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励志感人故事范文1
【摘要】
目的 探讨并优化人脐带间充质干细胞(hUCMSCs)体外获取及培养增殖的方法并鉴定；诱导其向成骨细胞和脂肪细胞分化，为其进一步应用奠定基础。方法 用酶消化法分离培养hUCMSCs，通过传代培养、扩增，倒置光学显微镜及原子力显微镜下观察细胞形态；MTT法检测细胞增殖曲线，流式细胞仪检测免疫表型；体外向成骨、脂肪方向诱导分化，并通过特异性染色鉴定其分化能力。结果 采用酶消化法能有效分离纯化hUCMSCs。接种24h，贴壁细胞形态多为长梭型、多边形或成纤维细胞样形态，大小均一。P3、P7代细胞的生长曲线基本一致，增殖能力强。流式细胞仪分析，第3代细胞强烈表达CD29、CD44、CD105，不表达CD34、CD45和HLADR。经成骨诱导分化后4周，碱性磷酸酶染色呈强阳性，茜素红染色可见明显钙结节；经成脂诱导3周，油红O染色呈阳性，有明显的脂滴出现。结论 本实验建立了一套体外稳定培养扩增hUCMSCs的方法。所培养的细胞成分单一、扩增迅速、生物学形状稳定，并能使其在体外诱导向成骨细胞和脂肪细胞分化，有望成为组织工程较为理想的种子细胞。
【关键词】 脐带；间充质干细胞；分化；成骨细胞；脂肪细胞
ABSTRACT: Objective To establish an optimized method to isolate， culture and identify human umbilical cord mesenchymal stem cells (hUCMSCs) in vitro and induce their osteogenic and adipogenic differentiation. Methods The hUCMSCs were isolated from human umbilical cord by digestion with collagenase. After serial subcultivation in vitro， the stem cells were passaged. Morphologic appearance of hUCMSCs was observed under an optical microscope and atomic force microscope. The proliferation rate was measured by MTT assay. Cell cycle and surface antigens were measured by flow cytometry. The osteogenic and adipogenic differentiation was tested and evaluated by specific staining methods. Results The isolation of hUCMSCs by digestion with collagenase was efficient. After seeded for 24 hours， the adherent cells showed spindle shape and fibroblast celllike shape and the size of hUCMSCs was homogeneous. The similar growth curves of passage 3 and 7 exhibited a great potential for proliferation. Flow cytometry analysis revealed that CD29， CD44 and CD105 were highly expressed on the surface of passages 3 cells， but the expression was negative for CD34， CD45 and HLADR. After culture in inducing medium， the cells were successfully induced into osteogenic and adipogenic lineages. These cells