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小豚鼠范文1
我家有两只可爱的小豚鼠，圆圆的身体，一公一母，母的那只叫“米米”黑，棕，白相间的身体，它?湮木玻?硬宦医校??橇街恢惺莸模??馨??庑?湎裢米樱?乇鹗悄橇娇呕苹频难莱荩?⌒〉亩?洌?劬Υ蟠蟮摹9?哪侵唤?ldquo;依依”，跟米米一样，豆大的眼睛，肥肥的身体，短短的脚，全身从深棕色到浅棕色。
它们很爱吃菜叶和枯草。我每天早上都会拿几片菜叶和枯草放在他们的笼子里，这就是他们的一顿饭了，依依通常饿了就会叫个不停，这时我便会再扯点儿菜叶给它们。我与豚鼠的趣事也挺好笑的。那天早上我提着我的米米和依依去新广场，想让它们见识一下世面，我把它们放在草坪上，我看着它们可爱的面孔，我忍不住想伸手摸一摸，我轻轻的打开半边门，没想到依依趁我不注意冒了一个头出来，我想他肯定钻不出来，于是便想逗逗它，看它怎么出来。看见它想进不敢进，想退又退不去的样子真搞笑。可是，我正在偷笑，一转眼，依依不知怎么的，突然出现在笼子外面。我心想：又不咋地，就等它玩一会儿吧。不知过了多久，外婆来了，她说我怎么把它放在外面了，我说我想等它玩儿一会儿。外婆伸手就想抓依依，依依立即冲进草丛里，我们往左往右都没看到依依，忽然，我好像发现了依依的身影，马上对外婆喊：“在那儿！在那儿！”我边说边指。我扑过去扑过来，都没捉到依依这个机灵鬼，我正在唉声叹气，外婆一把就捉住了依依，并把它放回笼子里。此后，我发誓，再也不放依依出来了。
我爱我的小豚鼠，我爱我的米米和依依。
五年级:余宁蒙
小豚鼠范文2
【摘要】 目的：进一步阐明休克血浆对心肌细胞的影响。方法：本实验利用常规的玻璃微电极细胞内记录技术，观察了休克血浆对豚鼠心室肌动作电位的作用。结果：用含一定浓度的正常血浆灌流时，豚鼠心室肌细胞动作电位的各指标均无显著变化，而用等量的休克血浆灌流，动作电位的APA、OS均显著升高（P＜0.05），APD50、APD90、APD也明显延长（P＜0.05）。结论：休克血浆可显著影响豚鼠心室肌动作电位APA、OS的高度及动作电位的时程，可能与心肌缺血再灌注心律失常的发生有关。
【关键词】 心室状肌；动作电位；休克血浆
【ABSTRACT】 Objective:The purpose of this study was to clarify the actions of shock plasma(SP)on guinea pig papillary muscles and its mechanism. Methods: By using conventional intracellular microelectrode technique the action potentials were recorded and the electrophysiological effects of SP on guinea pig papillary muscles were observed as well. Results: For normal papillary muscles， normal concentrated plasma didnt affect on their action potential， but shock plasma not only increased the amplitude of action potential (APA)， overshoot(OS)， but also prolonged the duration of action potential (APD)（P＜0.05）.Conclusion: The electrophysiological effects of shock plasma on guinea pig papillary muscles are likely resulted from arrhythmia caused by ischemiareperfusion injury.
【KEY WORDS】 Papillary muscles; Action potential; Shock plasma
休克是临床上常见急症，常因组织器官的缺血引起多个器官功能障碍，其中，心泵功能的降低是引起微循环障碍、组织细胞缺血性损害的重要原因[1]。探讨心肌缺血性损伤的机制并寻找抗心肌损伤的有效药物对疾病的治疗具有重要意义。为进一步阐明休克血浆对心肌细胞电活动的影响，本实验利用常规的玻璃微电极细胞内记录技术，观察了休克血浆对豚鼠心室肌动作电位的作用。
1 材料和方法
1.1 休克血浆的制备 按我室方法复制大鼠失血性休克模型[2]，大鼠颈动脉插管，经三通管一端连Lamson瓶，另一端记录血压，通过调节瓶的高度，将血压降至5.3kPa维持60min，颈动脉放血4ml，离心（2000转/min）10min，取上清液，制备休克血浆。
1.2 标本制备 选体重200～300g成年豚鼠，雌雄不拘。击颅致昏后迅速开胸取出心脏，置于O2饱和的改良Locke液中。暴露左室，选择分支少、大小约0.6mm×1mm×3mm的柱状肌。制好的标本以不锈钢针固定于灌流槽内的硅橡胶上，用（36±0.5）℃的改良Locke液恒温、恒速灌流，流速为5ml/min，灌流液中持续充以O2，pH7.4。标本在灌流液中稳定120min后开始实验。
1.3 电位引导 采用标准玻璃微电极技术记录心肌细胞电活动。玻璃微电极充以电极液后直流电阻为10～20MΩ。将刺激电极置于标本的心肌组织上，给一波宽2ms、1Hz，两倍阈强度的方波刺激，动作电位经微电极引出后，经镀氯化银的银丝输入DWF—3型微电极放大器后，一路输入监听器监听，另一路经高速数模转换器输入微机，采样存储动作电位并分析其各项参数指标。
