mL),立即颠倒摇匀,于4℃静置,血浆置-70℃冻存,采用改良盐析法提取基因组DNA. PCR扩增体系为:10×PCR buffer 2.5 μL,25 mmol/L MgCI2 2 μL,2 mmol/L dNTP 1 μL,10 pmol/μL引物各1 μL,模板DNA 1 μL,1 MU/L Taq DNA聚合酶1 μL,加灭菌双蒸水至溶液体积为25μL,混匀后以石蜡油50 μL覆盖. PCR热循环条件为: 94℃预变性2 min,然后94℃ 45 s,58℃ 45 s,72℃ 45 s 35个循环,72℃延伸5 min,4℃浸泡. 20 g/L琼脂糖凝胶电泳, 1×TAE缓冲液中电泳 35 min后,紫外检测仪观察. 切取300 bp左右条带,采用UNIQ10柱式DNA胶回收试剂盒,回收DNA, -20℃保存备用. 取回收DNA 10 μL,加入BSA 0.2 μL,10×Buffer 2 μL,10 MU/L HindⅢ酶1 μL,双蒸水6.8 mL,37℃孵育3 h,30 g/L琼脂糖凝胶电泳30 min后,紫外检测仪分析电泳结果. Fg Bβ148位点突变纯合子(T/T基因型)缺乏HindⅢ酶切位点,酶切后仅见与PCR扩增产物一样的300 bp片段,野生型(C/C基因型)酶切后可见202 bp和98 bp两个片段,突变杂合子(C/T基因型)酶切后可见300,202及98 bp三个片段. 用基因计数法计算等位基因频率.
统计学处理:各组血浆Fg用x±s表示,两组间差别统计采用t检验,多组差别比较,用方差分析和SNKq检验.
2结果
PCR扩增产物电泳后可见77个样品都在300 bp左右有一清晰条带(Fig 1). 回收PCR扩增产物,用内切酶HindⅢ酶切结果见Fig 2. 脑血管患者77例血浆Fg Bβ148基因频率C=0.364,T=0.636(Tab 1).表1脑血管病患者Fg Bβ148多态性频率与血浆Fg水平(略)
3讨论
血浆Fg的升高可作为心脑血管疾病的危险因素[2,3]. Fg Bβ基因多态性单独或与环境因素作用使循环中的Fg水平升高,造成或加速了动脉粥样硬化. T/T基因型与严重的颈动脉粥样硬化密切相关,纯合子T/T基因型增加颈动脉粥样硬化的风险OR=6.17,远远超过了C/C或C/T型,推测为一种短暂的不依赖Fg水平的Fg启动基因,重复着固有的、非固有的刺激,在颈动脉粥样硬化病因学上起一定作用. 吕波等[4]对冠心病和急性脑梗死患者Fg Bβ148C/T基因进行研究发现患者此基因变异频率显著高于对照组,且变异组(C/T及T/T)血浆Fg水平显著高于非变异组(C/C). 我们的结果显示,脑血管病患者Fg Bβ148C/T基因频率C=0.364,T=0.636,广东汉族健康人Fgβ148C/T的基因多态性与欧洲的结果[5]存在一定差异,所以这里也不能排除河北省与广东省人群之间的地区差别. A,B,E都属于C/T基因型,但A中300 bp和202 bp片断亮度相似,而B和E中却存在着差别(Fig 2),其中B:300 bp条带较亮,E:202 bp条带较亮,可能是由于此患者本身基因组DNA中就存在两种基因型或者由于某种外在原因导致患者本身的基因型发生突变,而实验中所提取到的DNA恰是处于突变中期的,因此会存在两种基因型,酶切就会出现三条片断的亮度不均衡现象,此现象仍需进一步研究.