were highly positive for alkaline phosphate staining and also showed mineralization presented with von kossa staining after 4 weeks culture induction of osteogenic differentiation. Furthermore， liquid vacuoles were detected by oil red O staining after 3 weeks culture induction of adipogenic differentiation. Conclusion An in vitro method for isolation and purification of hUCMSCs from human umbilical cord has been established. The cultured cells were composed of only undifferentiated cells and their biological properties were stable. The hUCMSCs are expected to be a new type of stem cells of tissue engineering.
KEY WORDS: umbilical cord; mesenchymal stem cells (MSCs); differentiation; osteocyte; adipocyte
人脐带间充质干细胞(human umbilical cord mesenchymal stem cells， hUCMSCs)是一类具有自我更新、增殖和多向分化潜能的干细胞，具有来源丰富，易于采集、保存和运输，无异体排斥，避免伦理争议等诸多优点。大量研究表明，hUCMSCs具有多向分化潜能，在体内外可以分化为骨细胞、软骨细胞、肝细胞、心肌细胞、骨骼肌细胞以及神经元细胞等[1]。因此，其在组织工程、造血干细胞移植以及基因治疗等领域具有广阔的应用前景，成为干细胞研究的热点。本研究探讨hUCMSCs的体外分离、 纯化、扩增以及定向分化条件，为hUCMSCs在组织工程中的进一步应用提供理论依据和技术支持。
1 材料与方法
1.1 材料
Ⅱ型胶原酶(GIBCO，美国)；DMEM/F12培养基(HYCLONE，美国)；胎牛血清(HYCLONE，美国)；地塞米松、吲哚美辛、胰岛素、β甘油磷酸钠和抗坏血酸(Sigma，美国)。恒温恒湿培养箱(SHELLAB，美国)；倒置相差显微镜(Olympus，日本)；原子力显微镜(THERMO，美国)；流式细胞仪(Becton Dickinson，美国)；恒温摇床(哈尔滨市东明医疗仪器厂)；超净工作台(苏州净化设备厂)；培养瓶、培养皿、离心管(Corning，美国)。
1.2 方法
1.2.1 hUCMSCs的分离与培养
从手术台取正常足月产健康婴儿脐带组织(根据医院规定并经家属同意)，浸泡于DMEM中。超净台内取出脐带，DHanks平衡液充分洗涤残留的血液，去除脐静脉、脐动脉及脐带外膜，剥离Wharton胶，并将其剪碎至1mm×1mm×1mm大小组织块。将组织块移至1g/L的胶原酶Ⅱ中，加入少许DMEM，在37℃恒温震荡仪内消化，直至Wharton胶全部消化。将含细胞的消化液吸入无菌离心管，以30倍体积的DMEM反复吹打稀释，1500r/min离心10min，弃上清液，用含150mL/L FBS的DMEM/F12的培养基清洗，使细胞悬液均匀分布，转移至普通培养瓶中，在37℃、50mL/L CO2培养箱内培养。细胞贴壁后，第3天首次半量换液，弃去未贴壁细胞，以后每3～4d换液1次。倒置相差显微镜下观察。细胞达80%融合后，用1.25g/L的胰酶消化，按1∶2～1∶3的比例传代，续扩增培养。
1.2.2 细胞生长曲线的绘制
分别取P3、P7代对数期生长的hUCMSCs，胰酶消化，用含150mL/L胎牛血清的DMEM/F12悬浮，以4×104/mL的细胞密度接种于96孔培养板中，每孔200μL，每孔培养液的量均为1mL，从培养的次日起每天每组定时消化3孔行MTT法检测，酶标仪(BioRad，Model 550)读取490nm吸光度(A)值，绘制细胞生长曲线。
