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抗癌药物范文1
圆白菜、西兰花——不仅是蔬菜
圆白菜、西兰花和其他类型的十字花科蔬菜中富有抗癌活性有效物质，如配糖类。在破坏细胞壁时，释放出硫化合物。这些次生植物物质可以保护体细胞，使其免受促发癌症物质的损害，阻碍肿瘤的发展。它给激发癌症的物质“解了毒”，并且调节雌激素分泌规律。使其发挥最大作用的用法是：一周食用3～4份西兰花，可以明显降低患乳腺癌或胆囊癌的风险。此外，西兰花和所有的圆白菜类一样，都是宝贵的维生素C的提供者。
但是，有效的成分就像冬眠一样困在蔬菜里，只有彻底地咀嚼才能释放抗癌物质。反之，高温会减弱其功效。因此尽可能用蒸锅来做西兰花及同类蔬菜，或者在短时间内烹炒一下。尽量多吃接近于生的圆白菜，尽量彻底咀嚼，因为每嚼一口都会提高其功效。
一种很好吃且容易消化的圆白菜是紫圆白菜，它是一种最古老、最有营养的圆白菜。
番茄——红色的迷你巨人
几乎没有一种蔬菜像番茄那样经常出现在我们的盘子里，这是有很好的原因的。大自然在此不仅没有吝啬口味，也没有吝啬宝贵成分，只要果实已经在植物上完全成熟，它就蕴含了丰富的矿物质、维生素和次生植物物质。起抗癌作用的是茄红素，一种属于类胡萝卜素的、赋予蔬果鲜美明亮红色的物质。
和大多数热敏感的次生植物物质相反，茄红素正好需要加热来使它的有效物质完全地发挥出来。用阳光下成熟的果实制作的浓缩番茄酱以及煮好的、煮烂的含最大含量的茄红素有效物质，同时结合使用高品质的油，还会提高茄红素的利用价值。结合大蒜和橄榄油，煮烂的番茄汤就成了一份理想的癌症预防食品。因此，番茄一定要每周至少2次出现在菜单上，要尽可能使用天然野生的番茄。与现代方法栽培的番茄相比，天然野生番茄蕴含的茄红素要多得多。
洋葱和大蒜——有效对抗“吸血鬼”癌症
首先，大蒜和洋葱给很多菜肴增添了可口的味道，同时它们也是高效的抗癌物，完全没有副作用。其宝贵的成分主要由具有强烈香味的硫化合物组成，如蒜氨酸。但是只有细胞壁破坏才能促使蒜氨酸转化成蒜素，即赋予大蒜特殊气味的物质。蒜素使百合属植物具有阻碍癌症的作用。因此，为了充分地发挥其作用，必须将大蒜和洋葱切成小块，在继续加工之前，先将其放置约10分钟。少许的油还会再次增强其功效。注意：蒜素并不耐热。因此，一定要在烹煮食物的最后放入大蒜，然后就不要再继续加热了。此外，洋葱还含有多酚，就像槲皮素。它保护身体免受激发癌症的物质的伤害，抑制癌细胞的生长，激活燃烧功能，阻止酵解新陈代谢。洋葱尽量生吃，比如拌色拉。
柑橘类水果——不仅仅是维生素C的提供者
这些彩色的维生素炸弹中所蕴含的东西，在削皮的时候就已经闻到了。这种向我们迎面扑来的轻快芳香，属于烯族。柑橘类水果还含有无数的高活性植物成分（主要存在于果皮中)以及大量的多酚，除了之前所述的作用外，它还具有很强的抗炎症作用。此外，活性物质能够直接干预癌细胞的复制周期。它的作用类似于清道夫，对解毒过程起到良性作用。此外，柑橘类水果能够提高其他植物素的功效和吸收率，而且，它能够激活并增强免疫系统。
比如，往色拉里调入一茶匙柠檬酱，就可以利用上这个巨大的力量。这样，可以提高对维生素、矿物质及次生植物物质的吸收，防止油被氧化。非常可口的还有用苦橘子果酱（注意糖含量）和柠檬皮调配的小吃和调味汁。
新鲜浆果——为健康大口吃吧
覆盆子、黑莓、蓝莓、黑色醋栗、草莓……只要想到新鲜的浆果就能让人直流口水，这样很好。因为几乎没有其他任何一种水果可以提供这么高效的植物素。浆果含有大量的多酚，它能通过封锁血管的形成(血管生成)，加速癌细胞有计划地自杀，起到阻碍癌症的作用。多酚还具有很强的抗氧化能力，因此，能够截获导致破坏健康体细胞和提前老化的自由基。
尽量将蓝莓等浆果经常列入菜单。吃冷藏浆果时，不用有所顾虑。因为，那些有效成分能经受得住寒冷。一定要注意食入量，不要超过推荐的每日糖摄入量。
黑巧克力——健康地享用
除了蓝莓和葡萄籽粉之外，另外一种高潜力的美食——不仅是指它的味道——可可也是高效的植物成分原花色素的提供者，它是一种类黄酮，可以抵消各种基，防止发生突变，通过促进燃烧和阻碍酵解，干预癌细胞制造能量。可可还含有大量的多酚。一天1/4块的黑巧克力(超过70%可可)就能充足地供应这种宝贵的成分。请享受这种美食，但是要适度。而且要遵循最简单的基本原则：巧克力越黑，可可含量越高，其抗氧化作用也越强。最好的是完全无糖的纯可可棒。
姜黄——不只是调味料
姜黄素是一种深黄色光敏植物素。它的根是传统咖喱粉的主要成分。基于其颜色很深，在食品工业中，姜黄素也被用作天然色素（E 100），如用于人造奶油、即食菜肴、面食、芥末、甜品和土豆泥。
当然，这种发亮的黄色姜黄素除了可以调动食欲以外，还有很多其他用途。它能抵抗化疗耐药的形成、癌细胞的入侵及扩散，同时还促进癌细胞死亡。因此姜黄素是最有效的天然抗癌食品之一。但是姜黄素在肝脏和肠黏膜内会相当快地分解，这就限制了它对身体的可用性。为了抑制其在体内降解，可以采用胡椒粉来调味菜肴，其中所含的胡椒碱会阻碍姜黄素的分解。
和所有的次生植物物质一样，由于自身的化学结构，姜黄素对光、热和氧气都非常敏感。因此，重要的是小心地加工、运输、储存提取物或调味品，保证它们的生物有效性不会丢失。
绿茶——不仅仅是一种饮料
抗癌药物范文2
上世纪60年代，科学家在五加科植物（西洋参、人参等）中发现了一类具有抗癌活性的物质——人参皂苷。从此开始了关于人参皂苷抗癌功效的研究。到现在科学家已经鉴定了超过50种人参皂苷，并确定了其化学结构。
随着对人参皂苷研究的深入，科学家发现有一类人参皂苷生物活性更强，科学家将其命名为稀有人参皂苷。人们熟悉的Rh2和Rg3，都属于稀有人参皂苷。
稀有人生皂苷的开发目前以Rh2和Rg3为主
一直以来，人参皂苷抗癌作用的研究主要集中在稀有人参皂苷Rh2和Rg3上。
各种研究表明，Rh2对癌细胞的生长有抑制作用，能诱导肿瘤细胞凋亡，逆转肿瘤细胞异常分化，抗肿瘤转移，与化疗药物联用能起到增效减毒的作用。
而Rg3则可以抑制癌细胞的分裂增殖，使癌细胞的增殖速度减慢，并能抑制肿瘤细胞的黏附、侵润，阻止癌细胞新生血管的形成，从而抑制肿瘤生长、扩散和转移，具有显著的抗癌功能。
目前国内市场上的人参皂苷类抗癌产品也主要是以Rh2和Rg3为作用成分。