参考文献
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纤维蛋白原范文2
【关键词】
老年;高血压;房颤;纤维蛋白原
Relationship between atrial fibrillation and plasma fibrinogen in elderly people with essential hypertension
LI yanyan Department of geriatrics, First Affiliated Hospital of Nanjing Medical University, Nanjing 210029,China
【Abstract】 Objective This study was aimed to investigate the relationship between atrial fibrillation (AF) and plasma fibrinogen (FIB) in elderly people with essential hypertension Methods 139 elderly essential hypertensive patients were divided into 2 groups according to AF complication, AF group 40 cases, control group (non AF group) 99 cases The FIB were examined and compared at the same time Results The difference of the FIB was significant, AF group>control group (P
【Key words】
Aged;Hypertension;Atrial fibrillation;Fibrinogen
心房颤动(AF) 是高血压心脏病患者的常见并发症,是临床上最常见的心律失常之一,具有一定的致残率和致死率,降低人们的生活质量。体循环栓塞是房颤患者最常见的并发症,房颤引起的体循环栓塞与血液高凝状态即血栓前状态有关[1]。血纤维蛋白原(FIB)是血浆中含量最高的凝血因子,直接参与凝血过程,是反映凝血功能亢进与纤溶活力下降的指标,是血栓形成的前体物质,直接作用于血管壁,其值增高使血浆和全血黏稠度增大,临床表现为血栓形成倾向[2]。本研究旨在探讨在老年高血压患者中,心房颤动发作与血浆FIB水平的关系,为防治房颤血栓栓塞提供理论依据。
1 资料与方法
11 临床资料 回顾分析2007年01月至2010年06月在南京医科大学第一附属医院老年科住院治疗的老年(≥60岁)的原发性高血压患者139例,年龄60~95岁,平均(7908±720)岁,按照有无合并房颤发作分为两组:AF组为伴有房颤发作组40例(男37例,女3例),年龄60~95岁,平均(7898±757)岁;对照组为不合并房颤发作组即窦性心律组为99例(男80例,女19例),年龄60~92岁,平均(7912±709)岁。两组患者的年龄、男女性别构成比、总胆固醇、低密度脂蛋白、血尿素氮、肌酐、尿酸、空腹血糖相互比较,均无统计学差异(P>005)。高血压诊断符合1999年WHO/ISH高血压诊断标准,除外继发性高血压、严重肝肾功能不全等疾病。两组患者合并冠心病、2型糖尿病、糖耐量减低病史比例比较,均无明显统计学差异(P>005)。
12 方法
121 24 h动态心电图检查 采用美国太空实验室(spacelab)生产的Lifecard CF ANSI/AAMIEC 38 Type 1的动态心电图仪,对入选的两组原发性高血压患者均进行24 h动态心电图检查, 24 h动态心电图证实有房颤发作的患者,包括阵发性房颤和持续性房颤,均归为AF组;否则为对照组。
122 血浆FIB测定 患者标本采集前禁食12 h以上,留取静脉血3 ml EDTA抗凝充分混匀,4℃离心分离血浆,全自动快速分析仪检测血浆FIB,参考值范围20~40 g/L。
13 统计学方法 采用SPSS 100统计软件进行统计分析,计量资料均用x±s表示。两组计量资料间比较采用方差分析,等方差采用t检验,异方差采用t′检验。P
2 结果
AF组、对照组两组高血压患者血浆FIB水平比较,AF组患者血浆FIB为287±059 g/L,明显高于对照组的265±047 g/L(P=004),差异具有统计学意义(P
3 讨论
本文从139例老年高血压患者房颤发作与血浆FIB水平关系研究中发现,合并房颤组的患者血浆FIB水平为287±059 g/L,明显高于对照组的265±047 g/L,差异具有统计学意义,提示老年高血压患者房颤的发作与血浆FIB水平升高关系密切,在老年高血压伴发房颤发作的患者中更易出现高血浆FIB血症。既往研究认为,房颤发作时患者心房血流缓慢、瘀滞,房颤本身造成心房压力、切应力、张力均有所增加,血流冲击造成心房内壁损伤,增加组织因子的释放,激活外源性凝血途径,使血浆FIB升高,引起血栓形成。另外,房颤时炎症反应增加,可能导致心房内膜组织受损,一氧化氮合成减少引发凝血纤溶机制失衡,使血液处于高凝状态,进而促进局部血小板的聚集和附壁血栓形成[3]。因此,在老年高血压伴有房颤发作患者中,在注重积极降低血压的同时,更要注意应用华法林的抗凝治疗,降低血液高凝状态,以防止血栓形成,减少缺血性脑卒中的发作。
参 考 文 献
[1] 夏小杰,昝沁,陈红,等心房颤动患者血浆纤维蛋白原、D 二聚体浓度及t PA 活性变化的研究医师进修杂志,2005,28(1):1821
纤维蛋白原范文3
【关键词】 冠状动脉疾病; 纤维蛋白原;诊断
abstract:objective:to study the correlation between fibrinogen and severity of coronary lesions.methods:in a total of 239 patients suspected as coronary artery disease (cad), coronary angiographies were performed,and they were divided into coronary stenosis group (stenosis>50%,177cases)and no coronary stenosis group (control group,stenosis ≤50%, 62 cases)by quantitative coronary angiography. the fibrinogen, total cholesterol (tc), triglyceride (tg), lowdensity lipoprotein cholesterol (ldlc), and highdensity lipoprotein cholesterol (hdlc) also determined in each patient. partial regression analysis was conducted.results: the result from partial regression analysis showed that there was a positive correlation between the fibrinogen and the severity of coronary lesions (r=0.489,p<0.05). especially, the level of fibrinogen was significantly higher in patients with diabetes than in patients with no diabetes (p<0.05).there was still a positive correlation between the fibrinogen and the severity of coronary lesions(r=0.693,p<0.05) after adjusting other factors, such as age, blood pressure, smoking, blood fat, and diabetes.conclusion:the serum level of fibrinogen may have a prognosis value on the severity of coronary lesion in patients with cad.
