谦君一发范例6篇

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谦君一发范文1

1、钧:古时三十斤为一钧。

2、千钧重量吊在一根头发丝上。比喻情况万分危急。唐韩愈《与孟尚书书》:“群儒区区修补,百孔千疮,随乱随失,其危如一发引千钧。”

3、出处:宋·程珌《程端明公洛水集·丙子轮对札子》第十一卷:“肆我祖宗得请于上帝;假手鞑靼;连岁屏除;岌岌之千钧一发矣。”

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谦君一发范文2

就在小樱桃绝望之时,只感到身体被人托起,已经离开地面。

“别怕,我带你走。”舒缓的声音从上方响起,让小樱桃焦躁的心情平复下来。

好像乘着一阵风,小樱桃觉得自己接连飞过了好几个阵中的房间,每飞过一个,身后便响起房门闭合的摩擦声,小樱桃不禁回头,一个熟悉的样貌出现在眼前。

“小楼?!”

小楼微微一笑,没有回答。

“原来……”刚想说“你这家伙竟然没事!害我担心这么长时间!”的小樱桃突然目瞪口呆。

她仔细看着小楼胸前印出一片血迹,慢慢扩大,好像胸前有一个大伤口崩裂一样。

就是这样的小楼还拖着自己在腾空飞行!小樱桃一时不知道该从哪里说起,太多奇怪的事同时发生,自己的脑子也乱成糨糊了。

“小樱桃?能听见吗?”师兄的声音响起。

“废话!我还没变成肉饼!不过听你的迟早会变成肉饼的!”小樱桃生气地回答,要不是师兄这盘棋没下好,自己也不用担这么大的风险啊!

“你在哪儿?”

“在你说的房间啊!接下来怎么办?”

“你怎么做到的?!”师兄第一次吃惊到说话都卡住。

小楼对小樱桃摇摇头,表示不要说出自己的出现。

小樱桃立即明白了他的意思,随即岔开话题:“你还是快说我怎么才能出去吧,再这样下去我真的被墙夹了……”

幽暗的室内,师兄闭上眼,在心中回忆整个棋局的过程。对于身处阵中的小樱桃来说,这个小房间的棋盘和头上的断头刀却丝毫不比小樱桃好到哪里去。

“棋,围者胜。弈棋无非取胜、取和。”师兄自言自语,既然不能取胜,只能退求取和。但胜与和从最初的对弈中就会显现出来,既然这盘棋是无法取胜的,那么自己从这局开始的时候就已经输了,输在自己的自信。

此时与他对弈的少女露出胜利的笑容:“你输就输在自己的天资上,你从无后顾,因为你从来就没有输过,你也不会……走出包容姿态的……和棋。”

身旁的女孩担心地看着她:“文欣姐姐,既然赢了,我们就不下了吧。”

少女并没有离开的意思,又取出棋子落在棋盘上:“我要仔细看看你失败的样子,这一刻可是千载难逢啊……”

同时,师兄的审判庭传出一阵笑声,棋盘上又一颗棋子浮起,代表对方已经在此处落子,这一子的落法,不禁让师兄苦笑了起来:“原来是你,我早该想到……难道说赢我就这么重要吗……”

师兄果断落子,对方也随着他的速度落子,几个来回后,小樱桃发现自己的四周已经没有一条出路了:“我被围起来了!你这个笨蛋!我怎么出去啊?!”

过了许久,师兄的声音缓缓响起:“你四周都是我落的子,你就好好待在那儿吧,因为这一局,我们赢定了。”

小樱桃被关在墨迹之阵,唯有赢得棋局才能平安脱身,与此同时,师兄在对弈棋局的审判庭和神秘人对弈,落棋不但要确保不败,还要顾及小樱桃所处的棋室,与棋盘对应数量的棋室会随落子而闭合,巨大的挑战之下,两人能否安全脱身?

听着接连不断闭合的墙体摩擦声,小樱桃坐在冰冷的石板地上,抱着膝盖沉默不语。小楼在身旁左顾右盼,不知道看着什么。

许久后,小楼拉起小樱桃,小樱桃还没开口问怎么回事,就看见小楼胸前的血迹越发扩大。

“我找到出口了。”小楼咳了两声,拉起小樱桃将头顶的墙撞碎,头破血流地拉着小樱桃向上方浮起。

“小楼,你没事吧!你别这样啊!我可不想你这样救我!”小樱桃都快哭出来了。

没多久,小樱桃看见头顶有一团亮光,已经在幽暗的墨迹之阵关了这么半天,看到强光不禁闭上眼躲避。当她再次睁开眼时才发现,那强光根本不是出口之类,而是一个华丽的灯,即便在自己的时代,也没有这么漂亮的吊灯吧?

硕大的莲花灯座倒立在整个岩壁顶端,从下面望去,墨迹之阵一览无余,莲花的花蕊部分是数十颗璀璨的珍珠,在光源下反射着奇异的光芒。让小樱桃吃惊的是,灯芯竟然是火苗倒竖的,好像水中的倒影一样,通身绿色的焰苗摇曳着。

小楼的手伸向焰苗,火焰围绕着手掌燃烧起来,之后竟然被小楼的身体吸收一样,慢慢融入到手掌中。

小楼松开拉着小樱桃的手,小樱桃慌张地瞪大眼睛,才发现自己还是和之前一样浮在空中,面前的小楼脸色好转,脸上、胸口的血迹也被绿色的火焰燃烧掉,好像什么都没有发生过。

小樱桃惊讶地看着他:你到底是……

审判庭中,师兄拿起棋子放在手里:“虽然我在开始的时候输了棋势,你却更早输了棋心。”手中的棋子落下,棋盘上浮起的棋子统统降下,恢复成普通的棋盘。头顶的数把刀刃也盘旋上升,回到合起的石壁中。