1.2.3 细胞表型的测定
用流式细胞仪对第3代MSCs表面特异性抗原进行检测。2.5g/L胰蛋白酶消化待检细胞，PBS洗涤3次，制成1×106/mL的细胞悬液。将待检细胞样品分为每管0.1mL，加入各类待测一抗，4℃孵育30min，加入荧光标记的二抗，4℃孵育30min，最后用100mL/L甲醛溶液固定细胞，用流式细胞仪测定各类抗原的阳性率。
1.2.4 体外多向诱导分化
以生长良好的第3代细胞为实验细胞。细胞经消化后调节密度为2×104个/mL，分别接种入12孔培养板和预置盖玻片的6孔培养板，24h后细胞完全贴壁，更换分化诱导培养基并分别设对照组。向成骨细胞诱导分化：以成骨诱导培养基培养(DMEM/F12培养基，100mL/L FBS、10-8mol/L地塞米松、10mmol/L β甘油磷酸钠和50mg/L抗坏血酸)，每3～4d全量换液1次，培养至第4周时行碱性磷酸酶钙钴法染色、钙茜素红染色。向脂肪细胞诱导分化：以成脂肪诱导培养基培养(DMEM/F12培养基，100mL/L FBS、地塞米松1μmol/L、胰岛素5u/mL、吲哚美辛0.5μmol/L)，每3～4d全量换液1次，培养至第21天时作油红“O”染色。
1.3 统计学方法
应用SPSS13.0统计学软件进行统计学分析。采用两因素的方差分析，P
2 结果
2.1 细胞形态学及生长特点
倒置显微镜下观察，原代接种24h即可见有少量细胞贴壁，外观呈纺锤形和多角形，并可见细胞核。培养至7d可见细胞数量开始增多，细胞形态为长而扁平的梭形，为典型的成纤维细胞形态(图1A)。培养至10d左右细胞汇合达到90%左右，细胞呈极性排列，集落呈漩涡状(图1B)。这时按1∶2传代，细胞传代后，贴壁速度增快，生长迅速；48h后，贴壁的细胞间可见有细胞集落形成，细胞大多呈长梭形，细胞核较大，数量也逐渐增多；3d后首次换液，5～7d左右细胞便铺满瓶底，融合成片，细胞排列较整齐，分布较均匀，生长较一致，杂细胞相对已较少可再次传代。原子力显微镜下可见，培养早期的MSCs多呈长梭形，细胞质与细胞核边界清晰，细胞体积很大，细胞长度超过100μm，细胞向四周延伸出数量不等的伪足样突起。对其局部结构观察发现，细胞边缘有较多的伪足，两端有鱼尾状或树枝状骨架，其形态较复杂(图2)。
2.2 hUCMSCs的生长曲线
hUCMSCs生长曲线呈S形，接种后第0～1天为潜伏适应期，从第2天起细胞开始增殖并进入对数生长期，第5天达到高峰，以后进入平台期。根据生长曲线可知hUCMSCs的群体倍增时间为26h(图3)。增殖曲线显示，P3、P7组间差异无统计学意义(P>0.05)，说明本实验中P3、P7代细胞增殖速率无明显差异。
2.3 细胞免疫表型分析
经流式细胞仪检测，hUCMSCs均一地高表达间质细胞标志CD29、CD44、CD105，不表达造血系标志CD34、CD45和人白细胞抗原HLADR(图4)。CD29为整合素家族中最重要的成员，是介导细胞与细胞外基质粘附作用的主要因子，参与细胞增殖、分化、凋亡等多种活动。CD44是分布极为广泛的细胞表面跨膜糖蛋白，其正常功能是作为受体识别透明质酸(HA)和胶原蛋白Ⅰ、Ⅳ等，主要参与细胞细胞，细胞基质之间的特异性粘连过程。CD34和CD45是造血干细胞阳性标记，HLADR为MHCⅡ类分子，其阴性表达说明细胞具有弱免疫原性，有利于异基因移植。本实验结果表明，脐带来源的MSCs与骨髓、脐血等其他组织来源的MSCs流式检测表型一致。
2.4 体外诱导分化检测
2.4.1 hUCMSCs成骨诱导的形态变化及功能鉴定
成骨诱导5d左右，细胞形态逐渐由长梭形变为方形、鳞片形、三角形或多角形等。高倍镜下可见细胞质内含颗粒样物质。第8天时，细胞外基质分泌增多，胞质中及胞质外均可见较多细小黑色颗粒，胞核颜色较淡，胞质色变深。3周时细胞生长密集，中央可见类似结节状的结构，部分细胞呈现层叠样生长。4周时可见局部由棕黑色细胞外基质沉积。
碱性磷酸酶染色可见，经诱导后的大多数细胞胞质中有浅棕色至棕黑色细小颗粒或大片状黑色沉淀，显示强阳性，符合成骨细胞的特征(图5)。茜素红染色后镜下可见细胞密集处有红色的沉着物，呈团样并向四周放射，中心颜色明显加深 (图6)。说明hUCMSCs在体外具有向成骨细胞分化的潜能。
2.4.2 hUCMSCs成脂诱导的形态变化及功能鉴定