author′s address:the section hospital of cardiovascular disease,the first affiliated hospital of xinjiang medical university,urumqi,xinjiang,830054,china
key words:coronary artery disease; fibrinogen;diagnosis 纤维蛋白原(fib)作为冠心病危险因素在近年来受到越来越多的关注,大量的流行病学和临床研究证实fib是一个重要的心血管危险因素,高水平的fib与心肌梗塞、卒中和外周动脉硬化的发生强烈相关[1,2]。133229.CoM本研究对239例疑诊为冠心病的患者进行冠脉造影, 检测fib水平,探讨fib水平与冠脉病变严重程度的相关性。
1 资料与方法
1.1一般资料选择2007年2月至2007年7月在我院心血管专科医院住院,疑诊为冠心病,行冠脉造影的患者,共239例,根据冠脉病变程度分成冠脉狭窄组(主干或分支直径狭窄程度>50%) 和对照组(主干或分支直径狭窄程度≤50%)。狭窄组177例,男108例,女69例,平均年龄(58.38±11.23)岁;对照组62例,男44例,女18例,平均年龄(56.57±10.06)岁。再将冠脉狭窄组按狭窄累及范围分为单支组(62例),双支组(56例)和多支组(3支或3支以上,59例)。合并高血压患者119例,糖尿病患者65例,吸烟患者47例。排除严重的肝、肾疾病,肺栓塞,下肢动静脉血栓病史以及近期应用抗凝药物的患者,并剔除病史资料不完整的病例。
1.2 方法 (1)冠状动脉造影:由心脏科心导管专业医师操作。用计算机辅助定量冠状动脉造影(qca)系统,采用judkin′s法自动测定血管狭窄程度;(2)血液检查:研究对象于冠脉造影前空腹12h后清晨采集静脉血,应用标准乙二胺四乙酸(edta)抗凝管,3 000 r/min离心10min后取血浆。采用免疫比浊法测定fib,血脂测定采用酶法。
1.3 统计学方法 采用spss 13.0软件包进行数据处理,计量资料以(±s)表示。两组比较采用t检验,多组比较采用方差分析;应用偏相关分析在控制可能影响fib水平的其他因素如性别、年龄、血脂、高血压、糖尿病后,观察fib对冠脉病变的影响。 p<0.05为差异有显著性。
2 结 果
2.1 各组的fib及血脂含量 入选患者各组的血fib,总胆固醇(tc),低密度脂蛋白-胆固醇 (ldl|c),高密度脂蛋白胆固醇(hdl|c),甘油三酯(tg),脂蛋白(lp)a含量,见表1。
2.2 fib与冠脉评分的相关性分析 fib与冠脉评分呈显著相关性(r=0.489,p<0.05)。随后进行偏相关分析显示,在控制其他变量包括糖尿病、高血压、吸烟、年龄、血脂、性别各因素的影响后,fib和冠脉评分之间的相关系数有所增加(r=0.693,p<0.05)。
2.3 冠心病各亚组合并糖尿病与否的fib含量 见表2。就总体(包括男女)而论,糖尿病组的fib水平明显高于非糖尿病组,冠脉3支病变的男、女及总体的fib水平,糖尿病组的明显高于非糖尿病组(p均<0.05) 表1 冠脉狭窄不同程度患者纤维蛋白原(fib)水平测定结果 表2 糖尿病和非糖尿病冠心病患者在不同狭窄亚组的fib水平 注:与非糖尿病组比较p<0.05。
3 讨 论
