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许海中学范文1
That’s why my newest goal， both as a 2）professional and a person， is to be a quitter.
Being a quitter isn’t being someone who gives up， who doesn’t see important things through to the end. I 3）aspire to be the opposite of those things， and think we all should. The quitter I want to be is someone who gets out when there’s no value to be added， or when that value comes 4）at the expense of something more important.
I want to quit doing things that I’m asked to do， for no other reason than I’m asked to do it. I want to be able to quit something in 5）mid-stream， because I realize there’s nothing good coming from it.
A friend of mine once told me that “I knew I was anwhen I could stop reading a book， even after getting 500 pages into it.” 6）Odd though it sounds， we all 7）tend to do this. We 8）get involved in something， realize we don’t want to be a part of it， but keep fighting through. We say “well， I’ve already 9）invested so much time in this， I might as well 10）stick it out.”
I 11）propose the opposite： Don’t be afraid to quit， 12）regardless of the project 13）status or time invested. If you’re reading a book， and don’t like it， stop reading. Cut your losses， and realize that the smartest thing to do is stop before your losses grow even more. If you’re working on a project at work that isn’t going anywhere， but you’ve already invested tons of time on it， quit. Take the time gained by quitting the pointless project， and put it toward something of value. Instead of reading an entire book you hate， read half a bad one and half a good one. Isn’t that a better use of your time？
If you’re 14）stuck doing something， and don’t really want to do it anymore， step back for a second. Ask if you really have to do this， and what value is being produced from your doing it. Don’t think about the time you’ve put into it， or how much it’s taken over your life. If you don’t want to do it， and don’t have to do it， don’t do it.
By quitting these things， you’ll free up time to do things that actually do create value， for yourself and for others. You’ll have time to read all the great books out there， or at least a couple more. You can start putting your time and effort into the things you actually like to do.
