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许巍时光范文1
最爱的那一碗亲情面
徐峥对吃货的认知，是从孩童时期开始的。对于一个正宗的上海人来说，在吃上的讲究，不在贫富，在于边边角角的周到殷实，绝不因环境而敷衍将就，也不会死撑面子让肚里吃亏。
在徐峥的记忆中，妈妈的味道就是炸土豆饼，把土豆碾碎成泥，放一点点肉末和葱花，捏成一个个小饼滑进油锅里。以前小时候吃不到西餐，星期天家里就会弄一碗罗宋汤，一个土豆饼，再加一块猪排，这就算是西餐了。在家里，说不上谁是主厨，谁有空闲谁就做饭。老爸的炒鳝丝，老妈的土豆饼，过后许多年，徐峥跟着记忆都能做出来。
随着徐峥长大、求学、拍戏，能在家里吃顿饭成了奢望，更别说吃上爸妈做的饭菜了。大学一年级时，徐峥的父亲与癌症搏斗了一年，生命进入倒计时。有一天，父亲回光返照似的精神出奇地好，他对徐峥说，想吃葱油拌面。当时，徐峥的母亲在国外，每天守在病床前的只有徐峥和那些叔叔。几个大老爷们儿，哪儿会做拌面。难道连父亲这点愿望都实现不了？徐峥二话不说，掉头回了家。他一边给妈妈打电话，一边动起手来。葱姜切碎，八角桂皮洗净，放入锅中炒香，加入调料和高汤煮成汤汁，将煮好的面条放入汤汁搅拌，再配上绿绿的黄瓜丝和葱末。看似简单的程序，但能做得地道可不容易。第一次下厨的徐峥，更是手忙脚乱。当他把这碗葱油拌面端到病床前，父亲只是尝了一小口便咽不下去了，脸上却露出了欣慰的笑容。那是父亲吃的最后一碗饭，之后便含笑撒手人寰。
父亲的去世，让徐峥一下变得成熟起来。他唯一感到心安的是，至少完成了父亲最后一个心愿。也是从那时候，他明白了一个道理，你最愿意做也最会做的，还是那些你爸爸妈妈会做的菜。直到现在，徐峥每次回上海，常常会在半夜去寻找一碗葱油拌面吃。
徐峥看过一档法国的美食节目，是讲一个法国老头到世界各地找一个当地的厨师教他做菜，比如在湄公河上弄条船开着让厨师教做咖喱。那会儿徐峥刚大学毕业，一边看一边觉得：“哎呀好馋啊！好羡慕他的职业啊！”去全世界旅游，吃很多好吃的东西，喝好喝的酒……自此，旅游和美食被徐峥固执地绑在了一起。每到一个地方游玩，或者是拍戏，他一定要吃到当地特色的小吃。
有一次去洛杉矶，他带了个吃货朋友去，每天晚上安排的精彩节目便是吃喝，好吃得叫人受不了。人家很多人从国外回来，都因水土不服要掉几两肉，徐峥的体重却是一路飙升。
做有品位的养生达人
2003年，徐峥娶了个地道的北京媳妇陶虹，他们便开始了京沪双城记的生活。在上海和北京都买了房，但装修风格截然不同，就像徐峥对于这两个城市的感情，有爱有恨，也同时敢爱敢恨。对不同城市有不同的感情，但是徐峥在双城里都找到了同样让他喜欢的美食。他喜欢吃，从来不怎么考虑要注意身材，提起吃，总是津津乐道，在自己家住的上海定西路上就觅到了一堆好吃的;而在北京，各地风味大荟萃，干脆组成了一个志同道合的，轮番在各种不同饭馆内聚会。
老婆陶虹也是个标准的吃货，这点和徐峥真可谓志同道合。陶虹喜欢吃零食，徐峥就在客厅里放了一大筐的零食，老婆大人随手可拿。经常在外面馆子里吃，徐峥觉得麻烦。有一次，他准备在家里大开吃戒，自己动手当厨子。话说，爱吃的人都爱摆弄几下，徐峥是个例外，除了老爸临终前给他做过那碗面之后，徐峥是不怎么下厨的。
这天，他发狠心说，要做几道正宗的上海菜，犒劳一下老婆大人。煞有介事地进了厨房，做来做去，没有翻出什么新鲜花样，倒是把儿时父母做的那几道菜手到擒来地做了出来，也没有特意学过，根据记忆和想象便做了出来。什么炒鳝丝、炸土豆饼，还有一道是他最爱的红烧荷包蛋。把荷包蛋双面煎好，放一点点酱油，在锅里头焖一会儿，酱油碰上荷包蛋煎得有点焦黑的表皮，非常香。陶虹对他的这道荷包蛋情有独钟，赞不绝口。
有了女儿之后，陶虹淡出娱乐圈，在家里相夫教子，形成了男主外女主内的夫妻模式。偶尔徐峥下厨，还是会把这道徐式荷包蛋拿出手。这成了他的招牌菜，和俘虏母女二人的利器。