然而越来越多的医学研究发现，稀有人参皂苷Rg5具有更广泛和更强的抗癌作用。
稀有人参皂苷Rg5显著诱导癌细胞凋亡
一项发表在《人参研究杂志》上的科学研究表明，稀有人参皂苷Rg5可以通过多种途径诱导癌细胞凋亡。【1】
这项以乳腺癌细胞为对象的体外细胞实验证明，稀有人参皂苷Rg5可显著诱导细胞周期在G0/G1期停滞，并影响与细胞凋亡相关的蛋白，从而诱导癌细胞凋亡，降低癌细胞的活性，抑制癌细胞的增殖。
值得注意的是，人参皂苷大热门Rg3，对肝癌细胞、前列腺癌细胞、胶质细胞瘤细胞等各种癌细胞系均具有抗癌作用，然而在本次实验中，Rg3对乳腺癌细胞并没有产生明显的抗癌活性。
另据报道，有研究表明Rg5对肝癌细胞的抑制作用，比Rg3强4倍。
Rg5对宫颈癌细胞同样有效
同样，发表在《分子医学报告》上的另一项医学研究也证明，Rg5对宫颈癌细胞也具有抑制作用。【2】
Rg5通过引发DNA损伤，诱导癌细胞凋亡，从而降低癌细胞活性、抑制癌细胞增殖。这种显著的抗癌活性，让科学家看到了Rg5成为宫颈癌治疗药物的潜力。
可减轻化疗药物顺铂的肾毒性
发表在《影响因子》上的一项科学研究还发现了Rg5在抗癌中的另一个重要作用——可以减轻化疗药物顺铂产生的肾脏毒性。【3】
顺铂是临床上重要的抗癌药物之一，广泛用了各种恶性实体肿瘤的化疗。但是高剂量的顺铂会给患者带来严重的肾脏毒性，而且目前临床上没有可用的药物能保护肾脏免受顺铂的这种毒副作用，这大大限制了顺铂在癌症治疗上的使用。
在这次研究中，科学家发现Rg5通过减轻氧化应激，抑制炎症和凋亡等方式，减弱了顺铂带来的肾脏毒性，从而减轻了肾小管损伤。
这表明Rg5可以和其他抗癌药物联合使用，起到减毒增效的作用。
Rg5或将成为抗癌药物的新希望
关于Rg5抗癌功效的研究和发现，让科学家们在它身上看到了成为新型抗癌药物的希望。随着医学研究的不断深入，科学家们或许会挖掘出Rg5更多的抗癌作用，从而使得Rg5成为抗癌的一个热门方向。
目前国内市场上，已经出现了含有包括Rg5在内的多种人参皂苷成分的抗癌产品。这类产品已经突破了Rh2和Rg3的局限，走在了稀有人参皂苷抗癌应用的前沿。
参考资料：
【1】Shin-Jung Kim， An Keun Kim 细黑参和人参皂苷Rg5的抗乳腺癌活性 《人参研究杂志》2015年4月 39（2）：125-134
抗癌药物范文3
通讯作者：刘圣活
【摘要】 目的 探讨MG7抗体靶向紫杉醇纳米药物治疗人胃癌裸鼠移植瘤的疗效。方法 采用裸鼠BGC-823胃腺癌动物模型，每组6只，随机分配至设立的生理盐水对照组、载体材料组、紫杉醇常规药物组、非靶向紫杉醇纳米药物组、MG7抗体靶向紫杉醇纳米药物组。采用尾静脉给药方式，动态观察并测定肿瘤的体积、瘤质量抑瘤率，评价治疗效果，并观察实验期间动物的全身情况及相对体质量变化，评价毒副作用。结果 MG7抗体靶向紫杉醇纳米药物组人胃癌移植瘤表现出明显的体积抑制和瘤质量抑制，抑瘤率分别为84.6%和84.5%,显著高于紫杉醇常规药物组（45.1%,48.7%）和非靶向紫杉醇纳米药物组38.7%,42.2%），而且MG7抗体靶向紫杉醇纳米药物组的小鼠体质量与其它各组比较相对平稳，且饮食活动正常，对正常组织的毒副作用明显减轻。结论 MG7抗体靶向紫杉醇纳米药物具有良好的高效低毒体内抗肿瘤作用，作为一种新型药物载体显示了良好的应用前景。
【关键词】 胃癌； MG7抗体靶向紫杉醇纳米药； 靶向治疗
A study on gastric cancer therapy and diagnosis with MG7 antibody targeting paclitaxel nano-drugs LIU Sheng-huo, SHUAI Xin-tao，ZHOU Jian-hua， HU Feng-xia.The Ninth People's Hospital Of Shenzhen, Shenzhen 518116,China
【Abstract】 Objective To study the curative effect of MG7 antibody targeting paclitaxel nano-drugs on human gastric cancer xenografts in nude mice.Methods Human gastric cell line BGC-823 was implanted into 30 nude mice Drugs were injected through the caudal vein in 5 different groups with established experimental models Tumor growth was monitored once other day.Results The growth speed of tumro in the group of MG7 antibody targeting paclitaxel nano-drugs was significantly slower than the other groups The rates of tumor restrain in tumor weight and tumor volume of the MG7 antibody targeting paclitaxel nano-drugs group were 84.6% and 84.5% respectively, remarkably higher than other groups.The side-effect and toxicity in the MG7 antibody targeting paclitaxel nano-drugs group were significantly less than in the other groups.Conclusion MG7 antibody targeting paclitaxel nano-drugs can inhibit the growthof tumor,which indicates a favorable foreground for its clinical application.
