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病危通知书范文1
这是世界第三大河、亚洲第一大河，曾长期被誉为中国的天然鱼仓。然而中科院水生所等多家科研机构的长期监测数据表明，长江中的“四大家鱼”鱼苗出生量急剧下降，由上世纪五十年代的三百多亿尾降为目前的不足一亿尾；今年6月，长渔办组织科考人员，首次从生态系统等四个领域对长江上游进行综合“诊断”。金沙江流域历史监测到鱼类有一百四十三种，但由于栖息地的破坏和丧失，此次科考鱼类资源采样仅发现十七种鱼类样本。
长江没有了鱼，就像地球上没有了蜜蜂。这是生态崩溃的一曲挽歌，道理很简单：鱼类是长江生物链中承上启下的环节――鱼类一旦消失，以鱼为生的其他动物将无法存活；若是没有鱼来吃掉水体里的浮游生物，江水也将彻底丧失重要的自净功能。一句话，鱼死了，整个长江流域的物种多样性和生态体系将全面崩盘。
有人说，我们今天已经无惧于说“长江已死”，不是大家盼着这条大江走向死亡，而是起于回天乏力的悲怆，已经无法靠涂脂抹粉来唤回一丝生气。
大凡了解或路过长江的，都不难窥见长江“病危”的肇因。一是长江沦为沿岸工业的“垃圾站”。每年，流域废水、废气和固体废弃物的排放量都在增长。二是江域保护让位于水电开发。水利部科技司前司长董哲仁曾直言长江上游水电开发无序，“对生态保护是在敷衍，没有考虑到要把一个生态多样性的长江留给子孙后代”。三是经济活动不计后果。美国一位知名鲸类专家在看过鄱阳湖水面上近千艘千吨位的挖沙船后，惊呼这是她一生中见到的最为严重的人为生态灾难。四是滥捕而无节制的欲望。譬如中华绒鳌蟹在1986年的捕捞量是三百二十四吨，及至今天，基本已难觅踪迹。
病危通知书范文2
关键词：混合痔；低位肛瘘；同期手术；疗效
痔为常见肛肠外科疾病，发病率约为50-80%，发病率较高，其中20%为混合痔[1]。肛瘘属于多发性肛肠疾病，直肠或肛管与肛周皮肤相通肉芽肿性管道，侵犯部位主要为肛管，外口为肛周皮肤处，内口为齿状线附近。研究显示，混合痔并发肛瘘、肛裂时，需及时治疗，维持及肛管的正常功能。现取2014年5月―2015年5月本院混合痔合并低位肛瘘56例，总结同期手术的治疗方法与疗效，以下具体报道。
1 资料和方法
1.1 一般资料 研究对象取2014年5月―2015年5月本院混合痔合并低位肛瘘56例，依照手术方法差异进行分组。对照组女患者12例，16例男患者，均龄（36.59±6.75）岁，21-59岁，病史均为（3.26±0.68）年，2个月-6年，共28例。研究组女患者11例，17例男患者，均龄（36.63±6.58）岁，21-57岁，病史均为（3.23±0.44）年，2个月-6.2年，共28例。组间基本资料比较（P>0.05），无显著性差异，有可比性。
1.2 方法 对照组手术方法采用肛瘘切除术，研究组手术方法为同期手术，即肛瘘切除与混合痔外剥内扎术同期进行。
（1）肛瘘切除：手持探针，由外口插入瘘管，按照瘘管走行对内口进行探查，探针一端由内口顺利探出；沿着探针方向切开组织，将切口向外延长1cm，对坏死组织及瘢痕进行切除，修剪创缘，挂线引流。
（2）外剥内扎术：在混合痔边缘作切口，呈V型，将皮肤切开，剥离皮下静脉丛至齿状线上方，约0.5cm，借助扩肛器，将肛镜缝扎器导入，钳夹内痔，并缝扎，环形切除内痔、黏膜下组织及痔上黏膜，吻合，对瘘管两侧痔核及痔核进行切除。手术给予明胶海绵和凡士林纱条止血，抗感染用药，5-7d。
观察两组症状改善情况，评定疗效，比较分析。
1.3 疗效标准 无效：经过治疗，患者症状与治疗之前相比较，无改善，或加重；好转：经过治疗，患者症状与治疗之前相比较，有所改善，基本恢复排便及排气功能；有效：经过治疗，患者症状消失，肛管内未出现水肿、畸形、粘连和狭窄等，手术创面比较光滑、平整，恢复排便及排气功能。治疗有效率=有效+好转。
1.4 统计学分析 对本文所得实验数据均采用SPSS 13.0统计学软件进行检验，所得计量资料采用t检验，所得计数资料采用χ2检验，以P
2 结果