像许多上海男人一样，心细的徐峥对家庭和家人的体贴照顾无可挑剔，他认为最好的方式就是让她们吃好的。于是乎，大街小巷，国内海外，哪里有好吃的便少不了徐峥一家3口的影子。照此下去，陶虹不乐意了，女明星最看好的身材，在这些美食的攻击下成了牺牲品。陶虹开始节食、减肥。这对吃货来说可是艰巨的考验。徐峥有时候故意拿美食在陶虹面前诱惑她，没想到陶虹一旦狠下心来，还真是雷打不动。她还劝徐峥，也要适当调剂饭量。之前从不考虑肥与瘦的徐峥，终于吃出了问题。有次，他身体感到不舒服，到医院一检查，脂肪肝，高血压，这些毛病都找上门来。看来光吃得好过了嘴瘾也不行，徐峥这才开始注意养生之道。
人家都说红酒能养生，徐峥也从之前的喝白酒改成喝红酒。他发现在喝红酒的时候，让人感觉舒适，在有情调的环境下，能让心安静下来。
对于菜品，徐峥也一改之前大鱼大肉的豪爽做派，清粥小菜这等家常菜成了他的最爱。有荤有素，粗细粮搭配，营养全面均衡。照此方法吃了一段时间，徐峥突感身体状况改良不少，不但体重下降，浑身上下也轻松了许多。他还向朋友们推荐，要怎么吃才营养又美味。后来大家一起出去吃饭，菜单一般都在徐峥手上，吃什么都是他说了算。从一代吃货到养生达人，看来徐峥在吃货的道路上又向前跨越了一大步。
藏在烟火味中的温暖
别看徐峥这么爱吃，但他的手机从来不装任何美食点评之类的APP，因为他的选择很精到，自己熟悉的馆子、朋友的口碑推荐，再加上一点点好吃之徒的直觉。
有一天徐峥突发奇想，既然自己这么爱吃，为什么不开一家喜欢的饭店呢？他喜欢吃日餐和西班牙餐，便决定开这样两家馆子。从选址到装修，还有给饭店起名字，徐峥都亲力亲为。上海的两家日本菜分别是龙海和奈良本，是他和朋友一起开的寿司店。前者在余姚路上，总共够招待10个人，正是他最喜欢的馆子的大小。年轻的寿司师傅用徐峥自己的话来说就是“很有素养”，手法细腻而有贵族气。后者则是从东京银座请来的师傅，“奈良本比较霸气，虽然是一款款的寿司，但会满足你的饕餮欲望，很合中国人的口味”。这两个馆子，就像商业性和文艺性结合得很好的片子。
开了这两家馆子，徐峥还不满意，又在杭州的黄龙饭店一层，开了一家料理店。光看料理店的中文名字“真炙炉匠料理”，很难想象这是一家怎样的日本料理，而看到它的英文名“salt and fire”就一目了然了，盐与火这样简单的调料和烹饪手法，会给客人带来一道不同寻常的盛宴。食材都是捕自北海道、长崎、九州或冲绳并取道上海运至杭州的超新鲜进口海鲜，所以要求客人提前预约，以保证食材的新鲜。每天下午2点左右，工作人员开始处理当日运抵的鱼生，为晚餐做准备。根据时节变化，食材也有变化，但始终坚持选用品质最上乘的食材，如果当天没有品质最好的，那宁可不上菜也不会退而求其次。这等精良的品质，征服了很多挑剔的食客。
炭烤金吉鱼、炭烤牛油果、鸡肉汉堡，是徐峥最喜欢的料理，也是他每次到店的必点。另一个原因，娱乐圈明星都知道，这家店的老板是著名演员、导演徐峥。直到孙俪在微博上@徐峥，夸他日料店里的员工餐都不同凡响，并开玩笑说要求去打工时，娱乐圈外的大众食客才知道，徐峥原来是这家日本料理的股东和老板。
饭店开得风生水起，徐峥又有想法了，什么时候拍部有关美食的电影该多好。他将这主意同朋友宁浩和黄渤一讲，两人都大赞。但听徐峥描述电影里的美食场面，绝对是件考验意志力的事儿。他的描述中有很多手势、拟声词，兴奋处眼睛冒光，啧啧连声，有时精彩过实际效果。“这两天看《纸牌屋》，政客主角跑到老黑人的店里去吃肋排，很小很破的餐馆，他说我是某某地方出身的，吃肋排可以让我回到过去――这一笔写得……太好了。一个政治戏，用这一笔给这人留了一个念想。”他从鼻子中笑出声来，“我们的电视剧里没有吃，就是扒拉饭，没有浸透到生活里头去，吃这件事儿里头，往大了说就是包含着对生命的感受啊。”
许巍时光范文2
