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爱的练习本范文1
【关键词】多西苯醌; 塞来昔布; 联合抑制; 结肠癌HT 29细胞; VEGF
Research of Docebenone combined Celecoxib Inhibit Human colon carcinoma cell line
LIU Chun ying,LI Jin feng,LIMing qiang,et al.Department of Gastroenterology,Affiliated Zhongshan Hospital of Dalian University,Dalian 11600l,China
【Abstract】 Objective To comparative investigate the influence of AA 861 alone or in combination with Celecoxib on the proliferation of colon carcinoma HT 29 cell line.Methods Group cultured colon cancer HT 29 cells,The morphological changes of HT 29 cells was observed by inverted phase contrast microscope after Docebenone(AA 861)and Celecoxib alone or in combination;By cell proliferation assay(MTT)detect cell absorbance so as to test cell proliferation;The expression change of VEGF was detected by Immunofluorescence staining experiments under Confocal microscope.Results We can observe that cell morphology chaned significantly under the inverted phase contrast microscope,and the group of AA 861and Celecoxib in combination changed most obvious; These results of MTT suggest that the group of two drugs in combination shows the lowest rate of cell proliferation.Immunofluorescence staining experiments revealed that the expression of VEGF was decreased,and the group of two drugs in combination has the lowest expression.Conclusion AA 861 and Celecoxib in combination can produce a superior anti colon cancer effection than AA 861 or Celecoxib alone,and this effect may be related with inhibit the expression of VEGF.
【Key words】Docebenone;Celecoxib;Associative inhibition;Colon carcinomaHT 29 cell line;VEGF
近年来研究发现结肠癌组织中存在环氧化酶 2(COX 2)及5 脂氧合酶(5 LOX)的高表达,而相应的正常组织或癌旁组织中则不表达或表达量很极少。应用选择性COX 2抑制剂或5 LOX抑制剂都能抑制结肠癌细胞增殖,但是对于联合应用COX 2及5 LOX抑制剂对结肠癌的抑制作用报道很少。我们通过体外细胞实验比较单独及联合应用COX 2抑制剂塞来昔布及5 LOX抑制剂AA 861对结肠癌的抑制作用。以期二者小剂量联合应用,在减轻副作用的前提下协同获得最大的抗癌效果。
1 材料和方法