对照组治疗有效率82.14%（23/28），无效5例，比例17.86%；有效12例，比例42.86%；好转11例，比例39.29%。研究组治疗有效率96.43%（27/28），无效1例，比例3.57%；有效15例，比例53.57%；好转12例，比例42.86%。组间有效率相对比，研究组高（P
3 讨论
混合痔患者直肠上下静脉丛发生曲张，形成静脉团块，好发于同方向的齿状线上下，患者可有瘙痒、便血、疼痛及痔块脱出症状，治疗时多给予患者痔核切除术，将肛周多余皮肤、炎症肛窦、内外曲张静脉及直肠下部的多余黏膜等切除，对动脉进行有效截断[2]。低位肛瘘又分复杂性瘘、单纯性瘘，难以自愈，患者需接受手术治疗。患者瘘管外口有少量脓液流出，对肛周皮肤进行刺激，引起瘙痒；如外口暂时性封闭，则脓液积存，引起局部红肿、胀痛。外剥内扎术为临床治疗混合痔常用方法，具有效果佳、操作简便、技术成熟等优点，术中尽量保留患者肛垫结构，使其在原来位置上重新固定及复位，保留齿线，避免解剖损伤[3]。肛瘘患者经过实施切除术，可切除全部瘘管和瘢痕组织，如直瘘患者瘘管较明显，则实施一期切除缝合术，完整切除瘘管，缩短愈合时间，使伤口完全缝合，并不留死腔。目前，临床在对混合痔并发低位肛瘘患者实施分期手术或同期手术方面，观点较不一致。同期手术较分期手术可有效避免患者二次手术，手术痛苦小，患者易接受，特别对于瘘管两侧痔核及较大痔核者，能最大限度的避免因刺激性操作造成充血、水肿，如手术操作、术后换药等。
本研究中，研究组采用同期手术，先实施肛瘘切除，后进行外剥内扎术，而对照组仅作肛瘘切除，结果比较，研究组治疗有效率96.43%，明显较高（对照组82.14%），表明同期手术疗效满意，有效率高。实施同期手术时需注意，先给予患者肛瘘切除术，后实施外剥内扎术，以免肛瘘切口痔结扎后对分支瘘管及弯曲瘘管处理造成影响；结合术前病情分析实施手术，一般来说，仅处理瘘管两侧及较大痔核；手术操作时应避免狭窄，皮桥总宽度应≥1.5cm。
综上分析，混合痔合并低位肛瘘实施同期手术治疗，疗效确切，可推广。
参考文献：
[1] 郑峰.同期手术治疗混合痔合并低位肛瘘的临床疗效观察[J].现代诊断与治疗，2014，25（16）：3804-3805.
病危通知书范文3
文/汪志
1.换季疲劳：在季节更替的时候经常发生换季疲劳，给自己做一个“安眠枕”。在枕套下面多放些气味芬芳的杀菌植物叶片：月桂、蕨、榛树、针叶、薄荷和玫瑰花瓣。
2.眼睛红肿：用香芹汁湿敷消除眼睛红肿，将香芹切成小细段装入纱布袋内放入开水中。过15～20分钟取出，冷却，放在眼皮上10分钟。
3.牙齿酸痛：丁香油中的芳香物质可以消除疼痛，消灭细菌。把棉棒浸入丁香油后放到病牙上，可以帮助你缓解疼痛。
4.打嗝：如果通常的方法（a.慢慢地大口喝一杯凉水；b.用双臂抱住自己做深吸气，然后尽量长时间屏住呼吸）不奏效，试一下用月桂叶浸液摆平打嗝。在一杯开水内放入3～4片月桂叶，浸泡一阵，每次打嗝时喝10～15滴。
5.体内垃圾：用植物油涂抹身体，按摩身体大约10分钟左右，最好用专门的浴刷。然后泡个热水澡，仔细地用浴球、浴液洗去植物油。这之后毛孔打开，开始流汗排除体内垃圾。
6.紧张：瑜珈最简单的呼吸运动可以帮助你神情自若，哪怕是上班时间也可以做。摆一个舒服的姿势：可以坐着，也可站着，慢慢地深呼吸。呼气的时间要比吸气的时间长两倍。努力集中精力，只想呼吸过程：甚至可以“听到”空气不只在肺内循环，还在肚子里循环。消除紧张情绪，这样做10分钟左右就够了。
7.口臭：口气不清新的一个原因是口干。通常是因为吸烟，长时间聊天，情绪紧张。柠檬瓣可以帮助你摆脱口臭。把柠檬瓣放在舌头上5～7分钟，不时地吸一下。
8.流鼻血：不能躺下，头也不能向后仰，更不能用棉球堵住鼻子。需要坐下，头稍稍往前低，最好用带冰的水袋放在鼻梁上，如果身边没有，那么把手绢用冷水沾湿，然后用手绢用力按住流鼻血的那个鼻翼2～3分钟，这时用嘴均匀呼吸。
六味地黄丸也可治皮肤病
文/朱晓娜
六味地黄丸属于一种中药，具有滋阴补肾作用。主要用于肾阴亏损、头晕耳鸣、腰膝酸软、骨蒸潮热、盗汗遗精等一系列肝肾阴虚的病症，此外其在治疗皮肤病方面也有一定疗效。
