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网络的爱情范文1
1、我要寻找的是一个不会跟我吵架，是一个可以接受我一切的坏毛病并且愿意和我一起改正；会喜欢女孩，会像宠自己的女儿一样宠我的男人，然后我们一不小心就地老天荒了。
2、多少情人沉浸在欢乐里，而我不能，和你在一起。无穷哀怨藏于心坎底，不想再听什么大道理！我只知道，我爱你，想你。
3、你多情的天空布满迷雾，我困在迷雾里失去了方向，每天用眼泪整理着回忆中的伤。现在终于明白，过期的爱，不会再绚彩。彻骨的恨，留给自己的只是伤害。
4、此生能够遇上你，是上苍对我最大的赐福。我会好好珍惜这份缘。
5、男人有钱就变坏，是的，很多男人这样，不过，一有钱就变坏的男人就算没钱，也好不到哪里去。
6、爱，如同一只纸风筝。可近可远，可高可低。风筝有时候会断线，风筝也可以将蓝天装饰得很美，但关键是要看握长线的人，是否用心？
7、断了线的风筝没方向地飞，忧伤在寂寞的荒原漫山遍野。
8、浪漫是什幺？是送花？雨中漫步？楼前伫立不去？如果两人彼此倾心相爱，什么事都不做，静静相对都会感觉是浪漫的。否则，即使两人坐到月亮上拍拖，也是感觉不到浪漫的。
9、都说一个成功的男人背后，常常有一个默默无闻的支持他的女人，那一个失败的男人的背后，是不是也常常有一个明明有闻的瞎捣乱的女人呢？
10、我们总是不懂得珍惜眼前人？在未可预知的重逢里，我们以为总会重逢，总会有缘再会，总以为有机会说一声对不起，却从没想过每一次挥手道别，都可能是诀别，每一声叹息，都可能是人间最后的一声叹息。如果只能够跟你重逢，而不是共同生活，那怎么会幸福呢？
11、如歌岁月总是让人难以清晰，路过你的世界读懂你的多情，熟悉的感觉却忽然感到陌生，那段情就这样从此僵硬冷冰。
12、其实，真正的爱情无关考验，也无关折磨，可是，现实中的我们往往太缺乏安全感，有了自己喜欢的人，就会不停的问自己，他是真心喜欢我吗？他会变心吗？然后，我们会去试探、去考验、去折磨，最后，弄巧成拙。
13、爱，绝不是缺了就找，更不是累了就换。找一个能一起吃苦的，而不是一起享受的；找一个能一起承担的，而不是一起逃避的；找一个能对你负责的，而不是对爱情负责的。爱不是一个人的事，而是两个人的努力，两个人的奋斗，两个人的共同创造、爱，如同一道美丽的风景。清香四溢、芬芳艳丽！而要将美丽进行到底，还需要用心栽培呵护，才不会退色污染！
14、当太阳不再上升，地球不再转动。当时间停住日夜不分，世间万物化为虚有。我的心依然会陪伴你，直到永远！
15、我们，不要去羡慕别人所拥有的幸福。你以为你没有的，可能在来的路上，你以为她拥有的，可能在去的途中。()有的人对你好，是因为你对他好。有的人对你好，是因为懂得你的好！
16、如果可以，我愿意带着我一生的情、一世的爱，来陪你度过天上、人间、地下所有的时间。
17、热恋的时候，不必那麼现实，失恋之后，却必须现实一点，一切已经完了，各有天涯路，多麼不舍，也要放手。
18、不爱你实在太过份，不爱你实在太对不起自己，不爱你我朋友会打我，我的目标只有一个：爱你。
19、好想看着你枕着我的枕头入眠！依然那么想你，爱你。
20、不可改变容颜，但可改变微笑；不可改变别人，但可把握自己；不可改变生命的长度，但可改变生命的宽度。
21、男人和女人，一旦睡过，就会对对方有要求；有要求，就有埋怨，有埋怨，就有痛苦；有痛苦，就有怨恨。
22、千里的路若是只能陪你风雨一程，握你的手前尘后路我都不问，荒凉人世聚散离分情有多真，茫茫人海只求拥有真心一份。
23、一个人的世界：病了，一个人扛；烦了，一个人藏；痛了，一个人挡；街上，一个人逛；路上，一个人想；晚上，一个人的床……慢慢地习惯了一个人的生活，变得沉默、变得冷落、没了想理、不想说、不想看……我不是高傲，也不是胡闹，是厌倦了所有的依靠、有一份极珍贵的礼物，我要把它送给你，那就是我那颗纯洁的心。
24、我曾经以为爱情可以克服一切，谁知道她有时毫无力量。我以为爱情可以填满人生的遗憾，然而，制造更多遗憾的，却偏偏是爱情。阴晴圆缺，在一段爱情中不断重演。换一个人，都不会天色常蓝。爱情要完结的时候自会完结，到时候，你不想画上句号也不行。关于爱情的句子、学会用理解的，欣赏的眼光去看对方，而不是以自以为是的关心去管对方。
25、不愿对你诉说我的不幸，也不敢向你要求爱情，只愿迎着温柔的目光，和你默默地相对不语。
网络的爱情范文2
2010年12月8日凌晨5时许，上海市南汇区某派出所接到群众报案，警方迅速布置警力赶到现场，只见小区内一幢楼前的出租车车顶躺着一名血肉模糊的女子。民警发现该楼栋的外排水管从5层处脱节，停放在排水管下方的正是那辆出租车。警方初步判断：死者可能是从5楼沿排水管爬行，因为排水管脱节而坠落在出租车车顶丧命。
经调查，该女子名叫徐丹，是一名导游。她因不堪人身自由被限，从所容身的五楼传销窝点逃离时不幸坠楼身亡。让人惊诧的是：她到此参加传销竟是其男友段坤所安排的！段坤为何要将女友往火坑里推呢？这背后究竟有什么隐情？
时尚女友：
定制人生的黑匣子
四年前，徐丹从旅游学校毕业后成了一名导游。