Let’s try it together： What are the things you’re doing， that you’re only doing because you’ve been doing them for so long？ Quit. Don’t let time spent 15）dictate time you will spend. Let’s learn how to say “no” at the beginning， or in the middle， and free up more of our time to do the things we’d like to be doing， and the things actually worth doing.
Saying no is hard， and admitting a mistaken yes is even harder. But if we do both， we’ll start to make sure that we’re spending our time creating value， rather than 16）aggravating our losses. Let’s be quitters together.
What do you think？ What in your life can you quit？
我是那种害怕说“不”的人。我每次总是承担太多的工作，并且花费太多的时间做我不想做的事情。我会把事情完成，但往往无法做到最好，或者不是以最佳的方式利用自己的时间。
所以，我的最新目标――无论从职业和个人方面――就是成为一个懂得放弃的人。
学会放弃，并不是去做一个轻易放弃的人，这种人没有看透事情的关键。我渴望成为与之相反的人，我认为我们都应该这样。我想成为这样一种懂得放弃的人――当无法创造更高的价值，或者创造这种价值需要牺牲更重要的事时，他们会选择离开。
我想放弃做那些别人要求我做的事，因为我做这些事的唯一原因只是别人叫我去做。我希望能在中途放弃一些事，因为我意识到自己从中没有得到任何好处。
我的一个朋友曾经告诉我，“当我能放弃读一本书，即使之前我已经读了500页，我知道自己长大了”。尽管听起来很奇怪，但我们都倾向于这么做。我们涉足一些事情，意识到自己并不想成为它的一部分，却继续挣扎。我们会说：“嗯，我已经投入了这么多时间在里面，我还是坚持到底吧。”
我提出相反的观点：不要害怕放弃，不管项目的状况是好是坏，或者你投入了多少时间。如果你正在读一本书，你不喜欢它，那就不要再读。减少你的损失，并懂得最明智的做法是在损失增加之前停止。如果你正在做一个没有进展的项目，但你已经花费了大量的时间，那么请放弃。从放弃毫无意义的项目中获得时间，并把它投入到有价值的事情上。读一半坏书，读一半好书，而不是读完一本你讨厌的书。这难道不是更好地利用你的时间吗？
如果你被一件事缠住，而你真的不想再做了，停下来想一想。问一问自己是否真的必须做，你做这件事情能产生什么价值。不要去想你投入的时间，也不要想它占据了你生活的多大部分。如果你不想做，且不是必须做的事，那就不要做。
通过放弃这些事情，你将可以腾出时间做一些能真正为自己和其他人创造价值的事。你将会有时间阅读所有伟大的书籍，或者至少可以多读几本。你能够将你的时间和精力投入到真正喜欢的事上。
让我们一起试一试吧：你现在做的事情当中，有哪些仅仅是因为你已经做了很久而继续做的？放弃吧。不要让已经付出的时间支配以后的时间。让我们学会在开始或中途说“不”，而后腾出更多时间去做我们想做、并真正值得做的事。
说“不”很难，承认错误更难。但是如果我们都做到了，我们将会知道自己所花的时间是在创造价值，而不是加重损失。让我们一起成为懂得放弃的人。
你有什么想法？生活中，有什么是你能放弃的呢？
何时需要放弃，何时需要坚持？
如果你想要放弃，确保你放弃的理由足够充分，确定你已经权衡过利弊。遇到一点小挫折就放弃，必然会令你一事无成。当你考虑放弃某一件事之前，思考以下问题：
你是新手，还在学习当中吗？有人可以为你提供指导意见，让你不断提高吗？
现在这个地方、这个阶段是否值得你全力以赴地追求当前的事业？你身边有支持你想法的人吗？
你正在做的事能让你快乐吗？即使日后无法从中取得巨大成功，你还会一如既往地享受这件事吗？
你的付出与收获成正比吗？
There comes a time when you’re losing a fight that it just doesn’t make sense to keep on fighting. It’s not that you’re being a quitter， it’s just that you’ve got the sense to know when enough is enough.―Christopher Paul Curtis （African-American writer of children’s books）
总会有这种时候：你在斗争中失利，继续坚持下去显得没有多少意义。这并不代表你是一个半途而废的人，只是说明你意识到真的够了。――克里斯托夫・保罗・柯蒂斯（非裔美国儿童书作家）
许海中学范文2
【导语】
报名时间
各区考试招生机构（以下简称“区招考机构”）可通过登录上海市中职校学业水平考试信息管理系统（以下简称“考试管理系统”），于11月13日至11月19日组织本区学生的报名工作。
报名入口
上海市中职校学业水平考试信息管理系统 点击进入
许海中学范文3
查询时间
2018年徐汇普通高校春季考试成绩将于2018年2月1日20:00公布。