雀斑在中医上讲主要是因为肾阴虚及肝气不舒造成的，因此治疗雀斑宜疏肝解郁、养血柔肝。六味地黄丸能滋阴补肾、调和阴阳，由内到外增强皮肤血液循环，提高皮肤的细胞活性，使代谢废物有效排除，从而有效抑制和分解雀斑的形成。老年性皮肤瘙痒症发病机理主要与老年人皮脂腺功能的减退、皮肤缺乏皮脂滋润及老年人植物神经功能的退化有关。六味地黄丸具有滋补肾阴，增强雄激素分泌、减慢皮脂腺萎缩、缓解皮肤干燥等作用。
瓜果蔬菜治百病——补中益气、消炎止痛用南瓜
文/许锐
南瓜也叫麦瓜、北瓜等，性温，味甘，主要成分有瓜氨酸、精氨酸、天门冬素、胡芦巴碱、腺嘌呤、胡萝卜素、维生素B1、维生素C、脂肪、葡萄糖、蔗糖及甘露醇等。南瓜有补中益气、消炎止痛、解毒杀虫的功效，主要用于肺痈、糖尿病、驱蛔虫、烫烧伤等。
肺脓肿：南瓜500克，牛肉250克。清炖后食用。可加六味地黄丸配合治疗。
慢性支气管炎、支气管哮喘：①南瓜1个（约500克），蜂蜜60克，冰糖30克。先在瓜顶端开一小口，挖出一部分瓤，将糖、蜜装入瓜内，封口，蒸1小时后取出，早晚2次吃完，连吃5～7天。②鲜南瓜（去皮）500克，红枣（去核）15～20枚，红糖适量，煮熟、煮烂后食用。
病危通知书范文4
[关键词] 疏血通注射液；糖尿病；周围神经病变
[中图分类号] R259 [文献标识码] A [文章编号] 1672-4062（2017）01（b）-0180-02
[Abstract] Objective To observe the clinical curative effect of shuxuetong injection in treatment of diabetic neuropathy. Methods 100 cases of patients which selected from Mingci Cardiovascular Hosptical between April 2014 and November 2016，were randomly divided into two groups with 50 cases in each. The control group adopted the routine treatment of methycobal and vitamin B， while the experimental group adopted the intravenous drip of shuxuetonginjection， and the treatment course was 14 d. Compared before and after treatment through clinical symptoms、signs、electromyography. Results The effective rate of clinical symptoms in the experimental group was obviously higher than that in the control group（P
[Key words] Shuxuetong injection； Diabetes； Peripheral neuropathy
糖尿病是一组以高血糖为特征的代谢性疾病。高血糖则是由于胰岛素分泌缺陷或其生物作用受损，或两者兼有引起。糖尿病时长期存在的高血糖，导致各种组织，特别是眼、肾、心脏、血管、神经的慢性损害、功能障碍。糖尿病周围神经病变（DPN）是指在排除其他原因的情况下，糖尿病患者出现与周围神经功能障碍相关的症状和（或）体征，是糖尿病最常的并发症之一，其症状主要呈呈对称性疼痛和感觉异常，下肢症状较上肢多见。感觉异常有麻木、发热、触电样等感觉，往往从远端脚趾上行可达膝上，患者有穿袜子与戴手套样感觉。感觉障碍严重的病例可出现下肢关节病及溃疡。痛呈刺痛、灼痛、钻凿痛，有时剧疼如截肢痛呈昼轻夜重。有时有触觉过敏。当运动神经累及时，肌力常有不同程度的减退，晚期有营养不良性肌萎缩。周围神经病变可双侧，可单侧，可对称，可不对称，但以双侧对称性者多见。糖尿病周围神经病变在体征方面有：跟腱反射、膝腱反射减弱或消失；震动觉减弱或消失；位置觉减弱或消失等。该文主要分析从2014年4月―2016年11月该院收治糖尿病周围神经病变100例，应用疏血通注射液治疗疗效显著，现报道如下。