2008年10月的一个周末，徐丹与一个女友逛街时，正兴高采烈地边逛边聊，突然有个戴眼镜的男孩上前拍了下她的肩膀说：“美女，你的红色背包很漂亮。不过，如果背在胸前会更安全。”说完，帅哥就大踏步上前走了。徐丹匆匆向四周看了看，发现不远处有个贼眉鼠眼的人正瞟向她。徐丹瞬间明白了，原来帅哥是在提醒她注意小偷！徐丹感动不已，向帅哥的方向投去感激的一瞥，可是那位仗义的男孩早已消失在人潮中……
2009年5月，徐丹在参加一次朋友聚会时，竟再次意外地见到了那位曾好心提醒过她的帅哥。徐丹主动与他攀谈，得知他名叫段坤，在一家文化传播公司就职。
热情开朗的徐丹巧妙地向段坤表达了好感，并且在好友的撮合下，两人开始了甜蜜的恋情。可因为职业原因，徐丹经常带团外出，所以与男友聚少离多。有一次，徐丹终于赶上倒休，能好好陪陪男友的她，却做了一件让男友吓了一跳的事儿。
2010年10月的一天夜里，徐丹看到段坤已经睡了，她便悄悄地趴在电脑前认真地写着什么，当她发现男友段坤朝她走来时，她赶紧关闭了网页。
看到徐丹如此举动，段坤有些生气，他担心女友和别人好了，他质问女友，刚刚究竟然在做什么。看到男友如此震怒，徐丹只好解释了其中原由：原来，徐丹坐飞机时在报纸上接触到了“网络遗嘱”这个新名词。网络遗嘱重点针对意外伤亡而推出的一个第三方“人生重要信息”的存储与传递平台，是一个特别的服务网站，它可将用户生前不方便告知或未及时告知的遗嘱、遗愿、隐私、财产信息及情感表达等重要信息存放在专门的“网络遗嘱保管箱”内，用户万一不幸发生意外身亡、瘫痪等失去正常意志的情况，网站便会将这些存储的信息提交给当事人所指定的联系人。一方面，以此防止当事人因发生意外而造成人生重要的信息丢失。另一方面，则可以帮助当事人向自己的亲人传递未来得及表达的情感。
“网络遗嘱”又被称为“定制人生的黑匣子”，只要29元就可以享受终身服务，可以给指定的人，留下生前想说的却没有说出的话，还可以存放信用卡、银行卡的密码。
“网络遗嘱”用户可以根据自己登录的频率设置期限，如果将登录频率设定为1个星期，客户一周没有登录遗嘱网站的话，他们会给客户发邮件或短信；如果没有联系到客户，就会将他存放在保管箱内的内容交给指定联系人。
“网站安全吗？万一被黑客窃取，遗嘱提前泄露呢？”段坤忍不住问道。
“这个你放心。网站采用了多重加密技术，即使是该网站的工作人员也不能接触用户的信息内容，如果是被黑客恶意获取，显示的也只是乱码。”徐丹以为男友也对写“网络遗嘱”动了心，于是向他大肆宣扬其安全性。她不知道男友感兴趣的并不是“网络遗嘱”本身，而是对她写的遗嘱内容充满好奇。
糊涂男友：
为看“网络遗嘱”软禁女友
徐丹考虑到自己经常在天上飞来飞去，属于高危的工作性质，万一哪天发生意外，根本来不及与家人道别，所以，徐丹悄悄地把自己重要的一些信息保存在网络遗嘱里，如果真的发生意外，也可以把这些信息传递给父母和男友，也算是对亲人的一个交代。
徐丹对段坤说：“如果有一天我真的发生了意外，就希望通过‘网络遗嘱’向你继续传递我的爱，也希望能够支持你继续快乐的生活；我还预订了特别纪念日的送花服务，就算我真的不在了，也希望你在之后每一年的生日和我们的结婚纪念日能收到我专门为你准备的花；另外，我还准备了一份特别的礼物，希望在你新的婚礼上送给你……”
说到这，段坤立刻制止徐丹继续说下去。徐丹看到男友的眼圈都红了，于是故作轻松地说：“傻瓜，我只是防患于未然而已，又不是真的写了遗嘱就会死，瞧你……”段坤回过神来，一把将女友搂在怀里，抚摸着她的发梢说：“那你能不能告诉我，你的遗嘱里都写了些什么？”徐丹回过头，狡黠地一笑，故作神秘地把一根食指竖在嘴边：“嘘，这是一个秘密！谁也不能知晓的秘密，除非，除非……”段坤赶紧用手捂住了女友的嘴。
随后，徐丹又对段坤说：“别人都是在遗嘱里交代遗产的分配，我没有遗产，我的最大财富就是感情。这辈子，我把我的感情分给了很多人，有父母，有兄妹，有你，还有……”说完，徐丹顿了顿，段坤立即紧张起来，他忍不住问道：“还有谁？”可是徐丹却笑而不答。
段坤不禁想起另一个人来。这个人名叫郭志阳，是徐丹的初恋男友。徐丹和段坤确定恋爱关系后，她曾向男友坦白过这段恋情。郭志阳是徐丹的校友，两人在大二相识后，相恋了四年。后来因郭志阳执意要去另一个城市发展而不得不分手。
段坤开始关注徐丹的一举一动，每天查看她的手机，偷听她与别人的通话，甚至还破解了徐丹的QQ密码，查看她与网友的通话记录。但是一连两个月过去了，他也没有发现任何蛛丝马迹。
自从知道女友写了“网络遗嘱”之后，段坤便觉得女友整天神秘兮兮的，特别是女友说的那句“我还准备了一份特别的礼物，希望在你新的婚礼上送给你”，难道她的话外音是她不会成为自己的新娘。
徐丹的网络遗嘱就像潘多拉的盒子充满了神秘感，如何打开这只神秘的盒子呢？段坤苦思冥想却毫无结果。
他几次试图登陆网络遗嘱窥探隐私，却无论如何也输不对密码，他用女友的生日、电话号码和银行卡密码试了无数遍，却仍然显示“密码错误”。就在段坤一筹莫展之际，他突然想起女友说过，她将“网络遗嘱”的登录频率设定为1个星期，如果她一个星期没有登录遗嘱网站，网站就会给她发送邮件或短信；如果没有联系到她，网站就会将她存放在保管箱内的内容交给指定的联系人。
要想提前获知女友的“网络遗嘱”，那就只有一个办法：让女友在一周内与外界失去联系。没有网络没有电话。可是怎样才能让徐丹不上网呢?而且时间长达一周。
有一天段坤在网上浏览新闻时，看到一则“女大学生身陷传销魔窟”的新闻。传销组织没收了女孩的手机，让她无法与外界取得联系。看到这里，段坤不禁茅塞顿开：何不让女友去参加传销？一周后等他破译了网络遗嘱的秘密之后，再将她接回。