2018年徐汇普通高中学业水平高三科目（语文、数学、外语）合格性考试成绩现开通查询。考生可登录“上海招考热线”网站或“东方网”，通过输入学业水平考试通知单上的12位报名号（报名号亦可通过历年学业水平考试成绩通知单获取），密码为报名时所填考生证件号码（最后不含字母的六位数字），查询各科成绩。
查询办法
2018年徐汇普通高中学业水平合格性考试成绩分“合格”“不合格”两类，考试成绩只公布合格或不合格，不公布分数。合格性考试合格分数线以卷面成绩的标准分值划定。经过教育测量、教育统计、教育教学等方面的专家测算，以课程标准为依据，对本次考试的试卷难度、成绩分布进行计算分析，确定本市各科目的合格标准。查询结果中“/”表示未报考该科目考试，“Q”表示该科目考试缺考。考试成绩以下发的成绩证书为准。
查询入口
线路一：2018徐汇高中学业水平考试成绩查询入口
线路二：2018徐汇高中学业水平考试成绩查询入口
东方网：2018徐汇高中学业水平考试成绩查询入口
复核时间
考生若对本人的成绩有疑问，可在2018年2月2日10:00—3日16:00登录“上海招考热线”网站（点击首页中的“成绩查询”栏目进入）申请网上成绩复核，按照系统提示输入相关信息并提交。成绩复核是核查答题纸姓名、报名号等是否与考生本人对应，试卷有无漏评、漏阅，小题得分是否漏统，各小题得分合成后是否与提供给考生的成绩一致等。成绩复核结果只向考生提供所复核科目成绩等级。成绩复核不重新评阅答卷，考生本人不得查阅答卷。
复核办法
1.考生使用考试通知单上学业考报名号作为用户名登录成绩复核系统，初始密码为报名时所填的考生证件号码最后不含字母的六位数字，登录后可以修改密码。
2.登录后，在申请页面勾选需复核的科目后点击“提交申请”，看到提示“提交成功”字样表示申请完毕，退出请点击“退出系统”按钮。
3.考生如需增加复核的科目，可在复核申请的时间段内再次登录系统增加科目。复核科目以考生在规定时间内最后一次网上成功提交的为准。
许海中学范文4
[关键词] 地中海贫血;产前诊断;稀有突变;CD6;CD56;CD22
[中图分类号] R596.2 [文献标识码]A [文章编号]1674-4721(2010)03(a)-015-03
Prenatal diagnosis for the rare beta-thalassemia mutation carriers with DNA sequencing
SONG Chunlin*,FAN Juhua,CHEN Shufen,GUO Xiaoling
(Clinical Laboratory of Foshan Maternal and Children′s Healthcare Hospital of Foshan,Foshan528000,China)
[Abstract] Objective: Prenatal diagnosis was performed for the rare beta-thalassemia mutation carriers by direct DNA sequencing of the entire β-globin gene. Methods: Screened the couples by cell counter and hemoglobin analysis, then identified the commonest known 17 types mutation by reverse blot dot. For the doubtful patient who was not detected mutation,direct DNA sequencing of the entire β-globin gene. Prenatal diagnosis was performed for the couples who was identified as rare beta-thalassemia mutation carriers. Results: One pregnant was heterozygote of CD6(GAGAAG)/N and her husband was heterozygote of CD41-42(-TTCT),her fetus was heterozygote of CD6(GAGAAG)/N.The other pregnant was CD56 (GGCGAC)/N heterozygote of and her husband was heterozygote of CD22(GAAGCA)/N,her fetus was not detected any reported mutation. Conclusion: Direct DNA sequencing of the entire β-globin gene is a effective technology of prenatal diagnosis for the rare beta-thalassemia mutation carriers.
[Key words] Thalassemia; Prenatal diagnosis; Rare mutation; CD6; CD56; CD22
地中海贫血是我国南方最常见和危害最大的单基因遗传病之一,重型β地中海贫血一般在出生后3～6个月出现症状,需要靠频繁地输血和去铁治疗维持生命,多在成年前夭折。目前主要以聚合酶链反应结合反向点杂交芯片技术检测中国人常见的17种β地中海贫血突变。还有一部分患者携带稀有β地中海贫血突变,若其配偶也携带β地中海贫血突变,容易被忽略,有可能诞生中重度β地中海贫血的患儿。笔者利用直接基因测序方法,发现一些稀有β地中海贫血突变患者,并为两对双方均携带β地中海贫血的夫妇做了产前诊断。