光从石壁的缝隙散落在棋盘前,反射出师兄端坐的身影:“文欣,我知道你现在可以听到我说话,小樱桃不该是此局的赌注,即便不为破阵,你也应该为此修好儒家的灵武。”

师兄所对话的少女,在另一个房间沉默不语。

小楼微笑,指着胸前衣服上残留的血迹:“刚才你看到了,一说话就会……现在好了,可以随便说话。”

谦君一发范文3

审计人员要找出施工单位上报的结算存在的问题,依问题寻找审计的思路。

1.1违反定额规定,高套、错套定额或费率,多计工程费

以某单位为例:新建一幢办公楼,审计人员发现工程装饰材料费用超概算。对此,审计人员并没有简单地进行定性,而是对该施工单位使用的装饰材料的价格进行调研,主要方法:一是建立建筑安装工程材料价格调查信息网络,定期调查。二是审查施工企业材料成本账,查证其实际采购价格。三是直接到供应厂商调查取证。经调查发现,设计图纸采用的是600mm×600mm的地砖,而施工单位套用的是800mm×800mm地砖的定额,且存在地砖价格不一的情况,最高的140元/块,最低的90元/块。为此,审计人员利用自己掌握的第一手资料,指出施工单位的错误,为工程审减材料费用18万元。此外,在审计过程中还发现施工方故意错套定额的行为。如把Ф50热交换器安装费套用Ф500热交换器安装定额;施工方想利用一字(数)之差,企图蒙混过关,如果审计人员审查不严,则可达到多计结算收入的目的。

1.2违反工程量计算规则,重算、多算工程量,不扣减未施工的工程量

如施工方在计算建筑工程土方外运量时,只按开挖量计算没有扣除回填土数量;又如在施工合同中原先包含了办公楼地面保温项目,在实际施工过程中由于种种原因该项目取消,但施工方在报送的造价结算中并没有扣减此项未施工项目的工程价款;再如在审计办公楼装修结算时,施工方使用了部分拆除下来的旧材料,但在结算中仍按新购置材料计价。

1.3利用“不均衡报价”的手段,借以调整合同包干价

有些施工单位在投标阶段就为中标后结算的高调打下埋伏,那就是“不均衡报价”。施工单位通过对设计图纸缺陷及现场勘察情况的分析,预计今后工程量可能在哪些方面要发生变动,在总报价不变的前提下,将工程量可能调高的项目单价报得很高,而工程量可能调减的项目单价则报得较低。建设方往往因时间原因难以对所有的报价一一核对,待到结算调整时发现某些单价异常时,只好按合同价予以调整。如在某单位审计中就曾发现在签订施工合同时,施工方的概算有的项目高于市价3~4倍,有的又低于市价好几倍,有的则干脆不报或漏报。待中标后,实际施工过程中,又以种种借口如漏项、单价小数点位数报错等要求补签签证。

1.4混淆设计变更和施工方案变更,达到多计结算数额的目的

如工程建设过程中要挖一个基础坑,设计方案中标明基础坑的具体尺寸为100×60×2(单位:米)。在施工过程中,施工方问甲方代表:“这个坑挖到1米多深的时候,旁边土总是往下坠落,是不是应该在四周加挡土板?”,这时甲方代表如同意加,事后施工方就以此要求增加预算。其实,这是一个具体施工方案变更的案例,不是设计方案的变更。作为一个有经验的施工方,基础开挖是否加挡土板,或者为满足尺寸要求四周要多挖一些等,这些都是为完成图纸要求而实施的具体施工方案,在符合国家建筑行业施工技术规范范围内,保证安全、质量的前提下,施工方可自行选择,甲方只要求施工方按图纸要求完工即可。在项目施工过程中,施工单位热衷于各种各样的变更签证,有些变更签证无非是借变更之名,行增加造价之实。

2、竣工结算审计的具体方法

2.1要了解建设项目基本概况,合理安排审计组

项目审计开始前,首先要进行调查研究,了解建设项目基本概况,特别是了解掌握好与项目有关的建设单位管理人员、监理质检人员、施工单位等相关情况,理清他们相互之间的关系,以及他们与审计部门拟派审计组成员之间的关系。特别是施工企业、监管部门经常相互配合工作,专业人员之间有着千丝万缕的关系,这些关系的存在有可能影响到审计资料、审计证据的真实性。因而,审计要合理安排审计组,选好主审。凡是与被审计单位或项目相关单位有利害关系的审计人员,一律实行审计回避,这是保证审计客观公正的前提。

2.2要发挥审计人员的专业特长,优化配置审计人员

建设项目竣工结算审计涉及面广,适用法规多,工作量大而繁杂。在组成审计组时,具体应做到以下几点:一是审计人员数量要与审计任务大小、完成时间长短相适应。二是审计组人员结构与所审项目和专业特点相适应,要综合现有人员实际,扬长避短,最大限度地发挥好每一个审计人员自身的特点。

2.3主审应以审查工程造价真实、合规为目标,做到公开透明

主审应以审查甲乙双方共同编报的工程造价真实、合规为目标,以工程量计算、定额套用、相关费用(包括现场管理费、临时设施费、企业管理费、劳保费、定额编制测定费、计划利润、税金等)的计取和材料价格核定为主要内容,实现每个环节的质量控制,并将审计结果向甲乙双方公开核对,做到100%透明。

2.4要将跟踪审计贯穿项目审计全过程

在实际勘查中,审计组要做到“五查”:一是查竣工项目是否按原设计图纸施工,有无未施工项目。二是查实际变更是否与变更鉴证相符。三是查实际施工、工程做法是否与设计相符,有无偷工减料。四是查变更工程量增减情况,看有无虚报、多报情况。五是查材料规格、品质、等级情况,为结算定价打好基础。在现场勘查时,建设单位、施工单位和审计人员均应同时参加,审计人员最少二人以上参加,深入现场调查、取证、记录,必要时进行拍照,跟踪审计勘查,记录要由甲、乙双方和审计人员三方签字认可,并整理归档。

