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平平淡淡简单的幸福范文1
关键词:残留试剂;电化学发光;人附睾蛋白4
罗氏Cobas e601全自动电化学发光免疫分析仪,具有高灵敏度、高特异性、高亲和力、高准确度、线性范围宽、自动化程度高、无放射性污染、操作简便快速、试剂保存期长、应用范围广等优点,是目前最先进的标记免疫测定技术,具有广阔的应用前景[1]。试剂为原装进口,成本较高,每瓶试剂条码记录为100人份。经日常统计,当完成100人次检测后,试剂盒约有15%~25%的残留试剂,若有效回收利用,可明显降低试剂成本。本研究以肿瘤标志物HE4着手,在保证标本检验质量的前提下,探讨肿瘤标记物残留试剂回收利用的可能性。
1 资料与方法
1.1 一般资料 本院2013年6月门诊体检者新鲜血清(样本无溶血、无黄疸、无脂血),混合后分装20°C冷冻保存。
1.2 仪器与试剂 德国Roche公司Cobas 6000全自动生化免疫分析模组中e601全自动免疫检测模块。标准品、质控品Roche原装配套。检测试剂为同批次有效期内、开启10d内的原装残留试剂拼装混合而成,3~4盒残留试剂可拼装一盒。方法是将三联瓶中M瓶:链霉亲和素包被的顺磁性微粒(白盖)、R1:生物素化的抗HE4单克隆抗体(灰盖)和R2:非同位金属三联吡啶钌+标记的抗HE4单克隆抗体(黑盖)充分混匀后分别集中于一个试剂盒的3个对应瓶中,组成一盒拼装试剂。使用前置4℃冰箱冷藏,消泡后装载上机,可避免试剂屏蔽。
1.3 方法 按照标准操作程序对仪器进行常规保养和维护,拼装试剂上机使用时须做通用肿瘤标志物质控(2个浓度水平),确保质控在控后进行标本检测。
1.3.1 精密度验证 批内精密度试验:①参考美国临床和实验室标准组织(CLSI)EP5-A2],选取2个水平的质控血清(TM1、TM2)作为批内和批间精密度的待测标本,用原装试剂和拼装试剂分别连续重复检测20次。计算平均值、SD和CV;②批间精密度试验:选择TM1、TM2 2个浓度的质控品,测定1次/d,用原装试剂和拼装试剂分别连续测定20d,计算平均值、SD和CV。通过实验得到估计的批内标准差(S批内)和批间标准差(S批间)。并与厂家声明的不精密度进行比较。根据CLIA'88要求,批内精密度应≤1/4TEa,批间精密度应≤1/3TEa。
1.3.2 准确度验证验证 参考CLSI EP5-A2文件,先用HE4校准品(Lot:168118浓度分别为:4.1pmol/L、196.0pmol/L)对检测系统进行校准;再用校准品对原装试剂和拼装试剂分别进行检测,对各自检测结果与靶值进行比对,计算检测值与靶值的相对偏倚,计算公式:Bias=(测定值-靶值)/×靶值%
1.3.3分析测量范围验证 参考CLSI EP6-A3文件,分别收集HE4浓度接近厂商声明的线性范围下限和上限的低值样本(L)和高值样本(H),按L、0.75L+0.25H、0.5L+0.5H、0.25L+0.75H、H混合,配制成系列浓度实验样本,用拼装试剂对每个浓度重复测量2次。在重复测量误差符合实验要求的条件下,数据在SPSS13.0软件上进行多项式回归分析,判断实验所涉及的浓度范围内是否为线性。当实验数据为非线性时,计算线性偏离。若每个浓度点的线性偏离小于线性允许误差,则实验所涉及的浓度范围即为线性范围。本研究设定重复误差≤5%,线性偏差≤10%为可接受的判断标准。
1.3.4 生物参考区间验证 采集在本院体检者(血液生化、心电图和B超检测均正常)空腹血清,用拼装试剂按标准操作程序进行样本检测,要求20个检测数据只允许10%数据在给定的生物参考区间之外,否则需要进行检测项目的生物参考区间建立。
2 结果
2.1 精密度验证结果 原装试剂和拼装试剂检测Roche 2个水平的质控血清(TM1、TM2),批内精密度与批间精密度检测结果均符合Roche公司声明。实测CV均
