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2、多去参加团体活动。孤独的原因很多时候是缺乏朋友,不放我们就积极的参加一些集体活动,这样容易结交很多朋友。朋友多了也就不会那么孤独了,每天与朋友联系,一起玩耍,一起聊天。这些都是容易消除孤独的。
3、看看书打打游戏。孤独的时候多看看书,打打游戏,做这些会让我们转移注意力,把注意力集中到所做的事情上,这样也就容易忘记孤独了。打游戏是一种不错的方式,当然也可以听听歌,看看电影,电视剧等。
4、不要忧虑。很多时候的孤独是来自忧虑,生活中我们要避免忧虑,忧虑会让人不开心,感到生活的迷茫,孤独也就随之产生了。避免忧虑就要学会乐观的生活态度。平时多去学习,培养乐观的生活态度。
5、成家立业。很多时候孤独感来自于单身太久了,而且对于事业也是一塌糊涂。这就需要依靠自己来解决了。成家立业,需要我们付出很多努力才能够实现,所以,不要偷懒,不要给自己找借口,努力让自己变得强大,拥有了属于自己的事业,家庭也会变得美满的。
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??小故事大道理??里面讲的虽然都是一些小故事,但是这可比讲1小时的“攻心为上”的大道理更重要。因为它里面不但有成功篇、心灵篇、幸福篇等多类故事,而且故事里还包含着意味深长的哲理。
书中有这样的一个故事:
有一个自以为是的青年人,毕业了以后一直找不到工作。他觉得自己怀才不遇,对社会感到十分失望。痛苦绝望之下,他来到了大海,打算用此来了解自己年轻的生命。
正巧这时,有一个老人来到了这里。老人问他为什么要走上绝路。他说:“我自己不能得到别人和社会的承认,没有人欣赏并且重用我,我的人生已经没希望了。”
老人从地上捡起了一粒沙子,然后把它扔到地上,对他说:“把这粒沙子捡起来。”
“这根本不可能的!”年轻人大声地说。
老人没有说话,只是笑了一笑,接着从口袋里掏出一颗晶莹剔透的珍珠,也把它扔到地上,又对它说:“你能把它捡起来吗?”
“这当然可以!”
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这是那样一群人,为了一份属于自己的净土,甘愿放弃物质上的满足,这就是世世代代生活在特里斯坦?达库尼亚岛上的一群朴实勤劳的人们。在这里,没有高科技物质的需求,也只是一个相对于其他城市落后的岛屿,但是,一群生活在哪儿的所有人们都一直躺在这一个大家庭的怀抱中,他们自食其力,勤劳,也只是依恋着这座“世界上最孤独的小岛”,因为这里是他们永远的家。
在这里,似乎一切都是温暖的,无论生活再艰苦,他们始终爱着这座小岛,爱着他们那温馨的家。
读罢,我恍惚间掉下几滴泪珠,大概是我想家了吧!我的家乡离这里很远,但是我和家紧紧地系在一起,就像铁锁和铁链般那样。我很小就离家了,但是我一直放不下属于我自己的家,毕竟他曾经给予过我温暖的怀抱。因为有家,我幸福。它是世上最富有的王国,最温馨的地方。家,对于我们所有人来说,都是一个温馨的字眼。而自从有了家这个词,也就有了相应的漂泊,漂泊的终点却是找到自己心灵的乐土??回家。的确,难怪有人说,萍水相逢,尽是他乡之客。“回首家山三千里,望断南天无雁飞”明确表达了多少人的思乡之情。李白再飘逸,也会低头思故乡;杜甫再无私,也知道家书抵万金;辛弃疾半夜里挑灯看剑,沙场秋点兵,也只是想光彩地回到幸福的家;李后主有恰是一江春水向东流的愁思,也只是对南唐故土一席安馨的怀念封建时代的文人们或许是因为前途,或许是因为战乱,或许是因为其他的原因,常常漂泊在崇山峻岭里,斜阳古道下,但当他们看到城市里的万家灯火与大江上的零星渔光,或者看到芜山野岭的数缕轻烟,又怎么能不忆起美好的家,涌出万般感慨呢?日暮乡关何处是,烟波江上使人愁!