【Key words】 Gastric cancer； MG7-Ab Paclitaxel nano-drugs； Targeting therapy
胃癌是最常见的恶性肿瘤之一，尤其在我国的发病率和死亡率仍居首位［1］，新近资料显示，我国胃癌死亡率总体呈上升趋势［2］。传统的手术治疗、放射治疗、化疗等疗效较差，5年生存率很低，化疗仍然是胃癌的标准治疗手段之一［3］。然而由于化疗药物对肿瘤细胞缺乏特异性且毒副作用大，传统途径给药模式由于化疗药物用量大，大多缺乏药理作用专一性，对正常组织产生严重的不良反应，因此提高药物抗肿瘤效果，减低毒副作用迫在眉睫，实现这个目标的一个重要方法是将化疗药物与载体相结合，以改变化疗药物在体内分布来提高肿瘤局部的药物浓度，最大限度降低非肿瘤部位的药物浓度，从而减少化疗药物带来的毒副作用［4］。
笔者在研究工作中，将靶向胃癌细胞的单克隆单链抗体（MG7-Ab）与抗癌药紫杉醇负载到同一个纳米体系中，通过MG7抗体靶向紫杉醇纳米药物对人胃癌裸鼠移植瘤作用观察，为靶向治疗肿瘤提供生物医学基础，为今后进一步深入研究提供实验依据。
1 材料和方法
1.1 实验材料
1.1.1 肿瘤细胞株和动物 BALB/C nu/nu裸鼠（购自北京维通利华实验动物技术有限公司），无特殊病原菌（SPF）级，雄性，6～7周龄，体质量18～20 g，动物质量合格证号为SCXX（京）2006～0007，于中山大学附属中山一院实验中心SPF条件下饲养。人低分化胃腺癌BGC-823细胞株为本室保存。
1.1.2 紫杉醇（北京协和药厂）、MG7抗体靶向紫杉醇纳米药物及非靶向紫杉醇纳米药物由中山大学化学与化学工程学院制备。RPMI-1640培养基系GIBCO公司产品，按产品说明书配制，过渡除菌备用，胰蛋白酶系华文生物工程公司产品，以1640培养液制成2.5 g/L浓度备用，新生小牛血清系兰州民海生物工程公司生产。
1.2 细胞培养 将人胃癌BGC-823细胞培养于37 ℃ 5% CO2培养箱中，加入含10%新生小牛血清的RPMI-1640培养液。传代时用0.25%的胰酶消化处理和PBS洗涤。
1.3 人胃癌裸鼠移植瘤模型的建立 人胃癌BGC-823细胞生长至铺满培养瓶80%～90%时，用0.25%的胰酶消化后收集，制成单细胞悬液，悬浮于无血清的RPMI-1640培养液中，显微镜下计数并调整细胞数至（4～6）×107/ml，分别接种于裸鼠右侧腹股沟皮下，每只0.1 ml。细胞种植14 d后，选择肿瘤体积为100 mm3左右裸鼠为实验模型。
1.4 实验分组和给药方法 移植性人胃癌裸鼠30只，随机分为生理盐水对照组（A）、载体材料组（B）、紫杉醇常规药物组（C）、非靶向紫杉醇纳米药物组（D）、MG7抗体靶向紫杉醇纳米药物组（E），共5组，每组6只，隔天尾静脉注射给药，各组紫杉醇剂量按10 mg/kg体质量计算。
1.5 肿瘤体积变化及抑瘤率 隔天（第3、5、7、9和11天）用游标卡尺测量肿瘤长径a和垂直于a的最大横径b，用电子天平称量裸鼠体质量。第11天拉脱颈椎处死裸鼠，在超净工作台上解剖观察，剥离瘤体称重，同时将肿瘤剥离拍照观察各组小鼠肿瘤体积变化的差异，按照公式：瘤体积 ab2；体积抑瘤率（%）（1-）×100%；瘤重抑瘤率（%）（1-）×100% 分别计算肿瘤体积、体积抑瘤率及瘤重抑瘤率，然后以每组动物移植瘤体积的平均值为纵坐标绘制移植瘤生长曲线。
1.6 实验动物的全身状况和体质量变化 每天观察各组动物的饮食、活动、皮色等方面变化，隔天测量一次裸鼠体质量，观察其变化情况，以每组动物体质量变化曲线为纵坐标，处理时间为横坐标，绘制体质量变化曲线。
1.7 统计学分析 采用SPSS 11.5统计软件完成所有统计分析，定量测定结果以均数±标准差（x±s）表示单因素方差分析比较多个样本的均数，Dunnett-t检验检测MG7抗体靶向紫杉醇纳米药物组与其它实验组均数的差异，以P≤0.05为差异有统计学意义。
2 结果
2.1 肿瘤体积变化及体积抑瘤率 紫杉醇常规药物组、非靶向紫杉醇纳米药物组、MG7抗体靶向紫杉醇纳米药物组的抑瘤率分别为38.7%、45.5%和84.6%，MG7抗体靶向紫杉醇纳米药物组的肿瘤增长速度明显低于其它各组（P＜0.05）。生理盐水对照组、载体材料组、紫杉醇常规药物组、非靶向紫杉醇纳米药物组肿瘤体积则较大，形状不规则，着色较深，表明肿瘤组织生长旺盛。与上述各组相比，MG7抗体靶向紫杉醇纳米药物组的肿瘤体积较小，形状较规则，颜色也较浅，提示肿瘤组织生长受到抑制。结果见表1、图1。
2.2 肿瘤瘤重及瘤重抑瘤率 MG7抗体靶向紫杉醇纳米药物组裸小鼠瘤重明显低于其它实验组（P＜0.05），抑瘤率最高，与紫杉醇常规药物组、非靶向紫杉醇纳米药物组比，MG7抗体靶向紫杉醇纳米药物组治疗后瘤质量明显减轻（P＜0.05），抑瘤率明显增加。结果见表2。