2.5要合理确定材料价格

竣工结算中的材料及设备价格是直接影响建设项目审计质量的重要因素,审计时要特别注意对材料价格的审查。主要方法:一是建立建筑安装工程材料价格调查信息网络,定期调查。二是审查施工企业材料成本账。三是调查了解建设单位当时市场考察情况。四是直接到供应厂(商)调查取证。在做好上述调查核实的基础上,通过主审、审计组长、主管领导共同讨论,才能确定最终结算价格。

谦君一发范文4

一、我市学前教育发展面临的新要求、新挑战

《赤峰市人民政府办公厅关于落实自治区教育厅深化教育改革与发展指导意见的通知》(赤政办发〔2008〕17号)提出:“高度重视幼儿启蒙教育,多种形式发展幼儿教育事业,……努力缩小地区之间和城乡之间的差距,提高办园层次和水平,逐步建立起与我市经济社会发展相适应的幼儿教育体制。”要实现这一目标,就必须解决一些关键性指标。目前,我市学前教育的主要问题如下。

1.公办园数量少,投入严重不足。一是市区公办园基本建于80年代或之前,随着城市的发展,幼儿入园需求越来越大,但公办园的数量没有增加,出现入公办园难的社会问题。同时由于当时幼儿园设置标准低,多数公办园园舍较小,占地面积和建筑面积不足,幼儿室内外活动面积小,幼儿户外接受日照时间短,无法满足幼儿成长和教育的需求。二是民办园园舍大部分为租赁或利用民宅及单位搬迁后改建,园舍结构不符合要求,缺少户外活动场地;农村民办幼儿园的办园条件简陋,家园式办园居多,缺少应有的教学设施设备,安全隐患突出。作为基础教育的重要组成部分,社会和家长对幼儿园期望很高,但政府相应的政策和投入却很低,学前教育阶段的财政经费投入与其他基础教育阶段相比都相差较远。

2.师资素质不均衡,保教质量难以保证。我市幼儿园教师公办园学历合格率达90%以上,但民办园、农村园却很低,持有教师资格证的还不到总数的一半,有专业技术职务的更少。全市幼儿教师中,公办教师比例太低,构成幼教队伍主体力量的非公办教师,以初高中毕业生和教师进修学校进修生为主,业务水平较差,缺乏对幼儿进行素质教育的技能,加之绝大多数就职于民办幼儿园,缺少学习交流的机会,缺乏参加继续教育的积极性和必要条件,素质很难提高。有些民办幼儿园教师待遇偏低,民办幼儿园教师的养老保险等社会保障问题普遍没法解决。同时,由于公办园多年编制不足,教师工作强度大待遇低,幼儿教师对其职业缺乏认同感,因此教师流动性大。幼儿教师队伍的不稳定,直接影响教育质量的提高。

3.民办园园均规模小,办园水平低。以一个旗县区为例:在全区134所民办幼儿园中,仅有9所在园幼儿达300人以上,其余均在20—60人。全区幼儿园总的占地面积67999.9平方米、建筑面积30516.4平方米,但园均占地面积仅507.46平方米、建筑面积227.73平方米,优质民办幼儿园数量少,民办园办园水平差别较大。

4.违背学前教育规律,“小学化”倾向突出。一些民办幼儿园为了争生源,迎合家长,在课程设置、教育内容、教育手段等方面存在着违反幼儿教育规律的现象,幼儿刚一入园就背上文化课作业负担,使孩子在入小学前就厌学,影响了幼儿身心健康。据调查,70%以上的民办幼儿园存在“小学化”现象。

5.供需矛盾突出,优质园压力过大,无证非法办园现象严重。近年来,公办园无论在管理上还是师资素质和保教质量上都得到社会和家长的广泛认可,家长在孩子入托中纷纷选择公办园,造成公办园班型过大,各项工作超负荷承载。由于公办幼儿园的数量严重不足,产生了大量的无证非法办园机构。有的地区无证非法幼儿园60多所,占幼儿园总数的30%。在农村,由于村办园较少,一些留守儿童,由于老人无接送能力,造成好的幼儿园由于远去不了、近的幼儿园质量不好又不想去的现象。供需矛盾紧张,也是农村幼儿入园率偏低的主要原因。

6.办园条件差距较大,安全隐患令人担忧。一是多数农村幼儿园、民办园的园舍窄小,设备不达标。有的租用民房或利用原有小学教室,设施简陋,教具、玩具和幼儿读物缺乏。二是保教工作欠规范,有的乡镇中心幼儿园班额超编现象严重,保教人员严重不足,大多数幼儿园每班仅有1名教师,还身兼数职。三是卫生保健工作不到位。大部分民办幼儿园没有食品卫生许可证,没有专职保健医生。四是消防安全不符合要求,设施设备不齐全,没有疏散通道、应急灯、安全出口等指示标志。

二、对我市学前教育发展的建议

1.科学规划。一是组织人员进行专题调研,制定《赤峰市幼儿园网点布局规划》。科学规划,合理布局,遵循适应原则和平衡原则,使幼儿园分布与社会的教育需求和资源供应基本达到或保持动态平衡,为适龄幼儿提供平等的受教育机会。二是加快推进乡镇中心幼儿园建设。三是坚持城镇小区的配套建园政策。在旧城改造、新区建设和实施安居工程过程中,同步规划、建设配套幼儿园。新建配套幼儿园建成验收合格后,无偿移交教育行政部门管理使用。对于已有一定规模、在小区有一定影响力的民办园,应化为小区配套幼儿园,给予一定的场地支持和保护。在农牧区,以民办公助的形式,如采用“政府提供校舍,你来负责运转”的方式,积极推进村级幼儿园的发展。

