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坚定的锡兵范文1
刘某于2006年经老乡介绍来到了山西省某县的一家煤矿公司当了一名井下工人。虽说下井又累又危险,但每个月四五千的工资,干别的是不可能挣到的,刘某也没啥技术,他就想趁着还有把子力气,多攒点钱供孩子上学。2011年12月的一天晚上,正在井下的工作面打锚杆时,刘某的衣服不慎绞在了钻杆上,还没等他反应过来,锚头已经重重打到了胸脯上。刘某当时就觉得胸疼得厉害,井下的班长赶紧让其他人扶着他升井,然后送到了就近的煤矿医院。经诊断,刘某右侧第八肋软骨骨折。当时公司支付了住院期间的医疗费,刘某听别人说还应该有别的赔偿,但他还想继续在公司上班,因此没有向公司提出赔偿。刘某继续上班后,胸部一直疼的厉害,自己买了止疼药也没管用,他觉得奇怪,按照医生的说法,他现在恢复的还不错,应该不至于这么疼了,刘某有点担心,就自己来到了医院又做了次检查,诊断结果为:肺大泡、肺气肿。医生一看检查结果,就问他是干什么的,得知刘某一直在井下工作,医生就说该病很可能是因为长期在井下吸入有害气体所致,如果再发展下去那就是矽肺病了。原本以为下井工作就是累点脏点,有危险也是瓦斯爆炸、塌方和透水等事故,没想到还有矽肺病。医生说这个病很严重,如果不及时治疗会有生命危险。回到公司后,刘某就去找公司领导,提出给自己治疗,却遭到了领导的拒绝。无奈之下,刘某在工友的指点下,来到了农民工工作站求助。
律师了解情况后,告诉刘某,他肋骨受伤和肺部的职业病都属于工伤,但由于伤害的性质不一样,所以需要分别处理。律师首先整理好相关材料后向社会保障局提出了工伤认定,要求认定刘某肋骨骨折为工伤;至于职业病的工伤认定,需要先经过职业病诊断才行。由于刘某当时肋骨受伤有很多工人在场,公司为他支付了医疗费,对受伤的事实也不否认,因此刘某肋骨骨折的工伤认定很快就做出了。拿到工伤认定书后,刘某却一点也高兴不起来,因为此时他的肋骨骨折已经基本痊愈,但肺部的毛病却越来越严重,而此时他还不知道自己该去哪里做职业病诊断。律师四处打听后,得知山西省职业病医院可以做职业病诊断,律师就帮助刘某将材料递交给了医院,但医院检查后认为刘某缺少有关劳动关系、工种、工作岗位等单位证明,因此拒绝为其作职业病诊断。律师提出,刘某肋骨骨折已经确认了工伤,工伤证上也表明了他的工作单位,劳动关系已经认定,为什么不能做职业病诊断?但医院方面认为,除了确认目前的劳动关系外,用人单位必须要出具工种、工作时间等具体工作资料。刘某很失望,这些东西自己哪能拿的来啊?律师考虑后,提出一方面让他继续就肋骨骨折申请劳动能力鉴定;另一方面,则向劳动仲裁委提出申请,要求确认他与公司的劳动关系、工种、工作岗位及时间。很快,刘某肋骨骨折经鉴定为九级伤残,而仲裁委经审理后也做出了裁决书:确认了刘某与公司存在劳动关系,并对其工作岗位和工作时间也做出了认定。收到仲裁裁决书后,律师整理了材料再次递交给了职业病医院。医院做出了职业病诊断,确认刘某为煤工尘肺一期。根据这一诊断证明,社会保障局做出了工伤认定,确认刘某所患的职业病为工伤。原本以为没办法的事,在律师的帮助下柳暗花明竟然拿到了工伤证。刘某这下有信心了,在律师的帮助下讨要自己应得的赔偿。
律师提醒:职业病是工伤的一种情形,但申请工伤认定前,必须先经过有资质的医疗机构进行职业病诊断,而职业病诊断需要劳动关系、工作岗位、工作时间等资料。农民工朋友若认为自己可能患职业病,就要先收集相关证据,尤其是确认劳动关系的证据。
