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田汉妻子范文1
1、这个冬季，是寒冷的，雪，一直飘，看着，让人不寒而栗。人们都不愿出门，不愿被那寒冷的气息包围，就连小星星，也不愿待在天上了，让这深夜显得更苍茫、寂寞了。
2、依然无语，我强忍住寒冷，而寒风却更加肆无忌掸，奔腾着，呼啸着，如同一群手持大刀的魔鬼，气势汹汹地奔腾而来。一直进入我的骨髓，我的手脚麻木了，紧接着，我的心也随之麻木了。牙床不由自主地瑟瑟发抖。
3、与闷热的夏日不同，冬日的寒风是真真实实地扎进血肉的，呼啸的疾风狂躁地卷着冰冷而来，冬天这个季节，如一把叛逆的利剑，透支着少的可怜的温暖，使放荡不羁的寒冷汹涌而来。
4、肆虐的雪花纷纷扬扬地飘落下来，凛冽的寒风一阵一阵地吹过。路上都是缩着脖子，拉紧了衣服的领口急匆匆地的行人，空气中到处膨胀着寒冷和干燥。这样的天气几乎统治了这个冬天。
5、快半夜的时候，天气冷极了，惨白的月光下，沙丘好似一座银子筑成的坟，毫无动静。
6、去年的冬日异常寒冷，滴水成冰。出行的人们不得不捂着口罩，呼出的热气立刻结霜。
7、我和妈妈捂得严严实实，准备出门去欣赏雪景。寒风刺骨，但空气清新，使我迫不及待地想要去看看这场雪留下的痕迹。
8、数九以来，朔风吹，寒气逼人，这又是一个奇冷的冬天。
9、树叶也不例外。寒冷的空气把他们麻痹，只是万事具备，只欠冬风了。一阵风吹过，树叶纷纷活跃了起来。有些树叶经受不了寒风的刺痛，从树上坠下，永远沉睡了。
10、一年一度的冬季长跑在这个寒冷的季节也开始了。当我们长跑的队列站到了操场上，我感到，我的手无法正常伸出来，寒冷让十指早已弯曲僵硬。我的脸冻得生疼，从嘴里呵出的热气在阳光下宣泄着，一屡屡地缭绕在我的眉宇间。
11、枯黄的树叶随着萧萧的寒风，纷纷投身于大地母亲的怀抱。
12、冬天的早晨，是寒冷的。寒风呼呼的吹着，吹到脸上如同刀割一样疼，出行的人们都戴上厚厚的帽子，穿上了暖和的棉衣。
13、鹅毛般的大雪瀌瀌的下着，交织、缠绕成凌杂的油画。少年在一间漏缝百出的茅草屋中哆哆嗦嗦，牙齿不住地打着寒颤，手也因寒冷而发抖。
14、在北方，寒冷的冬天已经到来了。早上，呼呼呼，寒冷的北风吹在人们的脸上，()像刀割一样。青蛙不再唱卡拉OK，树木像一把把光秃秃的扫把，上面结满了冰凌。
15、刚烧开的水，一落地就结冰了。
16、如此冷的天，不仅人耐不住，动物们耐不住，花草也耐不住。昔日在枝头欢快歌唱的小鸟不见了，就连我讨厌的蚊子，蜘蛛，一个个的也不见了踪影。花儿凋零了，草儿枯黄了。但是，唯有那路边的松柏依然绿意浓浓，给这块寂寥的大地注入了几番生命的活力。
17、他在寒冷的北风中瑟瑟发抖，手脚都冻僵了。
18、今年的冬天又是一个寒冷的严冬，冷的人们直打哆嗦，仿佛整个地球放在一个冰冷的水箱里。
19、迎来了冬，我的第一感觉是寒冷寂寞。是冬的冷清让懂得如何冷静，我明白了，不是一切的寒冷都会让人失意。
20、当黎明的曙色尚未到来的时刻，我感到透骨奇寒，便匆匆跑回宿舍，取件衣服披上。
21、北方的天气十分寒冷，滴水成冰，寒风刺骨。
22、房顶破了好几个洞，连绵不绝的雨水如根根麻线密集而又无情地落到屋里，打湿了整间贫寒的小屋，空气里满是寒冷，我的眉毛上几乎都可以结上一层霜。
23、雪花疯狂的咆哮着，打在脸上如同针扎一般，冰凉刺骨。
