手机担保书范例6篇

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【关键词】急性单纯性阑尾炎；保守治疗；手术治疗；对比分析

【中图分类号】R574 【文献标识码】A 【文章编号】2095-6851（2017）06--01

急性单纯性阑尾炎是外科中常见的疾病，由多种因素引发的急性炎症反应，主要表现为右下腹部疼痛。在临床治疗中一般采用保守治疗和手术治疗两种方法。本次研究的主要目的是探讨比较急性单纯性阑尾炎保守治疗和手术治疗不同治疗方法的效果。选取2015年1月到2016年12月在我院进行就诊的急性单纯性阑尾炎患者80例，作为本次研究对象，研究具体报告如下。

1.资料与方法

1.1 一般资料 选取2015年1月到2016年12月在我院进行就诊的急性单纯性阑尾炎患者80例，作为本次研究对象。其中男54例，女26例，年龄在18岁到62岁之间。在患者和家属知情的情况下将所有患者分为两组，记为保守组和手术组，每组患者40例。其中保守组中男28例，女12例，平均年龄43.35±2.15岁；对照组中男26例，女14例，平均年g43.97±1.98岁。所有患者两组患者在性别、年龄等基本资料比较无差异，P>0.05，无统计学意义，具有可比性。

1.2 方法

保守组患者采用保守治疗，主要方法为：常规禁食、抗感染治疗以及肠外营养给予等三方面治疗为基础，然后采用第三代头孢联合甲硝唑静脉滴注进行治疗，每天2次。在治疗过程中，需要对患者进行病情病症监控，每4小时查看一次，严重或未改善需进一步治疗或转手术治疗。待患者治疗体征恢复出院时，继续抗生素服用治疗。

手术组患者采取手术治疗，主要方法为：对患者进行全面的术前检查，然后进行充分的术前准备，继而根据患者的实际情况采取常规手术治疗和腹腔镜阑尾切除手术，手术后，需要对患者进行抗生素预防感染，同时进行心电图和全身支持疗法监控。

1.3 观察指标 对两组患者不同治疗方法产生的治疗效果进行观察，对这首次治疗成功率进行比较分析，指标为：治愈：患者右下腹无压痛、反跳痛等，发热和胃肠道症状明显消失，血常规等检查指标在正常值；有效：患者右下腹压痛和反跳痛有所减轻，发热和胃肠道症状有所改善，血常规等检查指标在正常值；无效：患者右下腹仍然压痛、反跳痛等，存在发热和胃肠道症状，血常规等检查指标在异常值

1.4 统计学方法 首先对上述患者各项记录数据进行分类和汇总处理，然后用统计学软件SPSS19.0对上述汇总数据进行分析和处理，计数资料采取率（%）表示，组间率对比采取检验（或者采用T检验）；对比以P

2.结果

两组患者治疗情况对比分析可知，手术组治疗成功有效率明显高于保守组，总有效率为95%，而保守组仅为70%，两组对比差异显著，P

3.讨论

急性单纯性阑尾炎是外科中最为常见的病症之一，且近年来有逐渐增高的趋势。阑尾炎的发生主要是细菌入侵，如大肠杆菌、肠球菌等，引起肠腔内发生梗阻造成。急性单纯性阑尾炎临床表现主要为右下腹部疼痛，还有发热、恶心、呕吐、皮肤感觉过敏等。急性单纯性阑尾炎若没有得到及时的治疗，将会引起很多严重的并发症，具有一定的危急性。在临床中，针对急性单纯性阑尾炎的治疗主要采取保守治疗和手术治疗两种，根据患者不同的情况和患者的需求进行选择。

相比较来说，保守治疗主要采用药物治疗，优点为：风险相对较小，治疗过程较为简单。但是缺点在于，治疗不彻底，且症状未缓解，还需转手术进行二次治疗；其次存在二次复发的几率。手术治疗主要是通过阑尾切除术进行治疗，通过腹腔镜对腹腔内整体情况进行探视，然后将病变严重部位进行针对性切除，优点为：治疗效果好，首次治疗彻底，避免二次伤害；再者，经过阑尾切除术后，患者出现二次复发的几率为0。而缺点在于，手术具有一定的风险，对患者身体有一定的损害。

本文研究也表明，经过手术治疗的患者治疗成功有效率明显高于保守治疗的患者，总有效率为95%，而保守组仅为70%，两组对比差异显著，P

综上，手术治疗首次治疗成功率高，复发率低，值得医院临床推广应用。

参考文献

[1]张子会，刘志永，朱建英.急性单纯性阑尾炎患者经保守治疗与手术治疗的临床效果比较探讨[J].世界最新医学信息文摘，2016，02：110+100.

[2]郭晓敏，宁红，赵丽萍.对比、分析急性单纯性阑尾炎保守治疗和手术治疗的临床效果[J].中国社区医师，2016，33：35-36.

