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Abstract: Based on the topology of the network and performance index of network equipment, from the operation mechanism and protocol of rip protocol and OSPF protocol in small and medium-sized network, through the analysis of the comprehensive performance index of agreement in the network, like stability and transmission performance, this paper studied the specific algorithm of rip protocol and OSPF protocol, and finally got the best matching network and matching environment of two kinds of protocol through combining with the performance index of network equipment and the topology of the network.
关键词: OSPF;RIP;拓扑;Dijkstra 算法;D-V算法
Key words: OSPF;Rip;topology;Dijkstra algorithm;D-V algorithm
中图分类号:TP39 文献标识码:A 文章编号:1006-4311(2013)05-0194-04
0 引言
近几年来,特别是在步入21世纪之后,Internet规模的发展非常的迅速,Internet逐渐的走到了千家万户,并成为了人们生活中的一部分。同时当前的Internet的节点并不是单纯指的是计算机,还包括了PDA、移动电话、各种各样的终端甚至包括冰箱、电视等家用电器,这些设备都能够被接入网络之中。我国从上世纪90年代开始就已经建起了面向全社会的网络基础设施,交换机路由器大量的在我国的网络互联设备中应用,并逐步的完善我国的网络建设,伴随着我国电信网,计算机网络以及有线电视网络的三网融合进程的推进,我国的网络建设越来越完善,并在更多的领域发挥着作用。这些服务的提供离不开交换机路由器配置各种路由协议,比如RIP、OSPF、BGP等,在各种类型的网络中,究竟使用何种协议,如何在不同的网络环境下达到网络设备与网络协议最佳匹配,成为三网融合时代企及解决的课题。
文中首先分析计算机网络的常见拓扑结构与网络设备性能的关系,其次对IP数据包在网络设备中的运行原理与IP数据包在路由器中转发过程进行了研究,接着对当前在互联网中广泛部署的两大动态路由协议OSPF与RIP的算法进行了详细分析,最后根据OSPF与RIP的算法特点与网路结构的类型得出OSPF与RIP协议的最佳匹配网络环境。
1 网络拓扑结构与网络设备性能分析
网络(network)是一个复杂的人或物的互连系统。计算机网络,就是把分布在不同地理区域的计算机以及专门的外部设备利用通信线路互连成一个规模大、功能强的网络系统,从而使众多的计算机可以方便地互相传递信息,共享信息资源。由于连接介质的不同,通信协议的不同,计算机网络的种类划分方法名目繁多。但一般来讲,计算机网络可以按照它覆盖的地理范围,划分成局域网和广域网,以及介于局域网和广域网之间的城域网(MAN,Metropolitan Area Network)。而网络的拓扑(topology)结构依据局域网和广域网的类型也可以分为不同类型[1]。但是在日益庞大的互联网中,网络设备的性能与网络的拓扑结构相辅相成。
拓扑(topology)结构定义了组织网络设备的方法。LAN有总线(bus)型、星型(star)等多种拓扑结构。在总线拓扑中,网络中的所有设备都连接到一个线性的网络介质上,这个线性的网络介质称为总线。当一个节点在总线拓扑网络上传送数据时,数据会向所有节点传送。每一个设备检查经过它的数据,如果数据不是发给它的,则该设备丢弃数据;如果数据是发向它的,则接收数据并将数据交给上层协议处理。典型的总线拓扑具有简单的线路布局,该布局使用较短的网络介质,相应地,所需要的线缆花费也较低。缺点是很难进行故障诊断和故障隔离,一旦总线出现故障,就会导致整个网络故障;而且,LAN任一个设备向所有设备发送数据,消耗了大量带宽,大大影响了网络性能。在这样的拓扑结构中对网络设备的要求比较平均,性能优良的路由器或交换机不能有效发挥其作用。
星型拓扑结构有一个中心控制点。当使用星型拓扑时,连接到局域网上的设备间的通信是通过与集线器或交换机的点到点的连线进行的。星型拓扑易于设计和安装,网络介质直接从中心的集线器或交换机处连接到工作站所在区域;星型拓扑易于维护,网络介质的布局使得网络易于修改,并且更容易对发生的问题进行诊断。在局域网构建中,大量采用了星型拓扑结构。当然,星型拓扑也有缺点,一旦中心控制点设备出现了问题,容易发生单点故障;每一段网络介质只能连接一个设备,导致网络介质数量增多,局域网安装成本相应提升。在这样的拓扑结构中,一般要求中心控制点的网络设备是整个网络中处理性能与稳定性最优的设备。
这些拓扑结构是逻辑结构,和实际的物理设备的构型没有必然的关系,如逻辑总线型和环型拓扑结构通常表现为星型的物理网络组织。WAN常见的网络拓扑结构有星型、树型、全网状(Full meshed)、半网状等等[2]。在对网络进行路由协议的部署时,要依据网络的拓扑结构与网络设备的处理性能进行最优配置。
2 RIP协议与OSPF协议在网络环境中的应用配置研究
路由器提供了将异地网互联的机制,路由就是指导IP 数据包发送的路径信息,在路由器上运行一定的路由协议就可实现将一个数据包从一个网络发送到另一个网络。
在互连网中进行路由选择要使用路由器,路由器只是根据所收到的数据报头的目的地址选择一个合适的路径(通过某一个网络),将数据包传送到下一个路由器,路径上最后的路由器负责将数据包送交目的主机。数据包在网络上的传输就好像是体育运动中的接力赛一样,每一个路由器只负责自己本站数据包通过最优的路径转发,通过多个路由器一站一站的接力将数据包通过最优最佳路径转发到目的地,当然有时候由于实施一些路由策略数据包通过的路径并不一定是最佳路由[3]。
