生物检测技术范例6篇

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生物检测技术

生物检测技术范文1

食品检测中的生物检测技术

技术人员只有了解现有的生物检测技术种类,才能更有针对性的发展和应用这些技术,从而促使生物检测水平得到提高,让人们吃到健康卫生的食品。

生物酶检测技术。这项检测技术应用最为广泛,在检测过程中具有强灵敏度和高准确度的特点。特别是对于蔬菜和水果的检测,可以充分体现出高灵敏度。同时这项检测技术对技术性能要求不高,需要花费的成本不高,能够高效率检测出微生物的污染程度和食品的农药含量。此外,生物酶技术和免疫技术结合检测食品,灵敏度和精确度较高,在我国食品检验各个领域应用较广。

免疫生物检测技术。免疫生物检测技术主要测定抗体,抗原和免疫细胞等,其检测过程需要遵循一定的检测原理,主要凭借的是抗体和抗原在体外的特意结合,定性定量检测标本中的抗体或抗原。现阶段,我国免疫检测技术主要包括发射免疫法,电脉法和沉淀反应等技术。技术人员在检测过程中需要分析食品的化学性质和结构要素,在此基础上才能保证食品具有较高的安全性。这一检测技术灵敏度最高,同时具有简单高效,操作性强和特异性强的特点,因此具有较强再现性,应用空间较广。

生物芯片检测技术。生物芯片具有检验速度快和数据处理量大的优势。这一技术的原理是利用微量点样等方法,在支持物表面有序固定生物大分子,再将其与之前特定分子混合,利用激光扫描。经过杂交后的分子产生的信号可以快速检测,得出目标分子所占比重。这项检测技术主要应用于进出口贸易的食品检测,具有高速度和高质量的检测优势。由于这一生物检测技术需要的费用较高,性能也不能达到人们要求的标准,因此这项技术并没有普遍应用,但其检测的精确性和快速性,使其具有较大的发展潜力。

生物检测技术在食品检验中的应用

以上主要介绍了几种主要的生物检测技术,这些技术在食品检测中的应用可以发挥不同的作用,对影响食品质量和安全的不同问题进行检测。对于不合格的产品不能让其流入市场。

对食品中农药残留进行检测。近些年,我国农药残留问题对人们的身体造成了极大的伤害,社会各界对此也给予了较大的关注。人们生活水平的提升,使人们对食品的数量和质量要求较高,导致农作物生产过程中农药的使用量偏大,从而造成食品农药的残留问题。为了保障人们的身体健康,技术人员需要利用生物酶技术科学判定食品中的农药残留,从而达到准确检测农药残留的目的。

对转基因食品进行检测。转基因食品是我国科技发展的成果。但是近几年对于转基因食品的安全性问题争论非常激烈。为了防止转基因食品对生态环境和人体健康造成伤害,现阶段我国食品检验中的重点工作就是检验转基因食品。此外,生物检测技术在检测转基因食品方面具有自身的优势,主要包括蛋白质检测法和活性酶检测法等检测技术。

对食品中的有害微生物进行检测。食品中的有害微生物对人体的危害非常严重。因此食品检测的重要工作之一就是对有害微生物进行检测。由于生物检测技术具有较强的有害微生物辨识能力,因此有害微生物检测中,生物技术是一项应用较广的技术。生物检测技术中的生物免疫技术和生物酶技术都可以准确辨识有害微生物的性状,种类和遗传情况,在此基础上提高食品检测技术的安全性。