1.4 观测指标 静息电位（resting potential， RP）、超射（overshoot， OS）、动作电位幅值（amplitude of action potential， APA）、0相最大除极速率（maximal rate of depolarization， Vmax）、复极50%和90%时间(50% and 90% of duration of action potential， APD50 and APD90)及动作电位时程（duration of action potential， APD）。
1.5 实验过程和分组 待动作电位稳定10min后开始采集一组正常的动作电位做对照，先用含有一定浓度的正常血浆液（20ml灌流液+2ml休克血浆）灌流，分别记录灌流后1min、3min、5min、10min、15min时的电位变化，然后用等量的休克血浆液灌流，记录上述各时间的电位变化。
1.6 统计学处理 动作电位的各观察数据均用x±s表示，t检验作统计学分析，P＜0.05为差异有显著性，P＜0.01为差异有高度显著性。
2 结果
用含有一定浓度的正常血浆液（20ml灌流液+2ml休克血浆）灌流心室肌组织15min，动作电位各观察指标与正常对照组比较无明显差异；然后改用等量的休克血浆液灌流，5min后，动作电位的超射值（OS）及幅值明显增高，分别由18.13±5.02mV，103.13±13.85mV增高至26.46±6.28mV，123.76±7.85mV(P均＜0.05)；10min时，动作电位时程(APD)开始显著延长，尤其是APD50由165.57±21.32ms延长至179.71±13.59ms(P＜0.01)，上述效应10～15min达到最大，见表1。2005年12月张晓云等：休克血浆对离体豚鼠心室肌的电生理效应第6期2005年12月河北北方学院学报（医学版）第6期表1 休克血浆对豚鼠心室肌动作电位的作用
3 讨论
本实验发现，给予一定浓度的正常血浆灌流液时，豚鼠心室肌细胞动作电位的各项指标均无明显变化，说明正常大鼠的血浆对豚鼠的心脏电活动不产生影响。而用等量的休克血浆液灌流时，豚鼠心室肌细胞动作电位的APA、OS均显著升高，APD50、APD90、APD也明显延长。这可能与休克血浆中肾上腺髓质素(ADM)和一氧化氮、神经肽Y等血管活性物质浓度明显高于正常、自由基超氧化物歧化酶（SOD）减低、脂质过氧化物丙二醛（MDA）升高、细胞内Ca2+超载、中性粒细胞损伤内皮细胞等因素有关[3～5]，致使心肌细胞膜Ca2+-Na+交换异常、Na+负荷过度，去极化时Na+内流增加，因而心室肌细胞动作电位的OS、APA明显增高，另外，可能由于Ca2+负荷过度，复极化缓慢，因此APD也明显延长。研究表明[6]，大量氧自由基生成及脂质过氧化反应是心肌缺血损伤的主要机制之一。心肌缺血时氧自由基产生增多，氧自由基与不饱和脂肪酸反应形成过氧化脂质，过氧化脂质进一步分解成MDA，MDA可与蛋白质的游离氨基及核酸等形成Schiff碱，而使生物大分子发生交联，心肌细胞膜的完整性受到破坏，造成对心肌的损伤，而这些改变可能是诱发心律失常的原因。
以上结果表明，休克血浆可显著影响豚鼠心室肌动作电位，对心肌缺血再灌注心律失常的发生可能起着重要作用，为临床治疗提供可靠的理论依据。
【参考文献】
1 肖献忠主编.病理生理学[M].北京：高等教育出版社，2004.76
2 姜华，张学锋，侯亚利，等.高分子右旋糖酐复制大鼠DIC模型[J].中华医学研究杂志，2002，2(6):503504
3 朱华栋.内毒素血症、细胞因子在失血性休克发展过程中的作用及治疗对策[J].中国急救医学，1999，19（8）：418421
4 赵克森，金丽娟.休克的细胞和分子基础[M].北京:科学出版社，2002.95
5 Bazzini G. Interaction of junctional adhesion molecule with the tight junction components ZO1，cingulin， and occludin[J].J Biol Chem，2000，275(27):2052020526
小豚鼠范文3
【摘要】 研究运脾方对免疫功能的调节作用，探讨运脾方增强免疫的作用机理。［方法］设立正常组、模型组、阳性对照组（消食健儿糖浆组）、运脾方大、中、小剂量组，测定正常小鼠免疫器官指数、吞噬指数与吞噬活性。［结果］运脾方大、中剂量组小鼠的吞噬指数及吞噬活性明显增强。［结论］提示运脾方对小鼠的免疫功能有上调作用。
【关键词】 运脾方 厌食症 巨噬细胞 小鼠 动物实验 儿童
Abstract:［Objective］ Study effect of YunPi Prescription on regulating the immune function， approach the mechanism of YunPi Prescription on how to enhance immune function. ［Method］All the mice were pided into groups: the normal group， the model group， the positive control group treated with Xiao Shi Jian Er Syrup， and YunPi Prescription treatment groups including high， middle and low dose; determine the index number of immune organ， phagocytic count and phagocytize activity of normal mice. ［Results］The high and middle dose of YunPi Prescription can obviously enhance the phagocytic count and phagocytize activity， YunPi Prescription has an upregulation effect on immune function.
