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形同陌路范文1
《悲伤逆流成河》读书心得
前言
我想,如果一切都不得选择,我们还会不会这样的快乐,曾经,每个人都有记忆中斑斓、苦痛的青春,如果那是一段埋葬的回忆,是否也还会常常被拾起?在这个被狂风吹打的季节,我读完了小四的《悲伤逆流成河》,看阳光大片大片从云层中喷涌而出,覆盖了城市所有的苍穹,看忧伤的灵魂撕裂过心间,独自跳着凌乱的舞步,那时候,太多的空白添满了悲伤,“生如夏花般绚烂,死如秋叶般静美”,泰戈尔曾经这样说过,生命到底是怎样的名词,该如何诠释,这也许是年轻的生命给我华美的嘱托。
关于易遥
读小四的文字,因为很干净,每一个人物都存在另一个遥远的世界,过着他们的生活,易遥是本书中我最喜欢的角色,我以一种把易遥当做我的心态,去读完这本书,幻想如果当时的场境是我,会怎么样,最终的回答是易遥很坚强,渴望得到一点点爱,对她来说,是莫大的力量,却因为害怕,因为太想一个人独自承受,却因为周围的肮脏拒绝,当一个人在弄堂门口哭的遍体鳞伤,她多么需要一个怀抱,满足,哪怕一点点的渴望,这样的女孩也许我们身边都会有,但她们永远很落寞,永远一个人,像易遥一样,她也许在家长,在很多人眼中的坏孩子,所承受的是孤单,寂寞,是没人懂的哀伤,没有爱,越是渴望欲是得不到,那份模糊的母爱,太朦胧,看不到,感受不到,父爱却将她拒之门外,无法靠近,爱是一种奢侈,华丽的奢侈,却有一种持续不断浇在她身上的东西,湿淋淋的仇恨,她曾经呐喊过,可是没有人听见。
内心撕裂的呐喊无人懂。
那些被唤醒的记忆沿着照片上发黄的每一张脸。
重新附上魂魄。
易遥是个孩子,哀伤的孩子,命运给予她的一直是她不能改变,也无法改变,她仅仅用她自己的单纯的方式,想法,一个人单枪匹马的面对,对她来说已经苍皇的世界,无论多么苦痛,她始终坚信,为了生存下去,也挺的过来,易遥在狭长的弄堂里接过一袋热牛奶,天天如此,那是她心里的寄托。
每个女生生命里,都有这样一个男孩子,他不属于爱情,可是,在离自己最近的距离,一定有他的位置,尽管不知道他什么时候会离开自己,成为另一个女孩子的王子。
这样的感情超越爱情,齐铭对于易遥来说,是超越爱情的存在,很伟大,很伟大……
易遥想过自生自灭,对于她,世界安静的一片弦音。
为了保护自己长出尖锐的刺,可是还是不能让自已幸福。一遍遍受伤,一遍遍失望,还继续渴望,不断的循环,又因为太倔强。悲剧会发生,这也是因为她的性格,不懂得怎么去保护自己。
最终,她选择了离开,因为所有人的不相信,因为齐铭和顾森西的不相信,打破了她内心最大的承受,寄托,没有寄托,也许没有了活下去的希望,曾经在一起守护秘密的人,就这么朝着世界的另一个方向,走远了,轻易的丢下一句:“我不想再见到你”,曾经守护过她的人,也冷冷的丢下一句:“我就是恨不得你替我姐姐去死”,巨大的悲伤汹涌的占据了她的全部。
当她张开口躺在血泊中的,所有的一切都破碎了,那些曾经用巨大勇气筑成的薄纱,那些含着爱,含着恨,含着悲伤的城墙,轰然倒塌,闭上眼的一瞬间,是放逐还解脱,这个黑暗的世界再也看不到,不用再用力的去承受一切,不用在用力的忍住眼泪。
到底是这个世界对不起她,还她对不起这个世界,我迷惑了,或许这两者之间,根本就没有界限。
远方的风景,那些记忆的破碎一片片涌上心头。
也许,对于易遥来说。
一切都只像是梦,醒了,一切灰飞烟灭。
关于齐铭
一个乖孩子,有着爱他的家庭,他爱的生活,和易遥相比,齐铭的幸福太远也太多。
却也因为有齐铭,易遥的黑暗有人分担,因为有齐铭,易遥不会孤单的哭,不会一个人承受太多,有了齐铭,易遥还会笑,尽管几率很小。
在你的身边,总有一个这样守卫你的人,你们不是太亲近,你们可以沉默不语,但他始终守卫着你,从未离开,他会默默的关心你。
这就是齐铭。
为了易遥,义无反顾的齐铭。
这远是超越爱情的存在。
齐铭说:“甚至有一天,她已经完全被旋涡吞噬”。连同她自己本身,也已经变成了那个巨大的黑色旋涡。
齐铭这样存在着,就又莫然的离开。
关于顾森西