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关键词：保守；手术；急性；单纯性；阑尾炎

急性阑尾炎在外科急腹症中较为常见，其临床症状主要表现为转移性的右下腹痛，呕吐、恶心以及发热等[1]。目前，对于保守药物治疗以及手术治疗急性单纯性阑尾炎仍存在分歧。本文主要就保守和手术治疗急性单纯性阑尾炎的临床效果进行对比分析，并作报道如下：

1.资料与方法

1.1一般资料

资料随机选取2008年2月～2013年2月我院救治的急性单纯性阑尾炎患者56例，将其作为研究对象；其中男性患者35例，女性患者21例；年龄为18～53岁；平均年龄为（32±2.13）岁。所选患者均出现不同程度的呕吐、恶心；且临床症状表现为间歇疼痛或压痛患者19例，转移性右下腹痛37例；患者体温在37℃以下9例，在37～38℃之间13例，体温超过38℃患者34例。白细胞计数为（10～20）×109/L，且中性粒细胞在0.7～0.9之间。经超声诊断发现，患者阑尾肿胀的程度较轻，阑尾管腔无液性暗区，管壁的横切面表现为靶环状，纵切面为管状回声。

1.2方法

1.2.1分组方法

将56例急性单纯性阑尾炎患者分为两组，保守组和手术组，每组38例，保守组采用抗生素进行维持治疗，手术组在腹腔镜下行阑尾切除术。两组患者年龄、性别以及症状等一般资料比较均无明显差异（P>0.05），具有可比性。

1.2.2治疗方法

给予保守组患者治疗主要的将抗厌氧菌药物替硝唑联合左氧沙星葡萄糖进行静脉滴注，2次/日；同时，给予保守组患者全身支持疗法。手术组患者术前，对其进行常规检查，术前准备充分后在腹腔镜下行阑尾炎切除术，术后给予抗生素避免患者感染，术后遵医嘱禁食；两组患者均定期进行心电监护。观察两组患者使用抗生素的情况、下床时间、住院时间以及并发症的发生率[2]。

1.3评定标准

急性单纯性阑尾炎治愈的评定标准主要表现为：右下腹部无疼痛；无恶性呕吐症状；患者体温、白细胞的计数以及中性粒细胞的比例均已恢复到正常状态，且身体状态较为良好。

1.4统计学方法

所有数据均用SPSS 18.0统计软件对数据进行统计并分析处理，一般资料用标准差（ ±s）表示，计量资料采用t检验，计数资料比较采用χ2检验，P

2.结果

2.1两组患者术后各项指标情况对照

两组患者术后使用抗生素的情况、下床及住院时间等指标比较中，手术组明显优于保守组，比较有差异具有统计学意义（P

2.2两组患者治愈情况对照

两组患者经治疗后治愈情况对照中，手术组治愈率为96.43%，明显高于保守组治愈率67.86%；比较有差异具有统计学意义（P

2.3两组患者并发症发生情况对照

两组患者经治疗后并发症发生情况比较中，保守组治疗后3年内复发9例，并发症发生率为32.14%；对9例复发患者行腹腔镜阑尾炎切除术，全部痊愈出院；手术组术后感染1例，并发症发生率为3.57%；经药物治疗后治愈。两组患者并发症发生率比较有差异具有统计学意义（P

3.讨论

急性单纯性阑尾炎若治疗不及时，容易发展成为坏疽性、穿孔性阑尾炎，致使死亡率增高。目前，治疗急性单纯性阑尾炎的方式不一，基层医院首选手术治疗方式，但有认为应首选保守治疗，若有复发或病情发展患者再给予手术治疗[3]。

许多患者之所以选择保守治疗的原因主要是由于对手术治疗的了解过少产生恐惧心理，强烈要求进行保守治疗；部分患者认为手术治疗的费用较高，经济条件受限等；少部分患者周围有经保守治疗后痊愈的患者。实践证明，急性单纯性阑尾炎患者采取保守治疗有一定的疗效，且部分患者经治疗后痊愈出院。但本次临床效果对比发现，手术治疗急性阑尾炎能够缩短患者下床及住院时间，术后并发症发生率较少。且腹腔镜下操作较为简便，患者疼痛感轻，能有效缩短下床及住院时间，减轻患者住院费用。

本次对56例急性单纯性阑尾炎采用保守和手术治疗效果显示，手术组各项指标明显优于保守组；且手术组治愈率为96.43%，明显高于保守组治愈率67.86%；两组患者治疗后并发症发生率比较，手术组并发症发生率3.57%，明显低于保守组发生率32.14%；两组各项数据比较有差异具有统计学意义。

综上所述，临床研究效果更为支持手术切除术治疗急性单纯性阑尾炎，但保守治疗仍可用于该病的治疗。在选择治疗方式时，需参照影像学的检查结果以及患者临床症状和体征等，减轻患者的疼痛，缩短患者康复时间，达到治疗的目的。

参考文献

[1]黄青红.急性单纯性阑尾炎保守治疗和手术治疗效果临床分析[J].当代医学，2013，26（5）：83-84.

[2]高岩.急性单纯性阑尾炎保守治疗和手术治疗的临床价值分析[J].中国卫生产业，2013，17（20）：132-133.

