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生物素范文1
关键词
关键词：高效液相色谱法 生物素 含量测定
前言
生物素(d-Biotin)又称维生素H或辅酶R，主要作为各种羧化酶的辅助因子。对糖、脂肪、蛋白质和核酸等代谢有重要意义，广泛应用于医疗，多维制剂及饲料添加剂等方面。已载入美国及欧州等国药典，含量测定均采用化学滴定法。本文建立了测定生物素的HPLC法，操作简便，结果准确，速度比较快。
实验部分
一、主要仪器与试剂
1.仪器
高效液相色谱仪：Agilent 1100 Chemstation 色谱工作站
2.试剂
乙腈( 浙江临海市浙东特种试剂厂，色谱纯)
三氟乙酸(上海化学试剂厂，分析纯)
磷酸（杭州化学试剂厂，分析纯）
3.试验样品
生物素对照品(中国药品生物制品鉴定所，含量100%，批号：1029*1-0001)。
生物素样品(浙江医药股份有限公司新昌制药厂，批号：20070826，20070827，20070831)。
二、实验方法
1.色谱条件
高效液相色谱仪：安捷伦（Agilent）1100 （LC）
色谱柱：VP-ODS色谱柱(4.6 mm×250mm,5um)；
流动相：取乙腈250ml，加磷酸1ml，再加入0.05%三氟乙酸溶液750ml，混合均匀，过滤；
检测器：紫外检测器
检测波长：210nm；
进样体积：20μl
柱温：室温。
2.测试方法
精密称取生物素样品约10mg，置于50ml容量瓶中，加流动相溶解，并稀释至刻度，摇匀，得供试品溶液。另精密称取生物素对照品约10mg，置于50ml容量瓶中，加流动相溶解并稀释至刻度，摇匀，得对照品溶液。分别将上述两种溶液20μl注入高效液相色谱仪，记录色谱图，计算主色谱峰峰面积，用外标法计算生物素含量。
三、方法的确定
实验方法的确定涉及到多个方面，例如色谱柱、流动相、检测波长、柱温的选择与确定等。本文重点阐述检测波长的选择与确定。
由于生物素结构具有有一定的极性，因此选择采用反相色谱法，色谱柱选择常用的ODS柱，尺寸4.6 mm×250mm,填料粒径5um。
1.检测波长的确定
根据生物素本身紫外吸收的特性，使检测波长尽量靠近生物素最大吸收波长且尽可能避免溶剂截止波长的影响。
1.1 溶剂截止波长的影响
我们所使用的流动相和溶解样品涉及的溶剂为乙腈，由于乙腈的截止波长为190nm，因此我们应该把波长的选择放在大于或等于210nm的范围。
1.2生物素的紫外吸收特性
当然波长的测定主要还是依赖于待测试样品的紫外吸收特征来决定的。为测定生物素样品的吸收特性，我们使用二级管阵列检测器（DAD检测器）进行测定得到生物素标准品的紫外吸收色谱图。生物素的最大吸收波长位于198nm左右,从该波长开始随着波长增大，吸收变弱。高于225nm时，生物素没有明显的紫外吸收迹象。198nm～215nm是生物素紫外吸收相对较强区域。结合流动相中所含溶剂乙腈截止波长的影响。故选择范围应大于等于210nm的波长。在210 nm ～215nm区域下生物素的最大吸收在210nm，故最后选择210nm。
2. 流动相
流动相：采用乙腈-磷酸-0.05%三氟乙酸溶液(250：1：750)为流动相。
取空白溶液(流动相)注入高效液相色谱仪，按色谱条件进行色谱分析，记录色谱图。将空白溶液的色谱图与样品溶液的色谱图进行比较，结果显示空白溶液对生物素的测定无干扰。
取生物素对照品溶液(2.2测试方法)注入高效液相色谱仪，按色谱条件进行色谱分析，记录色谱图，结果该色谱条件下生物素峰的较高的柱效(本次为7943理论塔板数)和较低的拖尾因子(本次为1.146)：
四、方法验证
1.线性试验
精密称取生物素对照品25mg置50ml量瓶中，加流动相溶解并定容至刻度，摇匀。分别精密量取1.0ml、2.0ml、3.0ml、4.0ml、5.0ml、6.0ml各置10ml量瓶中，加流动相溶解并定容至刻度，摇匀。浓度分别为0.05 mg/ml、0.10 mg/ml、0.15 mg/ml、0.20 mg/ml、0.25 mg/ml、0.30 mg/ml（涵盖范围相当工作浓度的25%至工作浓度的150%），分别取上述溶液20ul注入色谱仪进样测定，记录色谱图。以浓度C为横坐标，峰面积A为纵坐标，进行线性回归分析，计算线性回归方程，相关系数。计算的结果见下表。
经回归分析可得，生物素样品的线性回归方程为：A=8246.29 C + 15.73 (相关系数r=0.9999),线性范围： 0.05～0.30mg/ml
以上结果表明，在样品浓度0.05～0.30mg/ml（相当于工作浓度的25%至工作浓度的150%）范围内线性关系良好。
2. 准确度（回收率试验）
生物素范文2
一、生物科学素养包含的要素
