囊萤映雪范例6篇

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囊萤映雪范文1

1、原是车胤用口袋装萤火虫来照书本,孙康利用雪的反光勤奋苦学的故事。后形容刻苦攻读。

2、【出自】:元·贾仲名《萧淑兰》第一折:“虽无汗马眠霜苦,曾受囊萤映雪劳。”“囊萤”典出《晋书·卷八十三·车胤传》,“映雪”则出自《孙氏世录》。

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囊萤映雪范文2

胆囊癌(carcinoma of the gallbladder)70%~90%为腺癌,少数为鳞癌[1-2]。胆囊癌的发病率,女性明显大于男性,肿瘤好发于在胆囊底部或颈部,常有胆囊炎和胆结石[3,5]。80%呈浸润性生长,胆囊壁环形增厚;20%呈状生长突人胆囊腔[4,6]。肿瘤增大,可占据整个胆囊,形成软组织肿块,并侵犯周围肝组织。临床上主要表现为:右上腹持续性疼痛、黄疽、消瘦、肝大和上腹部包块[5,7-8]。胆囊癌的诊断困难,易出现误诊的情况,其诊断很大程度上依赖于影像学检查、,临床上常用的影像学诊断有X线、超声、CT、MRI、检查。

影像学表现

X线检查:胆囊癌侵犯胆管,PTC出现胆管不规则狭窄、充盈缺损及胆道梗阻。动脉造影,进展期胆囊癌,可显示胆囊动脉增粗,受压移位,血管受侵不规则、狭窄,甚至闭塞。肿瘤内可见肿瘤血管和肿瘤染色。胆囊造影或逆行胰胆管造影可显示胆囊外形不规则或胆囊内充盈缺损。

超声表现:B超显示厚壁型胆囊癌囊壁常呈局限性增厚,呈结节状向腔内突起,形态不规则,囊腔透声区缩小。晚期囊壁普遍增厚,囊腔缩小呈实性化、团块状回声,内壁粗糙不规则,囊壁外壁不光整,可向周围组织浸润。慢性胆囊炎囊壁常普遍增厚,急性发作时呈“双层征”,囊内可有散在点状回声,且常伴发结石,透声差;囊壁内膜比较连续、光整,无向周围浸润的征象。近期随访无明显改变。

CT检查:胆囊大多扩张不良或缩小,也可扩大。肿瘤表现为三种类型:胆囊壁增厚型,胆囊壁呈广泛性或局限性不规则增厚,若周围粘连,则可见胆囊皱褶变形。增强扫描显示为增厚的壁强化;结节型:胆囊腔单发或多发胆囊内壁结节状或状肿块,肿块基底部胆囊壁增厚,增强扫描病变明显强化;肿块型,胆囊腔全部被肿瘤所占据,囊腔消失,形成软组织肿块,与周围肝组织呈低密度或不规则密度,少数呈等密度,同时可见胆管受压、不规则狭窄和上部扩张,增强扫描肿瘤及其局部胆囊壁明显强化。CT检查若胆囊不显示,应进一步检查以排除胆囊癌。急性胆囊炎患者必要时也需做CT检查。它除可发现胆囊管或胆囊结石外,也可发现隐匿性胆囊癌,诊断主要依据:①胆囊扩大;②胆囊壁普遍性增厚,且增强扫描时可见胆囊明显强化。这两种现象对确诊缺一不可。

MRI检查:与CT表现相似,表现为胆囊壁增厚、胆囊内实质性肿块。

T1WI肿块周围的肝实质可形成不规则高信号带,提示肿瘤侵犯肝脏。同时显示淋巴结转移和胆道扩张。

检查方法比较

传统的X线胆系造影检查,对本病的术前诊断已无多大的临床价值,目前已很少用。超声与CT检查是目前胆囊癌最常用的影像学检查方法。B超检查具有费用低,超声检查无损伤,可反复、不同的检查等优点。CT检查对病变的检出率高于超声,可以消除因患者呼吸不均而遗漏的小病变,而且还可以用高压注射器进行增强薄层重建扫描、观察病变的动脉期、平衡期,静脉期的CT表现,能更进一步提高诊断正确率。尤其是CT检查对病灶侵犯周围组织和后腹膜淋巴结转移比B超检查有明显的优势,对病变的TNM分期及对病变的治疗方案的制定有重要价值。而MRI及MRCP可从多方位显示肿块。 鉴别诊断

