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暗示表白范文1
2、没有人值得你流泪,值得让你这么做的人不会让你哭泣。
3、你知道吗,我一直站在你的身后,期待着有一天,你会回过头来看看我。
4、我永远会记得曾和你在一起的那些日子。开心、快乐、幸福、失落、伤心、痛苦的所有日子。
暗示表白范文2
近年来,展览业发展快速,各级主管部门、行业内部对展会期间的展台搭建工作逐渐开始重视。“标准出台可以说是行业需要,也是管理部门的需要。”郑世钧告诉记者。展台的搭建不同于其他建筑,搭建和持续时间短、造型性强等特点注定对工程和相关活动有特殊的要求,同样,出于北京市公安、消防、质监等政府部门管理需要,会展场馆、搭建企业规范服务和质量要求,对于临时搭建的各项标准就显得异常重要。“全国各地都有不同的要求和情况,但就北京来说,对展台搭建安全标准呼声已经很久,因此这也是符合会展企业,特别是场馆、搭建企业和承办单位的发展需要的,”郑世钧说。
2010年11月16日,《展台等临建设施搭建安全标准》正式公布,“我们强调这个标准的实用性和适用性。”郑世钧说,如果标准不符合行业发展,缺少实用价值,那也就偏离了指定该标准的初衷。在历时半年多的规划和编制标准时期,北京市公安局治安管理总队与中国展览馆协会密切合作,组织经验丰富的建筑师、结构工程师、搭建企业、展馆等专家和代表,调查展览行业临时搭建设施的生产、安装全过程,并抽样分析了部分国内外临时搭建工程的事故案例,通过大量的调研、搜集资料的工作,《展台等临建设施搭建安全标准》终于出台,“虽然在一些细节方面还有待进一步完善,但毕竟是行业中第一部展台搭建标准,在日后的工作中还需要逐步修整。”郑世钧表示,标准已经上报公安部备案,如果将来北京执行情况良好,可以向全国其他会展城市进行经验推广。
从制定和的时间来看,正好经历了2010上海世博会,而中国展览馆协会也在其间组织其会员参观世博会,了解其他各国会展业发展情况及展台搭建方面的经验,“因为世博会展馆的设计、搭建周期较长,不同于专业贸易型展会的展台搭建,所以主要从世博会上是全面地借鉴经验。”郑世钧告诉记者,世博会期间的展馆搭建更多地借鉴了建筑业的相关标准,相对于专业贸易展的展台搭建要求比较严格,但是世博会也对标准的制定起到了一定的借鉴意义。
暗示表白范文3
《瞭望》周刊文章将这种腐败的另类表现形式称作“边缘腐败”行为。文章还列举了“边缘腐败”的十种表现:
利用权力的交换和互助牟利。比如部分掌握经营国有资产权力的干部,不直接利用自己的权力获取利益,而是与另一权力人达成默契,以互派第三者(通常是亲戚或朋友)至对方处并相互予以关照牟利的方法,进行权力交换。通过第三人的参与转移公众视线,规避有关法律或规定,将非法利益合法化。
利用权力的“继承”或“转移”牟取私利。个别曾经掌握权力的干部,虽然离开了领导岗位或特定的岗位,但其在离开之前,按组织程序,事先安排对自己感情深、关系好的下属或亲属的职务,虽无名义上的职权,但却拥有足以利用的资源、方便和间接权力继续为自己或他人谋取非法利益。
利用权力向亲友输送实质利益并自己间接获利。一些掌握重要的政府权力(通常为发包、招标、批证权力等)的干部,本人不直接进行这种交易或经营这一业务,而以亲戚、朋友的名义设立公司、企业,专司该类经营,或者让其在国有公司、企业里担任重要职务的亲戚、朋友承接项目,自己则利用职权密切合作,给予实质性利益,使亲戚、朋友获利,反馈给他。