摘自《农民工法律援助中心》
坚定的锡兵范文2
我院体疗科担负着特勤疗养员的体能训练任务。多年来我们在坚持传统的锻炼项目的同时,始终在寻找和探索针对职业特点的体练方法。最近,我们将自行创编的一组水兵健身操运用于来我院疗养的潜艇艇员,内容如下。
1 水兵健身操的创编与目的
潜艇艇员发病有三大特点和危害:其一,舰艇官兵长期工作在空间狭小,仪器和设备密布的战位上,操作的姿势单一固定,活动空间极为受限。加之高温高湿的侵害,易使肌体的某一关节部位和骨骼肌肉造成劳损和损伤。其二,由于长期生活在多种有害气体的环境中,对心肺功能损伤大,加之高气压环境下由于压力和氧分压的增加可使心率呼吸频率减慢,血管舒张压升高,血管外周阻力和呼吸阻力增大。其三,在长航过程中,由于远距离航行海域的不同,时间和季节变换,使人易产生头昏,乏力,睡眠欠佳,注意力不集中,甚至心情郁闷等亚健康状况。为使艇员在两个航次之间迅速而有效的恢复体能和调整好精神状态,除了有的放矢的治疗外,我们还创编了一套水兵有氧健身操进行辅矫正。
2水兵健身操的训练内容与对象
我们选用了动感性较强的,大家熟悉和喜爱的军旅音乐,踏着青春的脚步,使潜艇官兵在身心愉悦中接受有氧健身训练。本套操共分六个部分:①头颈部,②肩臂部,③腰胯部,④脚足部,⑤热身,⑥伸拉放松。共需30min。在做完操之后,达到热身、骨骼肌肉锻炼充分、心肺功能得到充分的有氧训练。
组织首次试训的人数共58名,最小年龄19岁,最大年龄34岁,平均年龄26.6岁。每日一次,每次为30min,共组织了28个锻炼日。30min有氧水兵健身操,其运动强度心率最高达114~130次/分,平均为103~112次/min,最高收缩压和舒张压分别为19.5kPa和13kPa,平均分别为16kPa和10.5kPa。
3 水兵健身操训练后有关健康数据
3.1 心肺功能的明显变化 与训练前比较,心率平均降低10次/min,肺活量明显增加(表1)。
3.2 肌力的明显增强 我们对腰背和腿肌进行测试(表2)。
3.3 亚健康状态的改善和变化(表3)。
4 讨论
水兵健身操是为水兵官兵量体裁衣精心编排的,适合艇员在长航和日常训练中运用。潜艇艇员反映,该套健身操是集保健娱乐于一体的有氧健身运动,值得推广。
坚定的锡兵范文3
论文关键词 司法精神病鉴定 司法程序 责任认定 管理和治疗
案件审理过程中,在接受司法精神病鉴定委托以后,鉴定进行过程中,要同时注重法学要件和医学要件的考察,做出能够赢得社会认可的鉴定结论。本文结合实际工作经验,就司法鉴定的启动权、鉴定前后的司法程序、涉案精神病人的责任认定以及管理治疗等方面,重点梳理一些看法和要点,供大家探讨。
一、司法精神病鉴定启动权
《中华人民共和国刑事诉讼法》第一百四十四条规定:“为了查明案情,需要解决案件中某些专门性问题的时候,应当指派、聘请有专门知识的人进行鉴定”。根据《精神疾病司法鉴定暂行规定》第五章规定,“司法机关是委托鉴定的唯一主体”。依据我国现行的精神病司法鉴定体制,由受理案件的司法机关决定是否进行精神病司法鉴定,我国在立法上并没有赋予当事人可以独立地启动鉴定程序。本人认为这不利于对当事人权利的保护,而且有悖于控辩平等的原则。法律应当允许当事人自己或其监护人选择进行鉴定,当事人可以因举证需要而委托鉴定,或者通过鉴定获得有利于自己的证据,这样既可以增强控辩双方对鉴定程序的参与性,规范司法鉴定活动,也可以树立司法鉴定结论的公信力。