Key words:YunPi Prescription; anorexia; macrophage; mice; animal experiment; children
运脾方是上海中医药大学孙远岭教授治疗儿童厌食症的有效验方，主要由黄芪、白术、煅龙骨、炒麦芽等组成。具有益气健中、运脾和胃之功效。临床应用治疗儿童厌食症、反复呼吸道感染儿童(复感儿) 等，能显著提高患儿食量，增进食欲，减少呼吸道感染次数及天数，减轻呼吸道感染程度。本研究通过测定小鼠的脏器系数及其碳廓清能力，探讨运脾方对免疫作用之机理，为其临床应用提供理论依据。
1 材料
动物：KM小鼠，雄性，体重22±2g，SPF级，由中科院上海实验动物中心提供，检疫后备用。药物及试剂：运脾方按国家药典规定加工为糖浆制剂，由本院制剂室提供。临床日服剂量按1ml/kg计，设大、中、小3个剂量组，相当于临床日用量的20、10、5倍。阳性对照药物：消食健儿糖浆，由四川豪运药业股份有限公司生产。临床日服剂量按1ml/kg计，试验时给药剂量为20ml/kg（相当于临床日服剂量的20倍）。印度墨汁为北京第二化工厂生产。主要仪器：塞多利斯BS124S电子天平，德国；UNICO WFZ UV2102C 紫外可见分光光度计，中美合资。XSP-6C双目生物显微镜，中国。
2 方法
2.1 运脾方对正常小鼠免疫器官重量和碳粒廓清能力的影响 取体重22±2g小鼠60只，雌、雄各半，随机分成正常组、阳性对照组、运脾方大、中、小剂量组，每组12只。按组分别灌服蒸馏水，消食健儿糖浆，运脾方糖浆制剂，连续给药7天。于末次给药后1h用印度墨汁法测RES吞噬活性，尾静脉注射印度墨汁0.1ml/10g体重，注射后2min、12min用毛细管从眼眶后静脉从取血20μl，溶于2ml0.1％Na2CO3溶液调零；将小鼠颈椎脱臼处死后，摘取肝脏和脾脏，称重。计算脏器系数，吞噬指数K和吞噬活性a的均值±标准差。
吞噬指数K=(logOD1–logOD2)/(t2–t1)
( 上式中OD1 、OD2 为不同时间所取血样的光密度，t2～t1为取两血样的时间差 )
吞噬活性a=K1/3*体重/（肝重量+脾重量）；脏器系数=器官重量/体重。
2.2 统计学方法 数据计算均数±标准差，采用单因素方差分析，用SPSS11.5进行统计处理。
3 结果
结果表明，小鼠连续灌服运脾方药液7天，与正常组比较后，有显著性差异。脏器系数有增大趋势，但统计学无显著差异；大、中剂量组吞噬指数K及吞噬活性a与正常组比较，有显著差异见表1。
4 讨论
《金匮要略》指出：“四季脾旺不受邪。”脾气健运，化源充足，气血旺盛，脏腑形体四肢百骸得养，正气充盛，抗病力强。腠理固密，则生机勃勃；反之，脾虚失运，化源匮乏，气血无由以生，脏腑形体四肢百骸失养，正气亏衰，抗病力弱，腠理疏松，不耐邪侵而患诸疾。脾虚证与免疫器官、非特异性免疫、体液免疫、细胞免疫、细胞因子、分子免疫以及免疫遗传学等方面异常改变均有极为显著的相关性［1］。运脾治疗对胸腺组织结构有较显著的恢复作用，可提高Ig、SOD 的含量，促进胸腺组织结构恢复等作用，从而显著提高脾虚大鼠免疫功能［2］。
表1 运脾方对小鼠免疫器官指数、吞噬指数K和活性a的影响（略）
与正常组比较，*P
单核巨噬细胞系统(网状内皮系统，reticuloendothelial system， RES)是机体非特异性免疫系统的重要组成部分。因能迅速清除多种致病物质，是维持机体内环境稳定的一个最重要的系统。巨噬细胞是免疫细胞的一种，具有多 种免疫功能如吞噬和杀伤多种病原微生物、处理和呈递抗原、分泌细胞因子(IL1、IL6、IL8、IL12、TNFα)、表达共刺激分子以加强 与T细胞的相互作用等方式参与免疫反应，在炎症、感染和肿瘤等许多疾病过程中发挥了重要的作用。其吞噬机能是反映动物非特异性免疫功能的主要指标之一，在一定范围内，体内碳颗粒被清除速率与血碳浓度呈指数函数关系［3］。巨噬细胞作为一种重要的抗原呈递细胞，在脾脏中所占比例的变化，可一定程度反映机体的免疫应答状况。研究发现，补气中药能使小鼠脾脏巨噬细胞的比例上调，提示补气中药对巨噬细胞有一定的活性作用，而运脾方主要成分中含有白术、黄芪等补气健脾中药，经合理配伍，对小鼠巨噬细胞的活性作用影响更为明显。本文研究结果发现运脾方大、中剂量能够增加小鼠吞噬指数和吞噬活性，加快碳粒廓清的速度，提示运脾方可能通过提高机体非特异性免疫的途径，增强免疫力，提高机体对有害刺激的防御作用。
【参考文献】
［1］ 修宗昌，余绍源，黄穗平.脾虚免疫学机制［J］.中国中医药信息杂志，2003，10(4)：1013.
