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永远的焦裕禄范文1
【关键词】探讨 鲁教版 地理 教学资源
【中图分类号】g633.55 【文献标识码】a 【文章编号】2095-3089（2014）03-0176-01
鲁教版高中地理教材，是当今社会热点与时代主题完美结合的产物，与社会生活的生产与实践有着密切的联系，坚持区域内部与区域之间的可持续发展，对人地关系的协调有着重要的作用。按照学习的时间顺序将地理知识进行合理划分，先进行自然地理的学习，然后在学生对自然有一定了解的基础上，研究人文地理，倡导人与自然的和谐发展。这种教学思路是科学合理的，并经得起实践的考验。鲁教版教材为地理课堂的理论基础，在此基础上，必须对教学资源进行合理开发，科学利用，下文将对此进行重点探讨。
一、地理教学资源定义
研究鲁教版教材下的地理教学资源，第一步就是要对教学资源的定义进行了解。与其他教学资源相近，地理教学资源在分类上，主要包括：图片教学、文字教学、课件教学、视频教学以及师生间的互动教学，随着经济与科技的不断发展，媒体教学现在也越来越流行了，在媒体教学中地理教师将相关知识运用媒体的手段让学生们接受，地理教学资源从媒体的表现形式上，主要表现为：文字教材、语音教材和视频教材。文字教材又可以叫做文字表达的教材，也就是学生必备的地理书，是一种我们的生活中使用最为广泛、成本相对比较低、方便学生携带，方便我们使用的原始教材。语音教材，包括广播、听力、录音、mp3、mp4等等。还有与之相应的视频教材，例如：现今课堂教学中常用的地理课件等，学生可以在地理书本知识学习的基础上，有相应的图片、视频加以理解，也可以理解为更好的帮助学生们接受地理知识，形成地理思维意识，地理视频教材也有：动画视频和非动画视频之分，综合应用多种媒体的表现优势并且有着非常大的交流与互动的特点。
二、合理开发利用高中地理教学资源
从鲁教版教材的特点来看，研究教的方法，应该从学生学的方法来。学生的学习要先从书本上得到一些知识，所以教师应该在教学生看书的方法上下一些工功夫，因为，不是每个学生都知道适合自己的方法的，所以教师应该挖掘学生的潜力让学生们在做短的时间得到最大的学习效率。
（一）教学模型的引导
一些学生领悟能力较强.针对这种情况，我们可以利用比较抽象的定义、理论使其深入理解知识点。学生的接受能力不同，对此应有不同的教学，比如应用教学模型——地球仪，这样在讲地球自转经纬度、时区划分等知识点时，便有助于学生更好的直观理解、领悟。融合相应教学方法，让学生的大脑随着教师讲解时地球仪的转动，也不断转动思考，不会出现教与学脱节的现象，更可以为后续讲解内容做好铺垫。如利用地球仪讲解地形图时，便可根据地球仪颜色分布，让学生了解一些简单的地质构造，板块运动等，为其以后学习打下坚实基础。类似的方法便于使一部分领悟能力较强的同学理解层次更深的知识点，理解其中原因，并不简单记住现象。
但是这种教学也存在一定弊端，不能够保证全部学生都理解、接受，从而对相关知识形成完整知识体系，为了更好处理这一问题，可以编排一些简单的教学口诀，用最简单、有效的教学方法，使学生更好的掌握地理知识。
（二）多媒体课件的辅助
新时期计算机网络技术的不断发展，多媒体课件辅助教学成为一种新型的教学资源与教学模式，地理教师在课前精心制作的辅助教学软件，能够很好的解决书本知识枯燥、死板等弊端，使地理课变得动感、直观、形象、生动。在鲁教版教材应用的过程中，更加要注重对多媒体课件的设计与应用，与其他教材相比，鲁教版教材对知识点讲解的更加深入，要求与实践结合的更加紧密，从而对学生的学习和接受能力提出了很高的要求。这样一来，需要更直观的教学资源与形式来打开