24、秋天尚未离去，那寒冷动冬天却迫不及待地来了。它还带来了寒冷的雨丝，把人们都冷冻在寒冷之中，感觉不道德一丝的温暖，使人们的心都麻醉了。
25、天气冷得能把湖水结成厚冰。
26、听老师说，这儿夏天是长沙最热的，热得像火上烧的炉子；冬天恰恰又是最冷的，冷得像冰箱。现在正值冬季，冷得我们穿四件衣服才敢到外面走走。
田汉妻子范文2
认清自己，拒绝童星光环
张子枫是被放养的小孩。在成长的过程中，她的父母很少用规规条条来束缚她，而是努力尊重她的意愿。因为得到了足够的尊重和自由，张子枫一直都是按照自己的节奏成长的。
在很小的时候，张子枫就对表演发生了兴趣，她喜欢看电视，还经常模仿经典影片中的片段，将大人们都逗得忍俊不禁。看到女儿颇具演艺天赋，张子枫的爸爸妈妈便送她去少年宫学习表演，她也学得非常认真，很快就成为了当地的演艺小明星。6岁那年，她偶然接拍了美的豆浆机的广告，其乖巧可爱的形象很快受到了观众的喜爱，她也因此被选中拍摄了一系列的广告。
虽然拍广告让张子枫获得了许多在荧屏上露脸的机会，但她并不满足于仅仅成为广告商的宠儿，而是认真地告诉妈妈：“我要当演员。”妈妈很尊重女儿的想法，于是便带着她去北京寻找机会。就这样，年仅6岁的张子枫成为了一名“小北漂”。做北漂的日子很辛苦，张子枫和妈妈租住在简陋的出租屋里，为了拍戏经常大冬天里四五点就要起床，但6岁的小丫头却咬着牙没喊过一声苦。因为极具表演天分又不娇气，张子枫先后参演了多部电视剧，虽然演的都是小配角，可她无一不是认真对待，颇受导演们的喜爱。
7岁那年，张子枫被冯小刚选中，在电影《唐山大地震》中饰演小方登一角。电影拍摄的过程非常辛苦，张子枫每天单是化妆就要3个半小时，要不停淋雨，还要被压在石板下，满身灰满嘴泥，对此很多孩子都受不了，张子枫却一声不吭。更让人惊喜的是她的眼神真实而充满灵气，以至于冯小刚都忍不住夸她：“她的眼神太有戏，让我敢给她各种特写，都能打动观众。她是这个电影的宝贝，没有她这个电影不会这么有底气。”徐帆也非常欣赏她的真实，赞她“演技太好”。而凭借《唐山大地震》中的表演，张子枫斩获了第31届大众电影百花奖最佳新人奖 。
虽然年少成名，但张子枫却有着不同寻常的低调和清醒，她拒绝媒体称自己为“童星”，并认真告诉记者：“我就是一个小学生。”
享受拍戏，做个真正艺术家
没有受过专业训练的演员演戏，大都会在导演的引导下亦步亦趋，但张子枫却能在最快的时间里入戏，不仅自己表现得特别到位，还能激发出其他演员的情绪。2010年她和王宝强合作《我的父亲是板凳》，王宝强便直夸她太会演戏，能带领着搭戏的演员一起往戏里走。正因如此，剧组里的好多演员都不敢跟张子枫对戏，还跟她开玩笑说“你这老天爷赏饭吃的小家伙也给大伙留口饭吃吧！”
在片场拍戏时，童星们因为年纪小、活泼可爱往往容易受到大伙儿的照顾和喜爱，但张子枫却从来不拿自己当小孩儿看，而是时刻以一个专业演员的标准来要求自己。业余时间里，她会主动去看许多专业理论方面的书籍，并把握机会向导演和资深演员们请教。每次开机后，她总能在最短的时间内进入工作状态。2011年，她和徐峥一起拍摄《摩登年代》，其间她表现得非常敬业，技术调整方面的问题更是一点即通，不需浪费额外的口舌沟通。剧中有场戏是张子枫忽悠交警，她把河南话飚得有板有眼，表情动作无懈可击，连科班出身的徐峥也心服口服，赞她：“说到戏我觉得她简直就是一个艺术家，她那种天然的感受能力和孩子的纯真完美融合在一起。她无疑是中国最好的女演员之一。”