小豚鼠范文4
小儿臀肌挛缩症是由臀肌及其筋膜的纤维变性挛缩继发髋关节屈曲、内收、内旋功能障碍,患儿表现为特有的外八字步态和姿势异常的临床病症。我院对本病均采用手术治疗,术后功能锻炼,无一例复发,有效率100%。本文对我院自2003年以来,收治的臀肌挛缩症进行总结告如下。
1 临床资料
1.1 一般资料:自2003年至2008年共收治小儿臀肌挛缩症患儿18例,男15例,女13例,年龄4岁～17岁,平均年龄8岁。双侧对称发病15例,双侧不对称发病即一侧重、一侧轻3例。所收病例均有反复臀部肌肉注射史,注射药物主要为青霉素、庆大霉素、安痛定等,所有病例均无家族史。
1.2 临床表现:步态异常,行走时双下肢呈轻度外展,外旋位,呈“外八字”状,跑步时出现“跳步征”;站立时,双下肢不能完全靠拢,轻度外旋,臀部尖削;坐立时,双膝分开,不能靠拢,交腿征阳性;双膝并拢不能下蹲,髋关节屈曲近90°,屈髋受限,出现“划圈征”或“蛙腿征”;髋部弹响,屈伸髋关节时,在股骨大粗隆表面有索带滑过并产生弹响;臀部可触及一条与臀大肌纤维走行方向一致的挛缩带,当髋关节内收内旋时更为明显;骨盆X片,可见假性双髋外翻,股骨颈干角>130°;血液化验,如肌酐、肌酸均正常,无肌肉病表现。
1.3 手术方法:消毒双侧术区,术中根据需要,取患侧卧位。切口取臀大肌前缘波状切口,长约10cm,下至股骨大粗隆下2cm止。显露臀大肌筋膜,切除增厚的纤维化组织,继之显露臀大肌纤维挛缩条带,将与四周组织分开,于大粗隆上缘切除,如仍影响髋功能,应松解髂胫束,必要时松解四周肌肉,最后依次探查中、小肌如有纤维挛缩病变一并松解。术中要被动活动髋关节,屈髋90°无弹响为止。术中彻底止血,术后放置引流,加压包扎。
1.4 术后功能锻炼:术后置于屈髋屈膝90°位,双膝并拢下肢交叉固定;术后2天拔出引流条,床上练习仰卧起坐;术后4天,下地扶床头作蹲起活动;术后伤口痛疼减轻,即作下地并膝行走;双膝并拢固定2周,出院后功能锻炼3个月。
2 讨论
2.1 发病原因:一般认为臀肌挛缩症系臀部肌肉注射后继发的医源性疾患,本院所收病例均有反复臀部肌肉注射史,也说明此点。任何注射剂均有刺激性,反复多次注射,可引起局部化学性炎症,继而发生纤维化、纤维组织增生,最后形成纤维痛瘢痕挛缩束带,从而引起一系列症状及体征,由于双侧臀部接受肌肉注射的机会往往相等,故多双侧发病。
2.2 术中注重事项:所收病例术中发现病变范围主要累及臀大肌的前下部分和阔筋膜张肌的后缘,但病变广泛者可引起臀中肌变性、髋胫束或髋关节外旋肌、臀小肌、阔筋肌张肌等变性挛缩,偶见关节囊及皮肤皮下组织受累者。由于本病非手术治疗无效,所以一旦确诊,应尽早采取手术治疗,与以往手术切口不同,我们取臀大肌前缘波形切口。由于臀部许多肌肉止于粗隆四周,并且是肌肉筋膜病变最为严重的部位,因此,以股骨大粗隆为中心,使松解挛缩组织更为方便,并便于探查臀中、小肌。为正确判定病情,术中应注重正确的髋关节检查,具体方法是,无论单侧、双侧发病,均消毒双髋、双下肢皮肤,这样在检查一侧髋功能时,便于防止对侧髋、膝关节屈曲,固定骨盆,排除骨盆移位所致假象,并可进行双侧对比,防止因两侧臀肌松解程度不一致而引起术后跛行及骨盆倾斜。若发现患侧臀大肌、阔筋膜、髂陉束等挛缩组织松解后,髋关节在伸直位仍不能内收时,应考虑臀小肌受累的可能,这时首先探查臀中肌,有挛缩则予以松解,若无明显病变,则将其向前牵引,显露臀小肌,有变性,影响髋关节功能者,于大粗隆顶点彻底切断臀小肌肌腱。术中应注重保护坐骨神经,防止误伤,术后彻底止血,加压包扎,防止血肿形成和发生感染。
2.3 术后早期功能锻炼可防止粘连,避免术后复发,提高整体疗效,恢复关节的正常活动度,是手术治疗小儿臀肌挛缩不可缺少的组成部分。
参考文献
小豚鼠范文5
【关键词】 感觉神经节
关键词: 哮喘;感觉神经节;P物质;免疫组织化学
