鸡消化道内的菌群定植需要一个过程，3-7日龄是雏鸡肠道内菌群形成阶段，7-16日龄雏鸡消化道内的正常菌群基本完成[1]，而在此之前，有益菌群未完全定植于肠道上皮细胞，容易受到外界病原菌的侵害，大部分的养殖者便采用饲料中添加抗生素来预防。但近年来，随着抗生素的耐药性和内源性感染等问题的日益严重，世界各国都在相继立法，限制部分或完全禁止抗生素用作饲料添加剂[2]。微生态制剂作为替代饲用抗生素的添加剂，正凭借其安全、优质、无公害及有效的促生长作用被越来越多的人所认可。我国农业部公告（第318号）批准使用的微生物饲料添加剂有15种[3]，植物乳杆菌（LactobacillusPlantarum）便是其中一种，其能分解食物中的蛋白质和糖类、合成维生素，能显著提高食物生物效价，促进消化吸收。前人对于乳酸菌对动物机体的影响研究已比较多，但是对于不同添加水平的植物乳杆菌对肉鸡免疫机能影响的研究还较少。本试验旨在对肉鸡饲喂不同添加水平的植物乳杆菌，研究其分别对肉鸡血清总蛋白含量、IgG含量及NDV抗体效价的影响，以便为植物乳杆菌在动物生产中的推广和应用提供科学依据。 1材料与方法 1.1实验材料 微生态制剂：植物乳杆菌菌粉，山东宝来利来生物工程股份有限公司生产。试验动物：1日龄健康爱拔益加（AA）肉鸡，购自山东民和牧业股份有限公司。鸡新城疫弱毒苗和传染性法氏囊疫苗均购自扬州威克生物工程有限公司。试验日粮：参照AA肉鸡营养标准自行配制的玉米-豆粕型全价料，按第一（1-14日龄）和第二（15-42日龄）两个阶段配制，不添加任何抗生素、药物及微生态添加剂。 1.2试验方法 1.2.1试验设计与分组 本试验选用健康体重状况基本相同的1日龄AA肉鸡420羽。随机分成7组，每组3个重复，每个重复20只。Ⅰ组为对照组，饲喂基础日粮；Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ、Ⅵ组为微生态制剂组，在饲喂基础饲粮的同时，分别定时在饮水中添加1.0‰、2.0‰、4.0‰、6.0‰、8.0‰、1.0%的植物乳杆菌，之前需禁水0.5h，确保乳酸菌在最短时间内全部被鸡只摄入，之后再补充清水。试验期42天。 1.2.2饲养管理 所有参试鸡采用笼养方式。鸡只自由采食、充足饮水。舍内光照、温度和湿度严格按照常规饲养管理要求进行控制。每日换食换水前进行食槽和饮水器的清洗工作。试验期间详细观察、检测并记录各组试验指标及试验鸡的健康状况。免疫程序：分别于7和21日龄，按规定剂量和方法对鸡进行新城疫疫苗的滴鼻点眼免疫；14日龄时，进行法氏囊滴鼻点眼免疫。 1.2.3样品采集及检测指标 （1）血液中血清总蛋白含量的测定：分别于14、21、28、35、42日龄清晨（禁食12h，仅供饮水）以重复组为单位，从中随机选取2只接均体重的健康鸡只，颈静脉采血，常规方法分离血清，利用全自动生化分析仪测定血清总蛋白含量。（2）IgG含量的测定：采集血清（方法同上），利用全自动生化分析仪测定血清中的IgG含量。（3）NDV抗体效价的测定：采集血清（方法同上），按照血凝抑制试验的标准检测血清中的NDV抗体效价。 1.2.4数据处理 采用SPPS17.0软件One－WayANOVA对上述数据进行方差分析，用Dun-can’s方法进行多重比较。试验数据用平均数M±标准差SD表示。 2结果与分析 2.1植物乳杆菌对肉鸡血清总蛋白含量的影响 由表1可知，14-42日龄各添加组的血清总蛋白含量均高于对照组。其中，第14日龄时，Ⅱ组和Ⅲ组显著高于对照组(P<0.05)，21日龄时，Ⅰ组、Ⅱ组、Ⅲ组显著高于对照组(P<0.05)，28日龄时，Ⅳ组显著高于对照组(P<0.05)。35日龄及之后，各添加组之间以及与对照组之间差异均不显著。