利用权力和政策广结关系网并牟取私利。部分干部针对法律或政策明确规定某一行为的允许度(如国有公司企业负责人可每年用于业务所需的接待费用等),用足政策,铺路搭桥,结关系网给关系人送礼、送物,美其名曰搞好横向、纵向的关系,有利于工作的开展,为以后的非正常利益的获取奠定基础,或通过他人以其他形式回报给他。
利用集体决策牟利并规避个人责任。个别国有企业的领导成员利用法律对单位犯罪规定的局限,明知以个人名义作出某种决策会触犯法律,便互相勾结,以集体决策的形式,谋取非正常利益。事后又以集体决策失误为名,使法难责众,避免个人承担责任。
利用权力“期权”牟利。有些掌握权力的干部,明知其权力拥有的短期性和价值性,为了规避法律得到某种利益,为自己铺设后路,实行权钱的延期交易,不直接向请托人收取现实利益,而与请托人达成交易,由请托人先代为保管某种利益,在其离开现职岗位后再合法地收取,比如退休、辞职后再合伙等。
利用内部信息牟取暴利。部分政府工作人员,利用职务便利,先于一般公众掌握足以为个人带来巨大经济利益的信息,并暗中出卖或利用这些信息,由自己的亲戚朋友进行投资、操作,获取由于国家法律或政策等的时间差所带来的信息优先的利益。
利用合法程序任人唯亲。个别掌握权力的领导干部,为了使自己的亲信被任用,在选拔干部时,通过有选择地听取意见、划定范围、预设标准等方法,排除他人竞争的可能,使预定的人员在看似平等的形式下,通过正常的程序和合法的形式任命,实现抱成团、互相靠,为小团体谋利益。
滥用自由裁量权为他人或自己牟利。目前我国法律和规章中除了许多规定都冠以“应当”和“必须”等强制性的词,但也针对许多特殊情况,设定了“可以”等司法和行政执法人员可以自由裁量的权力。法律和规章中设定“可以”的目的,是为了更好地体现公平,维刑法规定的贪污、贿赂、挪用公款以及滥用职权等罪名,仅是腐败行为发展到犯罪程度的极端形式,检察机关在实际办案过程中发现,腐败行为更多的是在日常的管理活动中以另类形式表现出来的。尽管这些另类表现形式在法律上没有规定为犯罪,有的甚至连党纪政纪也对之无奈,然而普通百姓却在生活中确确实实感受到其大量的存在。这种腐败的另类表现形式,最终会导致普通百姓对现职岗位干部的不信任,对法律及规章制度和施行的不信任,进而发展到对党和政府的不信任。重视和解决腐败的另类表现形式,是预防腐败基础性工作,切不可疏忽。护当事人的实际利益。但也被一些政府工作人员利用,为关系好的人谋取非正常利益。
利用职务消费黑洞大肆牟利和享乐。一些担任领导职务的干部,充分使用因工作需要而配备的小车、电话及其他用品,为个人的利益服务,即所谓“钞票不多,含金量高”。吃喝玩乐都能报销。许多百姓无奈地感慨,现在许多国有公司企业的领导按他们集体讨论出来的规定,每月可享受的订报费用就是普通百姓一个月的收入。
《瞭望》周刊文章指出,“边缘腐败”的危害极大。
危害之一,破坏社会正义与公平。一般而言,腐败行为可以分为两个大类,一类表现为“违反规则”地提供服务,另一类则是“符合规则”地提供服务。后者正是人们可以明显感受到,但法律又难以惩治的边缘腐败。法律的滞后性决定了它不可能对这些边缘腐败行为进行及时的制裁,但这种边缘腐败行为所带来的利益是客观存在的,对社会再分配的干扰也是直接的,这些在物欲驱使下,利用现行法律规章失范来达到自己目的的行为显然破坏了社会正义与公平原则,为更多人参与的广泛的腐败悄然埋下了伏笔。
危害之二,引诱任何掌握权力的官员滥用权力。现实生活中,人际关系在利益实现中的重要性,驱使边缘腐败行为在法律和制度允许的范围内,对社会财富进行再分配。而其不受法律制裁的“优势”,引诱人们不断坠入其中。