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【摘要】

目的探讨马棘70％醇提取物（IPM）的抗动脉粥样硬化作用及机制。方法用不同浓度的马棘、肝素孵育体外培养的小鼠单核巨噬细胞RAW264.7 12 h后，加入氧化低密度脂蛋白（OX-LDL ）作用，用免疫组化和逆转录聚合链反应（RT-PCR）分别检测IPM对低密度脂蛋白受体（LDL-R）蛋白和mRNA表达的影响。结果马棘能明显降低小鼠单核巨噬细胞RAW264.7的LDL-R蛋白和mRNA 表达，且对OX-LDL引起的LDL-R表达降低有保护作用。结论马棘具有降低巨噬细胞LDL-R的表达和逆转OX-LDL的作用，这可能是其抗动脉粥样硬化的重要作用机制。

【关键词】 马棘 巨噬细胞 低密度脂蛋白

Abstract：ObjectiveTo explore the antiatherogenic mechanism of alcohol extract from Indigofera pseudotinctoria Matsum (IPM). MethodsThe cell was incubated with different concentration of IPM or heparin for 12 h that was established by culturing mouse macmphage RAW264.7， then OX-LDL was added into culture plate. The experiment was terminated after OX-LDL took action for 24 h. The expressions of LDL-R protein and mRNA were determined by immunohistochemistry or RT-PCR， respectively. ResultsThe expression of LDL-R protein and mRNA in mouse macrophage RAW264.7 was reduced after being incubated with OX-LDL for 24 h .IPM reinforcemented the expressions of LDL-R protein and mRNA which were reduced by OX-LDL . ConclusionOX-LDL can inhibit the expression of LDL-R protein and mRNA in macrophage. IPM can reverse this effect of OX-LDL . This may be one of antiatherogenic mechanism.

Key words： Indigofera pseudotinctoria Matsum (IPM)； Macrophage ； Low density lipoprotein

马棘（Indigofera pseudotinctoria Matsum，IPM）为豆科木篮属植物，以根或全株入药。又名一味药、野绿豆、马料梢、山皂角、野篮枝子。性味苦、涩，平，具有清热解毒、消肿散结之功效。用于感冒咳嗽，扁桃体炎，颈淋巴结结核，小儿疳积，痔疮；外用治疔疮。该植物广泛分布于全国各省市，资源丰富［1～3］。我们曾研究发现马棘醇提取部位具有显著镇痛作用［4］。本研究探讨70%马棘醇提物（IPM）对小鼠巨噬细胞低密度脂蛋白受体表达的影响。

1 材料与方法

1.1 试剂与仪器

Gibco公司DMEN培养基和小牛血清；抗LDL-R多克隆抗体（武汉博士德生物工程有限公司）；LDL（中国协和医科大学基础生化所）；大连宝生物工程有限公司逆转录系统和PCR core system；引物（武汉博士德生物工程有限公司）；小鼠单核巨噬细胞RAW264.7（中国协和医科大学细胞中心）；其他试剂为国产分析纯。上海第三分析仪器厂722 型分光光度计；日本 Olympus 公司XDP-1倒置显微镜；SHELDON LAB 公司TC 2323 型CO2 培养箱；依地酸（EDTA，sigma公司），3，3二氨基联苯胺（DAB）。

1.2　马棘醇提取物的制备［5］

马棘枝叶采自湖北建始，经湖北民族学院鲁开功教授鉴定为豆科植物马棘（Indigofera Pseudotinctoria Matsum，IPM），经10倍量70%乙醇回流提取两次，过滤，浓缩蒸干，研末，收率为14.3%。

1.3 小鼠单核巨噬细胞RAW264.7的培养［6，7］

细胞培养瓶中接种RAW 264.7，调至pH 7.2～7.4，含胎牛血清10％、链霉素l×105 U·L-1、青霉素1×108 U·L-1的DMEN培养液，通以5 % CO2恒温37℃培养48～72 h，细胞融合后，用0.1％胰蛋白酶和EDTA0.08 %的混合消化液消化传代。实验前将细胞接种于细胞培养板，在无血清、无酚红的培养液中通以5 % CO2，37℃，培养12 h备用。

1.4 氧化低密度脂蛋白（OX-LDL）的制备［6，7］

将LDL置于恒温37℃、pH 7.2的PBS溶液（CuSO4，10 μmol·L-1）透析24 h，在含0.1 % EDTA的PBS中透析24 h终止反应，0.22 μm微孔滤膜过滤除菌备用。脂蛋白氧化修饰程度以硫代巴比妥酸反应物质值来表示。结果OX-LDL为 21.4 μmol·L-1，LDL为 2 .2 μmol·L-1，说明LDL被氧化。