为何,我们不去珍惜自己的家呢?我们满腔热血,可是家依然是我们那份牵挂啊。不变的,是恋家情,我们无论在哪里,都不能忘记家啊!不变的爱恋,是留给家的;永远的眷恋,是属于家的。我感同身受,离家如此之久,是得回家看看了。
在我看来,“家”是一种与生俱来的情结,在平常时无从察觉,到陌生处全涌上心头。家,故乡,是一个人一辈子无法消去的烙印。长大了,总要离家这时的家的感觉再不是妈妈不胜其烦的唠叨,而升华成一种记忆,一种气味,在他乡不如意时蒙上眼帘的一层雾。
“家是温暖的港湾,是我们永远的归属地”。
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有一次,妈妈给我买了一本书,名字叫《小故事,大道理》。妈妈对我说:“你读了这本书以后,一定会喜欢上它的。”听了妈妈的话以后,我就赶紧读起了这本书。
看了这本书以后,我明白了,一件小小的事中,可以领略到一个非常大的道理。我明白了真善美,假恶丑。我还懂得了我们生活在这个世界上,一定要有爱心、友谊、乐观、自信、理想、目标、智慧、奋斗、勇气、宽容、理解、美德、责任。啊!这是一本多么好的书,它告诉了我们很多在课本里学不到的知识。我想:我一定要珍惜好这本书。
从那以后,我一拿到这本书,心里就有说不出的兴奋……
山西省太原市清徐县职工子弟二校五年级一班 侯翔
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纳契本是一条被抛弃了的军用犬,但是因为它的坚强与不退缩,是他当上了犬王。在生活中,很多人碰到一点小的挫折就会退缩,看过《孤岛野犬》后,我明白不管遇到了多大的挫折,都要坚强的面对困难,不退缩。下面为大家精心整理了一些关于《孤岛野犬》读后感,请您阅读。
《孤岛野犬》读后感1《孤岛野犬》是日本著名作家椋鸠十的著作,这本书讲述了在一个孤岛上三个关于野犬的故事。
椋鸠十笔下的《孤岛野犬》中,我最喜欢的是野犬“纳契'的故事,书中描写生动有趣,野犬的形象栩栩如生,仿佛把你带入了这座海边孤岛,有一种身临其境感觉。在《孤岛野犬》里,原本所饲养﹑训练的一群狼犬,因为军队撤退而被遗弃了。他们没有野外生存能力,被一群野狗所攻击,逐一被撕咬吞食。唯有“纳契'生存下来,他凭着以往的训练及勇敢和智慧,迎接各种挑战,后来成为野犬之王。
椋鸠十总是把故事写的非常好看,好读,把一个感人至深的故事写得浅显易懂。就像许多寓言故事一样,故事明了,道理深刻。《孤岛野犬》作者不仅仅描写的是野犬,更深刻的述说了一个道理:在困难面前,在挫折中,更要有坚韧不拔的精神。
在困难面前,是要努力向上呢?还是退缩不前呢?其实古往今来,有很多名人用他们的行动和成就为我们选择了答案。当我们读起《假如给我三天光明》时,书中海伦.凯勒所遭遇的不幸和面对的巨大困难震撼着我们的心灵,但她那不屈不饶的奋斗精神又给我们的留下了十分深刻的印象。我国汉代的司马迁在经受刑罚和牢狱之灾的磨难中没有放弃,以人们难以想象的精神和毅力,写出了名垂千古的历史巨著《史记》。世界著名数学家华罗庚,年轻时期因病造成左脚终身残疾,但他没有灰心丧气,而是把痛苦与艰辛统统抛在脑后,用勤奋和智慧一心在数学王国的海洋中劈波斩浪。无数的事例告诉我们在困难面前在挫折中,要勇敢,坚韧的去战胜它。