1 资料与方法
1.1 一般资料
来本院产前诊断的孕妇及其丈夫,筛查并基因测序确诊两对夫妇(A夫妇和B夫妇)携带稀有β地中海贫血突变,两对夫妇自愿要求行产前基因诊断。A夫妇为广东省深圳市籍贯,B夫妇为广东省佛山市人。
1.2 地中海贫血筛查
用血细胞全自动分析仪Sysmex XT2000i检测血常规,对于MCV
基因诊断:对于HbA2升高或有异常血红蛋白电泳带的患者,采用深圳亚能生物技术有限公司的β地中海贫血基因诊断试剂盒,按说明书操作提取DNA,在Bio-Rad iCycler PCR仪上基于聚合酶链反应技术扩增出613、423 bp 2个片段,再用反向点杂交技术杂交显色,检测中国人常见的17种β地中海贫血基因突变。
1.3 基因测序
对于未检测出常见的17种β地中海贫血突变的患者,用Qiagene试剂盒纯化DNA,在ependoff gradient PCR仪上扩增β球蛋白基因,在ABI 3730测序仪上直接基因测序,测序范围为上游至-126,下游至终止密码子后230碱基处,参考序列为U01317,用DNAman和Chromas软件分析测序结果。
1.4 产前诊断
对于发现携带稀有β地中海贫血突变的患者,若其配偶携带有β地中海贫血突变,提供遗传咨询。在签署知情同意书后,于孕16～21周,在B超引导下采用PTC穿刺针经母腹部抽取羊水5 ml或于孕18～24周抽取脐血1 ml,提取并纯化DNA,进行基因测序。
2 结果
2.1 A夫妇基因序列结果
筛查A夫妇中丈夫血常规MCV 67.5 fl,MCH 20.5 pg,MCHC 303.0 g/L,血红蛋白电泳HbA2为7.10%。反向点杂交显色发现41-42(-TTCT)杂合突变,如图1。A孕妇血常规Hb 90.0 g/L,MCV 67.3 fl,MCH 19.9 pg,MCHC 296.0 g/L,在外院血红蛋白电泳检测报告有21.55%的异常带。反向点杂交显色未发现常见的17种β地中海贫血突变。基因测序结果为CD6(GAGAAG)/N杂合突变,如图2。在提供遗传咨询后,于孕17周抽取羊水。基因测序结果发现胎儿为CD6(GAGAAG)/N杂合突变,如图3,但是没有携带41-42(-TTCT)突变。
2.2 B夫妇基因序列结果
筛查B夫妇的丈夫血常规未发现异常,但血红蛋白电泳发现有G带42.73%,反向点杂交显色未发现常见的17种β地中海贫血突变,基因测序结果为CD22 (GAAGCA)/N,如图4。B孕妇血常规RBC 5.71×1012/L,MCV 71.6 fl,MCH 21.2 pg,MCHC 292 g/L,血红蛋白电泳发现有J带47.53%,反向点杂交显色未发现常见的17种β地中海贫血突变,基因测序结果为CD56 (GGCGAC)/N,如图5。在提供遗传咨询后,于孕20周抽取脐血,基因测序结果发现胎儿未遗传父母的两种β地中海贫血基因突变。
3 讨论
地中海贫血是一组常染色体隐形遗传病。它是由于珠蛋白基因突变,使珠蛋白生物合成受阻、产量不足或缺如所致,导致慢性溶血或严重缺氧致死,是我国长江以南各省发病率最高、影响最大的遗传病之一[1]。常见有两种类型:α地中海贫血和β地中海贫血。由于目前对地中海贫血尚无有效的治疗方法,一般依赖频繁地输血和去铁治疗赖以维持生命,且一般在成年前夭折,因此加强婚前检查和产前检查、进行遗传咨询,为夫妇双方均为地中海贫血基因携带者的孕妇,在妊娠早期抽取羊水或脐血进行产前基因诊断,防止中、重型地中海贫血患儿的出生,减少杂合子胎儿的出生。是最有效的预防措施,可以提高人口素质、减轻家庭和社会精神和经济负担[2]。全世界已发现的β地中海贫血基因突变超过200种[3],我国已报道突变超过30种,我国常见地中海贫血基因突变23种,其中CD41-42(-TTCT)、IVS-Ⅱ-654(CT)、CD17(AT)、CD71-72(+A)、-28(AG)、βE(GAG AAG),占中国人β地中海贫血基因突变总数的80%以上[4-5]。现在一般以基于反向点杂交技术的基因芯片检测中国人常见的17种β地中海贫血基因突变,所以会有一定的漏诊率。而且β地中海贫血基因突变具有异质性,在不同的地区基因突变类型和所占的比例都有所不同[6]。因此,调查本地的基因突变类型和所占的比例,发现当地的稀有突变就显得非常重要。因为当一对夫妇中有一位携带常见的β地中海贫血基因突变,而其配偶携带稀有β地中海贫血基因突变时,由于常规的反向点杂交未发现这个稀有突变,因而错过了产前诊断,但这对夫妇却有四分之一的机会诞生中间型或重型的β地中海贫血患儿。
笔者在筛查中发现两对夫妇血常规改变或血红蛋白电泳有异常带,在反向点杂交显色除A丈夫为41-42杂合突变外其他未发现常见的17种β地中海贫血突变,进一步的基因测序发现,A孕妇、B丈夫和B孕妇为稀有β地中海贫血突变的杂合子。然后为A孕妇抽取羊水行产前诊断,基因测序结果表明胎儿为CD6(GAGAAG)/N杂合突变,为轻型β地中海贫血。B孕妇抽取脐血行产前诊断,基因测序结果表明,没有遗传父母的两种稀有β地中海贫血基因突变,也没有发现其他突变,可以继续妊娠。对β球蛋白基因测序可以有效地发现稀有突变[7],并为携带稀有β地中海贫血突变的夫妇提前基因诊断,是常规地中海贫血产前基因诊断的一个重要补充手段,可减少漏诊率。
[参考文献]
[1]黄林环,方群,曾瑞萍,等.地中海贫血胎儿产前基因型诊断结果与血象特点的分析[J].中华儿科杂志,2006,44(10):760-763.