二、鉴定前和鉴定后的司法程序
依据《刑事诉讼法》的有关规定,对精神病人强制医疗的,由人民法院决定。公安机关发现精神病人符合强制医疗条件的,应当写出《强制医疗意见书》,移送人民检察院。人民检察院应当向人民法院提出强制医疗的申请。人民法院对符合条件的可以作出强制医疗的决定。
但司法实践中,常常发生公安机关主动申请进行司法鉴定,确定犯罪嫌疑人是否有精神病。一旦犯罪嫌疑人被确认为精神病人,公安机关就会撤销案件,终止司法程序,有的就将行为人移送强制医疗,有的由公安机关径行“无罪释放”,而不移送检察机关。在这种情况下,未经过司法机关公开、公平、公正的审判,被害人得不到心理慰籍,得不到经济上的补偿,容易对社会产生不满、对法律的公平公正性产生怀疑,最终导致上访政府、报复社会,给社会带来了不安定因素和不良影响;犯罪嫌疑人若被移送强制医疗,未有经过申辩机会,亦会有不满;犯罪嫌疑人若被放任在社会上,对社会亦会构成极大的危险和隐患,带来不良的后果。以上这些极不利于当前所提倡的构建和谐社会。
公安机关的主要职责是查清犯罪事实,收集和提取指控犯罪的证据。至于犯罪嫌疑人是否构成犯罪,构成什么罪,以及应不应当追究刑事责任,这些均应当由法院来最终判定。在侦查阶段,若犯罪嫌疑人的近亲属或其律师提出犯罪嫌疑人有精神病的情况,依照法律规定:公安机关发现精神病人符合强制医疗条件的,应当写出《强制医疗意见书》,移送人民检察院。因此,公安机关只要在实体上查明了案件事实的各要点,即使怀疑犯罪嫌疑人患有精神病,也应当将案件移送检察机关审查起诉。由法院结合司法精神病鉴定专家的鉴定意见作出有罪并追究刑事责任的判决,或者作出移送强制医疗的决定。
三、涉案精神病人的责任判定
《中华人民共和国刑法》第十八条第一款规定,“精神病人在不能辨认或者不能控制自己行为的时候造成危害结果,经法定程序鉴定确认的,不负刑事责任,但是应当责令其家属或者监护人严加看管和医疗;在必要的时候,由政府强制医疗”。以上认定标准与现代多数国家的刑事立法是一致的,即采用医学标准与心理学标准相结合的方式,在心理学标准的认定形式上采纳的是丧失辨认能力或者控制能力的择一说。
所谓医学标准,又称之为生物学标准,是指从医学上看,行为人是基于精神病理的作用实施特定危害社会行为的精神病人。所谓心理学标准,亦称法学标准,是指从心理学、法学的角度看,患有精神病的行为人所实施的危害行为由其自身难以避免的病理机制所引起的,而且由于精神病理的作用,使其实施危害行为时丧失了辨认或者控制自己行为的能力,从而实施了严重危害社会的行为。所谓丧失辨认行为的能力,是指行为人由于精神病理的作用,在实施危害行为时不能正确地了解自己行为危害社会的性质及其危害后果;所谓丧失控制行为的能力,是指行为人由于精神病理的作用,不能根据自己的意志自由地选择实施或不实施危害行为,也往往表现为不能根据自己的意志选择和控制危害行为实施的时间、地点、方式与程度。精神病人不构成犯罪,必须同时符合上述医学标准和心理学标准,才应确认为无责任能力人,排除在刑罚的处罚之外,按照《刑法》第十八条第一款的规定对其危害行为不负刑事责任。