路由器转发数据包的关键是路由表。每个路由器中都保存着一张路由表,表中每条路由项都指明数据包到某子网或某主机应通过路由器的哪个物理端口发送,然后就可到达该路径的下一个路由器,或者不再经过别的路由器而传送到直接相连的网络中的目的主机。当网络拓扑结构十分复杂时,手工配置静态路由工作量大而且容易出现错误,这时就可用动态路由协议,让其自动发现和修改路由,无需人工维护,但动态路由协议开销大,配置复杂。
有的动态路由协议在TCP/IP协议栈中都属于应用层的协议。但是不同的路由协议使用的底层协议不同。OSPF将协议报文直接封装在IP报文中,协议号89,由于IP协议本身是不可靠传输协议,所以OSPF传输的可靠性需要协议本身来保证。RIP使用UDP作为传输协议,端口号520。
按照工作区域,路由协议可以分为IGP和EGP。IGP(Interior gateway protocols )内部网关协议在同一个自治系统内交换路由信息,RIP和IS-IS都属于IGP。IGP的主要目的是发现和计算自治域内的路由信息。EGP(Exterior gateway protocols)外部网关协议用于连接不同的自治系统,在不同的自治系统之间交换路由信息,主要使用路由策略和路由过滤等控制路由信息在自治域间的传播,应用的一个实例是BGP。按照路由的寻径算法和交换路由信息的方式,路由协议可以分为距离矢量协议(Distant-Vector)和链路状态协议。距离矢量协议包括RIP和BGP,链路状态协议包括OSPF、IS-IS。
距离矢量路由协议基于贝尔曼-福特算法,使用D-V 算法的路由器通常以一定的时间间隔向相邻的路由器发送他们完整的路由表。接收到路由表的邻居路由器将收到的路由表和自己的路由表进行比较,新的路由或到已知网络但开销(Metric)更小的路由都被加入到路由表中[4]。相邻路由器然后再继续向外广播它自己的路由表(包括更新后的路由)。距离矢量路由器关心的是到目的网段的距离(Metric)和矢量(方向,从哪个接口转发数据)。在发送数据前,路由协议计算到目的网段的Metric;在收到邻居路由器通告的路由时,将学到的网段信息和收到此网段信息的接口关联起来,以后有数据要转发到这个网段就使用这个关联的接口。
链路状态路由协议基于Dijkstra算法,有时被称为最短路径优先算法。L-S算法提供比RIP等D-V算法更大的扩展性和快速收敛性,但是它的算法耗费更多的路由器内存和处理能力。D-V算法关心网络中链路或接口的状态(up或down、IP地址、掩码),每个路由器将自己已知的链路状态向该区域的其他路由器通告,这些通告称为链路状态通告(LSA:Link State Advitisement)。通过这种方式区域内的每台路由器都建立了一个本区域的完整的链路状态数据库。然后路由器根据收集到的链路状态信息来创建它自己的网络拓朴图,形成一个到各个目的网段的带权有向图。链路状态算法使用增量更新的机制,只有当链路的状态发生了变化时才发送路由更新信息,这种方式节省了相邻路由器之间的链路带宽。部分更新只包含改变了的链路状态信息,而不是整个的路由表[5][11]。
3 路由协议在网络环境中的性能指标
为了综合比较两种路由协议在网络中性能指标,我们搭建汇聚与接入的两层网络环境,在这两种网络环境中分别部署OSPF与RIP协议,然后用网络分析仪对部署两种不同协议的网络性能指标如带宽与时延等进行对比分析,网络拓扑如图1所示。
带宽(bandwidth)和延迟(delay)是衡量网络性能的两个主要指标。LAN和WAN都使用带宽(bandwidth)来描述网络上数据在一定时刻从一个节点传送到任意节点的信息量。带宽分为两类:模拟带宽和数字带宽。本文所述的带宽指数字带宽。带宽的单位是位每秒(bps,bit per second),代表每秒钟一个网段发送的数据位数。网络的时延(delay),又称延迟,定义了网络把一位数据从一个网络节点传送到另一个网络节点所需要的时间。网络延迟主要由传导延迟(propagation delay)、交换延迟(switching delay)、介质访问延迟(access delay)和队列延迟(queuing delay)组成。总之,网络中产生延迟的因素很多,可能是网络设备的问题,也可能是传输介质、网络协议标准的问题;可能是硬件,也可能是软件的问题[6][11]。
路由的花费(metric)标识出了到达这条路由所指的目的地址的代价,通常路由的花费值会受到线路延迟、带宽、线路占有率、线路可信度、跳数、最大传输单元等因素的影响,不同的动态路由协议会选择其中的一种或几种因素来计算花费值(如RIP用跳数来计算花费值)。该花费值只在同一种路由协议内有比较意义,不同的路由协议之间的路由花费值没有可比性,也不存在换算关系。
在上述网络环境中OSPF与RIP协议,网络分析仪对部署两种不同协议的网络性能指标对比分析如图2~4。
通过上述实验,对ospf与rip的带宽、延迟、路由花费进行比较,可以看出两种协议的性能基本一致。
4 两种路由协议性能指标与协议算法分析
距离矢量路由协议的优点:配置简单,占用较少的内存和CPU 处理时间。缺点:扩展性较差,比如RIP最大跳数不能超过16跳。
链路状态路由协议基于Dijkstra算法,有时被称为最短路径优先算法。L-S算法提供比RIP等D-V算法更大的扩展性和快速收敛性,但是它的算法耗费更多的路由器内存和处理能力。D-V算法关心网络中链路或接口的状态(up或down、IP地址、掩码),每个路由器将自己已知的链路状态向该区域的其他路由器通告,这些通告称为链路状态通告(LSA:Link State Advitisement)。通过这种方式区域内的每台路由器都建立了一个本区域的完整的链路状态数据库[7]。然后路由器根据收集到的链路状态信息来创建它自己的网络拓朴图,形成一个到各个目的网段的带权有向图。链路状态算法使用增量更新的机制,只有当链路的状态发生了变化时才发送路由更新信息,这种方式节省了相邻路由器之间的链路带宽。部分更新只包含改变了的链路状态信息,而不是整个的路由表。