一直,一直,陪在易遥身边的顾森西,他也同样给了易遥最安全的保护,在易遥难过的时候。
倘若你的身边有个一直不知疲倦陪着你的人时,那时个是很幸福的。
他在乎易遥,想着易遥,这是一种本能,也许吧。
他最爱姐姐,因为姐姐是对他最好的人。对易遥,因为他勇敢,敢于把易遥拉出来,去面对一切,顾森西在现实面前,你是最真实的。
这就是顾森西,他懂情,懂责任。
他是故事中最坚强的人,一直存在,从未离开。
关于唐小米
从头到尾,唐小米一直是专害易遥的,易遥是她的眼中钉,肉中刺。
唐小米本身没有错,只要她爱的方式错了,爱要为爱付出代价,就是这样。
有一种东西,你愿意为了它舍弃一切,你愿意为它背负世人的骂名,甚至愿用生命去交换,它就是“情”。
唐小米可以为了“情”不择手段,可以为了“情”丧失善良的本性,我不知道这是不是人性的泯灭?
但我清楚,她敢爱敢恨,这是好的性格。
那么如果换作其他人,是不是也就不会不择手段得到“情”?
原来人性,在内心深处,在你的生活……
关于结局
易遥死了,齐铭死了,顾森西也死了,如花般的生命却最终选择了离开,在黑暗的夜里陌然走远,来不及挽留,也来不及叹息,这也终是结局。
生命也许本就该如此,如此脆弱,不过是世俗与性格为他塑了虚无的外壳,终究无法承受,还是逃不过破裂,本该如此。
因为他们是青春,还太小,却承载了世界上太多他们这个年龄不该承载的东西,最终单薄的力量还是抗不下来,所以选择逃避,便成了永远离开,用单纯的眼光去看这个世俗的世界会是怎样?
用小四的话来说:“本该是以一个端点放出的射线,却因方向不同,最终,形同陌路,渐行渐远……”
形同陌路范文2
一路跌跌撞撞。
一路吵吵闹闹。
一路分分合合。
我累了,如今只想一个人,冷冷清清。
[⒉]
猜不透的永远是人心,看不懂的永远是感情。
我如此用心的经营我的一切,小心翼翼,结果最后才发现,没有那个必要。
我可以做得很洒脱,当做你从不曾出现在我的生命里。
只是回忆,还不断在旋转。
只是,还是会不受控制,回想过去。
[⒊]
也许是我变了,那个曾经单纯的女子走远了。
我变了,我承认。不再相信你所谓的永远。
[⒊]
看不透,永远看不透你善变的心。
为什么前一刻说着永厮守,后一刻转身远走。
我知道你不会难过,至少,不会为我难过。
〈⒋〉
我把所有的人分门别类。对不起,以后,你在陌生人行列。
分手不是谁的错,不适合是个失败的借口,不如直接说,你早已厌烦我。
〈⒌〉
我会伤心,会难过,但只会是一阵子。你只是个过客,不是归人。
有谁会傻到为一个过客惦念一生。
我是个决绝的女子,一直如此。
〈⒍〉
我不会问你,到底曾经有没有爱过我。
这种问题没有价值。
既然知道是曾经,问了又如何,至少我知道,现在,你已经不爱了。
[⒎]
结局后才明白,原来,是自己想的太完美。
永远不要和一个轻狂的少年说永远。
你要离开,我知道很简单。
我要放开,你不知道放开后的日子有多难捱。
但时间永远是一剂良药,再难捱,总会捱过去。
我知道,我很快会恢复。
形同陌路范文3
1、【第一季】:10 姐姐大人(御坂美琴)、11 妹妹们(sisters)、12 绝对能力(level 6)、13 一方通行(Accelerator)、14 最强VS最弱(一方与当麻战斗)、19 最终之作(Last Order)与最终之作相遇、20 最终信号(Virus Code) 为救最终之作受伤、24 虚数学区·五型机关 没有说话最后有住院的镜头。
2、【第二季】:06残骸(Remnant)13:20左右只有约1分钟,与最终之作在浴室洗澡、07坐标移动(Move point)17:40左右只有2分到3分钟, 虐结标、17 惩罚游戏、18 检体番号、19木原数多、20猎犬部队 工场内战斗、21学习装置 发动地球自转炮 发现学园都市上层下令回收最终之作、22天罚术式 爆黑翼 杀木原数多、23开战之前 加入Group、24武装集团 对Skill out,杀驹场利德,救御坂美玲。
(来源:文章屋网 )
形同陌路范文4
【关键词】 内皮细胞
关键词: 内皮细胞;体外模型;牛血清白蛋白;血迷路屏障;豚鼠