摘 要:目的 探讨豚鼠哮喘后颈静脉节和结状节P物质（SP）表达变化. 方法 成年雄性豚鼠随机分为正常组和哮喘组，采用免疫组织化学法观察豚鼠颈静脉节和结状节SP免疫反应神经元的变化. 结果 哮喘组颈静脉节和结状节SP免疫反应神经元数量发生了显著变化，哮喘组与正常对照组比较颈静脉节和结状节SP免疫反应神经元数量显著增加（P
Keywords:asthma;sensory ganglion;substance P;immuno-histochemistry
Abstract:AIM To investigate the changes in SP immunore-active neurons in the jugular tubercle and nodose ganglion of asthmatic guinea pigs.METHODS Immunohistochemistry was used in this study.RESULTS There was a significant increase in the numbers of SP immunoreactive neurons in the jugular tubercle and nodose ganglion of asthma group（P
0 引言
人们很早就注意到神经因素在哮喘发病机制中的作用，尤其是感觉神经与哮喘的关系越来越受到学者关注.研究［1-3］ 发现，P物质（substance P，SP）、神经肽A（neurokinin，NKA）、降钙素基因相关肽（cal-citonin gene-related peptide，CGRP）等神经肽类可以引发气道神经源性炎症，包括气道平滑肌收缩、血管通透性增加和炎性细胞浸润.研究发现哮喘患者支气管肺泡灌洗液（BALF）中SP，CGRP浓度均显著高于健康人群水平，特别是在急性发作时，SP和CGRP浓度进一步升高.同时有文献［4，5］证明哮喘发作时肺内SP和CGRP免疫反应阳性神经纤维数目和分布状态均发生非常明显的变化.而哮喘时肺内感觉传入神经胞体所在主要部位 结状节和颈静脉节SP表达的变化如何尚不清楚.我们应用免疫组织化学方法观察了哮喘豚鼠结状节和颈静脉节SP的表达变化，为阐明哮喘发病机制提供实验依据.
1 材料和方法
1.1 材料 成年雄性豚鼠20只，体质量（300±50）g，由第四军医大学实验动物中心提供.随机分为2组，即哮喘组和对照组，每组10只.
1.2 方法
1.2.1 复制豚鼠哮喘动物模型 实验的前1日腹腔内注射100g・L-1 卵白蛋白（Sigma）1mL;第10日开始吸入10g・L-1 卵白蛋白气溶胶30min，1次・d-1 ，连续14d.对照组用生理盐水代替卵白蛋白.
1.2.2 取材 于实验第24日以戊巴比妥钠（40mg・kg-1 ，ip）麻醉豚鼠，开胸经主动脉灌注100mL生理盐水，继以新配制的4℃40g・L-1 多聚甲醛加PB溶液（0.1mol・L-1 ，pH7.4）500mL持续灌注90min，取出结状节和颈静脉节，入200g・L-1 蔗糖PB溶液中，4℃过夜.
1.2.3 免疫组织化学染色 恒冷箱切片，片厚14μm，贴片于10g・L-1 明胶加50mg・L-1 硫酸铬钾处理过的载玻片上，室温干燥30min后，以0.01mol・L-1 PBS（pH7.4）浸洗，经800mL・L-1 甲醇加30mL・L-1 H2 O2 封闭10min，入30mL・L-1 Triton X-100中30min，KPBS浸洗3×10min，切片入兔抗SP血清（1∶4000，Oncogene Science），室温孵育24h.KPBS浸洗3×10min，入结合生物素的羊抗兔IgG血清（1∶500，Sigma），室温孵育3h，KPBS浸洗3×10min，入ABC复合物（1∶500，Sig-ma）室温孵育2h.葡萄糖氧化酶-DAB-硫酸镍胺法显色.显色反应终止后，常规脱水透明，DPX封片.光学显微镜下观察照像.替代实验在各组切片中随机抽取切片，以KPBS代替一抗，其余步骤相同.