2.3 实验期间动物的全身情况及相对体质量变化 在实验期间，紫杉醇常规药物组、非靶向紫杉醇纳米药物组的裸鼠后期反应迟钝，饮食及活动均较差，皮肤无光泽，体质量下降较快。各实验组由于药物毒性的差异显示相应变化，而MG7抗体靶向紫杉醇纳米药物组的体质量与其它组比较相应平稳，且饮食活动较正常。
表1 各组裸鼠肿瘤体积变化及体积抑瘤率
注：与生理盐水对照组比较，*P＜0.01；与其它组比较,P＜0.05
表2 各组裸鼠瘤体平均质量和瘤重抑瘤率
注：与等渗盐水组比较,*P＜0.01；与其它组比较,P＜0.05
3 讨论
随着人们对肿瘤认识逐步加强，以及新型抗肿瘤药物的不断问世，化疗在肿瘤治疗中的地位正逐步提高，成为许多肿瘤的主要治疗手段，但系统化疗存在全身药物的再分布，同时药物缺乏对病变部位的特异亲和性，当用药剂量很大时才能在靶部位产生较高的局部浓度，但大剂量抗癌药可对正常组织产生非特异毒副作用，产生肝肾损害、骨髓抑制、胃肠道反应等多种毒副作用。药物靶向治疗可在一定程度上解决这些问题，使靶部位的药物浓度明显提高，可减少用药量，使治疗费用下降，明显降低药物对全身的毒副作用。
胃癌相关抗原MG7-Ag是目前研究中一个最有前景的胃癌靶向诊断和治疗的肿瘤标记物，主要分布在癌细胞的胞浆内或胞膜上，也可分布于癌腺腔内或癌细胞周围的黏液物质中，不出现在血液中，具有很高的特异性，在健康人和良性疾病几乎不表达，在胃癌组织中高表达，对胃癌有很高的诊断与治疗价值，因此MG7抗体是一个很有前景的胃癌靶向诊断和治疗的肿瘤标记物。
紫杉醇是国际上公认为首选的抗癌药物，为治疗效果好、广谱性强、副作用相对小、作用机制全新的一种一线抗癌药物，但因明显剂量相关的骨髓抑制和神经损害等副作用制约其大剂量应用。
MG7抗体靶向紫杉醇纳米药物为中山大学化学与化工学院首次自行合成的纳米载体药物，即把胃癌细胞的单克隆单链抗体（MG7-Ab）与抗癌药紫杉醇负载到同一个纳米体系中，从而提高治疗胃癌的靶向性与紫杉醇的抗癌效应。作为载体纳米颗粒是一种多功能复合纳米粒子，具有表面亲水、内部疏水的独特壳－核结构，其亲水性的外壳使颗粒能够高度分散于机体水溶性内环境并随血液循环传输到特定部位，而其疏水性内核则可以充当疏水性药物控制释放的“纳米药库”［5］，使纳米颗粒成为具有优良的传输性能，选择性到达并定位于肿瘤靶区，使药物以受控的方式从载体中释放，然后在肿瘤组织的细胞或亚细胞水平上发挥药效作用，同时减少药物与正常组织或细胞的接触，明显减少毒性副作用［6］。
以人胃癌裸鼠作为动物模型，通过尾静脉注射MG7抗体靶向紫杉醇纳米药物，该组肿瘤生长速度较其它各组明显减慢，体积抑瘤率和瘤质量抑瘤率高达84.6%和84.5%，而紫杉醇常规药物组体积抑瘤率和瘤质量抑瘤率分别为38.7%和42.2%，和MG7抗体靶向紫杉醇纳米药物比较，差异有显著性（P值分别为0.0165，0.0197）,MG7抗体靶向紫杉醇纳米药物抗肿瘤效果显著高于目前临床上常用的紫杉醇注射组，在实验期间MG7抗体靶向紫杉醇纳米药物组体质量与其它各组相比较平稳，且饮食活动正常，而紫杉醇常规药物组与非靶向紫杉醇纳米药物组体质量下降较明显，可见MG7抗体与紫杉醇负载到同一纳米体系中后，其药物毒性明显降价，并具有高效的肿瘤靶向性，从而提高疗效和减少药物的毒副作用。
MG7抗体靶向紫杉醇纳米药物可较强抑制胃腺癌细胞的增殖活性，同时降低药物的毒副作用，本实验也进一步证实了MG7抗体靶向紫杉醇纳米药物在体内抗肿瘤作用，为其应用于临床胃癌治疗提供必要理论依据，目前靶向纳米技术治疗肿瘤，国内外还处于起步阶段，但其作为一种新型抗肿瘤纳米药物载体显示了良好的应用前景。
参 考 文 献
［1］ 孙秀娣，牧人，周有尚，等.中国1990-1992年胃癌死亡调查分析.中华肿瘤杂志，2002，24：4-8.
［2］ 孙秀娣，牧人，周有尚，等.中国胃癌死亡率20年变化情况分析及其发展趋势预测.中华肿瘤杂志，2004，26：4-9.
［3］ Alexiou C,Schmid RJ,Jurgons R,et al.Targeting cancer cell:magnetic nanoparticles.Eur Biophys J,2006，35:446-450.
［4］ Abdollahi A,Hlatky L,Huber PE.Endostatin:the logic of antiangiogenic therapy.Drug Resist Updat,2005，8:59-74.
［5］ Norased Nasongkla, Erik Bey,Jimin Ren, et al. Multifunctional Polymeric Micelles as Cancer-Targeted, MRI-Ultrasensitive Drug Delivery Systems. Nano letters,2006,6（11）:2427-2430.