[2]Joel Zlotogora.Population programs for the detection of couples at risk for severe monogenic genetic diseases[J].Hum Genet,2009,126:247-253.
[3]Kalokairinou EM.The experience of beta-thalassaemia and its prevention in Cyprus[J].Med Law,2007,26:291-307.
[4]Mao X.Chinese geneticists’ views of ethical issues in genetic testing and screening: evidence for eugenics in China[J].Am J Hum Genet,1998,63:688-695.
[5]周玉球,莫秋华,卢金汉,等.基于社区水平的珠海市大人群地中海贫血的筛查和产前诊断[J].中华医学遗传学杂志,2008,25(3):256-261.
[6]Vivian CD,Sandrine C,Mara H.Identification of β thalassemia mutations in South Brazilians[J].Ann Hematol,2008,87:381-384.
许海中学范文5
关键词：补阳还五汤；针刺；气虚血瘀型中风病
中图分类号：R255.2文献标志码：B文章编号：1007-2349（2016）07-0051-02
【Abstract】Objective： To observe and analyze the clinical effect of Buyanghuanwu Decoction plus acupuncture on the treatment of stroke patients with qi deficiency and blood stasis syndrome. Methods： 90 patients who were treated at our hospital from August， 2013 to December， 2015 were retrospectively analyzed and randomly divided into three groups， namely， group A （Buyanghuanwu Decoction plus acupuncture）， group B （acupuncture）， group C （Buyanghuanwu Decoction）. The clinical effect and adverse reactions of the three groups were observed after each different treatment. Results： Group A was better than other two groups in TCM curative effect. The curative effect of the three groups presented significant difference （P
【Key words】Buyanghuanwu Decoction， acupuncture， stroke patient with qi deficiency and blood stasis
中风是一组以脑部缺血及出血性损伤症状为主要临床表现的疾病，又称脑卒中或脑血管意外，其病因归纳起来不外虚（阴虚、气虚）、火（肝火、心火）、风（肝风、外风）、痰（风痰、湿痰）、气（气逆）、血（血瘀）六端，而气虚血瘀是中风的主要发病机制，中医辨证理论认为，气虚会导致肌体不能正常运血，气血不通则会使得导致脉络瘀阻[1]，进而对患者的预后造成极大的不利影响。临床中风疾病有着较高的致残、致死率，是危害中老年患者生命健康的常见疾病。为了观察更为有效的治疗方法，以提升治疗气虚血瘀型中风病的临床疗效，减轻患者及其家属的经济负担，笔者对补阳还五汤配合针刺治疗气虚血瘀型中风病的临床效果展开探讨与分析，收获了良好的效果，现报道如下：
1临床资料