1.掌握生物科?W的基本素质技能
在高中的生物学习中，首先要做的就是把课本上的理论知识理解透彻，在此基础上再对真实的生物进行认知和掌握。当然，课本上的知识也包括现代生物的科学技能，比如：生物的种类等
知识。
2.培养学生正确的生物科学观念
在生物的学习和教学中，都要先确定正确的生物科学的理念，这样才能对学到的知识学以致用，更好地应用在现实生活中。一般都是在高中才开始接触生物科学，所以高中的生物教学对学生的影响很重要，要促进学生对生物科学的积极性，保证他们在快乐的环境中学习到更多的知识，利用有限的课堂时间让学生学到无限的知识。刚开始的时候学生肯定会对其有很大的好奇心，所以，要根据他们所好奇的东西进行激发引导，这样对于教学就会有很好的效果，从而为生物科学的事业作出更大的贡献。
3.认识到生物科学在现实生活中的作用
现在高中的学生认为在学校学到的知识只是来应付考试，但并非如此，如果在学习中能找到自己所感兴趣的关注点就会在生活中也有所应用。当代的生活中很多地方都会应用到生物科学的知识，如果只是学理论知识，而不应用在现实生活中，就失去了学习的意义。所以要提高学生对生物科学的认识，保证他们能在生活中运用生物科学。
二、如何提升学生的生物科学素养
1.提升教师的整体素质
现在很多学校都提倡“翻转课堂”，就是以学生为中心来进行教学工作，但是这并不代表就不需要老师，老师在这种教学中也起很大的作用。生物的教学任务虽然不如数学、语文等学科的任务大，但是生物科学对学生的生活有很大的帮助，所以要加强生物老师的能力，不能让那些生物教师觉得学校不重视生物，那么他们就会出现消极怠工的心理，从而使学生对生物也没有兴趣。所以，要想提升学生对生物科学的素养，首先要做的就是加强对老师方面的投资，聘请更加专业的生物老师进行教学工作。
2.充分培养学生的兴趣
在高中教学中，大部分学生会觉得学习是枯燥无味的，但是生物中的乐趣是很多的，这就需要老师对教学进行设计，通过各种方式提高学生的积极性。如果一个学生对这个学科感兴趣就会很容易学到很多知识，在快乐的环境中得到的知识是最多的。学校也应该开展一些关于生物的实践活动，例如：组织学生去大自然对生物进行探索，然后通过实际的观察，得到更多的认识，让学生更加主动地去寻找知识的来源，逐渐去探索生物科学的奥秘。
3.注重课堂生物素养的培养
课堂是学生最佳的学习时间，所以要把握好上课的时间，让学生学到更多的知识。课后的作业也是不可避免的，但是不要过量，因为学生还有别的学科，如果仅这一科就有很多作业的话，就会使学生出现烦躁的心理，同时影响上课的情绪。要利用课堂上有限的时间，给学生传授无限的知识和技能，还要引导学生的思维，使他们有更加开阔的视野。最重要的是在课堂上，教师要不断地贯彻生物科学素养的问题，这样就会使学生印象深刻，才能更好地提高学生生物科学素养。
三、注重生物实验教学
生物素范文3
骨骼是鸡储存锰的重要器官。锰与骨骼发育有关，可影响磷酸酶的活力，缺锰时，血及骨中磷酸酶的活力降低，妨碍骨骼正常发育。锰与繁殖有关，锰的缺乏往往是由于鸡过度舍饲，缺乏阳光引起。鸡体中含锌量较多的器官有骨骼、肝、皮肤、肌肉、心脏及性腺等。当日粮中含有过多钙时就会增加鸡对锌的需要量，促使缺锌病的产生。硒有促进雏鸡生长的作用。硒也用于预防火鸡肌胃和心脏的疾病。缺硒还随之而产生胰纤维化及酯酶、胰蛋白酶元和胰凝乳蛋白酶元的减少。盐碱地土地区硒的含量比非盐碱土地区更少。微量的砷化合物有预防硒中毒作用。钼为体内黄嘌呤氧化酶及硝酸还原酶的组成成分。缺钼时种蛋质量下降，孵出的雏鸡生长势减弱。铜和钼有拮抗作用，故补饲硫酸铜可减轻或消除钼的有毒作用。动物体常含有微量的氟，成年动物骨骼中约含0．04％～0．06％。鸡蛋中含氟量增高，主要含在卵黄中。
关键词：
鸡；微量元素；作用；生物学；有效性
微量元素对机体的作用是目前世界上广泛重视的问题，根据对动物、植物与土壤中所存在的微量元素及相互关系的研究已证明鸡对外界环境中所存在的化学元素有很大的依赖性。所以，微量元素引起的疾病往往与地质结构与化学成分有关。在当前畜牧生产中，还缺乏因微量元素过多或不足而引起营养疾病的资料。对土壤与动植物体间元素迁移的规律知道得还很少。因此，在实践中如发现有微量元素缺乏症可疑病禽，首先从土壤、水源、饲料及周围环境等方面进行分析。
1锰
1．1骨骼是鸡储存锰的重要器官
由骨骼中含锰量的多少可以推测日粮及鸡本身是否缺锰。在动物体内各器官中，肝脏和脑下垂体的含锰量最高。另外，动物各种器官都有少量锰存在。锰对鸡生长、繁殖、造血都有重要作用，与鸡体内许多酶的活化有关，故能影响鸡体内碳水化合物、蛋白质、脂肪、维生素及矿物质的代谢。对锰的作用机制，现尚未充分阐明，据目前资料认为锰主要有以下的生理作用。
1．2锰与骨骼发育有关