抗癌药物范文4
在通入氮气的保护条件下，在100mL两颈瓶中进行进行操作，再50mL乙醇中取0.75g（5mmol）对甲酰基苯甲酸充分溶解，然后加入0.86g（5mmol）苯磺酰肼，溶解充分后，再搅拌0.5h，再用二次水沉淀法，干燥，得到淡黄色固体苯腙1.2975g，产率达到85.4%。将0.23mL苯胺溶于水、乙醇、浓盐酸三者混合溶液中，其中有2mL水、2mL乙醇、0.65mL浓盐酸，在冰水水浴条件下，在1ml二次水中溶解0.175gNaNO2固体，完全溶解后逐滴将其加入到上述混合溶液中，搅拌15min，得到淡黄色的重氮苯溶液。在15ml吡啶溶解0.6g苯腙，充分溶解后，逐滴将其加入到上述淡黄色的重氮苯溶液中，反应温度控制在0℃，反应6h，得到红棕色的溶液，用乙酸乙酯对该溶液进行4次萃取，每次取10ml，分离得到有机相，之后再加入120ml3MHCl进行萃取分层，取上层的有机层，通过过滤、真空干燥得到0.206g粉红色的固体，产率达到39.4%。
2.四臂的聚乙二醇的四唑衍生物（PEG-4-Tet）的合成
在通氮气的保护下，将0.216g四唑充分溶解于15ml二氯甲烷中，然后加入120mgDCC，充分搅拌15min。将10K，0.5gPEG溶解于2mL二氯甲烷中，然后加到上述四唑溶液中，混合搅拌10min后再加入10mgDMAP，充分反应24h，之后过滤，用冰乙醚沉淀，干燥后得到产物0.421g，产率为90.4%。
3.四臂的聚乙二醇甲基丙烯酸酯衍生物的合成
。在通入氮气的保护下，向25mL密封反应器中加入四臂聚乙二醇0.5g，120μL三乙胺Et3N，240μL甲基丙烯酸酐，4.9mgDMAP，10mL甲苯，将反应器密封好，置于70℃油浴中反应24h，之后用冰乙醚沉淀过滤，在常温下真空干燥得产物0.45g，产率为60.5%。
4.水凝胶的制备和流变分析
水凝胶按如下方法制备：分别将一定的PEG-4-Te（tDS81.6%）和PEG-4-MA溶于PB（200μL，pH7.4，10mM）中制备得到浓度分别为20wt%或30wt%的溶液，在室温下将两种溶液充分、均匀混合，置于波长365nm的紫外灯下，照射10min形成凝胶。通过使用遮光模板先盖住聚合物溶液，然后再用紫外光辐射可以制备得到设计图案的水凝胶，这些图案可以用荧光显微镜观察并拍照2]。采用RS6000流变仪（Thermo-Fisher，Germany），在37℃下Φ20mm的测试平台上进行流变分析操作。将PEG-Tet和PEG-MA的PB混合溶液加到测试平台上，然后在在液体表面滴加少量的油防止测试过程中水分的挥发。测试得到储能模量（G′）和损耗模量（G″）随时间变化的关系图。水凝胶的凝胶时间定义为从测试开始到G′=G″时所耗费的时间。
5.结果与讨论
抗癌药物范文5
河南省安阳市第六人民医院肿瘤内科，河南安阳 455000
[摘要] 目的 探讨采用电切除术联合抗肿瘤药物治疗膀胱癌的根治率。方法 对我院接收治疗的80例膀胱癌患者资料进行分析，医护人员根据患者入院时间顺序分为两组，每组有40例患者。对照组采用电切除术治疗，实验组采用电切除术联合抗肿瘤药物治疗，比较两组患者的根治率等指标。结果 实验中，实验组中有15例患者治疗效果较好，根治率达到37.5%；23例患者临床症状得到改善，治疗总有效率95%高于对照组（根治率为20%，治疗总有效率为85%）（P＜0.05）；实验组对我院治疗满意度达到95%高于对照组患者（P＜0.05）。结论 临床上，对膀胱癌患者采用电切除术联合抗肿瘤药物治疗效果较好，值得推广使用。
[
关键词 ] 电切除术；抗肿瘤药物；膀胱癌；根治率
[中图分类号] R4[文献标识码] A[文章编号] 1672-5654（2014）05（c）-0017-02
Electricity for bladder cancer resection and radical resection rate of antitumordrug treatment
ZHANG Bo
Anyang Sixth People´s Hospital of Henan Province,Anyang455000, China
[Abstract] Objective To investigate the cure rate by electric resection combined with anticancer drugs for the treatment of bladder cancer. MethodsOur hospital receiving treatment in 80 cases of bladder cancer were analyzed, the medical staff according to the admission time were divided into two groups, each group has 40 patients. The control group using transurethral resection treatment, experimental group uses electric resection combined withanti tumor drug therapy, compared two groups of patients with radical resectionrate.Results In the experiment, 15 patients have good therapeutic effect in the experimental group, the cure rate reached 37.5%; the clinical symptoms of 23 patients were improved, the total efficiency of treatment was 95% higher than that of the control group (cure rate was 20%, the total effective rate was 85%) (P<0.05); the experiment group in our hospital treatment satisfaction 95% higher than that of the control group patients (P<0.05).Conclusion Clinically, patients with bladder cancer by transurethral resectioncombined with anti tumor drug treatment is effective, is worthy to be popularized.