fib是肝脏合成的一种与血液凝固密切相关的血浆蛋白质,也是一种急性炎症期反应蛋白,在机体受伤或炎症时,其浓度成倍增高。目前认为它作为凝血途径的重要环节,通过与血小板膜上的受体结合促进急性期血栓形成[3]。fib不但通过影响血小板聚集、血流动力学和损伤内皮细胞而促进血栓形成和动脉硬化[4],而且还参与不稳定斑块的形成。近来研究表明,动脉粥样斑块形成不仅与脂质沉积有关,而且还与凝血亢进,纤溶系统功能低下,细胞增生与纤维蛋白增加有关[5]。尸检发现在动脉粥样硬化斑块内有fib及其纤维蛋白降解产物的沉积[6]。血浆fib及其降解产物能刺激血管平滑肌细胞增生、迁移,提示在动脉粥样硬化斑块最早期形成阶段就有fib参与[6]。很多研究提出高水平的fib可预示着急性心肌梗塞以及其他冠脉事件的高风险[7]。在急性冠状动脉事件发生发展过程中,血浆fib主要参与血管内梗阻性血栓形成,并在动脉血栓形成的最后阶段起增强作用[5]。也有临床研究提示高水平的fib可以反映冠心病患者冠状动脉病变的严重程度[8,9],而该方面研究国内外仅有少数研究及报道,但观点尚不统一。因此,在本研究中我们对239例入选患者进行冠脉造影,根据图像分析结果评分分组,简单相关分析显示fib与冠脉的病变程度明显相关;然后行偏相关分析,在控制可能影响fib水平的其他因素后仍得出上述结果。结果显示冠脉病变程度随着fib的提高而加重。上述结果证实了fib可以直接促进冠脉病变的设想,同时也可以解释fib的升高与心绞痛和心肌梗塞后再发的心肌缺血以及其他一些冠脉事件为何明显相关。根据是否合并有糖尿病进行分组,发现在相同的fib水平下糖尿病患者的冠脉病变程度明显较无糖尿病患者加重,而男性患者则更为明显。这与目前的报道一致,提示糖尿病作为急性心肌梗塞的等危症,fib可能在其中起着重要作用。总之fib受多种因素影响,它不仅可以促进冠脉内血栓形成导致终点事件的产生;同时还可以促进冠脉内慢性病变的发生发展,直接加重冠状病变的程度。因此,fib水平可以反映冠脉病变的严重程度,值得注意,同时fib也是简单易行的临床监测指标。
【参考文献】
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纤维蛋白原范文4
[关键词] 颈椎病 血液流变学 纤维蛋白原
颈椎病是中老年人的常见病和多发病,可引起昡晕,颈肩痛等,影响工作和生活,同时与血压异常、心率紊乱、冠状动脉粥样硬化性心脏病、脑血管等20多种疾病有关。多数学者认为,其发病与患者的血液流变学改变和微循环障碍有关,本文通过对颈椎病患者与正常人血液流变学和纤维蛋白原指标的比较分析,以了解颈椎病血液流变学和纤维蛋白原的特点。
1 材料与方法
1.1 研究对象
92例颈椎病患者均为2011年5月~2011年12月来我院就诊门诊及住院确诊的颈椎病患者,其中男50例,女42例,年龄29~82岁,平均年龄53.2岁,89例对照组均为同期在我院体检的同年龄段人群,均未发现有颈椎病史及无血液病史,其中男50例,女39例,平均年龄52.7岁。
1.2 仪器方法
所有检测者均空腹8h以上,次日清晨取静脉血。取两管其中一管肝素抗凝, 用于血流变检测;另一管用枸橼酸钠抗凝离心后分离血浆用于纤维蛋白原检测,纤维蛋白原测定采用法国STA-R EVOLUTION全自动血凝仪测定,血流变学测定采用北京普利生LBY-N6G型全自动血流变测试仪测定。所有检测均在4h内完成,并严格按照我科的操作指导流程进行操作。
1.3 统计学方法
采用SPSS 10.0软件进行统计分析。各组数据以均值±标准差(X?±S)表示,组间均数比较采用t检验,以P
2 结果
颈椎病患者全血黏度、血浆黏度、红细胞压积、细胞聚集指数、红细胞变形指数、FIB与正常对照组有显著性差异,P
3 讨论