在司法精神病鉴定方面,必须保证精神病鉴定结论的科学性、准确性和统一性,在全国范围内应当制定司法精神病鉴定的统一标准,供所有司法精神病鉴定机构共同遵守。另外,对精神病人的责任能力鉴定,不能紧紧依靠该结论作为认定刑事责任的唯一依据,还应进一步根据行为人的个人情况和案件情况综合评定,才能够公平公正地处理案件。笔者认为,立法可规定办案人员应当按下列步骤进行初步审查,进行初步认定:(1)是否有精神病史;(2)作案的动机是否为报复、泄愤、财、情等正常心理,是否有犯罪的现实动机;(3)作案是否为预谋,如果为预谋,是否精心“踩点”准备工具;(4)作案手段是否离奇;(5)犯罪后是否有自我保护意识,是否伪造现场,是否丢弃犯罪工具;(6)在整个犯罪过程中是否出现幻觉与妄想等精神症状。
四、涉案精神病人的管理和治疗
当前精神病人犯罪是一个非常热点的社会问题,尤其近些年国内外发生了许多重特大案件都是有关精神病人犯罪的,有些案件震惊全国甚至引得世界关注。尽管精神病人是弱势群体,其权利需要法律予以保护,但其对社会所带来的潜在危险亦非常严重。当精神病人发生重特大犯罪,专家从专业的角度提出观点时,往往会引起社会上很多不同的看法。我认为关键是需要改进目前我国对精神病人犯罪后的处理措施,我们应当保护精神病人的合法权益,但也不能以损害正常人的合法权益为代价。否则,公众会对司法的公正性产生怀疑,不利于司法权威的树立。
坚定的锡兵范文4
资料与方法
2006年1月~2010年6月由市辖两县两区人口计生局上报,申请进行病残儿童医学鉴定患儿160例,男74例(4625%),女86例(5375%);年龄2~15岁。
方法:由病残儿家长申报,经乡、镇、街计划生育服务站调查、核实后上报县(区)计划生育行政部门审核,再报市计划生育医学鉴定小组,统一组织体检。对所有申报对象进行认真、细致的体格检查。根据需要做辅助检查,包括:B超、心电图、脑电图、CT等。对疑有遗传倾向的患儿及其父母均作染色体及其相关生化检查,对智力低下者采用韦氏儿童智力量表(WISC-CR)进行智商评定。根据国家计生委《病残医学鉴定诊断标准及其父母再生育的指导原则》,最后由医学鉴定小组做出鉴定结果。
结 果
在上报的160例病残儿医学鉴定中,非遗传性疾病94例(5875%),遗传性疾病66例(4125%)。非遗传性疾病中的神经系统疾病最多(22例),占非遗传疾病的2340%,其次是心脏病18例(1915%),第3位是脑瘫14例(1489%)。见表1。
遗传性疾病中以多基因遗传病的先天性心脏病最多12例,占遗传性疾病的1818%,其次是脑神经系统疾病10例,占遗传疾病的1515%,第3位远视、弱视9例,占遗传疾病的1364%。见表2。
讨 论
对本地区出生缺陷的现状及病因进行分析:随着年龄增长,病残儿例数逐渐增多。因有些疾病早期不易发现,很多非遗传性疾病在育儿过程中才不断发生。病残儿主要分布在农村,原因是农村不少家庭卫生保健知识较差,部分妇女在孕期未脱离有害接触,孕期检查少,基础医疗设备较差,没有及时发现问题,导致胎儿出生缺陷。不少农村家长忙于外出务工或经商等,对儿童看管不当,外伤、烧伤、烫伤车祸等等致残较多。以上说明病残儿防治工作重点在农村,改善医疗条件,建立健全出生缺陷干预机制,减少环境污染及伤害。其中继发性癫痫、脑瘫所占比例最高。妊娠期感染、缺氧、有害物质的接触等,都是导致继发性癫痫、脑瘫等疾病的主要原因。产前检查,孕产期、围产期、儿童保健工作落后,很多妇女有不良孕产史因外伤等所致的运动系统伤残。因此应广泛普及优生优育知识,提高产前诊断水平和助产技术,搞好孕产期、围产期、儿童保健工作,并加强对幼儿的看守,防止意外事故的发生非常重要。遗传性疾病中发病率居前3位的先天性心脏病、遗传性智力低下、原发性癫痫均属多基因遗传病,其易患性的高低是由遗传因素和环境因素共同决定的。因此,重视环境保护,减少环境污染,避免接触有害物质,可降低多基因病的发生。有些单基因病如先天性耳聋,高度近视,再发风险较高,应建议其领养;而性连锁隐性遗传病如血友病等,可发放生育指标,但应做产前诊断,保留正常胎儿,流产病胎。非遗传性疾病中,由于母婴受内、外因素损害,如长期母亲患病服药,接触有害物质,高龄孕产妇等,已经证实,叶酸缺乏是神经管畸形的重要原因,增补叶酸可以有效预防出生缺陷的发生。