从整体情况来看，随着日龄的不断增加各组的血清总蛋白含量是上升的，以Ⅱ组的效果最好最稳定，且在21日龄之前均显著高于对照组(P<0.05)，其次为Ⅲ组和Ⅰ组。 2.2植物乳杆菌对肉鸡血清中IgG含量的影响 由表2可知，除了14、28和35日龄时，Ⅰ组低于对照组以外，各添加组在任意时段的IgG含量均高于对照组，其中，14日龄时Ⅱ组和Ⅲ组显著高于对照组（P＜0.05）。21日龄时，Ⅱ组显著高于Ⅰ组，且Ⅰ组、Ⅱ组和Ⅲ组均显著高于对照组（P＜0.05）。28日龄时，Ⅱ组和Ⅲ组显著高于对照组（P＜0.05）。因此，整体来看，以Ⅱ组和Ⅲ组提高IgG含量效果最好，且在28日龄之前显著高于对照组（P＜0.05）。 2.3植物乳杆菌对肉鸡NDV效价的影响 从表3可以看出，14-42日龄各添加组的NDV效价均高于对照组。其中，21日龄时，Ⅱ组和Ⅲ组显著高于对照组（P＜0.05）。42日龄时，Ⅱ组、Ⅲ组和Ⅳ组显著高于对照组（P＜0.05）。其他时间各添加组之间以及与对照组之间差异均不显著。从表中我们还可以看出，随着日龄的不断增长，对照组的NDV效价是先降低后升高降低的，这是因为7日龄和21日龄对鸡进行了新城疫滴鼻点眼免疫，7日龄免疫完之后，NDV效价应该是逐渐上升，14日龄之后有下降的趋势，到21日龄时，又加强了免疫，NDV效价逐渐上升，35日龄之后出现下降的趋势。各植物乳杆菌的添加组，则是随着日龄的增长，一直处于上升的趋势，35日龄之后趋于稳定，并且各添加组在任意时刻的NDV效价均高于对照组，尤其以Ⅲ组和Ⅱ组的效果最好。 3讨论 3.1植物乳杆菌对肉鸡血清总蛋白含量和IgG的影响 乳酸菌能通过淋巴循环活化全身的免疫防御系统，激发机体的体液免疫和细胞免疫，诱导干扰素、白细胞介素等细胞因子的产生，刺激肠道产生黏膜抗体，增强机体抑制癌细胞增殖的能力，从而提高机体局部免疫功能力，抵御感染。Huang［4］等研究发现，添加无活性嗜酸性乳酸杆菌可显著提高肉仔鸡30日龄血清IgA和IgG水平。王晶［5］等也得出同样的。本试验中血清总蛋白含量的测定结果表明，各添加组在任何时期的清总蛋白含量均高于对照组，在整个过程中以Ⅱ组的效果最好；IgG含量的测定结果表明，以Ⅱ组和Ⅲ组效果最好，尤其在28日龄之前均显著高于对照组（P＜0.05）。#p#分页标题#e# 3.2植物乳杆菌对肉鸡新城疫疫苗免疫后NDV效价的影响 张七斤等[6]利用两株乳酸杆菌L.casei.zhang和MG2-1制成乳酸菌液和发酵乳以不同的剂量灌服给雏鸡，在10、28日龄进行两次新城疫疫苗免疫，在二免后的第7天和14天检测血凝抑制效价，发现与对照组相比，试验各组抗体水平均达到显著或极显著水平。司振书等[7]报道，饲喂微生态制剂后，350日龄及380日龄时试验组血清中新城疫血凝抑制抗体效价分别高出对照组25.81%和25.42%。李路胜[8]等研究发现，55日龄乳酸菌发酵组较抗生素组的新城疫抗体效价有显著的提高。本试验结果表明，各植物乳杆菌的添加组随着日龄的增长，新城疫抗体效价一直处于上升的趋势，35日龄之后趋于稳定，并且各添加组在任意时刻的NDV效价均高于对照组，尤其以Ⅲ组和Ⅱ组的效果最好。植物乳杆菌之所以能提高肉鸡循环血液中的抗体水平，并且能长时间的保持较高水平，延缓抗体水平下降，这可能是因为乳酸菌制剂中的细菌本身或细胞壁成分刺激宿主细胞，激活免疫系统，使机体的免疫功能始终处在较高的活性状态，有更多的淋巴细胞发育成浆细胞产生抗体，从而提高机体抗体水平，增强抵抗力[9]。 4结论 各添加水平的植物乳杆菌均能不同程度地提高肉鸡的免疫性能，但并非添加量越多越好，综合考虑，以Ⅱ组和Ⅲ组（2.0‰-4.0‰）的植物乳杆菌添加组效果最好。