2.提升教育整体质量。幼儿园要积极把握发展方向,创造具有特色的现代化幼儿园,消除幼儿教育“小学化”倾向,保证幼儿身心和谐发展。幼儿园应崇尚园所文化建设,打造有特色的服务品牌,促进办园向个性化发展,满足教育需求的多样性。总结推广名园办分园的成功模式,广泛开展幼儿园“手拉手”活动,逐步形成以自治区示范园、乡镇中心园为中心,覆盖全市各类幼儿园的指导和服务网络,促进全市学前教育办园水平的整体提升。

3.加强督导评估。根据《民办教育促进法》,实行民办教育储备金制,对做出贡献的民办园实行奖励机制。对于办园规范,评估达标的民办园,政府应采取资金补贴、给予编制等方式进行奖励。

4.重视和加强幼儿园安全工作。一是政府要建立健全校园安全防范体系和应急机制,确保师生生命安全和校园稳定。同时,为幼儿园增加保安,保证安保的稳定性。二要高度重视幼儿接送工作,幼儿园大门避开马路,提倡家长就近步行接送。三要加大对民办园的管理力度,政府一方面通过良好的政策环境鼓励有条件的集体和个人兴办幼儿园,另一方面杜绝非法个体园产生。

5.加强教师队伍建设。一是坚持把师德放在首位,弘扬学为人师、行为世范的职业道德;加大教师培训力度,将民办幼儿园的教师培训纳入中小学校长和教师继续教育规划与管理;严格执行幼儿教师资格准入制度,把好入口关;实行赤峰学院定向招生和旗县区教师进修学校幼师班培训制度,以满足赤峰地区幼儿园的发展需求。二是加强名师名园长培养。严格实行幼儿园园长资格证制度,做好幼儿园园长的选配和骨干教师的培养工作,重视幼儿园学科带头人的培养。定期选派名园长、名教师,通过岗位培训、专家讲座、到自治区内外参观学习、挂职锻炼、与自治区内名师接对等途径提升素质、扩大知名度。

谦君一发范文5

关键词 军事刑法 基本原则 不足 完善

中图分类号:D924 文献标识码:A

一、军事刑法的概念

在国内军事法学界,对军事刑法这一概念的界定主要有以下三类:首先,“军人犯主义”说,该说认为军事刑法是指规定军人犯罪及其处罚的法律规范;其次,“军事犯主义”说,该说认为军事刑法是规定军人危害国防利益和违反军事职责的犯罪及其处罚的法律规范;第三,“并重主义”说,该说是对上述两种学说的综合,认为军事刑法是由国家制定或认可,并由国家强制力保证实施的,关于军人犯罪和其他公民破坏国家军事利益犯罪及其刑罚处罚的法律规范的总称。笔者认为,单纯采用“军人犯主义”说或“军事犯主义”说均不足取。在使用“军事犯主义”军事刑法概念的国家,对于应当承担军事罪责的是军人还是普通公民在所不论,其缺陷则在于加重了普通公民的军事刑事责任;在使用“军人犯主义”军事刑法概念的国家,普通公民被排除在军事刑法的处罚范围之外,但其将导致普通公民严重侵犯军事利益的行为难以得到有效制裁和防范。由此看来,上述两大主义军事刑法概念在军事利益的保护与普通公民权利保障之间非此即彼的做法均不合理。采用“并重丰义”军事刑法概念对军人与普通公民的军事刑事责任虽然有所界分,但关于普通公民军事刑事责任的规定过于严密。因此,对比之下,笔者认为,军事刑法是指由国家制定、认可并由国家强制力保障实施的,规定军职人员违反其特定义务和危害国防军事利益犯罪以及其他普通公民实施的严重危害国防军事利益的犯罪及其刑罚的法律规范的总和。

二、军事刑法的基本原则

(一)宽严相济原则。

该原则指,在对军事领域的犯罪进行认定和处罚时,都是以保持战斗力为指导,有宽有严、宽严相济,充分发挥军事刑法保护军事利益的作用。军事刑法在与普通刑法罪名相竞合的罪名中,有一些罪名的刑罚要较普通刑法严厉,但也有许多竞合的罪名的刑罚要轻于普通刑法。如武器装备肇事致人死亡罪较之过失致人死亡罪的法定刑要轻很多。此外,在刑法运用的实践中,军事刑法的具体运用是从刑法效果发挥的角度选择宽严和程度。该原则的具体表现为:(1)战时缓刑制度的规定。就是用宽严有度的原则最大地将不利因素转化为有利因素,使军事刑法能有效地促进军事行动的展开。(2)刑罚较普通犯罪严厉。军事刑法中死刑的适用率远比一般刑法高,危害国防利益罪和军人违反职责罪中规定可以判处死刑的有13条。军人违反职责罪的死刑比例数仅次于危害国家安全罪。另外,部分军事犯罪的法定刑的主刑种的起点也较之普通犯罪高。

(二)战时从严原则。

同样的犯罪在战时实施,比平时危害严重得多,必须从严惩处。只有这样,才能有力地惩戒军人战时军事犯罪行为,教育军人认真履行职责,保障夺取作战的胜利。该原则体现在以下三个方面:一是战时军事犯罪构成条件低于平时,有些行为虽然平时也具有社会危害性,但不构成犯罪,只有在战时才构成犯罪。如战时违抗命令、拒不救援友邻部队等行为。二是有些行为在平时和战时都可能构成犯罪,但在战时法定刑更重。如逃离部队罪,平时的法定最高刑是3年有期徒刑,而战时的法定最高刑是7年有期徒刑。此外,战时军事犯罪规定的死刑也多于平时,刑法规定军人战时犯罪条文共13条,其中6条可以适用死刑。三是有些行为平时和战时都构成犯罪,但要求战时从重处罚或加重处罚。如阻碍执行军事职务罪要求战时从重处罚。

