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病梅馆记范文1
病梅馆记范文2
1 资料与方法
1.1 临床资料
患者女，31岁，于2011年07月22日因“停经10周+，反复咳嗽1月余，发热1天，HIV抗体初筛阳性1天”收入院，住院期间出现“脐凹样”皮疹，血培养出马尔尼菲青霉菌，广西区疾病控制中心确认试验HIV抗体阳性。患者1月前无明显诱因下出现阵发性咳嗽，7月22日上午出现发热，高达39.0℃。既往否认冶游史，无吸毒史，否认“肝炎”病史。末次月经2011-05-12；查体：生命体征平稳，神志清，口腔满布白色膜状物附着，不易拭去，左腋下可触及一拇指大小肿大淋巴结，阴道可见豆腐渣样分泌物，两下肺可闻及少许湿罗音，肝、脾肋下可触及，双下肢未见水肿。辅助检查：白细胞：1.81×109/L，红细胞：2.39×1012/L，血红蛋白：68.2g/l，血小板：37.4×109/L，中性细胞比率：80.74%，嗜酸性粒细胞比率：6.64%，嗜碱性粒细胞比率：0.64%，CD3+T淋巴细胞：372个/微升，CD4+T淋巴细胞：25个/微升，CD8+T淋巴细胞：363个/微升，CD4+/CD8+：0.07，生化：钾：3.1mmol/l，钙：2mmol/l，磷：0.65mmol/l，门冬氨酸氨基转移酶：170.8u/l，谷氨酰氨转酞酶：46u/l，白蛋白：26.6g/l，血沉：22mm/h；结核抗体阴性；胸片：肺部感染；腹部B超示：肝、脾肿大；胆囊壁水肿；宫内早孕，考虑胚胎停止发育。
1.2 治疗方法
1.2.1 静脉用丙种球蛋白及血小板冲击，若血小板上升至5万，凝血功能基本正常，即给予米非司酮200mg分2日顿服，第3日米索前列醇0.6mg顿服，阴道后穹窿塞米索前列醇0.2mg。服药过程中，如阴道出血多于月经量。随时行刮宫术，如阴道排出物见胚胎组织，立即行清官术。
1.2.2 氟康唑、两性霉素B（AMB）抗真菌感染、头孢呋辛钠抗肺部感染、输血改善贫血、抑制胃酸保护胃粘膜、护肝治疗、纠正低钾血症及营养支持治疗。AMB静脉输入，从小剂量5mg/d开始逐渐增加至25mg/d，维持治疗量至两周。
2 结果
2.1 米非司酮+米索前列醇后有少量阴道流血，立即输入血小板，同时在全身麻醉下行人工流产术，术程顺利，术后子宫收缩好，阴道流血少。
2.2 感染得到控制、完成AMB治疗，PSM病情好转于8月18日出院，继续门诊口服伊曲康唑抗真菌及高效抗逆转录病毒治疗。
3 护理
3.1 心理护理 认真聆听患者的倾诉，向患者宣教相关知识，消除患者恐慌及悲观情绪，鼓励战胜疾病的勇气。该患者年轻、有文化，住院后通过治疗症状很快能控制，使其获得极大信心。同时家人的配合、理解、医护人员的关怀、各科专家会诊，让患者看到了生的希望，积极配合各种治疗护理，乐观的面对疾病。