可是如何保证女友的安全呢？段坤想起了自己的哥们黄鹏，黄鹏现在正在上海一家公司做传销，之前还几次打电话邀请他加入，但都被段坤婉言拒绝了。
何不借黄鹏之手，让女友消失一星期？段坤主动拨通了黄鹏的电话，向他细述了原委，一再强调让女友加入传销是假，只要让她与外界彻底失去联系一个星期就好。段坤还承诺事成之后将予以重谢。
面对这送上门的好事，黄鹏当然是求之不得。他向哥们段坤保证：一周期满，绝对将“嫂子”完璧归赵！在与黄鹏联系的这期间，段坤不时向徐丹提起他有个哥们在上海做销售，事业非常成功，正在寻找二级。段坤摸准了女友的心思，知道她早就想结束替人打工的日子，有朝一日能当上老板。
徐丹听男友有加盟朋友的公司做老板的意向，非常兴奋，当即邀约男友同去考察。但段坤称最近工作很忙，不好请假，辞职更是欠妥，万一考察不成功，他连条退路都没有。徐丹听男友说得有理，于是答应代男友前去考察。
段坤几次当着女友的面拨通黄鹏的电话，在电话里煞有介事地谈到事宜，并请黄鹏和徐丹通了话。
黄鹏非常能侃，几句话一出口，就将徐丹逗笑了。她感觉男友的这个哥们挺亲切幽默的，再加上段坤说等忙完这几天争取去接她，徐丹更是消除了顾虑。
花季女孩：
不甘受控跳楼身亡
2010年12月3日，徐丹踏上了去上海的列车。也为她的死亡之旅埋下了伏笔。
徐丹走的当天，段坤向黄鹏账上打了2800元钱的入会费，虽然是假传销，但是他必须把戏演真点儿，他把这钱就当做是女友在上海的生活费和给哥们帮忙的好处费。
黄鹏在火车站接到徐丹后，立刻给段坤打了报平安的电话。随后他带徐丹住进了南汇区某居民区的一栋单元楼的502房。黄鹏说是特意为她租的，徐丹非常感激。
第二天，黄鹏带着徐丹到外滩玩了一天，中午吃饭的时候，他打电话叫来了一个名叫秦圆的女孩，介绍说是他的女朋友。
临走时，他说晚上还有一个产品推广会，邀请徐丹也参加。
当晚7时30分，秦圆拎了几件换洗衣物敲响了徐丹的房门，她说黄鹏怕她一个人闷得慌，所以要她来陪她。徐丹很高兴，她不知道，秦圆其实是黄鹏派来监控她的。
随后，秦圆说产品推广会马上就开始了，于是拉着徐丹进了不远处一家酒店的宴客厅。黄鹏正在宴会厅里指挥大家布置，看到徐丹和秦圆，他客气地说：“为了推广会不受干扰，麻烦你们把手机、钱包等交到服务台来。”徐丹并未意识到有什么不妥，于是主动和秦圆一起将手机上交了。
推广会后，徐丹的手机并没有被归还。黄鹏适时地过来解释说：“接下来还要进行为期一周的封闭式考核。考核完成，才能享有这个品牌的权，如果考核失败，会将手机、钱物如数归还。”
徐丹有点疑惑，但是她什么也没有问出口。
接下来的几天，徐丹越来越感觉到不对劲。所谓的封闭式考核，完全就是关在租住的房间里被黄鹏“洗脑”；她被限制了自由，哪儿也不能去，即使是上个厕所，秦圆也在一旁跟着。这哪里是来考察，完全是被软禁！一晃徐丹已在上海呆了四天了。徐丹想男友，想亲人。徐丹决定不惜一切代价逃离这里。
当晚，徐丹和秦圆聊了一会就睡着了，其实她并没有睡着。晚上12点左右，她借起来上厕所之机，查看秦圆是否已经睡熟，并顺便查看了一下四周的环境，就又回到床上躺下了。经过一番激烈的思想斗争，凌晨三点左右，徐丹再次起床，她偷偷穿好衣服，打开了室内客厅的唯一一扇窗户，她抱着窗外的一根排水管往下滑。谁知脆弱的排水管根本无法承受一个人的重量，瞬间就断裂脱落了！可怜的徐丹，就这样从五楼坠落到一楼的一辆出租车车顶，气绝身亡！
事后，在接受记者采访时，记者问到段坤是否担心过女友的安全问题，段坤懊悔地说：“刚开始有点担心，但后来想到黄鹏是自己的好哥们，而且说好了是假传销，并不是真的，就慢慢释然了。”但让段坤万万没想到的是，一向性情刚烈的女友竟然不甘心受控，毅然决然选择跳楼逃生！
事发后，警方顺藤摸瓜，一举将黄鹏等传销组织人员抓获，为了撇清一些干系，黄鹏向警方交待了段坤介绍女友进入传销的经过。
为了不打草惊蛇，警方让黄鹏给段坤打电话，就说他的女友生病了，心急如焚的段坤接到电话就往上海赶，没想刚下火车，他就被警方拘捕了。
得知事情的原委，直到警方押着他在医院太平间里看见女友冰冷的尸体时，段坤还不敢相信这个事实。过了好久，他才放声大哭：“都怪我！我该死，真该死……”
段坤交待了所有的情况，他也向警方提出了惟一的要求，他想看看女友的遗嘱。
当他打开QQ，发现QQ邮箱里堆满了“网络遗嘱”网站发来的消息，因为此时从徐丹离开的那天算已有十天，网站已经将遗嘱的内容向他公开了。
“亲爱的坤：
当你见到这封信的时候，也许是10年之后，抑或很多个10年之后，但我已经不在人世了（不是我乌鸦嘴，因为人生总是充满了种种风险和意外），我想我该留给你点什么？
我要告诉你的只有一句话：我爱你！并且，永远爱你！
你永远是我最爱的人，当第一次见面时你用力拍我的肩膀，虽然很疼，但是那一刻，我开始祈祷我能和你再次相遇。
我希望能与你同生同死。如果不能，我希望在我死后，你不要太悲伤，我说过假如我不能陪你到老，我会送你的新娘子一份礼物。其实，我好违心，我当然不希望有除我之外的人来当你的新娘！不过，我还是准备了一份礼物，如果有那么一天，就请你转交给她。”