RIP:RIP协议是D-V算法路由协议的一个典型实现,非常古老的路由协议,RIP协议适用于中小型、比较稳定的网络,有RIPv1和RIPv2两个版本,RIP基于UDP,端口号为520,以跳数(hop)为路由度量,两个路由器之间缺省为1跳,16跳为不可达,RIP更新报文以广播地址周期性发送,缺省30秒,RIPv2可使用组播地址(224.0.0.9)发送,支持验证和VLSM。优点:实现简单,配置容易,维护简单,可以支持IP,IPX等多种网络层协议[8][12]。缺点:路由收敛速度慢,在极端的情况下,存在路由环路问题,以跳数(hop)标记的metric值不能真实反映路由开销,有16跳的限制,不适合大规模的网络,周期性广播,开销比较大。OSPF(Open Shortest Path First),目前IGP中应用最广、性能最优的一个协议(最新版本是version 2,RFC2328),具有如下特点:无路由自环,可适应大规模网络,路由变化收敛速度快,支持区域划分,支持等值路由,支持验证,支持路由分级管理,支持以组播方式发送协议报文[10][13]。
5 两种协议的最佳匹配网络环境
对于不同网络环境RIP与OSPF各有自己的优缺点,综合网络设备的性能之标与网络的拓扑结构,在小型网络中如果网络维护人员数量有限并且网络设备的成本较低与性能一般,我们有限考虑使用配置简单,占用较少的内存和CPU处理时间的RIP协议,RIP协议在这样的网络环境中能充分发挥其优势。并且RIP队列延与迟交换延迟比使用OSPF要小。同时路由变化收敛速度快也比OSPF协议要快。在中大型网络中我们考虑到RIP容易出现路由自环路,路由收敛速度慢,有16跳的限制,我们最好选用OSPF协议,在大型网路中骨干网络的网路设备性能比较优越,OSPF协议指定一台骨干路由器作为DR,完全可以满足处理大量路由信息的需求,对非骨干网络,网络设备的性能不需要特别要求即可实现路由变化的快速收敛。
RIP与OSPF两种路由协议在当今互联网中已经广泛应用,但随着电子芯片技术的不断发展,网络设备的处理性能得到突飞猛进的提高,并且其价格越来越低,因此RIP占用较少的内存和CPU处理时间的优势逐渐被打破,但是随着物联网与云计算技术的发展,网络上的节点不再单纯是计算机,还将包括各种各样的终端甚至包括冰箱、电视等家用电器,这些设备都需要接入到网络中,同时还有RFID标签与读写器,对于这样连接这些终端的小型网络环境,RIP仍能充分发挥其优势。
参考文献:
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rip协议范文2
(北京青云航空仪表有限公司,北京100086)
摘要:针对传统ARINC429总线电路设计中采用的协议芯片的方式有扩展性差,占面积大的问题,提出一种基于FP?GA的ARINC429协议电路设计。协议电路的设计分为接收电路设计和发送电路设计两部分,并且对电路进行了仿真和验证。协议电路可以通过配置模块的I/O口,方便地对ARINC429总线通信的波特率、奇偶校验等参数进行设置。该协议采用的独立的收/发电路设计可以很方便地进行ARINC429总线通道的扩展。除FPGA外,电路外围只需要使用总线驱动电路,从而大大地减少了电路面积。该协议电路设计通过严格的测试,已经应用在实际的产品中。
关键词 :FPGA;ARINC429总线;模块配置;电路设计
中图分类号:TN911?34 文献标识码:A 文章编号:1004?373X(2015)18?0092?03
ARINC429 总线是航空电子系统中最常用的通信总线之一。ARINC429总线电路是通过ARINC429总线接收/发送协议芯片加驱动芯片来实现的。协议芯片占用板卡面积,且每个协议芯片接收/发送通道数量固定,当电路需要多个ARINC429总线通道时,硬件面积占用较大。随着FPGA的大量应用,可通过在有FPGA的系统中,通过FPGA 来实现ARINC429 总线协议[1]。在FPGA中,通过设计通用的、可配置的ARINC429协议,可以方便地扩展ARINC429 通信通道,减少ARINC429 协议芯片的使用,缩小产品尺寸,并且通过配置ARINC429 总线,可方便适用于各种要求的ARINC429通信。
1 方案设计
1.1 方案概述
本方案中基于FPGA 的ARINC429 协议分为两部分:发送部分和接收部分。这两部分协议独立工作,接收协议和发送协议都可以通过对模块I/O的配置,实现不同的波特率、奇偶校验,数据格式等功能的设置。
由于ARINC429总线由两条差分线构成,总线上的电平范围为-5~5 V,见图1 的A(ARINC429),B(ARINC429)。该电平不能与FPGA直接进行接口[2],需要总线接口驱动芯片进行电平转换后才能与FPGA进行接口。对应转换后的TTL电平见图1的A(TTL),B(TTL)[3]。
利用本协议方案的ARINC429 的通信电路采用FPGA 加外围驱动电路的方式实现,方案见图2。其中ARINC429协议在FPGA内部实现,外围使用驱动芯片,如HI?3182和DEI?1046。ARINC429协议中每一路的收/发协议搭配上一路对应的驱动芯片,就可以成为一个独立的ARINC429收/发通道。
1.2 ARINC429发送部分
电路框图如图3所示,主要由发送状态机、计数器、奇偶校验、输出控制等部分构成。电路CLK 使用的是25 MHz时钟,可以通过设置分频电路的分频系数,使得电路工作在不同的ARINC429总线波特率下。
信号ENTX为电路工作的使能信号,“1”为使能发送功能;信号P 为奇偶校验位的选择位,默认为“1”奇校验。外部信号在进入状态机前通过D触发器进行时钟同步。发送状态机控制计数器工作,计数器的结果返回状态机作为状态机的输入控制状态机的状态跳转。其中Bit计数器为数据位的计数,Gap计数器为两个数据之间的时间间隔计数。
发送状态机是整个电路工作的核心。当状态机判断有数据需要发送时,先从数据缓冲区中取数,并存到移位寄存器中。然后根据预先分频的时钟频率逐位右移输出。当输出位为1时,A_OUT和B_OUT分别输出1和0;输出位为0 时,A_OUT 和B_OUT 分别输出0 和1。根据ARINC429 的协议,每一位数据前半个周期为数据,后半个周期输出同时为0。同时,每移出一位数据,奇偶校验电路就会统计移出的“1”的个数,当移位寄存器移到最后一位的时候,发送状态机选择奇偶校验电路生成的校验位进行输出。发送完32位数据后,最后会等待4 个位时的时间,即“GAP”的时间,状态机再回到初始状态。状态机状态转换图见图4。