摘 要:目的 研究豚鼠血迷路屏障通透性体外模型的建立方法及其通透性特征. 方法 ①用组织块贴壁培养法分离培养豚鼠耳蜗微血管内皮细胞,免疫组化法进行鉴定;②用小池技术建立起内皮细胞通透性的体外模型,并研究该模型中耳蜗、脑及肺3种内皮细胞对125 I-牛血清白蛋白的通透性;③研究豚鼠血迷路屏障对125 I-牛血清白蛋白的通透性. 结果 ①培养细胞致密融合时具有内皮细胞培养时典型的“铺路石样”外观,经免疫组化检测其内皮细胞标志性抗原Ⅷ因子,95%以上的培养细胞的胞质中呈棕黄色阳性反应;②耳蜗、脑及肺3种内皮细胞的体外模型中加入125 I-牛血清白蛋白后,贝克-时间变化图均呈抛物线型上升曲线,90min内几乎呈直线;③豚鼠血迷路屏障对125 I-牛血清白蛋白的通透性曲线与体外模型相似. 结论 血迷路屏障的体外模型能大体反映在体时的通透性特征.
Keywords:endothelial cell;model in vitro;bovine serum al-bum;blood labyrinth barrier;guinea pig
Abstract:AIM To study the method of setting up model in vitro for the permeability of blood labyrinth barrier from guinea pigs and the model’s permeability.METHODS ①Cochlear microvascular endothelial cells(CMEC)from guinea pigs were isolated and cultured by tissue nubbles culti-vation and were identified with immunohistochemical test,and the model in vitro for the permeability of CMEC was es-tablished using small pool technique;②Researched the model’s permeability on radioiodinated125 I bovine serum al-bum(RISA);③Studied the permeability on RISA of blood labyrinth barrier from guinea pigs in vivo.RESULTS ①The monolayer confluent cells showed typical“flagstone”ap-pearance as cultured endothelial cells,according to immuno-histochemical detection of factor VIII,which is the mark antigen of endothelial cell,over95%cells were observed the positive reaction with cytoplasmic buffy pigsmenting;②Af-ter RISA administration,the Bake-time curve of the model took on an ascending parabola,while within90min appeared like a straight line;③Permeability curve on RISA of the model in vitro simillar to that of blood labyrinth barrier in vivo.CONCLUSION The model in vitro of blood labyrinth barrier reveals the permeability of in vivo.