一瓶颈。多媒体教学资源应运而生，巧妙的将这一问题成功化解。教师在地理课堂应用课前准备好的视频、图片，以及音乐资源，大大的提高了学生学习地理的趣味性，也达到了地理教学的有效性。例如：在“学习地理环境整体性”课程中，教师可以有针对性点的对在网络、文献上搜索一些关于拉尼娜现象、厄尔尼诺现象的视频、图片资料，并且将同样的任务布置给学生，这样更能够提高学生的动手实践能力，这也是鲁教版教材着重培养学生的一个方面。经过师生课前的精心准备，学生对该现象的成因、影响会形成一定得印象，更有助于对教材知识点的理解。然后在课堂中，将课堂相关的教学资源进行集中展示，使学生形成完整、系统的认识和理解。
（三）合理利用图表
无论传统还是现代的地理教学中，图表的作用都是不言而喻的，有助于学生更直观、更有层次的接纳地理知识，在笔者对鲁教版教材多年的运用于教学中发现，图表与鲁教版中的知识点能够起到相辅相成的效果。课堂中，教师在解答的时候，要围绕着“图”（地图，插图，图表等）来，因为地图把形象和抽象的概念结合了起来，是地理学习关键方法。学生看老师能从地图中知道这么多，他们自己也就渐渐会用图了。会用图，会分析图，会记忆图。地理也就学到了大半。例如：在海洋地理知识的讲解中，可以引用“海底地形图”，解析海底主要的地貌形态及特征，并归纳出海底地形的分布状态与规律。
高中地理的教学资源的开发与利用，在教育改革之后地理教育者很大的挑战，不但要求教师教授知识，更需要学生们在课堂上的配合，课堂上教师与学生之间的交流是非常重要的，教师最主要的教学方法就是让学生们对地理产生兴趣，从而运用媒体教学、书面教学等有效教学方式，进行有效的创新与尝试，努力探索学生地理学习的新方法、新手段。
参考文献：
[1]刘欣.高校校园文化育人功能达成探究[j].广东水利电力职业技术学院学报，2011，9（4）：78-80.
永远的焦裕禄范文2
关键词：生药学； 胶原蛋白；创伤愈合；羟脯氨酸
中图分类号： S865.42 文献标识码： A DOI编号： 10.14025/ki.jlny.2017.13.017
鹿茸具有广泛的药理作用，但是深加工研究滞后，对其提取物有效活性成分的研究甚少。胶原蛋白由于结构独特，理化性质及生物特性非常突出，在医疗上的应用具体表现在胶原蛋白具有低免疫源性、组织之间的协调作用强、物理机械性能好，可生物降解度高，具体体现在止血、治疗烧伤和骨折等方面手术的应用。
目前，以鹿茸为主料，分离提取出对医学，对机体具有调节作用的胶原蛋白活性物质成分，研究其对皮肤创伤愈合作用的研究未见报道。通过本研究为后续开发鹿茸胶原蛋白相应的药品（如喷剂）奠定理论基础，以达到科学利用现有的鹿茸资源，增加鹿茸产品附加值的目的，从而促进我国鹿业养殖实现可持续性发展。
1 材料与方法
1.1主要仪器设备
紫外可见分光光度计、高速离心机、真空冷冻干燥机。
1. 2实验材料
新鲜鹿茸，清洁级胰蛋白酶，清洁级小白鼠50只，羟脯氨酸标准品等。
1.3方法
1.3.1提取 在4℃条件下，利用盐酸使梅花鹿茸灰分中的不溶物变成可溶性盐类，选择氯化钠溶液作为除杂蛋白的主要试剂，达到将其脱除的目的[1]。采用徐云凤的胰蛋白酶水解制备鹿茸胶原蛋白的方法，取新鲜的鹿茸50克，加入150毫升乳酸盐的缓冲液，用组织绞碎机绞碎，加入胰蛋白酶0.5克，加入激活┞然锰0.05克，pH值调为8.0，将溶液的温度调至52℃，放入反应罐3小时，离心去残渣，收集透明澄清的液体，在10℃条件下进行酶解提取[2]。
1.3.2纯化 在中性条件下盐析全部胶原蛋白，方法如下：向梅花鹿茸胶原蛋白酶解液中缓慢加入，并搅拌经过研磨的氯化钠，充分搅拌，静止10～24小时，以便胶原蛋白充分析出，再以8000转的速度离心，收集沉淀物后用0.5mol/L乙酸进行溶解，并对0.5mol/L乙酸进行透析，以便除去沉淀中的多余盐分，最后将样品进行真空冻干[3]。