颈椎病是因颈椎、颈椎间盘、韧带退行性改变,导致颈椎失稳、压迫邻近组织结构如脊髓、血管、神经而引起的一系列临床症状的综合征[1]。颈椎病由于机械性的卡压、血管因素及化学性的刺激,而使血流受阻,颈动脉供血不足,组织缺血缺氧;这种机械性的卡压和化学性的刺激是引起颈椎病血液流变学指标改变的主要原因。全血黏度反映的是红细胞的变形性,此时血液黏度增高,说明血液中红细胞变形能力下降,使得循环阻力增加。而低切变率下,全血黏度反映的是红细胞的聚集性,此时血液黏度增高,说明血液中红细胞容易聚集,从而增加血流阻力。本研究中影响全血黏度的因素主要是红细胞。红细胞的变形能力下降与红细胞比积升高有关,表现为高切变率下全血黏度升高,而红细胞的聚集性增高与红细胞表面负电荷减少有关,表现为低切变率下全血黏度升高。若红细胞变形能力降低,则通过毛细血管的阻力增加,使血液与组织之间气体和物质的交换受阻,而引起组织缺血和缺氧。红细胞聚集性增加时,使血液黏度升高,血液黏度升高必然导致血液流速减慢引起毛细血管内血流堵塞。阻力增加而导致微循环障碍。纤维蛋白原(FIB)是由肝脏分泌的分子量为340 kDa的一种急性期反应蛋白,它作为纤维蛋白的前体,是凝血活化的标志物,同时也是血小板发生聚集的重要介质,另外它作为血浆中最大的链状蛋白,对血浆和全血黏度的影响很大[2]。FIB水平增高表明患者体内存在高凝状态,使血液黏滞性增加,血液流速减慢,易于血栓形成,纤维蛋白原增高直接影响着血浆黏度的变化,从而影响颈椎的血液供应而加重病情。本研究中颈椎病患者血液流变学全血黏度(高切 、低切)、血浆黏度、红细胞压积、红细胞聚集指数、红细胞变性指数、纤维蛋白原均明显高于正常对照组,表明颈椎病与血液黏度有密切关系,与文献报道基本一致[3-5]。因此通过检测颈椎病的血液流变学可知本病急性发作时血液呈浓黏凝聚状态,改善血液流变性,决定它能够延缓和抵制颈椎间盘的退变,从而对颈椎病的防治起着重大作用。因此,血液流变学是颈椎病诊断、治疗、预防的重要检测手段。
参考文献:
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纤维蛋白原范文5
【关键词】 D-二聚体; 纤维蛋白原; 冠状动脉性心脏病
中图分类号 R541.4 文献标识码 B 文章编号 1674-6805(2014)24-0035-02
The Value of D-dimer and Fibrinogen in the Diagnosis of Coronary Artery Disease/CHEN Gao-ke.//Chinese and Foreign Medical Research,2014,12(24):35-36
【Abstract】 Objective:To study the significance of detection of plasma D- dimer and fibrinogen in the diagnosis of coronary artery disease.Method:The level of plasma D-dimer and fibrinogen of 108 patients with different types of coronary artery diseases and 62 health people from May 2011 to Dec 2012 were detected.The results of plasma D-dimer and fibrinogen were analyzed.Result:The levels of plasma D-dimer and fibrinogen of acute myocardial infarction(AMI) patients were higher than those of healthy people,unstable angina pectoris(UAP) and stable angina pectoris(SAP) patients(P
【Key words】 D-dimer; Fibrinogen; Coronary heart disease