锰可影响磷酸酶的活力，当含锰量正常时，血中磷酸酶活性较强，由血液中分解有机磷成为无机磷成分愈多，有利于动物体内钙、磷的沉积和骨骼正常形成，而缺锰时，血及骨中磷酸酶活力降低，妨碍骨骼正常发育。因鸡对锰的吸收能力较弱，缺锰后，雏鸡会产生溜腱病，腿骨变粗短，骨骼系统畸形，如弯腿、脆骨症和骨重减轻，骨的密度、长度、灰分含量下降。腿骨弯曲，病鸡跛行，病情严重可致死。在高度集约化经营的笼式养鸡场中易于发病。骨粗短症也因胆碱或生物素缺乏而发生。
1．3锰与繁殖有关
日粮中锰的含量可影响到卵的锰含量。缺锰时母鸡产蛋量下降，孵化率降低，蛋壳硬度也降低。缺锰时，鸡胚产生软骨退化病，腿部缩短变粗，翼部相应变短，喙的性状如鹦鹉，下颚短，不能配合上颚，头部呈球形，颈部由寰椎起出现水肿，并向后延伸到一定距离，腹部突出，有许多卵黄未吸收尽，胚体本身及皮肤上绒毛生长停滞，多在胚胎发育的18～21天时死亡。鸡对锰的需要量不大，鸡的日粮中每千克只需50mg锰就足够，而且一般植物性饲料中都有锰，特别是糠、麸类饲料及青绿饲料中含锰丰富，故不易缺乏。锰的缺乏往往是由于鸡过度舍饲，缺乏阳光引起。实验证明，紫外线或维生素D可降低锰的需要量。此外，日粮中过量的钙和磷会降低锰在小肠中的吸收率。因此，当日粮中含有多量钙、磷时会增加锰的需要量［1］。
2锌
鸡体中含锌量较多的器官有骨骼、肝、皮肤、肌肉、心脏及性腺等，骨骼为锌的贮存器官。血液中也含有锌。蛋中含锌量高，每千克鸡蛋约含1mg，主要集中在蛋黄中。锌是构成多种酶的重要成分，另外，有些酶同锌结合成一种复合体。因此，锌主要是通过动物集中的某些酶发生作用，如分布广泛的碳酸酐酶存在于动物的红血球、胃黏膜及肾的皮质部。碳酸酐酶有催化碳酸分解合成的作用，能把体组织排出的CO2转变为血中的碳酸，同时把后者分解为CO2由肺部排出的双重作用。碳酸酐酶（催化）H2CO3幑幐CO2＋H2O在胃黏膜中碳酸酐酶能催化CO2形成碳酸，中和胃黏膜中过量碱（由胃黏膜分解氯化钠及形成盐酸时产生的）。此外，由于锌能影响性腺的活动和提高性激素的活性，对鸡繁殖有重要影响。鸡缺锌时，体重减轻，身体短小，腿部软弱，不活泼，行动蹒跚，步态不稳，腿部胫跗骨与跗蹠骨间关节肿大，羽毛发育不良，生长迟缓，食欲不振，毛质松脆，头部及颈部羽毛迟迟保存幼时状态不换。严重时，雏鸡背部出现鳞状角质化。股骨变粗短，其他管状骨也有同样变化。缺锌还可使鸡殖机能失常。公鸡萎缩。降低孵化率，使鸡胚畸形发育。锌在饲料中分布很广，酵母、麸皮、禾谷类的胚是良好来源。鸡的常用饲料中一般含锌量很高，不致发生缺锌病，但当日粮中含有过多钙时就会增加鸡对锌的需要量，促使缺锌病的产生。
3硒
硒在鸡体组织、器官中含量极微，在发生硒中毒时，肝肾以及血液、胰、脾中的含硒量增高。日粮中硒含量增加时，肉及蛋中的硒含量也相应增加。过去认为硒是有毒的微量元素，1957年开始发现硒对家禽营养有重要的作用。家禽缺硒后，可使白肌病发病率增高，肌肉球蛋白的合成作用受阻，发生胸肌萎缩。雏鸡缺硒，发生渗出性素质病。毛细血管壁的损伤和通透性升高导致轻度出血及血浆成分透出，这些血样颜色的液体积蓄于皮下，特别常见于胸部和两翼内侧的皮下，并可见在心包腔和肌肉积聚。此外，硒有促进雏鸡生长的作用。硒也用于预防火鸡肌胃和心脏的肌病。缺硒还随之而产生胰纤维化及酯酶、胰蛋白酶元和胰凝乳蛋白酶元的减少。我国有不少地区属缺硒地区，盐碱地土地区硒的含量比非盐碱土地区更缺硒。硒中毒是一种区域性地方病，于美洲干旱地区发生过，由于土壤含硒量高，某些多年生豆科、十字花科及菊科植物易于积聚硒，含硒多的植物，其中蛋氨酸和胱氨酸中的硫被硒所代替，称为含硒的氨基酸，而含硒氨基酸不能被动物利用，因为使含硫氨基酸缺乏。因而羽毛受害最为严重。家禽硒中毒后采食量减少，瘦弱、生长停滞、产蛋率及孵化率降低，并产生畸形胚胎，孵出幼雏软弱。绒毛非常坚硬。高蛋白质日粮可减轻硒的毒性，微量的砷化合物有预防硒中毒作用［2］。
4钼
钼为体内黄嘌呤氧化酶及硝酸还原酶的组成成分。缺钼时产蛋母鸡肝、肾及肠中黄嘌呤氧化酶急剧减少，产蛋量虽不减少，但种蛋质量下降，孵出的雏鸡长势减弱。据近来研究表明，在缺钼的日粮中增加钼能刺激雏鸡的生长。铜和钼有拮抗作用，故补饲硫酸铜可减轻或消除钼的有毒作用。在一般饲料中都能满足鸡对钼的需要。
5氟
动物体常含有微量的氟，成年动物骨骼中约含0．04％～0．06％。采食一般饲料，鸡不会出现氟中毒。氟中毒的原因主要是鸡采食磷矿地区污染的饲料、以未脱氟的磷灰面（含氟3％～4％）作磷补充物、或含氟高的深井饮水所致。氟中毒多呈慢性，因氟在骨骼中有慢性蓄积作用，鸡受害后，骨骼的成分似乎没有影响，但血液的凝固时间可能缩短，十二指肠处常见流血，鸡蛋中含氟量增高，主要含在卵黄中。
6微量元素的生物学有效性