每个人都会遇到各种各样的困难,有学习上的困难、有生活上的困难。比如学习中遇到难题,当你绞尽脑汁想出一道又会有一道,当请教老师弄懂了一道又碰到另一道。这时就觉得苦闷、烦躁。有时写作文,总会是无从下笔不知写什么好,心里着急上火可就是写不出来。还有成长中遇到的挫折,生活中遇到的困难等等,最终都要靠自己去解决。“困难与折磨对于人来说,是一把打向坯料的锤,打掉的应是脆弱的铁盾,锻成的却是锋利的钢刀"。面对困难和挫折决不能退缩、逃避和抱怨,而是要勇敢面对,用坚韧和智慧去解决它。在学习中,不懂的就要多问,遇到问题要多思考,要背的内容一定要下功夫背出来,要练习的题目就应该多练习。不好的地方就要努力多做,一直到做好为止。
克服困难,战胜挫折,就像上山登台阶,只要坚持不懈,坚韧不拔就一定能到达顶峰。
《孤岛野犬》读后感2近期,我读了一本书,这本书就是《孤岛野犬》。非常好看,里面的故事内容,别说有多精彩了,这本《孤岛野犬》是我最喜欢的一本动物小说了,我很乐意推荐这本书给大家看,希望这本《孤岛野犬》对你,对他人都有益处。
《孤岛野犬》说的是甑岛浮于东海之上,是属于鹿儿岛闲的一座孤岛,里面一直住着令人感到惧怕的野狗群。它们像狼一样,常常成群结队的袭击家畜,村民们经常不胜其忧。
《孤岛野犬》向我们诉说了三位野犬之王:纳契、亚玛和阿卡。
纳契是一条勇敢、强壮又漂亮的狼狗,它不仅勇敢、强壮、漂亮,他还很聪明哩!它会跳高、跳远、攀爬,这些是普通狗做不到的,因为纳契是一只军用犬,所以,这些高难度动作,它样样精通,它还会巧用战术,因为被主人抛弃,它只好在野外生活,靠自己活下去,最终,以自己的聪明才智存活下来,并当上了前所未有的`野狗之王。
亚玛和阿卡都是一条野性十足的野狗,后来被人类收养,但因为它们总是伤害人或家畜,所以,它们才不得不与主人“骨肉分离”,回到大自然的怀抱,这让它们成了野犬之王。
这本《孤岛野犬》里,上演了一幕幕的悲剧和欢喜,让人情不自禁的读起来,书中感人的地方躲着呢!祝你看得开心 。
《孤岛野犬》读后感3假期里,我读了非常有趣的动物小说《孤岛野犬》,《孤岛野犬》的作者是日本鸠十,他是日本有名的动物小说家,儿童文学家,他写的同类的书还有《山大王》、《月轮熊》。
《孤岛野犬》这本书讲的是在日本的鹿儿岛上有一个叫三吉的小贩和野狗亚玛的传奇经历。亚玛是条凶猛的野狗,在掉进陷阱被三吉救出,三吉收养了亚玛并驯服了它,从此三吉和孤僻的亚玛就建立了深厚的感情。
在一次冒险的时候,三吉遇到狼群的袭击,亚玛和狼展开了殊死搏斗,亚玛因此受伤,这样他俩的感情就加深了。有一天,亚玛遇见了让它中了陷阱的青年,亚玛立即扑了过去,把青年咬昏了过去,警方知道了以后就叫三吉把狗杀死,万般无奈下,三吉决定将亚玛放走,最后在一个孤岛的海边把亚玛放走了。
几年之后,三吉突然很想念亚玛,他跑回孤岛,但是在森林没有找到亚玛,正当他在回家的路上,一大群野狗包围了他.....突然野狗队伍中传出嚎叫声音,野狗的首领来了,它久久地凝视着三吉—原来是亚玛,它已经是野狗的首领,亚玛认出了三吉,并放过了三吉后头也不回的地跑回茫茫的森林。
这篇让人最感动的地方是,在三吉准备放亚玛回森林,无论三吉怎样打亚玛,亚玛的眼眶里充满泪水,悲伤地看着三吉,被三吉放了几次后都跟了回去,最后三吉只得偷偷地把亚玛抛弃在孤岛上。看到这里,我的心里充满了悲伤,为三吉,为亚玛,他们之间深厚的友谊打动了我,他们互相信任,互相关心,迫于压力被分开,但他们互相思念着,我被深深感动,无论人和人之间,还是人和动物,友谊是多么可贵啊,我们一定要珍惜。