First-author’s address:Gaozhou People’s Hospital,Gaozhou 525200,China
冠状动脉粥样硬化性心脏病(coronary heart disease,CHD)简称冠心病,是临床心血管内科的常见病,多发于60岁以上老年患者,近些年冠心病的发病率、死亡率均呈上升趋势[1]。临床研究发现,冠心病的发生、发展与患者体内凝血状态的改变有直接关系[2]。血浆D-二聚体是血栓中的交联纤维蛋白经纤溶酶作用所产生的降解产物,是一项可反映机体纤溶活性的重要指标,其浓度在体内出现血栓病变并伴有纤溶亢进继发时而改变[3]。纤维蛋白原(fibrinogen,Fg)是一种急性时相蛋白,是血栓的主要成份,参与了凝血过程。有研究报道检测体内血浆D-二聚体及纤维蛋白原水平与冠心病的发生发展密切相关,对诊断各种类型冠心病及治疗方面均有重要的指导意义[4]。本文通过对不同类型冠心病患者及正常体检患者的血浆D-二聚体及纤维蛋白原水平的检测和分析,来进一步探讨血浆D-二聚体及纤维蛋白原水平检测在冠心病临床诊断及分型中的意义,具体报告如下。
1 资料与方法
1.1 一般资料
选取2012年5月-2013年12月在笔者所在医院就诊的108例不同类型的冠心病患者,其中男56例,女52例,年龄60~81岁,平均(57.3±5.4)岁。其中39例患者为不稳定型心绞痛(unstable angina pectoris,UAP),27例患者为稳定型心绞痛(stable angina pectoris,SAP),42例患者为急性心肌梗死(acute myocardial infarction,AMI),所有患者经冠状动脉造影确诊为冠心病,并经MRI或CT排除肾脏、肝脏疾病及脑出血。正常健康体检者62例中男34例,女28例,年龄59~78岁,平均(58.1±5.5)岁。所有患者及体检者在检测血浆D-二聚体及纤维蛋白原水平的前3周均未使用任何的抗凝药物,检测前半年内均未无吸烟史、输血史,均未并发糖尿病及高血脂疾病。冠心病换证和正常体检者年龄、性别比较差异无统计学意义(P>0.05),具有可比性。
1.2 方法
所有冠心病患者及正常体检者均于上午6时在空腹8 h状态下抽取3 ml静脉血,并置于含有枸橼酸钠抗凝液的试管中(枸橼酸钠抗凝液的浓度为0.109 mmol/L,试管中含量为0.2 ml,室温下),所有标本3000 r/min高速离心30秒,以分离血浆,保存于-80 ℃的冰箱中待分析时同批测定,所有操作严格按说明书指示进行[5]。需注意心肌梗死急性期患者的抽血时间都在急性期内(2 d内)进行。
1.3 统计学处理
所得数据采用SPSS 13.0统计软件进行统计分析,各组指标以均数±标准差(x±s)表示,组间比较用成组设计两样本t检验,以P
2 结果
正常体检者、不稳定型心绞痛(UAP)患者、稳定型心绞痛(SAP)患者、急性心肌梗死(AMI)患者的血浆中D-二聚体和纤维蛋白原的含量测定结果情况具体见表1。
D-二聚体水平比较:急性心肌梗死患者与正常体检者、稳定型心绞痛患者和不稳定型心绞痛患者分别比较,差异均有统计学意义(t=30.539,P
纤维蛋白原水平比较:急性心肌梗死患者与正常体检者、稳定型心绞痛患者和不稳定型心绞痛患者分别比较,差异均有统计学意义(t=9.510,P
表1 四类患者血浆中D-二聚体及纤维蛋白原的水平比较
类别 D-二聚体(mg/L) 纤维蛋白原(g/L)
正常体检者(n=62) 0.34±0.21 3.14±0.38
急性心肌梗死患者(n=42) 2.31±0.44 5.24±1.68
稳定型心绞痛患者(n=27) 0.39±0.23 3.28±0.41
不稳定型心绞痛患者(n=39) 0.72±0.26 4.38±0.83
3 讨论