在遗传病顺位中,先天性心脏病占第1位,其次是神经管畸形和远视、弱视。先天性心脏病是多基因遗传疾病,神经管畸形和远视、弱视是发病率较高的遗传性疾病,因此,应加强围产期保健,开展有效的孕前、孕期保健和产前诊断,及时发现异常情况,及时采取有效措施,降低遗传病的发生。
坚定的锡兵范文5
ASCUS经进一步诊治后有61%诊断为CIN(宫颈上皮内瘤样病变)甚至宫颈癌[2],因此加强对ASCUS患者的管理,对预防宫颈癌有重要作用。我们于2004年1月―2007年12月对在我院妇科门诊行宫颈细胞学TCT(薄层液基细胞学)检查,提示为ASCUS的病例进行随访,探讨其处理方法。
1资料与方法
1. 1对象
2004年1月―2007年12月,在我院门诊进行TCT检查者共16 108例,其中诊断结果为ASCUS的451例,检出率为2.8%。除28例失访(占6.2%),33例随访期未满6个月外,共有390例列入观察对象,均随访6~12个月。390例病例均行高危型HPV-DNA(人瘤样病毒)检测。将390例病例分为两组,第一组70例,进行局部用药后随访TCT,未行阴道镜下活检;第二组320例,均行阴道镜检查+活检,根据活检结果又有74例进行LEEP(宫颈电圈切术)治疗。
1. 2方法
1.2.1宫颈细胞学检查 采用TCT-TBS描述性报告方式。根据1988年提出[3]、2001年改进[4]的美国国际癌症协会的TBS分类法, ASCUS的诊断标准为:① 细胞核增大是正常中层细胞核的2.5~3.0倍,核浆比例轻度增大。② 可能有细胞核形态改变或有双核。③ 核染色质轻度增加,但仍均匀分布,无颗粒样改变。④ 细胞核外形通常光滑、规则,有时可稍不规则。当涂片中的异常细胞仅有1或2个,不足以诊断HSIL(鳞状上皮高度病变),这时报告诊断为ASCUS,不除外HSIL。
1.2.2HPV-DNA检查采用杂交捕获(HC2)技术,同时检测13种高危型HPV(16,18,31,33, 35,39,45,51,52,56,58,59,68)。
1.2.3阴道镜下活检 采用金科威电子阴道镜,由专人操作,行醋酸和碘试验。于图像异常区多点活检,未见异常图像者,于鳞柱交界的3、6、9、12点处取活检。
1.2.4LEEP手术对CINII、CINIII及CINI不能定时随访者行LEEP治疗。采用金科威妇科专用高频电波刀,根据病变的情况选择不同型号的LEEP刀头环形切除病变组织。切割宽度超过病变区域外2~5 mm,深度达10~15 mm,切除物送病理检查。
2结果
2.1ASCUS病例的基本情况
第一组70例,局部用药随访未行阴道镜检查,随访6~12个月后细胞学提示正常,占17.9%(70/390)。第二组320例,均行阴道镜检查+活检(包括28例局部用药随访TCT异常改行阴道镜检查者),其中99例经活检提示为CIN及以上病变,占25.4%(99/390)。99例中有74例进行了LEEP术治疗,术后59例证实为CIN及以上病变,占15.1%(59/390)(图1)。