生物检测技术范文2

一、生物检测技术在食品安全检验中的应用价值

生物检测技术是通过生物和生物、生物和非生物的反应来进行食品成分和质量判断的一种先进技术手段,适用于食品中的有害微生物、农产品中的农药残留以及食品的成分与品质等的检测。在食品安全检验过程中,生物检测技术主要的应用价值包括以下几个方面:第一,生物检测技术的检测效率非常高,可以进行大批量的食品质量与安全检验;第二,生物检测技术具有很高的准确性,通过观察生物之间、生物和非生物之间的反应,便可准确判断食品成分及其质量问题;第三,生物检测技术具有较低的综合成本,其中应用的酶和生物传感器等都易于制备,可以实现综合成本的良好控制。凭借着这些优势,生物检测技术如今已经成为一种备受欢迎的检测技术,并在食品安全检验领域中得到了广泛应用。1.生物检测技术在食品有害微生物检测中的应用。食品中的有害微生物会对食用者的身体健康产生非常不利的影响,因此在食品安全检验过程中,一项关键内容就是对其中的有害微生物进行检测,合理应用生物检测技术即可达到非常好的检测效果。比如,通过应用生物检测技术中的酶检测法,可以让相应的酶和食品中含有的微生物进行反应,检测人员通过观察反应情况便可对食品中所含有的有害微生物及其种类进行科学判断。除此之外,PCR检测技术以及酶联免疫检测技术等生物检测技术也都可以对食品中的有害微生物进行科学检测。2.生物检测技术在食品成分与品质检测中的应用。对于食品的安全性而言,食品自身的成分及其品质将起到至关重要的作用,因此,食品成分及其品质也是食品安全检验的主要内容。作为最早应用的一种生物检测技术,生物传感技术可以准确检测食品中的主要成分及其品质情况。此外,酶活性检测技术以及蛋白质检测技术等生物检测技术都在食品成分及其品质检测中得到了广泛应用,而且对各种食品都能够达到良好的检测效果。3.生物检测技术在农产品农药残留检测中的应用。如果农产品中存在农药残留,不仅会影响到其质量,还会对食用者的身体健康造成不良影响。近年来,随着我国农产品的绿色化发展,基于生物检测技术的农产品农药残留检测也开始备受关注。比如,通过应用生物传感技术和酶检测技术,可以准确检测出农产品中的农药残留成分以及含量等,从而为农产品质量检测提供科学参考。

二、生物检测技术在食品安全检验中的应用策略

就目前来看,在食品安全检验中应用的生物检测技术种类有很多,其中最为关键且常用的有5种,分别是生物芯片技术、免疫学检测技术、PCR技术、生物传感技术和胶体金免疫层析技术。合理应用这些生物检测技术,可以有效提升食品安全检验的效率与质量。1.生物芯片技术。生物芯片技术是将计算机、生物、化学和物理等多个学科融合在一起所形成的一种先进技术形式。在食品安全检验过程中,生物芯片技术的主要应用原理是把食品样品放置在生物芯片表层,借助于抗原和抗体等各种成分的特异性结合以及相应的化学反应来进行样品成分检测。该技术具有较低的检测成本,对于环境和动物也不会造成伤害,已经可以完全取代传统形式的食品安全检测技术,全面提升食品检测工作的效率与质量。同时,该技术的应用还可以进一步简化食品安全检验流程,仅仅借助于一个生物芯片,便可对多个基因进行科学分析。2.免疫学检测技术。在食品安全检验中,免疫学检测技术主要是对食品中的激素、农药以及抗生素等化学成分进行检测,主要原理是观察被测样品中的成分是否能够和试剂中的成分产生抗原抗体结合现象,因为抗原和抗体的结合具有单一性,所以在检测中只需观察抗原抗体的具体结合情况,便可实现对样品成分的准确确定。正因如此,免疫学检测技术在食品安全检验中具有非常高的灵敏度和准确性。随着现代科学技术的不断发展,免疫学检测技术也得到了不断的完善与优化。就目前来看,酶反应属于一种十分先进的免疫学检测技术,将该技术应用到鲜活食品的检验中,检测的灵敏度和精确度都极高。3.PCR技术。相较其他形式的食品安全检测技术而言,PCR技术属于一种最常见的技术手段,主要应用原理是核苷酸链条结合,也就是借助于DNA聚合酶来实现相应物质的合成。在具体应用中,可将一条DNA链用作模板,借助于相应的引物作用来实现一条DNA双链的完整形成,并使其在适宜的温度状态下逐渐衍生出一个DNA链条与之互补。在应用PCR技术进行食品安全检验的过程中,为充分发挥其作用与优势,检测人员一定要严格按照规定的流程来进行操作。首先需要对相应的DNA引物进行生物设计,再对PCR进行扩增,最后将所得产物作为依据,有针对性地对各种成分进行鉴定。根据PCR技术所具有的特征,该技术在病原生物以及转基因食品检测中都十分适用,可以对食品中外源基因进行快速、精准的检测,并对转基因食品进行精准鉴别,而且检测效果十分理想,能够为食品安全提供科学保障。4.生物传感器技术。在食品安全检验中,新鲜度检查是一项关键内容,生物传感器技术则是我国目前食品新鲜度检测中的一种关键技术手段。生物传感器的主要组成部分通常有两个,一是生物材料,二是设备工具。在选择生物材料时,一定要确保其分子识别功能足够强大;在选择设备工具时,一定要确保其放大功能良好。在通过生物传感器进行食品新鲜度检测的过程中,只需要检测少量样品,便可获得准确的检测结果。同时,生物传感器也可以在检测人员的专业操作下进行自动检测,并将样品的具体检测结果主动显示出来,具有良好的自动化和高效率特征。虽然该技术所应用的检测试剂价格较高,但是这些试剂都可以循环利用,这就使其运作成本得以大幅降低。因此,在当今的食品安全检验中,尤其是食品新鲜度检验中,生物传感器技术已经得到了十分广泛的应用。5.胶体金免疫层析技术。就本质而言,胶体金免疫层析技术是标记检测技术中的一种。胶体金是氟金酸这种化学制品的水溶液,该溶液在免疫层析过程中主要借助于条状纤维层材料实现固相设置,并借助于毛细玻璃来实现样品溶液的移动。在此过程中,层析材料上设置的待测取值将会和待测受体之间产生相应的结合反应,让其中所含有的免疫复合物聚集。而胶体金免疫层析技术的主要作用就是对免疫复合物聚集体进行全面检查与分析,并根据实际情况来实现检测结果的科学获取。比如,在通过该技术进行食品安全检验的过程中,如果发现了大肠杆菌、金黄色葡萄球菌或者其他细菌,其检测结果都将显示为不合格,并提示该食品将会对食用者的生命安全造成严重的不利影响。相较于其他形式的食品安全检测技术,胶体金免疫层析技术的检测更加全面、细致,检测精准度也更高,可以为食品中各项有毒有害成分的检测提供良好的保障,最大限度确保食品的质量与安全。