3.2 用药的护理 AIDS合并PSM病情发展快，病死率高，若能及早诊断并应用有效抗真菌药物，通常可收到较好疗效。治疗PSM最有效的药物为AMB和伊曲康唑，AMB副作用大，主要不良反应有寒战、高热、恶心、呕吐、肾功能损害和注射部位静脉炎等。使用前给患者讲解药物的治疗作用、不良反应及注意事项，使其主动配合治疗。用药过程中，确保针头在血管内方可使用AMB，避光输液，滴速宜慢，加强巡视，一旦发现药物外渗立即停止输液并重新更换注射部位，并给予冰敷或冰水加75％的乙醇湿敷。本病例使用颈静脉穿刺置管，效果满意，顺利完成药物治疗。为了减少AMB快速加量带来的不良反应增加的危险，在每次使用时加2～5mg的地塞米松静滴，用药期间常规口服或静脉补钾，定期复查肝、肾功能及血、尿常规、电解质、心电图等，尤其随着AMB累积量逐渐增大时，更应密切观察病情变化及各项指标的监测，防止诱发肝、肾功能衰竭[4]。
3.3 人流术的护理 患者进入AIDS期，合并较多内科疾病，凝血功能异常、血小板极低、肝功能异常（转氨酶升高），而稽留流产的患者，坏死胚胎可释放毒素，加重肝功损害及影响出凝血功能，若贸然清宫术可能有阴道流血不止、休克、DIC等风险。如患者流血不多，无明显腹痛，可经内科治疗后复查各项指标如血小板、白细胞、血色素等提升后择期行清宫术。若期间阴道流血增多，在备血情况下随时行清宫术。术前建立静脉通道，备好各种抢救物品器械，术中严密观察患者的生命体征，术后密切观察阴道流血情况，保持会阴清洁，继续应用抗生素抗感染治疗。
3.4 保护性隔离 有条件情况下置单人间病房，定时通风，每天用空气消毒机对室内空气消毒1次，地面、床头柜、床等每天用1：200ml含氯消毒液拖擦2次。护理时应戴口罩、帽子、戴手套，操作时应严格遵守无菌操作规程。接触病人前后要洗手，由于患者免疫力功能低下，易合并多种机会性感染，对有呼吸道疾病的家属禁止探视。
3.5 生活护理 修剪指甲，避免抓伤皮疹导致出血，床褥不可过硬，出汗较多者及时更换衣服和床单、枕套等，避免受凉，注意保暖，鼓励患者多饮水，并适当补液及进行营养支持治疗，以增强体质。进食半流质或软饭，以易消化吸收食物为主，防止便秘及消化道出血。
3.6 家属的支持 本病病情凶险，病死率高，治疗成本高。AMB治疗PSM一般用药3周左右，然后继续口服伊曲康唑胶囊。伊曲康唑价格昂贵，出院时嘱患者一定要坚持用药，以免复发[5]。本例患者家庭经济较好，解决了后顾之忧，对治疗效果起到一定的积极作用。
4 体会
我国艾滋病的感染和发病已经进入快速增长期，艾滋病合并PSM也随之增多，病情较重，预后差，病死率高。患者凝血功能、肝功能异常、血小板极低，合并稽留流产时坏死胚胎可释放毒素，加重肝功损害及影响出凝血功能，必须尽快创造条件适时终止妊娠。同时必须严密观察病情变化，加强心理护理、皮肤护理、用药护理，消毒隔离措施到位，保证患者度过危险期，为下一步抗逆转录病毒治疗做准备。
参 考 文 献
[1] 赵国庆，冉玉平，向耘．中国大陆马尔尼菲青霉病的临床表现及流行病学特征的系统评价[J]．中国真菌学杂志，2007，2(2)：68—72.
[2] Sirisanthana T．PeniciHium mameffei infection in patients with AIDS[J]．Emerg Infect Dis，2001，7(3 suppl)：561.
[3] 唐志荣，陆珍珍，刘伟等．广西艾滋病例合并马尔尼菲青霉菌病感染及其治疗[J]．应用预防医学，2007，13(1)：28.