(三)侧重预防原则。

该原则是指在军事刑法的制定和运用过程中,相对于对已然犯罪的惩罚来说,军事刑法更侧重于对未然之罪的预防,更强调用刑罚的方法预防犯罪。军事领域的关系较为简单,并且相对封闭,教育、经济、文化等社会因素对军事领域犯罪的预防作用并不明显,尤其在战时更是如此。军事领域的犯罪预防更多地依赖刑罚手段,因为刑罚手段的严厉性、快速性更符合军事活动的残酷性、紧急性要求。该原则具体表现为,有很多行为在一般领域并不构成犯罪,但一旦进入军事领域,就以犯罪论。例如为逃避军事义务而自伤身体的行为就以犯罪论处,就是希望用刑罚的方法来杜绝此类行为的发生。如上所述,军事犯罪的刑事处罚普遍较重,为更加突出刑罚在预防军事犯罪中的威慑作用,这也是侧重预防原则的表现。

三、我国军事刑法的不足

一是现在刑法中军职罪这一章和国家的一些法律已不相适应。97年刑法公布以后,国家陆续出台了一些法律,其中一些规定与军职罪的内容不相符。例如,在军职罪这一章中有相当的条款要求在“战时”情况下才能构成,《刑法》第451条对“战时”有一个界定,说“本章所称战时,是指国家宣布进入战争状态、部队受领作战任务或者遭敌突然袭击时。部队执行任务或者处置突发性暴力事件时,以战时论。”在这以后,2004年3月,宪法修改案,将“”改成了“紧急状态”。《中华人民共和国突发事件应对法》,对“突发事件”作了一个比较全面的界定,外延显然比刑法451条“突发性暴力事件”的范围要宽泛。另外,《中华人民共和国引渡法》规定,军事犯罪拒绝引渡,那么什么叫“军事犯罪”?我国刑法里面没有规定,在国家的其他法律里也没有规定。可见,刑法的规定已经和上述法律不适应了。

二是在刑法体例结构和内容上不太协调。(1)军职罪一章的设置不够合理。我国刑法把它排在刑法分则的最后一章,并且将危害国防利益罪放在第七章,和第十章分开,淡化了危害国家军事利益的危害性,而且有悖于我国刑法分则按照犯罪同类客体以及危害程度排列的原则。(2)有些法律术语不够明确。在军职罪条款中有很多专用的术语,如“临阵”、“在战场上”、“预备人员和其他人员”等概念,都存在法律上不易解释、司法实践难以认定的问题。(3)刑事处罚的手段比较少。军队司法机关在办理军职罪的案件时,基本上不适用管制和罚金等非监禁的刑罚,对于曾经使用并具有军事刑法特色的一些刑罚措施在军事刑法实践中存在执行不一的问题。

三是和依法打击刑事犯罪的客观需求不相适应。军职罪是以惩治军人违反职责为主旨的,军法从严,战时从重,历来是军事刑事立法的基本特征,它的立法目的是保证军队的战斗力,它和刑法在整个理念上是不一致的。军职罪这一章不仅条文的数量少,而且很多条文过于原则,弹性比较大,在司法实践中难以执行。另外,军职罪所设罪名中,近半数条款到现在没有案例,成了一些“休眠条款”。

四、完善我国军事刑法的思考

(一)完善立法。

要完善军事刑法,首先要论证我国军事刑法最佳的立法模式。国际上主要有三类模式,一是单行刑法或者是自称体例的模式,如《德国军事刑法典》。二是和其他军事法合为一体的模式,如《美国统一军事司法典》。三是和普通法律合为一体的模式,我国就是这样。从多年的情况来看,我国军职罪的立法模式到1997年以前采取的是第一模式,1997年以后属于第三模式。那么究竟采取什么样的立法模式?笔者认为应当在采取第三种模式的基础之上,加强研究如何完善目前的刑法总则部分和分则的第十章,包括对军人违反职责罪的定义、适用对象、刑罚遵循的原则、犯罪主体的界定、战时缓刑和戴罪立功的适用条件、剥夺军衔、剥夺奖章勋章和荣誉称号等等。此外,适应我国批准或者加入的国际军事条约和协定,增设有关战争和武装冲突法方面的罪名,以提高我国遵守国际条约的良好形象。

(二)立法规范军队司法机关。

我国到目前为止还没有制定《中华人民共和国军事法院组织法》和《中华人民共和国军事检察院组织法》。和地方司法机关相比,缺少规范军队司法机关的法律规定。另外,我国到现在也没有制定规范军队律师和军事监狱、看守所方面的法律规定,我国的两院组织法、《律师法》、《监狱法》、《刑事诉讼法》都没有反映武装部队的实际情况,都是采取的例外或者是授权立法。所以说必须要抓紧制定和完善这方面的法律规定,确保军队司法机关的活动能够在法律规范的范围内行使。

(三)完善涉外军事刑法。

改革开放以来,随着国际地位的提高,中国经济实力的增强,中国军事外交积极的拓展,对外交往的领域逐步扩大,对外合作的范围也日趋丰富,形式更加灵活多样。当前,我国驻外的军事人员越来越多,涉外的军事利益越来越复杂,如何既遵守中国的法律,又遵守所在国的法律,一旦触犯了,如何处理?这些都是全新的课题。我国对这个问题经历了自觉到不自觉的一个过程。现在涉外的事情越来越多,这些方面必须要考虑,我们现在在外国的军人,特别是非执行公务期间的犯罪,怎么处理,这都需要我们通过完善涉外军事刑法来加以明确。