冠心病指的是冠状动脉粥样硬化导致冠脉管腔阻塞或狭窄,继而导致心肌的缺氧、缺血所引发的心脏病。D-二聚体是纤维蛋白降解的特异性产物[6],纤维蛋白单体在谷氨酚胺转移酶作用下,转化为交联纤维蛋白,交联纤维蛋白将纤溶系统激活生成纤溶酶,纤溶酶将交联纤维蛋白降解,形成一系列的交联纤维蛋白降解产物,可见,D-二聚体可表明体内凝血活力,也可表明纤溶活性[7]。故D-二聚体浓度升高,说明体内形成了凝血酶及继发性纤溶酶,D-二聚体浓度升高可作一种高凝状态的标志,说明形成了新鲜血栓,可为肿瘤、血栓等疾病提供诊断依据[8]。研究还发现D-二聚体与冠状动脉病变程度呈正相关,随着Gensini积分增加,DD的水平逐渐升高[9]。纤维蛋白原是一种能溶于水的蛋白质,凝血酶原在血小板破裂后释出的凝血致活酶及钙离子的催化作用下变成凝血酶,凝血酶又能把本能溶于水的纤维蛋白原变成不溶于水的纤维蛋白,纤维蛋白与其他血细胞扭结成团,凝固成为血块。黄锡通等[10]发现血液纤维蛋白原水平与冠状动脉Gensini积分呈正相关性,纤维蛋白原水平越高,则冠状动脉狭窄程度越严重,纤维蛋白原水平可用于冠心病的早期危险性评估。对急性缺血综合征中血栓的研究表明,血浆纤维蛋白原水平是独立的危险因素,有冠状动脉阻塞病的患者血浆中纤维蛋白原水平较高,而且纤维蛋白原增加的水平也与急性心肌梗死的范围密切相关。在心肌梗死病程中,纤维蛋白原水平超过7 g/L的患者容易出现再梗死现象。有研究发现不稳定型心绞痛的患者,在发生心肌梗死之前,往往有血浆纤维蛋白原水平升高现象。
导致冠心病的因素有多种,人体中凝血纤溶系统维持机体稳态的重要的组成部分,正常情况下,凝血系统和纤溶系统活性的动态平衡状态是保证血液在人体血管内正常流动的必要前提条件,任何原因造成的纤溶和凝血系统失衡,都可能引发病理状态。近些年来研究发现,机体纤溶和凝血系统失衡是导致冠心病发病的重要因素,凝血纤溶系统变化对冠心病影响的机制可能有:(1)血液处于长期的高凝状态,为血管内血栓的形成创造机会;(2)血液流变学发生改变,降低了血液流动性,增高了血液黏稠度,继而使血管壁切流速度受到影响,使动脉粥样硬化的进展和血栓的形成速度加快;(3)在动脉粥样硬化斑块形成过程中血浆D-二聚体使血管平滑肌细胞的迁移和增生受到刺激,导致血管内皮细胞受到破坏等。所以,临床测定血浆D-二聚体对诊断和预测冠心病有重要意义[11]。
临床大量研究表明,不同时期、不同程度冠状动脉病变患者的血浆D-二聚体水平存在明显差异,所以,检测急性期冠心病患者血浆D-二聚体水平可反应患者凝血功能启动状态及纤溶亢进状态,为冠心病的临床诊断及病情严重程度的诊断提供可靠依据[12]。本研究发现急性心肌梗死患者D-二聚体水平和纤维蛋白原水平均明显高于正常体检者、稳定型心绞痛患者及不稳定型心绞痛患者,而正常体检者和稳定型心绞痛患者D-二聚体水平和纤维蛋白原水平差异无统计学意义,提示当患者有急性心肌梗死或不稳定型心绞症状、体征以及心电图表现时,若伴有D-二聚体水平和纤维蛋白原水平显著升高,可结合临床考虑冠状动脉内有否血栓形成。
总之,血浆D-二聚体水平及血液纤维蛋白原水平的检测可有效判断冠心病患者不稳定斑块存在情况、病情危险分层情况等,对冠心病的诊断有着重要的意义。
参考文献
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[9]程晓丹.超敏C反应蛋白、D-二聚体与冠状动脉病变的相关分析[J].中国医学创新,2013,10(11):122-123.
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[11]洪流,林伟华,陈华英,等.纤溶系统标志物的变化在不同临床类型冠心病诊疗中的应用[J].实验与检验医学,2013,31(5):428-430.