[Key words] Resection; Antitumor drug; Bladder cancer; Radical resection rate
膀胱癌在临床上比较常见，这种疾病机制十分复杂，且在中、老年患者中发病率较高（患者年龄多在40岁以上）[1]。目前，临床上对于这种疾病的治疗还没有有效的方法，一方面膀胱癌患者发病时症状不明显，另一方面医护人员对膀胱癌相关知识认识不足，延误了最佳手术治疗时间，给患者带来很大痛苦[2]。为了探讨采用电切除术联合抗肿瘤药物治疗膀胱癌的根治率。对我院自2011年l月—2013年10月接收治疗的80例膀胱癌患者资料进行分析，分析报道如下。
1资料与方法
1.1一般资料
对我院自2011年l月—2013年10月接收治疗的80例膀胱癌患者资料进行分析，医护人员根据患者入院时间顺序分为两组，每组有40例患者。实验中，男性47例，女性33例，患者年龄在39~84岁，他们的平均年龄为（48.4±1.5）岁。患者中，15例患者位于膀胱三角，25例患者位于侧壁，40例患者位于前壁，两组患者年龄、入院时间等资料经分析指标间没有统计学意义（P>0.05）。
1.2治疗方法
患者入院后，医护人员对患者进行常规检查，如患者的心肺功能、体温等。对照组采用电切除术治疗，实验组采用电切除术联合抗肿瘤药物治疗，具体方法如下。
医护人员根据患者实际情况进行电切除手术，当手术成功后，患者开始联合抗肿瘤药物进行化疗，首先帮患者安置常规导尿，放出残余尿，并让患者平卧20 min[3]。然后，开始使用抗肿瘤药物，患者每次用丝裂霉素（湖北拓楚慷元医药化工有限公司）20 mg或重组人白介素-Ⅱ（山东阿华生物药业有限公司，国药准字S20030017）50万单位，后交替应用（第一年每两周一次共三个月）然后对膀胱镜进行复查。第二年每两月一次，6个月复查一次。如复查发现肿瘤复发，再次电切，并重新开始化疗[4]。
1.3疗效标准
痊愈：患者临床症状完全消失，患者能够自理生活；显效：患者临床症状有所改善，患者能够进行简单运动；有效：患者临床症状基本消失，患者需卧床休息；无效：患者临床症状没有变化甚至有加重迹象。
1.4统计学处理方法
所有数据均采用spss 10.0统计软件进行统计分析，计量资料以均数±标准差（x±s）表示，采用t检验，计数资料采用χ2检验，P<0.05表明差异具有统计学意义。
2结果
实验中，实验组中有15例患者治疗效果较好，患者治疗后根治，根治率达到37.5%；23例患者临床症状得到改善，总有效率95%高于对照组（根治率为20%，治疗总有效率为85%）（P＜0.05）；实验组有38例对我院治疗比较满意，满意度达到95%高于对照组患者（P＜0.05），见表1。
3讨论
膀胱癌是我国消化道中发病率较高的肿瘤之一，它主要位于人体膀胱附近，患者患病后临床上病没有特异性症状，多数患者确诊后已经是中、晚期，给患者带来很大的痛苦[5]。目前，临床上对于膀胱癌的治疗主要采用手术治疗为主，但是这些治疗方法效果不明显，容易反复发作，使得患者手术后生活质量会受到严重的影响。
叶敏等[6]人曾经做了一项实验，实验中对60例膀胱癌患者进行实验，实验结果显示：电切除术联合抗肿瘤药物在患者中治疗效果较好，能够有效的改善患者症状[7]。临床上，为了有效的提高根治率，膀胱癌患者在采用电切除术后可以联合瘤药物进行治疗，由于肿瘤药物能够有效的抑制癌细胞DNA的复制，从而抑制癌细胞的分裂。临床上，常用的肿瘤药物有丝裂霉素和重组人白介素-Ⅱ等，由于丝裂霉素属于周期非特异性药物，适用于各期膀胱癌患者。而重组人白介素-Ⅱ则能够杀死肿瘤细胞，抑制癌症复发，并且还能够有效的增加宿主抗肿瘤的免疫力。临床上将这两抗肿瘤药物有协同使用可增加抗肿瘤能力，提高临床膀胱癌患者的根治率[8]。实验中，实验组中有15例患者治疗效果较好，患者治疗后根治，根治率达到37.5%；治疗总有效率95%高于对照组（根治率为20%，治疗总有效率为85%）（P＜0.05）。但是，本次实验中还存在一些缺陷，首先，实验中参与的患者例数较少；其次，实验中多数患者会存在焦虑、烦躁心理，很多患者甚至不配合，都给实验结果带来很大的不足。
综上所述，临床上，对膀胱癌患者采用电切除术联合抗肿瘤药物治疗效果较好，能够有效的提高临床根治率，改善患者症状，减轻患者痛苦，值得推广使用。
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抗癌药物范文6
【摘要】
目的建立HIV-1 Tat蛋白结合Tar的抗HIV-1药物筛选模型用于抗HIV药物筛选。方法构建表达HIV-1 Tat 蛋白的真核表达质粒（pCDNA3.1(+)-Tat）和HIV-1 LTR-luc荧光素酶报告基因，采用脂质体转染法共转染HeLa细胞，荧光仪检测Tat蛋白促进荧光素酶在HeLa细胞内的表达情况，建立HIV-1Tat蛋白结合Tar的细胞模型，用于抗HIV-1 的药物筛选。以DRB（5，6- 二氯- 1- β- 呋核亚硝脲-苯并咪唑）为阳性对照，进行模型的建立及条件的优化。结果通过反复试验表明，目的基因和报告基因的配比、转染时培养液中小牛血清的含量、细胞浓度、转染前细胞状态以及药物作用时间的长短等对模型的稳定性和敏感性有影响。结论应用优化的细胞模型对文冠果、紫苏等浸提物进行筛选及结果的分析。
【关键词】 HIV-1 Tat LTR-Luc荧光素酶基因 艾滋药物筛选模型
Abstract:ObjectiveTo establish HIV-1 Tal binding to Tar model. MethodsHIV-1 Tat protein eukaryotic expression plasmid （pCDNA3.1(+)-Tat）and luciferase report gene HIV-1 LTR-luc(LTR-LUC) were constructed and transfected into HeLa cells with lipofectamine 2000. The expression of HIV-1 Tat protein in HeLa cells was detected with Iuminometer. HIV-1 Tat protein binding tar model for screening HIV-1 inhibitors was thereby constructed.Results The abstractions of Xanthoceras sorbifolia and Perilla frutescens and so on were detected and DRB(5，6-dichloro-1-β-D-robofuranosylbenzimidazole) was positive control. The stability of the model was tested and regulated. ConclusionThe repeated experiments indicate that the matching of purpose gene and report gene， the rate of new calf serum in medium during transfection ， density of the transfected cells， condition of the untransfected cells and the action time of drugs affect the stability and sensitivity of the model.