(四)加强军事刑事理论的研究。

首先要在军事刑法立法理念上,引入国家刑法发展的新理念。随着国家司法制度改革的不断深入,强化刑法的权利本位观念、惩罚犯罪和保障人权相结合、实体公正和程序公正并重等理念在我国刑事法律中已凸显出来。这些先进的国家刑法理念也应在我国军事刑法中得到充分体现和反映。第二,要加强军事刑法国际化方面的研究。要适应《日内瓦公约》、国际刑事法院的建立以及《国际刑事法院规约》生效的情况,加强对上述国际刑事法律国内立法和司法制度的研究。第三,要加强对有关“战时”刑事立法的研究和完善。加强战争罪、反人类罪、参加维和行动、参加海外护航、打击海盗以及相关的刑事诉讼等方面的研究。还要加强对战时犯罪的特点、战争和突发事件等特殊环境下犯罪的心理、犯罪预防的手段、方法、如何适用戴罪立功和战时缓刑等的研究,使之逐步的完善起来。

(作者:翟广恒,广西大学2012级刑法专业硕士研究生;赵亚男,广西大学2010级刑法专业硕士研究生)

参考文献:

[1]安永勇、张保平.论刑法一般原则在军事刑法中的体现.武警学院学报。2004年第6期.

[2]蔺春来.浅谈军事刑法的基本原则.法学杂志.2005年第4期.

[3]孙玉琢.论军事刑法的价值构造.青春岁月.2012年04月下.

[4]田友方.军事刑法若干问题的理论探讨.当代法学.2004年第18卷第5期.

谦君一发范文6

【摘要】

目的对细菌纤维素高产菌株葡糖醋杆菌G-29进行发酵优化,以提高其细菌纤维素合成能力。方法采用基于非完全平衡块原理的Plackett-Burman(PB) 试验设计法,筛选出了3个主要影响因子:混合碳源(葡萄糖∶蔗糖=1∶2),MgSO4,乙醇,然后采用Box-Behnten中心,组合试验设计和响应面分析方法(RSM)确定其最佳浓度分别为混合碳原52.3g/L,MgSO40.159 8 g/L,乙醇32.5 ml/L。用扫描电镜观察了细菌纤维素的形态结构,并通过X射线衍射分析其在干态下和湿态下的最佳结构。结果在优化培养基条件下,菌株G-29发酵生产细菌纤维素的产量为11.83 g/L,是优化前产量(6.20 g/L)的1.9倍。结论PB试验和RSM相结合的试验方法,用于优化G-29发酵培养基,不仅科学合理而且准确有效。

【关键词】 葡糖醋杆菌属 细菌纤维素 Plackett-Burman设计 响应面分析

Abstract:ObjectiveIn this manuscript,the optimal conditions for cellulose production by gluconacetoba-ater G-29 were determined in order to improve the yield of bacterial cellulose.MethodsPlackett-Burman Design was used to evaluate three statistically significant parameters including mixed carbon sources(Glucose:sucrose=1:2),MgSO4,ethanol.The optimal levels of three variables were defined by Box-Behnken design and response surface method(RSM):mixed carbon sources:52.3 g/L,MgSO4 0.159 g/L,ethanol 32.5 g/L,ethanol 32.5 g/L comparison.The morphology of bacterial cellulose(BC) produced was observed by scanning electron microscope(SEM).The crystal structure of BC in dried and wet state was studied by X-ray diffractometry(XRD).ResultsThe results indicated that the BC yield under the optimal fermentation medium was 11.83 g/L,which was as 1.9 times as that under the original fermentation medium.ConclusionThe method of PB design combined with RSM used for optimization of G-29 fermentation medium is scientific and accurate.

Key words: Gluconacetobacter; Bacterial cellulose; Plackett-Burman design; Response surface method

细菌纤维素(Bacterial cellulose,简称 BC)是由部分细菌产生的一类高分子化合物,在化学组成和结构上同植物纤维相同,都是由D-葡萄糖以β-1,4糖苷键连接形成直链多糖,再经聚合而成。与植物纤维不同的是细菌纤维素是以单一纤维形式存在,纯度极高,不掺杂如植物纤维中的半纤维素或木质素等其它多糖类[1],因此其具有抗拉强度高、 杨氏模量高、良好的生物适应性以及优良的持水性和通透性等特点[2]。除了可用作膳食纤维和食品成型剂,还可用于生产纱布、绷带、人造皮肤等生物医学用品,有利于皮肤组织生长和限制感染。

自1987年以来,已有很多关于细菌纤维素膜用于烧伤、烫伤、皮肤移植等治疗的报道,目前已发展出纱布、绷带和“创可贴”等各种伤科敷料商品。它具有在伤口中维持湿的环境,防止体液流出,保持高机械强度,对液、气具有良好通透性,与皮肤相容性好、无毒、不发热,良好的防菌和隔离性等众多特点,均优于当今其它人造皮肤和伤科敷料。早在20世纪80年代初,巴西的Biofill公司就开始了用细菌纤维素膜制造伤科敷料的研究,成功开发出人造动脉,人造血管与人造皮肤等医疗用品[3],并已成功地应用于处理皮肤移植和慢性皮肤溃疡。这种材料可有效缓解疼痛,防止细菌感染,有利于皮肤组织生长,促进伤口愈合,对水分及电解物有良好的通透性,与传统的材料相比,这种材料成本低,处理时间短,更有利于健康皮肤的生长[4]。除此之外,细菌纤维素还可作为缓释药物的载体,软骨组织工程的支架材料[5]等。