《孤岛野犬》读后感4最近读了《孤岛野犬》,感受到了很多不一样的温情。
它是一个忠诚的野犬,它是一个聪明机智的野犬,它是一个分的清是非的野犬。在孤岛野犬这本书里,讲述了它一个个离奇而惊险的故事。
在鹿儿岛附近,有一个名叫三吉的小贩。有一次,当他再次去鹿儿岛做生意时。他发现两个年轻人抓到了一条好狗。于是,三吉就把它买了下来。三吉对它照顾的无微不至,渐渐的,他与狗渐渐的熟悉了,并给它取名叫亚玛。它简直就成为了三吉的亲人。
三吉每天都带着他去一起买东西,一起玩耍。可是,好景不长。有一天,三吉正与别人谈话时,亚玛碰见了把它抓住的年轻人。狠狠地咬了过去,结果,年轻人住了三个星期的院。村里人都想把亚玛给杀掉,而三吉却毫无办法。想让它重归大自然,可是亚玛却不舍得。于是,三吉想了个万无一失的办法,把亚玛放到了野外。
读了这本书,我觉得亚玛非常的忠诚,它不肯离开自己的主人,它每天都帮着三吉干事情,而且,它还救了三吉一条命。它机智勇敢,当他独自一人的面对两条野狗,它采取战术,咬对方的交心,把两只凶猛的野狗给赶跑了。看看我平时的表现,我经常把爸爸妈妈的话当成耳旁风。而且,爸爸妈妈的说的话有时我也不听从,还和他们吵架,比起亚玛来,我的做法可真是差远了!
这本书让我明白了很多的道理,从今天起,我要更加爱我的父母。
《孤岛野犬》读后感5《孤岛野犬》这本书是日本著名作家椋鸠十的作品。这本书讲了三个不同的故事,分别是《王者之座》、《消逝了的野狗》和《岗丘的野狗》。
甑岛浮于东海之上,是属于鹿儿岛县的一座孤岛。而这座岛上一直住着野犬群。这些野犬有着原始的野性,常常袭击村庄里的家畜,村民们经常不胜其扰。《孤岛野犬》讲了野犬群中的三个野犬王:纳契、亚玛和阿卡。
纳契是一只勇敢、聪明并且强壮的军用犬,因为士兵撤离时并没有带走它和他的同伴,所以它只好在野外生活,因为野犬的攻击,军用犬一只只的减少,最后只剩下纳契一只,纳契只好加入野犬群,经过一番苦战,纳契加入了野犬群,还成为了犬王。而亚玛和阿卡都是野犬,被主人收养后因为无法在村里生活,只好在主人的逼迫下重新回到了大自然。
纳契本是一条被抛弃了的军用犬,但是因为它的坚强与不退缩,是他当上了犬王。在生活中,很多人碰到一点小的挫折就会退缩,看过《孤岛野犬》后,我明白不管遇到了多大的挫折,都要坚强的面对困难,不退缩。
《孤岛野犬》读后感6这本书主要写了三个部分。第一部分王者归来,让我感动最深的是:士兵丢下了那50只精良的狼犬,它们被人类排挤,还让山里的野狗引出几只吃完了,最后只剩下一只狼狗了,它叫纳敖,它一看同伴死完了很伤心。我觉的人类不应该让狼狗们独自在外面,士兵走了,当地人应该领养几只。因为狼狗们已经习惯了食来张口,所以人们应该多包容一下狼狗,不能让他们再被人类打了。
第二部分“消逝的野狗”。这一部分最让我感动的是因为名叫三吉的小贩非常有同情心。
第三部分是本书中最让我感动的一部分,名字叫岗丘上的野狗,其中最最让我感动的是:阿卡在地板下不出来,怕被抓到、而他是被人类给误会了,别人都认为是阿卡偷的牲口,但是人们万万没有想到的是阿卡不是元凶,是另一个村里的无赖干的事。阿卡那么听话,那么可爱。我觉的人们要把事情搞清楚之后再来处置凶手呀!