1.1 材料 人结肠癌HT 29细胞(由大连理工大学生物医学工程实验室惠赠);胎牛血清、1640培养基分别购自Hyclone公司、胰蛋白酶购自Gibico公司;塞来昔布与AA 861均购自美国Sigma试剂公司;鼠抗人VEGF抗体购自Santa cruz公司,FITC标记山羊抗小鼠IgG购自北京中衫金桥生物公司。其余试剂均为国产生化试剂。
1.2 方法
1.2.1 细胞培养及分组 人结肠癌HT 29细胞采用含10%胎牛血清、100IU/ml青霉素和100 μg/ml链霉素的PRMI1640培养液,置于37℃ 5%的CO2培养箱中传代培养。按实验设计分为对照组、AA 861组(50 μmol/L、100 μmol/L、200 μmol/L)、塞来昔布组(50 μmol/L、100 μmol/L、200 μmol/L)、AA 861联合塞来昔布组(50 μmol/LAA 861+50 μmol/L塞来昔布组、100 μmol/L AA 861+100 μmol/L塞来昔布)。
1.2.2 倒置相差显微镜观察细胞生长形态变化 取生长对数期细胞,经胰酶消化后,以3×104~5×104/孔接种于六孔板中,待细胞贴壁生长稳定后,弃去孔板中原培养液,分别按上述分组,加入含有药物的培养液作用48 h后,在倒置相差显微镜下观察细胞形态变化。
1.2.3 MTT细胞增殖试验 取生长状态良好的对数生长期细胞,按1×105/ml的密度接种于接种于96孔板中,每孔加入100 μl,每列的第一孔不加细胞,为空白对照调零,于培养箱内培养。细胞同步化后,分为空白对照组、塞来昔布组、AA 861组、塞来昔布组联合AA 861组,具体浓度如前所述,药物作用第1、2、3天分别每孔加入0.5%MTT液20 μl,继续培养4 h后吸出孔内液体,每孔加入DMSO 200 μl,立即置入酶标仪中震荡后于492 nm处波长下测定各孔吸光度(A492),细胞抑制率计算公式为:细胞抑制率=(1 实验组A492/对照组A492)×100%。
1.2.4 免疫荧光染色方法观察VEGF蛋白表达情况 具体实验方法为:取生长对数期细胞,经胰酶消化制成单细胞悬液后,细胞爬片;待细胞生长稳定后,按上述实验分组药物作用48 h后PBS充分漂洗,分别通过4%多聚甲醛固定、0.2%Triton细胞穿孔、1%BSA封闭;然后避光加入1%BSA稀释的一抗4 ℃孵育过夜; PBS漂洗后避光加入1%BSA稀释的二抗于37 ℃杂交1 h;最后用PBS洗掉杂质,封片,在激光共聚焦显微镜下观察、拍照,利用Image Pro Plus6.0软件分析细胞内荧光强度,以细胞内的平均荧光强度反映细胞内VEGF的表达量。
1.2.6 统计学分析 所得实验数据以(x±s)表示,采用SPSS13.0for windows软件包进行分析。
2 结果
2.1 药物处理后结肠癌HT 29细胞形态学变化 倒置相差显微镜观察到对照组正常生长的结肠癌HT 29细胞,呈类圆形,少数呈梭形,且细胞折光性好,以贴壁方式生长,经过药物作用24 h后,50 μmol/L AA 861与50 μmol/L塞来昔布组细胞分别表现出现细胞变圆变小,细胞内颗粒状物质增多,折光性降低,这种变化随着时间及药物浓度的加大,更加明显,尤其AA 861与塞来昔布联合作用72 h后,细胞生长状态最差,部分细胞呈悬浮状态生长(图1)。
2.2 AA 861与塞来昔布单独及联合应用对HT 29细胞增殖的抑制 AA 861与塞来昔布单独及联合作用于HT 29细胞后,都以时间浓度依赖性抑制细胞增殖,其中AA 861 100 μmol/L(43.2%),塞来昔布100 μmol/L(42.8%),100 μmol/Lmol/LAA 861+100 μmol/L塞来昔布组(53.8%),两种药物联合应用组抑制率分别高于单独应用AA 861(P
表1
AA 861与塞来昔布单独及联合应用48 h后
HT 29细胞的吸光度(x±s)
药物组吸光度
对照组0.528+0.005
AA 861 100 μmol/L0.300+0.003*#
塞来昔布100 μmol/L0.302+0.002*#
AA 861 100 μmol/L+塞来昔布100 μmol/L0.244+0.005*
注:*P
2.3 激光共聚焦显微镜检测细胞内VEGF表达 以细胞内平均荧光强度表示细胞内的VEGF表达情况,免疫荧光照片显示,各实验组细胞免疫荧光强度随着药物浓度的加大逐渐减弱,而两种药物联合应用组荧光强度最弱(图2)。经图像分析软件分析后,各实验组与对照组细胞的荧光强度有统计学意义(表2)。
表2
AA 861与塞来昔布单独及联合应用48 h后
HT 29细胞VEGF表达的影响(x±s)
分组细胞平均荧光强度