三、生物检测技术在食品安全检验中的发展分析

就目前来看,生物检测技术在食品安全检验中所发挥的作用十分显著。随着社会经济的发展与科学技术的进步,人们对食品安全方面的要求将会越来越高,而应用到其中的生物检测技术也将获得更好的发展。1.生物检测技术的种类越来越多。随着生物检测技术的发展,将会有越来越多的生物检测技术种类出现,从而进一步拓展生物检测技术的应用范围。在食品安全检验中,生物检测技术的选择也将更加丰富,会对生物检测技术的发展以及食品安全检测质量的提升起到更好的推动作用。2.生物检测技术的检测速度越来越快。目前,基于生物检测技术的食品安全检验速度依然有待进一步提升,很多生物检测技术都需要一定的等待时间。随着生物检测技术的进一步发展,其检测效率将会得到进一步提升,进而将食品安全检验的等待时间进一步缩短,以便尽快获得检测结果。3.生物检测技术的检测精度越来越高。虽然目前的生物检测技术已经在食品安全检验中表现出了非常高的检测精度,但是随着食品安全检测技术要求的不断提升,生物检测技术的检测精度也将得到进一步的提升。相信在未来的食品安全检验中,生物检测技术将会具有更高的检测精度,进一步提升食品安全检测效果,为食品安全提供更加优质的技术保障。4.生物检测技术的适用条件越来越广。在当今的食品安全检验中,生物检测技术大多需要在特定的条件下进行,很多因素都会对检测效果产生一定程度的不良影响。未来,生物检测技术的适应性可能实现进一步的提升,进而在更多的环境条件下实现食品安全的科学检测,从而为食品安全检测提供更大便利,并进一步节约检测成本。

四、结束语

生物检测技术范文3

关键词:微生物检验 药品 检验

一、食品微生物检验应注意的问题

1、操作人员的选用和操作要求

实验室应当聘请具有一定微生物学资质的人来操作,并且要经过考核合格后方能上岗。要求其具有较熟练的操作技能,强烈的质量意识,并且严格遵守无菌操作规程,减少人为因素带来的困扰。