1.3.3动物造模分组及给药 购买清洁级小白鼠50只，分别用乙醚进行浅麻醉。局部备皮，常规消毒，将小鼠皮部取直径为1厘米的圆形切口，切开皮肤全层， 至深筋膜， 制作出直径相同的圆形创面， 然后以无菌纱布覆盖， 造模完成。把小鼠随机分成五组，根据人和小鼠的体重与表面积比计算得出小鼠给药量=小鼠体表面积×小鼠体重/人的体表面积×人的体重×人体用量。设高、中、低3个实验组，1个空白对照组，1个阳性对照组，将实验组创面分别使用0.05mol/L，0.25mol/L，
0.5mol/L的梅花鹿茸胶原蛋白，每日两次，空白组不进行药物治疗，阳性对照组用京万红以相同药量做阳性对照。以无菌纱布覆盖，防止感染，连续给药观察。
1.3.4羟脯氨酸含量检测 胶原蛋白是构成结缔组织中胶原纤维的主要成分，含羟脯氨酸的量最多，是愈合组织中最重要的成分，在一定时间内，创伤愈合部位组织中的胶原蛋白的含量会反映伤口的愈合程度[4]。羟脯氨酸是胶原蛋白中的特征性氨基酸，因此测定动物组织中羟脯氨酸的含量即可定量观察创伤组织的愈合程度。取创面皮肤经脱水及脱脂处理后水解，根据羟脯氨酸的测定原理，使用氯化亚锡对梅花鹿茸胶原蛋白样品进行水解使其释放羟脯氨酸，加入氯氨T、二甲氨基苯甲醛，于558纳米波长处比色，比较羟脯氨酸含量。若实验组羟脯氨酸含量高于空白对照组，则说明创面胶原蛋白水平提高，即创面伤口愈合情况较好[5]。
1.3.5创面愈合情况评价 描记创面愈合面积，以创面完全上皮化（病理证实）作为判断依据，记录创面愈合时间。每天观察伤口愈合情况，并将创面描记在半透明的纸上，再以半透明纸作为模板，将质地均匀的硬纸片剪成图样大小，以硬纸片重量间接表示创面及愈合部分面积大小，将数据统计起来，并以下式计算：创面愈合率（%）=（开始创伤面积-未愈合创面面积）/开始创伤面积[6]。再以实验组和对照组的创面愈合率进行对比，来确定鹿茸胶原蛋白是否起到愈合伤口的作用[7]。
2 实验结果
2.1 组织学观察
5个分组创伤涂药后均有不同程度的创面肿胀、渗出现象。伤口用药组涂药后创面出现肿胀、渗出程度较对照组轻。5个分组创伤2天后创面均有不同程度的干燥、结痂现象，其痂皮呈淡黄色，质地较软，无异常分泌物出现及感染情况出现。
2.2 小鼠创面愈合率（见表1）
2.3羟脯氨酸标准样品浓度与吸光度的测定结果（见表2）
2.4以羟脯氨酸浓度为横坐标，吸光度为纵坐标绘制标准曲线（见图1）
计算其回归方程为：y=0.076x+0.0035，r=0.9995（P
2.5小鼠组织中羟脯氨酸含量的测定（见表3）
由表3可知，小鼠创伤处组织中羟脯氨酸的含量逐渐递增，由于羟脯氨酸浓度和胶原蛋白浓度成正相关，羟脯氨酸浓度的变化即可反映小鼠组织中胶原蛋白的变化，由此可知，鹿茸胶原蛋白对伤口愈合的对比情况。
3 讨论与分析
经实验初步证明，鹿茸胶原蛋白对伤口创伤愈合有促进作用，不同浓度胶原蛋白对伤口的愈合率不同，高浓度的愈合率大于不用药的伤口愈合率，且伤口的愈合程度与鹿茸胶原蛋白的浓度有关。
参考文献
[1]叶易春，但卫华.酶法提取牛键胶原的研究[J].中国皮革，2005，34（07）：4-7.
[2]周文常，但卫华，廖隆理，等.猪皮胶原蛋白的提取及其结构表征[J].中国皮革， 2004， 33（13）： 36-38.
[3]王燕，付万冬，郑斌.酶法提取鱿鱼皮胶原蛋白[J].食品科技，2011，（06）.
[4]付小兵，孙同柱.几种用于创作修复研究的动物模型.中华实验外科杂志，1999，16（05）： 479-480.
[5]陈玉华，廖仕成，李瑞园，等.乳及乳制品中羟脯氨酸测定方法的研究[J].职业与健康，2010，2（03）：283-285.
[6]彭方毅，周欢，姜海蓉，袁兵占，崔玉花.一种新型优化的肺组织羟脯氨酸水平测定方法的建立[J].重庆医学，2014，（11）.