对照组0.046+0.002
AA 861 100 μmol/L0.025+0.001*#
塞来昔布100 μmol/L0.027+0.002*#
AA 861 100 μmol/L+塞来昔布100 μmol/L0.017+0.002*
注:*P
图1 AA 861与塞来昔布单独及联合应用48 h后HT 29细胞形态学变化(10×)
A:对照组;B:塞来昔布100 μmol/L;C:AA 861 100 mol/L;D:100 μmol/L AA86 1+100 μmol/L塞来昔布
图2 AA 861与塞来昔布单独及联合应用48 h后HT 29细胞内VEGF表达情况
A:对照组;B:塞来昔布100 μmol/L;C:AA 861 100 mol/L;D:100 μmol/L AA86+100 μmol/L塞来昔布
3 讨论
花生四烯酸(arachidonic acid,AA)是人体必需的一种不饱和脂肪酸,广泛存在于哺乳动物的中性脂肪中,参与组成细胞膜磷脂,在磷脂酶A2和磷脂酶C的作用下可分解生成游离的花生四烯酸。AA代谢主要有环氧合酶(COX)和脂氧合酶(LOX)两条代谢通路,COX 2及5 LOX分别通过各自的代谢产物前列腺素
(PGs)和白三烯(LTs)等参与肿瘤的发生发展过程[1 2]。随着研究的深入,发现AA的代谢通路COX 2及5 LOX之间存在交叉平衡关系,Goulet JL等[3]的实验发现,敲除5 LOX、COX 1、COX 2等基因可以引其他花生四烯酸代谢途径的活化,并且,应用其中一条通路的化学抑制剂后也可以活化另外的代谢途径[4]。Fabio Cianchi[5]等的实验发现,结肠癌的Caco 2和HT 29细胞都有COX 2和 5 LOX的高表达,并且两种细胞应用COX 2抑制剂塞莱昔布后都出现了COX 2代谢产物PGE2的降低,然而也都出现了5 LOX代谢产物CysLT的升高。而联合应用塞莱昔布和MK886后,则可以抑制塞莱昔布引起的CysLT上升和MK886引起的PGE2上升,并且对肿瘤的抑制效果优于只用一种同浓度抑制剂的实验组。本实验中采用5 LOX抑制剂(AA 861)和COX 2抑制剂(塞来昔布)分别单独及联合应用,通过相差显微镜观察到,两种药物都能使体外培养的结肠癌HT 29细胞的形态发生明显变化,而两种药物联合应用组,细胞形态变化最明显,细胞增殖受到明显抑制。MTT结果提示AA 861与塞来昔布都以时间浓度依赖性抑制结肠癌细胞增殖,且两种药物联合应用组抑制率最高。这可能是因为同时抑制花生四烯酸的两条代谢通路后,阻止了一条代谢通路向另一条代谢通路的分流作用,从而产生更强的抗肿瘤作用。
血管内皮生长因子(VEGF)及其受体的过度表达与肿瘤生长、侵袭及转移关系密切,以VEGF及其受体作为相对特异的肿瘤血管生成标记物,抑制其表达或阻断其效应是目前国内外抗血管生成治疗肿瘤的热点。研究资料发现,COX 2可以促进结肠癌细胞诱生血管生长因子,Tsujii等[6]对转染COX 2基因的结肠癌细胞株CaCo 2进行研究发现,CaCo 2在过度表达COX 2的同时,促血管生成因子VEGF、TGF β、bFGF等均明显上调,从而提供了COX 2参与肿瘤新生血管生成的有力证据。夏光涛等[7]发现应用5 LOX抑制剂作用于结肠癌HT 29细胞后,肿瘤细胞转移能力下降,并且与VEGF表达受抑制有关。本实验利用COX 2抑制剂塞来昔布与5 LOX抑制剂 AA 861联合应用后,通过细胞免疫荧光染色可以看到细胞内VEGF的表达比对照组明显减弱,而两种药物联合应用后,细胞荧光强度最弱,提示联合应用组细胞内VEGF表达量最低。
有研究证实选择性COX抑制剂塞来昔布对结肠癌细胞剂量依赖性的抑制作用是非常有限的,超大剂量的药物不良反应也是无法避免的。晚近研究发现:5 LOX的抑制剂AA 861对肿瘤生长抑制作用比COX抑制剂强,且未发现明显副作用。从多环节发挥抗癌作用的角度考虑,结肠癌的药物治疗应采用多种药物的联合治疗,这样可为在机体耐受每一种药物的不良反应范围内及不增量的前提下,产生最大的抑制肿瘤效应。而5 LOX抑制剂与COX 2抑制剂联合应用后对结肠癌细胞的抑制作用可能与对细胞内VEGF的抑制作用有关,也可能与两者联合应用后通过减少下游产物,作用于一系列信号通路及凋亡相关蛋白,促进细胞凋亡,并阻断底物转移所致的另一代谢通路激活,进一步阻断5 LOX或COX 2的促癌作用有关。其确切机制仍需要我们进一步的探讨。
参考文献
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爱的练习本范文2