危害之三,边缘腐败是法定腐败的先驱,它是腐败犯罪的经验原型。尽管从个体看,其边缘腐败本身所瓜分的社会利益并未达到法定制度的程度,但群体的边缘腐败的绝对数量的增大对整个社会秩序和利益的破坏是不可低估的。
危害之四,众多的无法用法律制裁的边缘腐败行为的发生,难免会造成社会道德评判标准的变异。久而久之,在干部别是刚上任的道德操守仍较好的年轻干部就会认为这种行为并不是罪恶,反而抱以一种“宽容”,无形中减轻了道德的压力,进而减轻了腐败者的内心恐惧与自我谴责,客观上形成了对腐败的纵容。同时,在错误的观念支配下,许多人不知不觉成了腐败风气的支持者与参与者,无论是出于对腐败的反抗还是报复,一些人开始不把腐败当成腐败,不把丑恶当成丑恶,痛恨腐败又容忍腐败,甚至身受其害仍助纣为虐,使社会的道德评判标准畸化。
任何严密的法律都必然会授予执行者一定的自由裁量权,这是法律实现个别正义所必须的。同时,这种自由裁量权也会成为腐败滋生的温床,在许多国家,“公务员一般都有利用职权中饱私囊的潜在倾向”。
文章认为,对于边缘腐败的治理,仅以法律治标显然是不够的。
首先应将内部监督转为外部监督。完善党的组织范围内的监督的扩张力应放在外力监督上,将内部监督转化为外部监督,充分建立民主机制。一方面是进一步抓好政企分开、官商分离、党政分离,解决好监督权分权、各种监督权相对独立的问题,从制度机制上杜绝腐败的滋生。另一方面,进一步扩大政务公开,增强透明度,公布有关法律和政策,公开政府机关的职权范围、办事程序和结果,公务员的纪律要求等。扩大公民的有序政治参与意识,对涉及群众切身利益的部门和事务要实行公开办事制度。走出传统的行业体系,将国家无法做的交由非政府组织完成。将非国家权力的社会功能纳入法治轨道,成为国家权力的重要补充。从利益机制上堵塞漏洞。
暗示表白范文4
这也算是最经典的表白方式了。不管是对着对方所在的位置比如楼下唱情歌,还是单独对着对方唱情歌,都是可以做的。最好还是利用一下现在的那些科技之类,把你唱的歌的视频,直接做成视频文件发给对方。一边录制视频的时候,一边对着镜头上,要把这首歌送给自己最喜欢的那个人,然后在唱完之后,喊出对方的名字。
2、身体语言暗示法
用你的身体行为表白,适合各类腼腆的小伙子小姑娘。在对方看得见的时候,用你的身体语言进行暗示。比如彼此碰面的时候,用你的眼睛深情的看着对方,用眼神传递你的爱意,或者是适当的靠近对方,但又表现出一种不太敢的姿态。当你的这些身体语言出现的时候,多数人都会明白的。
3、利用节日表白
暗示表白范文5
关键词:瑞舒伐他汀;氨氯地平;氧化低密度脂蛋白;基质金属蛋白酶9;稳定斑块
中图分类号:R329.2 R285.5 文献标识码:A 文章编号:1672
动脉粥样硬化(atherosc lerosis,AS)是1个复杂的炎症免疫反应病理过程[1]。其中,巨噬细胞吞噬氧化修饰的低密度脂蛋白(oxLDL)在AS的发生、发展中起着关键作用[2]。各种致动脉粥样硬化的因素促进血管局部炎症介质的生成, 启动血管壁的炎症反应是AS发生发展的主要机制。其中oxLDL是AS炎症反应中重要的危险因素[3]。有研究发现,oxLDL可增加单核细胞源巨噬细胞基质金属蛋白酶9(matrix metalloproteinase 9,MMP9)表达并增强其活性,是细胞功能和基因表达的主要调节因子[4]。