[7]杨晶，孙凤，丁武.波尔山羊杂交代肌肉中羟脯氨酸含量的测定及其与肌肉品质的关系[J].农产品加工（学刊），2012，（01）.
永远的焦裕禄范文3
1 研究对象与方法
1.1 研究对象
西安体育学院体育教育系2011级学生40人。其中男20、女20人。
1.2 研究方法
1.2.1 文献资料法
查阅了有关分层次教学在教学过程中的文献资料、书籍等，为本文提供理论依据。
1.2.2 问卷调查法
设计调查问卷；学生问卷发放40份，收回40份，回收率100%。
1.2.3 教学实验法
实验运用对比法，选择部分西安体育学院体育教育系2011级学生作为研究对象，并将学生随机分成实验班和对照班，实验班运用分层教学，对照班采用常规教学。
1.2.4 数理统计法
对实验结果采用统计学方法处理
2 分层次教学模式
2.1 分层次教学模式的基本内涵
2.2 分层次教学的课堂优越性
2.2.1 分层教学在培养学生兴趣方面
通过“分层次教学”的教学模式的实施，不仅能促进学生体质，传授武术方面的技术知识，掌握基本的运动技能，而且在培养学生基本的运动能力和兴趣等方面使学生不仅能养成锻炼的习惯，走向健康的生活方式。
2.2.2 分层教学与传统教学的比较
3 武术教学中分层次教学的具体实施
3.1 学生分层
在授课时对学生进行身体素质、专项技术等方面的测试通过专项技能测试，根据他们在练习时表现出的技能水平进行分层次教学，将能够熟练掌握专项技术，自觉性较强，学习兴趣较高，积极参与，自觉锻炼，综合素质较好的分别分为好、中、差。
Table 1. Comparison table test results before the experiment
表1 实验前测试结果对比表
指标人数力量素质耐力素质柔韧素质灵敏素质（n）（次/30s）（s）（cm）（次/min）
实验组2028.5±5.34：35 ±4：450.2±0.5157.2±20.9对照组2028.6±4.44：36 ± 4：400.2 ±0.4155.3±22.2
由表1可以看出在分班前实验组和对照组初始阶段测试成绩没有显著性差异。
3.2 教学目标分层
根据教学大纲的要求所有学生都应完成教学任务，即达到技术动作的技评标准，不同层次的水平，制定不同层次的标准。将技能水平较好，学习兴趣高，综合素质较好的在独立正确完成动作的基础上提出要求，随时对技术动作提出新要求，逐渐提高运动能力。
对中等生，在要求基本完成动作的基础上，对技术要领有进一步的提高在教学过程中，动作有进步时多给予鼓励，动作完成不好时耐心指导。
3.3 教学评价分层次
为了反映不同层次学生的学习效果，提高全体学生的学习兴趣，增加学习的信心，考试应分层次，对优等生可加大难度，对中等生、后进生可适当降低评分标准，如：考核成绩90分为满分，对优等生100分为满分。这样对水平较高的同学加大难度，对水平较低的同学降低难度，这样能使不同层次的学生都能积极练习，从而达到更好的学习效果。
4 结果与分析
4.1 分层次教学法最大限度的调动学生的潜在能力，在教学过程中为调动学生的积极性，我们规定每周对学生进行一次素质测试，C层次的学生可以升入A，B层，为学生们营造一个竞争的环境，从而提高他们锻炼的积极性。第二，层次教学法重视了适宜性和针对性，由于在教学中因人而宜，对学生的学习目标、教学方法进行区别对待，练习中不仅对不同层次的学生提出不同的要求外，从指导的对象应细化到个体，比如C层次的学生对体育锻炼的认识不足，运动兴趣、身体素质较差，在上课时多进行一些动作简单、趣味性较强的组合练习。有的是心理素质不好的同学，应对他们多鼓励，增强她们的自信心。使每个学生得到最优化的发展。
Table 2. After the experiment the test results comparison table
表2 实验后测试结果对比表
指标人数力量素质耐力素质柔韧素质灵敏素质（n）（次/30s）（s）（cm）（次/min）
实验组2035.4±5.34：15±4：250.1±0.2170.8±21.6对照组2030.8±4.44：30±4：400.2±0.5161.4±18.8
Table 3. Experimental results comparing the two groups