已经波及周围肝实质的肿块型胆囊癌,易与肝癌混淆。但胆囊癌引起的胆道侵犯,扩张比较明显。相反肝癌引起的胆管侵犯胆道扩张较轻,同时容易发生门静脉侵犯和癌栓。

胆囊壁增厚的胆囊癌还需与胆囊炎鉴别,胆囊壁明显不规则增厚,增强扫描CT明显增强,明显的胆道扩张,周围肝实质侵犯和肝内转移则支持胆囊癌诊断。因胆囊扩大也可见于胆道梗阻,或正常胆囊炎因增厚的胆囊壁而呈结节状,可给人以胆囊癌的现象。故其鉴别诊断需结合临床症状。化脓性胆囊炎胆汁CT值可大于20HU。胆囊周围炎,胆囊壁与肝实质界面不清或于胆囊周围显示为低密度环,系由肝组织继发性水肿所致。若系胆囊穿孔,胆囊窝部可出现有液平的脓肿。气肿性胆囊炎则于胆囊内或壁内出现气影。胆囊癌往往伴有胆囊结石,如无胆石存在,CT难以肯定胆囊缩小是生理性抑或病理性收缩。如胆汁钙化或胆囊壁钙化而形成所谓“瓷器胆囊”,则支持胆囊炎诊断。若造影显示壁厚且扩张不良的胆囊不显影,而胆管却良好显影,可肯定为慢性胆囊炎。

参 考 文 献

[1] 吴恩福,郑祥武,陈学荣. 原发性胆囊癌的CT诊断与B超检查结果比较. 中国临床医学影像杂志,1999.10(6):418-420 .

[2] 薛长林,薛腊梅. 原发性胆囊癌56例临床分析. 实用癌症杂志,1997.12(3):198-199 [3]刘国礼.胆道外科某些问题的现状.国外医学外科分册,1983,3:129.

[4] 卢延,孔庆文,田宗皎,等.胆囊癌的CT诊断.中华放射学杂志,1994,2:97.

[5] 周康荣主编. 腹部CT.上海:上海医科大学出版社,1993.73-76.

[6] 沈玉英,李昌彪. 胆囊癌的CT诊断. 影像诊断与介入放射学,1994.3(4):226-228.

囊萤映雪范文3

关键词: 利脉胶囊;东莨菪碱;跳台实验;学习记忆;Morris水迷宫实验

      老年痴呆是老年人致残最严重的疾病之一,主要表现为认知功能的下降和丧失。随着人口的老龄化,痴呆患者日益增多,给家庭和社会带来沉重的负担。因此寻找改善学习记忆障碍及具有促智作用的药物,成为当今国际医药界的重要研究课题。利脉胶囊每粒含阿魏酸钠 50mg、乙酰水杨酸(阿司匹林) 20mg、桂利嗪(脑嗌嗪)25mg、维生素B1 10mg。本品4种成分经组方后有协同作用,具有较强的抗血小板聚集、实验性血栓形成等作用[1]。本研究则进一步观察利脉胶囊对东莨菪碱所致小鼠学习记忆障碍及正常小鼠空间学习记忆的影响,为其作为抗痴呆药物用于临床提供理论和实验依据。

    1  材料与方法

    1.1  药品和仪器

    利脉胶囊(丽珠集团利民制药厂,批号070702),氢溴酸东莨菪碱(上海禾丰制药有限公司,批号071202)。小鼠光电刺激仪(ZH200型,安徽淮北正华生物仪器有限公司),Morris水迷宫(成都泰盟科技有限公司),电子精密天平(日本产1472CHA型)。

    1.2  跳台试验

    健康小鼠60只(体质量20~25g),雌雄各半,随机分为正常对照组、东莨菪碱模型组、利脉胶囊治疗组(140mg/kg,ig qd×14),每组20只。利脉胶囊治疗组每天按既定剂量给药,正常组和模型组灌以等容积生理盐水。第14d小鼠灌胃给药后1h,模型组及利脉胶囊治疗组小鼠均腹腔注射东莨菪碱3mg/kg,正常组腹腔注射等量生理盐水,10min后进行跳台试验。 试验装置为一28cm×13cm×34cm的被动回避条件反射箱,用不透明黑色塑料分隔成两间,箱底有铜栅,间距为0.5cm,可通36V交流电。每一间右后角置一6cm×6cm×3cm 的平台作为动物回避电击的安全区。造模10min后先将动物放入箱中适应环境3min,然后将动物置于铜栅上立即通电。此时小鼠正常反应是跳到安全区以躲避电击。多数小鼠可能从安全平台再次或多次跳至铜栅上,受到电击后又迅速跳回平台。记录小鼠跳上平台后3min内从平台跳至铜栅上的次数(即错误次数),以此作为学习成绩。24h后将小鼠放至平台,记录第1次跳下平台的时间即为触电潜伏期和5min内的错误次数作为记忆成绩。如果5min时小鼠未跳下平台,错误次数记录为0次,潜伏期记为300s。