操作要求:(1)操作人员牢记无菌观念,整个过程要求无菌操作,严格按照 GB/T4789食品微生物检验标准进行操作。(2)用无菌工具无菌操作取样。(3)按照 GB/T4789标准方法进行数据处理,得出实验结果。

2、设施设备的放置环境

实验室应当具有适宜微生物检验进行的设施设备条件,包括检测设施及辅助设施,并且要特别注意特殊的设备要在特殊的环境下放置和操作。

3、各种设备及药品的正确配置

(1)培养箱、水浴锅 、于热灭菌箱和高压灭菌锅的安装要求:①在首次安装时要校对温度的稳定性和一致性。②记录以上设施其温度稳定性达到平衡时所需要的时间。③要求定期对以上设备进行清洁和消毒。④最好是使用感应器来对运转循环情况进行控制和监控。

(2)药品配置:①培养基采用高压湿热灭菌法,121℃灭菌15分钟。②部分培养基如胆硫乳培养基则需采用煮沸灭菌法。③对于热敏感的培养基采用膜过滤法。

4、样品的采集、运输和保存

采集具有代表性的样品,并且样品采集必须在无菌操作下进行,以防止样品受到外源性污染和细菌的生长。采样用具及包装物必须是灭菌的。在样品的运输和保存过程中应避免日光照射,防止外来物的污染。采样后,应将样品在接近原有贮存温度条件下尽快送往实验室检验。运输时应保持样品完整。一般不应超过3小时。如不能及时运送,应在接近原有贮存温度条件下贮存。

二、食品微生物检验内容和技术

食品微生物检验的内容有以下几类 :

1、对食品污染程度指示菌的检验。(1)细菌总数又被称为菌落总数,指食品及生活饮用水检样经过处理,在一定条件下经过培养后,所得 1g或1mc检样中所含细菌菌落个数,是判断食品及生活饮用水被污染程度的重要指标。(2)大肠菌群系指一群在37℃培养24h后能发酵乳糖、产配、产气、需氧或兼性厌氧的革兰氏染色阴性无芽孢杆菌。其主要来源于人和牲畜的粪便,所以研究中经常采用粪便污染指标菌来评价生活饮用水及食品的卫生质量。

2、对食品中致病菌的检测。在GB4789食品微生物学检验标准中,已明确规定某些微生物的数量,所以我们除要检测食品污染程度指示菌,如菌落总数、大肠菌群(MPN)的测定外,还有致病菌如金黄色葡萄球菌、沙门氏菌和志贺氏菌等。

食品微生物检验的技术

多年以来,对食品微生物的检测,通常采用琼脂平板培养法,共需2―3d才能完成。近几年各国的许多机构和学者都致力于快速检测技术和方法的研究,已改进和开发了一些快速的检测技术和方法,提高了食品微生物检验的高效性、准确性和可靠性,其中新方法有以下几种。

1、采用电阻抗法。其原理是细菌在培养基内生长繁殖的过程中,将会使培养基中的火分电惰性物质如碳水化合物、蛋白质和脂类等,代谢为具有电活性的小分子物质,其能增加培养基的导电性,从而使阻抗发生变化,所以我们可以通过检测培养基的电阻抗变化情况来判定细菌在培养基中的生长繁殖特性,即可检测出相应的细菌。该法已用于霉菌、大肠杆菌等细菌的检测。

2、采用快速酶触反应及代谢产物的检测。细菌在生长繁殖过程中可合成和释放某些特异性的酶,所以根据其特性来选用相对应的底物和指示剂,并记录反应的结果。如美国3MPetiffilmTM微生物测试片可分别快速测定细菌总数、金黄色葡萄球菌等。

3、采用分子生物学技术。其又包括两种技术:(1)核酸探针技术。根据碱基互补的原则,用特定的方法测定标记物。(2)聚合酶链式反应 (PCR)技术。其原理为通过加热使双链 DNA经裂解成两条单链,成为引物和 DNA聚合酶的模板;然后降低温度,使寡聚核苷酸引物与 DNA分子上的互补序列退火。一般情况下退火温度越高,扩增特异性越好。

