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火星救母记范文1
关键词:青刺果(Prinsepia utilis Royle);黄酮;总糖;发酵;DPPH
中图分类号:Q815 文献标识码:A 文章编号:0439-8114(2017)07-1326-04
DOI:10.14088/ki.issn0439-8114.2017.07.033
Analysis of the Active Ingredient in Prinsepia utilis Royle Fermentation Liquor
and Its Antioxidant Activity
AN Quan1,LIU Ping-ping2,WANG Dong-dong2,SU Ning3,WANG Chang-tao2,LI Meng2
(1.Yunnan Baiyao Group Corporation Ltd.,Kunming 650504,China;2.School of Science/Key Laboratory of Plant Resources Research and Development of Beijing,Beijing Technology and Business University,Beijing 100048,China;3.Makeup Technology Center,Chinese Aeademy of Inspection and Quarantine,Beijing 100176,China)
Abstract: Extracted with water extraction methods and microbiological methods for Prinsepia utilis Royle extraction of flavonoids and total sugar,then crude extraction were measured on DPPH radical scavenging effect. The results showed that the rate of water extract and microbiological extract of extract Prinsepia utilis Royle flavonoids and was 0.37% and 0.88% respectively,the rate of water extract and microbiological extract of extract prinsepia flavonoids and was 7.65% and 3.38% respectively,Prinsepia utilis Royle extract microbial scavenging of DPPH radicals at the same dilution factor is higher than the ethanol extract. Indicate microbiological method to extract the flavonoids of plants have certain feasibility and superiority.
Key words: Prinsepia utilis Royle; flavonoids; total sugar; fermentation; DPPH
青刺果(Prinsepia utilis Royle)又名青刺尖、刺果,是蔷薇科扁核木属的一种常绿灌木,产于云南、贵州、四川、。生长于海拔1 000~2 560 m山坡、荒地、山谷或路旁等处,巴基斯坦、尼泊尔、不丹和印度北部也有分布[1,2]。青刺果的内茎、叶、根、果实均可入药,具有攻毒、活血、祛瘀、补虚、防贫血、接骨消肿等功效[3-5]。青刺果含黄酮、多糖、脂肪酸、生物碱等多种活性成分[6-9]。现代研究表明,青刺果具有免疫调节、抗菌、降血糖、降血脂、抗炎等作用[10-15]。由于青刺果有着广泛的用途,青刺果活性成分的研究就显得更加重要。
目前,植物活性成分因其高的安全性和功能活性,已应用到食品、医药、化妆品等行业[16,17]。因此,利用各种提取技术从植物中提取具有高活性的成分已成为研究热点。传统的提取技术包括有机溶剂提取法、热水提取法、系统溶剂提取法等,但这些方法产品安全性低、耗时长、提取率低。安全性高、提取率高和环保的新型提取方法越来越受人们关注。微生物法提取植物活性成分是利用微生物在生长过程中分泌的多种酶,对植物中的活性成分进行提取和修饰[18-22]。