    1.3  Morris水迷宫测试

    健康小鼠40只(体质量20~25g),雌雄各半,随机分为正常对照组及利脉胶囊组(140mg/kg,ig qd×20),每组20只。利脉胶囊组按既定剂量给药,正常对照组灌以等容积蒸馏水。给药后14d,进行Morris水迷宫实验,连续6d。

    Morris水迷宫主要由一个圆形水池和自动录象及分析系统两部分组成。小鼠的水池高30cm,直径 80cm,站台直径5cm,分为4个象限。预先在水池中注入清水,水温控制在(22.0±0.5)℃,加入适量奶粉使水呈乳白色,与站台表面白色相近,使小鼠不能看到站台。每只小鼠头部涂以黑色。水面高出站台表面0.5cm。在水池上各象限标定相同一点作为每次实验小鼠的入水点。站台置于离入水点较远的象限中间,实验过程保持站台位置不变。

  实验分为3部分:① 学习训练:第1d让小鼠自由游泳2min以熟悉迷宫环境;从第2d起开始训练。将小鼠头朝下面向水池壁依次从NE、SE、SW、NW 4个象限投入水中,每次游泳时间设定为120s。小鼠每次找到平台后,让其在平台上站立20s,巩固记忆,然后将其置于鼠笼休息1min。若小鼠在120s内未爬上安全平台,结束本象限实验,潜伏期记为120s。同时操作者将其引向平台,停留20s后置于鼠笼休息1min再进行下一象限实验。记录从入水点到达站台所需时间以及在这段时间内的游泳路程和经过平台的次数。每次训练4个象限,连续4d。② 定位航行实验:用于测量小鼠对水迷宫学习和记忆的获取能力。在学习训练结束后第6d进行,将小鼠从某一固定象限如前操作投入水中,记录找到平台的时间为逃避潜伏时间(escape latency,ST)。若120s内找不到平台者,ST记为120s。③ 空间探索试验:在定位航行试验后进行,撤走安全平台,将小鼠从某一固定象限如前操作投入水中,记录大鼠30s穿过平台所在位置的次数和在水池中的游泳路径。

    1.4  统计分析

    采用SPSS 12.0软件进行统计分析。所有数据以±s表示。多组间均数比较采用oneway analysis of variance (ANOVA)及Fisher LSD test(Leastsignificant difference)分析, P<0.05 有统计学差异。

    2  结  果

囊萤映雪范文4

1 材料与方法

11例中除1例Caroli氏病为临床影像学综合诊断外,余 10例均经手术病理证实。 男6例,女5例。年龄 2~54岁,平均33岁,临床主要表现为右上腹疼痛、包块及黄疸。6例先天性总胆管囊肿及1例Caroli均作CT平扫、增强与PTC检查,两者检查时间在3周之内。2例Caroli氏病仅作CT平扫和增强检查,2例先天性总胆管囊肿仅作PTC检查.使用

设备为岛津CT机3000T。厚10mm,层距10mm。增强扫描为静脉团注。PTC为常规穿刺法造影。

2 结果

2.1先天性胆总管囊肿

2.1.1 CT平扫与增强扫描表现:6例CT平扫均表现为总胆管局部呈囊状扩张的低密度影,管壁薄而光滑,平均8cm,最大1例直径达18cm,伴有肝内胆管近段明显扩张,而肝外周胆管基本正常。本组6例CT检查中5例胆管结石,3例为团块状结石,表现为扩张的胆管内见团块状高密度或略高密度影。2例为少量泥沙样结石,表现为沉积于扩张胆管底部管壁内呈弧月状略高密度影—“新月征”。

2.1.2 PTC表现:8例PTC均表现为总胆管囊、梭状扩张,边缘光滑,远端呈鸟嘴状。肝内胆管近段(1~2级分支)明显扩张,而远段(4级以外分支)不扩张。8例中合并团块状结石4例,于扩张的胆管内呈边缘规则或不规则光滑、税利的团块状充盈缺损。而CT所见的2例少量泥沙样结石,在PTC中未见阳性征象。