4、采用免疫学方法检测细菌抗原和抗体的技术。其有三种技术:(1)荧光抗体检测技术 (IFA),包括直接法和间接法。直接荧光抗体检测法是在检样上直接滴加已知特异性荧光标记的抗血清,经洗涤后在荧光显微镜下观察结果。间接法是在检样上滴加已知细菌特异性抗血清,待作用后经洗涤,再加入荧光标记的抗体后在荧光显微镜下观察结果。(2)免疫酶技术 (EIA),其是将抗原、抗体特异性反应和酶的高效催化作用原理结合,是一种新颖且实用的免疫学分析技术。通过共价结合将酶与抗原或抗体结合,形成酶标抗原或抗体,或通过免疫方法使酶与抗酶抗体结合,形成酶抗体复合物。(3)免疫磁珠分离法 (IMS),即应用抗体包被的免疫磁珠,用一个磁场装置收集铁珠。

5、采用仪器法。(1)微型全自动荧光酶标分析仪(Mini―VIDAS),其主要采用具有优异的敏感性和特异性的酶联荧光技术(ELFA),所测的荧光与抗体中抗原的含量成正比。(2)全自动微生物分析系统 (Vietk―AMS)。其可以同时对60-~480个样品进行分析,并且鉴定时间只需 2~3h,这是效率非常高的一个检验系统,并且也是今后食品微生物检验技术发展的一个方向。

三、总结

总而言之,我们在对食品微生物检验时要遵守职业道德,严谨科学态度,注意各个环节来确保微生物检验数据的准确性,为食品卫生和安全提供可靠的依据。并且随着现代技术的发展,今后食品微生物检验技术的发展方向会是:(1)采用快速和大批量的检验方法,来提高检验效率;(2)形成标准化的实验条件;(3)提高和保证检验的精度和灵敏度。

参考文献:

[1] 张洁梅.食品微生物检验技术的研究进展[J].现代食品科技,2005,21,(2):221-222.

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关键词:生物检测技术 重要性 检测方法 应用

随着科学技术的不断发展,也推动了生物技术的发展,特别是在全球一体化的当前,生物技术的研究成果很快就能转化为生产力。在此基础上,生物检测技术在食品检验中的应用也日趋完善,由于该技术在检测方式上没有毒副作用,结果准确,在食品检测领域中得到了广泛的应用。但是由于目前我国在部分条件下尚不能达到技术要求,生物检测技术在食品检验中还需要进一步的完善。

1、食品检验中的生物检测技术

为了保障食品的安全以及促进食品生产水平的提高,食品检验检测有着重要的作用。传统的检验检测方式主要是通过仪器进行物理、化学方面的检测,但由于其在某些方面存在局限性,已经满足不了当前食品检验的需求,随着生物技术的不断发展,食品检验中也有了新的检验方法的选择。生活中的各类食物都是来源于自然界中的动植物,生物技术主要是针对食品的原材料,二者有相通之处,基于此,在食品检验中,生物检测技术能达到安全、准确、灵敏的检验效果,在成本方面也比较低,对环境也不会造成污染。与传统的检测方法进行对比,生物检测技术具有明显的优势,因此在食品检验的各个方面都得到了广泛的应用,深入到了食品的生产过程、质量监督、质量控制、品质评价及视频科学研究等领域。

2、生物检测技术的内容

随着科技的发展,生物科技的发展速度非常快,很多领域内都取得了较为突出的成绩。现代科技条件下,生物检测技术的规模不断加大,内容不断增多,本文主要针对以下几种生物检测技术进行简单的介绍。

2.1酶检测法

利用适量的酶对食品中的化学成分含量进行检测的方法就是酶检测法,该方面具有极强的特异性,尤其是对食品中的生物污染或农药残留进行检测时的效果非常好,且操作简单,检测的成本低廉。但是需要注意的是,酶需要一定的温度及催化条件,以此来提高检测的效率。在检测中,主要要用到动力学测定法、终点测定法、利用辅酶作用、多酶偶联测定法、抑制剂测定法、酶标免疫检测法、酶反应循环高灵敏度测定法及放射性同位素测定法等。此外,在实际检测中,常会与免疫法结合使用,形成酶联免疫分析检测技术,在食品安全检验中比较常用,尤其是水果或蔬菜中存在杀菌剂噻菌灵的检测时,表现出的灵敏度非常高。