病梅馆记范文3
关键词：美托洛尔 慢性阻塞性肺部疾病合并心血管疾病 疗效观察
慢性阻塞性肺部疾病合并心血管疾病为心血管疾病治疗增加难度，是常见的一种并发性心血管疾病[1]，我院对美托洛尔治疗慢性阻塞性肺部疾病合并心血管疾病进行研究，现总结如下：
1 资料与方法
1.1 一般资料
74名患者均符合慢性阻塞性肺部疾病合并心血管疾病诊断指标。A组治疗组42名患者，男性31名，女性11名，年龄34~72岁，病程1.2~4.6年；B组对照组32名患者，男性19名，女性13名，年龄36~68岁，病程1.7~3.5年。对A、B组患者性别、年龄等研究不具有统计学意义（P>0.05）。
1.2 治疗方法
A组治疗组患者治疗方法：行美托洛尔医治。用药初期，每天两次，每次7.3毫克，根据患者身体情况和病情适当调整用药剂量，患者病情较轻，则减少用药剂量，病情较重者，则适当增加用药[2]，每天最大剂量不超过18毫克，以一周为一个疗程，连续服用三个疗程。观察患者使用后病情恢复情况，患者病情恢复较好，则减少或停止用药。
B组对照组患者治疗方法：行卡托普利医治。初始剂量为每天80毫克，分三次使用，病情较重的患者[3]，则适当增加用药剂量，最大用药量不超过270毫克每天，用药疗程与A组患者相同。如患者使用后身体出现不良反应，应及时做处理。
1.3 疗效评定方法
我院采用显效、有效、无效标准对A、B组患者治疗效果进行评定。显效：患者呼吸困难、心悸、昏阙等病症改善较好，肺功能和心功能有效恢复，不良反应发生率<5%；有效：患者呼吸困难、心悸、昏阙等病症一定程度改善，肺功能和心功能一定程度好转，不良反应发生率<10%；无效：患者病症无好转，病情无恢复迹象。
1.4 数据处理方法
我院本次研究所得有效数据，均采用SPSS14.0统计学数据处理软件进行处理，计数资料采用t检验，组间对比采用X2检验，P＜0.05为差异具有显著性，具有统计学意义。
2 结果
2.1 A、B组患者治疗效果对比分析
我院对74名患者进行为期10~14个月跟踪随访，患者恢复较好，治疗效果不佳患者经第二次治疗，患者恢复良好。经统计，A组治疗组42名患者，评定为显效31名，有效10名，无效1名，有效率为97.6%；B组对照组32名患者，评定为显效17名，有效8名，无效7名，有效率为78.1%。A、B组患者数据差异具有统计学意义（P<0.05）。
2.2 A、B组患者不良反应发生率对比分析
A组治疗组42名患者经治疗，出现心率减慢1名，血压降低1名，其他1名，不良反应发生率为7.1%；B组对照组32名患者，出现心率减慢2名，血压降低1名，失眠1名，其他1名，不良反应发生率为15.6%。A、B组患者数据差异具有统计学意义（P<0.05）。
3 讨论
心血管疾病，是指有关人体内运送血液的众多器官和组织的病症，如心脏、血管等，严重损害患者心功能和血管的正常工作，给患者体内正常的血液运送早场障碍，心血管疾病具有较高的病发率和病死率[4]。慢性阻塞性肺病是一种可以预防和可以治疗的常见疾病， 其特征是持续存在的气流受限。气流受限呈进行性发展，伴有气道和肺对有害颗粒或气体所致慢性炎症反应的增加。慢性阻塞性肺部疾病合并心血管疾病主要病症为呼吸困难、心悸、昏阙等，给临床心血管疾病治疗增加了更大难度，对患者身体和心里造成严重损害，影响患者正常工作和学习，必须及时接受诊断和治疗。
美托洛尔属于2A类β1-受体阻断药，能够较好的起到减慢心率、抑制心收缩力、降低自律性和延缓房室传导时间等作用[5]，是治疗慢性阻塞性肺部疾病合并心血管疾病常用药物，我院对美托洛尔治疗慢性阻塞性肺部疾病合并心血管疾病进行研究，并以传统卡托普利药物为对比，患者呼吸困难、心悸、昏阙等病症恢复较好，患者肺功能和心功能改善明显，治疗有效率为97.6%，不良反应发生率为7.1%，值得临床广泛推广使用。
参考文献：
[1] 中华医学会心血管病学分会，中华心血管病杂志编辑委员会.β肾上腺能受体阻滞剂在心血管
疾病应用专家共识[J]，中华心血管病杂志,2009，37(3)：196197.