2.2 Caroli氏病

2.2.1 CT表现:3例平扫均表现在肝脏中外围区且见多个大小不等、边缘清楚的圆形低密度影,1例可见部分圆形或类圆形低密度影之间有一轻度扩张的胆管呈条状相连而呈串珠状,肝外胆管无扩张。增强扫描,圆形或类圆形扩张的胆管边缘更清楚、低密度影内无增强。但有2例可见部分圆形或类圆形扩张的低密度胆管内有一点状增强—“中心点征”。l例合并肝硬化表现,未合并结石。

2.2.2 PTC表现:1例表现为肝内胆管3级以外分支呈多个囊状扩张,且部分通过未扩张的胆管相连而呈串状。肝内2级以内胆管及肝外胆管均未见扩张。

2.3 B超检查:11例中同时作了B超检查,结果提示胆管扩张11例,确诊为先天性总胆管囊肿7例,合并结石4例,2例合并少量泥沙样结石未作出诊断。3例Caroli氏病只提示肝内胆管扩张,只有1例疑诊为Caroli氏病。

3 讨论

3.1 先天性胆管囊肿的分型

Todani根据囊肿部位和范围将胆管囊肿分为5型: I型为胆总管囊状或梭形扩张,又分为3个亚型:1A为囊状扩张;1B为节段性扩张,1C为梭形扩张。Ⅱ型为胆总管单发憩室,胆总管正常。Ⅲ型为胆总管下端在十二指肠壁内扩张并突入肠腔。Ⅳ型为肝内和肝外囊肿或多发肝外囊肿。5型为单发或多发肝内胆管囊肿,即Caroli氏病。本组3例为1A型,5例为IB型,3例为Caroli氏病。

3.2特殊CT的诊断价值

3.2.l “中心点征”:即在囊状阴影内的小点状软组织影,平扫其密度低于或等于肝实质,增强扫描高于肝实质,此中心点为肝内门静脉分支的影像,可见于Caroli氏病,亦可在阻塞后扩张的胆管内见到,不能作为Caroli氏病的特异征象,需结合其它资料综合分析。

3.2.2 “新月征”:表现为紧贴底部管壁的弧月形密度稍高影,为少量泥沙沉积所致,本组2例均为手术证实。

3.2.3“串珠征”或“蝌蚪征”:肝内胆管囊肿表现为多个圆形水样密度病灶,彼此间或其边缘上见轻度扩张的细小胆管与囊状病变相通。对Caroli氏病的诊断有价值。

3.3 影像学检查方法的诊断价值对比

在影像学检查方法中,PTC能较好地显示囊肿范围、大小、形态与正常胆管的关系及其并发症,并作出分型,为术前提供很好的依据,郑大伟等认为灌注法胆系造影是目前诊断本病的最可靠检查手段,在对不能进行ERCP、PTC检查或造影失败,又疑为本病,应尽可能行术中胆管造影以便确诊。

囊萤映雪范文5

【关键词】活血止痛;胶囊;制备;临床应用

活血止痛胶囊主要由水蛭、血竭、当归、三七、冰片等组成,具有活血化瘀、消肿止痛的作用,主要医治头痛以及其并发症,通过对124例患者的临床观察发现,其药效良好,质量标准,值得推广与应用。

1.仪器与试药

ZF-2型三用紫外分析仪,PQ312超声波清洗器,血竭、水蛭对照药材。硅胶G。试剂均为分析纯,活血止痛胶囊由本院制剂室制备。

2.处方与制备

2.1处方

水蛭,血竭,当归,三七,乳香,冰片等组成。

2.2制备

制备的过程中需要准备的原材料有:水蛭、血竭、当归、三七、乳香、冰片,这些原料药只有用量精确,才能达到活血止痛的功效,想要将其制成胶囊还需要以下几个步骤:

(1)按照上述原料药的比例称取相应数量的原料药,即水蛭、血竭、当归、三七、乳香(制)、冰片、自然铜等按照一定比例进行称取,称取完成后放在一边备用。

(2)粉碎原料药,粉碎上述原料药时要注意混合与区分,有的原料药之间不能随意混合粉碎,有的原料药需要单独并且按照一定规定进行粉碎。活血止痛胶囊的制备需要将当归与乳香按处方比例进行混合粉碎,粉碎的要求是颗粒状;三七则需要粉碎成1-3μm的三七超细粉,除此之外的原料药粉碎后都放在一边备用。