纤维蛋白原范文6
[关键词]CA-1500血凝仪; 缓冲液; 研制和应用
[中图分类号] R446.11[文献标识码] B[文章编号] 1005-0515(2011)-02-239-01
纤维蛋白原(FIB为临床凝血试验中最常用检测项目之一。CA-1500血凝仪测定纤维蛋白原缓冲液多采用原装进口试剂,价格较高,自制缓冲液价格低廉,其效果如何已成为实验室中的新课题[1]。本文参照了美国临床实验室标准委员会的EP9-A文件标准[2],对比检验了我院自制纤维蛋白原缓冲液与原机配套试剂的理化性质,准确度,精密度及缓冲能力方面,显示理化性质及检验准确等方面与原试剂基本一致,可取代使用,现报道如下:
1 材料与方法
1.1 仪器
sysmexCA-1500全自动血凝仪、电导率测定仪、酸度计等。
1.2 试剂
原机佩戴的配套纤维蛋白原含量测定用试剂盒,勾玉美国的DADE公司,批号为540219,标准品批号为502576c,质控品批号为528186. pH值为7.3,电导率为15.52,Na离子浓度为146mmol/L,Cl离子浓度为153mmol/L。
1.3 缓冲液制备方法[3]
缓冲液制备标准规格按照中华人民共和国药典(7版),以原装试剂为标准钠氯离子浓度标准制备:氯化钠7.8g/L,巴比妥钠5.27g/L,医用明胶0.5g/L。pH值为7.31,电导率为15.52,Na离子浓度为148mmol/L,Cl离子浓度为155mmol/L。
1.4 标本来源
所有标本均来自与我院2010年10月份门诊和住院患者的凝血测定系列标本,共86份。
1.5 测定比较方法
本组冻干质控品的复溶之后,分别在小样品杯中冷冻保存,每天与原装配套试剂和自配试剂测定,每次测定2次,取平均值,连续测定10天,测算自配试剂的精密度。并将标本与两试剂进行Fbg检测,对比起显著性检验结果。
1.6 统计学方法
数据均用SPSS17.0统计分析软件包进行处理。计量数据以x±s表示, 采用t检验,计数数据采用χ2检验。且P
2 结果
2.1 精密度
自配试剂与原装试剂测定结果精密度比较见表1,由此可见两试剂检验结果基本一致,差异无统计学意义(P>0.05)。
表1自配试剂与原装试剂测定结果精密度比较
2.2 显著性检验
自配试剂和原装试剂对血液标本检测结果显示,原装试剂测定Fbg(s)均值为8.83±2.713,Fbs(c)均值为2.443±0.643。自配试剂测定Fbg(s)均值为8.81±2.62,Fbs(c)均值为2.441±0.721。
2.3 缓冲能力
标准液倍比稀释后分别行自配试剂和原装试剂的标准曲线,统计显示相关系数r为0.998、-0.997。由此可见两组试剂的缓冲能力差异无统计学意义(P>0.05)
3 讨论
近年来随着现代医学关于止血和血栓形成的机制认识不断深入,在实验室内开展止血、血栓相关指标检测的项目越来越多。纤维蛋白原(FIB)为临床凝血试验中最常用检测项目之一,对于出血性的疾病诊断、治疗和预后等各方面都有着重要意义,其测定方法的也颇多。CA-1500血凝仪采用的是散射光比浊法,操作简单,标准用量少,结果准确[4],但其缓冲液多采用原装进口试剂,价格较高,自制缓冲液价格低廉,其效果如何已成为实验室中的新课题。
过去检验学文献中关于进口试剂的配制有过多例介绍,自制缓冲液用生理盐水直接代替效果不佳[5]。本院参照参照了美国临床实验室标准委员会的EP9-A文件标准,对比检验了我院自制纤维蛋白原缓冲液与原机配套试剂的理化性质,准确度,精密度及缓冲能力方面显示,自配试剂在选材合适的基础上严格操作,可以较易达到原装试剂的pH值、电导率、钠氯离子浓度等理化性质[6]。本文采用的氯化钠,巴比妥钠,医用明胶制备缓冲液在显著性检验结果与缓冲能力、精密度比较效果与原状试剂差异无统计学意义,但价格较低,完全可以替代进口原装缓冲液的使用,大大节省了资源,值得临床推广使用。
参考文献
[1] Nmional Committee Laboratory Standards Mefhod Comparison and bias estimation using patient samples,Approved Guidline[J].EP9-A Pennsylvania,1995,15(7):1-2.
[2] 刘卓然,1CA-1500血液凝固分析仪对脂血与溶血抗干扰分析[J].临床和实验医学杂志,2009,8(6):31-32.
[3] 戴隽.新鲜血在校准血液细胞分析仪的应用[J].江西医学检验,2003,21(3):197-205.
[4] 胡意,钟伟祥,万腊根,血凝仪检测系统精密度的评价方法与结果分析[J]实验与检验医学,2009,27(5):491-492.
[5] 冯仁丰主编.临床检验质量管理技术基础[M].上海:上海科技文献出版社,2007,9:89.