段坤打开了另一封信，这一封信是写给段坤未来的新娘的，里面却全都记录着他平时的一些生活习惯和喜好，比如“喜欢吃炒鸡蛋，不吃蒸鸡蛋，不吃土豆和红薯；早上起来习惯先洗脸，再刷牙；上卫生间总是不关门；咖啡一定要喝苦的，不加糖”等等，还未看完，段坤早已泪流满面。他对爱情的不信任让一个花季少女失去了生命，他也将为此在监狱里痛苦的忏悔。
网络的爱情范文3
不久前，生活在普罗旺斯的女孩安娜创办了一家“爱情买卖”网店，让这个充满甜蜜爱情气息的小镇，再次吸引了人们的眼球。
一次，安娜的同事妮娅忽然很怀念童年时喝过的一种老牌子饮料，以为是已经绝迹的东西，居然在一家网站找到了，她欢欢喜喜订购了一箱，忽然叹息道：“只要想买，网上几乎什么都有，如果我们的爱情也能在网上买到就好了！”
一句玩笑话，却让安娜突发奇想：如果我开一家网店，将想要恋爱的男女“明码标价”，为大家提供一个自由选择的平台，说不定是一件很有意思的事情！
第二天，安娜就开始动员身边几个未婚的亲友，让他们把自己真实的资料传过来。简单而精彩的自我介绍，展示个人风采的照片，再根据外貌、气质、工作和年龄归结为四大类，分为男生篇和女生篇，然后“明码标价”挂到了网站上。
网站的定价，女生是99美元，男生0.9美元。也就是说，一般情况下，男方将心仪的女生拍下来，他要付费99美元，女生则要付0.9美元，一共将99.9美元交过来，安娜就会用这笔钱来做安排，邀请他们到一家充满浪漫气息的小店去喝咖啡。约会完毕，如果感觉彼此心仪，那就留下联系方式，继续交往。如果发现不是自己想要的类型，就算不谈恋爱，也可以成为朋友，并不存在真正的“买卖关系”。
为了保证资料的可靠性，安娜最开始挂到网上的资料，全是身边熟悉的人，也包括她自己的一份。令人意想不到的是，第一位跑到网站来拍女“宝贝”的男生，选中的正好是安娜。按照双方约定，手拿一束紫色熏衣草的安娜来到咖啡店，看到了早已等待在这里的约翰。他英俊高大，干净明朗。四目相对的那一刻，两人一见钟情，双双坠入情网。
爱情来得这样快，又这样突然，沉浸在甜蜜里的安娜，简直有点儿难以置信。更让她惊喜的是，约翰说是网店帮自己找到了爱情，熟悉软件开发的他，开始精心设计网页，完善约会准则，发动自己的好友也来参加，成为安娜最得力的助手。
刚开网店时，抱着娱乐和好玩的心态，安娜并没有想到赚多少钱。后来，随着网站点击率一路飙升，开始有公司请求植入广告。经过精心筛选，网页增加了鲜花、婚纱、旅游等方面的内容，恋爱中的男女，不用花费多少心思，就可以买到心仪的礼物，一旦真的牵手，不但可以用最优惠的价格去拍婚纱照，还有免费的浪漫蜜月之旅。
网店的会员越来越多，安娜和约翰双双辞去了原来的工作，还雇了6名员工，全心全意经营“爱情买卖”，每天忙着鉴定会员资料的真实性，为合适的男女搭桥牵线。
偶有空闲，他们也会放下手中的一切，欢欢喜喜去筑自己的爱巢――他们已经买下了一栋带农场的房子。等到夏天，薰衣草开遍普罗旺斯的小镇时，他们将举办一场薰衣草婚礼。那时，网站所有的会员都将被邀请来参加婚礼，并可以得到一份用黄衣草制作的神秘小礼物。
网络的爱情范文4
【关键词】 清毒栓；宫颈癌；SiHa细胞；PTEN-MDM2-p53网络
Abstract：Objective To discuss the effect of Qingdushuan on SiHa cells of cervical cancer proliferation and protein expression in PTEN-MDM2-p53 network from the level of cell biology and molecular biology. Methods SiHa cells were cultivated with 4% containing serum. Normal control group， blank serum group， Qingdushuan group， Baofukang group and interferon group were established. The influence of inhibiting and proliferating SiHa cell was detected by MTT assay. Three protein expression was detected by Western blot method. Results After cultured with drug containing serum， the number of cells decreased， 4% concentration of serum for 72 h was the strongest. Compared with the control group， there were significant differences (P＜0.01). At the same time， drug containing serum elevated expression of tumor suppressor protein of PTEN and p53， reduced cancer protein expression of MDM2. Conclusion Qingdushuan containing serum can inhibit tumor through regulating PTEN-MDM2-p53 network.