Key words:HIV-1 Tat; LTR-Luc luciferase gene; Model for screening
人类免疫缺陷病毒（HIV）是获得性免疫缺陷综合征（AIDS）的病原体；是一种逆转录RNA病毒，被称为“20世纪的瘟疫”，在全球广为传播，至今尚无根治药物。现已批准上市的药物（HIV蛋白酶、逆转录酶抑制剂）只能缓解病痛，价格昂贵、毒副作用大，病毒易产生变异性、耐药性，药效较差、抵消等［1，2］。因此，从艾滋病病毒的基础研究中寻找新的不易产生耐药性的靶点成为国内外研究热点。目前抗 HIV 药物的研究重点集中在逆转录酶、蛋白酶、整合酶及病毒吸附、融合等几个靶点。HIV反式激活因子(transactivator，Tat)作为HIV的调节蛋白，不仅可以通过反式激活效应调控病毒基因的复制与表达，还可以诱导细胞凋亡，激活静态T淋巴细胞，抑制免疫细胞的分化和增殖，有助于病毒的感染和体内传播，导致各种并发症等［3，4］。Tat 与反式激活效应区（trans- activator responseregion，TAR）RNA 相互作用，反式激活转录。Tat 和TAR 的结构具有高度保守性，使它成为寻找新的作用机制和不易产生耐药性的抗艾滋病药物的非常有吸引力的新靶点［5］。
Tat 基因编码蛋白可与HIV-1 病毒长末端重复序列（LTR）结合，以增加病毒所有基因转录率，也能在转录后促进病毒mRNA的翻译，导致病毒的复制增加［6］。本研究通过建立HIV-1 Tat 和LTR的结合，导致报告基因荧光素酶在细胞内的高表达，反映Tat 和LTR序列的有效结合，建立Tat的反式激活效应调控病毒基因的复制与表达模型，从而用于天然药物有效成分的筛选，具有简单、快速、微量、费用低廉、安全、不受P3实验室限制，不用同位素等特点，可为实验室建立抗HIV-1药物筛选模型提供借鉴与指导，具有较强的实践意义。
1 材料与方法
1.1 材料
HIV-1 Tat 蛋白的真核表达质粒pCDNA3.1(+)-Tat及报告基因 HIV-1 LTR-luc(LTR-LUC)由三峡大学分子生物学研究所构建保存。 HeLa细胞株由北京协和医科大学惠赠。Lipofectamine 2000、Opti-MEM培养液均为Invitrogen公司试剂，新生牛血清（NCS）为GIBCO公司产品。DMEM培养基、胰蛋白酶、底物Luciferin、阳性对照DRB，细胞裂解液1，2-diaminocylclohexane-N，N，N，N-tetraacetic acid，考马斯亮兰等药品均为Sigma公司产品。
1.2 方法
构建表达HIV-1 Tat 蛋白的真核表达质粒（pCDNA3.1(+)-Tat）、HIV-1 LTR-luc荧光素酶报告基因，采用脂质体转染法共转染HeLa细胞，荧光仪检测Tat蛋白在HeLa细胞内的表达情况，建立HIV-1Tat蛋白结合Tar的抗HIV-1的药物筛选模型。转染后的细胞加入对细胞毒性在20%以下的药物浓度，以DRB为阳性对照（Tat/Tar抑制剂，Mancebo et al.， 1997; Nekhai et al，1997），培养一定时间后收集细胞裂解液上清检测相对荧光值（RLU），考马斯亮兰（G-250）测定蛋白含量，在蛋白含量统一的条件下，药物对Tat蛋白表达的抑制作用表现为药物组与空白对照组RLU的差值。
1.2.1 HeLa细胞脂质体转染实验按 Lipo fectamine 2000的说明书进行操作：①转染前1天HeLa细胞以2×105cells/ml 浓度接种到24孔板，0.5 ml/孔，置37℃，5%CO2培养箱中培养过夜。②转染前1h对待转染细胞换等体积、新鲜、不含抗生素的DMEM培养液，置37℃，5%CO2培养箱中孵育1h。③DNA-Lipofectamine共沉淀物的制备：A：pCDNA3.1(+)-Tat与LTR-Luc的稀释与混合：pCDNA3.1(+)-Tat与LTR-Luc浓度均为0.1 μg/μl，二者按一定配比共同稀释入Opti-MEM培养液。B：Lipofectamine的稀释：用Opti-MEM根据需要稀释后于室温放置5 min。C：将制备好的A液与B液混合，缓缓抽打混匀，室温放置20 min。D：将C液缓缓加入待转染HeLa细胞中，混均，孵育4～6 h。E：弃上清液，换新鲜的完全DMEM培养液，孵育16～48 h。F：结果检测：弃上清液，加入一定量的细胞裂解液，收集细胞上清液加入相应的荧光酶底物，荧光仪检测RLU，并用考马斯亮兰（G-250）法测定蛋白含量。
1.2.2 HIV-1 Tat 蛋白结合Tar的抗HIV-1药物筛选模型的构建经以上实验建立方法后，进行药物筛选。具体方法为：“1.2.1”项③E步骤中换DMEM后，将对细胞抑制率在20%以下的不同梯度浓度的DRB及待测药物加入细胞中，继续孵育40 h，细胞裂解液裂解细胞，取上清液10 μl与底物luciferin100 μl，Sirius Berthold luminemeter 荧光仪检测结果。
1.2.3 HIV-1 Tat 蛋白结合Tar的抗HIV-1药物筛选模型的稳定性优化实验通过多次实验发现模型稳定性较差，药物抑制作用不显著。为此，对模型进行了诸多因素调试。具体方法为：DRB为阳性对照，以空白组为阴性对照，以文冠果种皮、紫苏浸提物的水溶物为待测药，设立3个复孔，3次重复实验，通过改变目的基因与报告基因的配比、转染时培养液中小牛血清的含量、转染后细胞接种数量（确定两种重组质粒配比后采用细胞培养瓶以3×105细胞/ml 浓度传代，6 ml/瓶）、药物含量、转染前细胞状态以及药物作用时间的长短等因素进行模型稳定性研究。
2 结果与分析
2.1 脂质体转染结果采用改变pCDNA3.1(+)-Tat与LTR-Luc的总含量及配比（如表1）进行转染HeLa细胞，以调节RLU值在104～106范围内，并检验两种重组质粒对转染过程的影响，进一步验证两种质粒构建的成功性。结果如图1所示。