能产生细菌纤维素的细菌种类较多,常见的有醋酸菌属、土壤杆菌属、假单胞杆菌属、无色杆菌属、产碱杆菌属、气杆菌属、固氮菌属、根瘤菌属和八叠球菌属等9个属中的某些种。其中醋酸菌属中的木醋杆菌(Acetobacter xylinum)是最早被发现同时也是研究较为透彻的纤维素产生菌,现已作为研究纤维素生物合成过程和机制的模式菌株。根据《伯杰氏系统细菌学手册》第9版,木醋杆菌已被划分到葡糖醋杆菌属(Gluconacetobacter)中,改为木葡糖醋杆菌(Gluconacetobacter xylinum)。

近几年关于细菌纤维素生产合成的研究仍多以木葡糖醋杆菌或其变种做为试验菌种,为此,本实验室分离筛选出一株细菌纤维素高产菌G-29,并经16S rDNA测序鉴定该菌为葡糖醋杆菌属中一个新的菌种。

本实验以G-29为试验菌种,在前期试验的基础上,利用响应面分析法[6],对其发酵培养基的诸多营养因素进行考察和评价,并确定了细菌纤维素合成的重要影响因子的最优水平,取得了较好的发酵效果,为进一步提高其产量和后续的放大培养奠定基础。

1 材料

1.1 菌种来源葡糖醋杆菌(Gluconacetobacter sp.)G-29,由本实验室课题组2008年从成都市所采集的水果样品中分离获得,保存于四川大学生物资源与生态环境教育部重点实验室。

1.2 培养基斜面培养基:葡萄糖30 g/L,酵母膏5 g/L,Na2HPO4 1 g/L,MgSO4 0.15 g/L,乙醇20 ml/L,琼脂18 g/L,pH6.0;种子培养基:葡萄糖50 g/L,酵母膏15 g/L,Na2HPO4 3 g/L,MgSO4 0.2 g/L,乙醇40 ml/L,pH 6.0;用于响应面分析的基础发酵培养基:葡萄糖30 g/L,酵母膏5 g/L,Na2HPO4 1 g/L,MgSO4 0.15 g/L,乙醇20 ml/L,pH 6.5;优化后的发酵培养基:混合碳源52.3 g/L(葡萄糖:蔗糖=1:2),酵母膏8 g/L,FeSO4 0.2 g/L,MgSO4 0.159 g/L,Na2HPO4 2 g/L,柠檬酸1 g/L,乙醇32.5 ml/L,pH 6.5。

1.3 培养条件挑取一环活化的斜面菌种至装有100 ml种子培养基的250 ml三角瓶中,30℃,110 r/min振荡培养24 h,然后按照8%的接种量,将种子培养基接入装有100 ml发酵培养基的250 ml三角瓶中,8层纱布封口,30℃静置培养7 d。

2 方法

2.1 细菌纤维素的产量测定从培养基中取出纤维素膜,用水多次冲洗,除去膜表面培养基及杂质。再将膜浸泡于0.1 mol/L的NaOH溶液,100℃煮沸20 min,去除液膜中的菌体和残留培养基,膜呈乳白色半透明。然后用蒸馏水多次冲洗,用pH试纸轻压膜测pH值,约7.2,80℃干燥至恒重。纤维素含量用g/L表示。

2.2 发酵培养基优化方法Plackett-Burman设计、Box-Behnken中心试验设计及响应面分析。

3 结果

3.1 Plackett-Burman设计法筛选重要因素 根据笔者前期实验,本研究选取混合碳源(葡萄糖∶蔗糖=1∶2),酵母膏,FeSO4,Na2HPO4,MgSO4,柠檬酸、乙醇作为PB试验的7个因素,每个因素取两个水平,因素水平及编码见表1,数据分析及模型建立由Design Expert软件完成。表1 Plackett-Burman(PB)实验设计因素水平及编码(略)

根据Plackett-Burman实验设计得到的7因素12实验组合,依次进行培养基的配制、接种、发酵试验(每组3个平行,取平均值),以细菌纤维素干重为响应值Y。结果如表2所示。

由表3可以看出,对G-29发酵合成能力影响最大的因素是混合碳源(葡萄糖/蔗糖=1∶2),其次是乙醇和MgSO4。这3个因素对细菌纤维素产量影响显著,置信度高于90%,可作为进一步优化的因素。而其它4个因素对发酵产量的影响未达到显著水平,在下一步的研究中不予考虑。表2 Plackett-Burman(PB)试验结果(略)表3 Plackett-Burman试验主效应分析(略)

3.2 重要因素与产量关系的2次方程的建立由Box-Behnken和Box-Wilson提出的中心组合设计是两种常用的响应面分析法,适用于2~5个因素的优化试验。Box-Behnken每个因素取3种水平,以(-1,0,+1)编码,对数据进行二次回归拟合,得到带交互相和平方相的二次方程,分析各因素的主效应和交互效应,最后在一定的水平范围内求出最佳值。对发酵产量有显著性影响的3个因素的水平及编码见表4。 表4Box-Behnken试验因素水平及编码 (略)

在Plackett-Burman试验的基础上,在最陡爬坡试验确定的浓度区域内,对影响G-29合成细菌纤维素的关键因素按照Box-Behnken设计进行l5组试验(每组3个平行,取平均值),以细菌纤维素干重为响应值Y。结果见表5。表5 Box-Behnken设计与细菌纤维素产量(略)

利用统计软件Minitab15对表5数据进行二次多项式拟合,获得细菌纤维素产量(Y)对自变量葡萄糖/蔗糖(x1),MgSO4 (x2),乙醇(x3)的多元回归方程:Y=11.223 3+0.443 8X1+0.208 8X2+0.415 0X3-0.927 9X12