就这样，张子枫保持着每年至少拍一部戏的节奏，在《心术》、《宫锁沉香》、《老爸回家》等多部作品中都有精彩表现。但因为拍戏占用的时间太多，她在学习上有些松懈，有一次她离开剧组后参加考试，结果英语考了个全班最低分――17分。看到成绩，张子枫觉得特别受打击，暗暗下决心要把成绩提上去。此后她尽量将拍戏时间安排在寒暑假，还经常利用拍戏的闲余时间温习功课，终于把成绩提了上去。她经常在微博上鼓励自己和粉丝用功读书，有粉丝问她：“你都是明星了，有那么多导演等着跟你合作，成绩好不好还有那么重要吗？”张子枫却说：“除了演员，我还有一个身份是学生，我得对得起自己的学业。”
除了立志要当学霸，张子枫还非常认可黄磊说的一句话“读书多才是王道”。这里说的读书不单是指课本，还有各方各面的书籍。因此张子枫一直在阅读中广泛涉猎，从金融、推理到科普、文学无所不读。她甚至还自学起了编程，并立志要考北大考古系。她说：“我热爱演戏，但却不想为了演戏而演，这就需要夯实的文化底蕴做铺垫，我希望多年以后自己成为一名艺术家，那就要从现在开始打基础。”
剧组为家，看遍繁华不改天真本色
张子枫在非常小的时候便离家北上，除了学校，剧组就是她最常待的地方。在片场，她遇见过形形的演员，有人敬业有人散漫，有人谦逊有人傲慢，她曾经以为，自己必须学会跟形形的人打交道，游刃有余地穿梭于片场之间才能受到大家的欢迎。但慢慢的她发现，讨人喜欢其实没那么重要，只有认真做好自己该做的事，踏踏实实提升自己的演技，才能在剧组中获得他人的尊重。
因为很小就开始接触社会，张子枫非常善解人意，待人也特别体贴：热天看到工作人员忙得汗流浃背，她会主动跑出去帮大伙儿买水喝；在户外拍片的时候天寒地冻，她怕其他小伙伴着凉便主动借出了自己的外套；拍戏时有粉丝来探班，她也从来不耍大牌，而是一口一个哥哥姐姐叫得亲热，并自掏腰包带大家出去用餐；在微博上看到一家机构收养的狗狗食物短缺，她默默寄去了一大批狗粮……因为善良贴心，张子枫还获得了“暖心少女”的称号，而她快乐的秘密就是：“把剧组当作自己的家，用心去对待每一个人，这样走到哪里都能感受到家的温暖。”
虽然天资卓著，演起戏来自带光环，但张子枫还是把握一切机会提升自己的演技，并搭建起了自己的“表演金字塔”理论，练就了炉火纯青的哭功和笑功，遇到哭戏，她在五秒钟内便能眼泪直流，笑起来更是表情百变，《唐人街探案》中诡异的笑容令无数人毛骨悚然，成为了该剧最大的看点，而她在《同桌的你》中饰演的周小栀更是摘得了中国电影导演协会表彰大会的“年度女演员”奖项。
田汉妻子范文3
【摘要】 目的 观察牛黄天龙胶囊（含药血清）对人子宫内膜癌HECB细胞能否诱导凋亡并对其抗癌机制进行探讨。方法 实验组分低、中、高3个剂量组并设空白组和阳性对照组进行含药血清的制备；MTT法观察细胞毒作用；细胞排染法观察瘤细胞直接损害实验；吖啶橙/溴化乙锭（AO/EB）双荧光染色法及电镜（TEM）下观察细胞凋亡的形态学变化；流式细胞术（FCM）测定细胞凋亡率并进行细胞周期
分析，测定凋亡抑制蛋白survivin和凋亡效应蛋白Caspase3的表达。结果 MTT法：人子宫内膜癌HECB细胞经含药血清作用后细胞生长受到明显抑制且以低剂量组抑制率最高。细胞排染法：同一时间段内以低剂量组效果最好，不同时间段内（24、48h）细胞抑制率显著提高(P
【关键词】 血清药理学；细胞凋亡；AO/EB双荧光染色法；TEM；FCM.