统计学处理:以肺内气道为分析对象，显微镜下行图像分析，测量单位玻片面积内SP-IR阳性细胞数.按x ±s进行两组间t检验.
2 结果
2.1 对照实验 替代实验未见有意义的染色.
2.2 正常对照组感觉神经节SPIR细胞分布 在结状节仅有极少量SP阳性标记细胞分布（Fig1），在颈静脉节则相对较多，SP主要表达于胞质中.
2.3 实验组感觉神经节SPIR细胞分布 在结状节（Fig2）和颈静脉节（Fig3）的SP阳性标记神经元较正常对照组明显增多，表达SP的阳性纤维也较多（Fig4）.
图1 －图4 略
2.4 感觉神经节内SPIR细胞记数 哮喘组结状节和颈静脉节的SP阳性标记神经元分别为（13±3）个・mm-2 和（35±7）个・mm-2 ，较正常对照组的（8±2）个・mm-2 和（18±4）个・mm-2 明显增多，两者相差显著（P
3 讨论
呼吸道中60%的感觉神经随迷走神经走行，其胞于颈结状节和颈静脉节，后者发出中枢突随迷走神经根终止于孤束核、极间核（nucleus inferpo-laris）、三叉神经尾侧亚核以及颈髓背角浅层;另外，约40%的感觉传入经C7-T5脊神经节、交感神经颈上节分别传入脊髓背角浅层以及孤束核内.其神经纤维主要是Aδ，C类纤维，在正常呼吸道主要分布于粘膜下层和外膜层，其神经肽为SP，NKA和CGRP.在哮喘动物模型及患者的血液和BALF中发现有异常数量的SP，NKA等感觉神经肽［6-8］ ，而SP又可以引起哮喘样的炎性反应，因此认为肺内感觉神经末梢释放异常量的神经肽与哮喘发作有密切关系.相应的实验［4，5］ 表明，哮喘发作时肺内SP和CGRP免疫反应阳性神经纤维数目增加，分布状态也发生非常明显的变化.
现在认为肺内SP的释放过程是通过神经纤维的轴反射机制实现的，但这种认识仅限于肺内局部神经纤维，没有涉及神经元的作用，也忽略了感觉神经通过反射机制引起传出神经元的作用，因而也无法阐明神经系统在哮喘发生中的作用机制.我们在实验中发现哮喘时颈静脉节的神经元胞质中有大量SP表达，这表明感觉神经元胞体与哮喘发生有密切关系.至于神经元和肺内神经纤维发生变化的因果关系尚不清楚.我们的实验还发现结状节内仅有少量SP免疫染色阳性细胞，表明肺内感觉神经末梢的SP等神经肽可能主要来自位于颈静脉节的胞体.这与文献［9］是一致的.
现在认为神经的营养、生长和功能改变是与神经生长因子（nerve growth factor，NGF）密切相关的，因此哮喘发生时感觉神经节内神经元的这种变化与NGF有何种关系是我们必须要考虑的问题.有关NGF与肺内周围神经纤维的关系已有大量的证据［10-12］ .Annick等［13］ 发现静脉直接给予NGF30min～3h后能提高组胺诱发的气道收缩幅度达200%，并且这种增强效应可为速激肽-1受体拮抗剂完全拮抗.进一步发现NGF在患者血液以及BALF中浓度的升高是因为IgE介导的肥大细胞中NGF的大量释放的结果［14］ .这提示哮喘发生时神经功能的改变可能与免疫炎性反应相关.
据此我们推测哮喘时气道各种炎性因子促进炎性细胞释放NGF，BDNF等，进而导致气道感觉神经元兴奋性提高和神经纤维再生，而高度兴奋的感觉神经元可通过增加反射弧传入冲动、促进冲动传导和表达分泌SP等功能增加，进一步加重哮喘，如此恶性循环，导致哮喘迁延不愈.
参考文献:
［1］Lundberg JM，Franco-Coreceda A，Hua X，Hokfelt T，Fischer JA.Co-existence of substance p and calcitonin gene related pep-tide-like immunoreactivities in sensory nerves in relation to car-diovascular and bronchoconstricter effects of capsaicin ［J］.Eur J Pharmacol，1985;108（3）:315-319.
［2］Palmer JB，Cuss FM，Mulderry PK，Ghate MA，Springall DR，Cadieux A，Bloom SR，Polak JM，Barnes PJ.Calcitonin gene-related peptide is located to human airway nerves and potently constricts human airway smooth muscle ［J］.Br J Pharmacol，
1987;91（1）:95-101.