1.3 ARINC429接收部分
接收协议电路如图5 所示,主要由接收状态机、计数器和奇偶校验等部分组成。接收部分的分频电路与发送的电路相同,信号P为奇偶校验位的选择位。信号A_IN和信号B_IN 为输入的ARINC429的TTL电平。信号在进入状态机前通过D触发器进行时钟同步。
发送状态机判断信号A_IN和信号B_IN起始位,开始启动工作,并对信号A_IN 和信号B_IN 进行采样,判断数据,完成后将数据存入移位寄存器最低位,同时移位寄存器往高位移1 位。待Bit计数器增加后,状态机跳回到采样状态,进行下一位的数据采样。同时状态机控制奇偶校验电路工作,奇偶校验电路根据接收到的值进行“1”的个数统计。采样完第32位数据时,状态机对奇偶校验位进行判断,根据之前奇偶校验电路的统计结果和采样到的数据进行对比,判断数据是否正确。判断正确将整个数据存入数据缓冲区;不正确,则报故障。数据接收完成后,置信号Data_Ready 有效。发送状态机状态转换图见图6。
电路经分频后的采样频率为ARINC429 数据传输波特率的10倍。接收数据时,当两个差分输入不相同时,则认为开始接收数据。数据的每个bit进行3 次采样,如图7 所示。只有三次采样都符合ARINC429 的TTL电平才认为数据有效,否则认为数据出错。采样1和采样2对数据进行采样确认,只有2次采样相同,数据才会被采用,存入移位寄存器。采样3是对数据位之间的间隔进行采样,只有A_IN 和B_IN 全0 才认为正确。以上任何一次采样出现错误,则认为数据错误。
2 设计仿真
发送部分的仿真图如图8所示(部分截图),通过编写testbench对发送数据缓冲区写入0~128,写入数据的时钟为系统时钟25 MHz,设置ARINC429总线发送波特率为100 Kb/s,奇校验,发送使能。可以看到A_OUT和B_OUT输出与预期波形一致,确认数据发送正确。
将ARINC429 总线发送的串行数据引入串行数据输入端,如图9所示;读取接收缓冲RAM的数据如图10所示。输入的ARINC429总线数据波特率为100 Kb/s,输入数据为0~128。从数据缓冲区中读取数据,得到数据为0~128,与输入数据一致,数据接收正确。
3 电路验证和结论
本文ARINC429协议电路的设计基于VerilogHDL语言[4],FPGA型号使用了ACTEL的APA600[5],该电路成功地应用在多个型号产品上,并且随产品通过了严格的测试和验证。基于FPGA的ARINC429协议的设计极大地方便了PCB电路的设计,节省了板卡面积,方便通信通道的扩展。此协议还可以通过简单的设置,实现数据的交叉,LABEL的识别等功能,具有良好的实用价值。
参考文献
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关键词 TRIPS协议 知识产权保护 自主知识产权
TRIPS协议,即《与贸易有关的知识产权协议》的简称,是当前国际知识产权领域标准最高、影响最大、保护力度最强的国际条约。2001年,我国加入世界贸易组织后,按照TRIPS协议的规制内容,结合国内实际,逐渐建立了相对完善的知识产权保护法律体系。但基于我国知识产权保护体系起步较晚,以及独特的国情,因此如何借鉴并利用TRIPS协议,更好地保护我国的知识产权,促进我国的经济发展和社会进步,是当前我国知识产权领域的一个重要课题。
一、知识产权和TRIPS协议的概念和特点
知识产权是指智力成果的创造人或者是经济活动有标记的持有人所享有的各种权利的总称,其具有无形性、地域性、专有性、可拷贝性、时间性等特点。知识产权看似无形,但其中蕴含着巨大的经济价值。因此,无论在国内还是国际范畴内,知识产权保护都日益显现出其重要的战略地位和作用。
TRIPS协议作为知识产权保护的国际普适准则,是世界各国艰苦谈判的结果,也是国际社会发展的实际需要。1991年12月8日,TRIPS协议初步达成,并写入了《乌拉圭回合多边贸易谈判最后文件草案》,其中就专利、商标、版权、产地标志、集成电路、工业品外观设计、未泄露的信息、许可证协议中的反竞争行为进行了规定,并就实施的基本原则、具体措施、争端解决、过渡期安排等进行了明确要求。1994年4月15日,TRIPS协议正式签署,并于1995年1月1日随着世贸组织的成立而正式生效。2005年,在香港召开的世贸组织部长级会议上,对TRIPS协议作了相应修改,以适应当前国际形势发展的需要。
二、我国知识产权保护的现状
2001年,我国加入世贸组织后,依据TRIPS协议,我国知识产权保护迎来了新的发展契机:一是修订了以前与TRIPS协议不相符合的各项知识产权法律法规;二是加大了权利保护的范围和内容;三是逐渐加强了打击侵犯知识产权行为的力度;四是对政府相关行为进行规范等。由此带来的变化是,我国企业知识产权保护意识明显增强,每年知识产权申请量大幅度增加,其中向世界知识产权组织(WIPO)申请的国际专利增长幅度日益加快。但我国改革开放进程毕竟才三十余年,仔细审视我国知识产权保护体系,整体上还存在诸多问题和不足,突出表现在以下几个方面:
(一)相关知识产权保护法律制度还需要进一步完善。尽管我国目前已经制定了较为全面的知识产权法律法规,但仍然存在少部分与TRIPS协议不相符合的内容,主要是基于国内保护主义的考量,并且没有及时跟上时展的步伐,需要尽快予以调整。
(二)对国内企业侵犯国际知识产权案件的执法力度不够,引起了诸多跨国公司的不满。
(三)部分企业对知识产权保护认识不够,重视不足,特别在一些还没有开展国际业务的企业身上得到较多体现。
(四)我国自主知识产权的数量不多,质量也还需要提升,企业模仿国外高新技术现象比较严重。
(五)知识产权领域专业人才现有储备不足,没有很好地建立起立足于未来发展的人才培养机制。
(六)涉外知识产权案例日益增多,重点是和美国、欧盟的一些企业存在知识产权官司,需要我国企业按照相关国际条约去应对。
三、TRIPS协议下我国知识产权保护的对策和措施
(一)政府方面