2.2免疫法

在生物检测方法中,免疫法的灵敏度是最高的,特异性也非常强。免疫法的操作简单,具有良好的再现性,应用前景比较广阔。采用免疫法可以对蛋白质进行检测,因为不同蛋白质的物理、化学性质差别不大,因此对不同蛋白质进行区别的时候只能采用免疫法或者是标记探针法。实际检测汇总,免疫法主要包含放射免疫法、沉淀免疫法、荧光抗体法、酶联免疫吸附法、免疫扩散法、凝集免疫法及免疫电泳法等几种方法。

2.3基因芯片技术

该技术主要是实现了将大量探针固定在支持物上,能够一次性的针对样品大量序列进行分析与检测,该技术主要是针对传统的核酸印迹杂交技术存在的操作复杂、操作序列数量少、自动化程度低、检测效率不高等缺陷而出现的,是一种新生的生物检测技术,该技术的发展前景非常广阔。对该技术的应用主要是对植物中是否含有外来基因序列进行鉴定,判断该植物是否是生物技术作物。

2.4免疫传感器

根据生物内的抗原-抗体特异性合并,导致的化学变化而设计的生物传感器,即免疫传感器,其构成主要包含感受器、转换器、放大器。免疫传感器主要有电化学免疫传感器、酶免疫传感器、压电晶体免疫传感器、光化学免疫传感器以及免疫芯片等,在食品检测中,免疫传感器的作用主要是针对生物性危害进行的检测。例如可以针对农药、致病菌、兽药、生物毒素等的检测。

3、食品检验中生物检测技术的应用

3.1残留农药检测

随着农药的普遍使用,人们所食用的蔬菜中,表面残留农药的成分越来越多,部分农药残留含有对人体有害的物质,长期食用就会导致多种疾病的出现,严重威胁到人体健康。所以,人们也越来越多的关注到食品中的农药残留问题,在检测方法上尤为重视。现阶段,用于农药残留检测的最佳生物检测技术有酶技术及生物传感器技术,也是目前最主要的生物检测方法。

3.2有害微生物检测

食品中含有的有害微生物如果进入人体后,会对人体产生较大的为好,对食品的品质也有着严重的影响。所以,对有害微生物的传播进行控制的主要方式是采取有效直接的食品检测方法。在此方面,生物检测技术的优势较为明显,检测的效果也比较突出。截至目前,对食品中的有害微生物检测主要采用生物传感器、酶联免疫法、PCR等检测技术,取得了较大的成果。

3.3食品成分及品质检测

生物感应器是最早应用与食品成分及品质检测的生物检测技术,而葡萄糖传感器由于最早的生物传感器技术,在食品含糖量的检测中最早得到应用。除此以外,在对转基因食品检测中,该技术也比较常用。目前,转基因食品对人体健康及生态环境可能存在不利的影响,因此应该避免食用。对转基因食品的检测也十分必要,主要采取的方法是酶活性检测、酶检测、蛋白质检测等。

结束语

随着人们物质生活水平的不断提高,食品的种类也不断丰富,对食品检测技术的要求越高越高,在操作简单性、检测灵敏度、准确性方面,生物检测技术的发展满足了这一要求。在科技的不断发展中,对生物检测技术中的不足还要进一步改进,不断完善食品检测中生物检测技术的应用。

参考文献:

[1]闫铁炜.现代生物技术在食品检验中的应用[J].商品与质量·学术观察,2011(2).

[2]朱昊浩.基于生物技术的快速食品检测研究动态[J].科技资讯,2011(9).

[3]魏利萍,郭蔚丽.微生物检测技术在食品检验中的探究[J].商品与质量:学术观察,2012(12).