成脂诱导5d左右，细胞形态逐渐由长梭形变为短梭形；在诱导约14d时细胞变为椭圆形、圆形；21d时胞质内可见脂滴形成，油红“O”染色呈强阳性(图7)。说明hUCMSCs在体外具有向脂肪细胞分化的潜能。
3 讨 论
间充质干细胞(mesenchymal stem cells， MSCs)是一类具有显著的自我更新和多向分化能力的细胞，他来源丰富，主要有骨髓、脐血、脐带、全身结缔组织和器官间质[24]。目前骨髓是实验和临床研究中MSCs的主要来源，但存在自身局限性。骨髓每106个细胞中含有1～10个干细胞，并且成人骨髓源MSCs的细胞数量及增殖分化潜能随供者年龄的增大而下降，病毒感染率较高，且供者MSC的采集须行骨髓穿刺术，来源受到限制[2]。脐血MSCs来源充足但MSCs分离效率低，限制了其在组织工程和细胞治疗中的广泛应用[5]。因此，有必要寻求组织工程种子细胞新的来源。
近年来，国内外学者对hUCMSCs进行研究并取得了一定成果。有研究表明，脐带中富含干细胞，平均每厘米脐带组织中含有4×105个[6]，远远高于骨髓中的含量。脐带间充质干细胞有望取代骨髓间充质干细胞成为组织工程中更为理想的种子细胞。因为其除具有取材方便、来源广、数量充足、增殖能力强、长期传代表型及增值能力不改变、分泌具有合适构成的细胞外基质等特点外，还具有以下优点：①采集脐带对产妇和新生儿没有任何危害及损伤；②干/祖细胞更原始，有更强的增殖分化能力；③免疫细胞较为幼稚，功能活性低，免疫功能不够成熟，处于一种缄默状态，不会触发免疫反应及引起移植物抗宿主病；④不会有肿瘤细胞、病毒和病原微生物的感染及传播几率也相对较低；⑤不涉及社会、伦理及法律方面的更多争议。
目前分离hUCMSCs的方法主要有酶消化法和组织块培养法。因为组织块培养法的原代培养时间为12～15d，培养时间较长，而采用胶原酶消化法可快速获得大量贴壁生长的MSCs，且操作简便易行，可更好地保持细胞活力，大大缩短了原代培养时间。因此，国内外大都采用酶消化法。袁源等[7]用1g/L的胶原酶Ⅳ，37℃持续搅拌消化30min，随即用1g/L的胰酶37℃持续搅拌消化30min；侯克东等[8]则是采用0.75g/L的胶原酶Ⅰ，在37℃磁力搅拌器作用下消化10～14h；PEREIRA等[9]采用3g/L的胶原酶Ⅰ，37℃磁力搅拌器作用下消化3h。文献报道通过胶原酶与透明质酸酶混合使用能够降低消化液的粘附及缩短消化时间，其中胶原酶Ⅱ消化能力较其他类型的胶原酶要强[1]。
本实验采用1g/L胶原酶Ⅱ，于37℃恒温震荡仪内消化分离人脐带MSCs，消化至Wharton胶全部消化，时间4～6h不等。消化过程中加适量的DMEM。消化完毕后采用100目的细胞筛过滤，离心后收集细胞接种于培养瓶。消化采用此种方法所培养的细胞在体外成集落样生长，细胞生长性状稳定，增殖速度快，贴壁时间短，贴壁细胞成活率高。
目前尚未明确hUCMSCs的特异性抗原标志，通常以细胞形态、流式细胞检测结果、多向分化潜能作为判断标准[10]。本研究分离纯化得到的脐带间充质干细胞具有贴壁生长的特性，形态类似成纤维细胞，流式细胞仪检测高表达间质细胞标志CD29、CD44、CD105，不表达造血系标志CD34、CD45和人白细胞抗原HLADR。经成骨和成脂诱导培养基诱导后，通过ALP染色以及茜素红染色证实分化为成骨细胞，通过油红O染色证实分化为脂肪细胞。因此，根据目前比较广泛的可被大多数研究者接受的鉴定标准，我们从人脐带中获取的这些细胞即是间充质干细胞。
综上所述，本实验建立了一套体外稳定培养扩增人脐带间充质干细胞的方法，所培养的细胞成分单一、扩增迅速、生物学性状稳定，并能使其在体外诱导向成骨细胞和脂肪细胞分化，为其进一步应用于组织工程和细胞治疗提供了实验依据。
参考文献
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[7]袁源，王媛丽，杨树源，等. 人脐带间质干细胞分离纯化及基本生物学特性研究 [J]. 青岛大学医学院学报， 2006， 42(2):120122.
[8]侯克东，许文静，张莉，等. 人脐带Wharton胶中间充质干细胞向软骨诱导的实验研究 [J]. 中华骨科杂志， 2007， 27(12):930935.
励志感人故事范文2
经市委、市政府研究同意，提高已故离休干部的无工作配偶的生活困难补助费标准。现将有关事项通知如下：
1.补助标准：