本研究以青刺果为研究对象,以水提取和微生物提取作为对比,检测提取液中黄酮、总糖的含量和提取液对DPPH自由基的清除作用,初步探究微生物法提取植物中总糖、黄酮的可行性与优越性。
1 材料与方法
1.1 材料与仪器
1.1.1 菌种 黄酒酵母,购自北京市食品酿造研究所。
1.1.2 供试材料 青刺果60 ℃烘干至恒重,粉碎过50目筛备用。
1.1.3 试剂 芦丁标准品、葡萄糖标准品(生化试剂,中国药品生物制品检定所);DPPH(1,1-二苯基-2-三硝基苯肼)购自美国Sigma公司;浓硫酸,苯酚、无水乙醇、亚硝酸钠、硝酸铝、氢氧化钠均为市售国产分析纯。
1.1.4 仪器 高压灭菌锅(上海申安医疗机械厂);全温度振荡培养箱、水浴恒温摇床(太仓华美生化仪器厂)、低速大容量台式离心机、紫外分光光度计UV-1240(日本岛津制作所)等。
1.2 黄酮的提取
1.2.1 水提法提取黄酮 称取20 g青刺果粉,按照1∶15料液比(g∶mL,下同),加入去离子水300 mL,于70 ℃水浴摇床中提取3 h,冷却后4 900 r/min离心10 min,取上清液待测[22-26]。
1.2.2 微生物法提取黄酮 分别称取20 g青刺果粉,按照1∶15的料液比,加入去离子水250 mL,接入5%的黄酒酵母扩培菌液,于28 ℃、180 r/min的空气摇床中提取48 h,4 000 r/min离心10 min,取上清液待测。
1.2.3 黄酮含量的测定 标准曲线的绘制:配制1 mg/mL芦丁标准液,精确吸取0.2、0.3、0.4、0.5、0.6、0.7 mL芦丁标准液,补齐至1 mL;各加入0.3 mL 5%亚硝酸钠溶液,摇匀,放置6 min;加入0.3 mL 10%硝酸铝溶液,摇匀,放置6 min;加入4 mL 1 mol/L NaOH溶液,再加0.4 mL去x子水,摇匀,放置10 min,以空白试剂为对照,在510 nm下测定其吸光度。以芦丁浓度为横坐标(x),以吸光度(y)为纵坐标绘制标准曲线。
黄酮提取率的测定:准确吸取1 mL的提取液,各加入0.3 mL 5%亚硝酸钠溶液,摇匀,放置6 min;加入0.3 mL 10%硝酸铝溶液,摇匀,放置6 min;加入4 mL 1 mol/L NaOH溶液,再加0.4 mL水,摇匀,放置10 min,以提取溶剂作为空白,在510 nm下测定其吸光度,由标准曲线计算出提取液中黄酮的含量。
黄酮提取率=提取液中黄酮含量×提取液总体积/原料质量×100%。
1.3 总糖的提取
1.3.1 提取总糖 称取20 g青刺果粉,按照1∶15料液比加入去离子水300 mL,于80 ℃水浴摇床中提取3 h,冷却后4 900 r/min离心10 min,取上清液待测[6,26,27]。
1.3.2 微生物法提取总糖 分别称取20 g青刺果粉,按照1∶15的料液比,加入去离子水300 mL,接入5%的黄酒酵母扩培菌液,于28 ℃、180 r/min的空气摇床中提取48 h,4 000 r/min离心10 min,取上清液待测。
1.3.3 总糖含量的测定 标准曲线的绘制:准确称取恒重葡萄糖标准品50 mg,溶于50 mL的去离子水,制得1 mg/mL的标准品溶液。分别取标准品溶液1、2、3、4、5、6 mL,定容于50 mL容量瓶中,得到20、40、60、80、100、120 μg/mL的标准溶液。分别准确吸取标准样品1 mL置于试管中,吸取0.5 mL 5%苯酚于试管,摇匀待其充分反应,再加入2.5 mL浓H2SO4,盖上试管盖,充分摇匀,并静置5 min;将反应后的试剂沸水浴1 h,取出在490 nm处测定吸光度。
总糖提取率的测定:吸取待测液1 mL(另取1 mL去离子水作空白对照)于有塞试管中,分别依次添加0.5 mL 5%苯酚溶液,混匀后加入2.5 mL浓硫酸,再次混匀,5 min后封管沸水浴1 h。取出后在490 nm处测定吸光度。
1.4 粗提液对DPPH自由基的清除作用
将提取液用提取溶剂稀释6个梯度作为待测液,取等体积的待测液与2×10-4 mol/L的DPPH溶液混匀为A1管;取等体积的无水乙醇与2×10-4 mol/L的DPPH溶液混匀为A2管;取等体积的无水乙醇与待测液混匀为A3管。反应30 min后,在517 nm下测A1、A2、A3管吸光度。清除率计算公式[26,28-31]:
清除率=[(A2+A3)-A1]/A2×100%。
2 结果与分析
2.1 芦丁标准曲线