Key words：Pharmacology; Cell apoptosis; AO/EB double fluorescent dye staining; Transmission electron microscope；Flow cytometry
大量研究表明，复方中药制剂可通过阻滞肿瘤细胞生长周期，影响癌基因和抑癌基因表达等途径发挥抗癌活性[1]。我们所用方剂“牛黄天龙胶囊”，是在传统抗肿瘤中药方剂“犀黄丸”[2]基础上添加了新的抗肿瘤中药成分，针对妇科肿瘤而研制的新的抗癌组方。本研究运用血清药理学方法从细胞、分子和基因水平对牛黄天龙胶囊（含药血清）诱导人子宫内膜癌HECB凋亡的作用机制进行了初步探讨，旨在为筛选有效的抗妇科肿瘤的中药方剂提供理论依据。
1 材料与方法
1.1 实验动物 Waster大鼠40只，雌性，清洁级动物，体重(280±30)g，合格证号：DK04020086，由河北医科大学动物实验中心提供。
1.2 实验药物 复方中药牛黄天龙胶囊主要由牛黄、麝香、乳香、没药等十几味中药组方（生药购自河北省石家庄乐仁堂中药饮片厂）由河北医科大学第四医院药剂室按工艺制成，相当于含生药量每胶囊2.5g。
1.3 细胞株 人子宫内膜癌中分化细胞系HECB细胞由北京医科大学附属第一医院北京医院妇科科研室提供。
1.4 主要仪器和试剂 PRMI1640培养基为美国Gibco公司产品；胰蛋白酶，丫啶橙（AO），溴化乙啶（EB）由美国Sigma公司提供；胎牛血清由河北医科大学第四医院科研中心提供；顺铂（冻干型）购自山东省德州制药厂，产品批号031001；CO2培养箱，美国Forma Scientific公司产品；倒置相差显微镜（XS2D2型），荧光显微镜（Nikon UFXⅡ型）均购自日本Olympus公司；透射电子显微镜为日本日立H7500；流式细胞仪420为美国B．D公司产品。
1.5 方法
1.5.1 含药血清的制备[3，4] 将40只Wistar大鼠随机分成5组：阴性对照组（空白组），实验组（分高、中、低剂量组）和阳性对照组（顺铂组）。实验组高、中、低三组每日用药剂量分别按1/10LD50、1/20LD50、1/40LD50给药，以每只2ml /次灌胃，阳性对照组采用腹腔注射每只1ml /次（剂量按每只5mg/kg /天计算）。采用李仪奎“通法原则”方案，即每日剂量分2次灌胃（灌胃前禁食12h不禁水）连续3d，于第3d第1次给药2h后再给药一次，间隔1h以乌来糖腹腔注射麻醉，背位固定，无菌条件下腹主动脉取血，分离血清，56℃，30min灭活，0.2μm过滤除菌，分装，-20℃冰箱保存备用。
1.5.2 细胞培养 将人子宫内膜癌HECB细胞置于含10%胎牛血清的PRMI1640培养基中，在37℃，5% CO2，95%湿度条件下的培养箱中贴壁生长，以按0.25%胰蛋白酶和0.02% EDTA 1∶1比例配置的消化酶消化，3d传一代。实验分组：将制得的5组含药血清即空白组、高、中、低实验组和阳性对照顺铂组分别加入PRMI培养基中，使各培养基的血清终浓度为10%[5]。