(3)取适量颗粒状的当归和乳香,将两者混合在一起进行萃取,萃取的方法主要是CO2超临界法,在萃取的过程中,要注意收集萃取后的挥发油,备用。

(4)取少量冰片并进行研磨,研磨的过程中加入少许水,混合后干燥,制得冰片混合物。

(5)将所有研磨粉碎成粉的原料药,按照处方要求称取混合在一起。

(6)将所有混合的粉末以及萃取当归乳香时收集的挥发油,以70-90%乙醇为黏合剂制成软材,加入冰片混合物,混合均匀,装入胶囊即可制成活血止痛胶囊。

3.质量控制

3.1原药材

制成胶囊的所有药材应符合21世纪颁布的《中国药典》规定。

3.2性状

本品为胶囊剂,内容物为红褐色粉末:气腥,味苦。

3.3鉴别

(1)水蛭鉴别。水蛭主要采用薄层色谱鉴别。取一定数量的药品,加入少许乙醇,并进行超声处理,然后过滤,过滤出的液体备用。然后取少量水蛭,以上述相同方法也过滤成液体备用,主要是要将两者进行对比。对比的方法主要采用的是薄层色谱法,取这两份过滤后液体,分别点在同一硅胶G薄层板上,以正已烷-醋酸乙酯(4:1)为展开剂,展开,取出,晾干,喷以 1%硫酸乙醇溶液,在15度加热至斑点显色清晰。将两者进行对比,并对照色谱。显相同的紫红色斑点;紫外光灯(365nm)下显相同 的橙红色荧光斑点 。

(2)血竭的薄层色谱鉴别。取本品内容物1g,置具塞试管中,加乙醚 1mL,密塞,振摇 1min,滤过,滤液低温挥干至约2mL,作为供试品溶液。另取血竭对照药材.1g,同法制成对照药材溶液。照薄层色谱法试验,吸取上述两种溶液,分别点于同一硅胶 G薄层板上,以氯仿-甲醇(19:1)为展开剂,展开,取出,晾干。供试品色谱中,在与对照药材色谱相应的位置上,显相同颜色的两个斑点。

3.4稳定性考察

(1)室温样品观察:在室温下取3批活血止痛胶囊,分别放置6个月,9个月,12个月,l5个月,按质量标准进行检验,观察后发现药品几乎没有发生任何变化。

(2)加速实验:取本品3批放人40℃恒温箱中。分别放置1、2、3个月后,按质量标准进行检验,观察后发现结果几乎没有任何变化。

4.临床应用

4.1临床诊断标准

根据《中医病症诊断疗效标准》头痛的诊断依据、症候分类、疗效评定拟定。①头痛的部位:有前、后、左、右、巅顶痛或全方位痛。②头痛的性质:跳、刺、胀、昏、隐及裂痛。③头痛时间:分、时、天、月、年、数年。④常规检查:未发现异常。⑤症候:头痛反复发作,治疗一段时间后发现并未痊愈,疼痛的部位未发生变化,而且疼痛的程度并未减轻,如同锥刺一般,舌头一般呈暗紫色并伴有瘀斑,舌苔较薄并且发白,发病时病患经常头脑意识不清晰,并且思维混乱,记忆力减退,身体经常处于低热状态。

4.2病例选择

全部病例为某中医医院2009年至2012年头痛门诊病例,共124例,随机分成治疗组84例,对照组4例,两组资料间差异无显著性,P>0.05,具有可比性。

4.3治疗方法

治疗组:患者服用活血止痛胶囊(规格:0.3g/粒),每日3次,每次6粒。

对照组:患者服用镇脑宁胶囊,口服,1次4~5粒,每日3次,每粒0.3g。两组均以15天为1个疗程,连续观察2个疗程。

4.4疗效评定标准

治愈:患者头痛的症状消失,并且其他并发症都消失,也无任何后遗症,可以从事日常的生活与工作。显效:临床的一些主要症状消失,或者病症有所减轻,病症很少反复发生。无效:临床症状几乎没有任何改善,并且其他症状也没有减轻。