对芦丁标准液的浓度和吸光度进行线性回归处理,计算得到的回归方程为y=1.098 9x+0.006 6,R2=0.999 5(图1)。
2.2 不同提取方法对青刺果黄酮提取率的影响
以去离子水与黄酒酵母提取青刺果黄酮(图2),粗提液中黄酮的总质量分别为74.09、241.98 mg,提取率分别为0.37%和0.88%,微生物法提取青刺果黄酮提取率高于水提法的提取率。
2.3 葡萄糖标准曲线
对葡萄糖标准液的浓度和吸光度进行线性回归处理,计算得回归方程为y=0.015 1x+0.004 4,R2=0.999 6(图3)。
2.4 不同提取方法对青刺果总糖提取率的影响
以去离子水与黄酒酵母提取青刺果黄酮(图4),粗提液中总糖的总质量分别为1.53、0.68 g,提取率分别为7.65%和3.38%,可见微生物法提取青刺果总糖的提取率低于水提法的提取率。
2.4 粗提液对DPPH的清除作用
青刺果的水提取液和微生物提取液对DPPH的清除作用如图5所示。从图5中可以看出,相同稀释倍数的青刺果微生物提取液对DPPH的清除率高于水提取液,即微生物提取液的抗氧化性高于水提取液的抗氧化性。
3 小结与讨论
本研究采用水提取和微生物提取的方式对青刺果黄酮、总糖进行提取,结果表明,青刺果酵母发酵液中的黄酮含量高于水的提取液,水提取的总糖在一定程度上高于微生物提取。两种形式的提取液对DPPH清除作用的测定结果表明,微生物提取液的清除作用要在一定程度上高于水提取液,初步表明微生物提取方式提取了更多的黄酮,在一定程度下微生物提取液具有更高的抗氧化活性。微生物提取的方式不使用有机试剂,温度适中,对环境无污染。此初探结果可用于今后微生物提取黄酮或者其他活性成分进行工艺优化,对提取的活性物质进行分离纯化、结构分析等,从而为微生物提取活性成分的应用提供参考和借鉴。
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火星救母记范文2
通讯作者:柳瑞春
【摘要】 目的 研究活菌制剂与思密达在新生儿母乳性黄疸治疗方面的作用。方法 把160例患新生儿母乳性黄疸患者随机分为治疗组与对照组,治疗组给予活菌制剂与思密达,对照组进行常规传统治疗,比较两组患儿黄疸消退的时间和血清TBIL的改变。结果 治疗组与对照组黄疸消退时间分别为(4.25±2.37) d和(6.54±2.46) d。治疗组血清TBIL降低(115.97±38.71) μmol/L,对照组降低(71.17±24.38) μmol/L。两组黄疸消退时间、血清TBIL降低值比较差异均有统计学意义(P
【关键词】 活菌制剂; 思密达; 新生儿; 母乳性黄疸
母乳性黄疸为较常见的新生儿疾病,随着母乳喂养率的不断提升,新生儿母乳性黄疸也逐渐增多[1]。本病尽管预后良好,然而要进一步倡导母乳喂养,应当通过有效措施来降低血清TBIL,保证新生儿的健康。笔者收集了本院近3年新生儿母乳性黄疸患者160例,研究活菌制剂与思密达在其治疗中的作用,现报告如下。
1 资料与方法
1.1 一般资料 选取本院儿科2008年1月~2010年12月所收治的新生儿母乳性黄疸患儿160例作为研究对象,其中男96例,女64例。平均胎龄(39±0.3)周,平均出生体重(3.3±0.5) kg,就诊日龄为15~36 d,血清TBIL为150~320 μmol/L,患儿全部是首诊治疗。将160例患儿随机分成治疗组84例与对照组76例,两组一般情况比较差异无统计学意义(P>0.05),具有可比性。
1.2 方法 治疗组给予活菌制剂与思密达:(1)双歧三联活菌胶囊(山西晋城海斯药业,0.21 g/粒)1粒/次,2次/d,剥开胶囊倒出药粉,用温水或温牛奶冲服,连服5 d。(2)思密达(天津博福-益普生制药有限公司)1.0 g/次,3次/d,以10 ml温开水调匀喂服。对照组进行常规治疗:(1)鲁米那3 mg/(kg・d),可拉明100 mg/(kg・d),分3次口服,连续5 d。(2)白蛋白1 g/kg或血浆10 ml/kg,静滴。(3)72 h黄疸无明显消退者进行蓝光照射24~48 h。观察两组患儿治疗前与治疗第5天时血清TBIL值和黄疸的消退时间。
1.3 检测 于治疗前和治疗后第5天清晨抽取静脉血查血清TBIL,采用笔者所在医院生化分析仪测定。
1.4 统计学处理 应用SPSS 10.0统计软件进行统计学处理,计量资料用均数±标准差(x±s)表示,采用t检验。
2 结果
2.1 两组治疗前后血清TBIL的变化 治疗前治疗组与对照组的血清TBIL值比较差异无统计学意义(P>0.05),治疗后第5天两组血清TBIL值比较差异有统计学意义(P
表1 两组治疗前后血清TBIL值的比较(μmol/L)