1、加快制定我国知识产权发展战略。我国知识产权战略是以国家为主体,通过加快建设和不断提高知识产权的创造、管理、实施和保护能力,完善现代知识产权制度,造就高素质人才队伍,从而在国家竞争中获得和保持竞争优势,促进经济社会发展目标实现的总体谋划。同时,我国知识产权战略,应该放在与可持续发展战略、科教兴国战略、人才强国战略处于同一平台上的国家总体发展主战略上,从更高的层次来推动落实,抓紧抓好。结合当前我国实际,应将专利、版权作为知识产权战略的核心,从战略的高度去促进知识产权保护落地生根。
2、完善知识产权保护法律体系。入世十年来,我国在知识产权保护方面做了大量工作,但与国际社会的整体水平,以及当前经济形势的发展要求,还有一定的差距。因此,我国应以TRIPS协议为指南,进一步完善知识产权保护法律体系,在保护我国自身利益的基础上,借鉴美国、欧洲、日本等发达国家在知识产权保护方面的通用做法,制定一批既符合我国实际又与国际接轨的知识产权保护法律制度,推动我国的科技进步,保障国内企业更好地走向国际化。
3、加强知识产权保护的执法力度。要继续推行行政和司法“两条途径、并行运作”的知识产权保护模式,在明确各自责任的基础上,加强协同配合。进一步整顿和规范市场秩序,坚决打击盗版、商业欺诈、制假售假、假冒专利等知识产权侵权的违法行为。进一步完善行政执法程序,依法公正、高效地调处知识产权纠纷。积极发挥跨部门执法协作机制和区域协作执法机制的作用,打击和防范群体侵权、反复侵权行为,依法追究侵犯知识产权犯罪行为的刑事责任。
4、加强宣传知识产权保护,提高全民保护意识。每年4月26日是“世界知识产权日”。作为政府部门,要发动各种宣传媒体,切实转变普通公众的知识产权保护意识,使其转化为公众的自觉行动。宣传措施主要包括:制作并播放保护知识产权宣传片;发放宣传资料;送法律到社区;举办专项培训班;开展竞赛活动等,努力扩大社会宣传面,提高普及率,营造保护知识产权的法制、市场和文化氛围,使知识产权保护成为全社会的共识。
5、加快培养知识产权保护的专业人才。结合国家知识产权发展战略和人才发展战略,加紧研究知识产权人才吸引、培养、评价和管理的政策措施,创新发展有利于知识产权人才脱颖而出的体制和机制。同时,采取请进来、走出去的方式,激励参加专利人考试和在高等院校设立知识产权学科等方式,大规模培养各类知识产权专业人才,重点培养企事业单位知识产权管理和中介服务人才,使知识产权事业成为吸纳人才、培养人才和使用人才的创新高地。
6、积极开展知识产权保护的国际化合作。知识无国界,知识产权保护必须上升到国际范围内进行合作与交流。一是加强与世贸组织、知识产权组织的合作,参与到国际知识产权保护规则的制定,发出中国的声音,体现出中国的意志;二是完善知识产权涉外工作,建立应急机制,妥善处理涉外知识产权纠纷,争取我国企业的合法权益;三是参与国际社会发起的打击知识产权侵权行为,遏制跨国侵犯知识产权行为的蔓延和泛滥。
(二)企业方面
1、加大投入,掌握核心技术,打造自主知识产权。打铁还须自身硬。我国企业要想提升核心竞争力,光靠模仿或引进是不能够持续发展的,并且很容易侵犯别人的知识产权,必须要依靠自主知识产权,树立起企业永续发展的基石。一是加大科研投入,从企业利润中拿出一定比例作为科研资金;二是加强科技创新,从关键技术入手,形成企业自有的高新技术;三是在引进境外技术的基础上,将其升级为我国的知识产权,并产生知识产权的外溢效应。
2、加强管理体系建设,及时申报和维护知识产权。要通过强有力的管理,使企业的知识产权保护形成体系化运作:一是企业高层要对知识产权管理和保护给予高度重视;二是实行知识产权转化全过程的信息化管理;三是培养知识产权方面的专业人才;四是按照相关法规,规范企业知识产权的申报和维护;五是建立相应的激励机制,促进知识产权的投入产出比。
(三)规范、提升专业机构和中介机构的服务水平
目前,我国知识产权保护的专业机构主要集中在国家知识产权局及相关的鉴定机构,其主要职能是建立一个知识产权信息平台,实行知识和信息共享。同时,专业机构要从专家角度,对企业知识产权保护提供相应的咨询和战略规划,促进相关行业和产业的良性发展。
中介服务机构作为企业与管理部门之间沟通的桥梁,要重点做好服务工作,加强行业自律,提升服务质量,在促进企业知识产权保护效率和效益的同时,展现出中介机构的价值。
(作者单位:黑龙江大学研究生院国际法专业)
参考文献:
[1]张维珍. 入世后我国企业知识产权保护现状分析——企业知识产权问题研究之一[J]. 山西: 生产力研究, 2003(4).
[2]刘春田. 知识产权法[M]. 北京: 中国人民大学出版社, 2007.
[3]张乃根. 国际贸易的知识产权法(第二版)[M]. 上海: 复旦大学出版社, 2007.
rip协议范文4
关键词:协议工程;随机Petri网;stop―wait协议;CSMA/CD协议
中图分类号:TP393 文献标识码:B
文章编号:1004373X(2008)0316603
Stochastic Petri Net Modeling Based on Communication Protocols
ZHANG Yahui,HU Xiaohui,GAO Jie
(Lanzhou Jiaotong University,Lanzhou,730070,China)
Abstract:With the increasing of popularity and complication of network protocols,the formal work of protocols become more and more important.cocompared with other Formal Description Techniques(FDT),Petri net has its own superiority,it is more suited for modeling and analysis of communication protocols.This paper describes two essential network protocols:stop―wait protocol and CSMA/CD protocol used Petri net,which has great significance to the development and verification of protocols.