1 资料与方法
1.1 一般资料
选择2014年4月―2016年11月住院收治的100例糖尿病周围神经病变患者，均符合糖尿病诊断标准，并满足以下条件：①肢体感觉障碍：出现四肢末端麻木、发热、刺痛、蚁感、手套袜套样改变、触电样等症状。②跟腱反射、膝腱反射减弱或消失；震动觉减弱或消失；位置觉减弱或消失；触觉和温度觉减低等体征。③肌电图提示神经传导速度减慢。④排除其他原因所致周围神经病变。⑤治疗前血糖控制相对稳定，空腹血糖≤9 mmol/L，餐后2 h血糖≤11 mmol/L。将100例患者随机分为实验治疗组（50例）对照治疗组（50例）2组。对照组治疗组：弥可保、维生素B族治疗；实验治疗组：在对照治疗组基础上另给予疏血通注射液静脉滴注。对照治疗组，其中男性患者28例，女性患者22例，年龄48～78岁，平均（61.50±5.38）岁，病程1～22年，其中26例合并冠心病，19例合并高血压，11例合并肾功不全。实验治疗组，其中男性患者29例，女性患者21例，年龄47～79岁，平均（61.47±6.24）岁，病程2～22年。其中26例合并冠心病，20例合并高血压，10例合并肾功不全。两组患者间年龄、性别、病程及既往史资料差异无统计学意义（P>0.05），具有可比性。
1.2 治疗方法
对照治疗组给予弥可保、维生素B族常规治疗，实验治疗组在对照治疗组基础上另给予疏血通注射液6 mL+0.9%生理盐水250 mL，1次/d，静脉滴注，两组疗程均为14 d。观察两组患者治疗前后变化：①症状、体征的变化；②腓总神经运动神经传导速度（MNCV）和感觉神经传导速度（SNCV）的变化。
1.3 观察指标
①临床症状、体征改善程度显效：肢体麻木、发热、刺痛等不适症状基本消失；跟腱、膝腱反射，位置觉、震动觉、触觉、温度觉等体征恢复正常。有效：自觉症状和体征减轻。无效：症状、体征变化不明显。②肌电图变化显效：神经传导速度较前增加≥5 m/s或恢复正常。有效：神经传导速度较前增加
1.4 统计方法
采用SPSS 12.0统计学软件分析数据，计量资料用均数±标准差（x±s）表示，采用t检验，计数资料用[n（%）]表示，采用χ2检验，P
2 结果
2.1 两组患者用药治疗前后临床症状、体征的变化比较
表1治疗组总有效率76%；对照组总有效率40%。治疗组治疗有效率明显高于对照组（P
2.2 比较两组患者用药治疗前后肌电图的变化
3 讨论
疏血通活血化瘀、通经活络，主要成分为水蛭、地龙。药理研究[1]发现水蛭中含有水蛭素肝素和抗血栓素等。水蛭中水蛭素为凝血酶特效抑制剂，扩张冠状动脉，增加冠状动脉血流量；具有抗血凝作用，有抗血栓形成的作用；水蛭素具有溶栓作用；水蛭素有抗血小板聚集和溶解凝血酶所致的血栓的作用；水蛭素能抑制凝血酶同血小板Y合，促进凝血酶与血小板解离，抑制血小板受凝血酶刺激的释放和由凝血酶诱导的反应；水蛭素可使血液粘度降低；水蛭素能使血中胆固醇和甘油三酯含量降低，可见胆固醇结晶减少；水蛭素有增加心肌营养血流量的作用；水蛭素改善局部血流循环，促进神经功能的恢复。地龙通经活络，用于多种原因引起的经络阻滞，血脉不畅，有效成分为蚓激酶，具有纤溶活性的多酶成份[2]，具有抗凝血和抗血栓以及溶解纤维蛋白原作用[3]。水蛭配地龙具有抗凝、溶栓、改善微循环等多种作用[4]。该研究表明：实验治疗组经疏血通治疗后，糖尿病周围神经病变临床症状、体征明显改善，腓总神经运动神经传导速度（MNCV）和感觉神经传导速度（SNCV）明显提高；而对照组治疗前后变化不明显。
综上所述，在积极控制血糖的前提下，疏血通注射液是治疗糖尿病周围神经病变一种有效的中药制剂，值得临床工作中借鉴和推广。
[参考文献]
[1] 高雪涛，段志强，高晶，等.水蛭素的应用及研究进展[J].黑龙江医药，2003，16（1）：38.