所有我所知道关于消费者的一切，都是从“我自己”身上得来的。我就是骑着50cc Scooter的通勤OL；我就是一年消费不到两次的健身房会员；我就是无车阶级；我就是刷卡积点兑换赠品的妇女；我就是收听午夜爱乐广播的失眠者；我就是不知道送朋友什么生日礼物的人；我就是会在探听小道消息的职员……我就是个体经济。我就是总体经济。我就是Globalization。
大量生产的东西一定是规格化的。跨国广告公司训练出来的在地广告人也是如此。
我只想做一个自由独立思考的人，完全不想被什么广告思考训练所污染，但毕竟这是广告业—世界上最bitchy的行业之一，所以我不能说我不必对抗什么，但我宁可说它是一种抽象的战争。
创意就是现代文明，我们的民族基因还无法演化出高度进化的创意文化社会。
广告并不只是什么写copy、找明星……所谓“文化创意产业”的思维模式其实就是广告。
我不能期待社会变得有品位，客户变得很聪明，广告人变得很专业，我只期待我自己。
我的广告和别人的分别并不在于一般人所认为的，外显的美学形式，意义层次或风格表现，而是形成我广告观的整个知识系谱传统。因此广告的创作能力并不是从一般人以单纯技术区分去判断，而是一种更radical的能力，就像禅修内观那般，可以运用于无限可能的情境之中。
如果对整体广告生态所形成的传播语境没有自觉及观照，我不认为一个广告创意的生产者他如何自称他是专业的。
没有标准答案。视对象不同而有所调整。
身为一个创作人，唯一的希望是抛弃希望。
就像任何一种创作一样，理论是没有意义的，广告系的教授永远做不好广告，教你写作的老师不一定写得出好小说。
我始终对“广告人”这种身份有一种茫然的陌生感，“这是在说我吗？”
中国广告工业在某种程度上，反映了中国文化在全球场景中的边陲性，以及从此一困境推溯所见的文化贫困：没有资本，因此没有累积；没有养成，因而没有观念；没有核心，因为没有共识。
“广告”不只是一种狭义的、物理性的工具，也不只是形式的、美学的呈现。背后的“广告思维”所代表的创意资本才是重点。
我能继续做这个工作的原因很简单—那就是因为我总是不断在redefine或reinvent广告。
本环节通关秘籍：有效率地，做对的事
员工首先要坚定可以不加班的信念，而这一推动过程将是艰辛复杂的。如威营销传播集团用了将近4个月的时间，在公司内部规定早上9点半上班，让广告人建立起“早开工”的习惯。日本黛安芬公司前任社长吉越浩一郎则更是花了几年时间才完成公司“零加班”的转变。他认为，首先要让员工认定：加班是件不光彩的事情。“有时间思考优先级、制定工作表，不如把每件事情都规定出完成期限。时间一旦受限，效率自然提升。”
学习分析问题的本质 看似单纯的问题，实际可能是好几个小问题的集合体。问题分得越细，处理起来就越简单。
不要耗时间，争取两分钟内做出结论 职场中我们经常要参加极为冗长的会议，花好几个小时解决一项议题。但实际上，如果没有充分的信息作为储备，时间拉长也无济于事。吉越浩一郎的做法是决定每项议题由谁负责，要求他们备妥“附有审查意见的原案”。
所谓原案，是针对现状如何、有什么问题、应如何处理、要花多少时间与费用等，要求每项议题的负责人都要事先整理好解决对策，这样就能让所有参会人都分享到必要的信息，参与讨论时，也能更贴近问题本质。吉越浩一郎说，有时间做漂亮的数据，不如专心做好分内工作。
有效率地做对的事 台积电创始人张忠谋在从业50多年来，无论是担任基层工程师，还是总经理、董事长，工作时间一星期从不超过50小时。他称自己对工作的理念，就是有效率地做对的事。这包含了两部分：“效率”及“做对的事”。
在职场上由谁来决定什么是“对的事”？主管有70%以上的责任，员工自己则占30%的责任及权力。“权力”是指假如主管要员工做的事，员工认为不对，他有权适时反映。“责任”则是指员工认为该做的事，不必等主管建议，自己可以主动放手去做。