2.2 两组新生儿黄疸消退时间比较 治疗组84例,黄疸的消退时间是(4.25±2.37) d;对照组76例,黄疸的消退时间是(6.54±2.46) d,两组黄疸消退时间比较差异有统计学意义(P
3 讨论
随着母乳喂养率和临床认识母乳性黄疸的深入,新生儿母乳性黄疸的发病处于上升阶段。研究认为,多种因素可引起母乳性黄疸,因为胆红素肠-肝循环变多引起,结合胆红素随胆汁到肠道后,由于肠道pH偏碱,部分在β-GD作用后分解成非结合胆红素,再进入肠-肝循环,另一部分于回肠终末通过肠道菌群作用,脱去GD,再慢慢被还原成粪胆原,然后在肠道下段和空气接触,氧化为尿胆素或者粪胆素被排出。新生儿的肠管中β一GD非常丰富,同时活性很高,是成人的10倍[2],增加了肠-肝循环;由于新生儿摄入少,肠内蠕动变少或者开奶晚,建立肠道菌群晚,胆红素转化的菌群缺乏;10%~20%粪胆原无法随粪排出,并被肠黏膜吸收,通过门静脉到达肝脏,大多再通过原形(胆红素)进入肠管,参与肠-肝循环。有人发现,在母乳内含特殊脂肪酸和胆固醇,增加了未结合胆红素的重吸收。以上多种因素使进入肠-肝循环的胆红素相对增加,进而加重了黄疸。传统治疗往往忽视这个因素。活菌制剂与思密达联合使用,能减少通过肠-肝循环进入血液的胆红素,有效治疗新生儿的母乳性黄疸。
研究表明,外源性的双歧杆菌活菌制剂口服能增多肠管内双歧杆菌的数量,快速补充人体必需的有益菌群,协助建立起肠道的菌群,让肠道中结合胆红素转化成粪胆原变多,并排出人体。活菌制剂代谢可产生乳酸等短链的脂肪酸,使肠管pH值下降[3],降低β-GD活性,竞争性抑制结合胆红素分解成未结合胆红素,降低胆红素肠-肝循环。外源性双歧杆菌活菌制剂还能经产酸刺激肠道蠕动,有利排便,加快胆红素的排出,降低肠-肝循环。肠管中定植双歧杆菌又有生物屏障与调节免疫功能,提升肠黏膜抗感染的能力,可间接降低血清胆红素水平。
新生儿由于肠壁黏膜通透性较高,易受细菌、病毒和毒素损害,降低屏障功能,肠腔中未结合胆红素能快速由肠黏膜进入血循环,引起高胆红素血症。所以,增强新生儿的肠黏膜屏障作用,能降低胆红素的肠-肝循环,有效治疗新生儿的黄疸。思密达为片层结构,它的颗粒直径是1~3 μm,表面积100 m2/g,吸附功能很强,它可以均匀覆盖消化道黏膜,以局部刺激,促进合成黏液蛋白,显著增加黏液层的厚度,加强黏液屏障,阻断胆红素的肠-肝循环。它的吸附作用能吸附肠腔中的胆红素并排出体外,降低小肠黏膜吸收未结合胆红素,从而发挥退黄功效。
研究表明,活菌制剂与思密达联合应用在新生儿的母乳性黄疸治疗上比传统方法更能显著降低血清TBIL水平,减轻黄疸,缩短病程。
参 考 文 献
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火星救母记范文3
曾经玩过这样一个游戏,在纸上写下5个对你来说重要的东西,再逐一划去,被划的这些东西就会失去,只剩下最后一样保留下来。这是对心灵的一个拷问:失去哪个,留下哪个。这是最本质面对舍、得的诀别。
“舍得”,字面上是说只有舍才能得。其实这个理由一点儿也不错,在漫漫人生中,很少会同时拥有许多东西,往往是在你谨慎的选择中或是在不知不觉中完成“舍去”和“得到”这两个步骤的。老师会在考试前的心理辅导上经常说,先易后难。什么意思呢?就是让你先舍弃困难的题目,把简单的题目的分得到,有舍有得。有时会在游戏上,在你的面前有一套VIP装备,需要用你的旧装备去换,你是舍旧换新呢,还是离开?答案是显而易见的,我相信大部分人都会选前者,除了你的脑子继承了火星人的思维方式。
不过,你们可别太天真了,关于舍得怎么可能这么简单?以上我列举的例子都是些微不足道的“舍得”,小到我们不知不觉中就完成了,都是先没什么大不了的事情,无非就是考试失利或游戏不通关呗!~这无疑不会给我们带来多大的痛苦,而在充满着未知的人生旅途中,充满了许多无奈的舍得。那是一种逼迫性的。
假如你在学校有一群知心好友,但你的亲人这几天得到了一份薪水不错的外地工作,你得转学和他们搬过去,但你肯定是不愿意的,我想你搬去之后会伤心好一阵子吧。但这一切一点儿也不违背“舍得”的道理,你失去了朋友,得到了优越的生活,只不过这并不是你愿意的交易,所以得不到快乐。
这种抉择也能让你烦恼上一阵子的了。比如说,某人在你妻子和妈妈都在场的情况下问你一个问题,在你妻子和母亲同时落水的情况下只能救一人,你就那个。很明显,那个人把你困住了,若不救母亲,那就是不孝,但若不救妻子,那就是不忠。
也有好多人,因为在“舍得”上选择不慎而一脚踩进了罪恶的深渊,像那些不法分子,就是舍去了良心,在获得了短暂财富的同时也获得了牢狱之灾。