1.5 动物分组共分6组，即：对照组（control group，CG）；OX-LDL组（OX-LDL group，OLG）；肝素组（100 mg·L-1，heparin group，HPG）；IPM 100，200，400 mg·L-1保护组（IPM-100，200，400）。取细胞计数为1×108个细胞·L-1的备用传代培养细胞，按每孔500μl 接种于6孔板，每组5孔，12 h细胞融合后，更换无血清无酚红DMEN培养液，后4组（HPG和IPM-100，200，400）分别加入相应浓度的肝素和IPM预处理，培养12 h后，除CG外，其余各组分别加入50 mg·L-1OX- LDL培养 24h 获细胞。

1.6 LDL-R表达的检测（免疫酶标记法，SABC）［6］

取细胞爬片，内源性过氧化酶以3% H2O2灭活，用羊血清封闭，加兔抗鼠LDL-R一抗，4℃，次日加山羊抗兔lgG二抗；加SABC复合物，DAB-H2O2显色。脱水、透明、封片，镜下观察，阳性物呈棕黄色。以德国欧波同VIDAs图像分析系统分析实验结果，小鼠单核巨噬细胞RAW264.7 中LDL-R相对含量以细胞平均吸光度A值表示。

1.7 LDL-R mRNA表达的检测（逆转录聚合酶链反应，RT-PCR）［7］

按Trizol试剂说明一步法提取各组细胞总RNA。取总RNA 4 μl按试剂说明逆转录合成cDNA，取2 μl加入25 μl反应体系扩增，PCR扩增条件为：94℃，5 min；94℃，45 s；52℃，45 s ， 72℃，1 min， 30个循环，72℃10 min。扩增后的LDL-R上游引物：5 ' TCC ATC TTC TTC CCT ATT GC 3 '，下游引物：5 ' CAG CCC AGC TTT GCT CTA 3 '，合成360 bp片断。内参照β-肌动蛋白上游引物：5 ' TAT CCT CTC CCT CAC CCC ATC3 '，下游引物：5 ' TCA GTA ACA CTC CGC CTA CAA3 '，合成639 bp片断PCR产物。用1％琼脂糖凝胶电泳显影，结果用天方凝胶图象分析软件分析，各组LDL-R mRNA 表达差异定量用各组目的基因与内参照基因的吸光度（A）比值来表示。

1.8 统计学分析各组数据采用±s表示，配对比较采用t检验。

2 结果

2.1 IPM对RAW264.7细胞LDL-R mRNA

表达的影响各组细胞均有LDL-R mRNA 表达，OX-IDL与小鼠单核巨噬细胞RAW264.7作用24h后，能明显降低LDL-R的mRNA表达，与CG比较，有显著性差异（P

2.2 IPM对RAW264.7细胞LDL-R蛋白表达的影响

LDL-R免疫组化结果显示，各组细胞均有LDL-R表达，表达强弱有明显差别；OX-LDL与 RAW264.7细胞作用24 h后能显著降低 LDL-R蛋白表达，与CG比较有显著差异（P

3 讨论

动脉粥样硬化（AS）是心脑血管疾病的主要病理基础，其主要成因与脂质代谢紊乱有关［8］。流行病学及实验研究发现，血浆低密度脂蛋白（LDL）浓度与AS的发生呈正相关［9］。最新研究发现，LDL受体（LDL-R）对调节体内的胆固醇平衡，降低血浆LDL浓度起关键性作用，因而LDL-R功能的缺陷和异常是引起脂质代谢紊乱主要原因［10］。LDL-R是一种细胞表面糖蛋自，能与血浆中两种致AS脂蛋白（LDL和VLDL）结合，介导内吞和胞内分解，所以LDL-R对调节血浆总胆固醇（TC ) 含量起着关键作用［11］。因此，通过调控LDL-R的活性控制高脂血症，可以预防AS的发生与发展［9］。LDL-R基因表达调控的分子机制是：转录水平LDL-R基因启动子的激活和抑制、胆固醇类分子的负反馈抑制以及转录后mRNA分子稳定性的提高与降低［10］。LDL-R 基因转录的调控主要由胞内胆固醇（负反馈抑制性机制）和非胆固醇分子介导，前者涉及胆固醇调节元件结合蛋白（SREBP1和SREBP2）的合成及与LDL - R基因启动子胆固醇调节元件（SRE1）的结合［11］。当胆固醇浓度降低时，SREBP便结合到SRE1上，激活LDL-R基因转录，这一机制对于保持细胞的胆固醇平衡有重要意义［10］。非胆固醇介导的调控机制则通过蛋白激酶MEK/ERK信号转导进行，并与LDL-R基因启动子中的重复序列3有关［9］。

本研究发现OX-LDL可降低LDL-R表达，与有关报道一致［8］。其机制可能为细胞摄取 OX-LDL后，使胞内胆固醇浓度升高，通过由胆固醇介导的负反馈抑制性机制，抑制了 SREBP与SREI结合，进一步抑制LDL-R转录与翻译［10］。IPM可逆转OX-LDL对LDL-R的下调，而且呈现浓度依赖趋势。其作用机制可能是：抑制泡沫细胞的形成，降低胞内胆固醇含量有关［9］，即通过降低胞内胆固醇含量，减少胆固醇介导的对LDL-R表达的负反馈抑制性，而增加LDL-R的表达［10］；IPM也可能通过蛋白激酶MEK/ERK信号转导途径，干扰LDL-R的转录所致［11］。这可能是其抗AS的作用机制之一，其详细的作用机制尚有待于进一步探讨。

参考文献

［1］《全国中草药汇编》编写组.全国中草药汇编，上册［M］.北京：人民卫生出版社，1975：84.