Keywords:protocol engineering;stochastic Petri net;stop―wait protocol;CSMA/CD protocol
1 网络通信协议验证技术的研究方法比较
协议工程用形式化描述技术严格的设计和维护协议的各个活动,建立准确的协议模型,验证协议的逻辑正确性。目前协议工程已经有一些网络协议验证技术:基于FSM模型的协议验证与分析,基于时序逻辑的协议验证与分析,基于Petri网的协议验证与分析等[1]。FSM由于简单、直观而得到广泛应用,但不易于描述复杂的系统,故不适于协议验证的实现。时序逻辑包括基于模态逻辑研究,状态搜索和代数归纳证明。但他们有各自的缺陷,模态逻辑研究分析需要理想化协议,状态搜索仅限于有限状态,代数归纳证明工作量太大。
虽然用Petri网进行协议验证也可能像FSM一样会出现状态爆炸的情况,但较其他技术,有其独有的优越性,表现在:用图表示,清晰直观;具有很好的适应性,不仅能适应计算机科学而且也适应于其他领域;描述系统的并发行为,能得到系统行为信息;具有坚实的数学基础和分析技术,如可达性分析、不变量分析、保持特性的变换、构造理论、形式语言理论等。对于网络协议评价使用最多的随机Petri网(SPN),数学基础是随机过程,能定量地求解系统的主要性能指标,如报文队列长度、吞吐量和丢包率等。
2 Petri网概述
Petri网是原联邦德国Cart Adam Petri博士在20世纪60年代初提出的研究信息系统及其相互关系的数学模型,现在已成为具有严密数学基础,多种抽象层次的通用网络,并已得到了广泛的应用。
Petri网是一种包含两种节点(位置、变迁)的有向图,可描述事物的因果关系,同时可用Token的移动来描述动态系统。他有4个元素:位置、变迁、弧、令牌(Token)。他是一种图示语言,一般用圆圈表示位置,方框表示转移,带箭头线表示变迁,黑点表示Token。
定义[2]:N= (s,T,F)称作网,当且仅当:
(1) S∪T≠粒S ∩ T=
(2) F(S×T)∪(T×S)
(3) dom(F)∪cod(F)=S∪T,任意x∈S∪T,有•x={y∈(y ∈S∪T)∧((y,x)∈F)}和x•={y(y∈S∪T)∧((x,y)∈F)} ,称•x和x•分别为x的前置集和后置集。
3 运用Petri网对通信协议的建模
要进行协议的验证和分析,建立协议模型是最基本也是最关键的一步。本文就基于Petri网对两个典型的通信协议进行建模。
3.1 stop―wait协议
stop―wait的思想:发送方传送一帧后,在传输下一帧之前等待一个确认,如果在某段时间之后确认没有到达,原发送方认为超时,重发。需注意的是没必要对每一次正确传输的数据包都回传一个链路层的响应,而只对出错的帧发响应信号。若校验正确,就接着看发送方或者接受方是否有信息要发送给对方,若没有信息则向对方发送一个链路层响应正确信息,如果有信息内容需要发送,则直接发送信息至对方而不需要再次发送正确的数据包。如图1所示为stop―wait的交互工作。
图1 stop―wait的交互工作
用SPN对此协议建模,他在每个变迁的可实施与实施之间联系一个随机延迟时间,连续时间随机变量满足指数分布。SPN与连续时间马尔可夫链同构[3]。库所用圈表示,变迁用白长方块表示。
因为实际网络通信中,信道往往易受环境干扰和本身情况所限,使得通信状况较差,因此必须在Petri模型中引入超时与出错双重处理的机制。须考虑到所有干扰情况:
(1) 要发送的数据1或2在链路中丢失,超时重发;
(2) 收到数据1或2后发送回应时回应数据丢失,超时重发;
(3) 接收方等待数据1时却收到数据2 ,接收方等待数据2时却收到数据1,错误重发。
建立的模型如图2所示。
图2 stop―wait协议模型
库所说明:p1:发送方等待第1个帧的回应。p2:发送方等待第2个帧的回应。p3:第1帧在信道中。p4:第1帧的回应在信道中。p5:第2帧的回应在信道中。p6:第2帧在信道中。p7:接收方等待第2帧。p8:接收方等待第1帧。
变迁说明:t1:发送方发送第1帧。t2:发送方发送第2帧。t3:发送方等待第1个帧的回应超时。t4:发送方等待第2个帧的回应超时。t5:接收方收到第1帧。t6:接收方收到第2帧。t7:接收方等待第2帧时却收到第1帧。t8:接收方等待第1帧时却收到第2帧。t9:第1个帧丢失。t10:第1个帧的回应丢失。t11:第2个帧的回应丢失;t12:第2个帧丢失。
初始标识:M0=(1,0,1,0,0,0,0,1)
建立好的stop―wait协议模型利用工具对其进行可达性和不变量分析,如果协议所描述的状态都是可达的,并且无死锁,没有无用循环,其最终状态总是回到初始状态,那么就是无冲突的活性模型,然后用Timenet工具分析得出各项性能指标。
3.2 CSMA/CD协议
CSMA/CD[4] 是以太网中各个节点对总线资源访问的仲裁机制,是以太网的基础,对其进行研究有利于深入了解以太网性能,因此对CSMA/CD协议进行性能评价成为必须。CSMA/CD协议思想:当一个站点产生一个新数据分组,他首先监听传输线路以判定任何正常进行传输的存在。如果线路正忙,分组的传输被延时直到线路变为闲置。此时站点等待一个短时间的延时d后,不管线路状态而传输这个分组,在分组传送期间线路被监督一侧是其他传输的碰撞。若一个碰撞被检测到,传输立即停止,线路扰一个短时间以保证所有站点都识别到这个碰撞。这个分组传输在一个随机的延时后再重新调度发送。站点假定没有缓冲功能,只有在前一个传输发送后才能接受新的传输要求。
此处用DSPN(确定与随机Petri网)来描述CSMA/CD协议,DSPN[3]是SPN的一种扩充,主要表现在时间变迁的实施延时既可以是常数(确定时间变迁),也可以是指数分布的随机变量(指数时间变迁)当然也可以有瞬时变迁。且可有禁止弧(禁止弧所连接的位置的原可实施条件变为不可实施条件,原不可实施条件变为可实施条件,且在相连变迁是实施时没有标记从相连位置移出)。确定时间变迁用黑长方块表示,指数时间变迁用白长方块表示,瞬时变迁用黑粗线表示。建模如图3所示。
库所说明:thi:思考状态,其中有token代表网络中有发送请求,其中的token表示连接到 Lan总线的站点的数量。back:后备状态,碰撞出现后但还没有重新发送数据。line:站点要进行分组传输。bfree:总线处于空闲状态。frig:传输开始的脆弱状态,脆弱状态就是当一个站点正在传输时,他的信号还没有传到距其最远的站点,因此,他并不知最远站点是否传输,此时他检测到的总线仍是空闲,他仍继续传输的状态beginx:传输开始前等待检测的状态。endfrig:没有碰撞,脆弱状态结束。beftran:准备好分组传输。relbus:总线使用完毕。biginjam:放置其他站点传输要求(有冲突)。knowjam:确认传输出现冲突。jam:第二个分组传输扰状态。endjam:干扰结束。begining:站点等待。begin:当前正要传输的第一个站点。
图3 CSMA/CD的DSPN模型
变迁说明:thi:思考时间变迁,实施速率正比于thi中标记数量。back:后备时间变迁,实施速率正比于back中标记数量。first:进入第一个站点传输。dist:模拟两站点之间距离的指数变迁。nocol:没有碰撞,结束脆弱状态,使位置endfrig变空。efrig:若没有碰撞发生,他的实施使frig变空,截止dist实施。tran:进行并完成分组传输。beginx:占有总线。nobody:line中没有传输要求,实施使总线处于空闲状态bfree。somebody:line中有传输要求,则实施开始准备传输下面的分组begin。conf:因为有冲突,通道请空。senconf:确认冲突。jam:冲突干扰结束。endback:第一个冲突站点变为后备状态,释放总线。dela:
近似模拟一对站点的传播延时。delay:数据包传输前所经历的延时。started:只要第一个站点开始传输,他就从begining向beginjam移动token,以阻塞其他站点。 others:在脆弱状态期间有其他站点发出传输要求,他把此要求于startjam中。baking:把token从sensejam移到back。
用DSPNexpress―NG工具分析模型的各项性能指标,DSPNexpress是德国Dortmund大学的Lindeman教授开发的DSPN软件,DSPNexpress―NG是DSPNexpress的升级版,是功能强大的DSPN分析软件[6]。
4 结 语
Petri网是一种适于系统描述与分析的数学模型,能够很好地描述系统结构与系统行为,他在描述并发、冲突、同步等重要行为现象所表现出的优势以及具有形式化步骤与数学图论相支持的理论严密性,特别是其图形表达直观和便于编程实现的技术特点尤其适合并发任务系统的设计,在协议工程领域有着广阔的前景。
参考文献
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[4]谢希仁.计算机网络[M].北京:电子工业出版社,2003.