[2] 梁海英，宋新德.美托洛尔联合步长稳心颗粒治疗心律失常85例临床分析[J].中国医药，2008，3(3)：170.
[3] 赵卫国，崔 洁.β1 受体阻滞剂琥珀酸美托洛尔对慢性心力衰竭的治疗作用[J].中国实用医药，2009，4(27)：58.
[4] 黄玫,曲晶,李晓天,等.黄芪化学成分及对心血管系统作用的研究进展[J].中国老年学杂志,2009,6(29):1451-1453.
病梅馆记范文4
1资料与方法
1.1病例选择
由于基层医院不能广泛开展冠状动脉造影术,只能靠临床诊断,为确保诊断的正确性,我们剔除了其他类型的冠心病,只选择心绞痛型和心肌梗塞型共312例。其中男性238例,女性74例,年龄44～84岁,平均年龄64.8岁。心绞痛患者128例,急性心肌梗塞患者68例,陈旧性心肌梗塞患者42例,冠心病合并心功能不全患者146例。以上病例重点观察心绞痛、急性心肌梗塞、冠心病合并心功能几方面,将各部分病例随机抽样分出治疗组和对照组,两组在年龄、病情、病程方面有可比性。两组心绞痛各64例,急性心梗各34例,冠心病心功能不全各73例。
1.2治疗方法
两组病人根据病情给予抗凝、抗血小板、溶栓、利尿、强心、β受体阻滞剂治疗。同时,治疗组静滴加钾镁硝极液(普通极化液250ml+25%硫酸镁10ml+硝酸甘油5mg)10滴/分;对照组静滴硝极液(普通极化液250ml+硝酸甘油5mg)10滴/分,两组均为一疗程。
1.3观察项目和方法
1.3.1心绞痛方面:观察治疗前后心绞痛发作情况及心电图情况,根据诊断标准判断疗效。
1.3.2急性心肌梗塞方面:行心电监护一周观察心律失常、心衰、再梗塞发生率、死亡率(延续观察一年)。
1.3.3心功能不全方面:以临床表现判断疗效,及彩色多普勒超声心动图仪测得反映心脏收缩功能的参数EF及反映舒张功能的参数E/A。
1.4诊断标准
1.4.1心绞痛:显效:心绞痛发作及硝酸甘油消耗量减少80%以上,静息心电图恢复正常或运动试验由阳性转为阴性;有效:心绞痛发作次数及硝酸甘油消耗量减少50～80%,ST段回升0.5mV左右,T波倒置变浅达50%以上或由平坦转直立;无效:心绞痛发作程度、次数,持续时间,硝酸甘油消耗量无改变,ST段T波变化无改善。
1.4.2心功能不全:显效:心功能改善两级,心衰完全控制;有效:心功能改善一级,心衰部分控制;无效:心功能改善不足一级,心衰未控制。1.5统计学处理采用t检验,数据以x±SD表示。
2结果
2.1心绞痛疗效比较(见表1)
2.2急性心肌梗塞疗效比较(见表2)
2.3心功不全治疗情况比较
2.3.1两组心衰疗效比较(见表3)
2.3.2两组超声心动图结果比较(见表4)
病梅馆记范文5
【关键词】胰激肽原酶;糖尿病下肢血管病变
【中图分类号】R587.2
【文献标识码】A
【文章编号】1814-8824(2009)-07-0035-02
下肢血管病变是糖尿病常见并发症,其临床表现为下肢疼痛、感觉异常和间歇性跛行,严重供血不足可致肢体坏疽,显著影响了患者的生存时间和生活质量。笔者自2008年3月～2009年3月,采用口服胰激肽原酶肠溶片治疗2型糖尿病下肢血管病变,取得了良好的临床效果,现将结果报道如下。
1 资料与方法