1.5.3 细胞抑制率的检测（MTT法）[6] 取对数生长期的细胞，以1∶10.25%胰蛋白酶和0.02%EDTA消化，制成单细胞悬液，再以2.0×104/ml浓度接种于96孔板，每孔200μl，实验分5组，即空白组、高、中、低实验组和阳性对照（顺铂）组，每组设4个复孔并设空白调零孔（除不加细胞外，余处理与其他各组相同）。将已接种HECB细胞的培养板置于37℃、5% CO2、95%湿度的培养箱中培养24h，待细胞进入对数生长期，弃去原培养基以PBS液洗两遍，然后依次更换含10%药物血清的PRMI1640培养基，置培养箱中分别培养24h和48h。取出培养板，向每孔加入MTT20μl，继续培养4h后终止培养，小心吸去孔内上清液，每孔加入DMSO 150μl，在微量震荡器震荡15min，使结晶物充分溶解之后在酶联免疫检测仪490nm处读取各孔光密度值（OD值）。瘤细胞抑制率=空白组平均光密度值－实验组平均光密度值/空白组平均光密度值。
1.5.4 吖啶橙/溴化乙锭（AO/EB）染色法观察HECB细胞凋亡的形态学变化[8] 取对数生长期的细胞消化制成单细胞悬液以2×105/ml接种于6孔板，每孔2ml，每组设4个复孔。将培养板置于37℃、5% CO2、95%湿度的培养箱中培养24h，细胞贴壁后弃原培养基，更换含10%药物血清的PRMI1640培养基，继续培养48h。分别消化制成1.0×106/ml的细胞悬液，取100μl受检细胞悬液加入4.0μl上述染液轻轻吹打均匀后取细胞悬液一滴滴在洁净的载波片上，加盖玻片后立即置于荧光显微镜下观察凋亡细胞的形态学变化并摄片。
1.5.5 透射电镜（TEM）观察HECB细胞凋亡的超微结构变化 收集含药血清（空白组、实验组）培养48h的HECB细胞，离心（1 000转/分 15min），PBS洗涤3遍，沉淀细胞以2.5%戊二醛溶液前固定，1%锇酸后固定，梯度乙醇脱水，Epon812浸透、包埋、聚合、超薄切片、硝酸油柠檬酸铅着色，凉干，在透射电镜下观察凋亡细胞的超微结构特征并摄片。
1.5.6 细胞凋亡率及细胞周期的测定 取1×105/ml单细胞悬液0.1ml加入10%的鸡红细胞作为内参标准，调整仪器CV值在5%以内。加入碘化丙锭（PI）（PI：50mg/L，triton×100 1.0%）1 ml，在4℃冰箱染色30min，以500目铜网过滤使样品成为合格的单细胞悬液上机检测。
1.5.7 HECB细胞凋亡相关基因Survivin和Caspase3的定量检测 取单细胞悬液1×106/ml，分别加入鼠抗人survivin单克隆抗体和鼠抗人Caspase3单克隆抗体0.1ml，室温孵育30min，加入PBS 10ml洗涤一次，弃上清，加入羊抗鼠FITCIgG二抗工作液100μl，避光室温孵育30min，加入PBS10ml离心同上，弃上清以除去未结合的荧光二抗，上机检测前加入PBS 0.1ml，经500目铜网过滤后上机检测。检测结果用荧光指数（fluorescence index，FI）或Xmode值表示。
1.6 统计学处理 统计学处理在SPSS 12.0软件包内进行。方法采用单因素方差分析和t检验。检验水准α=0.05，P＜0.05表示差异有统计学意义。
2 结果
2.1 MTT法 检测牛黄天龙胶囊含药血清对人子宫内膜癌HECB细胞作用24h、 48h后， 细胞增殖受到明显抑制， 与空白组相比差异均有显著性(P＜0.01)，但并非浓度越高抑制率越高而以低浓度组抑制率最好。 同一剂量组24、 48h细胞抑制率相比差异有显著性(P＜0.01)， 见表1。