已故离休干部配偶有子女无工资收入的每人每月生活困难补助标准提高到130元；配偶无子女又无工资收入的，每人每月生活困难补助标准提高到170元。
2.补助时间：
自1994年10月起改按上述标准执行。
励志感人故事范文3
曲院长知道何晶是自己女儿是电视剧《产科医生》的第7集，《产科医生》是由东阳市花儿影视文化有限公司出品，该剧由李小平执导、张作民编剧，佟丽娅、王耀庆、徐百卉、巩峥、张小磊、施京明、朱锐、钱洁等人主演的现代时尚医疗职场电视剧。
该剧讲述了医术高明的海归医生肖程与实习医生何晶在既是名利场又是生死线的第一产科共同见证生与死，爱与责任，一起成长蜕变，从排斥到相爱的感人故事。2014年12月17日，《产科医生》在2014年国剧盛典中获得十佳电视剧称号。
该剧是一部医疗行业剧，行业剧是指拿掉人物生存的背景，“行业剧”的使命有其特性，要做到首先体现行业性，然后是角色的个性，最后抵达整体的人性描述，在这些层面上讲，《产科医生》的完成度非常高，表现出了行业的专业性，角色丰富的个性，还有人性——人性中最好的部分。
这是一部充满人文情怀的作品。当下许多80后、90后的年轻人已陆续为人父母，他们都会面临生育孩子的难题，在与医生打交道的时候也会碰到各种麻烦。这部剧不仅为年轻人普及了生育知识，也为他们提供了帮助。此外，剧中还体现了医生之间真实的职场关系，传递了正能量与励志的情怀。我相信这部剧必将创造新一轮的社会热点话题。
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励志感人故事范文4
关键词：移动互联网；励志微动画；创作策略研究
一、移动互联网语境下的微动画特征
（一）移动互联网孕育“微”艺术
移动互联网的发展使人们的生活方式发生巨大改变，社会进入以草根为代表的全民传播时代，微博、微信、微小说、微电影等众多“微艺术”应运而生，作为被大众熟悉的艺术形式，“微动画”也紧跟时代步伐，在“微艺术”丛生的年代，展现出特有的艺术特征。
（二）微动画的艺术特征
微动画是互联网“微时代”催生下的产物，具有传统动画的基本属性，但是与传动动画动辄几十集的概念相比，微动画时长一般控制在3分钟左右，可以用“短小精悍”来形容。由于时效性的限制，“微动画”发展初期主要关注的是新闻焦点和世俗百态方面的题材。随着时间的推移，一个小品、一个事件点、一种短期的变化、状态都会成为微动画未来的选择方向。微动画的创作形式也越来越个性化，常常能够颠覆现有的创作形式和表现手法，结构语言也愈发丰富，比喻、暗示、反衬等修辞手法层出不穷，所以，微动画不再是孩子的专属，成人也逐渐加入动画观众的行列中来。
二、励志微动画创作的现实意义与价值
现阶段，励志微动画借助网络传播的便捷性，以成长、治愈为题材，结合中国传统文化的元素和风貌，不仅发挥了积极的教育作用，同时体现其文化传播价值。励志微动画在经济领域同样有很好的表现，比如科教短片、艺术宣传片、微动画广告的运用等，通过不同题材的开发，引发文化经济效应，将文化资源转化为经济资源，带动整个行业经济的发展，所以励志微动画的传播无论对社会文化还是经济的发展都具有重要的意义。
三、移动互联网语境下的励志微动画创作策略
（一）励志微动画的题材来源
1.经典IP故事改编
微动画的创作离不开优秀故事的支撑，创作者在筛选和整理内容时，可以从积累了大量粉丝的经典IP中汲取灵感。人类几千年的文化长河中，有数不尽的历史题材值得挖掘。一般来说，励志IP题材的整理分为两种，一是适当保留部分历史真实事件，对其进行梳理和改编。比如：迪士尼采用中国花木兰的经典IP形象创作了天马行空的《花木兰》电影。二是对童话、寓言故事等励志IP直接进行艺术加工，强化励志微动画的传播效果。
2.原创IP题材设计
2016年由皮克斯动画工作室出品的动画艺术短片《鹬》，总时长约5分多钟，讲述了小鹬鸟在觅食过程中，克服内心恐惧，积极面对大自然，努力适应大自然的感人故事。整个动画从角色形象到情节设计均是原创，其优秀的创作让低龄儿童至成人观众都能够喜欢和接受。2018年，苹果公司推出动画广告片《ShareYourGifts》，中文名《分享你的天赋》，时长接近3分钟，讲述了女主人公性格内敛，不敢将自己的天赋展示给大众，让自己的才华没有体现应用的价值，在偶然的机会下，唯一的爱犬将窗户打开，使美好的天赋设计图散落在众人面前，女主终于放下自己的畏惧和防备，将手稿展示给大众，最终，女主在受到众人的肯定中收获了最大的快乐。本片旨在呼吁更多有才华的人敞开心扉，通过自己让这个世界变得更加温馨和快乐。本片的整个构思也是围绕了苹果公司的要求进行了原创，个性化特征明显，给人带来耳目一新的视听体验。