这一本书让人感到亲近,就像看连续剧一样,自己的心跟着书中的情节人物等跌宕起伏,时高兴,时伤心。
《孤岛野犬》读后感7读了《孤岛野犬》中的“岗丘的野犬”后,我觉得这篇文章不错,介绍给大家。
这篇小说主要讲的是东海甑岛上的一只聪明的野狗经过十多天的仔细观察,最终认为农民松吉是一个可以信任的人,松吉也非常喜欢这条懂事的野狗。并且给这只野狗取名为“阿卡”。阿卡白天陪松吉一起干活,晚上跟他一起回家,住在他家里。他俩成为一对亲密的好朋友。阿卡到松吉家一个多月后,发生了一件事:村里的鸡呀,兔啊,接二连三的失踪了,村里的人本来就怕野狗,这下子都认为是阿卡干的,阿卡无缘无故地成了祸害鸡兔的罪犯了。
村长和村警命令松吉把阿卡杀死。尽管松吉很爱阿卡,想保护阿卡。最后还是被负责人逼迫下,把一只有毒的鸡抛给了阿卡,出于对主人的信任,阿卡舔了一口鸡内脏,结果中毒了!它跌跌撞撞地逃回了养育它的森林里。
过了一年左右,在村子里偷鸡兔的“犯人”找到了---原来是住在山对面村子里的无赖汉干的。
读了这篇小说,我有两处感想:
1、我们不能毫无证据地怀疑一件事物干了坏事,这样做可能让好人受到冤屈、伤害。
聪明、可爱的阿卡就是被这种无缘无故怀疑的可怜受害者。
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(1.长江大学农学院,湖北 荆州 434025;2.福建农林大学植物病毒研究所,福州 350002)
摘要:褐飞虱(Nilaparvata lugens Stal)可携带多种病毒,其中褐飞虱呼肠孤病毒(Nilaparvata lugens reovirus, NLRV)和水稻锯齿叶矮缩病毒(Rice ragged stunt virus,RRSV)均为dsRNA基因组的呼肠孤病毒。通过接种、dsRNA小量提取及RT-PCR等方法分析NLRV对RRSV传播和增殖的影响,初步探讨这两种呼肠孤病毒之间的关系。结果表明,褐飞虱携带NLRV比率高低影响褐飞虱接种RRSV效率;携带NLRV的褐飞虱种群接种RRSV后两种病毒的含量差异较大,NLRV的含量远远大于RRSV的含量,推测褐飞虱体内的NLRV某种程度上干扰了RRSV的传播和增殖。
关键词 :dsRNA病毒;褐飞虱呼肠孤病毒;水稻锯齿叶矮缩病毒
中图分类号:S432.1 文献标识码:A 文章编号:0439-8114(2015)05-1090-04
DOI:10.14088/j.cnki.issn0439-8114.2015.05.015
收稿日期:2014-06-06
基金项目:长江大学大学生创新创业训练计划项目(2013022);国家自然科学基金青年基金项目(31301638)
作者简介:蔡振政(1992-),男,广东韶关人,在读本科生,研究方向为植物保护,(电子信箱)164397952@qq.com;通信作者,章松柏(1978-),男,湖北黄梅人,讲师,博士,主要从事植物病毒监测和分子病毒学的研究,(电话)18972361635(电子信箱)yangtze2008@126.com。
病毒学研究往往多集中在单一病毒的诸多特性方面,对寄主或介体体内病毒与病毒之间,病毒与其它生物之间的复合感染以及复合感染所引起的生物学现象关注较少[1,2]。越来越多的证据显示病毒的复合感染是一种极其普遍的现象[3]。病毒的复合感染可以减轻或加重某种病害的发生,这主要取决于病毒之间的协同或拮抗或竞争等关系[4-7],根据这种关系可以解释病害加重或减轻发生的原因,从而采取相应措施控制病害的发生[8]。褐飞虱(Nilaparvata lugens Stal)也可以携带多种病毒,其中褐飞虱呼肠孤病毒(Nilaparvata lugens reovirus,NLRV)和水稻锯齿叶矮缩病毒(Rice ragged stunt virus,RRSV)均为dsRNA基因组的呼肠孤病毒[9]。