1.1 临床资料 2008年3 月～2009 年3月我院收治的2型糖尿病合并糖尿病下肢血管病患者60例,均符合世界卫生组织1999标准糖尿病及中华医学会糖尿病分会所制定的《中国糖尿病防治指南》诊断标准,排除严重高血压、脑出血、生命体征不稳定、明显的肝肾损害、急性冠脉综合征、肿瘤、上消化道大出血、伴自身免疫性疾病、服用影响免疫功能药物的患者;其中男33例、女27例,年龄55～85 (62±6.65)岁,糖尿病病程5～15年不等;将患者随机分为两组,每组各30例,两组患者在年龄、男女组成、糖尿病病程、血糖、合并其他慢性并发症方面差异无统计学意义。
1.2 治疗方法 两组均给予饮食控制,所有病例均给予常规饮食治疗加口服降糖药和(或)胰岛素治疗,使血糖控制达标并保持稳定。对照组在此基础上加用复方丹参片1片口服，每日三次。治疗组在此基础上加用胰激肽原酶(常州千红生化制药股份有限公司生产,商品名怡开) 120u口服，每日三次。30天为1个疗程，临床观察1个疗程。用药期间不合并应用钙离子拮抗剂、抗凝剂及扩血管药。
1.3 观察及评价指标 两组患者在治疗期间监测血压、血糖、出凝血常规等。观察临床症状、体征。显效:患者自觉下肢疼痛、冷感、间歇性踱行症状明显好转或消失。皮肤颜色转为红润或正常,皮肤温度明显回升或转为正常;有效:治疗后自觉症状好转,皮色及皮温有所改善;无效:自觉症状无改善,皮色及皮温无变化;恶化:自觉症状加重,并出现肢端坏疽。客观物理学检查：ABI :ABI < 0. 9 提示下肢动脉有明显狭窄, < 0. 5表明严重狭窄,
1.4 统计学方法 所有临床资料数据由SPSS12.0建立编辑与统计分析。计量资料以均数±标准差（x±s）表示，用t检验，疗效比较等级资料采用秩和检验分析。
2 结果
2.1 ABI 结果 结果显示两组治疗前后ABI 值均有好转表现,但在治疗后,治疗组的ABI 值与对照组相比明显升高(P
2.2 两组临床疗效比较 治疗组总有效率高于对照组，经检验两组具有统计学意义（P
3 讨论
糖尿病是独立于其他动脉硬化危险因素外引起下肢动脉硬化的危险因素,其所致的糖尿病下肢血管病变是糖尿病的严重并发症之一［1］。糖尿病下肢血管病变的病理基础是糖尿病的糖类及脂类代谢异常所导致的血管内皮损伤、中小动脉硬化、管腔狭窄、局部缺血缺氧坏死以及高凝所致的微循环灌注障碍。因此,治疗的关键就是:改善微循环障碍,纠正血液高凝状态及扩张周围血管,促进血管再通,改善局部缺血［2］。
胰激肽原酶是一种蛋白水解酶,能降解激肽原生成激肽,具有扩张血管、增加血流量、改善微循环的作用［3］。它还是一种活化因子,能激活纤溶酶原,溶解血栓［3］。通过激活纤溶酶原生成纤溶酶,提高纤溶酶活性,使血浆中纤维蛋白含量下降,从而改善血液流态、流速和流量。丛林等［4］发现胰激肽原酶对糖尿病患者脑血管供血有改善作用。
本研究显示,用胰激肽原酶治疗糖尿病下肢血管病变患者,明显改善临床症状,治疗的总有效率达93.3%,治疗组疗效高于对照组。治疗后的客观检测：ABI值指标均较对照组有明显的改善。本组患者在用药过程中无明显毒副作用,用药后未发现肝肾功能损害,表明在胰激肽原酶治疗中的副作用小,使用安全。综上所述,胰激肽原酶能明显改善糖尿病下肢血管病变患者的临床症状,提高患肢ABI值的客观参数,改善下肢微循环,对糖尿病下肢血管病变有明显的治疗作用。
参考文献
［1］ Ducery N , Curchod B.Oral buflomedil in diabetic bcuk2 ground ratinopathy : result s of a preliminary cont rollal study［J］.J Int Med Res ,1984 ,12 (3) :184-187.