[2] 徐庆员.疏血通注射液治疗不稳定型心绞痛的疗效观察[J].中国医药指南，2012，33（10）：277-278
[3] 李跃红，谢莹.疏血通联合氟伐他汀治疗糖尿病肾病的临床观察[J].现代生物医学进展，2010，10（12）：2319
病危通知书范文5
摘 要 本文在研究胃癌手术病人不同途径留置胃肠减压效果时,把30个病例平均的分为两组,单纯鼻胃管和空肠造瘘组(对照组),胃造瘘减压联合造瘘管内置空肠营养组合装置组(实验组),对照两组手术的结果,得出胃造瘘管内置空肠营养管组合装置的方法具有很大的优越性的结论。
关键词 胃肠减压 鼻胃管和空肠造瘘 胃造瘘 效果比较
胃癌手术后通常采用鼻胃管减压,因为手术创伤和麻醉,导致胃肠道活动停止,并出现胃肠麻痹,因此普遍认为胃肠道手术前后放置胃管行减压能预防胃扩张,治疗肠麻痹,防止术后呕吐和腹胀,减轻切口张力,使胃肠道吻合口在低张条件下愈合,同时可观察吻合口出血。但长时间的鼻胃管留置给病人带来不良刺激,并有可能发生一系列并发症。因此,鼻胃管给病人带来的不适及并发症日益受到社会各界的重视。目前,快通道外科理念正在国外得到普遍认可,外科将逐渐接受围手术期不常规应用鼻胃管引流的观念。我科在快通道外科理念的指导下,于2007年3月开始在胃癌术中运用一种集肠内营养功能和胃肠减压于一身的胃造瘘管内置空肠营养管组合装置,获得了良好效果。
一、对象与方法
1.对象
2007年4月至2007年12月入住我科拟行手术的胃癌病人30例,其中男20例,女10例。年龄28～74岁。患者经胃镜检查并行病理检查者,确诊为胃癌,病理类型不限。病人行胃大部切除术,其他腹部手术,手术后需要胃肠减压和肠内营养持者。同时也排除一些有其他疾病和病情有很大差别的患者。
2.分组方法
根据所采用的胃肠减压及营养支持方式的不同,我们采用随机数字表法,将30例病人分为两组: 单纯鼻胃管和空肠造瘘组(对照组),胃造瘘减压联合造瘘管内置空肠营养组合装置组(实验组)、每组15例。手术方法在这里就不加以阐述了。
3.观察
病人对鼻胃管或胃造瘘管忍受度比较:根据鼻胃管或胃造瘘管给病人造成疼痛、心理、生理、活动的影响。
4.临床观察指标
呼吸系统:观察术后两天起有无咳嗽、发热、及并发肺实变、肺炎,胸腔积液、呼吸衰竭等。导管相关并发症:导管阻塞,插管部位出血、周围渗漏,导管移位、脱出,导管部位的相关感染。消化系统:术后每天观察病人有无腹胀、腹泻、恶心、呕吐、痉挛性腹痛、呃逆、食欲变化等症状,记录排气恢复时间。
二、结果
实验组病人对胃肠减压引流管的承受度较强,即这种方法使病人的疼痛减轻了。二对照组的病人较多觉得疼痛比较严重,他们对胃肠减压引流管的承受度较弱。两组均无病人死亡,无胃肠瘘、吻合口瘘、腹腔脓肿、肠梗阻等严重腹部并发症发生,也未并发肺实变,胸腔积液、呼吸衰竭。并发肺部感染分别1例、3例。术后无并发症而顺利恢复的分别10例和6例;出现腹胀、痉挛性腹痛、腹泻、呃逆、呕吐、食欲减退等消化道症状的分别为2例和1例;胃排空障碍分别1例和2例。实验组排气恢复时间比对照组时间短。
三、比较
1.传统的鼻胃管相关并发症或其缺点
消化道手术病人于手术前根据病情留置胃管行胃肠减压,促进胃肠功能恢复。由于传统置胃管使病人恶心、呕吐、恐惧、紧张等,易引起交感神经兴奋性增强,血压升高,心率加快,肌群紧张导致置管失败。术后经鼻置管也会刺激咽喉部易引起痰多、咳嗽、咽痛等症状,加重手术病人的焦虑、抑郁情绪,使病人往往不愿接受。同时,放置胃管常给病人带来不适,可引起一系列并发症。
长时间留置鼻胃管带来的痛苦。因鼻胃管的机械刺激,病人感口干鼻咽痛,恶心欲吐,痰多又难咳出。病人仍认为使用鼻胃管比胃造瘘管更不便利和更不舒服,导致睡眠障碍,引发烦躁、谵妄而拔管。
呼吸道并发症。有人认为,鼻胃管阻碍鼻孔呼吸,改用口腔呼吸后可能发生腮腺炎、鼻窦炎、咽喉炎、中耳炎等;由于阻碍有效的呼吸,使通气量降低,支气管黏液栓积聚,导致肺不张和肺炎的发生。很多病人无效地频繁咳嗽,影响了切口的愈合,只有在拔除胃管后肺部感染才能得到有效的控制。
插管过程中的损伤及风险。插鼻胃管对病人来说是一个痛苦的经历,而且有的病人难以一次插管成功。多次插管可以引起喉头黏膜损伤、水肿、声带黏膜溃疡形成及声带发生,增加了病人的痛苦。
2.胃造瘘组合装置的优势
(1)使导管并发症的发生率减低。
(2)能降低肺部并发症发生的几率,使病人感觉更加舒适。
(3)使胃肠功能的恢复速度加快。
总之,随着医疗模式的日益向前发展,鼻胃管带给患者带来的不良刺激及并发症日益受到重视,鼻胃管在很多腹部手术的围手术期应用将逐渐减少,这也符合快通道外科理念的要求。通过临床工作的实践体会到,胃造瘘管内置空肠营养管组合装置的方法具有很大的优越性,对减轻了术后对导管护理的负担和缓解病人痛苦,提高手术耐受性的循症方法具有重要意义。
参考文献:
[1]刘凤林,邓进巍,秦新裕.根治性胃大部切除术后胃瘫综合征的临床研究.诊断学理论与实践.2006(1):56-57.
[2]黎介寿.对Fast-track Surgery(快通道外科)内涵的认识.中华医学杂志.2007.87(8):515-516.