NLRV是斐济病毒属(Fijivirus)成员,可以经卵传播给后代,同时还可以通过水稻传染给不带毒的褐飞虱,但病毒在水稻内不复制[10-12];RRSV是水稻病毒属(Oryzavirus)的成员,由褐飞虱持久性携卵而引发水稻锯齿叶矮缩病,并随着褐飞虱的长距离迁飞而传播扩散[13-18],两种病毒之间的关系未知。与褐飞虱一样,白背飞虱也是南方稻区最重要的稻飞虱之一,危害水稻和传播水稻病毒(南方水稻黑条矮缩病毒,Southern rice black streaked dwarf virus,SRBSDV)。但白背飞虱携带和传播SRBSDV的效率极高[19,20],这可能是SRBSDV易造成爆发和大面积流行的原因之一;而褐飞虱携带和传播RRSV的效率都较低,因此推测可能是水稻锯齿叶矮缩病一直仅限于局部地区流行的原因之一。导致褐飞虱携带和传播RRSV效率都较低的原因及与NLRV等病毒的关系一直是研究者比较感兴趣的问题。基于此,通过接种、dsRNA小量提取和RT-PCR等方法,初步研究NLRV对RRSV传播和增殖的影响,为深入研究这两种病毒间的关系奠定基础。
1 材料与方法
1.1 试验材料
植物材料:水稻锯齿叶矮缩病病株于2010年采集于福建省龙岩市发病田间,鉴定后隔离种植;接种水稻品种为水稻锯齿叶矮缩病感病品种Ⅱ优航2号。
昆虫介体:褐飞虱群体2010年采集于福建福州市郊区无水稻锯齿叶矮缩病发生的田块,并经过鉴定后于实验室网箱中饲养。
1.2 生物学接种
1.2.1 褐飞虱饲毒 采用两种饲毒RRSV的方法。第一种方法是抓取网箱中饲养的二龄若虫于病株上饲毒,第二种方法是模拟自然条件下,抓取网箱中饲养的雌性褐飞虱成虫在病株上产卵,卵孵化成若虫后直接在病株上饲毒。饲毒后的介体度过循回期(29 ℃下循回期平均为7.6 d[21,22])备用。
1.2.2 单管单苗接种 选择饲毒后度过循回期的褐飞虱成虫(每种方法40头,重复3次)进行单虫单管单苗生物学接种,接种水稻苗处于2叶1心期(下同),传毒8 d,然后将传毒成虫低温保存,接种苗每24 h换一次,接种苗按编号种植于防虫温室内。
1.3 快速小量提取dsRNA
介体昆虫体内的dsRNA参照食用菌病毒dsRNA的提取[23]。方法如下:选用褐飞虱100~200头,用液氮研磨成粉末;加入0.7 mL 2×STE和0.7 mL酚/氯仿/异戊醇(25∶24∶1)抽提处理,离心后取上清液,将上清液配制成含17%乙醇的溶液;注入含17%乙醇的1×STE溶液平衡过的纤维素(CF-11)中,充分混匀,离心后去上清,再用含17%乙醇的1×STE溶液反复洗涤3~4次;最后用不含乙醇的1×STE洗脱,洗脱液经过异丙醇沉淀和75%乙醇漂洗,沉淀即为dsRNA,干燥后溶于RNase-free的水中。dsRNA产物经1%琼脂糖凝胶电泳,EB染色后BioRad凝胶成像系统观察记录。
1.4 RT-PCR法检测褐飞虱介体带毒率
取传毒后低温保存的成虫各24头,用RT-PCR法检测褐飞虱携带两种病毒的情况,RRSV和NLRV两种病毒的dsRNA作为阳性对照。RRSV的检测引物为P9F/P9R(P9F:5′-ATGAAGACTGCCTTTGCCA
GA-3′,P9R:5′-CTACCCCGAGG CCTTCTGAGA-3′),根据泰国分离物S9片段(NC_003757)设计,扩增片段大小为1 017 bp;NLRV的检测引物为N8F/R(N8F:5′-AATCACTCATTGAACAAGGA TGGACG-3′,N8R:5′-CTACCAACCCAGTCGGTCCTTCAAATA-3′),根据已发表的NLRV S8的序列,扩增片段大小为560 bp[24]。单头褐飞虱总RNA采用Trizol试剂盒(北京天根)提取,参照说明进行,最后用20 μL的无核酸酶灭菌水溶解。反转录按照反转录试剂盒(Fermentas)说明进行操作。PCR反应体系按照TaKaRa的rTaq酶使用说明进行,反应程序为:94 ℃变性4 min,35个循环的扩增(94 ℃ 30 s,55 ℃ 30 s,72 ℃ 45 s),最后72 ℃延伸10 min,产物经1%琼脂糖凝胶电泳,EB染色后BioRad凝胶成像系统观察记录。