2.2 AO/EB双荧光染色法 镜下可见到空白对照组细胞以正常细胞为主，表现为细胞结构完整，大小正常。细胞被AO染色呈均匀一致的绿色，并可表1 含药血清对HECB细胞的生长抑制作用 MTT法在同一时间段，细胞生长抑制率与中、高组相比P＜0.01见到少量早期凋亡细胞，表现为细胞染色增强，荧光亢进，细胞被染色呈黄绿色黄色荧光。实验组中、高剂量组正常细胞减少，凋亡细胞增多并可见到晚期凋亡细胞，表现为细胞被EB染色呈橙红色，细胞体积缩小，部分细胞核破裂，呈现为大小不等、形态不规则的荧光染色碎片或梅花状核形。低剂量组和阳性对照顺铂组正常细胞明显减少，晚期凋亡细胞更多并可见到凋亡小体及细胞肿胀，体积增大，边缘模糊，被染成桔红色的坏死细胞见图1。
2.3 实验组人子宫内膜癌细胞，在电镜下均可见到凋亡的早期信号，表现为凋亡细胞的部分核膜向外呈锐角凸起，凋亡征象表现为核染色质浓缩并凝结成块，呈半月或新月状聚集在核膜周边，细胞浆浓缩，内质网变疏松并与胞膜融合形成一个个空泡及凋亡小体。空白对照组则很少见到凋亡细胞征象（图略）。
2.4 实验各组含药血清作用人子宫内膜癌HECB细胞48h后，在DNA直方图上均出现G1期前明显的细胞凋亡峰。各组凋亡率与空白组相比差异均有显著性(P＜0.01)。实验各组对细胞周期亦有明显影响，表现为S期细胞减少、G1期细胞增多，与空白组相比差异均有显著性(P＜0.01)，见图4、表2。表2 含药血清对HECB细胞增殖(48h)的 影响 FCM阴性对照组低剂量组中剂量组高剂量组阳性对照组图4 含药血清作用HECB细胞48h的凋亡测定FCM
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蛋白在空白组的表达量最高，而在实验组和顺铂组的表达则降低， 各组与空白组相比差异均有显著性(P＜0.01﹚， 但中、高浓度组相比差异无显著性(P＞0.05)， 低浓度组与中、 高浓度组相比差异均有显著性(P＜0.01)。Caspase3蛋白表达则相反， 在空白组表达量最低，而在顺铂组最高， 实验组中以低浓度组表达较高， 与中、 高组相比差异均有显著性(P＜0.01)， 而中、 高组相比差异无显著性（P＞0.05），并且显示在空白组survivin蛋白表达最高，Caspase3蛋白表达最低， 此时细胞凋亡率也最低， 细胞增殖指数最高。 在顺铂组则相反， 此时细胞凋亡率也最高， 细胞增殖指数最低为39.40±0.75， 见表3。表3 含药血清作用HECB 48h对基因的影响 FCM实验各组与空白组相比P＜0.01; * P＜0.01与中、高剂量组相比P＜0.01
3 讨论
血清药理学已成为中药药理研究的热点并逐渐被人们所认同。既往研究中药药理的离体实验多采用中药粗制剂直接体外给药，但由于中药粗提物并不能代表在体内真正发挥作用的有效成分，加之中药本身的理化性质也会干扰实验结果，因此对其可信度难于进行客观的评定。1998年由日本田代真一正式提出了“血清药理学”这一概念[9]。血清药理学是将中药或复方经口给动物灌服一定时间后，采集动物血液，分离血清，用含药物成分的血清进行体外实验的一种方法和技术（ex vivo method）[10]。优点是：（1）排除了通常体外实验中复方粗制剂的各种杂质成分，电解质以及PH等因素对实验结果干扰的不利影响。（2）客观地模拟了药物与机体相互作用的过程，其血清所含的药物成分也是经过体内一系列生物转化后真正发挥作用的有效成分及药物作用于机体所产生的内生性有效成分，并且血清的理化性质与细胞所处的内环境相似。（3）实验结果与在体实验有较好的一致性，不但能反映中药（母体药物）及其可能的代谢产物的药理（效）作用，而且还能反映可能由药物诱导机体内源性成分所产生的作用，比较客观和真实地阐明了中药的药效和作用机理，为从细胞、亚细胞和基因水平研究中药的抗癌机制提供了一个更加科学、客观的新手段。本实验正是采用了血清药理学方法研究牛黄天龙胶囊（含药血清）诱导人子宫内膜癌HECB细胞凋亡极其凋亡相关基因表达情况并分别从细胞形态学、流式细胞术及分子生物学等方面对其诱导凋亡的机理进行了初步探讨。