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(一)DNA探针技术

DNA探针技术即分子杂交技术,是一类基于碱基互补配对的高度精确性的,对指定DNA序列进行探查匹配的技术[1]。DNA探针是一段大小不定的受标记DN断,所包含的基因信息最多有一个基因组,最少仅有几十个碱基。DNA探针置于可疑样本中后与未被标记的单链核苷酸互补配对,生成双链杂交分子。之后溶解未配对的单链核苷酸,并利用已做的标记检测配对的反应情况。DNA配对一一对应的特点也使得该技术具有高度的特异性和准确度。DNA探针技术目前已经在沙门氏菌、乙肝病毒等的检测中得到了应用[2]。

(二)多聚酶链式反应

多聚酶链式反应,即PCR,是一种分子生物学技术,用于放大特定的DN段。可看作生物体外的特殊DNA复制[3]。基本原理是在体外且有各类酶参与的情况下对目标双链DN断进行反复的解链、延长循环,从而达到高效扩增的目的。经过30次左右的循环,即可将靶DNA序列扩增近百万倍。PCR技术应用于食品微生物检测可以迅速、准确地得出检验结果。目前研究已涉及的检验方法包括多聚酶链式双重实时检测法,可以同时检测副溶血性弧菌和金黄色葡萄球菌;多聚酶链式反应—变性梯度凝胶电泳分析,用于检测Malt威士忌中的乳酸菌菌群。

(三)基因芯片技术

基因芯片技术是目前最新的一项用于食品病源微生物检测的生物技术。同时利用了上述两种生物技术[4],即DNA探针技术和PCR技术。它是将各种基因寡核苷酸去少量置于芯片表面,在处理待检验样品时,先利用PCR技术进行快速扩增,再利用DNA探针技术进行标记和杂交,利用标记显示技术,通过对芯片表面杂交分布分析得出检测结果。由于结合两种技术,使得检测同时具有快速、准确、特异性高的特点,结合自身检测全面的特点,在食品微生物检测方面具有不错的发展前景。目前最新的研究成果中微阵列可准确识别18种致病性病毒、原核生物和真核生物。

二、免疫技术

(一)荧光抗体技术

免疫荧光技术原理与DNA探针技术类似,是指利用荧光物质标记血清中的抗体,再用荧光显微镜观察待检测样品中的结合物来得出结论。目前最常用的是mini-VIDAS全自动荧光酶标免疫测试系统[5],可对沙门式菌、葡萄球菌肠毒素等进行检测。

(二)酶联免疫法

酶联免疫法利用了抗原抗体特异性结合及酶的高效催化,对于抗原抗体均有检测功能[6]。该方法可用于检测食品中沙门氏菌、弯曲杆菌、致贺氏菌等的检测。研究表明酶联免疫法可以比DNA探针等技术更快得出结果,还可用于食品介导的病毒检测。

(三)免疫磁性微球

免疫磁性分离技术已在医学的各个领域广泛涉及,在食品卫生检测方面的应用研究也在开展。免疫磁性微球是一种表面结合有单克隆抗体的磁性球,可以与待测微生物特异性结合。免疫磁性分离技术主要适用于多相混合且常规检测方法难以分离出微生物的食物检测,在食品卫生检测和研究中效果显著,同样可以用于沙门氏菌、副溶血性弧菌等微生物检测与初步分离鉴定。

三、电阻抗技术

电阻抗法是一项新兴的生物学技术,原理是细菌在培养基繁殖的过程中会将大分子营养物质物质分解为导电型小分子物质,改变培养基的电阻抗。检测基于培养基中电阻抗的改变程度,定性地判断细菌的生长状况,从而分析得出相应的细菌类别。电阻抗法具有检测速度快、灵敏度高、准确性好等优点,用于食品微生物质量控制的许多领域。

四、生物传感器

生物传感器将生物元件做为敏感器件,配合适当的信号传导器组成的分析检测工具。生物元件包括酶、抗体、细胞、微生物等,可以特异地鉴别被测物质并进行反应。信号传导器是将生物信号转变为光、电等物理信号并进行分析,还原生物信息,最终得出结论。生物传感器具有方便快捷、成本低、灵敏度高等特点,已经在食品安全检测中已经得到广泛应用。

五、其他技术

其他食品病原微生物的快速检测技术包括蛋白质指纹图谱技术、ATP生物发光法、放射测量技术、微热量计技术、接触酶测定技术等。

六、讨论

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1免疫学的方法

在食品微生物的检测当中免疫学技术主要是建立在抗原、抗体特异性结合的反应基础上,并且以免疫放大技术为辅,利用病原体刺激生成免疫球蛋白。这种方法的优势在于不需要进行样品选择性增菌之后分离,就可直接进行筛选,具备了灵敏度高的特点,按照检测方法的差异可以分为凝集反应、免疫扩散反应和免疫荧光反应等。