0 引言
血迷路屏障的作用在于保持迷路液成分的稳定,从而保证内耳行使正常生理功能,同时其通透性异常也是某些内耳疾病发病机制的重要环节,因此,研究血迷路屏障的通透性的调控机制具有重要的临床意义.但是,截止目前在活体动物上开展的相关研究工作中,尚未能取得有意义的进展[1] .耳蜗血管纹等特定部位的微血管内皮细胞是构成血迷路屏障的基础,本研究在分离培养豚鼠耳蜗微血管内皮细胞的基础上,建立起了该屏障通透性的体外模型,并将这一体外模型对125 I标记的牛血清白蛋白的通透性与肺和脑微血管内皮细胞,以及与活体动物的通透性进行了对照研究,为今后进一步探索血迷路屏障的体外调控机制打下了良好的基础.
1 材料和方法
1.1 材料 ①兔抗人八因子相关抗原(Ⅷ-R Ag)多克隆抗体试剂盒由北京中山生物技术有限公司生产.②Millicell,底部为多聚醋酸酯滤膜的培养碟,底面积为4.2cm2 ,微孔直径为0.4μm由Millipore公司生产,使用前滤膜上分别涂以醋酸鼠尾胶原和粘连蛋白(Roche)液.③碘化钠(Na125 I)购于中国核动力研究设计院第一研究所.将牛血清白蛋白溶于PBS中,加入氧化剂氯甘脲后注入Na125 I震荡、上柱、层析、分离,收集产品配成放射浓度为3.7MBq・mL-1 的工作液.
1.2 方法
1.2.1 豚鼠耳蜗微血管内皮细胞的分离培养及鉴定[2,3] 选取200g左右的正常杂色豚鼠10只,麻醉,断头,取出听泡,用750mL・L-1 乙醇浸泡5min,冲洗浸入D-Hanks液中,解剖显微镜下完整剥离出耳蜗外侧壁软组织,分离出含深素的血管纹,并将其切碎成0.5mm大小的微小组织块,均匀平铺于直径35mm的培养皿底.贴壁牢固后,向培养皿中加入含有250mL・L-1 胎牛血清(hyclone)的DMEM(hyclone)细胞培养液,置50mL・L-1 CO2 ,37℃培养箱中进行培养.发现有细胞自组织块边缘长出后,6d时刮除所有组织块.待细胞集落增殖到有足够数量后开始首次传代:D-Hanks液冲洗,2.5g・L-1 胰蛋白酶-0.1mL・L-1 EDTA细胞消化液(Sigma)消化,待大部分细胞脱壁后,含胎牛血清的培养液中止消化,将细胞悬液离心,弃去上清液后加血清培养液,接种于25mL的培养瓶中继续培养,细胞接种密度为(2~3)×105 ・cm-2 .
在细胞传代过程中,细胞消化后只留取贴壁较快的约3/4的培养细胞.细胞接种时,只留取约3/4的贴壁较快的细胞继续培养.每次传代后,倒置显微镜下用细胞擦刮去已贴壁的可疑杂细胞.前三代细胞传代时连续进行上述操作,对内皮细胞进行纯化.
培养皿底放入盖玻片,将纯化的培养细胞接种其中,待细胞到达合适密度后,40g・L-1 多聚甲醛固定,依次滴加过氧化物酶阻断液(30mL・L-1 H2 O2 ,甲醇配制),正常山羊血清,1∶100兔抗人Ⅷ因子多克隆抗体(一抗),生物素标记的1∶100二抗工作液(通用型IgG/Bio),辣根过氧化物酶标记的链霉卵白素1∶100工作液,然后用DAB显色液显色,封片观察.同时用大鼠肝细胞作阴性对照,用PBS代替Ⅷ因子抗体作空白性对照,其余步骤不变.
1.2.2 微血管内皮细胞通透性体外模型的构建 该模型由内池和外池两部分组成.内池为Millicell,外池为6孔培养板的培养孔.使用时将Millicell放入培养孔中,60 Co照射灭菌后,向内池中接种入内皮细 胞悬液(细胞密度5×104 ・cm-2 ),尔后向内、外池中加入血清培养液后置CO2 孵箱中培养,7~8d时,观察内皮细胞已完全形成致密融合的单层时,该系统即为内皮细胞通透性体外模型[4] ,待用.