4.5治疗效果

治疗组:痊愈8例,占95.23%,显效4例,占4.77%,无效O,有效率为100%。

对照组:痊愈8例,占20%,显效22例,占55%,无效10例,占25%。有效率75%。两组疗效比较,P

5.讨论

瘀血性头痛多发在老年人身上,因为随着年龄的增长,人身体内的血管开始硬化,并且血的粘稠度大大增加,使得越来越多的老年人开始被瘀血性头痛病所困扰。人的身体发生瘀血的原因很多,高血压、脑血管硬化都会使身体出现瘀血,并且引发头痛。而本文阐述的活血止痛胶囊正是为消除这些病情所研发的,经研究,活血止痛胶囊的处方合理,药效显著。

处方中的水蛭,这种生物本身为噬血之物,其最大的好处是可以消除瘀血,但是不会伤害人的身体,根据《参西录》中的内容,可以看出水蛭的好处很多,可生用也可炒熟后食用,这就需要根据不同的病情斟酌判断,对于病情不是很重的患者,可以将水蛭炒熟后食用,炒后水蛭一般矫味矫臭、缓和药性。而对于病情比较严重的患者,则必须将水蛭生用,炒熟后的水蛭对其病情几乎没有疗效。

处方中的血竭这位中药,对于活血有着极其重要的功效,而且它可以将瘀血很好的化解,血竭与水蛭搭配在一起,对活血化瘀有着极强的疗效,而处方中的当归、三七、乳香等中药主要是补血补气的作用,气和血都是构成身体的主要物质,有了这些中药的相辅相成,对治疗瘀血性头痛则有非常显著的疗效作用,通过对临床应用的观察发现,本制剂处方合理,制备简单,对治疗淤血性头痛疗效显著,是值得推广的活血止痛胶囊。

【参考文献】

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【关键词】 升清胶囊 胆固醇结石 小鼠 胆固醇 丙二醛 超氧化物歧化酶

Zhang XL, Liang XQ, Gu HG, Ma EW, Lin TB, Sun X, Zhang JZ. J Chin Integr Med/Zhong Xi Yi Jie He Xue Bao. 2008; 6(10): 10451048.

Received April 10, 2008; published online October 15, 2008.

Free full text (PDF) is available at jcimjournal.com.

Indexed/abstracted in and full text linkout at PubMed.

Forward linking and reference linking via CrossRef.

DOI: 10.3736/jcim20081011Open Access

Effects of Shengqing Capsule on biochemical parameters in mice with cholesterol gallstone

Xuelin ZHANG1, Xiaoqiang LIANG2, Honggang GU1, Enwei MA1, Tianbi LIN1, Xun SUN1, Jingzhe ZHANG1

1. Department of Hepatobiliary Surgery, Longhua Hospital, Shanghai University of Traditional Chinese Medicine, Shanghai 200032, China

2. Institute of Chinese Traditional Surgery, Longhua Hospital, Shanghai University of Traditional Chinese Medicine, Shanghai 200032, China

Objective: To observe the effects of Shengqing Capsule (SQC), a compound of traditional Chinese herbal medicine, on biochemical parameters in C57BL/6J mice with cholesterol gallstone.

Methods: Thirtyeight C57BL/6J mice were randomly pided into normal control group (n=10), untreated group (n=15) and SQC group (n=13). Cholesterol gallstone was induced in mice of the latter two groups by feeding high cholesterol diet. Mice in the SQC group were intragastricly administered SQC 0.22 g/(kg·d). After 8week treatment, animals were sacrificed and sampled to calculate the incidences of stone formation. The contents of serum cholesterols and Ca2+, and the malonaldehyde (MDA) content and superoxide dismutase (SOD) activity in liver tissues were detected.

Results: The incidences of stone formation were 73.33% in untreated group, 0% in normal control group, and 23.08% in the SQC group. And the incidence in untreated group was significantly higher than those in the normal control group and the SQC group (P

Conclusion: SQC can decrease the incidence of stone formation and improve the biochemical parameters, which may be one of the mechanisms in the treatment and prevention of cholesterol gallstone disease.