瑞舒伐他汀(rosuvastatin)是新一代3羟基3甲基戊二酰辅酶A(HMGCoA)还原酶抑制剂,已有试验证明瑞舒伐他汀可抑制oxLDL诱导单核巨噬细胞MMP9mRNA和蛋白的表达[5]。氨氯地平(amlodipine)是广泛用于临床的第三代新型长效二氢吡啶类钙通道阻滞剂(calcium channel blockers,CCB),临床上主要应用于高血压治疗的一线用药。虽然,有报道称氨氯地平可以抑制单核细胞Lox1、MMP9的表达,从而起到稳定斑块的作用,但瑞舒伐他汀联合氨氯地平能否加强抑制高血压合并冠心病患者单核巨噬细胞MMP9mRNA和蛋白表达的作用,起到使斑块更加稳定的作用有待进一步实验证明。
本研究以健康人外周血单核巨噬细胞为对象,探讨利用oxLDL诱导后,不同浓度瑞舒伐他汀联合氨氯地平对MMP9mRNA和蛋白表达的影响。
1 材料与方法
1.1 研究对象 健康成人静脉血液来自山西医科大学第二临床医院体检中心;人淋巴细胞分离液(Lymphocytes Separation Medium1077)为上海华精生物高科技有限公司产品;RPMI1640培养液;胎牛血清为杭州四季青公司产品;oxLDL为北京协生生物科技有限公司产品;FITCCD14抗体购自日本Beckman Coulter公司。RNA提取试剂盒(TransZol)购自北京全式金生物技术公司;逆转录多聚酶联反应(RTPCR)试剂盒购自北京全式金生物技术公司;引物序列由上海生工生物有限公司合成;酶联免疫(ELISA)试剂盒购自美国R&D公司;瑞舒伐他汀为阿斯利康公司馈赠;氨氯地平为辉瑞制药有限公司馈赠;其他试剂为国产或进口分析纯。
1.2 人单核细胞来源的巨噬细胞的分离、培养、诱导和鉴定 密度梯度离心法分离健康人单核细胞。肝素抗凝静脉血30 mL分10个试管,RPMI1640液1倍稀释并充分混匀,分别缓慢加入等比例淋巴细胞分离液的离心管中,2 000 r/min离心20 min后,吸取中间环状云雾状淋巴细胞层,再以3 mL PBS液充分混匀,1 500 r/min离心洗涤2次;10%胎牛血清的RPMI1640各5 mL将细胞吹开混匀,将细胞悬液每培养瓶4 mL,并且每孔2 mL再种于12孔板中,于37 ℃、5%CO2培养箱中孵育,培养至2代~4代后于细胞指数生长期用于诱导转化实验。诱导转化时,以40 ng/mL的PAM无胎牛血清RPMI1640培养液继续培养48 h~72 h,待细胞转化为巨噬细胞后以RPMI1640培养液洗涤3次,置于10%胎牛血清的RPMI1640培养液中继续培养48 h。台盼蓝染色法测定细胞存活率。单核细胞源性巨噬细胞用特异性荧光素标记的CD14细胞表面抗体,流式细胞术进行细胞鉴定。
1.3 试验分组 试验共分8组。空白对照组:单独单核巨噬细胞培养24 h;oxLDL对照组:单核巨噬细胞经oxLDL 100 μg/mL诱导后单独培养24 h;瑞舒伐他汀组:单核巨噬细胞用oxLDL 100 μg/mL诱导后培养2 h后,分3组,分别单独加入瑞舒伐他汀(各0.01 μmol/L、0.1 μmol/L、1.0 μmol/L)培养24 h;瑞舒伐他汀联合氨氯地平组:单核巨噬细胞用oxLDL 100 μg/mL诱导后培养2 h后,分3组,第1组:加瑞舒伐他汀联合氨氯地平各0.01 μmol/L作用24 h;第2组:加瑞舒伐他汀联合氨氯地平各0.1 μmol/L作用24 h;第3组:加瑞舒伐他汀联合氨氯地平各1.0 μmol/L作用24 h。
1.4.1 RNA提取 弃培养瓶中的培养液,每瓶加入1.0 mL Trizol,依次加入氯仿、异丙醇沉淀,75%乙醇洗涤后略晾干,溶于25 μL DEPC中。核酸紫外分析仪检测,根据260/280比值,所有样品的A260/ A280的比值均介于1.9~2.0。并根据260 nm 的吸光度值对样品的总RNA进行初步定量,确定样品中RNA纯度和含量。