［3］Karlsson JA.Purines and sensory neuropeptides in human bull ［review］［J］.Eur Physiopathol Respir，1987;23（suppl10）:95s-101s.
［4］Wu CG，Mao BL，Sun B.The distribution of substance P in the lungs of asthmatic guinea pigs and the influence of dexametha sone on the distribution ［J］.Zhonghua Jiehe He Huxi Zazhi（Chin J Tuberc Respir Dis），1998;21（1）:16-18.
［5］Chu DL，Song JF，Rao ZR，Qiu JY.Changes of CGRP im-munoreactive nerve fibers in the lungs of asthmatic mice ［J］.Di-si Junyi Daxue Xuebao（J Fourth Mil Med Univ），2001;22（13）:1168-1171.
［6］Spina D，Shah S，Hanison S.Modulation of sensory nerve func-tion in the airways ［J］.Trends Pharmacol Sci，1998;19（11）:460-466.
［7］Tomaki M，Ichinose M，Miura M，Hirayama Y，Yamauchi H，Nakajima N.Elevated substance P content in induced sputum form patients with asthma and patients with chronic bronchitis ［J］.Am J Respir Crit Care Med，1995;151:613-617.
［8］Heaney LG，Cross LJ，McGarvey LP，Buchanan KD，Ennis M，Shaw C.Neurokinin A is the predominant tachykinin in human brochoalveolar lauid in normal and asthmatic subjects ［J］.Thorax，1998;53（5）:357-362.
［9］Hunter DD，Undem BJ.Identification and substance P content of vagal afferent neurons innervating the epithelium of the guinea pig trachea ［J］.Am J Respir Crit Care Med，1999;159（6）:1943-1948.
［10］Hogle GW，Graham RM，Finkelstein JB，Nguyen KP，Gozal D，Friedman M.Hyperinnervation of airways in transgenic mice overexpressingnerve growth factor ［J］.Am J Respir Cell Mol Biol，1998;18（2）:149-157.
［11］Braun A，Lommatzsch M，Lewn GR，Lommatzsch M，Lewin GR，Virchow JC，Renz H.Neurotrophins:A link between air-way inflammation and airway smooth nuscle contractility in asth-ma ［J］?IntArch Allergy Immunol，1999;118:2-4，163-165.
［12］Virchow JC，Julius P，Lommatzsch M，Luttmann W，Renz H，Braun A.Neurotropins are increased in bronchoalveolar lavage fluid after segmental allergen provocation ［J］.Am J Respir Crit Care Med，1998;158（6）:2002-2005.
小豚鼠范文6
【关键词】哮喘；布地奈德混悬液；IL-13
文章编号：1004-7484（2013）-11-6828-01
支气管哮喘的基本特点为慢性炎症和气道高反应性[1]。哮喘反复发作时存在的急慢性炎症过程可引起气道不可逆结构性改变，当气道上皮下基底膜网状结构增厚和纤维化及平滑肌层增厚、血管增生扩张等改变时，称为气道重塑（airway remodeling）[2]。这就是临床上慢性持续性哮喘气流阻塞存在不可逆性成分的重要、原因。近几年，随着免疫学和分子生物学的进展，对哮喘的发病机制的研究有细胞水平进入了分子水平，细胞因子，粘附因子等炎症介质在近些年成为了研究的热点，说明上述因子在哮喘发病机制中具有重要的作用。目前的研究认为[3]IL-13可能参与了哮喘气道重塑的过程。目前糖皮质激素是治疗哮喘的首选药物，而吸入糖皮质激素可作用于炎症的多个环节，调控靶细胞的基因转录，抑制多种炎症因子的生成及炎症细胞的活化，提高β2受体的敏感性，进而防止气道重塑。有鉴于此，本研究通过向哮喘豚鼠模型雾化吸入布地奈德混悬液，以气道上皮组织中IL-13的表达作为观察指标，探讨吸入布地奈德混悬液在哮喘治疗中的作用机制及局部与全身用药的差异。1资料与方法