2.2 准确度验证结果 与标准品比较,原装试剂实验检测结果的相对偏差(SE%)为0~0.61%,SE%≤1/2CLIA'88允许总误差(TEa)为可接受。拼装试剂检测结果相对偏差为0~0.72%,也在允许范围之内(见表3)。
2.3 分析测量范围验证结果 对系列浓度样本检测结果和预期值进行多项式回归统计,预期值为X,实测值为Y,得直线方程Y=bX+a,即Y=1.0085+22.836,相关系数为0.9995,>0.975,线性理想。实测线性范围35.08pmol/L~1416.50 pmol/L;试剂盒线性范围15pmol/L~1500 pmol/L,符合厂商声明(见表4)。
2.4 生物参考区间验证结果 Roche公司提供的HE4试剂盒生物参考区间为0.00pmol/L~104.00 pmol/L ,拼装试剂检测20个健康人血清标本浓度范围在18.24pmol/L~65.15 pmol/L,验证结果均在仪器说明的参考区间内,该95%生物参考区间可以采用。
3 讨论
按照《医学实验室质量和能力的专用要求》(ISO15189)对医学实验师的认可标准,以及美国颁布的《临床实验室修正法案》( CLIA'88)、卫生部《三级综合医院评审标准实施细则》、《医学检验科管理规范》等文件的要求,凡引进和改变的检测系统用于常规检测之前,必须对其主要分析性能进行验证,提供相关的方法学验证实验数据,证实其能够达到临床检测所要求的标准[2~5]。
本研究显示,残留试剂检测HE4 Roche两个水平的质控血清CV批内精密度分别为0.82%、0.50%(未校准);批间精密度分别为1.16%、0.76%(未校准),符合厂商声明。且残留试剂与原装试剂的检测结果无统计学差异(P>0.05),说明残留试剂重复性良好。参考CLSI EP5-A2文件,用HE4校准品对残留拼装试剂分别进行准确度验证,相对偏差(SE%)为0~0.72%,SE%≤1/2CLIA'88允许总误差(TEa)为可接受,即重复性良好。对一个检验项目而言,其线性范围起码应该覆盖本项目的医学决定水平和常见疾病的检测值,实验中线性结果分析表明,相关系数>0.975,斜率接近1,截距小,各项重复测定结果相关性好,残留试剂检测标本可报告范围在本实验的高、低值范围内的线性理想。试验中各验证 均在给出的生物参考区间内,符合临床要求。
在工作中应注意到不同批次的HE4检测试剂,不能混合使用。因为试剂批号不同,试剂所含抗体的浓度及活性有所不同,二维条形码所包含的参数信息也不同。并且HE4试剂说明书中指出,未开封试剂可稳定到标明的保质期;试剂一旦开封,放置于2~8的环境中有效期为8~12w,试剂放置在e601分析仪上的有效期为6w。这是因为试剂开始使用后,由于温度变化、水分蒸发等不利因素,会引起试剂中包被的单克隆抗体活性减低[5],进而导致检测结果误差。为保证检验结果的准确性,残留试剂在妥善保存的情况下应在规定时限内尽快回收利用,使用前必须做两点定标和室内质控,保证检验质量。
对残留拼装试剂的各项分析性能的评价显示:残留试剂检测HE4的精密度、准确度、分析测量范围和生物参考区间均符合相关实验要求。说明回收的残留试剂性能稳定,质量可靠,同批次的残留试剂在规定时限内可拼装再利用,可有效降低检测成本。
参考文献:
[1]谭浩.电化学发光免疫分析系统E170的应用评价[J].实用预防医学,2011,18(3):527-528.
[2]张葵.定量检测系统方法学性能验证实验的基本方法[J].临床检验杂志,2009,27(5):321-323.
[3]U.S.Department of Health and Human Services,Centers for Medicare&Medicaid Services.Clinical laboratory improvement amendments of 1988:final rule[S].Fed Register,2003:3704.
[4]张茜,郭健.定量检测方法极限参数的评价[J].中华检验医学杂志,2009,32(8):949-952.