“效率”则刚好相反，个人要负起70%以上的责任。每个人都应该有效率地去做对的事。有的人会说，我工作缺乏效率是因为“主管要我整天开会。”张忠谋会回答：“假如你觉得开会对你没有帮助，应该跟主管反映。”每个人在工作上都应该展现自主管理的能力。
善用管理工具 员工也可以自己从公司角度找到一些时间管理、效率管理的工具，从内部提升工作效率、增加默契度，减少加班时长，帮大家实现工作生活的平衡。比如在爱德曼公司，可用的工具有如下几类：
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因何正名
儿童虚拟社区的概念由来已久，这个概念提出本身就是为了回避“网游”这一敏感词汇，只是某些企业假儿童虚拟社区之名，行网络游戏之实，导致儿童虚拟社区“名不正，言不顺”。 IT行业著名营销专家、赢道营销顾问机构总策划邓超明认为： “一款真正的儿童虚拟社区产品对孩子成长是有益的。因为相对于电视或者儿童玩具，儿童虚拟社区在增进儿童之间的交流、提高儿童智力、增强儿童对社会的适应能力方面都有显著的作用，因此有必要为儿童虚拟社区正名。”
然而从父母本身来讲，虚拟社区与网络游戏的差别并不是那么显而易见，因为在表现形式上，两者共同点很多，例如都是网络产品，都有角色扮演内容，都充满卡通形象，都含有游戏内容。这种相似性使得很多家长将“儿童虚拟社区”等同于“儿童网游”，对其加以抵制。 浙江博卡思教育软件有限公司三大创始人之一、杭州博采广告有限公司创意总监李炼告诉《广告主》记者： “儿童虚拟社区重点应放在‘社区’，而非‘游戏’上。盒子世界是一款真正意义上的儿童虚拟社区产品，广告诉求也集中在这一点。”
如何正名
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在贵州省遵义市金鼎山镇大山深处的一条蜿蜒山路上，每天都能看到一位骑着马的中年人日出上山日落下山，来回往返从不间断，他就是扇子林小学校长徐德光，当地群众都称他为“马背上的校长”。
扇子林小学地处大山深处，海拔在1500米以上。学校覆盖区域地广人稀、交通不便，最少时只有8个学生，最多时也只有30多个学生。1975年，刚高中毕业年仅17岁的徐德光便自告奋勇到扇子林小学任教，从此他的人生便与深山中的孩子们连在了一起。
由于到学校的路有七八公里长，学生们往返要5个多小时，山路灌木丛生，十分难行，为了方便孩子们上学，刚任教一年的徐德光用了整整一年的时间砍出了一条5公里长的羊肠小道，又用黄土、竹篾夯起3间土屋，孩子们才开始有了读书的地方。
不仅如此。为了方便运送学校的课本、教具，也为了保障孩子们上学路上的安全，徐老师卖了家里仅有的一头猪，又借钱买了一匹马作为交通工具，碰上雨天他便骑着马到学生家里接孩子上学。山路难行，每次接孩子的途中，徐老师都死死地拉住缰绳，生怕会摔着孩子。九年前，为了保护学生，他从马上摔下来，断了两根肋骨，家人心疼，便劝他放弃，他淡然一笑：“为了深山里的孩子们将来有出息，就算豁出这条命也值。”
多年来，随着山民逐渐往山下搬迁，学校规模不断缩小，山上的老师也陆续下了山，但徐德光坚持了下来，从来没有离开过扇子林小学，校长一当就是20年。他说，他留下来是为了让更多的孩子走出大山，看看外面的世界。37年来，他就一直这样，用自己的艰辛托起了大山的希望：从这里走出去的毕业生有200多人，其中4人考上了大学，20多人考上中专，100多人读完了高中。
作为一名乡村教师，他给学生悉心传授的不仅仅是知识，更教育着学生们做人与处世的原则与方式。学校里的另外一名代课教师陈道坤，已经在这里工作了20年，他正是徐老师第一届学生中的一个。在外面打工一定比现在800多元的工资高很多，而且现在也转不了正。但是陈道坤说自己不会走，因为他知道孩子们是多么需要负责的老师。他的另外一个学生陈仁贤捐助了一百万来为家乡修缮公路，他说徐老师永远是自己的人生的老师，他让自己知道了什么叫“我们”。