（二）三幕剧结构在情节设计中的运用
1.三幕剧结构理论
悉德菲尔德的“三幕剧结构”，即建置—对抗—结局，基本上任何一部优秀的动画都能完美嵌套这个模型。三幕剧的第一幕为建置，或称开端，需要表明故事的主要人物和周围的情境。在第一幕结尾处要设置一个情节点，将故事的发展带入另一个方向。第二幕为对抗，是故事的主体部分，在剧本中为主要人物设定预期目标，为这一目标设置障碍，就产生了冲突，第二幕的结尾处同样需要设置情节点把故事引入结局部分。第三幕为结局，是所有故事的终结，故事需要一个有力的结尾使人认同并求得完整。这是线性的剧本结构模式，可以归纳为：一系列互为关联的事情、情节或事件按线性安排，最后导致一个戏剧性的结局。
2.三幕剧理论的具体实践
苹果圣诞节微广告《分享你的天赋》参照了皮克斯动画的惯用手法，通过三幕剧结构来发展剧情。第一幕开端，动画交代了临近圣诞节，一个寒冬的夜晚，宠物狗陪伴者女主角在房间里用苹果电脑进行创意构思，将观众的视线带入女主角的身上，这是故事的开端。第二幕中断部分，以女主角内敛的性格为矛盾冲突点，一方面发自内心的沉浸在创意的喜悦中，一方面因为惧怕展示天赋的个性而压抑自己，通过做面包、雾气眼镜等情节就可以明显体现。第三幕通过宠物狗的帮助，意外地打破了内心的禁锢，女主角同样收获了被认可的喜悦，结局并不是故事的结束，而是意味着矛盾的解决。其中两个情节点分别是：第一次创意图稿正要飘出之际被女主角快速阻止并牢牢地锁在绿色的盒子里，第二次宠物狗意外打开窗户使创意图稿飞出窗外，这两个情节点都推动了情节朝着另一个方向发展。动画短片《鹬》的情节发展同样适用于三幕剧结构。
（三）美术设计符合大众审美
优秀的故事剧本离不开个性化的美术设计，在整个动画篇幅中，美术风格决定了动画的成败，其中角色是动画的灵魂，而美术风格既要彰显个性，又不能完全脱离大众的审美。以皮克斯短片动画《鹬》为例，整个场景采用了照相写实的手法，客观展现了海洋和沙滩环境的真实面貌，其中的鹬鸟和寄居蟹的设计采用写实和拟人化的表现手法，既客观地展示了主角的造型特征，在表情、动作的设计上又充分的塑造了个性突出的人物性格，加上纪录片式的主客观叙事手法，让短片充满活灵活现的童趣氛围，让观者无论年龄、职业都能够为之动容、喜爱。对于时间3分钟以内的微动画来说，场景美术设计风格应该与角色保持一致，但场景元素的罗列应该尽量简洁、有序，不适合太过烦琐，并且空间的转换尽量控制在一两个场景之内，元素的过分堆积会虚弱主体的表演，弱化情节的发展。
（四）视听语言的创新设计
不同于长篇动画复杂的镜头设计，微动画的情节描述应该更多以客观镜头、长镜头为主，镜头语言总体趋于平和，不适宜采用动接动的镜头手法。景别受手机屏幕的限制，大全景中的细节不容易被展现，过快的镜头也会给大全景的细节刻画造成创作中的浪费，营造出混乱的视觉效果，所以微动画适宜全景、中景和特写的镜头组接方式，如广告微动画《分享你的天赋》的创作中，大多数镜头都是通过全景来客观记录主角的生活，结合少量的中景和特写来描绘主角的动作及心理变化，全程没有对话和旁白，配合舒缓的音乐，充分诠释了清新、唯美、温馨的圣诞氛围，而《鹬》则采用长镜头和近距离特写相结合，甚至创新式的采用微距摄影的手法，给观众耳目一新的视听感受。
励志感人故事范文5
阳光保险集团是国内七大保险集团之一是由中国石化、南方航空、中国铝业、中国外运长航、粤电力等大型企业集团于2005年发起组建。在成立短短六年的时间内，无论品牌建设、还是公司业绩，都实现了迅速成长。
据悉，2011年阳光保险在品牌建设过程中，与中央电视台大型综艺栏目《我要上春晚》合作，成功签约冠名该栏目。在经历了一年全方位的营销传播之后，企业理念与栏目理念已相互融合，搭建起一个让平民百姓实现心中梦想的舞台。在2012新的一年里，阳光保险面临的主要任务是把握时机，再度扩大品牌的影响力，与央视栏目建立更加紧密合作。资源的调配，广告投放时机的把握，以及争取更好的投放环境，都在整个执行过程中得到各方的全力配合，希望最终能够达到预期的广告与宣传效果。
春晚概念：树立品质企业的公众形象
继成功续约并独家冠名2012年《我要上春晚》之后，阳光保险集团品牌宣传再推创新之举，已成功与央视《我要上春晚》推出的草根明星旭日阳刚（王旭、刘刚）、西单女孩任月丽、大衣哥朱之文、呼啦圈女孩金琳琳、豫剧红孩儿邓鸣贺一起签约，集体代言阳光品牌，新广告片目前正在央视和凤凰卫视等媒体投放。