平平淡淡简单的幸福范文2
在真实的平淡的生活里,一切的甜言蜜语,一切的山盟海誓都显得有些多余。渴望听到这些话语的人也是有些糊涂的,毕竟生活的长度和山盟海誓的长度是不成比例的。只有平淡的生活才是真实的生活,只有真正的关怀和问候才是真实的爱。甜言蜜语是会过时的,山盟海誓也是到不了山的尽头,只有平淡生活里积累起来的情感才是不会过去的,长时间生活在一起的过程,是一段情感积累的过程,也是一段平淡累积的过程,可是就是在这些平淡的日子里,生活在一起的人积累起了越来越多的爱,越来越沉甸的关怀。他们的心中装着彼此的生活,也装着彼此的情感和牵挂。
原来我以为贫困的生活是不会有幸福可言的,生活在一起的人整天为了生计而奔波操劳,怎么可能会有幸福可言?他们在忙碌的生活中寻找的是生活的资本,寻找的是吃饭穿衣的资金,没有时间和心情去考虑幸福是怎么回事。可是现在我才发现只要彼此心里装着对方,即使是贫困的生活也能找到幸福的感觉。只要爱着彼此,一起辛苦一起劳累一起过着贫困的生活也是一种幸福,幸福和爱就是两个人一起经历风雨,经历贫穷,一起过着平淡而简单的生活。
前些天的在城市最繁华的市中心看到了一对推着小车,唱歌卖艺,讨钱生活的老夫妻,我的心感到一阵心酸和疼痛,好久没有这样的感觉了。但是这样相濡以沫的生活却是那么的让人感动。
早上吃早餐的时候,看着卖混沌的一对青年夫妻,感觉他们生活在一种幸福的感觉里,虽然生活并不是很好,但是一起经历有爱有关怀的日子,那就是一种幸福。他们没有舒适的生活环境,只是过着很普通的生活,平淡地过日子,可是彼此依靠在一起的日子却充满了暖暖的阳光和春意。
我的父亲母亲就是这样的人,他们彼此心里装着对方,彼此牵挂着,一起经历人生的每一次变故,一起面对生活中的每一次困难。一起迎来朝阳,一起送走晚霞。一起奔波在生活的边缘,一起为了家和家人而努力。对于他们而言,只要在一起,他们就找到了生活的依靠,他们是彼此心中的依靠,也是彼此生活的牵引者。
天下有许许多多的父亲母亲,他们相濡以沫,过着平淡的生活,却拥有幸福的源泉。他们把彼此看作是生活的伴侣,人生的同志。
生活很复杂,其实也可以很简单。人生不怕平淡的日子,只怕生活的感觉不真实。生活不怕困难的日子,只怕没有真情存在。拥有简单思想的人过着简单的生活就是一种幸福。然而思想一旦变得复杂起来,就不会满足于现实的生活,总是追求更高更好的生活层次,在情感上也想拥有得更多,这时生活的烦恼也会随之而来。生活得太好的人很难有一份纯粹的情感,即使生活在一起,也不能真心想着彼此。
生活不需要华丽的外衣,也不需要甜言蜜语,生活需要的是平平淡淡地过完每一天。生活就是两个人一起为生活里每一件事操心,奔忙,甚至是争吵。生活就是两个人一起在人生的艰难道路上相互搀扶,不计较结果,只在乎生活在一起的日子。
平平淡淡简单的幸福范文3
世人多喜欢喝茶,惯于从清香的茶中品出人生哲理,而我,却唯独钟爱于白开水。
白开水,透明纯洁,没有茶的芳香四溢,也没有咖啡的入口淳浓,却能够处世事之安康,人心之淡然。闲暇时品一杯淡淡的白开水,能让你顿感不再疲惫;浮躁时品一杯白开水,能让你心平气和。若你忙地满头大汗浑身发热,我想,你一定会从冰箱里拿出一瓶饮料解渴吧?因为冷是对付热的最好办法。然而我要说,且慢,若此时你品一杯淡淡的白开水,必能顿感馨香浓郁,神清气爽,不再口渴。你若能安静地品味它,或许还能感觉到一缕缕甘甜沁入心扉。
人生也有如白开水,求的是原汁原味。没有名扬立万,没有家财万贯,却有着非一般的和谐。没有大起大落,大涨大跌,只有平平淡淡,简简单单。人生,求的就是平凡,淡然。无需名利,一份简单的工作,一个温馨的小家,一群淡如水的朋友,就能让你无限幸福。你若能达到淡然一生的最好境界,那么,一片叶,一艘舟,一波水,一座山,一朵云,一棵草,都极有可能让你感觉到生命如夏花之绚烂。
人生也有如白开水,求的是真实。白开水是透明的,透过白开水你可以看到美丽的景象,人生也需这样。不需要任何多余的遮掩与逞强,想笑就笑,想哭就哭,不需要多做任何掩饰,只要将自己此刻内心的想法展现出来就好。
我口渴了。来到厨房,我看见了茶,咖啡,橙汁,还有白开水。我毫不犹豫地端起白开水,细细品味这漫漫岁月。
平平淡淡简单的幸福范文4
现在“爱”这个词已成为大众化。总会听见有人问,你爱我么?回答者也许会不假思索的说:“爱!”也许会略带迟疑的说:“爱!”如果问我会更偏爱哪种回答,我无法选择。第一种的不假思索并不是不经大脑的敷衍,而是觉得这样的问题已经不需要再深切的思考,因为爱已在心中。第二种的略带迟疑,并不是不爱,不确定,而是他想给问者一个真切,发自内心的答案。