[3]雷文章,赵高平,李卡.胃肠减压在下消化道切除吻合术后应用的必要性评价.中华胃肠外科杂志.2005.8(3):203-205.
[4]张晓磊,魏素华,朱萍.胃管插入深度的探讨.现代护理.2001.7(7):l1.
[5]冯建新.普外科患者行胃肠减压的护理体会.青岛医药卫生.2008.40(1):51-52.
病危通知书范文6
【摘要】 目的 观察通心络对链脲佐菌素(STZ)糖尿病大鼠心肌微血管炎症损伤及血管痉挛的防治作用。方法 38只STZ糖尿病大鼠分为STZ对照组、胰岛素组、通心络组，另取8只正常Wistar大鼠作为正常对照组。正常对照组、STZ对照组予生理盐水灌胃，胰岛素组皮下注射胰岛素，通心络组灌胃通心络混悬液，共8周。取心肌切片作HE染色、组织核因子-κB(NF-κB)免疫组化染色。取心肌匀浆测定细胞间粘附分子-1(sICAM-1)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、内皮素-1(ET-1)、血管紧张素-Ⅱ(AT-Ⅱ)，取血浆测定AT-Ⅱ、神经肽Y(NPY)。sICAM-1采用酶联免疫法，其余采用放射免疫法。对NF-κB染色切片采用计算机图像分析，取其阳性面密度比值的均值以评价其表达程度。结果 与正常大鼠比较，STZ糖尿病大鼠心肌匀浆sICAM-1、TNF-α、ET-1、AT-Ⅱ含量及NF-κB阳性表达升高(P＜0.01或0.05)，通心络组降低(P＜0.01或0.05)，胰岛素组有升高或降低趋势(P＜0.05或P＞0.05)。STZ糖尿病大鼠血浆AT-Ⅱ升高(P＜0.05)，通心络组AT-Ⅱ升高(P＜0.05)。STZ糖尿病大鼠血浆NPY明显降低(P＜0.01)，通心络组NPY升高(P＜0.01)，而胰岛素组明显降低(P＜0.01)。通心络组血糖无明显变化。HE染色显示通心络组心肌病变减轻。结论 通心络对STZ糖尿病大鼠心肌微血管炎症损伤及血管痉挛具有防治作用。
【关键词】 通心络；心肌；微血管炎性损伤；血管痉挛；糖尿病大鼠
Abstract：Objective To observe the preventative and curative effect of Tongxinluo on microvascular inflammatory injury and vasospasm in the cardiac muscle of streptozotocin (STZ) diabetic rats. Methods STZ rats were pided into STZ group， insulin group， Tongxinluo group， with the other 8 Wistar rats as normal control. The normal group and STZ group were intragastric administered with NS， insulin group was subcutaneous injected with insulin， and Tongxinluo group was intragastric administered with Tongxinluo suspension for 8 weeks. The sections of cardiac muscle was stained in HE staining and NF-κB immunohistochemical staining. The level of adhesion molecule-1 (sICAM-1)， tumor necrosis factor (TNF-α)， endothelin-1 (ET-1)， angiotensin-Ⅱ (AT-Ⅱ) in myocardial homogenate from intercellular， and level of AT-Ⅱ， neuropeptide Y (NPY) in plasma were determined， with sICAM-1 by enzyme-linked immunosorbent assay and the others by radioimmunoassay. The sections stained by NF-κB immunohistochemical staining were image analyzed using computer. The extent of its expression was evaluated by the mean of the density ratio of the positive side. Results Compared with normal rats， the content of sICAM-1， TNF-α， ET-1， AT-Ⅱ and the expression of NF-κB in the myocardial homogenate of STZ rats was increased (P＜0.01～0.05)， while that in Tongxinluo group was reduced (P＜0.01～0.05)， and they had the trend of increase or decrease in the insulin group (P＜0.05 or P＞0.05). AT-Ⅱ in plasma of STZ rats increased (P＜0.05)， but in the Tongxinluo group it was increased (P＜0.05). The level of NPY in STZ rats plasma was significantly reduced (P＜0.01)， but it was increased in the Tongxinluo group (P＜0.01)， and in the insulin group it was significantly reduced (P＜0.01). Blood glucose had no significant change in Tongxinluo group. HE staining showed the pathological changes of cardiac lesion in Tongxinluo group was significantly mitigated. Conclusion Tongxinluo had the effect of preventing and curing for microvascular inflammatory injury and vasospasm in cardiac muscle of STZ rats.