而对于徐德光这位年近五旬的“马背校长”，最让他开心的事情不是曾连续获评优秀教师，甚至被特邀参加建国60周年庆典现场观礼，也不是今年被评为“最美乡村教师”，而是这条刚刚修好的、可以连通教学点的水泥硬化公路。
热议锐评
寻找是为发现，发现是为践行。每一个最美乡村教师都是一个道德标杆，也是社会学习的榜样。在整个民族都陷入集体的道德焦虑、道德追问之时，个体以及群体的“最美”，所产生的示范效应，能唤醒真善美的人性，凝聚真善美的力量，提振全社会的“道德信心”。最美乡村教师们鲜活的形象，必将深入人心，引领社会向前；而他们生动感人的事迹，必将因为发现而转化为传递、传承、弘扬和践行的源动力。（堂吉伟德《中国文明网》）
话题拓展
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以前这种情况也许是天方夜谭，而现在，它将实实在在地发生在我们的现实生活中。
11月8日，大连高新区管委会、上海宇光科技发展有限公司就投资合作设立大连宇光虚拟网络技术股份有限公司，成立宇光全球计算机远程维护中心举行签字仪式。虚拟网络技术将从实验室走近我们的生活。
神奇的虚拟化技术
电脑不能上网了，怎么还能通过互联网对电脑进行远程修复？
宇光科技执行董事兼副总经理颜华解释道：“我们采用的虚拟网络技术，已经突破很多旧观念。就像孙悟空拔下身上的毫毛可以变出好几个和他一模一样的孙悟空一样，通过虚拟技术，我们可以在前端复制出好几台虚拟计算机，分别进行上网、办公、网银支付等应用。因为各个应用之间是隔绝的，所以这样本身就减少了病毒侵害的影响。即便病毒入侵系统，也只能损害这些‘毫毛’，真正的‘孙悟空’躲在操作系统的最底层，不可能受到病毒侵害。我们也非常容易对系统进行修复。”
显然，这项说起来简单的技术，需要开发人员对操作系统的内核有精深的研究。
据悉，宇光科技的董事长吉立人早年留学美国，1992年底就职于IBM公司位于美国佛罗里达州Boca Raton市的OS/2操作系统研发中心，并担任技术经理，曾带领虚拟技术研发团队于1994年成功研制出基于OS/2内核的Windows虚拟机。1997年，他大胆提出虚拟网络（VNS）理论。经过10年发展，宇光科技已经研发成功基于虚拟网络技术的计算机远程维护平台。至此，虚拟网络技术开始从实验室研发走入大规模应用阶段。
破解市场推广难题
用户只要通过互联网下载一个十几兆字节的客户端软件，就可以享受这种远程维护服务。整个软件安装过程只需要两分钟左右。这种崭新的电脑维护服务模式引起了业界广泛关注。吉立人表示，大连市政府以及大连高新区管委会的各级领导对这个项目都非常重视，在资金、场地、人员、服务等方面提供了一系列支持，并将此项目纳入“吸引海外学子尖端人才归国创业工程”，给予特别关注。
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关键词 光纤传感 硫化氢 微顺序注射-阀上实验室 荧光素汞 荧光猝灭
1 引 言
硫化氢（H2S）是一种具有臭鸡蛋气味的有毒气体，是空气和水源的污染物之一。近研究发现，H2S是继NO和CO之后又一种新型信号分子，作为一种活性神经调节物质广泛存在于动物体内，参与并调节动物体诸多的生理病理活动[1]。目前，H2S的测定方法大多局限于传统方法，如亚甲基蓝法[2]、硝酸银比色法[3]、气相色谱法[4]等。这些传统的方法检出限和灵敏度无法满足生物样品中极微量甚至痕量H2S测定要求。而荧光法的灵敏度更高，测定H2S数量级达到10 Symbolm@@ 6 mol/L。荧光素汞具有很强荧光，H2S中S2 Symbolm@@ 与荧光素汞结合，使荧光素汞荧光猝灭，H2S含量与荧光素汞的荧光强度具有良好的相关性。