［2］方志先，廖朝林.恩施药用植物志，上册［M］.武汉：湖北科学技术出版社，2006：525.

［3］张水利，朱伟英． 马棘皮的生药鉴定［J］.中药材，2001，24（1）：28.

［4］胡泽华. 马棘不同提取部位对小鼠镇痛作用的研究［J］.时珍国医国药，2007，18(10):2442.

［5］孙文基.天然药物成分提取分离与制备［M］.天津：中国医药科技出版社，1999：207.

［6］汪韶君，刘赛，孙福生，等．扇贝糖胺聚糖对巨噬细胞低密度脂蛋白受体表达的影响［J］.中国药学杂志，2007，42（3）：184.

［7］huang C L ， LIU S．Effect of scallop skirt glycosaminoglycan on proliferation of rat vascular smooth muscle cells and the action of mechanisms［J］.Chin J Pharmacol Toxicol，2005，15 ( l )：7.

［8］cho Y P C ，slow Y L，mymin．Lipids and atherosclerosis ［J］.Biochem Cell Biol ， 2004 ， 82 ( 1 )：212.

［9］brown M S，goldstein J L．A receptor-mediated pathway for cholesterol homeostasis ［J］.Science，1986，232：34.

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文/高科

在切小辣椒时，往往手上会有辣痛感。人们习惯用清水冲洗，但效果不佳。最好的办法是用白酒在痛处擦洗，然后用清水冲一下，这样手上的辣痛就能迅速消除。

果蔬放入冰箱前不要洗

文/孙国洪

人们习惯拟放入冰箱里的果蔬，先洗净，甚至切好，认为这样既卫生，用时又省事。这种做法是不科学的。

因为未洗的果蔬表面都有一层蜡质，保护其不受微生物的侵害。洗清后就把这层蜡质除掉了，细菌易侵入果蔬内部。

如果果蔬有根叶残土，可把根叶剪掉，再装盒贮藏。如果有些果蔬一定要洗，可等其水分完全沥干后，再密封入冰箱。取出来时，仍要再洗一下。因为存贮过程中，其表面会产生亚硝酸盐。再次冲洗才能洗净。

6个诀窍煲一锅好汤

文/张 亮

无论是在外丰盛的佳肴，还是家常普通的便饭，都能见到汤的身影，可谓“无汤不成席”。然而，要想煲出一锅营养美味的汤，还是有很多技巧需要掌握的。

肉类选鲜味足、血污少的，蔬菜选煮后没异味的。选料是煲好汤的关键，新鲜的鸡肉、鸭肉、排骨、猪蹄、鱼类等都是上选。蔬菜中冬瓜、莲藕、白萝卜、香菇等都是不错的选择，而西兰花、苦瓜等由于煮后有特殊味道，不适合用来煲汤。同时还要为食材选好“黄金搭配”，比如莲藕和排骨，羊肉和萝卜，就是煲汤的绝配。

炊具选瓦罐。有实验表明，使用瓦罐熬制的鸡汤色泽乳白，滋味鲜美清甜，口感醇厚，香味浓郁、肉质细腻，在色泽、滋味、香气、肉质四个方面均优于高压锅和电磁炉熬制的鸡汤。因为瓦罐能均衡而持久地把外界热能传递给里面的原料，从而使熬出的汤滋味更鲜醇，原料更酥烂。

加水量是食材重量的3倍。水既是鲜香食品的溶剂，又是食品传热的介质。水温的变化、用量的多少，对汤的风味有着直接的影响。因此，煲汤时加水量一定要充足，既不直接用沸水煨汤，也不中途加冷水，以使食品中的营养物质缓慢地溢出，最终达到汤色清澈的效果。

大火烧沸，小火慢煨。旺火能让食品内的鲜香物质尽可能地溶解出来，而文火能使营养物质溶出得更多，而且汤色清澈，味道浓醇。

时间别超过2小时。在食材允许的情况下，熬汤的时间一定要尽可能短，否则容易破坏食物中的氨基酸类物质，使嘌呤含量增高，营养成分流失。鱼汤的最佳熬制时间在1小时左右，鸡汤、排骨汤一般在1～2小时左右。

