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食物联系是海洋生态系统结构与功能的基本表达形式,初级生产的能量通过食物链—食物网转化为各营养层次生物生产力,形成生态系统资源产量,并对生态系统的服务和产出及其资源种群的动态产生影响;东黄海生物资源以多种类为特征,同时,又有明显的优势种。因此,关键资源种群食物网能量流动是认识东黄海生态系统资源生产及其动态的关键生物过程[1]。 浮游动物中华哲水蚤作为从基础生产者到高层捕食者的中间环节,在海洋生态系统能量转换和物质流动中起着承上启下的关键作用。它下行控制初级生产,上行控制上层捕食者,其种群变动在一定程度上决定着渔业资源的补充。国家重大基础研究规划项目“东、黄海生态系统动力学与生物资源可持续利用”确定中华哲水蚤为研究海区生态系统的主要关键种,将中华哲水蚤种群动力学和它的补充机制作为重点解决的关科学问题。 用GC-MS分析氨基酸的国内报道很少,采用三氟醋酸酐与酸性正丁醇作为氨基酸的衍生化试剂,对衍生化条件和色谱操作条件进行了优选,建立了样品中氨基酸的分离及定性定量分析方法,该法分析速度快,样品处理简单,分离效果好,定量准确。 1材料与方法 1.1材料 Agilent6890N气相色谱仪,5973N质谱仪(GC-MS)。L-谷氨酸,L-苏氨酸,L-苯丙氨酸,L-甘氨酸,分析纯;盐酸HCl,优级纯;正丁醇,色谱纯;乙酰氯CH3COCl,分析纯;二氯甲烷,色谱纯;三氟乙酸酐(CH3CO)2O,色谱纯,购自美国SigmaChemical公司。色谱柱:HP-5MS,30m×0.25mmID×0.25μm。气相色谱操作条件:气化室温度,250℃;传输线温度:280℃;色谱柱升温程序:初温50℃,以20℃/min升至220℃,以10℃/min升至280℃并保持3min。进样方式:不分流进样。进样量:1μl。质谱:EI离子源,倍增器电压1200V,离子源温度:230℃,四极杆温度:150℃,全扫描(SCAN)质量范围为33~600mau,各组分的峰面积是从全扫描的总离子流色谱图中积分得到。 1.2方法 氨基酸属非挥发性物质,GC-MS分析测定氨基酸须经衍生化反应使之成为易于气化的物质,试验采用生成三氟乙酰氨基酸正丁酯的方法对氨基酸进行了衍生化。将所得的16种标准氨基酸的混合物衍生物的谱图与GC-MS分析测定出的样品谱图进行比较,根据保留时间、结合分子式、分子量通过计算机检索和人工解析相结合的方法进行鉴定,并使用外标法定量分析[2]。 2结果与分析 2.1中华哲水蚤氨基酸的相对含量 测定中共确证出样品的15种氨基酸及各自的含量分别为:丙氨酸ALA5.50%,甘氨酸GLY4.89%,苏氨酸THR5.98%,丝氨酸SER3.68%,缬氨酸VAL5.18%,亮氨酸LEU5.25%,异亮氨酸LIE4.55%,脯氨酸PRO2.27%,蛋氨酸MET0.61%,天冬氨酸ASP6.43%,苯丙氨酸PHE2.31%,组氨酸HIS1.65%,酪氨酸TYR5.93%,赖氨酸LYS2.10%,谷氨酸GLU8.85%。 2.2中华哲水蚤氨基酸相对含量的比较(图1) 由图1可知,天冬氨酸、酪氨酸、谷氨酸含量都很高。丙氨酸、甘氨酸、丝氨酸、苏氨酸、缬氨酸、亮氨酸、异亮氨酸在中华哲水蚤中的组成相对变化比较大必需氨基酸蛋氨酸在中华哲水蚤中含量偏低,蛋氨酸与天冬氨酸相比,蛋氨酸也只有天冬氨酸的10%左右。 3讨论 由文献可知动物对其他氨基酸的需要量的比值越低,说明其缺乏的程度越大,对其他氨基酸的限制程度越强,苯丙氨酸、组氨酸、赖氨酸在中华哲水蚤中相对含量也偏低,可能对上行动物造成与蛋氨酸相类似的限制作用,从而影响食物链的营养质量,而亮氨酸在中华哲水蚤中的含量比较高。