Key words：Tongxinluo；microvascular inflammatory injury；vasospasm；cardiac muscle；diabetic rats
通心络是临床治疗冠心病应用广泛的中成药之一，具有益气通络、解痉止痛等作用。我们针对微血管炎症损伤导致血管
痉挛的机制，检测心肌组织核因子-κB(NF-κB)阳性表达、细胞间粘附分子-1(sICAM-1)、肿瘤坏死因子(TNF-α)、内皮素-1 (ET-1)、血管紧张素-Ⅱ(AT-Ⅱ)及神经肽Y(NPY)等，观察通心络对其的影响。
1 实验材料
1.1 动物
普通级Wistar大鼠2月龄70只，雄性，体重180～240 g， 5月龄8只，体重380～430 g，山东大学新药评价中心提供，动物合格证号：200203。
1.2 药物、仪器及试剂
通心络胶囊内超微粉(石家庄以岭药物公司提供)。链脲佐菌素(STZ，美国Sigma公司)。Rat sICAM-1 ELISA试剂盒(美国R&D Systems Inc，批号0704218，中国尚柏公司提供)；TNF-α、ET-1、AT-Ⅱ、NPY放射免疫试剂盒(北京普尔伟业生物科技有限公司)。免疫组化试剂：一抗：小鼠抗大鼠NF-κB p65(美国SANTA CRUZ BIOTECHNOLOGY INC，sc-8008，Lot：H0107)；二抗：羊抗小鼠-HRP(广谱、加强型，上海长岛生物技术有限公司)， DAB显色。匀浆机(IKA-ULTRA-TURRAX T 25 basic)；ELx808酶标仪(美国BIO-TEK INSTRUMENTS，INC)。GMJ型全自动放射免疫γ计数器(江苏省医疗电子研究所)。DDL-5冷冻离心机(上海安亭科学仪器厂)。图像分析软件：HPIAS-1000高清晰度彩色病理图文分析系统(同济医科大学千屏影像工程公司)。
2 实验方法
2.1 模型制备及分组
Wistar大鼠70只予STZ腹腔注射50 mg/kg，正常对照组大鼠给予等量柠檬酸钠缓冲液腹腔注射。采用强生公司One Touch Profile血糖仪每周测定空腹血糖(FBG)，第4周末，连续2次FBG＞16.7 mmol/L，且有多饮、多尿、多食现象者纳入实验，继续喂养至16周末(相当于糖尿病病程12周)。取状态较好者38只，随机分为3组：STZ对照组(12只)、胰岛素组(12只)、通心络组(14只)。另取正常5月龄Wistar大鼠8只作为正常对照组。正常对照组、STZ对照组予2 mL生理盐水灌胃；胰岛素组予胰岛素皮下注射2 U/d；通心络组予通心络灌胃1.0 g/(kg·d)。
2.2 标本处理及制作
上述大鼠灌胃8周，选取状态较好者进入标本处理。行氯胺酮腹腔麻醉，常规固定，沿正中线切开腹壁，腹主静脉取血，采用强生公司One Touch Profile血糖仪测定血糖。另取血4 mL，置入预冷的含抑肽酶及ED-TA的抗凝管内混匀，4 ℃冰箱内静置2 h后，4 ℃、3 000 r/min离心10 min，分离血浆，用于AT-Ⅱ、NPY检测。均置于-20 ℃冰箱保存待测。取心脏，立即用预冷的生理盐水冲洗，冲洗后在冰上操作，沿左心室方向解剖，4%多聚甲醛固定，连续作病理切片，片厚5 μm，分别行HE染色和NF-κB免疫组化染色。取新鲜心肌组织，每克心肌组织加5 mL生理盐水，置匀浆机上10 000 r/min 离心10 s×3次，制备20%心肌组织匀浆，4 000 r/min离心10 min，取上清液，-20 ℃保存待测。
2.3 指标检测
分别按照试剂盒方法。sICAM-1采用酶标双抗体夹心法测定，根据酶标仪测定结果，建立sICAM-1标准曲线方程，根据曲线方程计算各样品sICAM-1含量。TNF-α、ET-1、AT-Ⅱ、NPY采用放免法测定，由仪器自动计算各样品含量。
NF-κB阳性表达程度：心肌组织切片脱腊至水化，微波抗原热修复，3%过氧化氢封闭内源性过氧化物酶，5%正常山羊血清封闭组织内蛋白，按照1∶150稀释一抗，染色过程均设阳性对照组和阴性对照组，阳性对照组为已知切片的阳性组织，阴性对照组为PBS代替一抗。上述切片严格按照说明书操作，结果可见阳性细胞呈棕黄色。取每一切片，在物镜为20倍的光学显微镜下，在靠近左心室内膜下随机采集5～10个光镜视野，输入到HPIAS-1000高清晰度彩色病理图文分析系统，采用其分析软件，在相同的背底倍体(20倍体，像素点长0.816 μm，)条件下，选择阳性细胞较多的区域，采集5个光镜视野，计算其阳性细胞占所有细胞的百分比含量(面密度)。对每个光镜视野计算阳性面密度比值，计算公式为：阳性面密度比值＝阳性细胞面密度/(阳性细胞面密度＋阴性细胞面密度)。对阳性面密度比值取其均值，作为评价该切片NF-κB表达程度的指标。
3 统计学方法