1.4.2 逆转录反应 逆转录反应在20 μL体系中进行:含1 μg RNA,20 mg/L的oligo(dT)引物,1.0 mmol/L dNTP,20 U Rnase抑制剂,1×Buffer,200UMMLV逆转录酶。于PCR仪上42 ℃反应1 h,72 ℃灭活10 min后保存于-20 ℃冰箱中。
1.4.4 凝胶电泳 取PCR产物10 μL在琼脂糖凝胶上电泳,计算机凝胶成像系统扫描拍照,Toptal软件分析灰度值,以各条带与Bactin内参条带灰度的比值,代表MMP9mRNA转录水平。
1.5 酶联免疫吸附双抗体夹心法(ELISA法)测定MMP9蛋白含量的表达 六孔培养板的上清液进行酶联免疫吸附双抗夹心法(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)测定,实验操作严格按照试剂盒说明书进行,每组实验重复7次。
1.6 统计学处理 数据以均数±标准差(x±s)表示,用SPSS13.0建立数据库,采用单因素析因分析方法,P
2 结 果
2.1 单核巨噬细胞的形态学观察和流式细胞术鉴定 单核巨噬细胞经培养、诱导后,25×16倍倒置显微镜光镜下观察,部分细胞为多角形,并且易于聚积、贴壁,说明已由单核细胞分化为巨噬细胞。经流式细胞术进行细胞鉴定,鉴定细胞多为单核巨噬细胞,符合实验要求。
2.2 对oxLDL诱导的单核巨噬细胞MMP9mRNA及蛋白表达的影响 已经试验证明经oxLDL诱导单核巨噬细胞,可使MMP9mRNA和蛋白的表达显著增加,而加入瑞舒伐他汀共同培养24 h后,MMP9mRNA和蛋白的表达明显受到抑制,这种抑制作用随加入瑞舒伐他汀剂量的增加而愈显著,尤其当瑞舒伐他汀为10.0 μmol/L几乎完全抑制了MMP9mRNA和蛋白的表达[5]。本研究验证,瑞舒伐他汀联合氨氯地平后可使MMP9mRNA和蛋白的表达较单独加入瑞舒伐他汀时明显下降。
2.2.1 对oxLDL诱导的单核巨噬细胞MMP9mRNA表达的影响 与空白对照组比较,oxLDL对照组、瑞舒伐他汀组MMP9mRNA表达明显增加(P
2.2.2 对oxLDL诱导的单核巨噬细胞MMP9蛋白表达的影响 与空白对照组比较,oxLDL对照组、瑞舒伐他汀组MMP9蛋白表达明显增加(P
3 讨论
oxLDL在动脉粥样硬化的形成和发展过程中起着关键的作用,oxLDL参与内皮损伤、黏附分子的表达、白细胞的募集和潴留、泡沫细胞和血栓形成。另外,oxLDL可刺激人单核巨噬细胞MMP9的基因表达,增加基质金属蛋白酶的活性,有可能促进粥样硬化斑块内基质的降解,形成易损的斑块,并且,在oxLDL 存在下, MMP9表达维持在较高水平,MMP9过度的表达则抑制平滑肌增殖,促使其凋亡,减弱斑块稳定性,参与了斑块破裂的进程,促进粥样硬化病变和血栓的形成,因此oxLDL对人单核巨噬细胞MMP9基因表达的影响,是动脉粥样硬化病变的关键因素之一[68]。
细胞外基质降解是斑块不稳定的主要原因。MMP是一类蛋白酶家族,主要由成纤维细胞、心肌细胞及斑块中巨噬细胞、血管平滑肌细胞合成与分泌。MMP能特异性降解细胞外基质和斑块纤维帽,其表达增加、活性增强可使斑块稳定性降低,导致斑块破裂[9]。有研究显示有临床急性缺血性脑卒中组患者颈动脉粥样斑块中的MMP9逆转录水平和蛋白表达水平明显高于无临床卒中事件组和正常颈动脉组[10],与文献[11]研究结果类似。结果提示MMP9可能是导致动脉粥样硬化斑块不稳定的主要因素。