由于微量元素的来源不同，其化学结构及性质就不同，被鸡利用的效率也不同，因此，在饲养实践中，不仅要考虑各种微量元素的喂量，而且要考虑微量元素饲料的生物学有效性。生物学有效性是指某种微量元素离子改善某种生理作用的指标。例如，鸡体体重的变化，血液中血红素水平的变化等。微量元素的生物学有效性及有关情况见表1。
参考文献：
［1］甘肃省畜牧学校．家畜饲养学［M］．北京：农业出版社，1979．186．
生物素范文4
关键词：素质教育 高中生物
（一）、培养学生的兴趣
兴趣是最好的老师。没有兴趣的学习，是一个没有目的的学习。在高中生物的教学中，教师可以提出问题来提高学生的学习兴趣。如：生命是怎样诞生的？生命向哪些方面发展？我国在基因工程方面有那些主要的贡献？生男生女是由谁决定的？为什么美国的生物圈二号没有成功？人类能在月球上能生活么等等。通过一些现实生活和科技发展的问题，来激起学生的学习兴趣，激起学探究问题的热情。
（二）、在教学过程中培养学生辩证唯物主义自然观
世界是物质的，物质是运动的，这是唯物主义的根本观点。在新的课改下，高中生物教材主要从非生物界到生物界这个顺序揭示了这个根本观点。无机元素组成有机元素，有机元素有机结合在一起组成细胞。以细胞为基本单位的奇妙而多彩的生物世界，其组成的元素和化合物，即与非生命世界有普遍的联系，又有重大的区别，尤其是组成细胞的有机分子，如生命活动的主要承担者――――蛋白质；遗传信息的携带者――――核酸；具有多种生命功能的的糖类和脂质。蛋白质、核酸和多糖又都是以特定的单体构成生物大分子，以碳链为骨架，为细胞的结构基础，演绎着或简约、或繁复的生命之歌。形成学生从分子水平上看待生命的物质性和生命物质的特殊性的认识，对于他们树立正确的世界观极为重要，无论是进一步的学习和研究，还是处理个人或社会事物，都需要唯物主义的观点。
（三）、根据不同的章节和学生的实际，合理设计教学方案
1、以做一定量的巩固练习，但不能拿“题海战术”来提高学生的能力。
在实际教学过程中，很多教师采取“题海战术”，通过让学生多做题，多训练，使学生在有限的时间范围内，提高学生的成绩，以显示自己教学的水平。但长期如此，已经把学生训练成了做题的机器，不会思维的、没有头脑的机器。在真正踏进科学殿堂以后，这些人思维受到很大的限制，不敢越雷池一步，没有创造性思维，没有新的发现，没有开拓精神，不能发现事物的发展规律，只能固守先人的成就。在实际教学过程中，不要让学生去做大量的题目。对所做的每一道题，认真精选，对出的题量严格控制。学生做完题后，和学生一起探究如何改变出题的方向、考查点，做到举一反三。这种做法重在培养学生的创新思维能力。通过实践证明，这种做法非常有效，也取得非常理想的效果。
2、创设新情景，培养学生运用已学知识解决实际问题的能力。
生物题是源于教材，又不拘泥于教材。生物题考查学生知识的迁移能力，运用已掌握的知识解决实际问题的能力。在实际教学过程中，本着培养学生的创新能力、探究能力为目的，在每堂课上，采取多变的教学模式，创设新的情景（也就是说，联系生产、生活实际、社会热点，创设性情景），引导学生去思维，引导学生去探究，引导学生主动地去发现问题、解决问题。
3、培养学生终生学习的习惯，提高学生的生物学素质
作为一个学科教师，我们不可能也没有必要期望自己的学生个个都立下学习生物学的志向，但却有可能也有必要在普遍提高学生生物学素质的同时，让一些热爱生物学的学生脱颖而出。
普遍提高学生的生物素质，在当今的时代显得非常的重要。这里先说两个实例：
例1、据报载某农民因妻生女逼妻离婚不成，就用砂枪射杀其妻。这一酿成家庭悲剧的愚昧行为，显然是缺少应有的生物学知识。
例2、《野生动物保护法》颁布了四年多，但大肆捕猎、贩卖和宰杀珍稀野生动物的行为却屡禁不止。这一危及人类生存环境的愚昧行为，同样是对生物科学的无知。
两个实例从一个侧面说明，中学生物教育培养千千万万具备一定生物学素质的劳动者，比之于高等教育培养少数专门人才，具有更为深广的意义。
4、培养学生良好的心理素质
在生物学教学中可以进行如下几方面的心理素质教育：
（1）激发学生学习动机，培养学习兴趣。在介绍生物学的概念、规律发展的来龙去脉，生物学事实的发现过程，科学家的事迹和我国的生物资源等知识时，可使学生对知识的创造和创造者的思想品德、人格有一个全面深刻的了解，从中受到感染和影响，并由此激发学习的兴趣和钻研精神，从而树立为国家为科学献身的远大志向。
（2）培养学生丰富的情感和良好的心态。让学生了解与生物学有关的环境、资源、能源、土地、粮食、人口等问题，培养学生关心自然、关心社会、关心国家利益、关心地球的生存条件等的情感和责任感，树立环境保护意识。生物课本自始至终都贯穿着生物与环境相适应、生物的结构与机能相适应的生物学观点，我们要让学生知道人不能被动地等待淘汰，而是要主动地适应自然的变化和社会的变革。中学生应该学会多种本领，增强耐挫折的能力，提高适应能力，培养健康的心理。