所有数据均由SPSS11.0统计软件包处理，结果以x±s表示。各组数据均进行方差齐性检验，采用方差分析，均值间两两比较用t检验。
4 结果
4.1 病理观察结果
正常大鼠心肌组织HE染色可见：心肌纤维清晰，心肌排列规则，未见变性坏死和炎细胞浸润。STZ对照组、胰岛素组心肌切片可见大部分心肌纤维显著增生肥大，部分心肌纤维变性溶解消失，部分融合，间质纤维结缔组织增生，脂肪堆积，间质大、中血管壁显著增厚。通心络组心肌切片可见病变减轻。
4.2 心肌匀浆炎症因子测定结果
(见表1)表1 通心络对STZ糖尿病大鼠心肌匀浆炎症因子含量的影响(略)注：与正常对照组比较，*P＜0.05，**P＜0.01；与STZ对照组比较，P＜0.05，P＜0.01；与胰岛素组比较，P＜0.01(下同)
4.3 心肌组织核因子-κB表达及血浆血管紧张素-Ⅱ等检测结果
(见表2)表2 通心络对STZ糖尿病大鼠心肌NF-κB表达程度、血浆AT-Ⅱ、NPY及血糖的影响(略)
5 讨论
糖尿病微血管病变是糖尿病性心肌病变的特征性改变[1]。糖尿病早期即出现微血管内皮功能损伤和血管活性物质分泌异常[2]，一系列临床与实验研究表明，这些损伤常从内皮细胞与/或巨噬细胞的激活开始，在高血糖、氧化应激等作用下，释放各种炎症介质和自由基，损伤血管内皮细胞，因此，糖尿病微血管病变可能是一种轻度的亚急性或慢性炎症性病变[3]。
高血糖可增强氧化应激，氧化应激可通过激活NF-κB上调粘附分子及炎性因子基因转录[4]。NF-κB能引起一系列参与炎症和免疫反应基因的表达增加，如TNF-α、IL-1、sICAM-1、ET-1、血管细胞粘附分子、选择素等，反过来，TNF-α和IL-1又能激活NF-κB，从目前的研究进展来看，NF-κB起着中心调控作用[5]。
STZ糖尿病大鼠是目前常使用的糖尿病模型。本研究发现，与正常Wistar大鼠对比，STZ糖尿病大鼠心肌组织NF-κB阳性表达程度及sICAM-1、TNF-α、ET-1等炎症因子含量均升高，HE染色也显示心肌损伤较重。ET-1是目前发现的导致血管收缩痉挛最强的因子之一；AT-Ⅱ的心血管作用广为人知，如血管收缩、加压效应、促进醛固酮和儿茶酚胺分泌以及刺激VSMC增殖等作用。本研究也发现，心肌匀浆ET-1、AT-Ⅱ及血浆AT-Ⅱ在STZ糖尿病大鼠中也明显升高。
NPY也是体内血管收缩物质之一[6]，具有收缩冠状动脉和损伤冠状动脉内皮的作用。本实验发现，STZ糖尿病大鼠血浆NPY水平降低，其机制有待探讨。
通心络可以抑制心肌组织NF-κB阳性表达，能够明显降低sICAM-1、TNF-α、ET-1等炎症因子含量，HE染色也显示心肌损伤减轻，虽然在抑制NF-κB表达方面和胰岛素无明显差异，仍然可以说明通心络可以防治炎症因子对微血管、心肌的损伤，从而对抑制血管痉挛有一定作用。但本实验结果显示，通心络对缩血管物质有不同程度的影响，可以降低心肌匀浆中ET-1、AT-Ⅱ含量，和胰岛素比较有明显差异，但对血浆AT-Ⅱ、NPY，通心络却能够升高其含量。在糖尿病的病理发展过程中，各种炎症因子和缩血管物质之间可能存在着复杂的动态关系，对这似乎矛盾的结果有待进一步研究。同时，通心络可以升高STZ糖尿病大鼠NPY含量，使之趋向于正常大鼠，其机制也有待进一步研究。
综上所述，通心络可以防治炎症因子造成的微血管心肌损伤，对防止血管痉挛有一定作用，但对其防止血管收缩的机制有待进一步探讨。
参考文献
[1] 邱春光，卢长青.糖尿病微血管病变发生机制研究现状[J].心血管病学进展，2007，28(1)：13－14.
[2] Suwaidi JA， Hamasaki S， Higano ST， et al. Long term follow-up of patient with mild coronary artery diaease endothelial dysfunction[J]. Circulation，2000，101(9)：948－954.
[3] Cao DS， Yuan MS， Frantz DF， et al. Local and systemic insulin resistence resulting from hepatic activation of IKK-beta and NF-kappa B[J]. Nature Med 2005，11(2)：183－189.
[4] Nishikawa T， Edelstein D， Du XL. Normalizing mitochondrial superoxide production blocks three pathways of hyperglycaemic damage[J]. Nature，2000，404(6779)：787－790.