他汀类药物为HMCoA还原酶抑制剂,其调脂作用肯定,并且可明显降低致死性和非致死性心血管事件的发生,从而广泛用于冠状动脉粥样硬化性心脏病的一级和二级预防[12]。瑞舒伐他汀是一种被摄入后易进入动脉内膜的抗氧化质,在改善高胆固醇血症患者的脂类水平方面,明显优于阿托伐他汀、辛伐他汀和普伐他汀[13],可极大程度降低心血管事件的发生率。有研究表明,瑞舒伐他汀可降低斑块体积,抑制巨噬细胞内脂蛋白的积累,降低主动脉弓的低密度脂蛋白与低密度脂蛋白的斑块比例[14]。
近年来,许多研究资料提出氨氯地平在不降低血脂及血压的条件下,能延缓AS早期斑块的形成,这一作用可能与其强亲脂性和细胞膜上精确定位有关。氨氯地平是L型CCB,除具有此型的特性外,还具有与此型通道无关的多效性。这种作用不仅仅表现为对心血管的保护作用,还体现对颈动脉的保护作用,通过抗炎、抗氧化应激和保护内皮功能等多种机制实现。
氨氯地平降低血压主要是依靠其对钙通道的调节,然而其抗AS的许多机制并不依赖于其对钙通道的调节作用。受损伤的内皮细胞高表达多种炎性因子,如细胞黏附分子、血管细胞间黏附分子和趋化因子等,而氨氯地平抑制这些因子的表达。单核细胞趋化蛋白 1 促使单核细胞和血管内皮细胞黏附、迁入内皮下,摄取脂质形成泡沫细胞是AS的早期病变。在抑制一氧化氮(nitric oxide,NO)致小鼠AS模型中,氨氯地平不仅抑制AS斑块处单核细化蛋白1的表达 ,而且下调小鼠外周血单核细胞上单核趋化蛋白1受体的表达和 Rho活性。PREVENT试验结果表明,与安慰剂相比,冠心病患者长期服用氨氯地平可使心绞痛和心功能衰竭发作减少,血管重建率降低[15]。氨氯地平抑制白介素1诱导基质金属蛋白酶1水平升高及其激发的内皮细胞溶胶原活性的增强,不仅影响酶的活性与表达,还能调节此酶组织抑制剂的转录,呈剂量依赖性抑制小鼠腹腔巨噬细胞MMP2和9mRNA的表达,这可能对稳定AS斑块,减少其破裂具有重要作用[16,17]。目前有研究表明,氨氯地平可以抑制单核细胞Lox1、MMP9的表达,从而起到稳定斑块的作用。
本研究探讨了单核巨噬细胞经oxLDL诱导后,MMP9 mRNA和蛋白的表达较未经oxLDL诱导的单核巨噬细胞显著增加,而使用瑞舒伐他汀联合氨氯地平进行干预,干预后MMP9mRNA和蛋白的表达较单独使用瑞舒伐他汀显著下降,并随着瑞舒伐他汀联合氨氯地平计量的增加,下降的愈加显著。且这种抑制作用随着瑞舒伐他汀联合氨氯地平剂量的增加而愈显著,并呈剂量效应关系。
本研究探讨了瑞舒伐他汀联合氨氯地平干预oxLDL诱导的单核巨噬细胞MMP9mRNA及蛋白表达之间的关系,通过实验证明瑞舒伐他汀联合氨氯地平可降低经oxLDL诱导的单核巨噬细胞MMP9mRNA及蛋白表达,且较单独使用瑞舒伐他汀抑制作用增强。考虑瑞舒伐他汀联合氨氯地平可能通过oxLDL途径抑制单核巨噬细胞表达MMP9,从而起到稳定粥样斑块和抗炎的作用,从而改善冠心病患者预后。但未对其细胞内信号转导的具体机制做进一步研究,需进一步研究探讨。
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暗示表白范文6
1、送男生灯是代表她对你来电,即代表这给对方光明与希望,也表示对对方的关心与亲近。
2、送灯代表着灯谐音为等.有等你的意思哦!也许是她暗示喜欢你,没在一起的,是希望男生表白;已经在一起的,是表示恩爱甜蜜,甚至想嫁给你呢。
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