（3）培养学生逐步形成正确的审美观。从美育的内容上看，生物学可以进行自然美、艺术美、社会美的教育。生物是自然美的主体。如动物、人体外表的对称美；各种叶形、花冠的姿态美；动物（蜜蜂、蚂蚁）社群生活表现的和谐美；科学家的优秀品质体现了社会美。引导学生投入到创造美的活动中去，如养鸟、护鸟、种花、种树、绿化美化校园等。
生物素范文5
[关键词] 血管内皮生长因子；肝素酶；钙黏蛋白；胃癌
[中图分类号] R735.2 [文献标识码] B [文章编号] 1673-9701（2012）03-0051-02
Research of relationship between VEGF, heparinase, E-cadherin and biological behavior of gastric cancer
FU Yuxiang MA Guiliang MAO Weizheng LI Yang
Department of General's Surgery Qingdao Municipal Hospital Affiliated to Medical College of Qingdao University, Qingdao 266071, China
[Abstract] Objective To investigate the relationship between vascular endothelial growth factor (VEGF), heparinase, E-cadherin and gastric cancer biological behavior. Methods The expressions of VEGF, heparinase, E-cadherin proteins of 91 cases of gastric carcinoma and adjacent normal tissues were detected by immunohistochemistry. Results In gastric carcinoma and adjacent normal tissue, the positive expression rate of VEGF protein was 72.52% and 16.48% respectively, and there was significant difference between the two groups. The positive expression rate of heparinase protein was 80.21% and 18.68% respectively, and there was significant difference between the two groups. The positive expression rate of E-cadherin protein was 64.84% and 92.31% respectively, and there was significant difference between the two groups. The expressions of VEGF, heparinase, E-cadherin proteins were closely correlated with differentiation, depth of invasion, metastasis of lymph nodes and TNM stage. And the expression of VEGF protein was also closely correlated with tumor size, but the expressions of heparinase and E-cadherin proteins were not correlated with tumor size. Conclusion VEGF, heparinase, E-cadherin show high expressions in gastric cancer and are correlated with gastric cancer biological behavior. The united detection of the VEGF, heparinase, E-cadherin will be helpful to judge prognosis and formulate treatment program.