Key words：Qingdushuan；Cervical cancer；SiHa cells；PTEN-MDM2-p53 network
子宫颈癌是发展中国家妇女最常见的恶性肿瘤，居女性生殖器官恶性肿瘤的首位。研究表明，高危型人瘤病毒(HR-HPV)持续感染是宫颈癌发生的必要条件，宫颈癌成为目前人类所有癌症中唯一病因明确的癌症、唯一可以预防的癌症。近年来，中医药在治疗女性生殖道HR-HPV感染方面取得了一定的成效，但其作用机制不明。目前，对抑癌蛋白研究中，PTEN- MDM2-p53网络调控成为近年来的研究热点。笔者针对这一网络环路，探讨中药在PTEN-MDM2-p53网络调控方面的作用机制，进一步研究中药在HR-HPV相关宫颈癌细胞中抗病毒、抗肿瘤的机制。
1 实验材料
1.1 动物
选取SD雌性大鼠40只，体重为200～250 g，购自北京维通利华实验动物技术有限公司，许可证号：京动许字(2000)第004号总049号。
1.2 试剂
胎牛血清购自元享圣马公司，DMEM全培养液购自美国GIBCO公司，青霉素和链霉素购自华北制药厂，胰酶及EDTA购于SERVA公司及赛多利斯公司，噻唑蓝(MTT)购于北京欣源佳和生物科技有限公司，二甲基亚砜(DMSO)为上海华舜产品，一抗PTEN为小鼠单克隆抗体(Santa Cruz)，一抗p53为小鼠单克隆抗体(上海博士德公司)，一抗MDM2为小鼠单克隆抗体(Santa Cruz)，二抗为辣根酶标记山羊抗兔IgG和辣根酶标记兔抗小鼠IgG(北京中杉金桥公司)。蛋白质分子量Marker(美国MBI公司)，硝酸纤维素膜(美国Millipore公司)；其余试剂丙烯酰胺、双丙烯酰胺、丽春红、十二烷基硫酸钠、β-巯基乙醇等均为国产分析纯。显影液、定影液(上海冠龙照相器材公司)。
1.3 细胞株
人宫颈癌细胞系SiHa细胞为HPV16表达阳性的人宫颈鳞癌细胞系(美国ATCC细胞库)，北京大学人民医院干细胞中心妇科实验室魏丽惠教授惠赠。
1.4 药物
清毒栓由莪术、紫草、黄柏等组成，药材均购自北京同仁堂药店。将复方药物分别醇提(紫草)、油提(莪术)、水煎(黄柏)，去渣浓缩，2 375 g原药材制作成560 mL药液，终浓度约为4.2 g/mL，高温消毒后于4 ℃冰箱保存。中药阳性对照药按保妇康栓组成比例(主要成分为莪术油及冰片)制成口服溶液。安达芬注射用重组人干扰素α-2b，安徽安科生物工程股份有限公司生产)。
以上药物均按人临床给药剂量的等效剂量10倍制成药物留用(200 g体重大鼠给药剂量＝60 kg体重人给药剂量×0.018×10)。
2 实验方法
2.1 分组及给药
将大鼠随机分成4组：空白血清组给生理盐水、阳性药组(清毒栓组)、中药对照药组(保妇康组)、西药对照药组(安达芬组)，每组10只。每日同一时间给空白血清组、消毒栓组、保妇康组灌胃，安达芬组用注射用水溶解后按比例给予肌注，隔日1次，6 d后腹主动脉取血。将血液静置30 min后，3 000 r/min离心10 min，取上清分装到1 mL无菌EP管中，保存至-86 ℃冰箱备用，用前56 ℃水浴30 min灭活补体。
2.2 MTT法测定含药血清对SiHa细胞的抑制作用
取对数生长期细胞制成单细胞悬液，计数，细胞浓度为3×104个细胞/mL，每孔100 μL，接种于96孔培养板中，设空白调零孔。在37 ℃、5%CO2培养箱中培养48 h后，用含2.5%胎牛血清的培养基分别稀释含药血清浓度为4%、8%，终体积为100 μL/孔。每种浓度设立6个平等对照孔，并设正常对照，置正常培养条件下培养。每24 h换液1 次，作用24、48、72 h后，弃去孔中培养液，每孔加入MTT 100 μL，反应4 h后，弃去每孔中的液体，加入DMSO，100 μL/孔，振荡10 min后，选择492 nm波长，在酶标仪上测定各孔吸光度(OD)值，记录结果。
2.3 Western blot法测定PTEN、MDM2、p53的含量
用细胞刮子分别收集以4%浓度不同含药血清培养液作用72 h及对照组细胞的蛋白，冰浴1 h，然后4 ℃离心10 min。将上清移至预冷的EP管中，Bradford 法测定蛋白含量后，将剩余蛋白样品加入等体积上样缓冲液，沸水中煮5 min。制胶后上样，以电泳缓冲液冲洗加样孔数次。分别将处理好的80 μg各组蛋白样品按照预定的顺序加入浓缩胶的上样孔内。经过电泳及转膜、封闭，将膜移入杂交袋中，加入用适当漂洗液稀释的一抗(PTEN为1︰200，p53为1︰200，MDM2为1︰250)，封口，4 ℃孵育过夜，加入漂洗液稀释的辣根过氧化物酶标记的二抗(PTEN为1︰2 000，p53为1︰5 000，MDM2为1︰2 000)，振荡温育后感光、拍照。用Band Leader 3.0软件对扫描图像的目的条带进行灰度分析。
3 统计学方法
采用SPSS12.0软件包进行统计学处理，数据以x±s表示，采用方差分析。
4 结果
(见表1、表2、图1)表1 4%含药血清作用不同时间SiHa细胞生长及增殖情况(略)、注：与空白血清组同期比较，*P＜0.01
表2 4%含药血清作用72 h后各组PTEN、MDM2、p53蛋白表达比较(略)注：与空白血清组比较，P＜0.01，P＜0.05
5 讨论
PTEN是具有磷酸酶活性的抑癌基因，有研究表明，该基因表达缺失与宫颈癌的恶性演变、浸润生长及远处转移有关。PTEN主要通过脂质磷酸酶活性发挥抑癌作用，该基因的编码产物能够使被PI3K激活的细胞内第二信使PIP3去磷酸化，从而影响细胞内PI3K/Akt信号转导途径[2]。MDM2基因是一原癌基因，近年来研究表明，PI3K/Akt信号转导途径可以激活细胞的磷酸化过程，从而导致MDM2癌蛋白由胞浆进入胞核，而PTEN对该信号转导途径的影响可以阻止MDM2蛋白由胞浆进入胞核，从而加速该蛋白的降解[2-3]。p53基因是抑癌基因， MDM2高表达呈现癌基因的功能，其表达产物在细胞核内可以与野生型和突变型p53结合使其功能失活。MDM2在体内与p53构成降解-反式激活循环通路，是p53蛋白最重要的负调控因子。一方面p53基因激活了MDM2基因的表达；另一个方面MDM2促进p53磷酸化形式的降解，抑制p53基因转录活性。MDM2羧基端的RING finger结构域(441-491残基)有E3连接酶活性，可介导p53的泛素化及被26S蛋白水解酶复合体降解。MDM2亦可介导自身的泛素化及降解。p53和MDM2之间形成一个精细的反馈环，依细胞所处状态而及时调节彼此的数量从而保持正常情况下的低水平状态以保证细胞正常生长[4]。在PTEN-null细胞株中转染野生型PTEN后，细胞内p53基因转录活性增强，p53 蛋白的表达水平也上升，进一步影响p53靶基因的表达水平，其中包括某些与细胞周期阻滞密切相关的基因。PTEN-p53的相互关联性说明抑癌基因与抑癌基因间并不是独立发挥作用，而是有密切联系的[5]。抑癌蛋白、生长信号转导途径、癌蛋白都处在一种相互调控网络框架中，并且抑制生长信号/刺激生长信号网络处于动态平衡状态。在恶性肿瘤细胞中就经常会出现网络调控失衡状况，这进一步表明，实际上人类肿瘤发生与否与抑癌基因-癌基因调控网络中各个组分的功能是否异常有关。这些观察到的现象提示在肿瘤发生发展过程中某个抑癌基因的丢失或突变会影响其他基因的功能。
从本实验结果可以看出，空白对照组与正常对照组无论在细胞增殖抑制实验及Western blot实验，其检测结果比较差异无统计学意义，排除动物血清造成实验结果假阳性的可能。在细胞增殖抑制实验中，3组含药血清均有抑制宫颈癌SiHa肿瘤细胞增殖的作用，并且随着作用时间的延长，有明显的时间依赖关系，其中以安达芬组为最佳，清毒栓组次之。通过含药血清最佳浓度和时间作用于宫颈癌SiHa细胞，运用Western blot实验方法检测，PTEN及p53蛋白的表达量与空白的含药血清相比均有所升高，而MDM2蛋白表达较之降低，验证了PTEN、p53、MDM2抑癌基因和癌基因的相互关联性，说明抑癌的过程是多个环节相互作用的复杂过程。提示清毒栓抗宫颈癌的作用可能是通过提高PTEN、p53的抑癌蛋白表达及降低MDM2促癌蛋白的表达，调控PTEN-MDM2-p53网络环路而起作用的。
参考文献
[1] Mayumi N， Kevin HK. HLA class I binding promiscuity of the CD8 T-Cell epitopes of human papillomavirus type 16 E6 protein[J]. Journal of virology，2007，81(3)：1412－1423.