但,不管怎么说,话都停留于表面。所以这两种答案都不是我想要的。
我觉得沉默才是最好的回答,因为爱不需要通过话来表达,用实际行动会比话语更令人心动。不注重于表面得到的往往会更珍贵。
生活就是这样,没有人会知道一个人的内心世界,爱是要付出代价的,现在的社会有两种爱:这第一种是那种轰轰烈烈的火爱;第二种是平平淡淡,真真切切的水爱。我偏于第二种,并不是为人的低调,而是内心世界渴求的清淡。
往往当我们沉浸于幸福中,时间久了,爱变味了,由甜蜜到苦涩。它慢慢的变成了借口。
慌了,接着是惋惜,最后分散。接着轮回。
腊梅的持之以恒是我羡慕的,但它那么伟大,我做不了它。我只愿自己是荒野中的野草,那份平凡的恒心,是我向往的。
幸福,一个多么简单的词,却让不少人痴死于此。争取,内心的骚动,让一颗平静的心不再稳定。
现在,只求不同,与别人不同,满足自己永不知足的心。只求微小的我发挥着作用。
不要因为你看见了许多社会的恶处,而不再相信还有希望的曙光,而不再相信有个地方叫天堂,社会就是你心里所想的是美好的,世界就会充满爱;而心里想的全是利益,肮脏的,那么世界就是是黑白的,社会就是灰色的。
平平淡淡简单的幸福范文5
今年的天气比起往年更恶劣,北方的冬天自有他的威严,今年对我们每个人更是个考验。妈妈每天至少四次的接送我。到家后妈妈给我做饭,给我辅导作业,给我精心的呵护。我有时候很叛逆,认为他们很唠叨,现在我真正体会到了父母真的不容易,看到妈妈穿着厚厚的棉衣,顶着寒风拉着我的手一步一步的艰难的走在我求学的路上,妈妈把全部的爱都倾注在我的身上。他们没有一句怨言这些风风雨雨日日夜夜,他们豪不放弃一直接送我。那是一个真实的事情,有一次在放学的路上,我看到一个三四十岁的女人艰难的骑着自行车,后面坐着一个中学二三年级左右的大哥哥坐在车后玩手机,好像他妈妈骑车的艰辛和那生锈快零散的自行车都与他无关。
我们都是被亲人们在手心中疼大的,在蜜罐里长大的,我们何尝能体会到父母的不易,妈妈年轻的容貌一去不返,爸爸宽厚强壮的肩膀不再有力。我们感受到了吗?我们关心吗?有一句话说的好,长怀感恩之心的人是幸福的,在我们不停的顶撞他们时,你会想到他们的感受吗?感恩这个词是普通的,说出这个词是简单的,立下决心要感恩是容易的,但真正做是困奶难的,真正心口如一是艰难的
这词看起来普普通通,平平淡淡却意义深远。
让我们怀有一颗感恩之心吧!让我们行动起来,真正体会“感恩”吧。
平平淡淡简单的幸福范文6
其实,我有想过:人的一生无非就是为了过得幸福和有意义。而在我的意识里,那所谓的幸福与意义,用俗话说就是金钱,权利和地位。拥有了这一切,就等于拥有了所有!可是,我同时也很矛盾,想来想去我还是不明白;那到底怎样才能拥有到这一切呢?通过努力?奋斗?争取?不,为什么我总是觉得在这个过程中缺少了点什么?而拥有了这一切之后又有什么意义?我迷惑不已……
现在的我,很简单,只想平平淡淡地过……也许是经历了许多事情后,学会了看开。在这往后的日子里,也许不会再有什么惊喜或欢乐,但绝不会后悔……一直以来,我都很羡慕武侠小说里的那些世外高人;他们看透了人间世俗,渴望平淡简单的生活,而隐居深山。无形中他们也感染了我,使我也有了这种渴望和向往。但是,在这里我要明确一点的是:我看透了人间世俗了吗?
昂头望向天际,一只老鹰划过,鸣叫了一声,仿佛回答了我的疑问;没看透。又好像是说看透了?……风,安静地也吹起了,从我耳边轻轻吹过,好像在感叹道:你不是世外高人!
对!我并不是什么高人,所以我还没有资格这么想。现在只属于妄想,可我却不愿这么认为。但不愿也好,不甘也罢,都不曾改变什么。有时候,有些事,不得不向现实低头。
我很自闭,从不自动;看着一些人总是聚在一起谈天伦地,打打闹闹……我就会很高傲,认为自己很成熟,认为他们是多么的无聊和幼稚……因此,我和他们隔绝开了。渐渐地我发觉我的这种态度,也是那么的天真和幼稚……因为我很孤独。
原来我所对人生的了解和感悟也不过如此,看来我所了解的和经历的是那么的少。一直以为自己做好自己的本份,就可以了……
前不久,我在图书馆里看了一本书。我很喜欢,记得里面有一段话是这样讲的:人生是什么?我们不知道!我们也可以不知道。但是,我们必须要知道:“人活着,不能没有意义,而它的意义不是看你做了多少?而是看你最后给世人留下了多少?也不是看你做了什么?而是看你最后给世人留下了什么?”