1.2.3 体外模型对RISA的通透性 取待用模型,向内池和外池中分别加不含血清的DMEM培养液,同时向内池中加入RISA工作液3mL11.1MBq,放入50mL・L-1 CO2 ,37℃之培养箱中培养,分别于15,30,45,60,75,90,120和240min时从外池中取液5μL,及时检测其每分钟放射强度计数,计算出其放射活度值,绘制时间-通透性曲线[5] .
本研究分别用豚鼠脑微血管内皮细胞(按Diglio等[6] 的方法培养获得)、兔肺微血管内皮细胞(从APCC购买)及未接种细胞的Millicell滤膜作阳性、阴性和空白对照,样本数均为6.
1.2.4 豚鼠活体血迷路屏障对牛血清白蛋白-125 I的通透性 选取2mo龄,质量200~300g的正常杂色豚鼠48只,雌雄不限.全部动物用乌拉坦按1.5g・kg-1 的剂量ip麻醉,切开颈部皮肤显露颈静脉,按5.55MBq・kg-1 的剂量向静脉中注入RISA工作液,1,2,3,4,5,6,12和18h后随机抽取6只动物作为一组,断头,取出听泡,剪去听泡骨壁,钩破前庭窗并扩大,微量取样器吸出迷路液5μL,立即作每分钟放射强度计数,计算出放射活度值,绘制时间-通透性曲线[5] .
2 结果
2.1 培养细胞的形态学观察及鉴定 耳蜗血管纹组织块培养后2d,部分组织块边缘可见有细胞生长,10d以后增殖成数个较大的细胞集落.初期细胞呈梭形及多边形,其间夹杂着少数杂细胞,原代细胞经消化接种后,用台盼蓝排阻法鉴定细胞存活率约90%.
培养细胞纯化后,以多边形为主,7~8d形成致密融合的单层,呈现出内皮细胞培养时典型的“铺路石样”外观(Fig1).经免疫组化法检测其标志性抗原Ⅷ因子,95%以上的培养细胞胞质内有棕黄色着色,呈阳性反应(Fig2). 转贴于
2.2 内皮细胞通透性体外模型对RISA的通透性 观察Fig3,可发现曲线均呈上升趋势,经统计学(SSPS10.0软件)各种曲线拟合,均以二次曲线拟合最佳.同时前9min内上升几乎呈直线,可得到直线回归方程.经方差分析,实验组与阳性对照组相差显著(P
2.3 豚鼠血迷路屏障对RISA的通透性 观察分析该散点图,可发现呈抛物线型曲线,其中前6h内几乎呈直线上升,12h到达峰值,此后呈较快下降,提示该通透性曲线在6h内直线化上升,12h内则呈上升的双曲线,整条曲线则为3次抛物线,经统计学处理后能分别得到直线、双曲线及三次抛物线方程(Fig4).
图1 - 图4 略
3 讨论
自20世纪60年代,国外学者提出血迷路屏障的概念并被普遍接受以来,国内外对该屏障进行了大量研究,并取得一些进展.但由于受到在体(in vivo)研究技术手段的限制,均未能对其病理生理学进行更深入的探索,更无法利用调控其通透性的方法对这类内耳疾病进行防治,未能达到指导临床应用的目的.国外学者通过研究证实,血迷路屏障同血脑屏障等其他屏障系统一样,是以毛细血管内皮细胞及其连结为基础而构成的物质交换机制的集合,因此,研究血迷路屏障的关键是研究耳蜗微血管内皮细胞的通透性.近年来,由于活体组织毛细血管内皮细胞分离及培养技术的发展,通过获取体外培养的单层融合内皮细胞,一些器官血管内皮细胞通透性的体外模型不断建立成功,被多数学者广泛用于外周器官血管内皮细胞通透性和血脑屏障通透性的调控机制及药理学研究,并取得了许多重要进展[7] ,但迄今国内外尚未见耳蜗微血管内皮细胞通透性体外模型的研究报告[7] .