[2] Yunqing Li， Fadila G. PTEN has tumor-promoting properties in the setting of gain-of-function p53 mutations[J]. Cancer Res，2008， 3(68)：1723－1731.
[3] Choi HJ， Chung TW. Ganglioside GM3 modulates tumor suppressor PTEN-mediated cell cycle progression-transcriptional induction of p21WAF1 and p27kip1 by inhibition of PI-3K/AKT pathway[J]. Glycobiology，2006，6(16)：573－583.
网络的爱情范文5
通讯作者：杨旺生，南京农业大学人文院院长，教授，博士，方向历史文化资源开发与利用。
摘 要：2014年8月，一条微博火了“南京爱情隧道”。10月29日，相关部门表示要砍掉爱情隧道的树木，网友纷纷呼吁“刀下留树”，人民日报转发的微博被转发，评论均超过6万次，人们表现出异常的关心度，爱情隧道到底有什么魔力。所以笔者也亲自去了爱情隧道观察，一睹隧道风采。一条普通的铁路轨道，之所以吸引舆论的视线，是因为一方面中国人的公民意识不断提高，城市建设中来;另一方面。互联网的发展，网络的普及，网络问政成为普通百姓于政府管理者沟通的桥梁，成为国家政治民主的新常态。
关键词：“南京爱情隧道”;公民意识;网络问政;新常态
一.“南京爱情隧道”的基本情况
（一）“南京爱情隧道”的地理位置
“南京爱情隧道”位于南京市江宁区，地铁s10号线正方大道500米处，从银杏湖大道到秣周路4公里路段内，有多个大弯道，由于近年没有及时清理，路边杂树疯长，加上列车穿行，形成了拱形绿道，被网友称为“爱情隧道”。这条铁路属于云台山硫铁矿公司，这条31公里的铁路是公司转运生产设备、原料的专用铁路线。
（二）“南京爱情隧道”作为浑然天成的自然景观
笔者前去南京隧道观察过，只是一片绿树，因为树木沿着这段隧道延伸，所以视觉效果不错。可以说这样的绿色在农村，是很普通的景色，但是为什么这一片普通的绿色在网络迅速走红，吸引大批游客的脚步。笔者认为其中一个原因是这是自然生成的美景，没有经过人工的修饰，是原生态。
在多年前司空见惯的景色，如今都成为了奢侈品，成为我们必须为此付出昂贵代价才能看到的景色，甚至我们再也看不到。雾霾是大部分中国地区面临的严重问题。在几十年前，我们从来没有想过这个问题，但是在今天我们都在恐惧，都在想如何治理。可是诸位有没有想过，为什么雾霾现在如此严重？是什么原因造成今天的窘境，我们认为科技的发展能够解决解决问题，然而，科技不能解决所有问题。
（三）“真”景色到“真”人情
在繁华的大都市里，只有钢筋混水凝土，宽广的道路是人造的，甚至马路上的美女也是人造的。这是个让我们看不到“真”的时代，此时南京爱情隧道出现在公众的视野，我们发现了自然给赐予我们浑然天成的美景，震惊了，惊喜了，希望能够留住它。以前每个城市也都有它浑然天成的美景，但是为了所谓的城市建设、房地产，我们把它都牺牲了。如爱情隧道作为绿色景观在南京也是奢侈品，因为现在的土地寸土寸金，市区哪能容忍这么大面积的绿化，简直浪费土地，有这片地开发房地产。
二.“刀下留树”成功的原因。
10月29日有消息称管理部门将砍树，网友议论纷纷，据调查，有90%的网友要求刀下留树。11月3日确定将不会砍爱情隧道沿线的树木，火车将调整营运时间。在这短短的几天时间里，由于网友们的热议，高度关注，强烈支持，“刀下留树”成功。
（一）网络带来中国公民意识的变化
从此事件中可以看出，我国的国民对国家决策事件关注度有所提高，中国人的公民意识在逐步提高。为什么我国人民的公民意识一直比较薄弱，当然这与中国自古以来的国家管理形式和传统思想有关系。
所谓公民，最初是古希腊的雅典和古罗马城邦时期的市民。公民身份意味着参政议政的权利、义务与责任。所以，在帝制时代，山高皇帝远，地方权威当局经常是民众的噩梦。因此，地方民众也不可能是公民，公民意识更是无从谈起[1]建国以来，特别是改革开放以来，中国人的公民意识觉醒。网络的出现，给中国人表达内心的声音提供平台。随着微博的普及，越来越多的中国人通过微博来传达自己对国事家事的种种看法[2]。
（三）网络问政的力量
2008年是网络问政元年，此后通过网络来影响中国人日常生活、国家政治生活的例子越来越多。如2013年雅安地震中的贩灾捐款事件。
网络问政成为政府电子政务的重要内容。根据人民网舆情监测室统计，截至2012年12月底，中国政务微博已经全面覆盖所有省级行政单位。政务微博已经扩展到以公安、旅游、交通等为代表的大多数政府职能部门，所以政务微博是政府向国民信息、征求意见和传递正能量的重要平台。
三.如何使网络问政常态化
（一）政府信息公开透明
试想，如果人民日报没有刊登这则相关部门表示要砍掉爱情隧道的树木的消息，那么公众只能在树被砍后对盲目城市建设破坏环境的行为表示抵制。随着十三中全会以来，中国的各项改革不断深化，政府信息的透明度不断提高管理者与老百姓之前的交流越来越频繁。虽然在2012年12月底政务微博务就已经覆盖了省级各个部门，但是政府微博所的各级政府信息比例较少。建议各市、县、乡、村，都应该开通政务微博，实时向百姓传达你那里发生了哪些事情。没有政务公开，公民意识的培养就是空中楼阁。