1.1一般资料选取2013年8月―2015年12月来我院治疗的90例气虚血瘀型中风病患者进行回顾性分析，按照数字表法将所有患者随机分成A、B、C 3组，平均每组30例。其中，A组有女8例，男22例，年龄45～76岁，平均年龄（53.6±8.7）岁；病程为1～4个月，平均病程（2.1±0.2）个月；其中脑出血3例，脑梗塞27例；B组有女10例，男20例，年龄49～75岁，平均年龄（52.7±9.1）岁；病程1～5个月，平均病程（2.3±0.4）个月；其中脑出血4例，脑梗塞26例；C组有女9例，男21例，年龄48～80岁，平均年龄（54.8±8.2）岁；病程2～5个月，平均病程（2.2±0.3）个月；其中脑出血2例，脑梗塞28例。3组患者在年龄、性别、病程及病情程度方面无显著差异性（P>0.05），具有可比性。
1.2诊断标准所有患者均经头颅CT、MRI经病理诊断为气虚血瘀型中风，符合中华医学会第十六次中国脑血管病大会关于中风病的诊断标准[2]。
1.2方法对所有患者均给予临床神经内科治疗，甘露醇脱水脱水以弱化患者的颅内压，通过硝苯吡酯控制血压进行控制，使患者脑细胞尽量活化。A组采用补阳还五汤配合针刺治疗；B组采用针刺治疗；C组采用补阳还五汤治疗。具体如下：
1.2.1针刺针对上肢瘫痪中风病，取患者椎间穴，实施浅刺，具体可以自第四颈椎逐渐向下，刺5针，进针8 mm。主穴为椎间穴交替，以肩k穴、曲池穴、少海穴、合谷穴为配穴。针对下肢瘫痪中风病，取患者腰椎前5节夹脊穴，进针8 mm，取腰椎穴，自命门穴逐渐向下刺6针，进针8 mm。以环跳穴、足三里穴、昆仑穴、委中穴、悬钟穴、三阴交穴、申脉穴围刺配穴。所有针刺穴位患者取平补平泻手法，每日1次，每次30 min，7 d为1疗程，疗程结束后间隔2 d再进行下1疗程，共2疗程。
1.2.2补阳还五汤选当归10 g，赤芍15 g，地龙15 g，黄芪70 g，桃仁15 g，红花10 g。痰阻则加半夏15 g，胆南星15 g；肢体痛感强烈加鸡血藤10 g，拘急加全蝎5 g。上述药物均水煎口服，每日1剂，疗程同上。
1.3疗效判定参照《中风病诊断和疗效评定标准》评分，并按文献标准拟定，按尼莫地平评分法[3]：治疗后/治疗前×100%。患者积分≥95%，可判定为治愈；患者积分≥70%，可判定为显效；患者积分≥30
1.4统计学分析
本文根据所得相关数据资料进行分析，所使用的数据处理软件为SPSS 19.0，计量资料采用（x±s）表示，组间对比以t值检验，计数资料以χ2值检验，以P
2治疗结果见表1。
3讨论
气虚血瘀是中风病的主要致病机理之一，中医辨证理论认为，“气为血之帅，血为气之母”，患者由于气虚而致使无法运血，气运行不畅因而血不荣，导致人体脉络瘀阻。患者瘀阻时间太长，则可能会在很大程度上损耗气血，以致于患者气虚血瘀，最终恶性循环。临床中医研究实践表明，补气活血可非常有效地遏制恶性循环。本病以气虚为本，血瘀为标，即王清任所谓“因虚致瘀”。治当以补气为主，活血通络为辅。本方重用生黄芪，可补脾胃元气，意在气旺则血行，祛瘀通络，为君药。当归尾活血通络而不伤血，用为臣药。赤芍、川芎、桃仁、红花协同当归尾以活血祛瘀；地龙通经活络，力专善走，周行全身，以行药力，亦为佐药。重用补气药与少量活血药相伍，使气旺血行以治本，祛瘀通络以治标，标本兼顾；且补气而不壅滞，活血又不伤正。合而用之，则气旺、瘀消、络通，诸症向愈。本方既是益气活血法的代表方，又是治疗中风后遗症的常用方。
因臂丛神经是供应上肢的神经丛，自4个颈神经根和第1胸神经根组成而言，上述神经根自椎间孔走出，抵达斜角肌间隙集合于锁骨上窝内，臂丛神经发出腋神经、尺神经、正中神经等。因而治疗患者上肢瘫痪时，应按照其臂丛神经走向及组成选穴，自第4颈椎始逐渐向下取穴，以刺激臂丛神经。骶丛神经位于骶骨位置，自腰丛神经穿过坐骨大孔，和腰4神经前根的纤维和腰丛相连。治疗患者在下肢瘫痪时，按照骶丛神经的具体情况，可选腰椎5节主穴，并且按照患者的具体临床症状选配穴，治半身不遂。解溪穴位于患者拇长伸肌和趾长间，针刺治疗下肢痿痹、足下垂[4]。补阳还五汤配合针刺均有其各自的治疗侧重点，针刺主要以刺激作为主要方式，利用对经络的刺激并以此来调动患者肌体的积极因素，最终完成疾病的良性转归[5]。药物治疗主要以物质方式直接进入患者，以此来影响患者机体内环境，达到直接或间接的药物调节效果。补阳还五汤联合针刺可兼并两者治疗的长处，且临床疗效稳定。可以明确的是，针药补阳还五汤配合针刺并非只是1+1的治疗相加，更多的是彼此补充，彼此影响。针刺治疗可以强化药物的有效利用，而中药则能延长的针刺效应，补阳还五汤配合针刺作为一种综合的中医治疗手段，其功能发挥了其他单一的治法无法协调的作用。
参考文献：
[1]张东升.加味补阳还五汤治疗气虚血瘀型中风后遗症临床观察[J].内蒙古中医药，2013，13（21）：88.