微顺序注射-阀上实验室（MicroSIA Lab-on-valve，μSIA-LOV）是第三代流动注射分析技术[5]，在μSIA-LOV分析系统中，所有的单元操作，如样品稀释、试剂试样的加入、混合以及多种连用技术的结合，使得整个实验测定过程能够可控、高效地进行。该系统能将试剂及样品消耗降低至微升水平，减少了试剂的使用量，适用于长时间监测和试剂比较昂贵、样品来源受限的分析。LOV系统不仅可以与光纤传感结合，也可以灵活与电化学[6]、色谱[7]、化学发光[8]、固相萃取[9]、原子荧光[10]等方法联用。
本研究将光纤传感技术与微量顺序注射-阀上实验室（μSIA-LOV）结合，以光纤作为传导介质，将光纤光谱仪、微顺序注射分析仪八通阀和氙灯光源连接，用计算机控制，利用该系统自动介观流控特征与光纤传感的实时监测相连，可以实现样品的在线监测。本研究以Na2S为供体，建立光纤传感-微量顺序注射-阀上实验室检测肠灌流液中H2S的分析方法，为进一步进行动物在体肠灌流H2S或H2S供体药物的肠吸收特性研究奠定分析基础。
2 实验部分
2.1 实验装置
微量顺序注射仪（美国FIAlab Instruments公司）;光纤光谱仪（QE65000-FL，CCD）、连续氙灯光源（HPX-2000）、200 μm×1 m光纤两根均为美国Ocean optics公司产品。PB-10型pH计（德国Sartorius公司）;实验流路所用连接管道采用PTFE管（0.75 mm，I.D.）。分别采用安装有FIAlab for Windows和SpectraSuite 软件的Windows XP系统台式电脑对微量顺序注射分析仪和光纤光谱仪进行控制。光纤传感-微顺序注射-阀上实验室仪器装置：包含一个1000 μL高精密度注射泵、一个棕色滤光8通道的多位阀模块（LOV），在该模块上集成了一个中心控制通道、多个工作通道及一个多功能流通池等操作单元;通过软件调节控制中心通道一端与8位阀上联通位置，使中心通道与工作通道准确连接，另一端与高精度注射泵相连而构成流动分析系统。一根光纤与光谱仪相连，另一根光纤与氙灯光源相连，两根光纤探头插入LOV流通池接口，光路垂直组成荧光测定模式。
2.2 试剂及溶液配制
荧光素汞（优级纯， 美国化学服务公司）;Na2S・9H2O（分析纯， 天津市福晨化学试剂厂）;其余试剂均为分析纯。实验用水为二次蒸馏水。
准确称取0.0159 g荧光素汞，用0.1 mol/L NaOH定容到100 mL棕色容量瓶中，浓度为1.874×10 Symbolm@@ 4 mol/L，冷藏备用，使用时稀释到所需浓度。准确称取0.240 g Na2S・9H2O，用水溶解并定容到100 mL，浓度为0.01 mol/L， 4 ℃密封保存备用，使用时用水稀释到所需浓度。
Kreb-Ringer′s（KR）营养液：准确称取NaCl 7.8 g，KCl 0.35 g，CaCl2 0.37 g，NaHCO3 1.37 g，NaH2PO4 0.32 g，MgCl2 0.02 g，葡萄糖1.4 g于1000 mL容量瓶中，用水定容，4 ℃保存备用。
系列浓度H2S肠灌流液的配制：将0.01 mol/L Na2S溶液用KR营养液稀释10倍（1.0 mmol/L），再分别取稀释液0， 0.05， 0.1， 0.15， 0.2和0.25 mL于5 mL容量瓶中，用KR营养液定容。
供试品溶液：由KR营养液配制的Na2S溶液（5.0×10 Symbolm@@ 5 mol/L），健康大鼠麻醉后，将KR营养液由活体空肠灌流（蠕动泵流速0.2 mL/min） 30 min，接取供试品溶液于5 mL EP管中，封口4 ℃保存，待测。
2.3 操作流程
实验流路如图1所示，在注射泵的驱动下，首先由多位阀的6号口吸入适量载液（0.1 mol/L NaOH），7号口以50 μL/s的速度先后从中心通道吸入50 μL荧光素汞溶液，再以50 μL/s由5号口吸入适量样品溶液，