最后再放盐。过早放盐会使原料中的水分排出，蛋白质凝固，鲜味不足，口感变柴。喝之前再加少许盐，这样可以限制盐的摄入。此外，浓汤宝中也含大量盐，熬汤时尽量不要放。

清水测鸡蛋是否新鲜

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【摘要】

【目的】观察黄连解毒汤对动脉粥样硬化（AS）大鼠主动脉组织中单核细胞趋化蛋白1（MCP1）及其特异性受体CCR2mRNA表达的影响。【方法】选用SD大鼠，随机分为正常对照组，模型组，黄连解毒汤低、中、高剂量组（中药组，剂量分别为2.7、5.3、10.6g·kg-1·d-1），阿托伐他汀组（剂量为1.8mg·kg-1·d-1）。除正常对照组外，其他组均采用高脂饮食法复制AS模型，造模第6周开始给药，连续4周。取各组大鼠主动脉采用实时荧光定量PCR法检测各组MCP1/CCR2mRNA表达。【结果】与正常对照组比较，模型组主动脉MCP1/CCR2 mRNA表达显著升高（P＜0.05或P＜0.01）；与模型组比较，黄连解毒汤各剂量组MCP1/CCR2 mRNA表达均显著降低（P＜0.05或P＜0.01），且呈一定的剂量效应关系，MCP1与CCR2两者表达呈正相关。【结论】黄连解毒汤治疗AS的作用可能与其能下调MCP1、CCR2 mRNA在主动脉的表达有关。

【关键词】 黄连解毒汤/药理学；动脉粥样硬化/中药疗法；疾病模型，动物；大鼠

Abstract: ObjectiveTo investigate the effect of Huanglian Jiedu Decoction（HJD） on the expression of monocyte chemoattractant protein1（MCP1） and its specific receptor CCR2 mRNA in rats with atherosclerosis（AS）. MethodsSD rats were randomized into normal control group，model group，atorvastatin（1.8 mg·kg-1·d-1） group，and low，moderate and highdosage HJD（in the dosages of 2.7，5.3 and 10.6 g·kg-1·d-1，respectively） groups. Rats except for the normal group were given highfat diet to induce AS. In the 6th week of modeling，the rats were given the corresponding medicine according to the experimental design for 4 continuous weeks. The expression of MCP1/CCR2 mRNA in rats aorta was detected by the method of realtime fluorescent quantitative polymerase chain reaction（RTPCR）. ResultsCompared with the normal control group，the expression of aortic MCP1/CCR2 mRNA was increased in the model group（P

Key words:HUANGLIAN JIEDU DECOCTION/pharmacology；ATHEROSCLEROSIS/TCD therapy；DISEASE MODELS，ANIMAL；

近年来大量研究提示炎症与动脉粥样硬化（AS）的发生发展关系密切［1］。单核细胞趋化蛋白1（MCP1）及其特异性受体CCR2是与炎症、感染等相关的重要调节因子［2-3］。黄连解毒汤被视为清热解毒的代表方，源于《外台秘要》，主要用于治疗相当于热毒证的感染性疾病，在治疗心脑血管疾病如高血压、冠心病、糖尿病、缺血性脑血管病以及血管性痴呆等慢性退行性疾病方面也有良好作用 ［4-5］。本实验观察了MCP1/CCR2与AS发病的关系及黄连解毒汤的调节作用。现报道如下。

1材料与方法

1.1实验动物SD大鼠，雄性，体质量150~180g，SPF级，由广东省实验动物中心提供，合格证号：SCXK（粤）20030002，粤监证字2008A020。

1.2实验药物立普妥（阿托伐他汀钙片）购自美国辉瑞制药公司，胆维丁乳（维生素D3）购自上海信谊金朱药业有限公司。黄连解毒汤的制备：黄连、黄柏、黄芩、栀子以3∶2∶2∶3（质量比）的比例煎煮，分2次煎煮，第1次60min（并过滤），第2次30 min（并过滤），合并2次滤液，浓缩到1g/mL备用。

1.3仪器及试剂PRISM7300荧光定量PCR仪（ABI公司），超低温冰箱（日本三洋公司），总RNA抽提试剂（美国MRC公司），逆转录试剂、实时荧光定量PCR试剂均购自立陶宛Fermentas公司，MCP1、CCR2、GAPDH引物（上海英骏生物技术有限公司）。

1.4模型复制及分组将SD大鼠随机分为正常对照组，模型组，黄连解毒汤低、中、高剂量组（中药组，剂量分别为2.7、5.3、10.6g·kg-1·d-1），阿托伐他汀组（剂量为1.8mg·kg-1·d-1）。除正常对照组外，其他组均采用高脂饮食法复制AS模型：以高脂饲料喂养8周（配方：酪蛋白、L胱氨酸、黄豆粉、果糖、蔗糖、草粉、豆油、猪油、矿物质、磷酸氢钙、柠檬酸钠、多维、贝壳粉、蛋黄粉、胆固醇、去氧胆酸钠、胆盐），同时在第2、4、6周灌胃维生素D3溶液（2.0×104U·次-1·只-1），正常对照组喂普通大鼠饲料。从造模第6周开始每天灌胃给药1次，正常对照组灌服等容积蒸馏水，连续给药4周。