[2]蔡粉桃.补阳还五汤治疗气虚血瘀型中风后遗症34例[J].甘肃中医学院学，2012，11（1）：19-20.
[3]蔡新伦.补阳还五汤加减治疗气虚血瘀型中风后遗症48例临床观察[J].实用中西医结合临床，2011，18（5）：16-17.
[4]徐晓今，黎凯，王幼奇.针刺联合补阳还五汤治疗气虚血瘀型中风随机平行对照研究[J].实用中医内科杂志，2014，12（8）：138-140.
许海中学范文6
[关键词] 地中海贫血；MLPA技术；基因测序技术
[中图分类号] R556.6 [文献标识码] A [文章编号] 1673-7210（2013）08（a）-0019-02
我国常见的遗传性血液病有很多种，其中之一就是地中海贫血病。在我国，地中海贫血病的高发地区主要集中在广东、广西、海南和福建等省份。在世界范围内保守估计[1]，有近2亿人携带此病基因[2]，它已被世界卫生组织列为危害人类健康的6种常见病之一。如果夫妇双方都携带地贫基因，按照基因重组定律，他们子女就会有25%的可能是重型地中海贫血，50%的可能是轻型地中海贫血，另有25%才属于正常。按照现有的医疗技术水平，尚无有效治疗地贫的方法，只有通过遗传筛查和产前诊断才能有效杜绝重症地贫患儿的出生[3]。本文回顾性分析了地中海贫血病患者110例，目的是联用MLPA技术和基因检测技术，对地中海贫血病患者进行基因诊断。
1 资料与方法
1.1 一般资料
2011年10月～2013年2月来深圳市坪山新区人民医院就诊的地中海贫血病患者110例，其中男56例，女54例，年龄21～56周岁，平均（34±3.4）周岁。在110例地中海贫血病患者中，重型41例，轻型69例。
1.2 方法
1.2.1 基因测序 将目的基因聚合酶链式反应（polymerase chain reaction，PCR）扩增，具体为，PCR反应体系为每管10 μL，提纯的人体DNA 样本1 μL，上下游引物各1 μL，1 μL 10×loading buffer，1 μL的酶，剩余量用ddH2O补足。PCR反应程序为，92℃ 2 min，（92℃ 25 s，55℃ 15 s，72℃ 40 s）进行35个循环，最后4℃保存。再将基因扩增产物进行聚丙烯酰胺凝胶电泳，结束后观察，拍照。
1.2.2 MLPA检测 根据MLPA试剂盒说明书步骤进行实验。先进行PCR扩增，具体步骤为，PCR反应体系为每管10 μL，提纯的人体DNA样本1 μL，上下游引物各1 μL，1 μL 10×loading buffer，1 μL的酶，剩余量用ddH2O补足。PCR反应程序为，92℃ 2 min，（92℃ 25 s，55℃ 15 s，72℃ 40 s）进行35个循环，最后4℃保存。再取扩增产物2 μL加上甲酰胺和Ladder，加热5 min，最后放在冰上10 min。最后进行电泳，时间为2 h。电泳完后用相关软件进行分析。
2 结果
2.1 基因检测结果
对110例基因进行检测，α1型地中海贫血病21例，α2型地中海贫血病27例，β型地中海贫血病62例。在62例β型地中海贫血病患者中，21例（33.9%）合并α型地中海贫血病双重杂合子，41例（66.1%）是41～42杂合基因型。
2.2 MLPA检测结果
通过MLPA检测检测又发现16例（14.55%）α型地贫缺失型。因为通过普通的基因检测结果所发现的地中海贫血病基因缺失型仅仅只能包括中国人的90%，再加上MLPA检测，基本就能覆盖全中国人。
3 讨论