复方中药牛黄天龙胶囊以牛黄清心、退热、化痰、通窍、散结肿为主药；以麝香通经络、散结滞、辟恶毒、除秽浊为辅药；并配以水蛭、天龙、巴豆等消症、化结；佐以乳香、没药等活血、化瘀、消肿、定痛。君臣佐使，各有所司，从而起到有主次、多靶点、多环节的整体协同的抗癌治疗效果。本研究结果也显示牛黄天龙胶囊可显著抑制人HECB生长并能诱导其发生凋亡， 通过荧光显微镜和电子显微镜对人HECB细胞的形态学观察和流式细胞仪的DNA含量分析，证实牛黄天龙胶囊含药血清具有使人子宫内膜癌HECB细胞发生凋亡的作用并可使其生长阻滞在G0/G1期。
目前观点认为恶性肿瘤是一种多基因异常的疾病，它发生的分子基础是原癌基因的激活或抑癌基因的突变失活或缺失，导致某些细胞分化不良、凋亡受阻、增殖失控而形成肿瘤。研究显示细胞凋亡的核心成分是半胱氨酸蛋白酶家族（cysteinyl aspartate specific proteinase，Caspase）。其中研究最多，功能相对较明确的为Caspase3， Caspase3被发现是哺乳动物细胞凋亡的关键蛋白酶之一，为凋亡的效应分子，被称为凋亡的“执行者”[1113]。survivin是凋亡抑制蛋白家族（IAPs）结构独特的新成员1997年由耶鲁大学的Altieri等[14]首先分离出来。survivin只在胚胎和肿瘤组织中表达在正常成人分化组织中（胸腺，生殖器除外）检测不到。survivin能抑制细胞凋亡，促进细胞增殖，参与调节细胞的有丝分裂并可能参与血管形成，是至今发现最强的凋亡抑制因子[15，16]。研究发现survivin可强烈抑制由Caspase3和Caspase7过度表达诱导的凋亡。另有研究显示[1719]在食管小细胞癌、肝癌和胃癌中survivin和Caspase3的表达呈负相关，提示survivin基因对Caspase3的表达可能是负反馈调节，survivin直接或间接抑制Caspase3的表达从而促进肿瘤的发生、发展及恶性增殖，但二者在子宫内膜癌组织中的表达关系如何，目前国内外尚未见报道。本实验运用流式细胞技术检测了survivin和Caspase3这两个基因，对牛黄天龙胶囊（含药血清）能否诱导人子宫内膜癌HECB细胞凋亡方面进行了初步研究。结果显示，在实验组中survivin的表达降低，Caspase3的表达升高，二者与空白组相比差异均有显著性(P＜0.01)，且显示以低剂量组表现最明显(P＜0.01)。本研究survivin和Caspase3的表达也证实了以上观点。表明牛黄天龙胶囊（含药血清）能降低人子宫内膜癌HECB细胞survivin的表达同时可升高Caspase3表达，而使人子宫内膜癌HECB细胞凋亡增加，进而使肿瘤细胞生长受到抑制。由此推测，牛黄天龙胶囊（含药血清）诱导人子宫内膜癌HECB细胞凋亡的机制之一，可能是干扰了肿瘤细胞代谢，并使其基因蛋白表达发生改变，从而抑制了人子宫内膜癌HECB细胞的生长。