[Key words] VEGF; Heparinase; E-cadherin; Gastric cancer
浸润转移是胃癌一个本质的生物学行为，是胃癌患者死亡率高、预后差的主要原因。癌组织的浸润转移是复杂的、多步骤的、多阶段的、多基因的病理过程，其分子机制还不明确，研究与胃癌浸润转移相关的免疫分子，对胃癌的指导治疗、预后判断有重要价值。本文就研究血管内皮生长因子（VEGF）、肝素酶、钙黏蛋白（E-cadherin，E-cad）与胃癌生物学行为的关系进行统计学分析，以了解VEGF、肝素酶、钙黏蛋白能否作为胃癌浸润转移的临床指标。
1 材料与方法
1.1 实验标本
收集2010年2～6月手术切除的新鲜标本及术后病理石蜡块91例，术前未经任何抗癌治疗，其中男63例，女28例，年龄45～81岁，中位年龄62岁；根据2010年新TNM分期标准分为Ⅰ期10例，Ⅱ期21例，Ⅲ期38例，Ⅳ期22例。每例分别取胃癌组织及癌旁正常组织（距癌缘5 cm以上）各一块，-80℃冰箱保存。术后病理示中高分化腺癌36例，低分化腺癌55例。
1.2 主要试剂
VEGF兔抗人抗体和E钙黏蛋白兔抗人抗体购自美国Santa Cruz公司，肝素酶兔抗人抗体购自武汉博士德生物工程公司，SP试剂盒和DAB显色试剂盒购自北京中山生物技术有限公司。
1.3 实验方法
VEGF、肝素酶、钙黏蛋白在胃癌及癌周正常黏膜的表达通过免疫组织化学方法检测。组织经1%甲醛固定，石蜡包埋，4 μm连续切片。常规石蜡切片脱蜡。滴加内源性过氧化酶阻断剂，室温下孵育20 min。热抗原修复，切片置于盛有檬酸盐缓冲液的高压锅中2 min。滴加正常羊血清封闭，室温下孵育30 min。滴加一抗（1:50稀释），4℃冰箱过夜。滴加生物素标记的二抗，室温下孵育30 min。DAB显色，镜下控制反应时间。苏木素轻度复染，脱水，透明，封片。阴性对照试验以PBS替代一抗。
1.4 半定量结果判定
染色强度分数标准无色为0分，淡黄色为1分，棕黄色为2分，棕褐色为3分。同样物镜下阳性细胞数1分为阳性细胞数≤10%，2分为11%～50%，3分为51%～75%。两类分数乘积满3分为（+），满4分为（++），5分以上为（+++）。
1.5 统计学处理
应用SPSS 17.0软件进行统计学分析。组间差异采用χ2检验，VEGF、肝素酶和钙黏蛋白表达与胃癌生物学行为的关系采用秩和检验，相关性采用Spearman等级相关分析，P ＜ 0.05为差异有统计学意义。
2 结果
2.1 肝素酶、VEGF、钙黏蛋白的表达
肝素酶蛋白表达阳性产物位于细胞质（图1A），癌组织阳性表达率为80.21%，癌周正常胃组织也有18.68%的表达率，差异有统计学意义（χ2=68.931，P ＜ 0.05）。VEGF阳性产物位于细胞质（图1B），91例胃癌患者癌组织阳性表达率为72.52%，癌周正常组织阳性表达率为16.48%，差异有统计学意义（χ2=57.864，P ＜ 0.05）。钙黏蛋白阳性表达产物位于细胞膜，细胞质及细胞核不表达，胃癌组织阳性表达率为64.84%，癌周正常组织阳性率92.31%，差异有统计学意义（χ2=20.396，P ＜ 0.05）。肝素酶、VEGF、钙黏蛋白的表达相互之间无相关性。
2.2 VEGF、肝素酶、钙黏蛋白的表达与胃癌生物学行为的关系
VEGF、肝素酶和钙黏蛋白的表达与胃癌的分化程度、浸润深度、淋巴结转移和临床分期相关，VEGF还与肿瘤大小相关，肝素酶和钙黏蛋白与肿瘤大小不相关。见表1。
3 讨论
VEGF、肝素酶在低分化组中的表达明显高于中高分化组，有淋巴结转移组高于无淋巴结转移组，胃癌Ⅲ～Ⅳ期高于Ⅰ～Ⅱ期。E-cad在低分化组、有淋巴结转移组和胃癌Ⅲ～Ⅳ期组中是低表达的。表明VEGF、肝素酶和E-cad与胃癌的侵袭和转移潜能密切相关，可作为胃癌生物学行为的标志物。