after examinationtable
表3 实验后两组考核成绩对比表
组别人数优秀良好中等及格不及格
实验组2046831百分比20%30%40%15%5%对照组2013565百分比5%15%25%30%25%
由表3可以看出采用分层次教学后实验组的考核成绩明显高于对照组。
4.2 为了解学生对分层次教学模式的看法以及教师在教学中所安排的练习内容是否适合学生的实际水平。我们对实验组和对照组共40名学生进行了对采用分层次教学是否满意的问卷调查。比较喜欢的为10个，喜欢的为30个。
5 结论
5.1分层教学不仅对学生兴趣、积极性、运动技能水平等方面都有积极作用。
5.2 通过分层教学对学生实施因材施教、分层指导、分层教学。对不同类型的学生提出不同层次的要求，运用不同的练习方法，更有效的提高学生的自信心、自尊心。
永远的焦裕禄范文4
关键词： 启发式教学 学习能力 《半导体集体电路原理与实践》课程教学
《半导体集成电路原理与实践》是微电子技术专业的一门重要的专业课程，与前后课程联系紧密。学好这门课程对于学生掌握专业知识来说非常重要。
从学生的情况来说，有些学生的专业基础比较薄弱，特别是理科方面的基础。对于基础的数学计算和电路分析方法有一定的了解，却不能熟练掌握应用。
从课程来说，这门课程本身有一定的难度，理论性比较强，包含了很多分析。这就使得学生在理解和掌握上往往存在困难。传统教学方法是教师单向地讲授，这种单向的讲授只是枯燥地向学生灌输，重点在于老师而不是学生，缺乏让学生自己思考研究的过程，最终获得的学习效果肯定不是很理想。
因此在目前的授课过程中，普遍采用启发式的教学方法，这种教学方法更注重教与学的双向沟通，重点在于学生。在教学中，通过老师开其意，实现学生达其辞的目的，重视学生受启而发的过程。教学中，通过启发让学生展开研讨，使学生在教学的过程中能更多地发表自己的观点，更多地提出疑问。让学生能够主动思考，反复思考，加深理解。
课程中每个单元的教学过程都可以分为以下几个步骤。
（1）明确教学目的。
（2）教师讲授（启）。
（3）学生讨论，并自己完成相应的练习。（发）
（4）总结练习过程中存在的问题，并让学生再次通过讨论完成更深入的练习。（加深）
（5）最终由学生自己得出相应的结论，总结出适合自己的分析方法。
如在讲授COMS逻辑门电路这个单元的时候，首先明确这个单元的学习目标：掌握CMOS逻辑门电路的一般电路结构和设计分析方法。然后教师先讲授关于CMOS逻辑门电路的一些理论知识。如复习已经学过的关于CMOS互补对的知识，并根据CMOS互补对的特点提出CMOS逻辑门设计的一般方法。
图1 MOS逻辑规则
*对每个输入使用一个NMOS/PMOS互补对
*将输出节点通过PMOS与电源VDD相连
*将输出节点通过NMOS与地（0V）相连
*确保输出总是一个正确定义的高电平或低电平
根据这个方法，给学生演示常用的二输入与非门电路基本结构是如何得到的，并根据电路中器件的工作状态分析电路的功能与器件间连接方式之间的关系，进行验证。
图2 CMOS与非门
针对CMOS与非门电路，除了讨论其电路工作原理外，另外还在简单地讨论其开关特性。结合已经学过的CMOS反相器，引导学生发现为了保证良好的开关特性，二输入与非门中NMOS的尺寸应该对应CMOS反相器中NMOS尺寸的两倍。并进一步得到结论：为保证开关特性，多个晶体管串联时，晶体管的尺寸变大，芯片占用面积增加，因此电路设计中应尽量避免多个晶体管串联，特别是多个PMOS管串联。
教师对二输入与非门电路进行设计，分析过程的演示，让学生自己设计分析一些其他的CMOS逻辑门。
图3 CMOS或非门
这个可让学生自己画图得到，可以叫一个同学在黑板上演示，并让大家一起分析得到的电路有没有错误。并根据巡查的结果，由教师总结存在的问题。
永远的焦裕禄范文5
[摘要]目的:研究Ⅳ型胶原酶心包经上预处理对小鼠“内关”穴注射胰岛素后降糖作用及GLUT4表达、分布的影响。
方法:小鼠“内关”穴上方5mm心包经上注射Ⅳ型胶原酶,30min后,“内关”穴注射胰岛素,间隔5min后测血糖,取骨骼肌用Northernblot方法观察GLUT4mRNA表达,免疫组化法研究GLUT4分布,并与心包经旁预处理组、蒸馏水心包经上预处理组相比较。