[关键词]血管性认知障碍；丁苯酞；奥拉西坦
[中图分类号] R743.9 [文献标识码] A [文章编号] 1674-4721（2017）02（a）-0144-03
[Abstract]Objective To investigate the clinical curative effect of Butylphthalide combined with Oxiracetam in the treatment of vascular cognitive impairment （VCI）.Methods Altogether 80 cases of patients with VCI who were treated in our hospital from February 2014 to February 2016 were divided into experiment group （n=40） and control group （n=40） according to random number table method.Patients in the control group were treated with Butylphthalide，while patients in the experiment group adopted Oxiracetam treatment on the basis of control group.Activities of daily living （ADL） score and mini-mental state examination （MMSE） score before and after treatment in two groups were observed.Results 4 weeks after treatment，the total effective rate of the experiment group was 90.0%，higher than that of the control group （67.5%），with statistically significant difference （P0.05）；while significantly decreased ADL scores [（30.64±2.67） scores] and increased MMSE scores [（24.32±2.24） scores] were seen in the experiment group in contrast with that in the control group [（39.11±3.63） scores and （20.14±2.15） scores]，with statistically significant differences （P
[Key words]Vascular cognitive impairment；Butylphthalide；Oxiracetam
血管性J知障碍（vascular cognitive impairment，VCI）是指患者由轻度的认知障碍逐渐发展到痴呆的一大类临床综合征[1]。VCI的人群中有约半数是脑卒中患者，VCI发病缓慢，患者以及家属一般不能及时发现症状且就医，待患者生活自理能力严重下降，记忆力明显减退入院就诊时，本病已逐渐发展为不可逆，唯有用药物控制疾病的发展。但目前还未发现单一有效治疗VCI的药物，本文采用丁苯酞联合奥拉西坦治疗80例血管认知障碍患者，现报道如下。
1资料与方法
1.1一般资料
将2014年2月～2016年2月我院诊断的80例VCI患者按照随机数字表法分成两组，每组40例。对照组中，男24例，女16例；年龄51～82岁，平均（66.25±6.18）岁；病程1～4年，平均（2.18±1.12）年；高血压史30例，糖尿病史10例。实验组中，男22例，女18例；年龄50～83岁，平均（67.32±6.54）岁；病程1～5年，平均（2.56±1.42）年；高血压史28例，糖尿病史12例。纳入标准：经头部CT或MRI证实符合血管认知障碍的诊断标准[2]；年龄50～85岁；出血性卒中：包含蛛网膜下腔出血和脑出血；均经医院医学伦理委员会审核并签署知情同意书者。排除标准：意识障碍；合并有严重的心、肝、肾及造血系统疾病；重度代谢营养障碍性疾病及颅内占位性病变等认知障碍异常；药物过敏和妊娠及哺乳期妇女。两组患者基线资料比较，差异无统计学意义（P>0.05），具有可比性。