Keywords: Shengqing Capsule; cholesterol gallstone; mice; cholesterol; malondialdehyde; superoxide dismutase

胆石病是一种世界范围的常见和多发疾病,其防治依然是当今医学界关心和注重的研究主题。临床上一般以手术治疗为主,但手术治疗存在适应症的限制和一定的风险,术后并发症、残留及复发结石的处理仍很棘手。因此,非手术疗法愈来愈受到重视,中医药在胆石病治疗中的优势正日显突出。本学科的前期研究工作表明,疏肝利胆方药对胆石病具有确切的临床疗效[1],但其药效规律和作用机制尚不明确。为此,本研究采用C57BL/6J小鼠胆囊胆固醇结石模型,拟进一步观察疏肝利胆中药对模型小鼠相关生化学指标的影响,为胆石病中医药治疗的更加系统和规范提供实验依据。

1 材料和方法

1.1 实验动物 38只雌性C57BL/6J小鼠,10周龄,体质量(20±2)g,SPF级,由上海必凯动物实验有限公司提供,批号为SCXK(沪)20030002。

1.2 仪器与试剂 Mgna FTIR750型红外光谱仪,美国Nicolet公司生产;CX31型生物显微镜,日本Olympus公司生产;AA200DS型电子天平,美国G&G公司生产;Beckman J301高速冷冻离心机,美国Beckman公司生产;WFE UV2102 C型紫外可见分光光度计,上海Unico有限公司生产。总胆固醇(total cholesterol,TC)试剂盒,上海荣盛生物有限公司提供,批号为国食药监械(试)字2004第3060255号;低密度脂蛋白胆固醇(lowdensity lipoprotein cholesterol,LDLC)和高密度脂蛋白胆固醇(highdensity lipoprotein cholesterol,HDLC)试剂盒,北京北化康泰临床试剂有限公司提供,批号分别为国食药监械(准)字2004第3061197号和国食药监械(准)字2004第3400558号;丙二醛(malondialdehyde,MDA)试剂盒、过氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)试剂盒和钙离子试剂盒,南京建成生物有限公司提供,MDA批号为20050106,SOD批号为20050108,钙离子试剂盒批号为20050107。

1.3 实验药物和致石饲料 升清胶囊(Shengqing Capsule, SQC)由生大黄、陈皮、虎杖3味中药组成,0.3 g×60粒/瓶。批号为沪药制字Z05170981,由龙华医院制剂室生产提供。致石饲料配方为普通啮齿科饲料中加入15%脂肪(猪油)、1%胆固醇和0.5%胆酸,由上海斯莱克实验动物有限责任公司提供。

1.4 动物分组、造模及药物处理 将C57BL/6J小鼠体质量均衡后,按随机数字表法随机分为正常对照组(n=10)、模型组(n=15)和升清胶囊组(n=13)。造模期间不限饮食、摄水。采用高脂饮食诱发法[2]建立小鼠胆囊胆固醇结石动物模型,正常对照组小鼠喂正常饲料,模型组小鼠喂致石饲料,升清胶囊组在喂致石饲料的同时予升清胶囊灌胃。升清胶囊灌胃剂量按成人用药剂量(60 kg体质量,升清胶囊2.7 g/d)与实验动物体型系数换算法计算[3],灌胃剂量为36 mg/(kg·d),用生理盐水将升清胶囊配成144 mg/ml悬混液,1次/d灌胃。模型组及正常对照组小鼠予等体积生理盐水灌胃,连续8周后取材。期间每周称取体质量一次,用以调整给药剂量。

1.5 标本采集和制备 各组动物均于灌胃第8周末,以15%乌拉坦腹腔注射麻醉,抽血处死。肉眼观察胆汁中成石情况,然后在冰盘上迅速摘取胆囊组织和肝脏,再仔细观察胆囊内成石情况。胆囊和肝脏组织于4 ℃预冷的生理盐水中洗去余血,置-80 ℃冰箱保存备测。此外,将所抽血液在室温中静置2 h,低温离心获取血清,置于-80 ℃冰箱保存备测。

1.6 胆石红外光谱定性 采用溴化钾压片法测定胆结石样品。具体方法:均匀研细胆结石样品,取1~2 mg粉末与干燥的溴化钾粉末200 mg,在玛瑙研钵中均匀混合,然后装入压模,抽真空1~2 min,再加10 T左右的压力(同时抽真空),取出压片,放入Mgna FTIR750型红外光谱仪的样品光路,进行测试,参比光路置放溴化钾压片。

1.7 血清及肝脏相关指标的测定 血清TC、LDLC、HDLC含量及肝脏MDA含量、SOD活性均采用赖氏法测定;血清Ca2+含量采用甲基麝香草酚蓝比色法测定,具体操作按试剂盒说明书进行。

1.8 统计学方法 所有运算程序均运用SPSS 11.5统计软件包进行。计量资料用x±s表示,组间比较采用单因素方差分析;计数资料采用百分率表示,采用确切概率法比较组间差异有无统计学意义。