当本刊记者问到如何想到与《我要上春晚》栏目“牵手”时，阳光保险集团品牌宣传部总经理张杰这样讲到，“首先，品牌发展到一定阶段寻求突破就必须与一个大的平台合作，央视这个平台是独一无二的；其次，春晚具备大众基础，每年都是一次社会事件；第三，我们看到了央视打造综艺栏目的决心，这个决心是对栏目品质和资源的有力保障；最后，阳光保险与栏目合作更能将资源与营销结合，避免单纯硬广在落地营销支持方面的不足。”值得提出的是，在选择代言人的过程中，与春晚草根明星结合，不但能最好地宣传阳光保险对央视《我要上春晚》栏目的冠名，而且广告片投放内容与栏目做到顺势融合，巧妙地实现了借力打力的整合传播。
据张杰介绍，“2012年阳光的品牌和广告片要上一个新台阶，我们一直在思考代言人的使用问题，这也是品牌发展到一定阶段的一个必要问题。而代言人的选择一定是个重点，用谁、怎么用才能为品牌带来持续稳定的正面效应则成为关键。阳光保险契合合作栏目主题，最终决定邀请这六位代言人拍摄广告片。”选用通过《我要上春晚》这个舞台走上央视春晚的草根明星作为代言，对于企业近两年的品牌传播主线起到了贯通升华作用。一方面更加深入地将企业品牌与“春晚”概念绑定，另一方面通过个例凸显“为13亿中国人的梦想保驾护航”的企业愿景，树立企业关爱大众的公众形象。
阳光保险其实更看重的是草根明星的感人故事和成长背景，没有太多的品牌符号贴在他们身上。选六位草根明星群体代言，打破了保险行业甚至其他行业的惯例，势必会形成强大的新闻传播热点。其六人的选择，具备共性的东西，比如对于梦想不断追求，面对生活积极乐观，梦想成真的励志故事等等。他们代表的是普通百姓，他们是梦想与希望的代言人。而作为保险企业，其本质是为社会分担风雨，共享阳光，让每一个人拥有梦想和希望，企业使命和代言人特质不谋而合。
代言广告片通过讲述“阳光”带给六位草根明星命运的变化，讲述他们坚持梦想最终成功的感人故事，树立阳光关爱的品牌形象。广告片首次播出被安排在除夕之夜央视春晚开场前倒三位置，借央视春晚这个黄金时间、黄金事件、黄金舞台，惊艳亮相。大年初一，@张杰阳光在他自己的微博上六位春晚明星代言阳光保险的广告片，短时间被广泛转发，评论上百条，代言新闻的微博转发更是达到了800多条，引起了很大的社会关注。
草根明星：撑起品牌的厚重感与使命感
众所周知，这六位明星中旭日阳刚、西单女孩任月丽和呼啦圈女孩金琳琳是2010年从《我要上春晚》栏目脱颖而出，登上2011年央视春晚舞台；大衣哥朱之文和豫剧红孩儿邓鸣贺是2011年《我要上春晚》栏目中的人气王，已成功登上2012央视春晚，人气和知名度一路攀高。
通过阐述阳光带给草根的人生变化，感人至深，能很好展示阳光的关爱力量！选用草根明星群体作为代言人，大众的熟悉度和共鸣感很强，势必会快速形成价值认同，传播效果也将得到提升，从而最终提升企业正面的品牌形象。代言人代表的是普通大众，是最广大的社会力量，足以撑起品牌的厚重感与使命感。
此外，阳光保险借《我要上春晚》平台全方位展示企业形象，还形成线上线下配合，其有效提升了品牌知名度和在行业内的影响力，同时阳光品牌进入第一梯队，得到广告界关注，先后获得“中国最佳品牌建设案例大奖”、“中国广告主长城奖・营销传播金奖”等多个奖项。有力带动了全系统的营销，全国客户活动开展踊跃，极大提升了品牌美誉度和活跃度。
阳光保险集团作为一支行业内新锐力量，公司品牌、企业文化、公司业绩、公益及员工关爱等工作已全面铺开，张杰坦言，“企业的存在价值取决于对社会的贡献，阳光保险将永远致力于树立拥有高度社会责任感的金融企业形象。”
正如中国传媒大学广告研究所所长杜国清所言，阳光保险的整体营销传播战略是有的放矢且效果显著的。从它的营销传播实践来看，体现了品牌定位、品牌精神，还有产品服务、创意表现，这几个方面与高端媒体和精品栏目的高度契合，实现了创新，实现了最终的有效传播。
品牌营销:更重视企业社会责任建设
在品牌建设方面，除了硬广投入，阳光保险集团历来高度重视企业社会责任建设，在公益方面表现异为突出,付出了很多人力物力，做了很多扎实的工作。为使公益力量持续不断释放，2009年3月5日成立“阳光保险青年志愿者协会”，2010年5月注册成立“阳光保险爱心基金会”，现如今志愿者人数已达到5000人，从一个侧面展现出企业在公益方面的雄厚实力和坚定决心。