1.5标本采集及处理实验结束处死动物，取主动脉，去除上面附着组织，称取50mg，将标本浸入含有1mLTrizol的EP管中，-80℃保存，备用。

1.6MCP1/CCR2 mRNA的检测

1.6.1引物的设计引物在Genebank查到基因序列，使用软件Primer Express 3.0进行设计。MCP1上游引物：5TGTCCCAAAGAAGCTGTAGTATTTGT3，下游引物：5TTCTGATCTCACTTGGTTCTGGTC3，扩增片段为120 bp。CCR2上游引物：5GGAATCTTCTTCATTATCCTCCTGAC3 ，下游引物物：5TGACTACACTTGTTATTACCCCAAAGG3，扩增片段为112bp。内参GAPDH上游引物：5ACTGAGCATCTCCCTCACAATTC3，下游引物：5TGCAGCGAACTTTATTGATGGTAT3 ，扩增产物长1307bp。

1.6.2RNA提取和cDNA合成使用TrizolRNA提取液，按照其说明书提取总RNA，提取的RNA质量由D260 /D280 比值和20g/L琼脂糖凝胶电泳鉴定。在PCRSystem扩增仪上按SYBR，RTPCR Kit反转录试剂说明书进行cDNA的合成，反应体系为10μL，包括：5倍PCR Buffer2μL、三磷酸脱氧核糖核苷（dNTP）1μL、Primer（oligodT）0.5μL、inhibiter0.5μL、逆转录酶0.5μL、1g/L焦碳酸二乙酯（DEPC）水0.5μL、RNA模板5μL，反应条件为：反转录反应42℃、1h，反转录酶的失活反应70℃、10min。

1.6.3实时荧光定量PCR法GAPDH、MCP1、CCR2 mRNA的PCR反应：引物按40倍稀释，反应体系为25μL，包括上游引物 0.25μL、下游引物 0.25μL、SYBR Green Realtime PCR Master Mix12.5μL、cDNA2μL、1g/LDEPC水 10μL。反应条件：第1步是预变性，95℃、1min，1个循环。第2步是PCR反应，95℃、15s，60℃、1min，共40个循环，95℃、15s，60℃、30s，95℃、15s，1个循环。第3步是循环结束后72℃延伸10min。整个过程中收集荧光，反应结束后，使用7300 System SDS software软件分析PCR过程中各检测样本Threshold cycle（Ct）值，Ct值随模板浓度增大而减少。由溶解曲线判断PCR反应的特异性。样本mRNA含量（copies/mL）相对值=样本quantity copies/GAPDH quantity copies。

1.7统计学方法采用SPSS 13.0软件包进行统计分析。

2结果

各组大鼠主动脉MCP1/CCR2 mRNA表达情况：模型组与正常对照组比较，主动脉MCP1/CCR2 mRNA表达显著升高（P＜0.05或P＜0.01）；黄连解毒汤及阿托伐他汀组MCP1/CCR2 mNRA表达较模型组显著降低（P＜0.05或P＜0.01），且呈一定的剂量依赖关系，MCP1与CCR2两者表达呈正相关。结果见表1及图1~图3（见彩图页第665页）。表1各组大鼠主动脉MCP1/CCR2 mRNA表达比较(略)

3讨论

1976年，Ross提出了动脉粥样硬化（atherosclerosis，AS）形成的炎症学说。AS从粥样硬化斑块形成到斑块破裂，以至血栓形成的各个阶段，都有不少炎症细胞和炎症介质参与。当血管内皮因病原微生物感染、脂质浸润等因素致损伤后，局部发生炎症反应，这些炎症因子作为一种介质，使参与AS形成的内皮细胞、单核/巨噬细胞、淋巴细胞、平滑肌细胞、血小板相互联系，相互影响，使病变得以发生发展［1］。

MCP1属于趋化因子CC亚家族，其主要功能是趋化和激活单核细胞至炎症部位，MCP1的趋化作用通过CCR2完成。

Hoogeveen等［2］研究血浆MCP1水平与外周动脉疾病或冠状动脉粥样硬化性心脏病之间关系时发现，MCP1随动脉粥样硬化程度增加而增加，MCP1是心血管疾病的独立危险因素。近年来的研究显示［3-5］，构成AS病变的主要细胞如单核细胞、巨噬细胞、平滑肌细胞和内皮细胞均能表达MCP1，并特异性地作用于外周血中的单核细胞，招募其迁移至内皮下，构成AS发生发展的重要机制。阻断MCPl作用的治疗措施能阻止早期血管炎症反应和稳定斑块［6］。

近年来，单味中药（如黄芩、知母、葛根等）治疗冠状动脉粥样硬化的研究已经证实，清热解毒中药治疗冠状动脉粥样硬化是有效的［7］。本研究结果显示：黄连解毒汤对炎症反应中的炎症因子有调节作用，通过抑制单核细胞的激活，进而抑制MCP1的产生，阻断炎症因子MCP1/CCR2的表达。前期研究也表明，黄连解毒汤对动脉粥样硬化大鼠血清中细胞间黏附分子1（ICAM1） 和血管细胞粘附分子1（VCAM1）水平均有降低的作用［8］，并可上调CD4+CD25+Treg表达［9］。本研究结果表明，黄连解毒汤能显著降低动脉粥样硬化大鼠主动脉的MCP1/CCR2 mNRA表达，且呈一定的剂量依赖关系。提示黄连解毒汤可通过减轻局部的炎症反应，从而对血管内皮细胞起到保护作用，延缓动脉粥样硬化的进程。