从表1和图1可看出：①RLU值随着两种质粒总量的增加而显著增加，当两种质粒都为0（对照）时，RLU值极低，即：未转染；当两种质粒的含量达20 μl时，RLU值可达3×108，且随着LTR-Luc含量的降低而明显降低，但不由其决定，因为当LTR-Luc含量均为10 μl，而pCDNA3.1(+)-Tat的含量由10 μl变为0时，其RLU值降低了100倍，充分说明LTR-Luc的表达需要pCDNA3.1(+)-Tat刺激。②当pCDNA3.1(+)-Tat为3 μl，LTR-Luc为1ul时，RLU值为5459851可作为较佳的配比，初步建立模型。表1 pCDNA3.1(+)-Tat与LTR-Luc不同含量、不同配比转染HeLa细胞所得结果（略）
2.2 模型的稳定优化实验结果
2.2.1 初建模型加药筛选实验结果以pCDNA3.1(+)-Tat 3 μl，LTR-Luc1 μl转染HeLa细胞，加入文冠果、紫苏等浸提物，以DRB为阳性对照，加入对HeLa 细胞毒性在20%以下的药物浓度，结果如图2所示。
从图2可看出，文冠果等药物对Tat蛋白无明显抑制作用，部分药有促进作用，阳性对照DRB也无明显的抑制作用，经过重复实验，结果依然。
2.2.2 重组质粒的配比优化实验结果从上述结果可看出，pCDNA3.1(+)-Tat 3μl，LTR-Luc 1μl两种重组质粒的转染率高，Tat蛋白表达量高，可能导致了药物失效，为此，对两种质粒作梯度稀释后，进行拉丁方设计配比，所得RLU值如表2所示。
表2所得结果再次验证了表1中结果。其中a1b2，a2b2组合所得RLU值相对其它组合值较适中，对其进行药物筛选实验，同样加入对细胞毒性低于20%的药物浓度，经过重复实验，a2b2组合中药物作用效果显著，a1b1组合中不明显，表明转染率高低影响药物作用效果，进一步确定a2b2组合为优化质粒配比，即：pCDNA3.1(+)-Tat与LTR-Luc分别以0.017，0.001 7 μg/ml配比转染Hela细胞可以获得较高的Tat蛋白表达，且待测药物对其抑制作用灵敏，尤其阳性对照DRB表现出较为显著的抑制率。表2 pCDNA3.1(+)-Tat与LTR-Luc梯度稀释配比转染HeLa细胞所得RLU值（略）
表中a 表示质粒pCDNA3.1(+)-Tat ，其中a1为原液；a2为3倍稀释液；a3为9倍稀释液；a4为27倍稀释液；a5为0； b 表示 LTR-luc，其中b1为原液，b2为10倍稀释液，b3为30倍稀释液
2.2.3 转染时培养液中小牛血清（NCS）的含量对药物抑制作用的影响细胞转染过程中通常不加NCS，为使该模型能表现出较高的稳定性、重现性、敏感性，本实验对NCS的含量进行了试验，分别为不加NCS及NCS在培养基中占5%，10%3种情况，结果如表3及图3所示。
从表3及图3可看出，随着转染过程中NCS含量的升高，细胞转染率显著降低，当NCS含量为5%时，药物抑制率较为明显，故确定NCS用量为5%。
2.2.4 转染后细胞接种到24孔板的浓度对药物抑制作用的影响 确定了两种转染质粒的配比及转染过程中NCS含量关系，将24孔板转染转换为200 ml的细胞培养瓶直接转染后分传到24孔板，可简化操作，减少影响因素，适宜大批量药物筛选。培养瓶中以6×105cells/ml 浓度传代，6 ml/瓶，转染率与24孔板直接转染效果相当，略偏高，转染细胞均匀地传入24孔板后密度为3.5×105cells/ml，加药后细胞生长快，孵育15 h 培养基变黄，细胞长满24孔板，药物抑制率不明显或重现性差，故将转染前细胞密度降低为3×105cells/ml，并对转染后细胞分传入24孔板的浓度进行了梯度实验，结果如表4及图4所示。表3 转染过程中小牛血清（NCS）的含量对药物抑制作用的影响（略）
表4和图4所得结果显示：随着24孔板中细胞密度的减小，RLU值减小，药物抑制作用无明显变化。其中4倍、8倍稀释液RLU值较低，结果可信度小；不稀释或2倍稀释下RLU值较高，药物作用一致。故转染细胞可平均分传入两块24孔板，进行大批量药物筛选。表4 转染细胞分传密度对药物抑制作用的影响（略）
2.2.5 药物作用时间的影响对药物作用时间进行试验：12，24，48，60 h后分别检测结果，表明药物作用24～48 h检测结果较佳，作用40 h后，细胞约为90%，此时收集细胞检测结果最佳。
2.2.6 转染前细胞状态的影响转染前细胞状态好，转染率高，药物抑制率偏低；细胞状态正常，则药物抑制率重现性强。细胞状态差，转染率略低，药物抑制率重现性差；细胞状态较差，转染过程中细胞生长慢，加药后细胞收缩变小，但不凋落，结果检测时，RLU值仍在1 000～9 000，药物作用可信度低。故在进行转染前有必要调节细胞生长状态。
2.2.7 药物浓度的影响采用以上确定的最佳因素，对阳性对照DRB进行了浓度梯度抑制作用实验，如表5及图5所示。
表5及图5表明：随着DRB浓度的降低，RLU值降低，即：DRB对Tat蛋白的抑制作用降低，DRB的抑制作用与其剂量呈依赖性关系；进一步说明本模型构建成功，稳定性好、重现性强。另外，DRB对细胞毒性较大，在大于50 μmol/ml时，细胞部分死亡，随着其浓度的增加，细胞死亡数量增多。
3 讨论
艾滋病药物筛选暂无理想的动物模型，目前主要从细胞和分子水平上进行体外筛选［8］。王岱等［7］首次应用牛免疫缺陷病毒(BIV) 合胞体和BlV 长末端重复序列(LTR) 引导的荧光素酶(Luc) 基因，建立抗AIDS药物的筛选和评价模型。随着基因工程、生物化学和分子生物学及检测仪器的发展，该模型原理、机理方面得以深入研究，由HIV 取代BIV［9～12］，但对其建立方法等仅作简要介绍。本研究首次对该模型的实验室构建、模型优化等进行了全面、系统的研究，进一步完善了该模型，为抗HIV药物筛选积累资料。表5 药物浓度的影响实验（略）
经过优化建立的细胞模型，其结果表明：①目的基因与报告基因的配比起决定性作用，当两者含量过高时，Tat表达量大，药物几乎无抑制作用，以0.017，0.0017 μg/ml配比可以获得较高的Tat蛋白表达及显著的药物抑制作用；②以3×105细胞/ml，6 ml/瓶，转染后细胞分传入24孔板的浓度对药物抑制作用有一定的影响，但不起主要作用，一瓶可分传两块板；③转染前细胞状态对药物敏感性有一定影响，故转染前调节细胞生长状态，尽量使细胞生长均匀、形态正常。④转染过程中小牛血清含量越低，转染率越高，当含量为5%时，转染率高且药物敏感性显著；⑤药物作用40 h 后检测结果较佳。
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