1.2方法
两组患者均要进行对症治疗，包括血糖的控制、高血压的控制、血脂的调节等。对照组口服丁苯酞软胶囊0.2 g（石药集团恩必普药业有限公司，国药准字：H20050299，规格：0.1 g/粒），2次/d口服。实验组在对照组的基础上给予奥拉西坦注射液（哈尔滨三联药业股份有限公司，国药准字：H20060070，规格：5 ml∶1 g）4 g，将注射液与0.9%氯化钠注射液250 ml混合静滴，1次/d。两组患者均治疗4周。
1.3评定标准
1.3.1疗效评定 显效：可独立生活，无其他临床症状；有效：生活可自理，但智力、言语、认知有轻度障碍，记忆力轻度减弱；无效：生活无法自理，存在明显的智力、言语、认知功能障碍，注意力不能集中[3]。总有效率=（显效+有效）例数/总例数×100%。
1.3.2 ADL4级评定 1分：生活独立；2分：生活能力有所下降；3分：生活能力下降明显，对家人及医护人员依赖大；4分：生活能力完全丧失，需要家人或专业护理人员照顾[4]。
1.3.3 MMSE评定 MMSE评分≤9分为重度认知障碍；10～20分为中度认知障碍；21～24分为轻度认知障碍[5]。
1.4统计学处理
采用SPSS 17.0软件数据进行分析，计量资料用均数±标准差（x±s）表示，采用t检验，计数资料用百分率（%）表示，采用χ2检验，以P
2结果
2.1两组患者临床疗效的比较
治疗4周后，实验组治疗总有效率为90.0%，高于对照组的67.5%，差异有统计学意义（P
2.2两组患者治疗前后ADL与MMSE评分的比较
治疗前，两组ADL和MMSE评分比较，差异无统计学意义（P>0.05）。治疗4周后，实组ADL评分较对照组下降明显，MMSE评分较对照升高，差异有统计学意义（P
3讨论
VCI是指有脑血管病危险因素或脑血管疾病的基础，并且与认知功能损害之间有因果关系，记忆力相对保留或较少损害，注意和执行功能受损较重，病情呈波动性发展[6]。目前，对血管性痴呆的诊断缺乏统一的国际标准，也难以发现非痴呆的认知障碍。VCI的概念则可以涵盖所有与血管危险因素和脑血管病变有关的各种程度的认知障碍，其意义就在于能促进早期识别和早期干预，可以有效延缓痴呆发展[7]。VCI患者其线粒体和血管都有损伤，由脑部CT可发现，患者脑部血流灌注较正常人明显偏低，脑白质损伤严重[8]。VCI是逐渐演化的一大类综合征，疾病最开始时，患者只是轻微的认知障碍或记忆功能减退，但随血供减少以及脑实质的损伤进展，疾病逐渐向不可逆的方向发展，最终发展为老年痴呆[9]。
VCI可发生于约半数的脑卒中患者，脑卒中后，患者生活能力减弱，对身体变化的敏感性差，加之早期症状不明显，发病隐匿，大部分患者进展到不可逆的脑痴呆后才进行治疗，这时血管损伤严重，供血严重受阻导致脑实质变化明显[10]。因此，对VCI进行有效的早期诊断和干预，可以给患者争取更多的治疗时间，延缓血管和实质的快速恶化是VCI治疗的关键。但由于其发病原因复杂多样，涉及分子和细胞变化的多种病理机制，而且治疗药物的针对性差，还未发现单一应用便能有效缓解症状的药物，药物之间的联用可能会增加疗效，于是本实验采用多种药物联合，探讨不同药物联合使用后的效果。
丁苯酞胶囊是用于阻断脑部缺血性损伤、恢复部分区域血供的新型药物，在脑梗死前期的治疗中效果显著，已应用临床多年。丁苯酞对于脑缺血所致的神经缺失改善作用明显[11-12]，主要的机制是：①丁苯酞可增加血液灌注面积，改善脑血管微循环，避免脑实质的进一步损伤，同时可减轻脑水肿，防止颅内压的快速升高；②能减少患者体内花生四烯酸的含量，阻断酯类的代谢与转化，使钙离子的载体减少，钙池向外排出，钙离子的通道关闭，胞内钙离子的浓度降低，可一定程度改善认知功能。奥拉西坦是新一代γ内酰胺类脑功能改善药物[13-14]，其主要的机制是：①可快速通过患者的血脑屏障，针对性作用于患者中枢神经，激活相应区域脑细胞；②与蛋白激酶有机结合，改善患者记忆神经元的去极频率，增强患者的认知和记忆功能；③增强患者脑部的可塑性变化，预防患者血管进一步损伤，导致不可逆的老年性痴呆。从研究结果分析，与单独使用丁苯酞的对照组比较，实验组丁苯酞联合奥拉西坦治疗后，ADL评分显著降低，MMSE评分明显增高，总有效率明显高于对照组，差异明显。
综上，丁苯酞联合奥拉西坦治疗VCI，不仅可提高患者日常生活能力，还能延缓患者的记忆减退，提高治疗总有效率，效果明显，可临床推广。
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爱的练习本范文3