结果:Ⅳ型胶原酶心包经上预处理几乎完全阻断“内关”穴注射胰岛素的降糖效应,其对骨骼肌GLUT4mRNA表达无影响,但可使GLUT4从胞内储存部位向细胞膜转运减少。
结论:Ⅳ型胶原蛋白参与了从胰岛素穴位注射到GLUT4再分布进而产生快速降糖作用之间的信息传递。
[主题词]梭菌胶原酶/投药和剂量;心胞经;穴,内关;血糖;胰岛素/投药和剂量
EffectsofPretreatmentofCollagenaseⅣinPericardiumChannelon
DecreaseofPlasmaGlucoseLevelandExpressionandDistributi
onofGLUT4afterInjectionofInsulininto“Neiguan”
PointQianDongsheng,ZhuYifang,LuoLin,etal(Departmentof
Pharmacology,NantongMedicalCollege,Jiangsu226001)
[Abstract]PurposeToobservetheeffectofpret
reamentofcollagenaseⅣinthePericardiumChannelondecreaseofplasmaglucosel
evel,expressionofGLUT4mRNAanddistributionofGLUT4a
fterinjectionofinsulininto“Neiguan”
(PC6).MethodsCollagenaseⅣwasinjectedintothePericar
diumChannel5mmabove“Neiguan”(PC6)inthemouse,andinsulinwasinjectedinto
“Neiguan”(PC6)30minuteslater.After5minutes,plasmaglucoselevelwasdete
rmined.Meanwhile,expressionofGLUT4mRN
AanddistributionofGLUT4inskeletalmuscleswereinvesti
gatedwithNorthernblotanalysisandimmunohistochemicalmethod.ResultsP
retreatmentofcollagenaseⅣinthePericardium
Channelalmostentirelyblockedtheeffectofreductiono
fplasmaglucoselevelduetoins
ulininjectioninto“Neiguan”point.Althoughitdidnotaffect
theexpressionofGLUT4mRNA,theGLUT4incytoplasmicmembranewasdecr
easedmarkedly.ConclusionCo
llagenⅣmayparticipateinthemessagetransmissionfrominsulini
njectiontotherapiddecreaseofplasmaglucoselevel
causedbyredistributionofGLUT4.
[Keywords]ClostrdiumHistolyticumCollagenase/admin;
PericardiumMeridian;PointPC6(Neiguan);BloodGlucose;Insulin/admin
国家自然科学基金资助项目(39770896)经穴现象是客观存在的,但是其实质尚不清楚。胶原蛋白为细胞外间质的主要组成成分,不仅参与细胞运动、增殖和分化等细胞行为,而且介导细胞与细胞,细胞与生物分子间的作用[1]。胶原蛋白是否参与药物穴位注射后的信息传递尚未见文献报道。本课题组初步研究表明,“内关”穴注射药物后的药效变化与胶原蛋白特别是Ⅳ型胶原有关[2]。本研究拟在心包经上用Ⅳ型胶原酶预处理,观察其对“内关”穴注射胰岛素后降糖作用以及葡萄糖转运体蛋白4(glucosetransporter4,GLUT4)表达和分布的影响,以进一步证明胶原在经络信息传递过程中的作用。