-0.587 9X22-0.825 4X32-0.002 5X1X2-0.050 0X1X3+0.000 0X2X3

从该方程的方差分析(表6)可知,该模型极显著(P

3.3 响应面分析及最佳培养条件确定通过回归方程来绘制分析图,考察所拟合的相应曲面的形状,响应面立体分析图和相应等高线图见图1~3。通过该组图可对主效应因子对细菌纤维素产量的两两交互作用进行评价,并确定各个因素的最佳水平范围。表7 发酵培养基多元二次方程方差分析表(略)

由图1~3可知,该回归方程存在稳定点,即极大值点,经分析可知回归模型的稳定点的编码值为:X1=5.232 3,X2=0.015 9,X3=3.252 5,相当于葡萄糖/蔗糖为5.232 3 g/100 ml,MgSO4 0.015 9 g/100 ml,乙醇3.252 5 ml/100 ml,在此最优条件下,细菌纤维素的预测最大产量为11.347 g/L。为验证模型的准确性和有效性,用预测的最优发酵培养基进行发酵实验,可得实际细菌纤维素产量为11.83 g/L,是优化前的基础发酵培养基产量(6.20 g/L)的1.9倍。由此,进一步证明该回归方程能够真实的反映筛选因素对细菌纤维素产量的影响,可用于预见实际发酵情况,对发酵条件的研究具有指导意义。

3.4 细菌纤维素形态与晶体结构分析

细菌纤维素膜经水冲洗和稀碱液处理后,残留的发酵液及菌体被除去后,细菌纤维素膜呈乳白色半透明胶状(图4),外表均匀光滑,质地柔韧。经干燥后,由电镜扫描可观察其微观结构为典型的超微细网状结构(图5),由高密度微纤维进行无规则的层状重叠,互相缠绕形成。

纤维素X-射线衍射图谱是以衍射角为横坐标,衍射强度为纵坐标,以晶胞(101),(101)和(002)面的衍射峰为计算基准。由图6可以看出,干膜的衍射图分别在14.94 2θ和22.45 2θ处有两个主要的衍射峰,这是纤维素I的特征峰,即细菌纤维素的晶体结构属于纤维素I。其中2θ为22.45处的衍射峰对应晶面(002),在纤维素X-射线衍射图谱中,2θ值在22.50附近的峰高代表了002面的衍射强度,即结晶区的强度。由衍射图谱可看出,G-29合成的细菌纤维素,结晶指数高,结晶强度大。而图7则反映了湿膜的衍射峰,只在28.5 2θ和42 2θ处有衍射峰,没有呈现出纤维素I的衍射峰,表明湿态的晶面面间距比干态的小。这两个峰的峰宽比干态下大,表明其结晶不完全,结晶度低,晶粒尺寸小。可能是由于细菌纤维素湿膜含有大量的水,导致纤维素分子链之间的距离增大,在水分子与纤维素链的相互作用下,纤维素分子链之间的氢键模式发生改变,从而影响了细菌纤维素膜的晶型和晶粒尺寸,导致其的结晶度变低。

4 结论

本实验采用了Plackett-Burman试验设计,对影响菌株G-29合成细菌纤维素的7个因素进行了评价,筛选出了混合碳源(葡萄糖∶蔗糖=1∶2),乙醇和MgSO4为影响细菌纤维素产量的关键因子。葡萄糖是合成细菌纤维素的原料,蔗糖可以缓解发酵过程中pH值的急剧降低;乙醇可以被细菌氧化为乙酸,同时生成用于细胞合成的ATP等高能量化合物[7],对细菌纤维素的合成起促进作用,而MgSO4中的Mg2+是纤维素合成酶的激活剂。因此,以PB试验筛选出的主要影响因子能够反映实际情况,证明该方法是一种经济而有效的试验方法。

通过响应面法(RSM)建立了细菌纤维素发酵培养基的回归模型:Y=11.223 3+0.443 8X1+0.208 8X2+0.415 0X3-

0.927 9X12-0.587 9X22-0.825 4X32-0.002 5X1X2-

0.050 0X1X3+0.000 0X2X3该模型高度显著,可用于实际分析与预测。

优化后的发酵培养基组成:混合碳源52.3 g/L(葡萄糖∶蔗糖=1∶2),酵母膏8 g/L,FeSO4 0.2 g/L,MgSO4 0.159 g/L,Na2HPO4 2 g/L,柠檬酸1g/L,乙醇32.5 ml/L,此条件下的发酵产量是优化前的基础发酵培养基产量(6.20 g/L)的1.9倍,表明Plackett-Burman试验和响应面相结合的试验方法用于优化G-29发酵培养基,不仅科学合理而且准确有效。

细菌纤维素具有超微结构,湿膜的固形物含量低,持水性高,结晶不完全;干燥后结构致密,抗拉强度高,结晶指数高,结晶强度大。

参考文献

[1]Peter Ross, Raphael Mayer, Moshe Benziman. Cellulose biosynthesis and function in bacteria[J]. Microbiological Reviews,1991,55(1):35.

[2]Choi Yong-Jin, Ahn Yeonghee, Kang Moon-Sung, et a1. Preparation and characteri- zation of acrylic acid-treated bacterial cellulose cation-exchange membrane[J].Journal of Chemical Technology and Biotechnology,2004,79(1):79.

[3]Czaja W, Krystynowicz A, Bielecki S, et a1. Microbial cellulose-the natural power to heal wounds[J].Biomaterials,2006,27:145.

[4]马霞,陈世文,王瑞明,等.纳米材料细菌纤维素对大鼠皮肤创伤的促愈作用[J].中国临床康复,2006,10(37):45.

[5]Svensson A, Nieklasson E, Harrah T, et al. Bacterial cellulose as a potential scaffold for tissue engineering of cartilage[J]. Biomaterials,2005,26(4):419.

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