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病梅馆记范文6
摘要： 目的 探讨内皮型一氧化氮合酶(eNOS)基因内含子4可变串联重复序列(VNTR)多态性与早发冠心病的关系。方法 以医院为基础的病例对照研究，选择新诊断的冠心病患者为研究对象。男性≤55岁及女性≤65岁患冠心病为早发冠心病，以188例早发冠心病患者为病例组，315例迟发冠心病患者为对照组。应用聚合酶链反应(PCR)技术检测eNOS基因内含子4 VNTR多态性。结果 eNOS基因内含子4 VNTR c/c、c/b、b/b、b/a、a/a基因型频率，早发冠心病组分别为053%，000%，8138%，1649%，160%；迟发冠心病组分别是 000%，032%，7746%，2032%，190%。c/c+c/b+b/b与b/a+a/a基因型在2组之间分布差异无统计学意义(P=0268，OR=1294，95%CI=0820～2043)。c、b、a等位基因频率，早发冠心病组分别是053%，8963%，984%；迟发冠心病组分别是016%，8778%，1206%。c+b与a的等位基因频率在2组间分布差异无统计学意义(P=0280，OR=1257，95%CI=0830～1904)。在α=005显著性水平上，用多元逐步非条件Logistic回归分析调整性别、吸烟、饮酒、收缩压、体质指数、腰臀比、甘油三酯和总胆固醇后，eNOS基因内含子4 VNTR多态性与早发冠心病也无显著相关(P=0427， OR=0819， 95%CI=0500～1341)。结论 eNOS基因内含子4 VNTR多态性可能不是早发冠心病发病的危险因素。
关键词： 冠心病；一氧化氮合酶，内皮；基因
Association between polymorphism of endothelial nitric oxide synthase gene and coronary heart disease
Abstract： Objective To assess the association between intron 4 VNTR polymorphism in endothelial nitric oxide synthase (eNOS) gene and premature coronary heart disease(p-CHD).Methods A hospital-based case-control study was conducted.Newly-diagnosed CHD patients were recruited as this study subjects.one hurdred and eighty-eight CHD patients diagnosed at/before 55 years old for males and 65 for females were assigned to p-CHD case group with other 315 CHD patients as the control group.Genotypes were detected by polymorphism chain reaction (PCR) technique.Results The genotype frequencies of c/c，c/b，b/b，b/a，a/a were 053%，000%，8138%，1649%，160% in p-CHD group respectively and 000%，032%，7746%，2032%，190% in the control group respectively.There was no significant difference between the p-CHD and the control group for comparing genotype frequencies of c/c+c/b+b/b with b/a+a/a (P=0268，OR =1294，95%CI=0820～2043).The allele frequencies of c，b，a were 053%，8963%，984% in the p-CHD group respectively and 016%，8778%，1206% in the control group respectively.There was also no significant difference between the p-CHD and the control group for comparing allele frequencies of c+b with a (P=0280，OR=1257，95%CI=0830～1904).Stepwise multiple logistic regression analysis at 005 significant level with adjust ment of sex，smoking，alcohol drinking，systolic blood pressure，overweight，waist-hip ratio，serum triglyceride，serum total cholesterol covariates showed that the eNOS4a had no significant effect on p-CHD (P=0427，OR=0819，95%CI=0500～1341).Conclusion eNOS intron 4 a/b VNTR polymorphism is not a risk factor for p-CHD.