VEGF是活性最强的血管生成因子之一，它能与血管内皮细胞表面受体特异性结合，诱导血管生成，促使血管通透性增加，导致血管内的蛋白物质渗透到血管外间隙，形成纤维基质，诱导内皮细胞增生，最后使间质血管化，为胃癌的浸润转移提供基础[1]。VEGF还能促进肿瘤的淋巴管生长，维持血管正常的结构完整性，从而引起肿瘤细胞生长和转移[2，3]。研究发现[4]，胃癌组织VEGF表达阳性的患者与VEGF表达阴性的患者相比，其肿瘤组织体积更大，病理分期更晚，肿瘤细胞浸润程度更深，更容易发生转移。肝素酶是一类能降解肝素类物质的裂解酶，通常被称作类肝素酶或乙酰肝素酶（heparanase），是通过水解硫酸乙酰肝素蛋白聚糖的肝素类侧链破坏细胞外基质和基底膜的基本结构，释放并激活连接在肝素类侧链上的活性物质，与血管生成、肿瘤转移等过程密切相关[5，6]，促进了胃癌的浸润转移和血管形成[7]，实验结果显示肝素酶与胃癌的分化程度、浸润深度、淋巴结转移和临床分期相关，与肿瘤大小没有相关性，与VEGF亦没有相关性。
钙黏蛋白（E-cad）是一类介导细胞与细胞之间相互黏附的具有钙依赖性的跨膜糖蛋白，是主要的正常细胞生长接触抑制剂，E-cad表达减少和异质性使细胞间的黏附减弱，因此癌细胞更易脱落，这是癌转移的基础[8]。钙黏蛋白在癌周正常组织的表达明显高于癌组织。本研究显示，VEGF、肝素酶、钙黏蛋白的表达与胃癌的分化程度、浸润深度、淋巴结转移和临床分期等生物学行为相关，可作为胃癌浸润转移的分子指标。由此，除了手术、放化疗等治疗手段外，可联合基因工程或其他方法，抑制VEGF、肝素酶在癌组织中的表达，增强钙黏蛋白的表达，为胃癌治疗提供新手段。
[参考文献]
[1] Yang L，Lin Z，Lin J，et al. Antitumor effect of endostatin overexpressed in C6 glioma cells is associated with the down-regulation of VEGF[J]. Int J Oncol，2011，38（2）：465-471.
[2] 梁启廉，陈小东，王三明. 血管内皮生长因子和抑癌基因p33 ING1与胃癌生物学行为的关系[J]. 第四军医大学学报，2007，28（2）：175-178.
[3] 张涛，徐惠绵，赵宜良. 胃癌组织中VEGF、MMP-9和PCNA表达与胃癌生物学行为的关系[J]. 实用癌症杂志，2008，23（3）：242-245.
[4] Yang Q，Ye ZY，Zhang JX，et al. Expression of matrix metalloproteinase-9 mRNA and vascular endothelial growth factor protein in gastric carcinoma and its relationship to its pathological features and prognosis[J]. Anat Rec（Hoboken），2010，293（12）：2012-2019.
[5] Li JP. Heparin，heparan sulfate and heparanase in cancer：remedy for metastasis?[J]. Anticancer Agents Med Chem，2008，8（1）：64-76.
[6] Shafat I，Pode D，Peretz T，et al. Clinical significance of urine heparanase in bladder cancer progression[J]. Neoplasia，2008，10（2）：125-130.
[7] 杨来志，陈晓鹏. 胃癌组织中乙酰肝素酶表达的研究进展[J]. 实用肿瘤学杂志，2010，24（6）：597-600.