再通过6号口以50 μL/s吸入100 μL载液。在注射泵的驱动下，被吸入储液线圈中的载液推动试剂和样品迅速混合，形成混合区带，并充分反应，然后再反向以25 μL/s的流速将混合区带从连接有光纤的多功能流通池（Flow cell）流出，通过光纤光谱仪读取反应后溶液的荧光强度。每次测定结束后，用水以300 μL/s流速冲洗整个流路。所有实验操作均由FIAlab软件自动完成，上述程序操作分6步，见表1。
3 结果与讨论
3.1 荧光素汞荧光光谱
由通道5吸入200 μL荧光素汞（1.0×10 Symbolm@@ 5 mol/L），得到光谱图（图2），结果表明，荧光素汞最大发射波长位于521 nm。
3.2 荧光素汞浓度的选择及体积
考察荧光素汞浓度（1.0×10 Symbolm@@ 4 mol/L ， 1.0×10 Symbolm@@ 5 mol/L， 5.0×10 Symbolm@@ 5 mol/L， 1.0×10 Symbolm@@ 6 mol/L）的影响，由于LOV为封闭的管道系统，管径很小，荧光素汞浓度过大， 会粘附在管道内，清洗使用试剂多、时间长，影响测定效率;荧光素汞浓度过低， 会影响测定灵敏度，故本实验选择荧光素汞的浓度为5.0×10 Symbolm@@ 5 mol/L。 溶液体积越大，混合程度越低，为了确保充分混合、反应完全，本实验选择荧光素汞溶液体积为50 μL。
3.3 载流NaOH溶液浓度及体积
根据文献 [11]，荧光素汞在碱性条件下荧光较强增加实验的灵敏度，本研究考察不同浓度的NaOH溶液（0.01， 0.05， 0.1， 0.2和0.5 mol/L）以及水作为载液对荧光素汞（1.0×10 Symbolm@@ 5 mol/L）与1.0×10 Symbolm@@ 5 mol/L Na2S荧光强度的影响（图3），综合考虑，本实验选择0.1 mol/L NaOH作为载液。NaOH溶液为整个体系提供碱性环境，冲洗管路并推动反应后，溶液全部流过流通池，本实验采用100 μL的0.1 mol/L NaOH作为载液，即达到上述目的。
3.4 流通池检测流速
0.1 mol/L NaOH溶液中荧光素汞与1.0×10 Symbolm@@ 5mol/L Na2S反应后，考察通过流通池流速分别为10， 15， 20， 25， 30， 35和40 μL/s时的信号强度。结果表明，流速过慢，会加大对供试品的稀释效应;流速过快，信号稳定，重现性降低。在流速为25 μL/s时，检测信号最强且稳定（图4）。
3.5 干扰物质测定
据文献[12]报道，含巯基氨基酸可能是内源性H2S的供体，故本实验在最佳实验条件下，以5%的最大允许误差进行干扰测定，考察了L-半胱氨酸、蒜氨酸、高半胱氨酸、胱氨酸、蛋氨酸及大蒜辣素对H2S测定造成的干扰，结果如表2所示。
3.6 性能分析
荧光素汞浓度为5.0×10 Symbolm@@ 5mol/L， 0.1 mol/L NaOH溶液为载液，检测流速为25 μL/s，检测波长为521 nm，供试品进样量50 μL，测定系列浓度硫化氢肠灌流液，获得在521 nm处的荧光强度，将荧光强度与浓度进行线性回归，在5.0×10 Symbolm@@ 6～8.0×10 Symbolm@@ 5 mol/L范围内，线性方程为y= Symbolm@@ 262.13x+26182（图5），相关系数r=0.997。
4 结 论
本实验将微量顺序注射-阀上实验室（μSIA-LOV）系统与光纤传感技术结合，建立了荧光素汞二元体系荧光猝灭法测定生物样品中H2S含量的方法。H2S作为一种信号分子，本身是内源性物质，参与和调节动物体多种生理及病理活动，目前对H2S的测定方法大多采用需取样分析，需要经过多步样品前处理。本实验则是在LOV模块上以荧光测定模式进行样品测定，简化了操作步骤，每一步操作采用程序化控制，提高了实验可重复性和规范性;整个系统微升级的进样量大大降低了试剂和样品的消耗，显著提高分析速度。本方法与光纤传感相连可实现生物体内H2S的在线监测。