（二）政府转变姿态
政府转为服务型政府的理念已不新鲜了，各级政府也做出了各种改变。但是笔者认为这种改变不仅仅是政府功能的改变，更重要是姿态的改变，真心的改变。中国几千年来的官本位、权力本位思想，让部分人在仕途中只考虑如何拥有更多的权力，而不是更好的为人民服务。深化改革，应该是由里而外的深化，对个人而言，是心态的改变;对政府而言，是姿态的改变。人民，从来不是愚民，愚政也无法治理好人民。
（三）人民树立公民意识
由于种种原因，中国人的公民意识比较薄弱，这是历史造成的。笔者认为应该通过不断增强公民意识使这种网络问政常态化，而不是只在某一件事，某一个领域，必须让公民参与到国家生活的各个方面中，树立人民的公民意识的新发展。开放、平等的网络环境使得网络问政更显轻松、畅快，使人人都有麦克风，可以转发、评论、点赞。
国家的权力来自人民，人民是国家的主人。人民如何做好国家的主人，这不是一句口号就能解决的问题，必然需要行使主人的权利。此次“刀下留树”与其说是微博的力量，不如说是人民的力量。但是这样的事情不应该成为一种典型，而应该是一种常态化的存在。国家的发展与每个人息息相关，我们需要摒弃“个人自扫门前雪”的观念。只要你还在这个国家，你还是这个国家的公民，那么所有的事情都与你戚戚相关。网络发展的新时代，通过网络问政已成为一种必然趋势，每个公民都应树立公民意识，为国家建设，城市建设献计献策。（作者单位：南京农业大学人文院）
通讯作者：杨旺生
注解：
① 范可.历史脉络、权力与多民族国家-关于公民意识的若干问题[J].西北民族研究，2014，2
② 谢阜康.论“网络问政”对公共话语空间的构建[D].长沙：湖南师范大学，2012.
参考文献：
[1] 唐旭.基子微博问政的社会冲突治理机制研究[D].中南大学，2013。
网络的爱情范文6
关键词：微电影；艺术特征
网络时代催生出与这个时代相适应的艺术形态――网络艺术。目前，学术界对网络艺术的定义仍有争论，主要从广义和狭义两个方面对网络艺术概念进行界定：广义的网络艺术认为所有与网络有关联的艺术都应该称为网络艺术，既包括针对网络传播属性制作、传播的新兴艺术形式，如网络电影、网络文学、网络游戏、网络音乐、网络美术等，也包括通过网络传播的传统艺术形式，如通过网站看到的各种影院电影、电视电影、戏曲、电视节目等等；狭义的网络艺术概念专指前者：即专门针对网络传播制作的具有艺术审美特征的艺术作品。本文中提到的微电影是从狭义的角度出发，指专门针对网络传播，形式短小且具有电影艺术特征的电影形式。微电影具有典型的网络时代特征，其题材选择、情节设置、审美追求等都同影院电影和电视电影不同。
一、微电影的制作特点及发展现状
（一）微电影的制作特点
网络传播具有速度快、范围广、互动参与性强等特征。在网络中，传播者和受众是平等的，每个人都可以自由的参与到制作与传播中。传统电影的生产往往需要导演、编剧、摄像、灯光、后期、发行等十几个专业部门配合完成。但是微电影在计算机软件的帮助之下，几个人，甚至一个人都能完成以前复杂的电影制作与传播。与传统电影动辄上千万、上亿的制作成本相比，微电影在制作方面的成本要低得多，同时，与传统电影生产周期相比，微电影的生产周期要短得多。一部传统电影从立项、送审，到搭建班底、拍摄、送审，直到院线上映，最短也要十个月以上的时间，而微电影生产无需层层报批，没有条条框框的束缚，许多新锐导演及电影爱好者的才华可以通过微电影得到了充分展现，其周期相对要短得多。少的一两天，多的几个星期、两三个月。①
（二）微电影的发展现状
基于很低的制作门槛以及便利的传播条件，越来越多的非专业人士投入到拍摄微电影的行列中，他们拍摄了大量的作品，例如：《剩男突围记 》《我的浴室女友》《性命呼叫转移》《给力情人节》《听梦》《该死的胖子》等，数量巨大，参与人数和涉及的范围都非常广。
由于微电影拥有巨大的市场前景，越来越多的专业拍摄团队也加入进来，如由三星(中国)投资有限公司、北京新浪互联信息服务有限公司出品的《4夜奇谭》；由灵思传播机构旗下灵思网络影视中心投拍的全球首部微博系列电影《微博有鬼之目击者》《微博有鬼之私信》《微博有鬼之@谁谁》等等，这些电影大多数由明星参演，拍摄专业，制作精美。
二、微电影艺术特征探析
微电影是由网络媒介传播发展起来的新兴电影形式，拍摄、制作、参与者都与传统的影院电影不同，具有独特的艺术特征。
（一）多样化的题材选择
微电影创作从专业走向草根，是一种面向大众的个性化的自我展示，没有票房压力的微电影在题材选择方面呈现出多样化的特征。
1.爱情题材
爱情是人类永恒的主题，微电影中的爱情主题清新，旨在感动年轻观众。有的传达“乐观、积极”的现代爱情观，如中国最大的微电影出品方华影盛视推出“疗伤系爱情微电影”系列，主打“治愈－励志”风格，将爱情中最脆弱也最令人难以忘怀的“失恋”部分展现给观众，希望通过与观众最细腻的情感接触，传达“乐观、积极”的现代爱情观；有的将题材定位在回归“纯爱”、回归传统爱情观，如微电影《蚁族的奋斗》。据不完全统计，2012年情人节期间，在各大视频网站以爱情为主题首映的微电影多达几十部。②