地中海贫血病属于遗传性疾病，主要由基因缺陷导致的，鉴于现有的医疗水平，彻底根治此病尚有难度。所有对于地中海贫血病的预防已经受到外国的重视。所以许多发达国家例如希腊、撒丁尼亚岛、意大利和塞普路斯等从20世纪70年代起采取对地中海贫血病的预防措施，如普及地中海贫血病的病例知识，加强实施卫生教育、加大对地中海贫血病筛查力度等方法，很好地控制了地中海贫血病在这些国家的发病率。甚至在有些国家地中海贫血病发病率降低到了0%，比如在意大利，年轻夫妇从临床医生和卫生部门学习到关于遗传风险的知识，从而能更好地选择生育时机，降低了地中海贫血病的发病率。亚太地区如新加坡等也是地中海贫血病的重灾区，这些国家学习欧洲先进的预防方法和干预手段，也大大降低了地中海贫血病的发病率，已经接近了0%。在中国，地中海贫血病高发地区是广州，卫生部门已对此有了高度的重视，也制定了相关的预防措施，力图最大程度地降低地中海贫血病的发病率。
预防地中海贫血病的关键就是能否有效地检测和筛查出地中海贫血病缺陷基因的携带者[4]。一旦准确地检测和筛查出地中海贫血病缺陷基因的携带者，就能指导他们进行合理的婚配和生育，就能预防地中海贫血病基因缺陷的胎儿出生，所以提高地中海贫血病缺陷基因的检测和筛查水平有重要的意义。
血红蛋白电泳与血液学筛查是诊断地中海贫血的常用方法[5]。如用这两种方法发现地中海贫血的疑似病例，就再通过基因检测的方法确定是否为地中海贫血病基因缺陷。这一些系列的方法准确度比较高，能发现中国人中90%的地中海贫血病基因缺失型。PCR法和反向斑点杂交技术是基因检测中常用的两种方法[6]。国际上检测α型地中海贫血基因缺失的方法主要是单管多重PCR法，方法就是在一个PCR反应体系里加入多对反应引物，大概有3～4对，这样能同时检测多对等位基因，一般能同时检测出3种地中海贫血病基因缺失，但对非缺失型基因，漏检率较高。反响杂交发能检测β型地中海贫血病的基因突变。这种方法能在同一张膜上同时检测17～18对等位基因的突变，大大提高了工作效率，但漏检率也不低，所以用PCR法和反向斑点杂交技术等基因检测的方法还存在一定的漏洞，检测率还不能达到100%。
据文献报道，一种全新的检测技术已问世，它就是多重连接酶依赖探针扩增法，它能在一个Eppendorf管里准确地检测40多个基因序列[7]。现在已经将此种方法引入到地中海贫血基因检测领域[8]，发现它能快速准确地检测出β地中海贫血的基因缺失和α地中海贫血缺失型。
多重连接酶依赖探针扩增法的原理是这样的，先设计出多对与目的序列互补的探针，它们一般能有效覆盖真个目的序列[9]。再进行PCR扩增，得到40多种不同的DNA序列。最后进行电泳分析，检测出缺陷基因。它的强大之处在于能同时检测出所有的缺陷基因。对于检测地中海贫血缺陷基因，多重连接酶依赖探针扩增法能同时检测出α基因缺陷型和β缺陷型的基因[10]，而且运用这种方法能检测到人类所有的β珠蛋白基因（HBB）和正常的血红蛋白基因（HbA）突变，很好地弥补了血红蛋白电泳、血液学筛查和PCR法[11]、反向斑点杂交技术这几种方法的技术缺陷[12]。
通过本文的研究，发现运用基因测序技术能检测到大部分的地中海贫血病，再联用多重连接酶依赖探针扩增技术能更准确的检测到全部地中海贫血病，所以联用多重连接酶依赖探针扩增技术和基因测序技术是检测地中海贫血病有效的方法，为以后的临床检测提供了依据。
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