2 结果与分析
2.1 生物学接种结果
两种饲毒方法获得的褐飞虱成虫单管单苗生物学接种结果见表1。从表1中得出,能够传毒的褐飞虱成虫分别占试验成虫总数的22.50%、50.00%;生物学接种320株水稻分别有24株、44株发病,发病率为7.50%、13.75%。
2.2 褐飞虱体内dsRNA的提取和检测结果
收集接种RRSV和未接种RRSV的褐飞虱种群,提取并检测褐飞虱种群体内的dsRNA情况,以协助了解介体体内的带毒情况以及dsRNA病毒种类。经过反复试验,从褐飞虱体内提取dsRNA以0.2~0.3 g为宜(100~200头)。图1是褐飞虱(100-200头)体内的dsRNA,从其dsRNA基因图谱中可清晰地看到褐飞虱体内存在NLRV,饲毒RRSV后体内的病毒除了NLRV外,还有RRSV,但两种病毒的含量差别较大,NLRV含量远大于RRSV。
2.3 褐飞虱介体带毒率
由图2可知,在方法1和方法2中,24头成虫中携带RRSV分别有13头和18头,带毒率分别为54.17%、75.00%,带毒率差异较大;而携带NLVR分别为23头、24头,带毒率分别为95.83%、100.00%,带毒率差异较小。
3 小结与讨论
生物学接种试验和褐飞虱带毒率检测结果表明,在方法1中,使用二龄若虫饲毒RRSV,度过循回期后成虫带毒率为54.17%,带毒且能够传毒的成虫为42.85%,这些数据与以往报道的数据相符合[13,21,25,26];在方法2中,模拟自然条件下在病株上产卵、饲毒和度过循回期后,带毒率较高,成虫带毒率约为75%,带毒且能够传毒的成虫约为50%,这些数据皆比以往报道的数据高一些[13,21,25,26]。两种方法不同点之处在于饲毒RRSV时褐飞虱携带NLRV的差异。NLRV可以经卵传播,经卵传播比率为15%[10,12],在方法1中,卵孵化成若虫后携带NLRV的比率低于15%,多数介体首先接种的是RRSV;而室内饲养的褐飞虱种群带毒率一般都在90%以上[10,24]。在方法2中,二龄褐飞虱若虫在饲毒RRSV之前多数都携带了NLRV。因此,根据生物学接种和褐飞虱带毒率检测结果初步推测NLRV能在一定程度上影响褐飞虱生物学接种RRSV以及褐飞虱的传毒效率。此外,NLRV和RRSV都是褐飞虱体内增殖性病毒[12,15],但两者同时存在时,NLRV的含量远远大于RRSV(如图2),这也说明NLRV可能某种程度上干扰了RRSV在体内的增殖。褐飞虱是一种典型的迁飞性害虫,每年春季或夏季由南向北迁移、秋季由北向南回迁,在中国境内分布范围几乎覆盖全境,褐飞虱一旦带毒,则可以将水稻锯齿叶矮缩病毒传进迁入地区[13,14,16-18]。水稻锯齿叶矮缩病首先发现于菲律宾和印度尼西亚,并于20世纪70年代末在日本、印度及东南亚一些国家局部地区引起水稻大面积减产[13-15];在中国该病自1978年以来,先后在台湾、福建、广东和江西等省发生流行,对水稻生产造成了一定的影响[15,21,25]。但相对于白背飞虱传播的水稻南方黑条矮缩病毒病等大面积流行病害来说,水稻锯齿叶矮缩病一直仅限于局部地区流行,危害程度远不及水稻南方黑条矮缩病毒病[20,27],具体原因鲜见报道。本研究发现NLRV可能某种程度上干扰了RRSV在褐飞虱体内的增殖以及传播,从病毒与病毒之间的拮抗方面初步分析了NLRV的存在可以减轻水稻锯齿叶矮缩病的发生和流行,从某种程度上解释了水稻锯齿叶矮缩病一直仅限于局部地区流行的现象。
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