rip协议范文5
[关键词] TRIPS协议 软件产业 知识产权保护
一、TRIPS协议中关于计算机软件保护的内容
TRIPS协议在很大程度上反映了以美国为代表的发达国家的立场,它扩大了知识产权的保护范围,体现了高标准、高水平保护的原则。这一点在计算机软件知识产权保护方面尤为突出。
1.对程序代码的保护
TRIPS协议第10条第1款规定:“计算机程序,无论是原代码还是目标代码,都将作为文字作品根据伯尼尔公约(1971)保护。”《伯尔尼公约》是世界现行的国际版权保护条约,它的核心在于规定了每个缔约国都应自动保护在伯尔尼联盟所属的其它各国中首先出版的作品和保护其作者是上述其他各国的公民或居民的未出版的作品。
2.保护期
TRIPS协议第12条规定:“除摄影作品或实用艺术作品外,……保护期将不短于自己许可出版之年底起50年,或在创作之后50年内未许可出版的情况下为自创作之年年底起50年”。 TRIPS协议的这一条,规定了对计算机程序版权的保护期不应少于50年。大家知道,计算机程序是一个发展极为迅速的高科技作品,一项软件产品往往在十几年甚至几年内就被更新换代了。
3.软件著作权侵权损害赔偿的归责
TRIPS协议第45条第1款规定:“对已知或有充分理由应知自己从事之活动系侵权的侵权人,司法当局应有权责令其向权利人支付足以弥补因侵犯知识产权而给权利持有人造成之损失的损害赔偿费”。根据该款规定,不法行为人侵害著作权损害赔偿的条件,是行为人在实施不法行为时,知道或应当知道自己实施的行为属于侵犯他人知识产权的行为,即主观上有过错(故意或过失)。如果不知或不应知所实施的行为属侵权行为,即主观上无过错,就不承担损害赔偿的责任。
4.出租权
TRIPS协议第11条中规定:“至少对于计算机程序和电影作品,缔约方应该规定,其作者或者合法继承人有权允许或禁止将他们具有版权作品原件或复制件向公众出租。……对于计算机程序,此项义务不适用于程序本身不出租主题的情况。”根据这一规定,各缔约方就应该把计算机程序的出租权列入程序权利人享有的专用权利之内。这实际上对计算机程序提供了高于一般文字作品的版权保护水平。
二、TRIPS协议下我国软件知识产权保护法律对接问题
1.某些权利上没有对接
TRIPS协议第11条规定:“至少对于计算机程序及电影作品,成员应授权其作者或作者的合法继承人许可或禁止将其享有版权的作品原件或复制件向公众进行商业性出租”。 TRIPS协议是把计算机软件著作权人的出租权作为一项独立的权利加以保护的。我国作为TRIPS协议的成员国之一,也应履行此项义务。但目前我国的《著作权法》、《计算机软件保护条例》来说,均未对计算机软件的出租权作出明确的规定。
2.某些权利的保护方式上没有对接
TRIPS协议第10条规定,无论是以原代码或以目标代码表达的计算机程序,均应作为伯尔尼公约1971年文本所指的文字作品给予保护。但我国的《著作权法》、《计算机软件保护条例》则规定计算机程序及文档作为一个整体予以保护。显然,我国这种立法方式即把计算机软件纳入版权法中,又使之处于版权法保护的范围之外,与国际上通行的将计算机软件作为普通文字作品来保护的惯例不符。
3.保护水平上没有实现对接
从保护期限看,TRIPS协议规定软件知识产权保护期限和一般著作权无异都是50年。我国的《计算机软件保护条例》实际规定保护期是25年,软件著作权人可以申请续展25年。从保护范围看,TRIPS协议并不将软件侵权的最终界限延伸到任何最终用户。我国采取的则是将软件侵权的最终界限延伸到所有最终用户,即不论单位、家庭还是个人,不问其目的如何,只要使用未经授权软件就构成侵权。
三、TRIPS协议下我国软件企业的应对策略
1.企业要全面了解TRIPS规则,树立知识产权保护意识
TRIPS规则是国际通行的知识产权保护国际条约,它提出了知识产权保护的一般规则和要求,同时又具有很大的灵活性,各国在运用其规则保护本国产业发展时,无不结合本国实际给予变通。所以,倘若我国软件企业不去了解和掌握、运用这些知识产权规则,一方面将可能面临严厉制裁(既有民事,还有刑事),同时又可能闲置自身应享有的知识产权的权利,造成一种巨大的浪费。因此,我国企业应对TRIPS协议策略首先应解决的问题就是研究TRIPS协议规则,树立知识产权意识。
2.防止和抵御盗版、假冒等侵权行为
盗版、假冒行为往往给企业的危害是巨大的,有的是致命的,因此,企业一方面要加强防范措施,当发生侵权行为时,要注意收集证据,运用《TRIPS协定》和我国知识产权法律制度中的临时措施等行政和司法救济手段,及时有效地把侵权损失降至最低,以有效地保护自己的知识产权。同时,要求软件企业也要加强自律,保证自己不使用、出售盗版产品,避免侵权行为。
3.密切关注《TRIPS协议》的发展趋势
计算机软件的一大特点是淘汰率高、更新速度快,相应的对其实施保护的要求和标准、规则也在不断变化。所以,作为软件企业在关注软件技术创新的新趋势同时,也要关注当前国际上软件知识产权保护出现的新动向,以有效利用国际新规则来充分保护自己权益。
参考文献:
rip协议范文6
[关键词] 胰岛素信号通路; 胰岛素受体底物2(IRS2); 瘦素受体(Ob-R); 葡萄糖转运蛋白1(GLUT1);GLUT2
[Abstract] To observe the anti-hyperglycemic effect of Puerariae Lobatae Radix in hepatocyte insulin resistance(IR) models, and investigate its preliminary molecular mechanism. IR-HepG2 cell model was stably established with 1×10-9 mol・L-1 insulin plus 3.75×10-6 mol・L-1 dexamethasone treatment for 48 h according to optimized protocol in our research group. After IR-HepG2 cells were treated with different concentrations(5%,10% and 15%) of Puerariae Lobatae Radix-containing serum, cell viability was detected by CCK-8 assay; the glucose consumptions in