参考文献

［1］张小梅，翟桂兰． 炎症因子与动脉粥样硬化的研究进展［J］． 牡丹江医学院学报，2008，29（1）：91．

［2］Hoogeveen R C，Morrison A，Boerwinkle E，et a1． Plasma MCP1 level and risk for peripheral arterial disease and incident coronary heart disease： atherosclerosis risk in communities study［J］． Atherosclerosis，2005，183（2）：301．

［3］Siebert H，Sachse A，Koziel W A，et a1．The chemokine receptor CCR2 is involved in macrophage recruitment to the injured peripheral nervous system［J］． J Neunroimmunol，2000，110（1~2）：177．

［4］吴辉，刘煌德，吴伟．清热解毒法对肺炎衣原体感染致兔动脉粥样硬化的干预作用［J］．广州中医药大学学报，2006，23（2）：151．

［5］方青，詹小萍，莫剑翎，等．黄连解毒汤对AD大鼠的治疗作用及对细胞因子含量的影响［J］．中国中药杂志，2004，29（6）：575．

［6］Braisier A R，Recinos A，Eledrisi M S．Vascular inflammation and the reninangiotensin system［J］．Arterioscler Thromb Vasc Biol，2002，22（8）：1257．

［7］刘彦珠，罗国安，龙致贤，等．清热解毒药对血管平滑肌细胞增殖、细胞周期的影响［J］．清华大学学报（自然科学版），2000，40（6）：13．

手机担保书范文6

“有关上市一事，目前没有可透露的，不做安排。”比亚迪公关部的工作人员回绝了记者的采访，但比亚迪30号召开的股东大会却对比亚迪分拆上市表达了势在必得的决绝之心。公告显示，比亚迪国际已向香港联交所递交了排期申请表以申请批准比亚迪国际的股份上市及进行买卖。

日前，业界普遍认为，富士康与比亚迪之间的诉讼造成比亚迪分拆上市一缓再缓，甚至有人认为，比亚迪将因此而失去手机代工业务市场。据记者了解，有关“比亚迪窃得富士康商业机密”一案目前仍在僵持阶段，尚未有新的进展。

重组提速

比亚迪与富士康之间的这段恩怨尚未分出胜负，而比亚迪分拆手机上市计划已经压抑的太久，于是比亚迪已经耐不住性子了。

2007年11月的最后一天，比亚迪股份有限公司在其深圳龙岗区的公司会议室中恢复召开了一再拖延的有关分拆建议的临时股东大会。

“对手机业务分拆上市，我们一直都在朝着这个方向走。”比亚迪内部一李姓经理表示。

据了解，比亚迪股份有限公司将继续原计划进一步进行重组。比亚迪方面表示，分拆上市的主体是于2007年6月注册成立的香港公司比亚迪电子（国际）有限公司（以下简称比亚迪国际）。据悉，经过一个月的重组，香港比亚迪、GoldenLink、比亚迪电子与比亚迪国际之间进行了一连串的股份转让和安排，从而实现比亚迪国际成为了BE集团的控股公司。

至此，比亚迪股份有限公司的格局就成了香港比亚迪全资拥有GoldenLink，GoldenLink全资拥有比亚迪国际，而比亚迪国际则全资拥有比亚迪电子。

一切似乎都在计划之中，有业内人士称，比亚迪有望在12月20日实现分拆上市。据悉，比亚迪此次分拆的业务包括制造塑料及金属手机壳，以及塑料和橡胶的手机键盘。比亚迪持有该部分业务91％的股权，集资最高额为8亿美元（约合62.4亿港元）。

面对比亚迪的“一意孤行”，富士康方面表示并不担心，更不惧怕竞争，富士康目前手机代工业务发展相当好，是排名前五大手机厂商的主要供应商，未来在外包订单上将会是各大厂商最理想的合作伙伴。

竞争加剧

“关于案件的进程，目前尚没有新的消息提供。”富士康方面表示，和比亚迪之间的官司仍然没有结论。

而比亚迪在公告中表示，2007年11月2日比亚迪曾向香港特别行政区高等法院发出传讯令状申请搁置新成立的新香港公司诉讼，直到富士康相关公司支付在香港诉讼中产生的相应的法律费用为止。由于富士康以香港一家银行发出的担保书为这笔法律费用的抵押品，并获得比亚迪的接纳，于是搁置的诉讼将继续进行。公告还显示，搁置的新香港公司诉讼申请已定于2008年6月11日进行聆讯，为期两天。

有分析人士指出，虽然富士康对比亚迪的诉讼多多少少成为阻碍其分拆上市的原因之一，但相信无法阻止比亚迪的上市计划。富士康对比亚迪的诉讼主要针对的是不正当竞争手段，至于是否涉及知识产权纠纷，目前听证会尚未给出结论。