励志感人故事范文6
“获得首届最佳‘狗狗影帝’双料提名的是——Uggie!”好莱坞《每日犬报》奇思妙想，为影视作品中的明星小狗开设了“金项圈”评比奖。《艺术家》的女演员佩内洛普·安·米勒作为揭晓嘉宾，与Uggie一起出席了提名仪式。提名中，Uggie凭借《艺术家》和《大象的眼泪》独占两席，当米勒把话筒举到它面前询问“感言”时，Uggie以一声中气十足的“汪——汪汪”表达激动。
其他入围的还有《爱的初学者》中的Cosmo、《抗癌的我》中的Denve r以及《青少年》中的Hummer和《雨果的秘密》中的德国杜宾犬Blackie。
杨嘉松在北京宠物领养日唱响“希望”
2月5日下午的愚公移山livehouse，没有往日摇滚乐的狂欢，屋里和屋外仿佛都洒满了温暖的阳光。第四届北京宠物领养日活动在这里举行。
十三月唱片的民谣歌手杨嘉松也应邀参加了此次活动，并上台演唱了《我希望我的希望不再只是希望》。近一个月来，有网友将杨嘉松的这首歌和无数流浪动物的照片制作成了一段感人的视频，在网上得到热烈响应。杨嘉松，不仅仅是一个民谣歌手，更是收留了15只猫和一只狗的好主人，他还为自己的爱猫创作了好听的歌并收录在新专辑中。
策划本次北京领养日活动的志愿者表示：我们共同的心愿，就是让每一只流浪动物进入家庭，让每一只猫猫狗狗都有人疼爱。
欧美宠物新时尚狗狗变身“老虎和斑马”
近日，美国和英国正流行一股新的热潮，宠物狗狗被打扮成各种古怪的形状。富有想象力的狗狗美容师狗狗打造成各种造型，从龙和鸡到海盗与足球。获奖的英国美容师苏维文受到老虎和斑马的启发，将贵宾犬威洛和佛洛德打造成了“老虎”和“斑马”。
沙发保护剂毒死狗 趴着玩了一会儿就被熏死
据英国媒体1月14日报道，英国格拉斯哥市一只十周大的宠物狗因为肺部吸进喷雾状沙发保护剂而死亡。经调查，这种惹祸的沙发喷剂早在去年就在英国停止销售，但至今仍能在1 50多家零售店里发现它们的踪影。
据悉，斯坦西购买的沙发保护剂里含有一种叫做庚烷的化学物质，有麻醉和刺激作用，长期接触会致人神经衰弱，丧失意识，对胃部和皮肤也有损伤。目前斯坦西购买的同种品牌沙发保护剂在英国已全部下架处理。
公司送斗牛犬林俊杰过年不孤单
外表帅气的林俊杰，私下爱狗成痴，去年6月才遭逢爱犬过世，让他伤心了好几个月，但他仍很喜欢狗，还想再养狗，日前唱片公司得知消息后，主动送上一只法国斗牛犬，让他又惊又喜，直说“太可爱了”。之所以想养，林俊杰想了想，笑说“感情上比较有寄托，且狗不会背叛主人”。
斗牛犬看来笨笨的，非常需要人照顾，激发出JJ的爱心与责任感。但有之前Eusha病逝令人难过不舍的经验，难道不会怕养狗?林俊杰坦言“会害怕，但实在太喜欢狗了，因此愿意承受爱狗的这一切”。
日本男子因殴打小狗面临监禁
据日本新华侨报网2月6日消息，近日，日本一名男子因殴打自己的小狗，造成小狗脑部和肝脏损伤。日本神奈川县警方以违反《动物保护法》的罪名，将这名53岁无业男子虐待宠物的案件移交给了检察院。这名男子可能很快面临牢狱之灾。
1月3日凌晨，该男子在川崎市川崎区的一家酒吧内，对饲养的小狗拳打脚踢，造成小狗脑部和肝脏严重损伤。男子虐待小狗时将酒吧的柜台弄得污秽不堪，酒吧店员随后拨打110报警。该男子向警方供称：“我只是想教育一下小狗。”小狗是该男子2011年末花20万日元在宠物商店购买的，现在已经被送往动物医院治疗。
公犬疑因主人训斥伤自尊跳楼 曾多次获比赛冠军
它叫威胜，是一条德国罗威纳犬，血统纯正，年少扬名，曾四次获得全国性犬类比赛冠军，曾经有人出价十几万元购买，平日性格温顺，也很听话。但一日上午，刚满十一个月的它，突然从距离地面二十多米高的阳台上，飞身跃下，不幸身亡。
狗主人游女士说，威胜是只公犬，事发前几分钟曾与一只母犬大声对吠，被训斥了几句。她很疑惑，威胜智商很高并且训练有素，为何能克服恐高的天性跳楼?
《陪伴》
一部以狗狗为题材的电影，描述了发生在一只导盲犬、导盲犬训练师小佐、导盲犬寄养小主人以及失明女子星野真之间的感人故事。小佐因同事自杀而立志成为造福社会的训练师，寄养导盲犬的四口之家正面临父母离异，因为舞台意外而失明的女主唱星野沉浸在不得不放弃唱歌的悲伤中，如此三个同时面对人生困境的人，因为毛盲犬的牵连而产生了奇妙的化学作用，谱写了一段感人肺腑的励志真情。
孔琳推荐：日式惯有的催泪弹，尽管这样题材的片子多的数不胜数，但是我们还是次次泪眼连连。
白狗的华尔兹