1.1凝集反应凝集反应从本质上来讲也是利用抗原、抗体相结合的原理,将特异性抗体包被于乳胶颗粒之上,进而产生了肉眼可见、便于观察的凝集反应。这种方法因其特异性需要获得较纯的细菌培养物,然后使培养物和致敏乳胶发生反应,通常应用于大肠杆菌类细菌中H7和O157的鉴定。

1.2免疫扩散反应免疫扩散反应的本质是生成一种不溶性的抗原、抗体复合物,是将抗体放入固体或者液体的培养基中进行培养,生成一种肉眼可见的沉淀性物质,这种反应需要在特定培养基中进行,在实际的食品微生物检测方法中,应用了这一技术的有VIP免疫扩散的试剂条还有Salmonella1-2的TestTM,这一类产品在实际当中应用也颇为广泛。

1.3免疫荧光反应免疫荧光学反应的本质是一种免疫学标记技术,利用荧光素对检测抗原或者抗体进行标记,而后产生的特异性抗原反应能够形成带有荧光的抗原、抗体结合物,在仪器中得到检验。这种方法在实际应用的过程中按情况不同可以分为直接方法和间接方法。直接方法就是直接在检测的样品上滴加已知特异性的荧光标记抗血清,在洗涤之后进行观察。间接方法就是将细菌特异性抗体上滴加在检测样本上,经过反应后再洗涤,然后加入荧光标记第二抗体,实现检测。这种方法因其荧光性更加有利于观察,也因其特异性主要适用于沙门氏菌、葡萄球菌、李斯特菌以及单核细胞增生的李斯特氏菌等方面的检测。

2分子生物学法

2.1聚合酶链式反应技术聚合酶链式反应技术是一种体外的选择性DNA或RNA扩增技术。其根本目的就是将人工无法培养出的微生物进行相应DNA或者RNA的片段扩增,通过检测扩增产物的含量来快速检测饲料当中存在的致病菌含量。聚合酶链式反应技术简称为PCR,可以直接对样品当中的肉毒梭菌、大肠杆菌、乳酸杆菌和痢疾杆菌进行检测,PCR能够克服核酸定量敏感性低的缺点,分析出极为微量的DNA,对任何模板的标本都能够实现定量扩增及分析。聚合酶链式反应技术克服了基因探针技术灵敏度不高的缺陷,其中引入的Taq聚合酶还能够简化反应程序,实现半自动化。以同位素标记基因探针的PCR反应为例,这种方法应用于水源E.Coli的检测,能够使检测量达到100%,能够快速检验出食品当中带有污染的病原,并能够保证其准确性。美国杜邦快利康公司已经建立了BAX+病原菌的检测系统,PCR技术在细菌检测方面的应用前景十分广阔。

2.2核酸探针技术核酸探针本身是一种带标记的DNA特异性片段,核酸探针技术的原理是利用碱基互补的原则,使核酸探针和目的DNA进行杂交,最终以特定方法进行标记物测定,核算探针技术大致可以分为非放射性标记和放射性标记两大类。核酸探针具有特异性。传统的检测方法都是以基因表达产物为检测目标,会受到多种因素的干扰,检测病毒要在组织培养之后对蛋白质的囊膜进行检测,还须采取超低温的保存技术,但仍然会因其一些编码蛋白的基因变化,核算探针则避免了这一复杂的程序,无需改变目的蛋白质的结构,更方便应用。但是要注意这其中要将RNA除外,因为RNA探针不耐受碱处理,需要采取不同的方法来制备出检测用的RNA。核酸探针特异性主要取决于使用条件和碱基序列,还会受到探针长度的影响,其敏感性主要受标记系统和探针本身的控制,延长培养的时间也能够提高探针灵敏度。在当前的核酸探针应用过程中还存在一些问题,要实现更快更简洁的制备还需要一段时间的研究和探讨,逐步克服因待检菌种繁多而产生的核酸探针制备问题,突破局限性。

3结语