2.2ASCUS病例与高危型HPV的关系
第二组中高危型HPV(+)有178例,占55.6%(178/320)。第一组中高危型HPV(+)仅11例,占15.7%(11/70)。99例活检提示CIN及以上病变的病例中,高危型HPV(+)79例,占79.8%。59例经LEEP术后证实为CIN及以上病变的病例中,高危型HPV(+)者49例,占83.1%(表1)。
2.3ASCUS病例的年龄分布
390例ASCUS病例的平均年龄为34岁。第一组平均年龄为30岁,第二组中99例活检提示为CIN及以上病变者的平均年龄为37岁,其中≥35岁64例,占64.6%。59例经LEEP术证实为CIN及以上病变者的平均年龄为40岁,其中≥35岁41例,占69.5%。
2.4ASCUS病例阴道镜下图像情况
390例病例中阴道镜下发现异常图像的有319例;71例未见明显异常图像,其中有11例(15.5%)术后活检病理提示为CIN及以上病变。
3讨论
ASCUS可以是增生活跃的良性改变或潜在的恶性改变,因不能对其进行明确分类而命名。ASCUS的具体临床意义有:① 可能和炎症有关;② 与刺激有关;③ 与宫内节育器有关;④ 与抹片采取固定不好有关;⑤ 可能有癌前病变,但异形细胞程度不够诊断标准;⑥ 可能有癌存在,但所收取涂片中细胞的异常不够确切诊断。2001年ASCCP(美国阴道镜和宫颈病理学会)推荐的关于ASCUS的处理指南为:① 细胞学复查;② 阴道镜检查; ③ 高危型HPV-DNA的检测[5]。
本文统计发现,有15.5%的阴道镜下图像阴性者活检病理报告提示为CIN及以上的病变,故对有临床症状或宫颈细胞学异常的患者应重视宫颈活检及颈管搔刮,不能轻率地以阴道镜下图像是否发现异常决定是否活检,以免造成人为的漏诊。
本文资料显示,ASCUS病例的发生率为2.8%,略低于文献报道[6],阴道镜下活检提示为CIN及以上病变的占25.4%,也略低于文献报道[7,8],LEEP术后病理证实为CIN及以上病变的占15.1%,与文献报道相似[9]。发生CIN及以上病变的病例平均年龄在35岁以上,并与高危型HPV的感染密切相关。高危型HPV感染与CIN及宫颈癌的发生、发展有着极为密切的联系,高危型HPV持续感染是发生宫颈癌的必要因素,这一观点已成为共识。70例局部用药随访TCT正常者中仅11例有高危型HPV感染,其平均年龄为30岁,故认为ASCUS的病例需根据年龄及HPV感染情况对其进行分层处理。① 高危型HPV(+)且年龄>35岁者:本文结果表明,此类病例发生癌前病变的概率较高,建议可以直接进行诊断性LEEP术。LEEP手术能够获得足够的宫颈组织进行病理诊断,并可以在诊断的同时进行治疗,同时省去等待阴道镜下活检病理报告的时间,节约医疗成本。即使有生育要求者经知情同意后也可手术,有文献报道LEEP术对生育的影响很小[10]。② 高危型HPV(+)且年龄
Fallani等[11]认为阴道脱落细胞学结果为ASCUS的妇女,其病理组织学检查结果范围广(从正常到宫颈浸润癌)。本文结果亦发现细胞学诊断为ASCUS的病例,有25.4%的患者经阴道镜活检病理诊断为CIN及以上的病变。故应加强对ASCUS病例的管理,做到早期发现、早期治疗宫颈癌及癌前病变,避免宫颈癌的漏诊。
4参考文献
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坚定的锡兵范文6