1材料与方法
1.1材料
1.1.1动物ICR小鼠,20±2g,雌雄各半,由南通医学院实验动物中心提供,合格证:苏动(质)98025,苏动(环)98062。
1.1.2试剂Ⅳ型胶原酶(Sigma公司);胰岛素(徐州万邦生物化学制药厂,批号:990524);限制性核酸内切酶购自华美生物工程公司;Trizol试剂为Gibco公司产品;HybondN+尼龙膜为Amersham公司产品,随机引物标记试剂盒购自Promega公司;[α32P]dCTP购自北京亚辉公司;含葡萄糖转运体4(GLUT4)cDNA质粒,由南通医学院分子生物学研究室郑震林博士惠赠;含3磷酸甘油醛脱氢酶(GAPDH)cDNA质粒,由南通医学院生物化学教研室刘飞博士惠赠;山羊抗GLUT4多克隆抗体和HRP标记驴抗山羊二抗购自SantaCruz公司;ABC试剂盒购自武汉博士德公司,其余试剂均为国产分析纯。
2方法
2.1分组及测定血糖取禁食12小时的ICR小鼠,用OneTouchⅡ型血糖测定仪(强生中国公司产品)测定空腹血糖水平,然后随机分为3组,每组10只,雌雄各半。①Ⅳ型胶原酶经上预处理组(A组):“内关”穴上方5mm,心包经上注射Ⅳ型胶原酶0.1mg(0.02ml);②Ⅳ型胶原酶经旁预处理组(B组):“内关”穴上方5mm,心包经旁开2mm处注射Ⅳ型胶原酶0.1mg(0.02ml);③对照组(C组):“内关”穴上方5mm,心包经上注射蒸馏水0.02ml。各组动物均在预处理30min后“内关”穴注射胰岛素0.05ml(2U),5min后,测定血糖,观察各组血糖下降百分率。
2.2RNA提取及Northernblot分析上述动物测血糖后立即处死,迅速取大腿肌肉组织,用Trizol试剂提取总RNA,紫外分光光度计测定RNA浓度,总RNA经甲醛变性胶电泳后,毛细管法转移至尼龙膜,80℃固定2h。含GLUT4cDNA质粒经扩增、提取、酶切、电泳、回收,得到GLUT4cDNA,随机引物标记[α32P]dCTP。尼龙膜于65℃预杂交、杂交(预杂交液:0.2M磷酸盐buffer(pH7.2)、1mMEDTA、1%BSA、7%SDS、15%甲酰胺),洗膜后-70℃放射自显影,所有样膜经洗脱探针后用GAPDHcDNA探针再杂交,作内参照以校正RNA上样量,最后图像分析杂交信号进行光密度(A值)扫描。
2.3免疫组化实验取大腿肌肉组织石蜡包埋后切片,厚4～5μm。切片经二甲苯脱蜡、系列酒精水化,0.1mol/LpH7.4PBS缓冲液洗涤3次,滴加蒸馏水新鲜配制的3%H2O2,室温5～10min,以消除内源性过氧化物酶;PBS洗3次后,用正常血清封闭,室温10min;吸去正常血清,滴加1∶50山羊抗GLUT4多克隆抗体,4℃过夜,PBS洗3次;滴加HRP驴抗山羊IgG(1∶200),37℃30min;PBS洗3次后加ABC试剂,37℃30min,0.01MPBS洗3次,加DAB显色液,室温显色,镜下控制反应时间,蒸馏水洗涤,苏木精复染,分色,系列酒精脱水,二甲苯透明,中性树胶封片。
3结果
3.1Ⅳ型胶原酶心包经上预处理对小鼠“内关”穴注射胰岛素后降糖作用的影响结果见表1。Ⅳ型胶原酶“内关”穴上方心包经上预处理几乎完全阻断“内关”穴注射胰岛素后5min的降糖效应,而同等剂量Ⅳ型胶原酶“内关”穴上方心包经旁预处理对“内关”穴注射胰岛素后的降糖作用与对照组相比无明显差异。
3.3免疫组化实验结果见图2(见封3)。3组动物骨骼肌细胞胞浆呈棕色反应,但Ⅳ型胶原酶经旁预处理组(图2B)及对照组(图2C)骨骼肌细胞胞浆膜上棕色线条较深,表明GLUT4在胞浆膜上有较多分布,Ⅳ型胶原酶经上预处理组(图2A)骨骼肌细胞胞浆膜上棕色线条较浅,表明GLUT4在胞浆膜上分布较少。
4讨论
胰岛素小剂量穴位注射具有快速强大的降糖作用,其初始药效与静脉注射同等剂量该药相当,与血药浓度、神经系统的完整性无明显相关,这已为诸多实验所证实[3～5]。胶原蛋白为细胞外间质的主要组成部分,已有初步实验表明,Ⅳ型胶原与经络信息传递有密切的关系[2]。本实验结果表明,用Ⅳ型胶原酶心包经上预处理,能明显阻断胰岛素穴位注射的降糖效应,Ⅳ型胶原酶心包经旁预处理组的阻断作用不明显,这更进一步证明了上述观点。