Key words： coronary heart disease;nitric oxide synthase;endothelial;gene
遗传因素在冠状动脉粥样硬化性心脏病(冠心病CHD)发病中具有重要作用，但早发与迟发病例在遗传背景方面存在较大差异，其中，内皮型一氧化氮合酶(eNOS)基因对冠心病具有重要作用〔1〕。eNOS基因内含子4存在27bp的可变串联重复序列(VNTR)，研究显示，这种多态性与机体一氧化氮(NO)的代谢水平密切相关〔2〕。为探讨eNOS基因内含子4VNTR多态性与早发冠心病之间的关系，本文对188例早发冠心病及315例迟发冠心病进行观察比较。结果报告如下。
1 对象与方法
11 对象 选择2002年6月～2005年6月山东大学附属医院心内科确诊的新发病例503例，均符合1979年WHO制定的关于缺血性心脏病的诊断标准〔3〕，以男性≤55岁及女性≤65岁患有冠心病者为早发冠心病。以早发冠心病188例为观察组，平均年龄(511±776)岁；迟发冠心病315例为对照组，平均年龄(697±802)岁。
12 方法
121 现场调查 (1)问卷调查：内容包括年龄、性别、既往病史、吸烟史和饮酒史；体检包括身高、体重、腰围、臀围、收缩压(SBP)和舒张压(DBP)；并按体重/身高2(kg/m2)计算体质指数(BMI)，按腰围/臀围计算腰臀比(WHR)。(2)采集血样：抽取调查对象空腹肘静脉血5ml，其中1ml用乙二胺四乙酸二钠盐(EDTA)-Na抗凝，用于基因组DNA提取；4ml分离血清，用于血清学检测。(3)血清生化指标检测：血清甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)用酶法测定，试剂盒由(北京中生生物工程高技术公司。)
122 基因组DNA提取 用十二烷基硫酸钠(SDS)及蛋白酶K消化，酚/氯仿提纯，乙醇沉淀。
123 eNOS基因内含子4 VNTR多态性检测 以提取的DNA为模板，根据设计的上、下游引物，用PCR方法特异性扩增含有可变串联重复序列的片段。引物序列，上游5′-CTCAGCCCAGTAGTGAAGAC-3′；下游5′-GCTTCTCTTAGTGCTGTGGT-3′。PCR反应体系总体积为30μl，其中含模板100ng，引物各03μmol/L，50mmol/L KCl，15mmol/L MgCl2，10mmol/L Tris-HCl (pH=84)，015mmol/L dNTPs，15U Ex Taq DNA聚合酶(TaKaRa)。反应条件为95℃预变性5min，33个循环中95℃变性45s，58℃退火60s，72℃延伸45s，最后72℃延伸5min。PCR产物用8%的聚苯烯酰胺电泳，银染色观察实验结果。根据片段数量与长度进行基因型分析。
13 统计分析 用SPSS 115及STATA 82软件进行分析，计数资料用χ2检验；计量资料用两样本均数比较的t检验；多因素分析用多元逐步非条件Logistic回归。
2 结果
21 一般情况 (1)早发冠心病组男性104例，女性84例，性别比为124∶1；迟发冠心病组男性221例，女性94例，性别比为235∶1。早发冠心病组吸烟者73例，吸烟率为388%；迟发冠心病组吸烟者92例，吸烟率为292%。早发冠心病组饮酒者44例，饮酒率为234%；迟发冠心病组饮酒者45例，饮酒率为143%。其中性别比、吸烟率、饮酒率等差异均有统计学意义(P