由于内耳结构复杂,豚鼠中毛细血管量少,所以取得耳蜗微血管内皮细胞有较大困难.在本研究中,作者应用显微解剖分离技术出耳蜗血管纹后,采用微小组织块贴壁培养法,再结合应用差别纯化技术,国内外首次成功分离培养了所需要的豚鼠耳蜗微血管内皮细胞[8] .分离纯化后的培养细胞,形态基本一致,多数呈多边形,单层融合状态下具有内皮细胞培养时典型的“铺路石”样外观,经免疫组化法鉴定,95%以上的细胞胞质中含有内皮细胞的标志性抗原Ⅷ因子,表明作者培养的细胞是基本纯净的豚鼠耳蜗微血管内皮细胞[9] .
在参照国外研究血脑屏障通透性体外模型技术方法的基础上[10] ,作者采用小池技术,将内皮细胞接种在经鼠尾胶原及粘连蛋白处理后的Millicell上,使细胞顺利贴壁,单层生长,底层滤膜经透明化处理后,能够对细胞生长及融合情况进行观察,满足了实验需要.该方法建立的内皮细胞通透性的体外模型,在对RISA通透性的研究中表明,耳蜗内皮细胞的通透性,大于脑灰质内皮细胞,但明显小于肺内皮细胞,这一结果与Juhn等[1] 在活体动物上的研究结论一致.同时,牛RISA在该CMEC通透性的体外模型中的通透性曲线,亦与其在动物血迷路屏障中的通透性曲线非常相似(12h内),都呈现先快后慢的上升型曲线,都能进行最佳的二次曲线拟合.另外,本研究中豚鼠血迷路屏障对牛RISA的通透性曲线,与以前该项研究中[9] 所得到的曲线基本相同,从而证明,本研究建立的耳蜗微血管内皮细胞通透性的体外模型,基本上反映了其在机体内的机能状态,适用于离体(in vitro)开展血迷路屏障的某些通透性研究.
参考文献
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形同陌路范文5
竟是无话可说,
原来形同陌路,
却思念至深。
如果我不告而别,
你是否会将我的点点滴滴
保留脑海?
思念越多,
眼泪越多,
心酸越多。
明明约定好,
相守到老,
你却悄然离去。
原来,原来,
这一切都是欺骗。
约定也好,
誓言也好,
形同陌路范文6
本书向读者提供了在纳米尺度工艺方法存在变化的情况下,适用于有变化意识设计方法和VLSI系统的计算机辅助设计(CAD)的工具。作者介绍了建模与分析的最新进展,内容集中在统计互连建模、统计寄生析取、考虑到空间相关的统计全芯片漏泄及动态功率分析、适用于大型整体互连及模拟/混合信号电路的统计分析与建模。本书向读者提供了有关VLSI系统统计建模及分析的系统全面的论述,内容集中在互连、单片功率网格和时钟网络,以及模拟/混合信号电路上。作者帮助芯片设计者了解他们设计工具的潜能与局限,改进他们的设计效率,描述了每一种算法分析以及它们在真实电路设计情境中的实际应用。本书还包括了用来量化分析与评估作者提供的算法的数值实例。
本书共有17 章,分成5个部分:第1部分 基础,含第1-2章:1.绪论;2.统计分析基础。第2部分 统计全芯片功率分析,含第3-7章:3.传统的统计漏功率分析方法;4.使用谱随机方法的随机漏功率分析;5.利用基于虚网格建模的线性统计漏泄分析;6.统计动态功率估算技术;7.统计总功率估算技术。第3部分 变化单片功率发送网络分析,含第8-10章:8.考虑到对数-正态漏电流变化的统计功率网格分析;9.利用随机广义克雷洛夫子空间方法的统计功率网格分析;10.利用变化子空间方法的统计功率网格分析。第4部分 统计互连建模与析取,含第11-13章:11.统计电容建模与析取;12.变化电容的增量析取;13.统计电感建模与析取。第5部分 统计模拟及输出分析和优化技术,含第14-17章:14.变化线性化模拟电路的性能限制分析;15.随机模拟失配分析;16.统计输出分析及优化;17.用于输出优化的电压分级技术。
本书可供微电子学专业的研究人员、研究生、工程师阅读借鉴。
胡光华,高级软件工程师
(原中国科学院物理学研究所)