论文关键词:香蕉枯萎病菌,号小种,拮抗细菌,基因,鉴定
关键词:香蕉枯萎病菌;拮抗菌;16SrRNA基因;鉴定
香蕉枯萎病是由尖孢镰刀菌古巴专化型(Fusariumoxysporumfsp.cubense)侵染而引起香蕉维管束坏死的一种真菌病害。目前在香蕉枯萎病的防治方面,缺乏有效的化学防治试剂,农业防治措施也不能达到较理想的效果。因此,生物防治作为一种经济、安全、有效的防治措施成为了研究的热点。目前,对于香蕉枯萎病生物防治的研究主要集中于香蕉枯萎病拮抗菌的筛选及其室内盆栽防治试验。Thangavelu等报道获得对香蕉枯萎病的防治效果为48%~51%的哈兹木霉(Trichodermaharzianum),获得防治效果为41%荧光假单孢杆菌(Pseudomonasfluorescens)能诱导植物产生系统抗性抑制香蕉枯萎病,枯草芽孢杆菌也有较好的防效。曹理想等报道,在研究香蕉内生菌区系时,发现几株玫瑰浅灰链霉菌(Streptomycesroseogriseolus)对香蕉枯萎病菌有一定拮抗作用。本试验旨
资助项目:广东省农业厅(粤农函2006-229)
*通讯作者.Authorforcorrespondence,E-mail:chunpingyou@sina.com
在从香蕉根际土壤中筛选出对香蕉枯萎病菌具有拮抗作用的生物防治细菌菌株,并对其拮抗作用和分类地位进行研究,为香蕉枯萎病生物制剂的开发打下基础。
1材料与方法
1.1材料
1.1.1供试菌株香蕉枯萎病菌4号小种(Fusariumoxysporumf.sp.Cubenserace4)由仲恺农业工程学院植物病理实验室提供。
1.1.2培养基马铃薯葡萄糖琼脂培养基PDA、营养琼脂培养基NA、营养肉汤培养基NB配方参考方中达的方法。
1.2方法
1.2.1土壤细菌的分离从不同果园的香蕉植株根际取得土壤样本,将1g根际土置于灭菌的小三角瓶内,加入9ml无菌水稀释,摇匀成悬浮液,用接菌环蘸取一环于NA培养基上划线分离。28℃下培养2d,在培养基上挑取不同形态的单菌落,进一步分离纯化后,挑取不同形态的单菌落进行保存。
1.2.2拮抗细菌的初步筛选保存的细菌单菌落分别接入装有20mlNB培养液的小三角瓶中,于28℃振荡培养24h。拮抗菌的筛选采用对峙培养法,先将香蕉枯萎病菌菌丝块接于平板的一侧,再在平板另一侧(与病菌菌丝块相距3cm)放上浸透细菌菌液的灭菌滤纸片,于28℃培养4d后,观察细菌对枯萎病菌的抑制效果,初步筛选出对香蕉枯萎病菌有抑制效果的拮抗细菌。
1.2.3拮抗细菌对香蕉枯萎病菌的抑制作用拮抗细菌与香蕉枯萎病菌采用对峙培养的方法,在PDA平板一侧接入于PDA培养基上25℃下培养5d的香蕉枯萎病菌菌丝块(Φ5mm),在相距菌丝块边缘3cm处用打孔器打一直径为5mm的孔,吸取细菌培养液25μl注入孔中,以注入B培养液为对照,每处理4次重复。于28℃培养5d后,观察细菌是否具有拮抗效果,并测量其抑菌圈直径。
1.2.4拮抗细菌对香蕉枯萎病菌菌丝的作用方式拮抗细菌与香蕉枯萎病菌作平板对峙实验后,如果拮抗菌对枯萎病菌产生抑制效果,在抑菌圈的交界处切取菌丝块,在显微镜下进行观察,研究拮抗细菌对香蕉枯萎病菌的作用方式。以病菌菌落边缘的正常菌丝做为对照。
1.2.5拮抗细菌发酵液对香蕉枯萎病菌分生孢子萌发的抑制作用实验方法参考肖爱萍等方法,12h后观察孢子萌发率,根据下列公式计算孢子萌发抑制率:
孢子萌发抑制率(%)=
对照平均孢子萌发率-处理孢子萌发率