清脆的上课铃声响了起来，班主任刘老师走进了教室，挤在一堆的同学们纷纷回到了座位上，教室渐渐恢复了宁静。刘老师沉思了片刻，开口说了这样一个故事：以前，曾有个同学，他的爸爸妈妈十分宠爱他，饭来张口，衣来伸手。什么事都依着他，结果养成了好吃懒做的恶习，当父母满足不了他时，他竟打起了别人的主意，最后，终因抢劫时杀人致死而被判死刑……不经意间，刘老师的双眼已经把整个教室扫视了一遍，忽然她看见一个小男孩的脸上已微微返起红晕，眼神闪烁，似乎有些不自在，刘老师好象明白了什么。
刘老师走下讲台，走出教室，转眼间，又抱着一摞练习本回到教室，看见老师搬来一大摞本子，同学们更奇怪了，又不禁猜测着，这葫芦里到底卖的是什么药呢？
“请同学们静一静！”对于这件事，老师心中已有了些眉目，我不想当众批评这位同学，请拿了钱的同学把钱夹在本子里，明天我会带个密封的纸箱子，请你把本子塞进去．我会为你保守这个秘密。”
第二天，同学们纷纷把本子塞进了纸箱。下午，刘老师当着同学们的面把那65元钱还给了小女孩，同学们都欢呼雀跃，为刘老师的成功“破案”而喝采，除了一个人之外，所有的同学都没注意到老师眼里一丝失望的神色。
爱的练习本范文4
庞青松
太阳舞着红纱巾下山，
月亮提着星星灯出场，
校园的灯亮了，
一排排，一盏盏，
教室亮得跟白天一样，
满堂的学生都笑了，
双眼像星星一样亮，
脸蛋像可爱的明月……
和语文老师一起，
激情飞扬；
和数学教师一起，
在黑板上丈量；
实验室里蓝光闪闪，
又攻克了一道理化难关；
和历史老师畅谈古今，
地理老师海北天南，
英语老师洋调洋腔……
天上的星星要瞌睡了，
欢腾的校园渐渐宁静，
一阵铃声，灯开始熄了，
一排排，一盏盏，
就剩那一排灯仍在亮，
老师的身影在窗前晃，
摊开一叠叠练习本，
轻轻地，
犹如抚摸着学生的面庞，
时而点头，时而微笑，
钢笔一扬，
留下评语一行行，
淌着祝福，育着希望。
月光照着灯光，
校园里飘着桂花香，
浅浅地，睡梦中，
学生笑得很甜……
老师身披月光，
来来回回地数，
来来回回地看，
轻轻地，举起手，
爱的练习本范文5
你好！
我有好多话想对你说,以前我是一个性格内向,上课不爱积极发言的小女孩．我还有一些坏毛病，写作业不认真，遇到写作文更是头疼，不知道怎么去写．从您三年级开始教我们语文,并代我们班主任以后．我的成绩有了很大提高，逐步改掉了一些坏毛病．
记得有一次上语文的时候，您在讲台上给我们讲课，我却在下边做起了小动作，您让我们写第四单元的日积月累的动物成语，我不知道做什么，便拿起语文大本练习册准备做,您看到了就说“还有一个同学干吗呢？就像我们刚刚学的‘呆若木鸡’一样。”您并没有点名批评我，同学们也不知道说的是谁，但是我知道您说的是我，我当时看了看我的同桌，她在认真的写第四单元的日积月累的动物成语，我赶紧拿起练习本写起来，那节课您没有再批评我。其实我知道我错了，您在讲台上为我们讲课，我却在下面作小动作，这样不是白白浪费您的心血吗？
从那以后我上课认真听讲，认真完成作业，现在我的写作水平慢慢有所提高。
夏老师我想告诉您一个好消息：我在《小学生优秀作文库》发表了10篇作文了有《我的秦老师》、《明天就要开学了》、《我的弟弟》、《我》、《铁西公园》……
夏老师一定不辜负您对我们的期望，虽然我不是什么好学生，可是我会努力努力在努力的，您相信我吧，我一定会很出色的！
祝老师
身体健康
爱的练习本范文6
您好！
爸爸，您最近的烟瘾越来越严重了：上班吸烟，回家吸烟，查作业时也吸烟，就连我的练习本也留下您吸烟的踪迹。我和妈妈苦口婆心地劝您，给您讲吸烟的危害性，可您还振振有词：“生产那么多烟草弄哪儿去？我可是在为国家服务。”
那件是深深地印在我的脑海里。一天，您的心情不好，一连抽了好几根烟。我让您帮我查作业，您只说了声：“拿来。”我也知道您心情不好，也不敢多说什么。“来！过来！”您“一声令下”，“小的”只好赶紧跑过来“听吩咐”。“你看！”您指着我得脑袋瓜子，“这么容易还不会！应该这么做……”于是，您滔滔不绝地讲解起来，一边讲还一边“吞云吐雾”呛得我直咳嗽。“爸爸，您就别吸了吧！”我忍不住插了一句，“认真听！”您生气了。这下，我不敢多嘴了，生怕又挨训。我瞥了瞥夹在您手中的香烟，直嘀咕：讨厌的香烟！你以为有爸爸撑腰就可以如此狂妄吗？可又转念一想：算了吧，反正只剩下三分之一了，再忍一忍一分钟就行了。一分钟终于过去了，可我觉得十分漫长，这相当于吸烟者两倍的吸烟量啊！爸爸，就算您一定要吸，那您把烟量降到最低，别在不需要的时候吸。您给我查作业时边吸边讲，我站在旁边简直难受极了！爸爸，吸烟就等于慢性自杀呀！
爸爸，烟对人百害而无一利，您就把烟戒了吧！