22 eNOS基因内含子4 VNTR基因型及等位基因频率分布(表1) (1)将eNOS基因内含子4 的VNTR多态性按不同等位基因分析，4次串联重复序列等位基因记为eNOS4a；5次串联重复序列野生型等位基因记为eNOS4b；6次串联重复序列等位基因记为eNOS4c。PCR结果显示，共扩增出5种基因型，其中：a/a片段长度为425bp；b/a 2个片段长度分别为452和425bp；b/b片段长度为452bp；c/b 2个片段长度分别为479和452bp；c/c片段长度为479bp。(2)为观察eNOS4a基因型与冠心病的相关性，将eNOS4a与eNOS4b及eNOS4c进行基因型与等位基因频率分析。结果可见，c/c+c/b+b/b(合并后的频数与频率，早发冠心病组为154与8191%；迟发冠心病组为245与7778%)，与b/a+a/a(合并后的频数与频率，早发冠心病组为34与1809%；迟发冠心病组为70与2222%)，经比较，χ2=1229，P=0268，OR=1294，95%CI=0820～2043；c+b(合并后的频数与频率，早发冠心病组为339与9016%；迟发冠心病组为554与8794%)与a(频数与频率，早发冠心病组为37与984%；迟发冠心病组为76与1206%)，经比较，χ2=1167，P=0280，OR=1257，95%CI=0830～1904，差异均无统计学意义。
表1 eNOS基因内含子4 VNTR基因型及等位基因频率（略）
23 eNOS基因内含子4 VNTR多态性与早发冠心病关系多因素分析(表2) 在α＝005显著性水平上，用多元逐步非条件Logistic回归筛选性别、吸烟、饮酒、收缩压、BMI、WHR、甘油三酯、总胆固醇等有显著影响的可能混杂因素，并将eNOS基因内含子4 VNTR纳入模型，以探讨在控制可能的混杂因素后eNOS基因内含子4 VNTR多态性的效应。表2可见，eNOS基因内含子4 VNTR多态性与早发冠心病无显著性相关。
表2 eNOS基因内含子4 VNTR多态性与早发冠心病关系的多元Logistic回归分析（略）
注：VNTR：c/c+c/b+b/b与b/a+a/a比较；BMI≥240为1
3 讨论
目前，虽然国内外对eNOS4a/b VNTR多态性与冠心病之间的关系研究较多，但结果相差甚远。有资料认为〔4，5〕，eNOS4a 等位基因能显著升高冠心病的发病危险性。有研究表明〔6〕，eNOS4a/b VNTR多态性与冠心病无显著性相关，但有资料显示〔7〕，eNOS4a 等位基因对冠心病的发病具有显著的保护性作用。尽管导致现有资料结果相互矛盾的原因众多，但各研究所选研究对象年龄的不同可能是其原因之一，因为早发冠心病与迟发冠心病在遗传背景方面存在巨大差异。Lee等研究显示〔5〕，只有在年龄＜51岁的人群中，eNOS4a/b VNTR多态性与冠心病之间的关系才具有显著性。本研究结果显示，无论单因素分析还是多因素分析调整潜在的混杂因素后，eNOS4a/b VNTR多态性与早发冠心病之间均无显著性相关。唐欧杉等〔8〕选择年龄匹配的健康者作为对照组，结果显示，eNOS4a/b VNTR多态性与早发冠心病之间也无显著性相关，与本研究结果一致。关于eNOS4a/b VNTR多态性是否引起eNOS的功能改变目前尚无定论。虽然有资料显示〔2〕，eNOS4a 基因携带者血浆NO水平显著降低，但是eNOS4a等位基因与eNOS基因T-786C变异存在显著的连锁不平衡〔9〕，而eNOS基因T-786C变异能显著降低eNOS基因启动子活性〔10〕。因此，关于eNOS4a/b VNTR多态性仅仅是一个遗传标记，还是与冠心病发生相关的因素，以及其与冠心病之间的关系如何尚须进一步深入研究。
参考文献
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