葡萄糖跨膜转运是由葡萄糖转运体家族(glucosetransporters,GLUTs)实现的。在肌肉等组织,胰岛素刺激快速显著的葡萄糖跨膜转运,这主要是由于GLUT4再分布造成的。在胰岛素作用下,GLUT4迅速从细胞内储存部位分布到细胞膜上,发挥转运葡萄糖的作用[6,7]。但未见胰岛素穴位注射后GLUT4表达和分布的变化以及Ⅳ型胶原酶对其影响的报道。
本研究中,3组动物GLUT4mRNA的表达没有明显变化。免疫组化研究显示,3组动物骨骼肌细胞胞浆呈棕色反应,Ⅳ型胶原酶经上预处理组骨骼肌细胞胞浆膜上棕色线条较浅,表明GLUT4在胞浆膜上分布较少,而Ⅳ型胶原酶经旁预处理组及对照组骨骼肌细胞胞浆膜上棕色线条较深,表明GLUT4在胞浆膜上有较多分布。
本研究结果提示,胰岛素“内关穴”注射后,产生快速降糖作用,而这种降糖作用的机理不是由于GLUT4产生增加,而主要是由于GLUT4再分布造成的。用Ⅳ型胶原酶心包经上预处理,能明显阻断胰岛素穴位注射的降糖效应,亦能减少GLUT4自胞内储存部位向胞浆膜上转运。我们认为Ⅳ型胶原蛋白参与了从胰岛素穴位注射到GLUT4再分布进而产生快速降糖作用之间的信息传递过程,至于Ⅳ型胶原蛋白如何参与信息传递有待进一步研究。
5参考文献
1刘秉慈.细胞外间质.生理科学进展,1996;27(3):221
2邵政一,朱毅芳,陈霞.胶原酶预处理对内关穴注射胰岛素降糖作用影响.中国针灸,2000;20(3):169
3邵政一,刘祖舜,丁斐,等.“内关”穴注射胰岛素对去臂丛神经小鼠、STZ糖尿病小鼠的降糖作用及其对胰高血糖素拮抗作用的研究.现代应用药学,1987;4(4):7
4丁斐,刘祖舜.大鼠内关注射去甲肾上腺素升压作用机理初探.南通医学院学报,1996;16(1):9
5徐济良,黄金华,邵政一.大鼠内关注射肾上腺素对血流动力学与血药浓度的影响.南通医学院学报,2000;20(1):20
6Livingstone,C,Lyall,H,andGould,G.W.HypothalamicGLUT4Expression:aGlucoseandInsulin
SensingMechanism?Mol.Endocrinol.1995;107:677Marsh,B.J,Alm,R.A,Mclntosh,S.R,etal.Molecu
永远的焦裕禄范文6
"如果你是一缕阳光，你是否照亮了一片黑暗?如果你是一滴水，你是否滋润了一寸土地?如果你是一粒粮食，你是否哺育了有用的生命?如果你是一颗最小的'螺丝钉'，你是否永远的坚守岗位?"
雷锋，就是这一缕阳光、这一滴水、这一粒粮食、这颗最小的螺丝钉，虽然他的一生短暂，但他的精神长存，虽然他的一生平凡，但他的形象伟岸。
有人说："雷锋已经永远离开了我们"，他真的离开了吗?不，没有!虽然他的肉体离开了，可他的崇高灵魂却永远伴随着我们，激励着我们……
你听,兰考县的父老乡亲们呼唤县长的声音响起来了,"焦县长,你怎么啦?"声音是那样关切，是那样深情，因为他们的县长为了兰考县的人们病倒了，倒在了兰考那片贫瘠而又富饶的土地上。
你看，新时代的焦裕禄向我们走来了，他的感人事迹，传唱大江南北。两次进藏的他，领养了三个孤儿，让家境本不富裕的家庭更加拮据，有时甚至须靠捐血来贴补家庭，可他给群众买药、扶贫救济时却出手大方，少则百十元，多则上千元，最终实现了"青山处处埋忠骨，一腔热血洒高原"的誓言。这位视少数民族同胞为骨肉的汉族干部却倒下了，用他的鲜血染红了他所热恋的雪域高原。中学生学雷锋征文演讲稿由精品信息网整理！
他们是谁?他们就是党的好干部焦裕禄、孔繁森。可他们又是"雷锋"是时代前进中的"雷锋"，你能说，雷锋已经离开了我们吗?
老师把自己的知识和道德力量传播给莘莘学子们;工人农民们用自己的汗水描绘着祖国的蓝图;警察叔叔们用自己的青春和鲜血守护着人们的和平、安宁;白衣天使们用自己的温柔给我们带来了健康、美好……
在祖国广袤的土地上，到处都有雷锋的身影，他们学习雷锋精神，实践雷锋精神，在平凡中做出不平凡的贡献，雷锋虽然逝去多年，但是他的精神却被一代又一代地传递下去了，他的精神在学习中体验出来了，在生活中体验出来了，在任何一个岗位中都体验出来了。你又能说，雷锋已经离开了我们吗?