生物素范文6
关键词：初中生物 提升 科学素养
世界科技创新步伐的加快与基础教育课程改革的实施把全面实施素质教育、 促进学生和谐发展、培养学生的科学素养和人文精神摆在了教育的重要位置。科学素养这一概念伴随二十世纪五六十年代美国课程改革运动而系统确立起来，把科学素养作为科学教育的目标已在世界各国达成共识。科学素养包括科学兴趣、科学知识、科学方法和科学精神四个核心要素，既要对青少年进行责任感、团队精神、追求真理、坚持真理等规范性教育，又要通过具体知识的传授，培养学生对科学研究的兴趣，促进其个性的健康发展，促进其健全人格的形成和完善，提高他们的创造能力。
生物课程的根本任务是提高学生的科学素养。“提高全民科学素质，特别是青少年科学素质，是关系中华民族伟大复兴的根本大事，是科学教育的神圣使命。”据研究资料显示，科学素养教育成果的显现是一个漫长的过程，而我国又是一个经济、社会、文化等领域发展相对落后的发展中国家，开展青少年科学素养教育，就显得尤为重大、突出和紧迫。作为生物教师，作为生物科学教育在生物课堂的代言人，不仅要完成生物学科知识体系的传授，更要注重对科学的共性、本质和研究方法的指导，并在此过程中引导学生对科学研究的感悟，对人与自然和社会和谐关系的认同，对自己行为准则的规范。
我工作多年以来，注重发挥学科的资源优势，依托初中生物教材，逐步提升学生的生物科学素养。具体做法是：
一、在课堂中放手让学生讲、演，转变学习方式，提升学生的生物科学知识素养
生物课程目标涵盖了生物学知识、能力以及情感态度与价值观等方面的基本要求，是要通过每节课或每项活动来逐步完成的。课堂教学一直是实施新课程的主阵地，教学模式的改革，只有在课堂上体现出来才是可行的、有效的、成功的。我在“以人为本”教学思想的指导下，进行了一系列的教学改革。针对不同内容设计不同的教学模式，如实验探究课、中心概念形成课、多媒体与课堂教学整合课、问题模式课和学生主讲课等。例如，我在学生充分预习的情况下，给每组学生分别安排不同的展示内容，由学生主讲，并用小品、角色扮演、讲述、谈话等多种多样的手段，把知识讲解得淋漓尽致，使我真正认识到了“你给学生一个机会，学生会给你一个奇迹”的内涵。
二、在探究实验中，放手让学生讨论、探究、实验，提升学生的生物科学方法素养
生物教学不仅是教师讲解和演示的过程，也是师生交往、共同发展的互动过程，教师必须向学生提供更多的机会让学生亲自参与和实践。发展学生的科学素养离不开科学的学习过程。科学的核心是探究，教育的重要目标是促进学生的发展，科学课程应当将这两者相结合。突出科学探究的学习方式，应给学生提供充分的科学探究机会，让学生通过手脑并用的探究活动，体验探究过程的曲折和乐趣，学习科学方法，发展科学探究所需要的能力并增进对科学探究的理解。新的课程标准突出了科学探究的重要性，将其放在科学教育的中心环节上，着力于发展每一个学生对科学的理解力和从事科学探究的能力，让学生像科学家那样探索和思考，在积极参与科学探究的过程中逐渐对自然界有所认识。
三、在生物课外科技活动中，放手让学生参观、调查、访问，提升学生的生物科学精神素养
生物学习注意课内外活动相结合。教师应打破课堂内外的约束，有计划地安排好需要较长时间才能完成的活动，包括必要的调查、访问、参观等，充分利用多种教学资源，保证活动时间。生物课外科技活动是生物学习的重要形式，生物课外科技活动主要是学生在教师指导下进行的一些与生物科学技术相关的试验、考察、种植等实践活动。一般情况下，课外活动以学生的实践活动为主，突出学生的活动主体地位，活动内容和课程标准所规定的教学内容是相联系的。在课外活动过程中，学生通过亲身实践去扩大、加深和巩固课内所学到的基础知识和基本技能；通过生物课外活动，培养学生的科学素质。但由于课外活动的内容具有多样性、广泛性，容易与课堂教学内容脱节，因此，生物课外活动应围绕课堂教学内容扩展和加深。这样，学生在课外活动中不仅可以学到一系列科学工作方法和技能技巧，增强学习的兴趣，而且可以达到培养学生的科学创新精神、科学实验素质和热爱生物环境科学的良好品质。
四、在校本课程编写中，放手让学生搜集、设计、撰稿，提升学生的生物科学兴趣素养
为凸显学科特色，充分发挥生物学科优势，进一步提升学生的科学素养，笔者创造性地开发了一批注重激发学生潜能的校本课程。在编写校本课程的过程中放手让学生搜集、设计、撰稿，并让学生制作丰富多彩的多媒体课件。多样的校本课程使学生获得能力、情感的提升，唤起学生的学习积极性，提升学生的生物科学兴趣素养，也为他们获得成功提供更多的机会。
基础教育需要通过一系列学生主动参与的科学探究和技术设计活动，才能使学生的科学素养逐步发展并成熟。科学素养的培养和提升，是教育与教学的统一，是一项需要多方紧密配合、共同实施的系统工程。依托初中生物教材，提升学生生物科学素养将是一项长期而艰巨的任务。
参考文献
[1]顾志跃，丁沅.走进科技教育[M].北京：科学出版社，2001.
[2]叶禹卿.科学新课程与科学素质培养[M].北京：中国纺织出版社，2002.
[3]丁邦平.反思科学教育[J].中国教育学刊，2001（2）.