References
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Fluorescein Mercury Combined with Optical Sensing Micro
Sequential Injection Lab-on-Valve for Determination of
H2S in Intestinal Perfusate
HOU Jun-Feng1， GUAN-Ming1， LI Xin-Xia*2
1（Laboratory on Pollution Monitoring and Control， College of Chemistry and Chemical Engineering，
Xinjiang Normal University， Urumqi 830054， China）
2（College of Pharmacy， Xinjiang Medical University， Urumqi 830000， China）
Abstract A fluorescence quenching method was established for the determination of H2S in intestinal perfusate by optical fiber sensing technology combined with micro sequential injection lab-on-valve （μSIA-lov）. In the experiment， 100 μL of 0.1 mol/L NaOH was used as the carrier， and 50 μL of 5.0×10 Symbolm@@ 5 mol/L fluorescein mercury and 50 μL of sample were selected for the determination. The detection flow rate at the flowcell was 25 μL/s. According to H2S quenching fluorescence at 521 nm， the concentration of H2S in the sample was determined. The detected concentration range of H2S was 5.0×10 Symbolm@@ 6-8.0×10 Symbolm@@ 5 mol/L， and the detection limit was 5.4×10 Symbolm@@ 7 mol/L. Detection result of H2S in intestinal perfusion was 3.8×10 Symbolm@@ 5 mol/L with 3.1% RSD （n=3）. This method can be used for the determination of H2S effectively in the samples， which lay the foundation for real-time online measurement of H2S in biological samples.
Keywords Fiber sensing; Hydrogen sulfide; Micro sequential injection lab-on-valve; Fluorescein mercury; Fluorescence quenching