健康雄性豚鼠40只（由南华大学动物实验部提供，清洁级），12周龄左右，体重（400±50）g。豚鼠40只按随机数字分成对照组（A组）、哮喘组（B组）、吸入布地奈德组（C组）和地塞米松组（D组），每组10只。复制哮喘模型哮喘组首日和第15日两次致敏，10%卵清白蛋白1ml，腹腔注射，第二次致敏后一周开始超声雾化吸入3%的卵清白蛋白激发哮喘，依症状雾化吸入30s至3min，直到出现哮喘症状：呼吸增快，点头呼吸，躁动，隔日诱喘一次，共18次。地塞米松治疗组和吸入布地奈德治疗组致敏方法及诱喘方法同哮喘组，第21日起每次诱喘前30min雾化吸入布地奈德1mg和腹腔内注射地塞米松1.5mg/kg。对照组以生理盐水替代卵清白蛋白同步实验。动物处理：哮喘豚鼠于末次雾化吸入24h后，以1000u/ml肝素钠腹腔注射抗凝，水合氯醛（0.8g/kg）腹腔注射麻醉，无菌开胸穿刺心脏取血处死豚鼠，收集标本。通过气管插管导管（由中心静脉导管改成）灌注10%中性甲醛使肺叶充分膨胀，取一叶支气管肺组织做图像分析，其余肺组织置于10%中性甲醛中固定24h以上，常规石蜡包埋，切片行HE染色、免疫组化。IL-13抗体染色采用链霉亲和素-生物素-酶（SABC）免疫组化染色法。胞膜或胞浆内有棕黄色颗粒且着色明显高于背景者为阳性。免疫组化结果在400倍视野下，每张玻片随机取10个视野，用BLTS2080病理图象采集系统和Image Pro Plus 5.02专业图像分析软件，分别测定阳性颗粒的平均光密度值，进行分析处理。所有统计分析使用SPSS13.0软件进行分析，计量资料用资料用均数±标准差表示，组间均数差异的比较采用t检验，计数资料采用χ2检验，以p
哮喘组切片可见气道黏膜、黏膜下层、肺泡区有大量呈棕黄色的阳性细胞，对照组切片可见气道黏膜、黏膜下层、肺泡区有少量呈棕黄色的阳性细胞，平均光密度值分析比较，哮喘组IL-13的平均光密度值均明显高于对照组，示哮喘组IL-13阳性表达明显强于对照组，而布地奈德治疗组及地塞米松治疗组IL-13的表达相对于哮喘组均有不同程度的减轻，差异均有统计学意义，而布地奈德治疗组及地塞米松治疗组组内比较差异无统计学意义，见表1。
3讨论
支气管哮喘是由多种细胞特别是肥大细胞、嗜酸性粒细胞和T淋巴细胞参与的气道慢性炎症。其发生是由遗传因素和环境因素共同作用的结果，免疫反应的异常在发病机制中起重要作用。目前大量的研究表明至少有10余种细胞、20余种细胞因子和50多种生物活性物质参与了哮喘的发生[4]。
IL-13是一个重要的介导变态反应的Th2型细胞因子，它的过度增加可诱发变态反应，如出现气道高反应性、嗜酸性粒细胞炎症、Ig-E增高等，还与多种粘附分子及趋化因子表达增多、支气管杯状细胞分泌黏液增多和气道纤维化有关。在趋化因子的作用下，血管内的炎症细胞与血管壁的粘附分子结合并跨越血管壁、定向移行从而向气道聚集。IL-13还可抑制Eos的凋亡，延长其存活时间[5]从而使气道炎症的持续时间延长。IL-13能够刺激人肺纤维细胞产生纤维素，并呈时间质量浓度依赖关系，参与呼吸道重塑过程。
布地奈德是一种非卤化糖皮质激素，有较高的糖皮质激素受体结合力，具有很强的抗炎作用，可减轻炎症渗出，减轻水肿和毛细血管扩张，抑制炎症细胞向炎症部位移动，阻止过敏递质的释放并降低各种过敏递质的活性，同时可抑制组织中细胞生长因子和趋化因子的合成和释放，并可通过对血液循环中T淋巴细胞和嗜酸性粒细胞的再分配作用，促使其由血液进入机体其他部位，使其在血循环中的数量减少；并可促使中性粒细胞、巨噬细胞向炎症部位的聚集减少。
本研究结果显示，哮喘豚鼠应用糖皮质激素（包括布地奈德混悬液及地塞米松），肺部炎症反应明显减轻，镜下显示与哮喘组及对照组有明显的区别。哮喘组豚鼠气道内的IL-13水平明显高于正常对照组，二者之间存在统计学差异（P
综上所述，哮喘的气道重塑过程中，IL-13具有重要的调控作用，其在很大程度上促使或诱发气道重塑的发生。吸入用布地奈德混悬液可能通过抑制IL-13在哮喘豚鼠肺组织中的表达，从而达到抑制气道重塑的作用，减轻哮喘症状，避免或延缓肺功能的进一步损害。同时，吸入用布地奈德混悬液作为局部作用的激素，与全身用糖皮质激素的作用比较差异无统计学意义，二者均能降低气道内IL-13的水平。参考文献
[1]钟南山.支气管哮喘-基础与临床.人民卫生出版社，2006：438.
[2]刘鑫，戴爱国.柴朴汤对哮喘豚鼠嗜酸粒细胞凋亡及气道重塑的影响.四川中医，2005，23（6）：11-12.
[3]Wen FQ，Kohyama T，Skold CM，et al.Glucocorticoids molecular TGF-beta production by human fetal lung fibroblast[J].Inflammation，2003，27（1）：9-19.