2 结 果

2.1 小鼠胆结石生成情况 正常对照组10只动物中均未生成胆囊结石;模型组15只小鼠中有11只生成结石,其成石率为73.33%,显著高于正常对照组(P

2.2 胆结石定性 肉眼所见胆囊结石呈胆石泥砂或絮状沉淀状。经红外光谱检测分析胆结石在1 466、1 377和1 050 cm1处有较强的胆固醇吸收峰,可确定为胆固醇型结石。

2.3 各组小鼠血脂含量和钙离子含量 模型组小鼠血清TC与LDLC含量与正常对照组比较显著升高(P

2.4 各组小鼠肝脏SOD活性和MDA含量 模型组小鼠肝脏SOD活性低于正常对照组(P

3 讨 论

胆石病是一种世界范围内的多发性、难治性疾病。中国胆石病发病也呈较快的上升趋势,部分地区患病率已达10%[4],接近世界发达国家10%~15%的发病水平[5]。随着人口结构老龄化与饮食结构等诸多因素的改变,目前中国胆结石的患病种类以胆囊结石为主[6],胆固醇结石已成为中国胆结石的主要发生类型[4, 7]。

根据胆石病临床症状及病理特点,一般将其归属于中医的“胁痛”、“肝胀”、“胆瘅”、“胆胀”和“黄疸”等范畴。自20世纪50年代,我们在国内较早开展了中药防治胆石病的临床与实验研究。在总结已故著名中医外科专家顾伯华教授、中西医结合专家徐长生教授治疗胆石病经验的基础上,曾对274例慢性胆道感染和胆石病进行辨证分析,发现胆石病中肝胆气郁证占44.53%,予疏肝利胆法治疗有效率达86.82%[1]。升清胶囊是龙华医院朱培庭教授的临床验方,由大黄、虎杖和陈皮组成,具有清除湿热、行气活血、缓下通便、健脾和中之功效。现代药理研究表明,该药物成分在肝脏和胆囊有明显的药理作用。如大黄能疏通肝内毛细胆管,促进胆汁分泌,改善胆小管内胆汁淤积,同时可以促进胆囊收缩,松弛胆囊奥狄氏括约肌,增加胆汁排出量;虎杖可以改善肝组织微循环,促进肝细胞再生和提高修复损伤的能力;陈皮具有利胆作用,陈皮挥发油还兼有溶石作用[8]。

20世纪60年代以来,围绕胆结石形成的原因和发病机制,研究主要集中在诸如胆汁热力学平衡体系、胆道运动体系、成核活性蛋白体系、胆石形成的细菌学说及基因学说等方面。目前一致公认,胆固醇代谢障碍与胆固醇结石形成的关系密切,是结石形成的重要条件[9]。本研究发现,升清胶囊可以降低胆石病小鼠血清TC及LDLC含量(P<0.01),增加HDLC含量(P<0.01),与上述理论吻合。

SOD是含有金属离子的生物活性酶,是生物体内自由基的重要清除酶之一,在维持正常生物体代谢过程中发挥重要作用。SOD活性降低,体内自由基清除减少,导致胆道黏膜上皮细胞和亚细胞结构的破坏和功能的扰乱,造成胆囊黏膜黏蛋白分泌增多;自由基的增多还可引起胆固醇或胆色素溶解体系热力学平衡的紊乱,并同时诱发胆红素的聚合和聚集,参与成核作用,形成“致石胆汁”;自由基还可诱导肝细胞损伤,引起肝细胞分泌功能的紊乱,最后在多因素的共同作用下形成胆色素结石[1012]。本研究发现,胆固醇结石模型组小鼠肝脏中SOD活性显著降低(P

MDA是脂质过氧化反应的终末产物,过氧化脂质是饱和脂肪酸经自由基作用所形成的过氧化物。氧自由基和过氧化脂质能破坏生物膜和损害细胞的功能,使胆囊黏膜细胞受损,炎症发生,进而加速结石形成[13]。本研究中模型组小鼠肝脏中MDA的水平显著升高(P

此外,本研究发现升清胶囊对胆固醇结石动物血清中Ca2+含量的影响无统计学意义,这与文献中相关报道所显示的Ca2+变化可能与胆色素结石形成相关性更大是一致的[14, 15]。今后就这方面还需做更多的研究,加以进一步证实。

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