本实验为复方中药治疗妇科恶性肿瘤提供了新依据。虽然本研究在多方面证明了牛黄天龙胶囊的抗肿瘤效果，但有关该中药抗肿瘤作用的研究尚处于起步阶段，且由于条件的限制本实验未能对含药血清的有效成分进行定量和分析，所以有关复方中药牛黄天龙胶囊抗肿瘤作用的其他机制及其活性成分如何尚有待深入研究。
参考文献
［1］ 汝海龙，陈敏明.抗肿瘤中药诱导细胞凋亡的研究进展[J]. 黑龙江医学，2002，26(1):810．
[2] 熊鹰，孔小云，陈如山.复方犀黄丸含药血清对人肝癌细胞生长极其周期影响的实验研究[J].中国中医药科技， 2001，8（4）：217218．
[3] 李仪奎，吴健宇.血清药理实验中采血时间的通法方案[J].中国药理学通报，1999，15（6）:56970．
[4] 李仪奎. 中药血清药理学实验方法的若干问题[J]. 中药新药与临床药理， 1999，10（2）：9598．
[5] 刘平. 关于血清药理学的若干思考[J]. 中国中西医结合杂志，1999，19（5）：263265．
[6] 司徒镇强，吴军正.细胞培养[M]. 西安: 世界图书出版社，2001.186187．
[7] 张静波. 组织与细胞培养技术[M]. 北京：人民卫生出版社，2002. 111112．
[8] 汪承亚，盛瑞兰，汪凡，等.丫啶橙/溴化乙锭双荧光染色检测细胞凋亡的形态学变化[J].中国病理生理杂志，1998，14（1）：104106．
[9] 杨奎.关于血清药理学的若干思考[J]. 中国中西医结合杂志，1999，19（5）：263265．
[10]韩克起，凌昌全. 中药体外抗肿瘤效应血清药理学研究现代与前景[J]. 中国中西医结合杂志， 2003， 23（9）：717719．
[11]Chen YC，Shen SC，Lee WR，et al. Emodin induces apoptosis in human promyelokukemic HL60 cells accompanied by activation of caspase3 cascade but independent of reactive oxygen species production[J].Biochem Pharmacol， 2002，64(12):17131724．
[12]周喜乐，郑树森，谢海洋.半胱氨酸酶3在依托利酸诱导肝癌细胞凋亡中的作用[J].中华实验外科杂志，2004，21（5）：541543．
[13]郑世营，葛锦锋，赵军，等.外源性FasL基因诱导肺癌细胞Caspase3的表达及凋亡[J].肿瘤防治杂志，2004，11(3):273277．
[14]Ambrosini G，Adida C，Altieri DC. A novel antiapoptosis gene，survivin，expressed in cancer and lymphoma[J].Nat Med，1997，3（8）：917921．
[15]徐纪香，李珊珊，董雪蕾. Survivin、细胞凋亡与恶性肿瘤[J].医学综述，2004，10（1）：1416．
[16]伊新，曲喜英，林木生. 凋亡抑制因子Survivin与肿瘤诊治的研究进展[J].中国癌症杂志，2003，13（2）：182185．
[17]林木生，伊新，缪辉来，等. 生存素和天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶3在肝癌中的表达及其关系[J].中华实验外科杂志，2004，21（2）：210211．