2.怀旧题材
“怀旧”是人类的一种原初情感。从人类诞生之日起，渴望肉体和精神的美好、舒适、幸福与自由，是人类最根本最原始的天性。然而生活并不尽如人意,各种各样的挫折、失败总是不断阻碍、毁灭着人的这种与生俱来的愿望，为了摆脱痛苦寻求解脱，人往往采用两种方式进行精神的救赎，一种是继续幻想美好并试图付诸行动去追求未来的乌托邦，另一种就是反复地咀嚼品味往昔留下的美好记忆，以抚平痛苦聊以的“怀旧”。③微电影《老男孩》是一部怀旧题材的典型代表作品，作品以主人公王小帅和肖大宝的成长历程为主线，带领观众重回90年代的中学校园。从使用的道具到唱的歌曲如李春波的《小芳》、动画片《花仙子》的主题曲、迈克杰克逊的《billie jean》、小虎队的《青苹果乐园》等都充满着浓郁的怀旧色彩。现实生活中的80后面临着结婚、买房、就业等压力，在巨大的压力面前人往往留恋过去美好的回忆，充满浓郁怀旧色彩的《老男孩》正巧击中了80后心结，获得了广大80后观众的喜爱与追捧。
3.热点话题
随着移动互联网时代的到来，随时、随地、任何人可以发表任何言论的微博获得了空前的发展，成为2011年发展速度最快的网络应用，截至 2011 年 12 月底，我国微博用户数已达到 2.5 亿，较上一年底增长296.0%，网民使用率为 48.7%。微博用一年时间发展成为近一半中国网民使用的重要互联网应用。④微博成为网络社会的热点话题，灵思网络影视中心紧抓微博这一热点话题，投拍了全球首部微博电影《微博有鬼之目击者》《微博有鬼之私信》《微博有鬼之@谁谁》。《微博有鬼之目击者》讲述了一个通过微博寻找“目击者”的故事，《微博有鬼之私信》讲述了一个漂亮姑娘在收到一封微博私信之后生活改变的故事，《微博有鬼之@谁谁》讲述了小人物药家威一心希望通过微博过上名利双收日子的故事。《微博有鬼》三部曲系列利用三个风格迥异的故事多角度揭示了全新社交媒体环境下的网络生态和复杂人性，并藉此片唤起网民对微博应用的理性思考。
（二）节奏紧凑
节奏是艺术的重要元素之一。“电影是时间的艺术，同时也是空间的艺术。节奏是影视艺术的重要造型手段，能够增添影视的艺术魅力，可以创造气氛和表现情绪。在影视中，节奏的快慢与激烈的呼吸和心脏的悸动完全一致，使存在于有机的节奏强度和艺术的节奏强度之间的一定关系更加强化。”⑤
微电影最大的一个特征是短小，最短的电影在十几秒，长一点的一般在二十分钟左右，这是由网络时代“碎片化”的传播特征和传播设备决定的。在短短的十几分钟内要将一个故事讲清楚，需要非常紧凑的叙事节奏。例如微电影《起死回生的爱》以短短27分钟讲述了一个很有时代感的爱情故事，即一个有了外遇即将离家的女人和她一直细心照顾却无法理解她的男人在结婚五年后面对即将到来的离别，两个人内心纠结却又无法割舍的矛盾心态。
（三）追求自由的审美理想
现代社会思想、文化的解放，唤醒了人的自尊、自信、自立、自主之心，使人萌发了对自由的强烈追求。互联网由于自身的突出特性为现代人提供了一个比以往任何一种交往方式都广阔的交往平台，为沉溺于物欲焦虑中的现代人搭设了一个平等对话、畅所欲言的家园，使得人们追求自由的理想有了实现的可能。在网络中，网民们可以自由发表言论、自由访问网站、自由的创作和发表作品。在这样环境中成长起来的网络艺术，不但超越传统艺术的审美属性，而且展示自己自由创造、感性张扬的特征。⑥
没有投资、票房压力的微电影给电影创作者带来了空前的创作自由，只要不违反道德和法律，任何题材、任何表现形式都可以尝试；可以反映现实生活，可以讨论热点话题，可以讲述恋爱故事；可以是现代题材，也可以是古代题材；可以追随潮流，也可以背道而驰；可以是系列剧，也可以仅仅只拍几秒钟。
自由的参与使得网络世界中人人都有机会成为“艺术家”，艺术与非艺术的界限模糊了，“网络艺术以其意义的模糊性、影像的碎片化、情节的互动性、视觉听觉的沉浸感、规则的不确定性、观赏者的随意性、作品的商品化等特征在一定程度上淡化了传统艺术对“宏大叙事”、“真理”、“本质”的价值诉求；在网络中，艺术家的主体性常被消解，“人人都是艺术家”、艺术的精心创造被“怎么都行”替代……艺术与非艺术的界限模糊了。”⑦
自由是全方面的，不仅制作者拥有完全自由，电影受众也可以自由的发表评论，针对电影拍摄提出自己的看法，甚至可以改变电影的情节，微电影追求自由的审美理想完全实现了艺术追求自由和个性化的精神内涵。
作为网络时代的产物，微电影具有题材种类多、节奏紧凑、追求自由的审美理想等艺术特征，充分满足了网络时代受众的审美需要，具有巨大的受众市场。随着越来越多的专业人士的加入，相信不久的将来微电影一定会成为越来越成熟的艺术形式。
注释：
①杨晓茹.《网络电影产业探析》，《当代电影》，2011年7
月。
②《情人节微电影折射现代爱情面面观》，news.省略。
③姜辉.《论当下中国电影的“怀旧”倾向》，《作家杂
志》，2008第3期。
④《第29次中国互联网络发展状况统计报告》，中国互联
网络信息中心。
⑤郭蔚.《电影节奏的旋律》，《电影评介》，2009年第1
期。
⑥杨晓茹.《浅析网络艺术的审美追求》，《新疆艺术学院
学报》，2009年9月。
⑦欧阳友权.《网络传播与社会文化》，高等教育出版社，
2005年版，第189页。