IR-HepG2 cells were separately detected at different time points (12, 15, 18, 21, 24, 30, 36 h) by using glucose oxidase method; intracellular glycogen content was detected by anthrone method; and the protein expression levels of leptin receptor (Ob-R), insulin receptor substrate-2 (IRS2), glucose transporter 1(GLUT1) and GLUT2 were detected by Western blot assay. The results showed that Puerariae Lobatae Radix-containing serum (5%, 10% and 15%) had no significant effect on IR-HepG2 cell viability; 5% and 10% Puerariae Lobatae Radix-containing serum significantly increased glucose consumption of IR-HepG2 cells (P
[Key words] insulin resistance (IR); IRS2; Ob-R; GLUT1; GLUT2
众多临床实践发现中药在降糖调脂及治疗2型糖尿病(type 2 diabetes mellitus,T2DM)中注重调节人体的整体机能,作用温和,长期使用具有较强的竞争优势[1]。在中药临床辨证治疗,葛根为主的系列经方广泛用于糖尿病发生发展的不同阶段。采用分子网络药理学方法发现,葛根主要成分葛根素、大豆苷元、染料木苷等均作用于胰岛素信号PI3K,JNK通路,PI3K,JNK通路在胰岛素信号转导途径中起着重要的作用,其异常的表达可能会影响葡萄糖转运和合成、脂质代谢等[2]。已有研究发现葛根颗粒剂可明显改善肥胖小鼠的糖脂代谢紊乱[3]。葛根煎剂能显著降低糖尿病大鼠空腹血糖、游离脂肪酸、TNF-α的含量来提高胰岛素敏感指数[4]。葛根主要药效成分葛根素能改善T2DM患者血糖[5],葛根素治疗糖尿病的主要作用机制可能与降血糖、抗氧化应激、抑制蛋白质非酶糖基化等相关[6]。
本课题组研究发现重用葛根的葛根芩连汤配伍干预糖尿病大鼠呈现更好的降糖降脂药效,可有效减轻胰岛素抵抗(insulin resistance,IR)。本课题组已采用血清药理学方法发现葛根含药血清可明显提高IR-3T3-L1脂肪细胞降糖降脂作用,干预多个糖脂代谢相关基因表达来改善脂肪IR的作用[7]。本实验采用先期优化胰岛素加地塞米松的稳定体外肝IR胞模型[8],研究葛根含药血清对IR-HepG2细胞糖代谢的影响及并初步探讨降糖的相关分子机制,为葛根的方剂配伍和临床精准用药提供理论指导。
1 材料
1.1 药物 人肝癌细胞系HepG2细胞购于北京鼎国生物科技有限公司(源于协和细胞库)。葛根(批号912014,产地广西,江西汇仁药业有限公司),葛根素质量分数为5.4%,符合2015年版《中国药典》标准。
1.2 动物 SPF级雄性SD大鼠,购于北京维通利华实验动物技术有限公司,动物合格证号11400700119627。
1.3 试剂 葡萄糖测定试剂盒(上海荣盛生物药业有限公司,GOD-POD法,批号361500);DMEM高糖培养基(Hyclone公司,批号NAE1396);胰岛素(Sigma分装);地塞米松(Sigma公司,批号#BCBC92609V);Cell Counting Kit-8(同仁化学研究所,批号JH620);盐酸二甲双胍(中国食品药品检定研究院,批号41DF-4HDKM);非诺贝特(中国食品药品检定研究院,批号41DF-4HKJM);GLUT1抗体(美国Millipore公司,批号#2430566);GLUT2抗体(美国Abcam公司,批号#ab921599);Ob-R抗体(美国Santa公司,批号L2673);IRS-2(美国CST公司,批号3089S);辣根酶标记山羊抗鼠二抗(联科生物公司,批号#5103930)。
1.4 仪器 倒置显微镜(日本Olympus CKX41);CO2培养箱[赛默飞世尔科技(中国)有限公司];全波长酶标仪(Spectra Max Plus384,美国Molecular Devices);电泳仪、水平和垂直电泳槽、转移槽(美国Bio-Rad公司);化学发光凝胶成像仪(美国Bio-Rad公司)。
2 方法
2.1 葛根含药血清的制备及含量测定 参考本课题组已发表文献的方法制备[7],简述如下:称取葛根药材并加入8倍药重的水,浸泡30~60 min;煮沸40 min后,减压旋转蒸发浓缩制备葛根水提液(1 g・mL-1),保存于4 ℃备用。SD雄性大鼠60只,体重(280±20) g,随机分为空白血清组(40只),葛根含药血清组(20只)。含药血清组按每100 g大鼠体重给药量2.5 mL给予葛根水提液灌胃制备,分装-20 ℃保存。UPLC-MS检测葛根成分葛根素和大豆苷元出峰时间及含量。
2.2 细胞培养 将冻存的HepG2细胞用15%FBS转至细胞培养瓶中,放37 ℃,5%CO2培养箱中。待细胞接触性抑制后,用10%FBS的DMEM培养基每3 d按1∶3传代1次,待细胞从复苏适应2周后,于对数生长期进行实验。
2.3 IR-HepG2细胞模型建立 参考本课题先期优化肝IR模型建立方法[8],用1×10-9mol・L-1胰岛素加3.75×10-6 mol・L-1地塞米松培养诱导48 h后,弃去培养液,PBS洗涤2次,再用培养基37 ℃孵育20 min;重复上述过程1次,换上无血清培养液孵育24 h后,检测各组细胞培养基上清液中葡萄糖含量,计算葡萄糖消耗量。
2.4 对IR-HepG2细胞葡萄糖消耗量的影响 复制2.3项中的模型,给药分组为正常组,IR组,二甲双胍组(2 mmol・L-1),5%,10%,15%葛根含药血清分组,每组都补大鼠空白血清至总血清含量为15%,在给药12,15,18,21,24,30,36 h分别采用葡萄糖氧化酶法检测其上清液中葡萄糖含量,参照文献加以改进[9],以无细胞的空白孔为对照,以起始葡萄糖浓度减去各时间点葡萄糖浓度来计算葡萄糖消耗量。